实验室生物防护与安全

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1、实验室生物防护与安全标 志内容提要内容提要实验室安全工作面临的问题安全防护实验室安全事故的危害类型硬件建设方面软件管理方面规划设计考虑不周,造成安全隐患基础设施陈旧,线路老化,火灾隐患多乱设防护门窗,堵塞安全通道安全资金投入不足,安全设施陈旧落后安全观念落后,安全意识不强安全建设审核制度不完善安全管理体制不顺,安全责任不明制度不严,检查不力,奖罚不明不重视安全教育和培训,相关制度不完善实验室安全工作面临的问题实验室安全工作面临的问题内容提要内容提要实验室安全工作面临的问题安全防护 机械危害 辐射危害 化学品危害 电气危害 信息泄露危害 生物危害实验室安全事故的危害类型实验室安全事故的危害类型电

2、光眼 概念概念 眼球外膜(角膜或结膜)发炎 引发的原因引发的原因 弧光放电时,眼睛受到紫外线或红外线照射 发作时间发作时间 照射后的48h 症状表现症状表现 眼睑皮肤红肿,结膜发炎 严重的时角膜透明度受到破坏,瞳孔收缩信息泄露危害 安装防火墙和杀毒软件来抵制黑客的恶 意攻击和病毒的泛滥够了吗? 信息安全意识普遍淡薄 数据备份,关键数据的加密生物危害2004年 CDC 因安全管理不善引起的“非典”疫情内容提要内容提要实验室安全工作面临的问题实验室安全事故的危害类型机械危害辐射危害 化学品危害 电气危害 信息泄露危害生物危害危害类型危害类型安全防护安全防护化学品防护及处理 生物安全 实验室常用的危

3、险化学品简介 废弃物的处理 实验过程中的自我防护 呼吸 接触 致癌性综合毒性EB DEPC DMSO DTT SDS 氯仿 甲醛 乙酸 丙烯酰胺 实验室常用的有毒化学品EB EB(Ethidium bromide,中文名为溴化乙锭) 强诱变剂,具有高致癌性!易在6070度蒸发。实验操作时,要戴薄膜(PE)手套或者橡胶手套,谨防EB溶液沾于身上或者在随处洒落,在实验使用后要妥善处理好,严禁随意丢弃。 强氧化剂强氧化剂 避免擦拭金属表面 避免接触到皮肤 避免吸入 穿实验服穿实验服 戴口罩戴口罩 手套手套 次氯酸钠次氯酸钠DMSODMSO中文名:二甲基亚砜。用途广泛。生物学实验常用作一种渗透性保护剂

4、。是一种即溶于水又溶于有机溶剂的极为重要的非质子极性溶剂。DMSO存在严重的毒性作用,与蛋白质疏水基团发生作用,导致蛋白质变性,具有血管毒性和肝肾毒性。对皮肤有极强的渗透性,有助于药物向人体渗透。能够灼伤皮肤并使皮肤有刺痛感,如同所见的皮疹及水泡一样。与皮肤接触会产生热反应。最为常见的为头痛、恶心、呕吐、皮疹。DMSO是毒性比较强的东西,用的时候要避免其挥发,要准备1%-5%的氨水备用,皮肤沾上之后要用大量的水洗以及稀氨水洗涤. SDSSDS 中文名:十二烷基硫酸钠。是一种刺激物,有毒会造成对眼睛的严重损伤的危险。可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康戴合适的手套和安全护目镜。不要吸入其粉末。异丙

5、醇常温常压下是一种无色有强烈气味的可燃液体,低毒,半数致死量(大鼠,经口)2524mg/kg。高浓度蒸气有麻醉性、刺激性操作注意事项:通风橱或生物安全柜内操作,佩戴口罩,手套,远离火源。 实验室常用的危险化学品简介 废弃物的处理 实验过程中的自我防护化学品化学品化学品存放化学品存放 1. 有机溶剂,固体化学药品,酸、碱化合物分类存放; 2. 挥发性化学药品放置于具有抽气装置的药品柜内; 3. 高挥发性或易于氧化的化学药品存放于冰箱或冰柜之中; 4. 强酸或强碱(包括废酸碱)不得不得存放于金属架之上。使用时的自我保护使用时的自我保护 1. 避免用手直接去接触药品; 2. 使用有毒或带剌激味的试剂

