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1、流式细胞术在白血病中的临床流式细胞术在白血病中的临床应用应用检验科检验科科室讲座课件一、简介流式细胞术一、简介流式细胞术二、简介白血病二、简介白血病三、流式细胞术在白血病中的应用三、流式细胞术在白血病中的应用(结合病例分析结合病例分析)科室讲座课件一、简介流式细胞术一、简介流式细胞术1.1.流式细胞术（流式细胞术（flow cytometry,FCM）：）：以流式细胞仪测量悬浮细胞的一种现代以流式细胞仪测量悬浮细胞的一种现代细胞分析技术。综合运用电子、激光、细胞分析技术。综合运用电子、激光、计算机和流体力学等与荧光标记、分子计算机和流体力学等与荧光标记、分子免疫学、分子遗传学及分子生物学等结免
2、疫学、分子遗传学及分子生物学等结合，对细胞的生理功能和特性进行分析。合，对细胞的生理功能和特性进行分析。科室讲座课件散射光信号散射光信号Right Angle Light Detector Cell ComplexitySSCForward Light Detector Cell Surface Area FSCIncident Light Source=前向角散射光（前向角散射光（FSC, Forward ScatterFSC, Forward Scatter）细胞相对大小及其表面积细胞相对大小及其表面积 =侧向角散射光（侧向角散射光（SSC, Side ScatterSSC, Side S
3、catter）细胞粒度及细胞内相对复杂性细胞粒度及细胞内相对复杂性LaserFALS Sensor科室讲座课件流式细胞仪的检测信号流式细胞仪的检测信号荧光信号荧光信号n使用荧光标记的单克隆抗体染色，做多色分析使用荧光标记的单克隆抗体染色，做多色分析n荧光信号的强弱，反映了细胞抗原的表达含量荧光信号的强弱，反映了细胞抗原的表达含量科室讲座课件荧光信号荧光信号双色直接染色双色直接染色科室讲座课件外周全血细胞散射光双参数点图外周全血细胞散射光双参数点图（红细胞溶解后）（红细胞溶解后）科室讲座课件二、简介白血病二、简介白血病科室讲座课件造血干细胞分化过程的不同阶段造血干细胞分化过程的不同阶段发生分化阻
4、滞、凋亡障碍和恶性增殖发生分化阻滞、凋亡障碍和恶性增殖而引起的一组异质性的造血系统恶性而引起的一组异质性的造血系统恶性肿瘤。肿瘤。1.1.白血病：常见的恶性肿瘤之一白血病：常见的恶性肿瘤之一科室讲座课件根据白血病细胞的成熟程度和自然病程：根据白血病细胞的成熟程度和自然病程：急性：原始细胞、早期幼稚细胞为主，急性：原始细胞、早期幼稚细胞为主，自然病程仅数月自然病程仅数月慢性：较成熟幼稚细胞和成熟细胞为慢性：较成熟幼稚细胞和成熟细胞为主，自然病程常为数年主，自然病程常为数年科室讲座课件淋系、髓系（单核和粒细胞）淋系、髓系（单核和粒细胞）急淋、急非淋（急性髓系白血病）急淋、急非淋（急性髓系白血病）慢
5、淋、慢粒慢淋、慢粒科室讲座课件2 2、白血病的病因、白血病的病因n放射因素放射因素n化学因素化学因素n病毒因素病毒因素n遗传因素遗传因素n其它血液病：慢粒、真性红细胞增多症、其它血液病：慢粒、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、骨髓纤维化、原发性血小板增多症、骨髓纤维化、MDS、PNH、淋巴瘤、淋巴瘤、MM 科室讲座课件3、发病率、发病率占癌症发病率的占癌症发病率的5%，我国发病率，我国发病率2-4/10万，美国万，美国9.6/10万，欧洲万，欧洲4.3-9.0/10万。万。科室讲座课件我国白血病的流行现状及特点我国白血病的流行现状及特点n急性：慢性急性：慢性5.5：1n急性髓系白血病最多，
