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1、疟原虫镜验技术疟原虫镜验技术四川省疾病预防控制中心寄防所康杨 2个阶段：人体内发育阶段无性分裂 蚊体内阶段有性生殖 2个宿主: 中间宿主-人 终末宿主按蚊 2个时期: 红细胞外期肝细胞内期 红细胞内期。 裂体增殖周期: 间日疟、卵形疟48小时； 三日疟72小时；恶性疟36-48小时。 疟原虫的生活史按蚊按蚊库蚊库蚊伊蚊伊蚊三种蚊子停留姿态三种蚊子停留姿态蚊体蚊体 人体人体肝细胞肝细胞 红细胞红细胞 唾腺唾腺 红外期红外期囊合子囊合子 子孢子子孢子 裂殖体裂殖体 裂殖子裂殖子 环状体环状体 休眠子休眠子 裂殖子裂殖子 大滋养体大滋养体速发型速发型迟发型迟发型动合子动合子 裂殖体裂殖体雌配子雌配子
2、 雌配子体雌配子体合子合子雄配子雄配子 雄配子体雄配子体红外期裂体增殖外期裂体增殖 红内期内期裂体增殖裂体增殖配子生殖配子生殖孢子增殖子增殖配子体构成配子体构成生活史生活史 根本根本发育育过程以程以P.v为例例(life cycle)分子生物学、血清学技分子生物学、血清学技术开展迅猛开展迅猛,但是但是确确诊疟疾的疾的“金金规范范 依然是血液依然是血液显微微镜检查显微微镜检查是独一可是独一可鉴别4种种疟原虫的方原虫的方法法厚薄血涂片的厚薄血涂片的检查仍被以仍被以为是不可替代的是不可替代的疟疾疾诊断的金断的金规范范实验室技术实验室技术厚薄血膜的制造厚薄血膜的制造 血片制造血片制造在制造血片前，首先
3、要核对患者的姓名、在制造血片前，首先要核对患者的姓名、年龄和住址年龄和住址取血部位和血量取血部位和血量采血部位和取血方法：耳垂采血部位和取血方法：耳垂或无名指婴儿足跟或脚或无名指婴儿足跟或脚趾，通常在耳垂取血，趾，通常在耳垂取血，先用先用75%75%酒精棉球消毒取血酒精棉球消毒取血部位，待酒精干后，用左部位，待酒精干后，用左手拇指和食指紧捏耳垂上手拇指和食指紧捏耳垂上方或无名指指尖，右手持方或无名指指尖，右手持消毒针迅速刺入皮肤，不消毒针迅速刺入皮肤，不宜过深或过浅。然后用右宜过深或过浅。然后用右手中指悄然挤压出血。厚手中指悄然挤压出血。厚血膜血量约一粒米大小。血膜血量约一粒米大小。厚血膜厚血
4、膜 用推片的一角，从取血部位刮取约用推片的一角，从取血部位刮取约4微升微升血量相当于火柴头大小，使血滴与平置的血量相当于火柴头大小，使血滴与平置的载玻片接触，再由里向外一个方向旋转，转载玻片接触，再由里向外一个方向旋转，转24圈，涂成直径圈，涂成直径0.81厘米大小圆形厚血膜。厘米大小圆形厚血膜。薄血膜再取一小滴血薄血膜再取一小滴血.将血置于第一张玻片离厚血将血置于第一张玻片离厚血膜适当远的地方膜适当远的地方.将采血玻片将采血玻片(推片推片)的边缘紧贴的边缘紧贴载玻片使载玻片使 血液沿边缘散开血液沿边缘散开(如图示如图示).正确的推片姿态正确的推片姿态规范的疟疾厚薄血膜片位置规范的疟疾厚薄血膜
5、片位置各种不同的疟疾血片涂制法：各种不同的疟疾血片涂制法：规范血片规范血片门诊发热病人血片门诊发热病人血片居民普查血片居民普查血片厚薄血膜的规范厚薄血膜的规范 厚血膜血量适宜，不宜厚血膜血量适宜，不宜过多或多或过少少 薄血膜平整薄血膜平整,无无皱折和空泡折和空泡.红细胞胞单层陈列列血膜的制造血膜的制造血膜编号血膜编号 血膜制成后，立刻用特种血膜制成后，立刻用特种蜡笔或水笔于玻片面上写上受检者的蜡笔或水笔于玻片面上写上受检者的号码，以防过失，待薄血膜干后再用号码，以防过失，待薄血膜干后再用铅笔于薄血膜中写上血片种类的代号铅笔于薄血膜中写上血片种类的代号和受检者的个人编号，依次顺序插入和受检者的个
