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1、血清钾(K+)测定余留海2013.11.182013.11.18主要内容总结上节课实验报告。知识回顾。血清钾的几种测定方法。酶法测定血清K。知识回顾血液组成成分。 血浆 血液 红细胞 血细胞 白细胞 血小板1、什么叫血清?2、血清与血浆的区别? K的主要贮存场所。血清钾的几种测定方法 近年来,随着科学技术的发展,检测手段不断提高,离子选择性电极在临床上的广泛应用,使离子的测定向着快速、简便、准确、特异性高的方向发展.临床上检测钾离子基本上分为比浊、火焰光度分析、离子选择性电极及酶法.全自动电解质分析仪 PL-1000B PL-1000B电解质分析仪电解质分析仪采用国际上先进的离子采用国际上先进
2、的离子选择电极,其整机的钾、选择电极,其整机的钾、钠、氯、钙电解质检测钠、氯、钙电解质检测灵敏度、稳定性、抗干灵敏度、稳定性、抗干扰能力等达到了国外同扰能力等达到了国外同类机型的先进水平。类机型的先进水平。可同时检测钾、钠、氯、PH、总钙、标准离子钙等项目。 血清钾(K+)测定(蛋白水解酶法)一、原理:一、原理: 血清中的钾离子在蛋白水解酶的作用下,从蛋白分子的吸附下解脱出来与四苯硼锂呈浊度反应,在625波长测定标准管和样品管的吸光度值,计算钾离子的含量。二、测定方法二、测定方法 1.加样:试剂 空白管 标准管 样品管蒸馏水(l) 100 标准液(l) 100 血清(l) 100试剂R1(ml
3、) 2.0 2.0 2.0 充分混匀试剂R2 (l) 200 200 200 混匀后置37保温3分钟,上机测定。 2.分光光度计测定方法:波长625nm,以空白管调零,测定标准管和样品管吸光度值,按公式计算测定结果。 计算公式:样品钾含量(mmol/Lmmol/L)= (A样/A标)C标 (C标5.0mmol/L) 3.各型半自动生化分析仪测定方法:分分析析方方法法 波长波长(n nmm) 温度温度() 延迟延迟时间时间(s s) 测量测量时间时间(s s) 试试剂剂空空白白 标准值标准值(mmol/mmol/L L) 吸入量吸入量(mlml) 终终点点法法620620或或6306303737
4、2 22 2否否5.05.010001000 三、参考值:三、参考值: 正常人参考值:(3.5 5.4)mmol/L 四、临床意义:四、临床意义: 1.血清钾增高:血清钾5.6 mmol/L为高血钾。 肾排钾减少:如急性或慢性肾功能衰竭所致少尿或尿闭,使体内钾不能排出体外;肾上腺皮质功能减退时,肾排钾能力降低;应用保钾性利尿剂药物影响肾脏排钾。 摄入过多:食入或静脉输入大量钾盐,超过审排钾能力,尤其是肾排泄功能降低时更易发生高血钾。 细胞内钾外逸:如严重溶血、组织损伤或缺氧、代谢性酸中毒及应用胰高血糖素、受体阻滞剂、精氨酸、琥珀胆碱、强心苷药物均可使细胞内钾转移到细胞外液而引起高血钾。 其它:
5、醛固酮缺乏或长期应用抗醛固酮利尿剂及家族性周期性麻痹等,均可使血钾升高。 血清钾高于7mmol/L时,可引起严重的肌肉、心肌和呼吸功能的抑制性应激紊乱,以及特异的心电图改变。超过10mmol/L时,即可发生心室纤颤,心脏停搏而导致死亡。 2.血清钾降低:血清钾3.5mmol/L为低钾血症。 钾盐摄入不足:长期低钾饮食、厌食或禁食等。 钾丢失过多:胃肠道丢失,如严重呕吐、腹泻、胃肠减压、十二指肠引流;尿液丢失,如大量应用肾上腺皮质激素、利尿剂、醛固酮增多症、碱中毒等,恶性肿瘤因细胞分解过多,大量钾从尿中排出。 分布异常:注射胰岛素或应用维生素B2可使血清钾向细胞内转移。五、方法学评价五、方法学评
6、价 1. 1. 空白吸光度空白吸光度 A A6256250.0800.080 2. 2. 线性范围线性范围 2.52.57.5mmol/L 7.5mmol/L (r r0.9950.995) 3. 3. 重复性重复性 测量精密度(测量精密度(CV%CV%) 5.0%5.0%;批间;批间差(差(R%R%) 6.0 %6.0 % 4. 4. 准确性准确性 在质控品的范围在质控品的范围 六、注意事项六、注意事项 1.应用新鲜血清,且无溶血、无乳糜。 2.先将标准液和血清加入试管底部,加R1时沿管壁按同一流速加入,充分混匀。 3.为减少定标误差,可做两个标准管将两管混合后定标。用余下的定标液可监测仪器的重复性。小结小结谢谢!