6、其次急淋、慢粒，慢淋急性髓系白血病最多，其次急淋、慢粒，慢淋少少n成人急白以急粒为多见成人急白以急粒为多见儿童以急淋为多见儿童以急淋为多见n慢粒白血病随年龄增长发病率逐渐升高慢粒白血病随年龄增长发病率逐渐升高n慢淋在慢淋在50岁以后才明显增多岁以后才明显增多n男性略高于女性男性略高于女性1.18：1科室讲座课件现有的分型：现有的分型：FABFAB19761976年年形态分类形态分类1985-19861985-1986MIC:MorphologyImmunology Cytogenetics WHOWHO1995-19971995-1997细胞遗传学细胞遗传学NCINCI19901990科室讲座
7、课件FAB1991年修订：急性髓系白血病急性髓系白血病nM0 M0 急性髓系白血病微分化型急性髓系白血病微分化型nM1M1急性粒细胞白血病未分化型急性粒细胞白血病未分化型nM2M2急性粒细胞白血病部分分化型急性粒细胞白血病部分分化型nM3M3急性早幼粒细胞白血病急性早幼粒细胞白血病nM4M4急性粒单核细胞白血病急性粒单核细胞白血病nM5M5急性单核细胞白血病急性单核细胞白血病nM6M6红白血病红白血病nM7M7急性巨核白血病急性巨核白血病科室讲座课件急性淋巴细胞白血病急性淋巴细胞白血病nB B细胞系细胞系nT T细胞系细胞系科室讲座课件4 4、临床特点、临床特点n起病：发病急骤或缓慢起病：发病
8、急骤或缓慢起病急者往往可没有前驱症状，突然发病，起病急者往往可没有前驱症状，突然发病，以发热、多部位出血、进行性苍白或骨、关节以发热、多部位出血、进行性苍白或骨、关节疼痛等为首发症状。疼痛等为首发症状。起病缓慢者以苍白、乏力、虚弱和食欲减起病缓慢者以苍白、乏力、虚弱和食欲减退等症状开始，可进行性加重，以后多有发热、退等症状开始，可进行性加重，以后多有发热、出血等出血等。科室讲座课件发热是最常见症状。发热是最常见症状。感染原因：感染原因：中性粒细胞减少或缺乏；中性粒细胞减少或缺乏；中性粒细胞功能异常；中性粒细胞功能异常；免疫功能尤其是细胞免疫功能低下，或化疗、糖皮质激素的应免疫功能尤其是细胞免疫
9、功能低下，或化疗、糖皮质激素的应用；用；白血病细胞在全身各脏器广泛浸润，尤其是高白细胞浸润后使白血病细胞在全身各脏器广泛浸润，尤其是高白细胞浸润后使组织缺氧，局部组织出血、坏死，增加了细菌滋生机会。组织缺氧，局部组织出血、坏死，增加了细菌滋生机会。抗生素的使用不正确，尤其是条件致病菌及真菌的感染抗生素的使用不正确，尤其是条件致病菌及真菌的感染科室讲座课件急白：几乎所有患者都有不同程度出血，急白：几乎所有患者都有不同程度出血，其中以其中以M3和和M5出血重。出血重。慢性白血病慢性白血病:不常见不常见原因：原因：血小板质和量异常血小板质和量异常DIC :M3易发生易发生凝血因子缺乏凝血因子缺乏科室
10、讲座课件原因：原因：骨髓中红细胞系的造血被白血病细胞增殖所替代或骨髓中红细胞系的造血被白血病细胞增殖所替代或受到白血病细胞分泌的抑制因子所抑制，使骨髓中受到白血病细胞分泌的抑制因子所抑制，使骨髓中红细胞的生成减少，并使幼稚红细胞对红细胞生成红细胞的生成减少，并使幼稚红细胞对红细胞生成素的反应减弱。素的反应减弱。无效红细胞生成；幼稚红细胞增生异常。无效红细胞生成；幼稚红细胞增生异常。溶血：多见于溶血：多见于ALL、CLL,急白合并急白合并DIC时常有微血管时常有微血管病性溶血。病性溶血。其它：急慢性失血及某些抗代谢化疗药物其它：急慢性失血及某些抗代谢化疗药物科室讲座课件白血病细胞大量繁殖，使骨髓
