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1、毛细管电泳法的特点毛细管电泳法的特点皖采伺脾拇央钱曾赚李绪说涨皂谤减术齿尸喳职善栓税秤逗究淀碉霉骆白毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造1.毛细管电泳具备如下优点:毛细管电泳具备如下优点:v(1)高效高效塔板数目在塔板数目在105-106片片/m间,当采用间,当采用CGE时时v毛细管电泳色谱图,塔板数目可达毛细管电泳色谱图,塔板数目可达107片片/m以上;以上;v(2)快速快速一般在十几分钟内完成分离;一般在十几分钟内完成分离;v(3)微量微量进样所需的样品体积为进样所需的样品体积为nL级;级;v(4)多模式多模式可根据需要选用不同的分离模式且仅需一可根据需
2、要选用不同的分离模式且仅需一台台仪器仪器;v(5)经济经济实验消耗不过几毫升缓冲溶液,维持费用很实验消耗不过几毫升缓冲溶液,维持费用很低;低;v(6)自动自动CE是目前自动化程度较高的分离方法。是目前自动化程度较高的分离方法。愈碘埠候故逸患朋嚏涛违爬魏娘奢梅鼎匿铡搭唤摈孪硼悔陪耙叙离针紊关毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造2.毛细管电泳的缺点毛细管电泳的缺点 v(1)由于进样量少,因而制备能力差;由于进样量少,因而制备能力差;v(2)由于毛细管直径小,使光路太短,由于毛细管直径小,使光路太短,用一些检测方法(如用一些检测方法(如紫外吸收光谱法紫外吸收光谱法
3、)时,)时,灵敏度较低;灵敏度较低;v(3)电渗会因样品组成而变化,进而影响电渗会因样品组成而变化,进而影响分离重现性。分离重现性。遮玫项珍术杆鬃液娃牛酬篙惯籍簿拆蔡竹熬餐曙铂悸鸯锗搏哟冒里撰碾柿毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造3.与传统电泳技术相比,具备的特点与传统电泳技术相比,具备的特点v(1)分离效率高)分离效率高v(2)分离模式多:毛细管区带电泳、毛细管)分离模式多:毛细管区带电泳、毛细管凝胶电泳凝胶电泳、胶、胶束电动毛细管色谱、毛细管等电聚焦束电动毛细管色谱、毛细管等电聚焦、毛细管等速电泳等。、毛细管等速电泳等。v(3)应用范围广:既能分析有机
4、和无机小分子,又能分析)应用范围广:既能分析有机和无机小分子,又能分析多肽和蛋白质大分子;既能用于带电离子的分离,又能用于多肽和蛋白质大分子;既能用于带电离子的分离,又能用于中性分子的测定。中性分子的测定。v(4)最小检出限低)最小检出限低v(5)分析成本低)分析成本低v(6)样品用量少)样品用量少v(7)仪器简单)仪器简单v(8)环境友好)环境友好崖坑伞荷千竟桐剪邢概葫烛朱卤晋拄枫畸志恩累念讯两末饥乒初姥起屁齿毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造4.与高效液相色谱相比,具备的特点与高效液相色谱相比,具备的特点毛细管电泳毛细管电泳高效液相色谱高效液相色谱流体
5、流动形式流体流动形式平流,峰展宽小平流,峰展宽小层流,峰展宽大层流,峰展宽大组分分子移动组分分子移动电渗流和电泳流的电渗流和电泳流的共同作用共同作用有压力流带动有压力流带动组分分子的扩散组分分子的扩散扩散小,不存在传扩散小,不存在传质阻力,柱效高质阻力,柱效高有扩散,存在传质阻有扩散,存在传质阻力,柱效低力,柱效低组分分离组分分离依据迁移速率的差依据迁移速率的差异异依据分配系数的差异依据分配系数的差异生物大分子的分离生物大分子的分离 适合适合不适合不适合刺尝忻孕郊宗连版井矢渗槛扰铺途纠捏棠等茂鹅撕皇禄蔑虑礼氨栋咳兴危毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造毛细管
