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1、动物实验基本技术动物实验基本技术 LOGO动物实验基本技术动物实验基本技术实验动物的抓取、保定实验动物的抓取、保定1实验动物的分组和编号实验动物的分组和编号2实验动物的给药与取血实验动物的给药与取血34实验动物被毛去除实验动物被毛去除5实验动物的粪便采集实验动物的粪便采集56实验动物的处死实验动物的处死7实验动物的麻醉实验动物的麻醉LOGO一、实验动物编号与分组一、实验动物编号与分组（一）编号（一）编号： 1 1、被毛涂染法：、被毛涂染法： 实验动物：大鼠、小鼠。实验动物：大鼠、小鼠。 常用染色常用染色剂剂：3-53-5苦味酸苦味酸溶液，可染成溶液，可染成黄色黄色。2%2%硝酸银硝酸银溶液溶液
2、 ( (咖啡色咖啡色) )0.5%0.5%中性品红中性品红溶液溶液 ( (红色红色) )煤焦油煤焦油的酒精溶液的酒精溶液( (黑色黑色) ) LOGOLOGO2 2、穿耳孔法、穿耳孔法 用专用耳空器在动物耳朵不同部位打一小孔或缺口表用专用耳空器在动物耳朵不同部位打一小孔或缺口表示一定号码的方法，示一定号码的方法，原则是：左耳代表十位，右耳代表个原则是：左耳代表十位，右耳代表个位。位。实验动物：兔、犬、猪实验动物：兔、犬、猪3 3、标牌法、标牌法 一般挂在动物的颈部、耳朵、脚上一般挂在动物的颈部、耳朵、脚上 实验动物：犬、猴实验动物：犬、猴LOGO穿耳孔法穿耳孔法LOGO4 4、烙印法、烙印法直
3、接把标记编号烙印在实验动物身体上的方法。直接把标记编号烙印在实验动物身体上的方法。5 5、电子标签法、电子标签法用电子芯片标记动物。用电子芯片标记动物。LOGO实验动物编号与分组实验动物编号与分组（二）分组（二）分组：1 1、组别的要求：、组别的要求： 正常对照组正常对照组 模型组模型组赋形剂（或溶剂组）赋形剂（或溶剂组） 阳性药组阳性药组 药物不同剂量组药物不同剂量组LOGO随机区组分组随机区组分组步骤：步骤：1）给小鼠编号（在尾巴上写数字）2）称重3）按体重重新编号4）按区组分组LOGO在在EXCEL中建立随机数字表中建立随机数字表LOGO例如：3个实验组，分3个区组，每个组5只动物。编编
4、号号1 12 23 34 45 56 67 78 89 9101011111212131314141515随机数字771028073235494011037除数3333333333余数2021221121组别231213231123213LOGO大鼠大鼠豚鼠豚鼠家兔家兔犬犬二、抓取、保定二、抓取、保定二、抓取、保定二、抓取、保定小鼠小鼠LOGO小鼠的捉持小鼠的捉持1 1 1 1、用右手拇指、用右手拇指、用右手拇指、用右手拇指和食指捏住小鼠和食指捏住小鼠和食指捏住小鼠和食指捏住小鼠尾巴中部将小鼠尾巴中部将小鼠尾巴中部将小鼠尾巴中部将小鼠提起，放在饲养提起，放在饲养提起，放在饲养提起，放在饲养盒的
5、笼盖上。盒的笼盖上。盒的笼盖上。盒的笼盖上。用左手拇指和用左手拇指和用左手拇指和用左手拇指和食指迅速、准食指迅速、准食指迅速、准食指迅速、准确地捏住小鼠确地捏住小鼠确地捏住小鼠确地捏住小鼠的两耳后及颈的两耳后及颈的两耳后及颈的两耳后及颈背部的皮肤，背部的皮肤，背部的皮肤，背部的皮肤，将小鼠提起。将小鼠提起。将小鼠提起。将小鼠提起。翻翻翻翻转转转转左左左左手手手手掌掌掌掌，以以以以左左左左手手手手掌掌掌掌心心心心和和和和中中中中指指指指夹夹夹夹小小小小鼠鼠鼠鼠背背背背部部部部的的的的皮皮皮皮肤肤肤肤，使使使使小小小小鼠鼠鼠鼠整整整整个个个个呈呈呈呈一一一一条直线。条直线。条直线。条直线。用左手拇