11、内张力增高而发生疼白血病细胞大量繁殖，使骨髓内张力增高而发生疼痛；痛；白血病细胞也可浸润骨皮质和骨膜，发生局部肿块，白血病细胞也可浸润骨皮质和骨膜，发生局部肿块，还可以引起骨皮质破坏缺损引起疼痛；还可以引起骨皮质破坏缺损引起疼痛；白细胞坏死引起高尿酸血症致痛风、融骨性粒细胞白细胞坏死引起高尿酸血症致痛风、融骨性粒细胞肉瘤等，均可引起骨痛。肉瘤等，均可引起骨痛。肢体剧烈疼痛多见于肢体剧烈疼痛多见于ALL,儿童白血病多浸润关节，儿童白血病多浸润关节，成人主要疼痛部位在胸骨、肋骨及脊椎等。成人主要疼痛部位在胸骨、肋骨及脊椎等。科室讲座课件n神经系统神经系统白血病细胞常可侵及中枢神经系统，白血病细胞常
12、可侵及中枢神经系统，以蛛网膜及硬脑膜的浸润常见。以蛛网膜及硬脑膜的浸润常见。科室讲座课件n消化系统消化系统消化道的出血常见消化道的出血常见科室讲座课件n肝、脾、淋巴结肿大肝、脾、淋巴结肿大急白的淋巴结肿大多为表浅的轻度肿大，质地较急白的淋巴结肿大多为表浅的轻度肿大，质地较软，多局限在颌下、颈部、腹部及腹股沟等处。软，多局限在颌下、颈部、腹部及腹股沟等处。绝大多数绝大多数T-ALL有纵膈淋巴结的肿大，但较少引起有纵膈淋巴结的肿大，但较少引起气管、颈静脉压迫等症状。气管、颈静脉压迫等症状。巨脾主要见于巨脾主要见于CML晚期及其急变、幼淋巴细胞白晚期及其急变、幼淋巴细胞白血病。血病。科室讲座课件n呼
13、吸系统呼吸系统肺部浸润以肺部浸润以AML多见，多见，侵犯胸膜发生胸腔积液以侵犯胸膜发生胸腔积液以ALL多见，亦多见，亦可见于可见于AML-M5,多为血性，可见较多多为血性，可见较多白血病细胞。白血病细胞。科室讲座课件n泌尿系统泌尿系统科室讲座课件n心脏五官及口腔心脏五官及口腔白血病细胞浸润口腔黏膜可引起牙龈肿胀增生、白血病细胞浸润口腔黏膜可引起牙龈肿胀增生、巨舌、牙龈出血及口腔溃疡，以巨舌、牙龈出血及口腔溃疡，以AML-M4和和M5最常见；最常见；眼眶与球后为绿色瘤的好发部位。眼眶与球后为绿色瘤的好发部位。n乳腺乳腺 n绿色瘤绿色瘤 常见于儿童和青年常见于儿童和青年AML患者，尤以患者，尤以M
14、2b多见，少多见，少数以绿色瘤为首发。绿色瘤浸润之处皆呈绿色，是由数以绿色瘤为首发。绿色瘤浸润之处皆呈绿色，是由于含大量的过氧化物酶所致。于含大量的过氧化物酶所致。科室讲座课件n电解质紊乱电解质紊乱低钾血症是低钾血症是AML于于ALL常见的并发症，于常见的并发症，于溶菌酶增高有关，血及尿中溶菌酶增高损伤肾溶菌酶增高有关，血及尿中溶菌酶增高损伤肾小管，使近曲小管功能不全，钾离子排出增多。小管，使近曲小管功能不全，钾离子排出增多。低钠血症低钠血症高钾血症高钾血症低钙血症低钙血症高磷血症高磷血症科室讲座课件3.3.流式细胞免疫分型的发展史流式细胞免疫分型的发展史19681968年年第一台流式细胞仪第
15、一台流式细胞仪 美国斯坦福美国斯坦福大学大学8080年代中期年代中期MICMIC分型分型我国：我国：19881988年年北京大学人民医院购入北京大学人民医院购入19901990年年白血病免疫分型临床应用白血病免疫分型临床应用科室讲座课件二、二、FCMFCM在白血病诊断、治疗中的应用在白血病诊断、治疗中的应用科室讲座课件科室讲座课件外周全血细胞散射光双参数点图外周全血细胞散射光双参数点图（红细胞溶解后）（红细胞溶解后）科室讲座课件1.CD45的临床应用的临床应用 CD45CD45是是白白细细胞胞的的共共同同抗抗原原成成分分。其其分分子子量量介介于于180220Kda180220Kda之之间间，属