6、人编号，依次顺序插入标本盒内。标本盒内。 制造血膜的本卷须知制造血膜的本卷须知 1. 玻片清洗时，防止玻片碰撞、磨损。制造血膜的载玻片必需完全清洁而毫无油渍或污垢。制片时，手指只能持载片的边缘，不能接触玻片外表，以免油污使薄血膜产生空白区以及厚血膜零落。作为推片的玻片边缘一定要平滑，才干使推出的血膜均匀一致。制造血膜的本卷须知制造血膜的本卷须知 2. 刚刚涂涂制制的的血血膜膜要要平平放放在在标标本本盒盒内内，厚厚血血膜膜未未干干前前勿勿使使标标本本盒盒倾倾斜斜，以以免免血血膜膜倾倾向向一一侧侧，呵呵斥斥血血膜膜厚厚薄薄不不均均，厚厚处处不不一一溶溶血血和和着着色色而而影影响响检检查查结结果果；
7、晾晾干干血血膜膜时时应应留留意意防防尘尘、防防止止苍苍蝇蝇、蟑蟑螂螂等等昆昆虫虫吮吮吸吸血血膜膜，干干后后应应及及时时装装入入标标本本盒盒并并盖盖严严，新新的的木木制制标标本本盒盒需需敞敞开开放放置置一一段段时时间间，让让木木醇醇挥挥发发后后才才干干运运用用，以以免免厚厚血血膜膜红红蛋蛋白白被被其其固固定定，不不能能溶溶血血或或染染色效果不佳。色效果不佳。制造血膜的本卷须知制造血膜的本卷须知 3. 血膜让其自然枯燥，切忌用太阳晒或血膜让其自然枯燥，切忌用太阳晒或火烤，干透后才干用甲醇固定薄血膜。火烤，干透后才干用甲醇固定薄血膜。夏天标本尽能够夏天标本尽能够2448小时内固定染色；小时内固定染色
8、；冬天也不能超越冬天也不能超越72小时。放置时间越久，小时。放置时间越久，厚血膜越不易脱血，染色效果也差。假厚血膜越不易脱血，染色效果也差。假设不能及时染色，薄血膜宜先用甲醇固设不能及时染色，薄血膜宜先用甲醇固定定13分钟然后用过滤清水对厚血膜分钟然后用过滤清水对厚血膜溶血，晾干固定后装入盒内盖严，待以溶血，晾干固定后装入盒内盖严，待以后染色。后染色。染色过程染色过程将血片平置于染色板上。将血片平置于染色板上。用吸管汲取已稀释的吉氏液约用吸管汲取已稀释的吉氏液约2ml于厚薄血于厚薄血膜上，染色膜上，染色2040 min。用清水细缓冲去染液。用清水细缓冲去染液。置玻片于插板上，自然晾干。置玻片于
9、插板上，自然晾干。血片枯燥后血片枯燥后, 用甲醇固定薄血膜。用甲醇固定薄血膜。血片染色血片染色 两种染色方法两种染色方法:吉氏染色法吉氏染色法瑞氏染色法瑞氏染色法 常用吉氏染色法常用吉氏染色法一染液的种类一染液的种类染液种类：染液种类： 对对镜镜检检疟疟原原虫虫染染色色虽虽然然种种类类称称号号很很多多，但但都都是是从从罗罗门诺夫斯基氏发明的多色性染液变化过来的。门诺夫斯基氏发明的多色性染液变化过来的。 多多色色性性染染液液可可分分为为水水溶溶液液和和醇醇溶溶液液两两类类。水水溶溶液液类类有有罗罗氏氏RomanowskyRomanowsky染染液液、费费氏氏(Field)(Field)染染液液等
10、等；醇醇溶溶液液有有吉吉氏氏GiemsaGiemsa染染液液、瑞瑞氏氏WrightWright染染液等。液等。 一染液的种类一染液的种类水溶液水溶液类: : 罗氏氏RomanowskysRomanowskys染染剂早早在在18911891年年由由罗门诺夫夫斯斯基基发明明。还有有费氏氏FieldsFields 和和 J.S.BJ.S.B Jaswanant Jaswanant Singh Singh & & BhattacharjiBhattacharji染染剂。均均为分分成成甲甲、乙乙两两种种染液的复式染染液的复式染剂。一染液的种类一染液的种类醇溶液类醇溶液类: : 有有吉吉氏氏GiemsaG