6、指和用左手拇指和用左手拇指和用左手拇指和食指迅速、准食指迅速、准食指迅速、准食指迅速、准确地捏住小鼠确地捏住小鼠确地捏住小鼠确地捏住小鼠的两耳后及颈的两耳后及颈的两耳后及颈的两耳后及颈背部的皮肤，背部的皮肤，背部的皮肤，背部的皮肤，将小鼠提起。将小鼠提起。将小鼠提起。将小鼠提起。LOGOhttp:/ 左手顺势按、左手顺势按、左手顺势按、左手顺势按、卡在大鼠躯干卡在大鼠躯干卡在大鼠躯干卡在大鼠躯干背部，稍加压背部，稍加压背部，稍加压背部，稍加压力向头颈部滑力向头颈部滑力向头颈部滑力向头颈部滑行。行。行。行。以左手拇指和以左手拇指和以左手拇指和以左手拇指和食指捏住大鼠食指捏住大鼠食指捏住大鼠食指捏
7、住大鼠两耳后部的头两耳后部的头两耳后部的头两耳后部的头颈皮肤，其余颈皮肤，其余颈皮肤，其余颈皮肤，其余三指和手掌握三指和手掌握三指和手掌握三指和手掌握住大鼠背部皮住大鼠背部皮住大鼠背部皮住大鼠背部皮肤，完成抓取肤，完成抓取肤，完成抓取肤，完成抓取固定。固定。固定。固定。LOGOLOGO豚鼠的捉持豚鼠的捉持先用左手轻轻扣、先用左手轻轻扣、先用左手轻轻扣、先用左手轻轻扣、按住豚鼠背部。按住豚鼠背部。按住豚鼠背部。按住豚鼠背部。顺势抓紧其肩顺势抓紧其肩顺势抓紧其肩顺势抓紧其肩胛上方皮肤，胛上方皮肤，胛上方皮肤，胛上方皮肤，拇指和食指环拇指和食指环拇指和食指环拇指和食指环箍其颈部。箍其颈部。箍其颈部。
8、箍其颈部。用右手轻轻托用右手轻轻托用右手轻轻托用右手轻轻托住其臀部，住其臀部，住其臀部，住其臀部，即可将豚鼠抓即可将豚鼠抓即可将豚鼠抓即可将豚鼠抓取固定。取固定。取固定。取固定。LOGO兔的捉持兔的捉持用右手抓住兔颈用右手抓住兔颈用右手抓住兔颈用右手抓住兔颈部的被毛和皮肤，部的被毛和皮肤，部的被毛和皮肤，部的被毛和皮肤，轻轻把兔提起。轻轻把兔提起。轻轻把兔提起。轻轻把兔提起。用左手托住兔用左手托住兔用左手托住兔用左手托住兔的臀部的臀部的臀部的臀部家兔的固定方家兔的固定方家兔的固定方家兔的固定方式有腹卧式和式有腹卧式和式有腹卧式和式有腹卧式和仰卧式两种仰卧式两种仰卧式两种仰卧式两种 家兔的抓取、
9、称重、麻醉、固定http:/ 用粗棉绳兜住用粗棉绳兜住用粗棉绳兜住用粗棉绳兜住狗的下颌，并狗的下颌，并狗的下颌，并狗的下颌，并在上颌打结在上颌打结在上颌打结在上颌打结（勿太紧）。（勿太紧）。（勿太紧）。（勿太紧）。 如犬不合作，如犬不合作，如犬不合作，如犬不合作，则先用一根特则先用一根特则先用一根特则先用一根特制长柄狗头夹，制长柄狗头夹，制长柄狗头夹，制长柄狗头夹，从后面夹住犬从后面夹住犬从后面夹住犬从后面夹住犬颈，限制犬头颈，限制犬头颈，限制犬头颈，限制犬头部活动，再按部活动，再按部活动，再按部活动，再按上述方法捆住上述方法捆住上述方法捆住上述方法捆住犬嘴。犬嘴。犬嘴。犬嘴。 LOGO三、动