16、属于于T200T200家家族族。所所有有人人类类白白细细胞胞均均表表达达CD45CD45，包包括括淋淋巴巴细细胞胞、单单核核细细胞胞、多多形形核核细细胞胞、嗜嗜酸酸、嗜嗜碱碱性性细细胞胞、胸胸腺腺细胞、脾细胞、扁桃腺细胞以及骨髓前体细胞。细胞、脾细胞、扁桃腺细胞以及骨髓前体细胞。科室讲座课件造血系统细胞造血系统细胞CD45CD45表达量与细胞分化表达量与细胞分化程度的高低紧密相关程度的高低紧密相关即即：分分化化程程度度高高的的细细胞胞CD45CD45表表达达量量高高，分分化化程程度度低低的的细细胞胞CD45CD45表表达达量量低低（淋淋巴巴细细胞胞 单单核核细细胞胞 成成熟熟粒粒细细胞胞 原原
17、幼幼细细胞胞，在在红红细细胞胞中中不不表表达达；SSCSSC是是侧侧向向角角参参数数，反反应应细细胞胞的的颗颗粒粒度度（成成熟熟粒粒细细胞胞 单单核核细细胞胞 原原幼幼细细胞胞 淋淋巴巴细细胞胞）。目目前前，国国际际上上采采用用CD45SSCCD45SSC设设门门（GatingGating），可可非非常常轻轻松松地地将将白白血血病病细细胞胞与与正正常常细细胞胞分分开开，增加白血病免疫分型的准确性增加白血病免疫分型的准确性科室讲座课件正常人骨髓有核细胞免疫表型散点图正常人骨髓有核细胞免疫表型散点图科室讲座课件2.FCM2.FCM在白血病中的应用优势在白血病中的应用优势能能正正确确区区别别AMLA
18、ML和和ALLALL，并并能能进进一一步步区区别别ALLALL中中的的T T系和系和B B系及亚型系及亚型能正确鉴别能正确鉴别AMLAML中难于鉴别的中难于鉴别的M0M0、M6M6、M7M7诊断双系或双表型白血病诊断双系或双表型白血病发现仅表达个别次要非本系列相关抗原的白血病发现仅表达个别次要非本系列相关抗原的白血病诊断少见疑难白血病（如诊断少见疑难白血病（如HCLHCL）科室讲座课件正常正常BMBM各系细胞比率各系细胞比率n淋巴淋巴20-25%: 20-25%: T: 70%, B: 20%, NK:10%; T: 70%, B: 20%, NK:10%; n单核单核2-6%2-6%n粒细胞
19、粒细胞:40-60%:40-60%n有核红有核红:20-25%:20-25%科室讲座课件急性急性B淋巴细胞白血病（淋巴细胞白血病（B-ALLB-ALL）R2R2：95.15%95.15%，CD33,HLA-DR,CD19,CD22,CD10 CD33,HLA-DR,CD19,CD22,CD10 阳性阳性科室讲座课件正常B细胞标志CD19CD22TdTCd34CD10CD20FMC7CD23DRI期+II期 +-+-/+III期+-+IV期+-+ 科室讲座课件B-ALLB-ALL的分型的分型亚型亚型CD19CD19CD34CD34TdTTdTCD10CD10CylgCylgSmIgSmIg急性早
20、期急性早期B B前体细胞白血病前体细胞白血病Early B-precursor ALLEarly B-precursor ALL+ + + + +- - -急性前急性前B B细胞白血病细胞白血病Pre B-ALLPre B-ALL+ +-/+-/+ + + +- -急性急性B B细胞白血病细胞白血病B-ALLB-ALL+ +- - - -/+-/+ +科室讲座课件2 2个月后复查个月后复查:R3:73.94%:R3:73.94%CD33,HLA-DR,CD19, CD22,CD10,CD34CD33,HLA-DR,CD19, CD22,CD10,CD34阳性阳性科室讲座课件R2：15.14%C
