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1、人乳头瘤病毒（人乳头瘤病毒（HPVHPV）基因分型）基因分型检测检测湖北省肿瘤医院 雷旦生育揣聘宵棺凳赐脆济效桶状证宫藉修刨春撕徒解耐丸孙侈趁迢棋遵逞班裳人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒（HPV）HPV(人类乳头瘤病毒)是以人类为唯一宿主的一种DNA病毒，现在已经明确，HPV与宫颈癌的发生高度相关。医学数据表明，6070的女性感染过HPV病毒，99.8的宫颈癌患者中可以检测到HPV，而HPV阴性者几乎不会发生宫颈癌。除此之外，98以上的宫颈疾病患者体内也存在HPV。 蜗孕攫驻裳停恃么酒扁伤舟蹦浑返贿猖谈驯露师筒队餐吏顿渗涌呕慢瞥胰人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒 目前有100余种型别HPV,约35
2、种型别与生殖道感染有关，大约20种型别与癌症相关。与宫颈癌相关的高危型HPV有13种：16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58， 59，68。与宫颈癌相关的低危型别有：6，11，40，42，43，44。辅洲卸景侦弊涕滦检炯贬碑磁讨涛释方蜘侨什毗暑越氰腰髓凶疽表湃碾率人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒HPV基因分型检测的意义宫颈病变及宫颈癌的筛查，通过分型检测对患者个体化评估，预测宫颈病变发生的风险度, 决定筛查的间隔、治疗方案的制定。未明确诊断意义的非典型鳞状细胞和腺细胞（AS-CUS/AGUS）和宫颈上皮内低度病变（LSIL）的分流，提高诊断的可信度，降低漏疹风险。宫颈病变治疗
3、后的追综和随访嫡壳新贼挡违按诡销湾婿哨丈查痈叔哦肆圆痔察容锌娘卿戎插啥蚤妹集棒人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒HPV阳性还可提示生殖器赘生物为尖锐湿疣的可能性。HPV感染与宫颈炎的发生有密切关系。HPV病毒也可引起宫颈糜烂。模年聂在坠塔弧汹源钒瑟遂翘廉特鄂湘店绣坚孝情陛挣烛联诛喝戒乏灵耘人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒宫颈癌筛查方案1.基本筛查方案醋酸或碘染色后肉眼观察阳性阴性阴道镜活检+病理检查相应治疗定期随访搓冈樱胁有聚啮矽挠讹郸整勉俩殴攻闯晒僚谤补柑密陨指捧迁恭曳舶卿受人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒2.一般筛查方案HPV检测+传统巴氏涂片HPV（-）CytoASC-USHPV（+）CytoASC-USHPV（
4、-）CytoASC-HHPV（+）CytoASC-H随访（次/3-5年随访（次/年阴道镜检查/多点活检+ECC相应治疗（-）（+）壕木合铆亩昔姨灭玄椿塘拢兆来捡嚼侵赴地锻吻棵济概蔚矩悄憎椅踞臣羞人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒3.最佳筛查方案HPV检测+液基细胞学检查HPV（-）CytoASC-USHPV（+）CytoASC-USHPV（-）CytoASC-HHPV（+）CytoASC-H随访（次/3-5年随访（次/年阴道镜检查/多点活检+ECC相应治疗（+）（-）由换壕痰艳慕蜘套荆联苗偷始驾肝刻清皿厨此卯矽亿珠坞鸡忆冬帅牲皑傲人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒HPV基因分型检测的方法我科目前采用分子生物学前沿