11、iemsa染染液液、瑞瑞氏氏WrightWright染染液液等等。是是在在水水溶溶液液染染液液的的根根底底上上改改良良开开展展而而成成。目目前前我我们们引引荐荐的的是是运运用用醇醇溶溶液液类类中中的的吉氏吉氏GiemsaGiemsa染液染液三吉氏染液母液配置方法三吉氏染液母液配置方法 取吉氏粉取吉氏粉0.5克置于研克置于研钵中，中，加少量甘油充分研磨，再加再磨，加少量甘油充分研磨，再加再磨，至至25毫升加完毫升加完为止，倒入止，倒入60或或100毫升毫升带有玻塞的有色玻瓶中。有玻塞的有色玻瓶中。在研在研钵中加少量甲醇，洗去甘油中加少量甲醇，洗去甘油浓液混入瓶内，至液混入瓶内，至25毫升甲醇洗毫
12、升甲醇洗净钵中甘油染液中甘油染液为止，塞止，塞紧瓶塞，瓶塞，充分充分摇匀，置于匀，置于5560水浴中水浴中或温箱内或温箱内24小小时或室温内或室温内35天，天，多加多加摇动，即成原液。吉氏染液，即成原液。吉氏染液是目前是目前较优良的血膜染良的血膜染剂，即使，即使在炎在炎热天气中，亦可天气中，亦可经久不久不变。 资料：资料： 1、吉氏粉、吉氏粉0.5克克 2、甘油、甘油25毫升毫升 3、甲醇、甲醇25毫升毫升稀释吉氏原液稀释吉氏原液原液需原液需经pH7.2磷酸磷酸盐缓冲液冲液PBS或或净水稀水稀释后，方可用于厚薄血片染色。后，方可用于厚薄血片染色。 汲取母液汲取母液时，不要晃，不要晃动瓶子瓶子,
13、以免沉淀物以免沉淀物泛起影响染色效果泛起影响染色效果.三吉氏染液血片染色方法三吉氏染液血片染色方法 先用甲醇或无水酒精固定薄血膜，待干后进展染先用甲醇或无水酒精固定薄血膜，待干后进展染色。亦可在固定薄血膜后用清水对厚血膜溶脱血红蛋色。亦可在固定薄血膜后用清水对厚血膜溶脱血红蛋白，然后才进展染色。白，然后才进展染色。 成批血片染色：将已固定薄血膜的血片插入染色成批血片染色：将已固定薄血膜的血片插入染色缸，倒入缸，倒入2%吉氏染液稀释液吉氏染液稀释液2毫升原液加中性蒸馏毫升原液加中性蒸馏水水98毫升稀释均匀即成，同时对厚薄血膜染色毫升稀释均匀即成，同时对厚薄血膜染色30分钟如染液不合规范时，得酌情
14、增减染色时间，分钟如染液不合规范时，得酌情增减染色时间，然后用清水悄然将染液冲去，再用清水悄然冲洗一次，然后用清水悄然将染液冲去，再用清水悄然冲洗一次，干净后将血片标本血膜面朝下插于晾干板上，待干净后将血片标本血膜面朝下插于晾干板上，待干镜检。干镜检。 血片的染色血片的染色三吉氏染液血片染色方法三吉氏染液血片染色方法 先用甲醇或无水酒精固定薄血膜，待干后先用甲醇或无水酒精固定薄血膜，待干后进展染色。亦可在固定薄血膜后用清水对厚血进展染色。亦可在固定薄血膜后用清水对厚血膜溶脱血红蛋白，然后才进展染色。膜溶脱血红蛋白，然后才进展染色。 单张血片染色：薄血膜经固定枯燥后，用单张血片染色：薄血膜经固定
15、枯燥后，用2%吉氏染液稀释液吉氏染液稀释液12毫升，滴入血片标本上毫升，滴入血片标本上染色染色30分钟左右，或用中性蒸馏水分钟左右，或用中性蒸馏水1毫升，加毫升，加吉氏母液吉氏母液12滴，混合均匀后滴入血片标本上，滴，混合均匀后滴入血片标本上，染色染色1020分钟，然后用清水悄然将片上的染分钟，然后用清水悄然将片上的染液冲洗干净，晾干镜检。液冲洗干净，晾干镜检。 操作操作1 快染快染 配制配制5%染液，每张血片约需染液染液，每张血片约需染液2ml：量筒内量：量筒内量2ml缓冲液或净水，直接滴加吉缓冲液或净水，直接滴加吉氏原液氏原液7滴，混匀，滴入待染标本的厚薄血膜上，滴，混匀，滴入待染标本的厚
16、薄血膜上，染色染色10min，清水细缓冲洗，晾干镜检。，清水细缓冲洗，晾干镜检。操作操作2 (慢染慢染) 在染色量筒内量在染色量筒内量2ml蒸馏水或净水，蒸馏水或净水， 再滴加吉氏原液再滴加吉氏原液4滴，混匀，滴入待染标本上，滴，混匀，滴入待染标本上，染色染色3040min。清水细缓冲洗，晾干镜检。清水细缓冲洗，晾干镜检。吉氏染液浓度吉氏染液浓度门诊染色门诊染色质量好的染色质量好的染色 : 核呈红色核呈红色,胞浆呈蓝色胞浆呈蓝色 假设血片偏红假设血片偏红,阐明染液偏酸性阐明染液偏酸性假设血片偏蓝假设血片偏蓝,阐明染液偏硷性阐明染液偏硷性外观吉氏染色血片外观吉氏染色血片瑞氏染液的配制： 将瑞氏染