21、D33,HLA-DR,CD19,CD10,CD34,CD22阳性，部分细胞阳性，部分细胞表达表达CD20科室讲座课件急性急性T T淋巴细胞白血病（淋巴细胞白血病（T-ALLT-ALL）骨髓细胞免疫分型散点图）骨髓细胞免疫分型散点图科室讲座课件正常正常T T细胞标志：根据在胸腺内发育阶段分类细胞标志：根据在胸腺内发育阶段分类CD7CD7CD2CD2CD5CD5CD34CD34CD1aCD1aCD3c/mCD3c/mCD4CD4CD8CD8I I期期+ + + + +/-+/-IIII期期+ + + +- -+ +/-+/-IIIIII期期+ + + +- -+ +/+/+ + +IVIV期期+
22、+ + +- - -+/+/+/-+/-+/-+/-泛泛T:CD2,CD5,CD7,cCD3T:CD2,CD5,CD7,cCD3幼稚幼稚T:CD34,TdT,CD1a,CD4/8T:CD34,TdT,CD1a,CD4/8成熟成熟T:CD3,CD4,CD8T:CD3,CD4,CD8科室讲座课件T-ALLT-ALL的分型的分型分型分型CD7CD7CD2CD2TdTTdTCD3c/mCD3c/m急性早期急性早期T T前体细胞白血病前体细胞白血病Early T precursor ALLEarly T precursor ALL+ +- -+ +/-+/-急性急性T T细胞白血病细胞白血病T-ALLT
23、-ALL+ + +- -+/+/+T-ALLT-ALL特点：特点：1 1，幼稚，幼稚T T细胞数量增多：细胞数量增多：CD34+,TdT+CD34+,TdT+2 2，泛，泛T T标志丢失标志丢失3 3，CD4/8CD4/8双阳或双阳或CD4/8CD4/8单阳单阳科室讲座课件预后nB-ALLB-ALL及急性早期及急性早期B B前体细胞白血病的预前体细胞白血病的预后差，后差，C-ALLC-ALL的预后较好。的预后较好。nT T细胞系细胞系ALLALL的预后一般讲，小儿的预后一般讲，小儿T T细胞系细胞系ALLALL预后较差，而成人此型的预后较好。预后较差，而成人此型的预后较好。n染色体分析对染色体
24、分析对ALLALL尤其是儿童尤其是儿童ALLALL有重要有重要的预后价值。的预后价值。n混合型混合型CLLCLL预后及治疗效果比预后及治疗效果比CLLCLL差。差。科室讲座课件正常单核细胞标志正常单核细胞标志n全单核细胞标志：全单核细胞标志：CD33,CD13,HLA-DRCD33,CD13,HLA-DRn幼稚单核细胞标志：幼稚单核细胞标志：CD34,CD117CD34,CD117n成熟单核细胞标志：成熟单核细胞标志：CD14,CD64CD14,CD64HLA-DRHLA-DRCD33CD33CD13CD13CD34CD34CD117CD117CD14CD14CD64CD64幼稚单幼稚单+ +
25、 + + + +- - -成熟单成熟单+ + + +- - -+ + +科室讲座课件正常人骨髓有核细胞免疫表型散点图正常人骨髓有核细胞免疫表型散点图科室讲座课件正常粒细胞标志正常粒细胞标志cMPOcMPOCD13CD13CD34CD34CD11CD117 7HLA-HLA-DRDRCD33CD33CD11CD11b bCD15CD15CD64CD64CD10CD10幼稚粒幼稚粒+ + + + + + + +- - - - -成熟粒成熟粒+ + +- - -+ + + + + +全粒细胞标志：全粒细胞标志：CD13,CD33,CmpoCD13,CD33,Cmpo幼稚粒细胞标志：幼稚粒细胞标志：C