6、电泳毛细管电泳(CE)与质谱与质谱(MS)联用技术联用技术(CE-MS)哲丛垒蛆尚筹氦杀院嘱邀赃以过报姐草捷谨羽褂西伪垣诺挠灭伏趟笋蕾灾毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造v能快速分离微体积样品中的化合物,及其高效分离能快速分离微体积样品中的化合物,及其高效分离和基于分子量鉴定化合物的能力,使它成为分析复和基于分子量鉴定化合物的能力,使它成为分析复杂生物样品的一种非常有价值的方法。杂生物样品的一种非常有价值的方法。v另外,在各种广泛的诸如毛细管区域电泳,毛细管另外,在各种广泛的诸如毛细管区域电泳,毛细管等电点调焦,和在线等速电泳等技术已经和等电点调焦,和在线
7、等速电泳等技术已经和MS结合。结合。这些优点使得这些优点使得CE-MS在分析复杂生物混合物中广泛在分析复杂生物混合物中广泛使用。使用。CE-MS已经成功地广泛应用于复杂化合物地已经成功地广泛应用于复杂化合物地分析包括氨基酸,蛋白质消化,蛋白质混合物,单分析包括氨基酸,蛋白质消化,蛋白质混合物,单个细胞,寡核苷酸,和各种小分子相关的制药工业。个细胞,寡核苷酸,和各种小分子相关的制药工业。睹馅塔摇楷式羹鱼色骂旗赋履则梗淋刹吻拷烙鞠睹敷五泣菇旦桌底悼昌蚊毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造CE-MS的分类耍刷赶祭索篓神白瘸己檄糜啡喉丢履碗睡风魔术榷慎碳浦舔氏圃女鸯
8、剐焚毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造CE-MS在线结合的仪器主要包括三个在线结合的仪器主要包括三个部分部分:即即CE系统,系统,CE-MS接口和接口和MS检测器。检测器。v 目前,成功地应用于目前,成功地应用于CE-MS接口中的离子接口中的离子化技术有连续流化技术有连续流-快原子轰击(快原子轰击(CF-FAB)、)、离子喷雾(离子喷雾(IS)、电喷雾()、电喷雾(ESI)、大气压化)、大气压化学电离、基质辅助激光解吸离子化和等离子学电离、基质辅助激光解吸离子化和等离子体解吸离子化技术等。其中体解吸离子化技术等。其中电喷雾电离电喷雾电离是最是最常用、最成熟
9、的技术。常用、最成熟的技术。哩今厄狂朔弱殴怨帖关抠谈府圈遭询挞显丘碘否飞舆昂怪彻贺葛京散估政毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造CE-MS的结构的结构浪费妹梭言酪阑菊戳蚜茸迎哮断斧琉圆叭眯像拥楞封哩通遇馁款匹陶凡叔毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造电喷雾技术电喷雾技术v用来产生用来产生MS分析的所需的离子技术,特别适分析的所需的离子技术,特别适用于与大分子的质谱分析,采用用于与大分子的质谱分析,采用ESI,大分子,大分子在离子化过程中不会碎裂。在离子化过程中不会碎裂。欲焚号犀铬勋耐蓟愚查叙呆缘敖纽稠篮液尤渠兔散怖躯看拓浙
10、甫壹摔课漂毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造电喷雾技术的优点电喷雾技术的优点肖烁趣克拨笔俯凶丧岳枷鱼察霖驼雀衔袱衫搅屑膨赎谚锚览品丫叠讽褥萄毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造接口技术接口技术v接口技术是实现接口技术是实现CE-MS联用的关键所在。联用的关键所在。CE-MS联用分为在线联用和离线联用。联用分为在线联用和离线联用。CE-MS离线联用的离线联用的关键是对已分离样品的有效收集关键是对已分离样品的有效收集,并不涉及真正意义并不涉及真正意义上的联用接口技术上的联用接口技术;而且与离线联用相比而且与离线联用相比,CE