17、剂粉1g置于研钵内，参与15ml甘油充分研磨后，倒入有塞玻璃瓶中，再用500ml甲醇洗出研钵中的甘油溶液，倒入瓶中，摇匀后，置室温下，每天摇动5分钟，3天后即可运用。 此方法染色的时间短，但染色效果不如吉氏染液效果稳定，又不能大量血片染色，可用于门诊应急血片只用。 瑞氏染液的染色方法： 先用蜡笔在厚、薄血膜间划一界限，滴几滴蒸馏水在厚血膜上溶血。溶血后倾去水滴。在薄血膜上加瑞氏染液58滴，染色12分钟。然后再加58滴蒸馏水于薄血膜上，用吸管将染液与蒸馏水混合均匀后，把染液引到厚血膜上，使厚血膜再染色10分钟。用清水悄然冲去染液，晾干。血片制造与染色本卷须知血片制造与染色本卷须知 运用前运用前载
18、玻片一定要清玻片一定要清洁，不然会影响，不然会影响 血片血片制造和制造和镜检结果果 厚血膜枯燥厚血膜枯燥时不要加不要加热，加，加热会使原虫会使原虫变形，形，影响影响镜检结果果 配置母液配置母液时过滤可除去可除去杂质颗粒，有助于提粒，有助于提高高镜检质量量 固定薄血膜固定薄血膜时不要将甲醇触碰到厚血膜不要将甲醇触碰到厚血膜 冲洗染液冲洗染液时，不要冲走厚血膜。，不要冲走厚血膜。影响染色效果的要素影响染色效果的要素血血片片染染色色好好坏坏除除了了与与玻玻片片能能否否清清洁洁，血血片片制制造造质质量量好好坏坏等等有有关关外外，还还遭遭到到以以下下几几个个要素的影响：要素的影响：1染染料料溶溶剂剂的的
19、质质量量 染染料料、甲甲醇醇和和甘甘油油假假设设不不纯纯，常常使使配配制制的的染染液液偏偏酸酸或或偏偏碱碱而而影影响响染染色色效效果果。因因此此必必需需用用分分析析纯纯的的甲甲醇醇和和中中性性甘甘油油，而而且且在在配配制制时时所所用用的的器器具具必必需干净而无水份。需干净而无水份。影响染色效果的要素影响染色效果的要素2染染液液的的新新旧旧 新新配配制制的的染染液液因因色色素素尚尚未未充充分分溶溶解解，染染色色力力较较弱弱且且常常呈呈现现偏偏碱碱性性。染染液液存存放放时时间间越越久久，染染色色力力越越强强。通通常常在在染染液液配配制制12周周后后才才运运用用，盛盛装装染染液液的的瓶瓶子应加塞盖密
20、。以防吸潮而影响染液质量。子应加塞盖密。以防吸潮而影响染液质量。影响染色效果的要素影响染色效果的要素3染染液液稀稀释释后后运运用用时时间间 吉吉氏氏和和瑞瑞氏氏染染液液的的主主要要成成份份是是美美蓝蓝、伊伊红红和和由由美美蓝蓝氧氧化化产产生生的的天天青青，三三者者能能在在酒酒精精溶溶液液中中溶溶解解，但但在在水水溶溶液液中中伊伊红红遇遇到到美美蓝蓝和和天天青青即即产产生生沉沉淀淀。因因此此，必必需需在在稀稀释释染染液液当当时时运运用用，普通在半小时内染色力最强。普通在半小时内染色力最强。影响染色效果的要素影响染色效果的要素4染液的稀释浓度染液的稀释浓度 染液的浓度高其染液的浓度高其着色就快而深
21、，从而疟原虫寄生红细胞着色就快而深，从而疟原虫寄生红细胞的薛氏点粗大显著，但颜色常偏碱；染的薛氏点粗大显著，但颜色常偏碱；染液浓度过低那么染色时间久，颜色偏酸，液浓度过低那么染色时间久，颜色偏酸，薛氏点不明显或消逝。薛氏点不明显或消逝。影响染色效果的要素影响染色效果的要素5染色时间染色时间 染色时间长染色效果染色时间长染色效果好，反之较差。室温高那么着色快，染好，反之较差。室温高那么着色快，染色时间可略缩短，气温低可适当延伸。色时间可略缩短，气温低可适当延伸。因此染色时间应根据染液的质量、新旧、因此染色时间应根据染液的质量、新旧、稀释浓度和气温而适当增减。稀释浓度和气温而适当增减。影响染色效果