6、时必需戴上安全手套,穿上实验服, 挥发性酸在通风橱进行; 3. 使用药品和实验结束后立即用肥皂水洗手; 安全防护安全防护 - - 口罩口罩在普通口罩仅可以保护部分面部免受生物危害物质如血液、体液、分泌液以及排泄物等喷溅物的污染生物安全实验室中佩戴简易防护帽可以保护工作人员避免化学和生物危害物质飞溅至头部(头发)所造成的污染。 适用于-BSL-1或BSL-2实验室中使用手套手套手套的选择:生物安全实验室一般使用乳胶橡胶或聚腈类或聚氯乙烯手套用于对强酸、强碱、有机溶剂和生物危害物质的防护 手套的检查:在使用手套前应该检查手套是否退色、穿孔(漏损)或有裂缝手套的使用手套的使用 一般情况下,佩戴一副手

7、套即可(BSL-1和BSL-2实验室)在生物安全柜中操作感染性物质时(BSL-3实验室)应佩戴两副手套。 在操作过程中,外层手套被污染,立即用消毒剂喷洒手套并脱下后丢弃在生物安全柜中的高压灭菌袋中并立即戴上新手套继续实验。戴好手套后应完全遮住手及腕部,如必要可覆盖实验服衣袖。 1) 在实验室工作中要一直保持戴手套状态并选择正确类型和尺寸的手套;2) 将手插入手套后将手套口遮盖实验服袖;手套的配带手套的配带避免手套避免手套避免手套避免手套“ “触摸污染触摸污染触摸污染触摸污染” ” 戴手套的手避免触摸鼻子、面部和避免触摸或调整 其他个人防护装备(如眼镜等) 避免触摸不必要的物体表面如灯开关、门或

8、捏手等 如果手套撕破应该脱去,在换戴新手套前应清洗手部 注意尽量不去触摸工作台面和其他物品 不得戴着手套离开实验室区域 洗洗 手手洗手是一种减少有害物质暴露的有效措施,要经常洗手。 a)在处理活体病原材料或动物等生物危害物质后, b)在脱去手套之后和离开实验室之前, c)在脱卸个人防护装备时发生手部可见的污染时,洗手 后再继续脱卸其他个人防护设备之前。 洗手一般用肥皂和水或使用酒精擦手器。防护服(实验服)防护服(实验服)(实验服、隔离衣、连体衣、围裙以及正压防护服)1、在实验室中工作人员应该一直或持续穿上防护服2、清洁的防护服应放置在专用存放处3、污染的防护服应放置在有标志的防漏消毒袋中4、每

9、隔适当的时间应更换防护服以确保清洁 5、当防护服已被危险材料污染后应立即更换6、离开实验室区域之前应脱去防护服鞋子和鞋套或靴套鞋子和鞋套或靴套鞋子和鞋套或靴套鞋子和鞋套或靴套当实验室中存在物理、化学和生物危险因子的情况下,穿合适的鞋子和鞋套或靴套。可以防止实验人员足部(鞋袜)避免受到损伤。BSL-2和BSL-3实验室要坚持穿鞋套或靴套。配带顺序配带顺序穿:戴口罩戴帽子穿防护服戴防护眼镜穿鞋套戴手套脱:外层手套防护眼镜防护服口罩和帽子鞋套内层手套 实验室常用的危险化学品简介 废弃物的处理 实验过程中的自我防护分类处理分类处理废弃物可以分成以下几类:1、可重复或再使用,或按普通“家庭”废弃物丢弃的

10、非污染 (非 感染性)废弃物2、污染(感染性)锐器皮下注射用针头、手术刀、刀子及 破 碎玻璃;这些废弃物应收集在带盖的不易刺破的容器内, 并按感染性物质处理3、通过高压灭菌和清洗来清除污染后重复或再使用的污染材料4、高压灭菌后丢弃的污染材料5、直接焚烧的污染材料废弃物处理废弃物处理废废 EBEB溶液的处理溶液的处理 对于EB含量大于0.5mg/ml的溶液,可如下处理: a. 加入一倍体积的2.5mol/L NaOH,混匀并置室温数小时后废弃。 b. 加入一倍体积的0.5mol/L KMnO4 ,混匀,再加入等量的0.25mol/L HCl混匀,置 室温数小时; c. 将EB溶液用水稀释至浓度低