26、D34,CD117,HLA-DRCD34,CD117,HLA-DR成熟粒细胞标志：成熟粒细胞标志：CD15,CD11b,CD10,CD64CD15,CD11b,CD10,CD64科室讲座课件成熟粒、单核细胞主要区别成熟粒、单核细胞主要区别成熟粒细胞：成熟粒细胞：CD33+ HLA-DR- CD14- CD64+dimCD33+ HLA-DR- CD14- CD64+dim成熟单核细胞：成熟单核细胞：CD33+ HLA-DR+ CD14+ CD64+CD33+ HLA-DR+ CD14+ CD64+科室讲座课件R2:48.18%CD33,HLA-DR,CD34,CD15,CD14,CD64,CD
27、11b,CD13阳性，阳性，部分细胞表达部分细胞表达CD117科室讲座课件R3:44.36%CD33,HLA-DR,CD34,CD15,CD117,CD38,CD13阳性阳性科室讲座课件干祖细胞标干祖细胞标志志T T祖细胞祖细胞B B祖细胞祖细胞髓祖细胞髓祖细胞CD34CD34+ + + +TdTTdT+ + +- -CD117CD117-/+-/+- -+ +HLA-DRHLA-DR+/-+/-+ + +CD38CD38+ +/-+/-+ +科室讲座课件病例一病例一某男，某男，4949岁，汉，以岁，汉，以“咳嗽、咳痰、气短咳嗽、咳痰、气短4040天天”为主诉入院。为主诉入院。血常规：血常规：
28、WBC:33.510WBC:33.5109 9/L, HB 62g/L,RBC /L, HB 62g/L,RBC 1.87101.87101212/L PLT:5110/L PLT:51109 9/L, N 4.3%, /L, N 4.3%, L 90% M 5.4% L 90% M 5.4% 科室讲座课件骨髓白血病免疫分型结果：骨髓白血病免疫分型结果：R1:98.80%阳性表达：阳性表达：CD33:87.36%, CD13:46.67%, CD38:22.68% CD34:92.49% , HLA-DR:83.99%, CD19:98.08%, CD10:58.70% , CD20:34.0
29、9%, CD22:54.92%, 科室讲座课件骨髓形态：骨髓形态：有核细胞增生活跃，粒系增生受抑制，有核细胞增生活跃，粒系增生受抑制，红系增生活跃，淋巴细胞增生明显活跃，红系增生活跃，淋巴细胞增生明显活跃，占占81%81%，其中原始及幼稚淋巴细胞分别占，其中原始及幼稚淋巴细胞分别占10%10%和和58%58%。科室讲座课件治疗一个疗程治疗一个疗程( (长春地辛长春地辛+ +去甲氧柔红霉素去甲氧柔红霉素+ +地塞米松地塞米松) )后复查后复查骨髓免疫分型骨髓免疫分型R2:83.14%R2:83.14%阳性表达：阳性表达：CD33:99.53%, CD13:56.26%, CD38:24.47%
30、CD34:98.44% , CD33:99.53%, CD13:56.26%, CD38:24.47% CD34:98.44% , HLA-DR:99.68%, CD19:99.39%, CD10:99.42% , CD20:54.47%, HLA-DR:99.68%, CD19:99.39%, CD10:99.42% , CD20:54.47%, CD22:84.24%, CD22:84.24%, 科室讲座课件第二个疗程加用阿糖胞苷，第二个疗程加用阿糖胞苷，2个月后复查骨髓免疫分型个月后复查骨髓免疫分型（急性白血病双表型）（急性白血病双表型）科室讲座课件科室讲座课件病例二病例二某男，某男，2