10、物被毛的去除三、动物被毛的去除 拔毛法：用拇指和食指拔去被毛的方法 剪毛法：用剪刀紧贴皮肤剪去被毛剃毛法：用剃毛刀剃去动物被毛。脱毛法：用化学药品脱去动物被毛。LOGO四、实验动物的给药与取血四、实验动物的给药与取血给药途径经口灌胃经呼吸道吸入经皮肤吸收注射给药LOGO灌胃给药灌胃给药大小鼠大小鼠1 1 1 1、将灌胃针连将灌胃针连将灌胃针连将灌胃针连接在注射器上，接在注射器上，接在注射器上，接在注射器上，吸入一定量的药吸入一定量的药吸入一定量的药吸入一定量的药液。液。液。液。左手捉持动物，左手捉持动物，左手捉持动物，左手捉持动物，使头部向上。使头部向上。使头部向上。使头部向上。右手持针，把右
11、手持针，把右手持针，把右手持针，把灌胃针头的前灌胃针头的前灌胃针头的前灌胃针头的前端放进动物的端放进动物的端放进动物的端放进动物的口腔，顺着上口腔，顺着上口腔，顺着上口腔，顺着上腭部插入咽部，腭部插入咽部，腭部插入咽部，腭部插入咽部，顺咽后壁轻轻顺咽后壁轻轻顺咽后壁轻轻顺咽后壁轻轻往下推。往下推。往下推。往下推。用右手食指将用右手食指将用右手食指将用右手食指将针栓慢慢往下针栓慢慢往下针栓慢慢往下针栓慢慢往下压，将注射器压，将注射器压，将注射器压，将注射器中的药液灌入中的药液灌入中的药液灌入中的药液灌入动物的胃中。动物的胃中。动物的胃中。动物的胃中。剂量：小鼠约剂量：小鼠约剂量：小鼠约剂量：小鼠
12、约0.1-0.5ml0.1-0.5ml10g10g体重体重体重体重。最大体积为。最大体积为。最大体积为。最大体积为1.0ml/1.0ml/只只只只 大鼠约大鼠约大鼠约大鼠约1-2 ml1-2 ml100g100g体重体重体重体重，最大体积为，最大体积为，最大体积为，最大体积为5.0ml/5.0ml/只只只只大鼠的灌胃http:/ 定架定架定架定架内，灌胃者用左内，灌胃者用左内，灌胃者用左内，灌胃者用左手拇指和中指挤手拇指和中指挤手拇指和中指挤手拇指和中指挤压兔两颊，将下压兔两颊，将下压兔两颊，将下压兔两颊，将下颌挤开使兔被动颌挤开使兔被动颌挤开使兔被动颌挤开使兔被动张口。张口。张口。张口。 右
13、手将开口器右手将开口器右手将开口器右手将开口器从一侧口角插从一侧口角插从一侧口角插从一侧口角插入口腔并固定。入口腔并固定。入口腔并固定。入口腔并固定。胃管经开口器胃管经开口器胃管经开口器胃管经开口器的孔插入，向的孔插入，向的孔插入，向的孔插入，向前推进约前推进约前推进约前推进约15cm15cm，可达胃内。，可达胃内。，可达胃内。，可达胃内。在插管时应将在插管时应将在插管时应将在插管时应将胃管另一端泡胃管另一端泡胃管另一端泡胃管另一端泡在水中确认没在水中确认没在水中确认没在水中确认没有冒气泡，即有冒气泡，即有冒气泡，即有冒气泡，即可用注射器经可用注射器经可用注射器经可用注射器经胃管注入药液。胃管
14、注入药液。胃管注入药液。胃管注入药液。豚鼠灌胃同豚鼠灌胃同家兔家兔家兔的灌胃http:/ 摆动，摆动，摆动，摆动，易易易易摆动摆动摆动摆动则表示已则表示已则表示已则表示已 刺入皮下。刺入皮下。刺入皮下。刺入皮下。再轻轻再轻轻再轻轻再轻轻抽吸抽吸抽吸抽吸，如无回血，可如无回血，可如无回血，可如无回血，可缓慢地将缓慢地将缓慢地将缓慢地将 药药药药物注入皮下物注入皮下物注入皮下物注入皮下大鼠的抓取、灌胃、皮下注射、肌肉注射、脱颈处死、尾静脉、舌下静脉给药、心脏取血、心电图测定http:/ 中，通过金属中，通过金属中，通过金属中，通过金属笼或笼或笼或笼或大小鼠固定大小鼠固定大小鼠固定大小鼠固定器器器器