11、于0.5mg/ml; 含含 EBEB的废胶的处理的废胶的处理 a. 阳光下暴晒:痕量的或小于0.1的没有问题可以直接扔掉。 大于等于0.1(胶发红)时应该放在生物危害柜中焚烧掉。 b. 对于废EB接触物,如抹布,枪头。一般回收至黑色的玻璃瓶中, 定期进行焚烧处理。EBEB的处理的处理机械危害辐射危害 化学品危害 电气危害 信息泄露危害生物危害危害类型危害类型安全防护安全防护化学品防护及处理 生物安全防护 狭义狭义:指现代生物技术的研究、开发、应用及转基因生物:指现代生物技术的研究、开发、应用及转基因生物 对生物多样性、生态环境和人类健康产生潜在的危对生物多样性、生态环境和人类健康产生潜在的危害

12、害 广义广义:指与生物有关的各种因素对社会、经济、人类健康及:指与生物有关的各种因素对社会、经济、人类健康及 生态环境所产生的危害或潜在风险。生态环境所产生的危害或潜在风险。生物安全生物安全感染性微生物的危险度等级分类感染性微生物的危险度等级分类危险度 个体危险群体危险1 级无或极低无或极低2 级中等低3 级高低4 级高高生物安全防护的目标生物安全防护的目标 确保实验室工作人员不受实验对象侵染 确保周围环境不受其污染。生物安全防护的组成生物安全防护的组成 安全设备 技术操作(略)与微生物危险度等级相对应的生物安全水平、操作和设备与微生物危险度等级相对应的生物安全水平、操作和设备不同安全等级的个

13、人防护不同安全等级的个人防护BSL1实验室实验室 工作人员在实验时应穿工作服,戴手套 必要时佩戴防护眼镜 完成实验,工作服必须脱下留在实验室并定期消毒洗涤 BSL2实验室实验室除符合BSL1的要求外,还应该符合下列条件:在工作服外加罩衫或穿防护服。戴帽子和口罩。如可能发生感染性材料的溢出或溅出,宜戴两副手套。工作完全结束后方可除去手套。不同生物安全水平对设施的要求不同生物安全水平对设施的要求实验室生物安全防护水平实验室生物安全防护水平 一级防护屏障 生物安全柜 + 个人防护装备 二级防护屏障 实验室的设施结构和通风系统超超 净净 台台正压柜气流从顶部或底部经过过滤器后从操作区正面流向工作台面,

14、被样品污染的气流排出柜外,没有循环气流。超净台保护样品不受污染,适用适用于普通实验室或于普通实验室或1 1级生物安全水级生物安全水平中平中对人员和环境无保护要求的对人员和环境无保护要求的实验实验。一级生物安全柜一级生物安全柜负压柜气流经操作人员向内进入工作台面,被污染的气流通过HEPA过滤器外排出柜外,没有循环气流。CLASS I级BSC保护操作人员和环境不受污染,适用于生物安全水适用于生物安全水平中平中对实验样品无保护要求的实对实验样品无保护要求的实验验二级生物安全柜二级生物安全柜层流负压柜 它它们们可可以以安安全全的的保保护护样样品品、人人员员和环境和环境。II 级生物安全柜分为A型(30

15、%排在室内 )和 B型;B型中又分为 B1 (70%接管道外排) B2 (100%接管道外排) B3 (30% 接管道外排)CLASS IIICLASS III生物安全柜生物安全柜生物安全柜生物安全柜(手套柜)(手套柜)(手套柜)(手套柜)全封闭的、气密结构的通风柜;通过橡胶手套进行操作;柜内保持至少120Pa的负压;供气通过HEPA抽入内;外排的气流经过双层双层HEPA过滤或经 HEPA后再经燃烧处理。CLASS III 型BSC适用于BSL3、BSL4的生物实验。生物安全装置异同生物安全装置异同高效空气过滤工作人员安全无涡流单项流动保护实验对象手套式操作箱通风厨否是是否否超净台是否是是否级-BSC是是否否否级-BSC是是是是否级-BSC是是是是是熟悉实验室的制度规定了解实验室环境:物品存放、试剂订购、垃圾处理、急救信息刻苦的学习精神;严禁的工作作风;求是的科学态度;良好的操作习惯谢谢 谢谢 !

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