31、121岁，哈族，以岁，哈族，以“间断发热，伴头晕、乏力一个月间断发热，伴头晕、乏力一个月”为主诉为主诉入院。入院。查体：重度贫血貌，右侧腹股沟处触及查体：重度贫血貌，右侧腹股沟处触及2 2个个0.5*1cm0.5*1cm大小淋巴结，边大小淋巴结，边清，活动可，质中，无压痛，余（清，活动可，质中，无压痛，余（- -）T T：39.639.6，WBC: 1.310WBC: 1.3109 9/L, HB 73g/L, PLT:9410/L, HB 73g/L, PLT:94109 9/L, /L, 科室讲座课件骨髓免疫分型骨髓免疫分型科室讲座课件形态：有核细胞增生极度活跃，粒系增生形态：有核细胞增生
32、极度活跃，粒系增生极度活跃，占极度活跃，占96%96%，以异常早幼粒细胞，以异常早幼粒细胞增生为主。增生为主。诊断：诊断：M3aM3a科室讲座课件6 6个月后复查个月后复查：科室讲座课件急性早幼粒细胞白血病（急性早幼粒细胞白血病（AML-M3AML-M3）骨髓细胞免疫分型散点图）骨髓细胞免疫分型散点图科室讲座课件某男，某男，7373岁，汉，以岁，汉，以“发现双侧颈部淋巴结肿大发现双侧颈部淋巴结肿大1 1周周”为主诉入院。为主诉入院。血常规：血常规：WBC:6.4910WBC:6.49109 9/L, HB 80g/L, /L, HB 80g/L, PLT:21410PLT:214109 9/L
33、, N 57.1%, L 33.4% M 7.9% , IgM /L, N 57.1%, L 33.4% M 7.9% , IgM 32.3g/L32.3g/L病例三病例三科室讲座课件骨髓白血病免疫分型结果：骨髓白血病免疫分型结果：R1：61.41%阳性表达：阳性表达：CD19, CD22,HLA-DR, CD20, CD38,FMC-7, CD23, CD5科室讲座课件病理结果：病理结果：B B小淋巴细胞淋巴瘤小淋巴细胞淋巴瘤注意与其它慢性注意与其它慢性B B淋巴细胞增殖性疾病的鉴别淋巴细胞增殖性疾病的鉴别科室讲座课件病例四：多毛细胞白血病病例四：多毛细胞白血病典型为外周血全血细胞减少，脾大
34、。典型为外周血全血细胞减少，脾大。血涂片中细胞具有明显的特征：为中等大小的淋巴细胞，血涂片中细胞具有明显的特征：为中等大小的淋巴细胞，核核/质比中等。胞质亮蓝，边缘不清，具有细且不规则质比中等。胞质亮蓝，边缘不清，具有细且不规则的的“毛毛”状胞质突起。状胞质突起。科室讲座课件科室讲座课件诊断白血病主要标志：诊断白血病主要标志：nB-ALL: B-ALL: CD34, HLA-DR, CD19, CD10+/-, cCD79aCD34, HLA-DR, CD19, CD10+/-, cCD79anT-ALL: T-ALL: CD34, CD38, CD7, CD2+/-, CD5+/-, cCD
35、3CD34, CD38, CD7, CD2+/-, CD5+/-, cCD3nAML: AML: CD34, CD117, CD33, CD13, cMPOCD34, CD117, CD33, CD13, cMPO M2: CD19+: t(8, 21) M2: CD19+: t(8, 21) M3: CD34-, HLA-DR- M3: CD34-, HLA-DR- M4/M5: CD14+ M4/M5: CD14+ M6: GlyA+, CD71+ M6: GlyA+, CD71+ M7: IIb/IIIa(CD41, CD61)+ M7: IIb/IIIa(CD41, CD61)+科室讲