15、的孔拉出鼠尾的孔拉出鼠尾的孔拉出鼠尾的孔拉出鼠尾巴巴巴巴用左手捏住鼠用左手捏住鼠用左手捏住鼠用左手捏住鼠尾巴中下部，尾巴中下部，尾巴中下部，尾巴中下部，用用用用7575酒精棉酒精棉酒精棉酒精棉球反复擦拭尾球反复擦拭尾球反复擦拭尾球反复擦拭尾部部部部注射时，以左注射时，以左注射时，以左注射时，以左手拇指和中指手拇指和中指手拇指和中指手拇指和中指捏住鼠尾两侧，捏住鼠尾两侧，捏住鼠尾两侧，捏住鼠尾两侧，用食指从下面用食指从下面用食指从下面用食指从下面托起尾，托起尾，托起尾，托起尾，右手持右手持右手持右手持4 4号针号针号针号针头的注射器，头的注射器，头的注射器，头的注射器，使针头与使针头与使针头与使
16、针头与 静脉静脉静脉静脉平行（小于平行（小于平行（小于平行（小于3030度角）度角）度角）度角）大鼠亦可用舌大鼠亦可用舌下静脉注射下静脉注射小鼠尾静脉注射http:/ 用左手食指和中用左手食指和中用左手食指和中用左手食指和中指夹住兔的耳缘指夹住兔的耳缘指夹住兔的耳缘指夹住兔的耳缘静脉的近端，拇静脉的近端，拇静脉的近端，拇静脉的近端，拇指绷紧静脉的远指绷紧静脉的远指绷紧静脉的远指绷紧静脉的远端，无名指和小端，无名指和小端，无名指和小端，无名指和小指放在耳郭下作指放在耳郭下作指放在耳郭下作指放在耳郭下作垫。垫。垫。垫。右手拿注射器，右手拿注射器，右手拿注射器，右手拿注射器，针尖的斜面朝针尖的斜面朝
17、针尖的斜面朝针尖的斜面朝上，将针上，将针上，将针上，将针 头从远心端插头从远心端插头从远心端插头从远心端插入血管入血管入血管入血管回抽有血即可回抽有血即可回抽有血即可回抽有血即可注射，拔针后注射，拔针后注射，拔针后注射，拔针后用棉球止血用棉球止血用棉球止血用棉球止血豚鼠可用足豚鼠可用足背静脉注射背静脉注射http:/ 5 52 23 31 1尾尖采血尾尖采血尾尖采血尾尖采血眼眶静脉丛采血眼眶静脉丛采血眼眶静脉丛采血眼眶静脉丛采血断头采血断头采血断头采血断头采血腹主动脉采血腹主动脉采血4 4心脏采血心脏采血心脏采血心脏采血腹主动脉采血腹主动脉采血腹主动脉采血腹主动脉采血6 6静脉采血静脉采血静脉
18、采血静脉采血LOGO方法：方法：固定动物并露出鼠尾，将尾部在45的温水中浸泡数分钟，使尾部血管扩张。将鼠尾擦干，用锐器切去尾尖0.30.5cm，让血液滴入盛器或直接以吸管吸取。对象：对象：大、小鼠特点：特点：小量采血，可以多次采血。 1尾尖采血尾尖采血LOGOLOGO方法：方法：用左手捉鼠，拇指及中指抓住头颈部皮肤，食指按于眼后，使眼球轻度突出，眼底球后静脉丛淤血。右手持取内径为取内径为1.0-1.5mm1.0-1.5mm的玻璃毛细管（临用前折断成的玻璃毛细管（临用前折断成1-1.5cm1-1.5cm长的毛细管长的毛细管段，浸入段，浸入1 1肝素溶液中，干燥后用）肝素溶液中，干燥后用）刺入深度
19、小鼠23mm，大鼠45mm。当感到有阻力时再稍后退，得到所需要的血量后，拔出。 对象：对象：大、小鼠等。特点：特点：中等血量（0.20.3ml，小鼠；0.51.0ml，大白鼠），避免动物死亡。2眼眶静脉丛采血眼眶静脉丛采血眼眶静脉丛采血眼眶静脉丛采血LOGO小鼠眼眶取血http:/ 对象：对象：大、小鼠等。特点：特点：需要血量较大（小白鼠可采血0.81.0ml，大白鼠可采血5.08.0ml） ，且不需要继续保存动物生命时用本法。3断头采血断头采血 LOGOLOGO方法：方法：动物要麻醉后进行，用针管在腹主动脉与血管平行刺入。对象：对象：大、小鼠等。特点：特点：需要血量较大，且不需要继续保存动物