22、的要素影响染色效果的要素6染色用水染色用水 染液的稀释用水和染色后冲洗染液的稀释用水和染色后冲洗用水应选择用水应选择Ph7.07.2清洁水，通常运用的新颖清洁水，通常运用的新颖的蒸馏水或过滤的冷开水，以及自来水、井水、的蒸馏水或过滤的冷开水，以及自来水、井水、河水、泉水和雨水等。假设偏酸或偏碱，可用缓河水、泉水和雨水等。假设偏酸或偏碱，可用缓冲蒸馏水调整。染色后发现血膜颜色偏蓝偏碱冲蒸馏水调整。染色后发现血膜颜色偏蓝偏碱或偏红偏酸时，可用与之相反的酸、碱度或偏红偏酸时，可用与之相反的酸、碱度水冲洗血片予以纠正。水冲洗血片予以纠正。影响染色效果的要素影响染色效果的要素7染染色色后后不不要要直直接
23、接将将染染液液倒倒掉掉，应应沿沿玻玻片片或或染染色色缸缸边边缘缘加加水水使使染染液液外外表表一一层层溢溢出出，并悄然冲洗，以免染液色素颗粒沾污血膜。并悄然冲洗，以免染液色素颗粒沾污血膜。如何确定疟原虫血片为阴性如何确定疟原虫血片为阴性 检查全部厚血膜未全部厚血膜未查见疟原虫原虫 最少最少检查100个厚血膜油个厚血膜油镜视野未野未查见 疟原虫原虫显微镜的普通构造显微镜的普通构造1.镜座 9. 粗调理器 17.滤光镜圈 2.镜柱 10.细调理器 18.反光镜3.镜臂 11.齿板4.倾斜度关节 12.镜台5.镜筒 13.推进器6.接目镜 14.弹簧夹7.旋转盘 15.聚光器8.接物镜 16.虹彩血片
24、的镜检血片的镜检1.在学习镜检疟原虫之前，必需先对正常厚薄血膜中各在学习镜检疟原虫之前，必需先对正常厚薄血膜中各种血细胞的形状、内部构造和染色性质加以识别。种血细胞的形状、内部构造和染色性质加以识别。2.学习镜检疟原虫，首先要学看薄血膜，在根本上掌握学习镜检疟原虫，首先要学看薄血膜，在根本上掌握薄血膜中疟原虫形状后，才学习镜检厚血膜。薄血膜中疟原虫形状后，才学习镜检厚血膜。3.镜检疟原虫普通只查厚血膜，薄血膜仅作为原虫分类镜检疟原虫普通只查厚血膜，薄血膜仅作为原虫分类时参考和血片编号之用。时参考和血片编号之用。4.镜检疟原虫必需用油镜头配合镜检疟原虫必需用油镜头配合5X低倍目镜镜检，当发低倍目
25、镜镜检，当发现疑问问题时可互换现疑问问题时可互换10X目镜进展察看。目镜进展察看。5.检查时应从厚血膜的上缘开场，使血膜从上而下，自检查时应从厚血膜的上缘开场，使血膜从上而下，自左至右，由右至左，一行接一行，一个视野稍叠一个左至右，由右至左，一行接一行，一个视野稍叠一个视野顺序地查完好个血膜。视野顺序地查完好个血膜。 人类四种疟原虫的人类四种疟原虫的 基基 本特征本特征感染人的疟原虫有四种感染人的疟原虫有四种: 恶性疟原虫恶性疟原虫 P. falciparum 间日疟原虫间日疟原虫 P. vivax三日疟原虫三日疟原虫 P. malariae 卵形疟原虫卵形疟原虫 P. ovale 恶性疟恶性
26、疟 P.falciparum 四种四种疟原虫中致病力最原虫中致病力最强 无免疫力者感染后出无免疫力者感染后出现急性病症急性病症,不及不及时治治 疗可危及生命可危及生命 在我国主要流行云南省和海南省在我国主要流行云南省和海南省 间日疟间日疟 P.vivax P.vivax 间日日疟原虫分布于我国大部分地域，原虫分布于我国大部分地域， 主要是中部地域主要是中部地域 引起引起间日日疟, 病程呈良性病程呈良性, 但有复但有复发 三日疟三日疟 P.malariae 三日三日疟在我国已根本消在我国已根本消灭主要主要发生在晚秋及初冬生在晚秋及初冬, 无复无复发 卵形卵形疟 P.ovale又称蛋形又称蛋形疟原