36、座课件免疫分型对下列情况具有重要意义免疫分型对下列情况具有重要意义 n用形态学、细胞化学染色不能肯定细胞来源的白血病。用形态学、细胞化学染色不能肯定细胞来源的白血病。n形形态态学学为为急急性性淋淋巴巴细细胞胞白白血血病病（ALLALL）或或急急性性未未分分化化白血病（白血病（AULAUL）但缺乏特异性淋巴细胞系列抗原标记。）但缺乏特异性淋巴细胞系列抗原标记。n混合性白血病。混合性白血病。n部部分分髓髓系系白白血血病病。目目前前，免免疫疫分分型型对对粒粒- -单单核核细细胞胞和和单核细胞白血病的鉴别尚有一定困难。单核细胞白血病的鉴别尚有一定困难。n慢性淋巴细胞白血病。慢性淋巴细胞白血病。n微小残
37、留白血病。微小残留白血病。科室讲座课件l原始细胞原始细胞90%90%，胞浆大多透亮或中，胞浆大多透亮或中度嗜碱，无嗜天青颗粒及度嗜碱，无嗜天青颗粒及AuerAuer小体，核小体，核仁明显，类似仁明显，类似All-L2All-L2型；型；l细胞化学过氧化物酶及苏丹黑细胞化学过氧化物酶及苏丹黑B B染色染色3%3%；lCD33CD33或或/ /及及CD13CD13阳性。淋系抗原阴性，阳性。淋系抗原阴性，但可有但可有CD7+CD7+、TdT+TdT+；l电镜过氧化物酶阳性。电镜过氧化物酶阳性。科室讲座课件原粒细胞（原粒细胞（+ 型）型） 90%(NEC), 早早幼粒细胞很少，中幼粒细胞以下阶段不幼粒
38、细胞很少，中幼粒细胞以下阶段不见或罕见。见或罕见。科室讲座课件M2nM2a M2a 骨髓中原粒细胞为骨髓中原粒细胞为30%-90%(NEC),30%-90%(NEC),单核细胞单核细胞20%10%10%nM2bM2b骨髓中原粒、早幼粒细胞增多，以异骨髓中原粒、早幼粒细胞增多，以异常的中性中幼粒细胞增生为主，其胞核常的中性中幼粒细胞增生为主，其胞核常有核仁，有明显的核浆发育不平衡，常有核仁，有明显的核浆发育不平衡，此类细胞此类细胞30%.30%.科室讲座课件M3以颗粒增多的异常早幼粒细胞增生为主，以颗粒增多的异常早幼粒细胞增生为主，30%(NEC),30%(NEC),其胞核大小不一，胞浆中有其胞
39、核大小不一，胞浆中有大小不等的颗粒：大小不等的颗粒：nM3a M3a 粗颗粒型粗颗粒型nM3b M3b 细颗粒型细颗粒型科室讲座课件M4科室讲座课件M5nM5a M5a 未分化型：骨髓中原单核细胞未分化型：骨髓中原单核细胞+（NEC) 80%NEC) 80%nM5b M5b 部分分化型：骨髓中原始部分分化型：骨髓中原始+ +幼稚单核幼稚单核细胞（细胞（NEC)30%NEC)30%，原单核细胞，原单核细胞+80%+50%50%，且有形态学异常，且有形态学异常，骨髓原粒细胞（骨髓原粒细胞（NECNEC）或原始）或原始+ +幼稚单核幼稚单核细胞（细胞（NECNEC）+型型30%30%；若血片中原；若
40、血片中原粒细胞或原单核细胞粒细胞或原单核细胞5%,5%,骨髓原粒细胞骨髓原粒细胞或原始或原始+ +幼稚单核细胞幼稚单核细胞20%(NEC)20%(NEC)科室讲座课件M7外周血中有巨核细胞；骨髓中原巨核细外周血中有巨核细胞；骨髓中原巨核细胞胞30%30%，该原巨核细胞应有电镜或单克，该原巨核细胞应有电镜或单克隆抗体证实；骨髓细胞少，往往干抽，隆抗体证实；骨髓细胞少，往往干抽，活检有原始和巨核细胞增多，网状纤维活检有原始和巨核细胞增多，网状纤维增加。增加。科室讲座课件关于双系与双表的定义关于双系与双表的定义n双表型：白血病细胞均一，每个细胞能同时表达淋巴系细胞及髓系细胞标记。n双系型：白血病细胞不均一，部分细胞表达淋巴系细胞标志，另一部分细胞表达髓系细胞标志。n在同一患者可见到淋巴细胞系及髓系细胞形态的白血病细胞。科室讲座课件科室讲座课件科室讲座课件