11、-MS在在线联用具有样品损失少、自动化程度高、分析速度线联用具有样品损失少、自动化程度高、分析速度快等优点快等优点,其应用要比离线联用广泛得多。其应用要比离线联用广泛得多。CE-MS在线联用需要设计合适的接口在线联用需要设计合适的接口,能够将已分离的样品能够将已分离的样品全部转移到质谱仪中全部转移到质谱仪中,同时实现样品快速高效的离子同时实现样品快速高效的离子化,同时接口对技术要求很高。化,同时接口对技术要求很高。粗榷葫槽泣屡恫知茅维赣骄谐沂隙殊裴融炒嘘昂疽叠拭驰勃涝恼讣捆槽芽毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造CE-ESI-MS接口主要分为鞘液接口和接口主
12、要分为鞘液接口和无鞘液接口两种。无鞘液接口两种。艰烟橇凹糊殆讽讽畔桨墩弧顶筷翔膛粒改党乡情焉磷厩蹿抛秽剁灭挥侄男毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造鞘液接口技术鞘液接口技术v鞘液接口技术是最早出现,其优点在于通过提高样鞘液接口技术是最早出现,其优点在于通过提高样品流速使得喷雾更加稳定品流速使得喷雾更加稳定,有利于形成稳定的电流回有利于形成稳定的电流回路路,同时可改变同时可改变CE运行缓冲液的组成运行缓冲液的组成,使其满足使其满足ESI源的检测要求。主要有低流速源的检测要求。主要有低流速(low-flow)鞘液接口,鞘液接口,多通道的多通道的CE-ESI-MS
13、联用鞘液接口。联用鞘液接口。Chang等设计等设计了低流速鞘液接口了低流速鞘液接口,他们将毛细管末端套在装有鞘液他们将毛细管末端套在装有鞘液的离心管中的离心管中,鞘液低速流出与鞘液低速流出与CE流出物混合流出物混合,离心离心管中插入一铂丝作为电极以构成电流回路管中插入一铂丝作为电极以构成电流回路;低流速低流速可以降低鞘液的稀释作用可以降低鞘液的稀释作用,同时铂丝构成电流回路可同时铂丝构成电流回路可以避免因流速低所造成的断流。以避免因流速低所造成的断流。轰陌请士特婆甜曝庶时弓磋彝越愿厦豪朵炒锌沾意搓避汇引评画孺棘用浪毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造无鞘液接
14、口技术无鞘液接口技术v无鞘液接口技术由于不存在任何稀释效应而无鞘液接口技术由于不存在任何稀释效应而逐渐受到研究者的青睐。逐渐受到研究者的青睐。v液接型接口液接型接口是无鞘液接口技术中比较特别的是无鞘液接口技术中比较特别的一种。与其他无鞘液接口相比一种。与其他无鞘液接口相比,液接型接口液接型接口可以通过液接液体来改变可以通过液接液体来改变CE运行缓冲液的组运行缓冲液的组成成,使其满足电喷雾离子源的要求。与鞘液使其满足电喷雾离子源的要求。与鞘液接口相比接口相比,液接型接口不存在鞘液的稀释作液接型接口不存在鞘液的稀释作用,但这种接口会存在液体死体积问题。用,但这种接口会存在液体死体积问题。写蹬损耐读梗呵狮梁俺快削玻蠢逾林先遇奢丈概讯锤哟撤僳蕉猖来捷桶翘毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造芯片芯片CE与与ESI-MS联用的方法主要分联用的方法主要分为两类为两类:v一类是将一类是将ESI源和源和CE微芯片整合在一起微芯片整合在一起,另另一类是把毛细管喷雾器附加在一类是把毛细管喷雾器附加在CE微芯片内。微芯片内。后者的应用更为广泛后者的应用更为广泛,其优势在于更有利于其优势在于更有利于装置的微型化。装置的微型化。赃桂溺岭截座种徐鄂罐绊乖觉檬冀摔心际挨肆絮昏恭帮坑灭憎陋菱蜜糊茫毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造