20、生命时用本法。4腹主动脉采血腹主动脉采血腹主动脉采血腹主动脉采血大鼠腹主动脉取血、灌流http:/ 对象：对象：大鼠、兔、豚鼠等。特点：特点：采血量较大，继续保存动物生命。5心脏采血心脏采血LOGOLOGO方法：方法：将家兔放在固定箱内，剪去拟采血耳壳上的毛，用电灯照射加热或用二甲苯棉球涂擦耳壳，使耳部血管扩张。用粗针头刺破耳缘静脉或以刀片在血管上切一小口，让血液自然流出，滴入已放有抗凝剂的盛器中。采血完毕，用干棉球压住出血口，以待止血。如一时不易止血，可用木夹夹住耳壳1020分钟。 对象：对象：兔特点：特点：采血量较大，继续保存动物生命。6静脉采血静脉采血LOGO兔耳缘静脉取血方法LOGO麻
21、醉方法：麻醉方法：吸入、注射（静脉、皮下、肌肉、腹腔）吸入、注射（静脉、皮下、肌肉、腹腔）常用麻醉药物：常用麻醉药物：挥发性麻醉药：异氟烷、乙醚（吸入），挥发性麻醉药：异氟烷、乙醚（吸入），非挥发性麻药：戊巴比妥钠、硫贲妥钠、氯胺酮（静脉）非挥发性麻药：戊巴比妥钠、硫贲妥钠、氯胺酮（静脉）五、实验动物的麻醉五、实验动物的麻醉LOGO常用麻醉药的剂量及注射途径种类种类戊巴比妥戊巴比妥硫贲妥钠硫贲妥钠盐酸氯胺酮盐酸氯胺酮水合氯醛水合氯醛乌拉坦乌拉坦mg/kgmg/kg途径途径mg/kgmg/kg途径途径mg/kgmg/kg途径途径mg/kgmg/kg途径途径mg/kgmg/kg小鼠小鼠353550
22、50IVIVIPIP25255050I.V.I.V.IPIP22-4422-44IMIM400400IPIP- - -大鼠大鼠25255050IVIVIPIP20204040IVIVIPIP22-4422-44IMIM300300IPIP0.750.75IPIP豚鼠豚鼠30304040IVIVIPIP20205555IVIVIPIP22-4422-44IMIM200-200-300300IPIP1.51.5IPIP家兔家兔30304040IVIVIPIP2020IVIV22-4422-441.01.0IVIVIPIPLOGO麻醉注意事项麻醉注意事项麻醉前应准确称体重；麻醉前应准确称体重；注意麻
23、醉剂量，麻醉过程中注意观察动物的反应情况；注意麻醉剂量，麻醉过程中注意观察动物的反应情况；注意保温，在寒冷冬季，麻醉剂在注射前应加热至动物体注意保温，在寒冷冬季，麻醉剂在注射前应加热至动物体温水平；温水平；静脉注射时，速度要均匀，不宜太快。静脉注射时，速度要均匀，不宜太快。动物在麻醉状态体温容易下降，手术中和手术后要采取动物在麻醉状态体温容易下降，手术中和手术后要采取保保暖暖措施；措施；及时处理麻醉过量的动物，使用及时处理麻醉过量的动物，使用10%10%的咖啡因，按的咖啡因，按0.1ml/kg0.1ml/kg静脉注射或用静脉注射或用10%10%的可拉明按的可拉明按0.20.20.5 ml/kg0.5 ml/kg静静脉或肌肉注射。脉或肌肉注射。LOGO六、实验动物的粪便采集六、实验动物的粪便采集压迫膀胱法压迫膀胱法代谢笼法代谢笼法导尿法（用导尿管导尿法（用导尿管插入膀胱，用于大型插入膀胱，用于大型动物）动物）LOGO七、实验动物处死方法实验动物处死方法 颈椎脱臼处死法 断头处死法 放血处死法空气栓塞处死法（家兔）过量麻醉处死法LOGO谢谢