27、虫原虫, 在我国已根本消在我国已根本消灭引起病症与引起病症与间日日疟类似似, 但很少复但很少复发 四种疟原虫的四种疟原虫的 诊断要点诊断要点 1.环状体纤细环状体纤细, 红细红细胞不涨大胞不涨大2.一个红细胞内可有一个红细胞内可有几个环状体几个环状体 3.环状体内可有环状体内可有2个个核核 4.环状体可贴在红细环状体可贴在红细胞边缘胞边缘 5.血片中没有其他发血片中没有其他发育期原虫育期原虫 6.配子体呈新月形或配子体呈新月形或腊肠形腊肠形 7.可出现茂氏点可出现茂氏点恶性疟恶性疟P.falciparum鉴定鉴定 要点要点红细胞通常涨红细胞通常涨大大 薛氏点明显薛氏点明显 成熟环状体粗成熟环状
28、体粗大大滋养体有阿米滋养体有阿米巴样伪足巴样伪足可见不同发育可见不同发育期的原虫期的原虫 间日疟间日疟P. vivax 鉴定要点鉴定要点1.环状体可环状体可呈方形呈方形2.带状形是带状形是特点特点 3.成熟裂殖成熟裂殖体呈菊花体呈菊花状状,内含内含612个裂个裂殖子殖子 4.红细胞不红细胞不涨大，略涨大，略减少减少5.有时有西有时有西门氏点门氏点6. 三日疟三日疟P.malariae诊断要点诊断要点卵形疟卵形疟P. ovale诊断要点诊断要点1.红细胞略涨红细胞略涨大或不变大大或不变大 2.红细胞边缘红细胞边缘呈车轮状呈车轮状3.环状体有时环状体有时呈现鱼眼状呈现鱼眼状4.薛氏点明显薛氏点明显
29、 5.成熟裂殖体成熟裂殖体类似三日疟类似三日疟原虫原虫,但更粗但更粗大大6.原虫呈卵圆原虫呈卵圆形形7. 薄血膜中疟原虫寄生时薄血膜中疟原虫寄生时 红细胞的变化红细胞的变化间日疟原虫间日疟原虫 三日疟原三日疟原虫虫恶性疟原虫恶性疟原虫卵形疟原卵形疟原虫虫涨大涨大,色浅淡色浅淡,略变略变形形 可见薛氏点可见薛氏点(除早除早期环状体时期环状体时) 多重感染少见多重感染少见 疟色素黄褐色疟色素黄褐色,散散在在,呈小杆状呈小杆状正常正常,或略小或略小 正常染色时点彩正常染色时点彩不明显不明显多重感染少见多重感染少见 色素见于早期色素见于早期 ,黑色颗粒状黑色颗粒状,多见多见于细胞周围于细胞周围正常大小
30、正常大小 常见多重感染常见多重感染 一些细胞呈黄色边一些细胞呈黄色边缘较厚缘较厚 过度染色时茂氏点过度染色时茂氏点明显明显 疟色素颗粒较疟色素颗粒较粗粗 新月形配子体外红新月形配子体外红细胞膜见不到细胞膜见不到感染红细胞略感染红细胞略涨大或不变大涨大或不变大 通常呈卵圆形通常呈卵圆形 感染红细胞边感染红细胞边缘破碎状缘破碎状 薛氏点明显疟薛氏点明显疟色素棕黄色色素棕黄色,类类似间日疟原虫似间日疟原虫种种周周 围围 血血中中 发发 育育阶段阶段红细胞形状红细胞形状疟原虫形状疟原虫形状大小大小点彩点彩胞浆胞浆疟色素疟色素裂殖子数裂殖子数恶恶性性疟疟原原虫虫环状体环状体配子体配子体正常正常常常 见见
31、茂茂 氏氏点点环环状状体体钎钎细细，常见个核常见个核粗粗黑黑，配配子子体中明显体中明显16-32间间日日疟疟原原虫虫各各 期期 滋滋养体养体裂裂 殖殖 体体和和配子体配子体涨涨大大,可可达达正正常常的的 1.5-2 倍倍薛薛 氏氏点点 可可出现出现阿阿米米巴巴样样滋滋养养体体，浅浅蓝蓝色色，活泼活泼金棕色金棕色不明显不明显12-24卵卵形形疟疟原原虫虫各期滋各期滋养体养体裂殖体裂殖体涨涨大大,可可达达正正常常的的 1.25-1.5倍倍薛薛 氏氏点点 可可出现出现卵卵圆圆形形滋滋养养体体，蓝蓝色色较较深深，核核较大较大深棕色深棕色明显明显4-12三三日日疟疟原原虫虫各期滋各期滋养体养体裂殖体裂殖
