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1、Page 1Page 2第六节 细胞裂解酶一 溶 酶 菌二 蛋 白 酶 K 三 纤维素酶 Page 3 1、溶菌酶的作用：裂解细胞的细胞壁 2、种类：细菌细胞壁溶菌酶，真菌细胞壁 溶菌酶。一一 溶酶菌溶酶菌Page 43、溶菌酶是一种碱性球蛋白，分子中碱性氨基酸、酰胺残基和芳香族氨，酸的比例较高，酶的活动中心是天冬氨酸和谷氨酸。基因工程常用鸡蛋清溶菌酶。鸡蛋清溶菌酶是碱性球蛋白，具有4个S-S键。Da 全称道尔顿，是分子量最常用的单位，就是将分子中所有原子按个输求原子量的代数和。由于蛋白质是大分子，所以常用KDa。Page 5其水解位点是N-乙酰胞壁酸（NAM）的1位碳原子和N-乙酰葡萄糖胺（
2、NAG）的4位碳原子间的-1,4-糖苷键。主要作用：裂解 细菌菌体。裂解微生物细胞壁Page 6溶酶菌作溶酶菌性质稳定，对热的稳定性强，所以溶酶菌裂解细菌往往 PH6.07.0和25。 溶菌酶是母乳中能保护婴儿免遭病 毒感染的一种有效成分，它能通过 消化道而保持其活性状态，溶菌酶还 可以使婴儿肠道中大肠杆菌减少，促 进双歧杆菌的增加，还可以促进蛋白 质的消化吸收。Page 7二 蛋白酶Kv 蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋v白酶，用于生物样品中蛋白质的一般降解。v从林伯氏白色念球菌，尤其适合水解羧基v末端至芳香族氨基酸和中性氨基酸之间的v肽键。Page 8*值得注意的是，蛋白酶K在原位杂交
3、技术中通常用于杂交前的处理,它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用,以增加探针与靶核酸结合的机会,提高杂交信号.但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时,都会对细胞的结构有一定的破坏,导致组织切片的脱落,细胞核的消失,从而影响杂交结果.EDTA缓冲液可以替代蛋白酶K的作用,解决上述出现的问题,并能达到理想的染色效果.蛋白酶K的作用温度和时间一般是37水 浴和25h。最适PH为7.512，对热稳定。Page 9三 纤维素酶纤维素酶是指能水解纤维素-1,4-葡萄糖苷键，使纤维素变成纤维二糖和葡萄糖的一组酶的总称。Page 10是由葡聚糖内切酶（Cx酶），葡聚糖外切酶（C1酶）， -葡萄糖苷酶
4、（CB酶）三个主要成分组成的 诱导型复合酶系。Page 11 纤维素酶是一种重要的酶产品，是一纤维素酶是一种重要的酶产品，是一种复合酶，主要由外切种复合酶，主要由外切-葡聚糖酶、内切葡聚糖酶、内切-葡聚糖酶和葡聚糖酶和-葡萄糖苷酶等组成，还有葡萄糖苷酶等组成，还有很高活力的木聚糖酶活力。由于纤维素酶很高活力的木聚糖酶活力。由于纤维素酶在饲料、酒精、纺织和食品等领域具有巨在饲料、酒精、纺织和食品等领域具有巨大的市场潜力，已被国内外业内人士看好，大的市场潜力，已被国内外业内人士看好，将是继糖化酶、淀粉酶和蛋白酶之后的第将是继糖化酶、淀粉酶和蛋白酶之后的第四大工业酶种，甚至中国有可能成为第一四大工业酶种，甚至中国有可能成为第一大酶种大酶种，纤维素酶是酶制剂工业中的一个纤维素酶是酶制剂工业中的一个新的增长点新的增长点。 Page 12纤维素酶来源广泛，常采用微生物发酵法获得。在基因工程操作中，纤维素酶主要用于制备植物原生质体。在2530和4.85.8条件下，纤维素酶和果胶酶一起降解细胞壁，释放出原生质体。Page 13