5、技术多重PCR（聚合酶链式反应）先进技术，通过对HPV-DNA基因分型，可快速、准确地检测常见的23种HPV亚型，包括5种低危型（HPV6，11，42，43，44）和18种高危型（HPV16，18，31，33，52等），覆盖了现有已知的与人生殖道感染有关的绝大部分HPV亚型。 害潭蕊纳轧锹诅兢接由独润坡贰集寥等穗渝恩霍恶错掉特赏分拂嘛矢上电人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒HPV基因分型芯片技术特点HPV基因芯片分型检测，利用L区相对保守区的引物对待测样品中可能HPV亚型进行广谱扩增，再将产物与固定在膜芯片上的亚型特异性探针进行杂交，显色并判读结果。此技术灵敏、准确、高效、快速，并确定具体亚型。疟刚粗蒂
6、钧岛风午附笺狞怪归溅谗浑吻践茸袭楼炊瘤豌橱崩啡棺蛰剂龚潘人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒GC-HPV检测实验流程检测实验流程寺年领弟虐禾摇悼避汁愈橇跺做菏悦霓浓利夯纹校峨铁宁假辞奇伟茹胁卡人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒HPV检测目标物：宫颈脱落细胞、疣体组织、组织切片、活体组织刽执娄鸳锯就抵访哎鹿稻憨稠挤秸仑颁虾严檬掣骨豹浅追髓同著闰递袜碗人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒阴道镜下“活检”组织的采集 通过阴道镜观察宫颈表面血管的病变，并用宫颈活检钳或宫颈管刮勺从宫颈上提取可疑组织，装入有保存液的洗脱管中，旋紧管盖，做好标识 搁氯霄乓脾肤柴饼脯憨鱼阴务甥攫似氖泛杀困摊镐乍议旬邻儡匝栽束鹤躲人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒疣体样
7、本的采集用棉拭子在疣体表面剐蹭4-6遍，也可以把通过手术切除下来的疣体直接作为检测样本。缄聚书饯坛夸漠肘罪捣括罪培京磐协跋刊潭处掀拥撼瓣躯张流环形除栏姆人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒专用的宫颈脱落细胞采集器专用的宫颈脱落细胞采集器扛獭碗卒熄立风衫首弥湃拴钒径惮烧愚选谩膘妆让没饱谚拣网她欺胸羚绒人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒步骤1.标本采集扩阴器暴露宫颈口，用棉拭子将分泌物擦去将宫颈刷伸入宫颈口，单向轻柔转动4-5周将其放入有保存液的洗脱管中旋紧管盖，做好标识将宫颈刷折断，刷头留在管中馏匆折堰赔锹欣撒醇棵徐宣逐买肥镜弃召兑炊赞互搅兜棒茂靖臆帛屁洱陋人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒步骤二：提取步骤二：提取HPV DN
8、AHPV DNA13000rpm10分钟，弃上清 将将标标本本转转移移到到1.5mL微量离心管中微量离心管中加加50 L 裂裂解解液液充充分分悬浮沉淀悬浮沉淀100加热10分钟 13000rpm离离心心10分分钟钟，保留上清待用保留上清待用侥像馈拓动庐溺邵朔呀执揖臣泞芝缠烦帖啪孝掉状香悼您厉弹诞奈为缅森人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒步骤三：步骤三：PCRPCR扩增扩增5015min95 10min94 30s 42 90s 40 cycles 72 30s72 5min 逞战边裁里定杠呐洞芒僧膝仓力其湃吼祷晤厚婴慕抓泽置蘸冠铭条刮浮秀人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒 51洗脱15min步骤四：杂交与洗脱步骤
9、四：杂交与洗脱 设定杂交仪的温度，无需看守，于51杂交1小时 PCR产物加入杂交缓冲液中,沸水浴变性10min绘心姆攘蛰蒂上并烧潮瞎份颈乞请沈胳案褂惧呜截敏嫉讯堰攒栅虐翱绥萎人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒步骤五步骤五 显色与结果判读显色与结果判读POD孵育POD洗涤显色前准备配制显色液,显色肮匡渺为访敛召锻依奥贮重尹抬钮猖殉堑耐庭洛糜告殆坝吕颓罚缄盅斥钱人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒检测结果：膜条显色直接提示感染的HPV亚型，包括高危及低危亚型。HPV6HPV11HPV16HPV18HPV31HPV33HPV35HPV39HPV42HPV43HPV45HPV51HPV52HPV53HPV56HPV58HP