32、体和和配子体配子体正常正常西西 门门氏氏 点点少见少见圆圆形形，蓝蓝色色深深，核核紧紧缩缩，滋滋养养体带状体带状深棕色，粗深棕色，粗明显明显6-12呈呈 菊菊 花花状状镜检示教镜检示教以下血片采自现症病例以下血片采自现症病例This is a thin film from a 27 year old female backpacker, with a recent history of trekking through Northern Thailand and high fever. A typical Plasmodium falciparum presentation.Numerous
33、fine ring forms Double chromatin dots Marginal forms Red cells are not enlargedA thin film from a 22 year old male holidaying in Lombok (Indonesia) one month previously. Intermittent fevers since returning. A typical Plasmodium vivax presentationSalient features are: Developing and thick (signet) ri
34、ng forms Enlarged red cells Recent travel in Africa. Pyrexia of unknown origin. A typical Plasmodium ovale presentationDeveloping form of plasmodium Comet-like red cells Enlarged red cell Female patient, arrived from Brazil two weeks previously. Flu like symptoms since arrival. A typical Plasmodium
35、malariae presentationBroad band form of plasmodium Red cells not enlargedThis is a thick film prepared from a 32 year old male recently returned from Vietnam. Numerous ring form of Plasmodium can be seen (as indicated by the arrows). Note size of neutrophils (for comparison).The only definitive diag
36、nosis that can be made from this film is that Malaria is present. Thin films would have to be examined for species identification.读片练习读片练习2. Intermittent fever; arrived from India 2 months ago. POPMPV6. New Australian previously from Malaysia. Intermittent temperatures and headaches. PV. PV14. 50 year old male patient presented with fever after holidaying in Viet Nam. POT. 21. A member of the UN forces in East Timor. Presented with high temperature. 谢谢 谢！谢！