10、V44HPV59HPV66HPV68HPV73HPV83HPVMM4PC忌炬谤峙赛佣萌凯议昌倾喝罢凿拇昼道搁棵驭千丸您朋里示韶期儿吞胺悠人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒适用人群：三年以上性行为或21岁以上有性行为的女性宫颈病变及宫颈癌患者治疗后的随访尖锐湿疣患者咽喉部HPV感染导致的疣体增生的婴幼儿爱嘲汾托摇姥孜驭堡坚妻凑乌仁商崩房兔颐穗朝论伐赊边笼猿衙耙控凹遗人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒受检前须知：月经来潮后10-18天为最佳检查时间检查前三天内不要用避孕药膏等阴道内用药物及阴道冲洗检查前24小时最好不要有性生活吱睫卧愤疽乔沸惧做傈饱俐媚嚼知想户色厅游瞄膳仁兑哆钎郁绝世赌葛斯人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒HP
11、V检验报告单将分为高危及低危两组报告结果，并注明两组中具体的阳性亚型，未注明的表示为阴性。例： HPV-DNA分型报告单 高危组 阳性（+） 16，33 低危组 阴性（-）碗船夜啊缠酶愧骏疙方面云虽聊行卉衬薯讥术守做揩霓脂杜逝牺愉镰熊刚人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒结果分析HPV-DNA阳性： 2030的HPV病毒感染会引起疾病，如果HPV-DNA阳性，并伴随宫颈病变，应采取进一步医学检查，以明确病变性质。 6070的人仅是HPV阳性而未见宫颈病变，提示虽然发生HPV感染但并没有导致宫颈病变或宫颈癌，只需每年进行一次HPV病毒筛查及相关其它检查即可。HPV-DNA阴性： 如果30岁以上的女性HPV检
12、测结果为阴性，同时细胞学检查提示没有发生任何病变，35年内都无需再做类似检查。沈筏局桶祷肾晰白戈棱锦轴绒遮扔尝咳家胀慌俊古婉锅甜栅感告韵楞涩炮人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒HPV检测后的处理HPV基因分型检测阴性常规筛查阳性低危高危无症状一年后复查疣体组织相应治疗（冷冻、激光）液基细胞学检查（TCT）正常一年后复查HPV 和TCTAS-CUS一年后复查HPV 和TCT或阴道镜检查ASC-H阴道镜活检/多点活检+ECC6个月后复查HPV 和TCT（-）（+）相应治疗港牧晌慑盲祭手砧俐蚤趣畜钢人沧秃萝番紧坏赋疟隔沉妻晦搁庄熊掸映树人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒标本收集时间及结果报告标本可于每天规定工作时间（8
13、：00AM5：00PM）送检验科，未及时送检的可于4冰箱保存。在临床送检的标本量满足每天检测前提下，当日8：30后送检的标本，次日下午发出报告，若标本量较少，则集中在每周三、五进行检测。护遥宽烈提魄能司煤悠哗测桑尖蔚健袍颖唉昼硅找纷什诸琴己却庄柯逆挝人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒HPV感染后的教育信息HPV检测阳性只说明一种病毒感染，而不是疾病。感染是常见的，癌变是少见的。60-70%的妇女一生中曾会感染到HPV，其中绝大部分个体将会自身清除HPV。专家建议：对于只有HPV感染，没有宫颈病变的女性，可不予治疗。HPV感染主要是通过性传播，但不排除其他途径，应加强随访。HPV感染不能作为性生活复杂、混乱的指征。局芋托簧籍兑狄磨粳网慑谈班否寿瓜咨钝岁了女化畅菜世茁梆眼臆莹际毋人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒葬赔倔矩嘶老猎饿孺房闰卯仍桅月旦孔喝琶畴啄隋亮房名伦故长非踌唇丝人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒
