原核生物的形态构造和功能细菌

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1、 微生物类群概述微生物类群概述 根据微生物的细胞结构可分为:根据微生物的细胞结构可分为:真菌真菌显微藻类显微藻类原生动物原生动物微微生生物物的的种种类类细胞型细胞型微生物微生物非细胞型非细胞型微生物:微生物:病毒病毒原核生物原核生物:(由原核细胞构成的)(由原核细胞构成的)真核微生物真核微生物(由真核细胞构成的)(由真核细胞构成的)细菌细菌放线菌放线菌肽聚糖、磷壁质肽聚糖、磷壁质生物性状生物性状原核微生物原核微生物真核微生物真核微生物核核拟核,无核膜、核仁拟核,无核膜、核仁真正的核,有核膜、核仁真正的核,有核膜、核仁DNADNA1 1条条1 1至数条,与至数条,与RNARNA、组蛋白组蛋白核糖

2、体核糖体70707070S S S S( (细胞器中细胞器中) )8080S(S(细胞质中细胞质中) )细胞分裂细胞分裂二分裂二分裂有丝分裂有丝分裂, ,减数分裂减数分裂有性生殖有性生殖无无有有呼吸链呼吸链细胞膜上细胞膜上线粒体上线粒体上细胞器细胞器无无线粒体、高基体、内质网等线粒体、高基体、内质网等 细胞壁成分细胞壁成分多聚糖多聚糖, ,几丁质几丁质大小大小1 11010mm1010100100mm原核微生物与真核微生物区别原核微生物与真核微生物区别原核细胞真核细胞第一节第一节细细菌(菌(Bacteria) 细菌是单细胞原核微生物,个体微小,细菌是单细胞原核微生物,个体微小,形态简单,多以二

3、等分裂方式繁殖。在自形态简单,多以二等分裂方式繁殖。在自然界中,细菌分布最广、数量最多。然界中,细菌分布最广、数量最多。 细菌的形态构造及其功能细菌的形态构造及其功能 细菌的群体形态细菌的群体形态(一)(一) 形态和染色形态和染色一、一、细菌的形态构造及其功能细菌的形态构造及其功能螺旋菌杆菌球菌自然界中哪种最多?自然界中哪种最多?最多其次最少1.球菌(1)(1)单球菌单球菌 分裂后的细胞分散而分裂后的细胞分散而单独存在的球菌单独存在的球菌. .如尿素微球菌如尿素微球菌(Micrococcus (Micrococcus ureaeureae) )单球菌单球菌 (2)(2)双球菌双球菌 分裂后两个

4、球菌成对排分裂后两个球菌成对排列的为双球菌列的为双球菌. . 如肺炎双球菌如肺炎双球菌 ( (DiplococcusDiplococcus pneumoniaepneumoniae) )双球菌双球菌 (3)(3)链球菌链球菌 分裂是沿一个平面进行,分裂是沿一个平面进行,分裂后细胞排列成链状分裂后细胞排列成链状. .如乳链球菌如乳链球菌 (Streptococcus Streptococcus lactislactis)链球菌链球菌 链球菌 链球菌 (4)(4)四联球菌四联球菌 分裂是沿两个相垂直的分裂是沿两个相垂直的平面进行,分裂,分裂后每平面进行,分裂,分裂后每四个细胞在一起呈田字形四个细胞

5、在一起呈田字形. . 如四联微球菌如四联微球菌 (Micrococcus Micrococcus tetragenustetragenus)四联球菌四联球菌 (5)(5)八叠球菌八叠球菌 按三个互相垂直的平按三个互相垂直的平面进行分裂后,每八个面进行分裂后,每八个球菌在一起成立方体形球菌在一起成立方体形. . 如藤黄八叠球菌如藤黄八叠球菌 (SarcinaSarcina ureaeureae) ) 八叠球菌八叠球菌 (6)(6)葡萄球菌葡萄球菌 分裂面不规则,多个球分裂面不规则,多个球菌聚在一起,像一串串葡萄。菌聚在一起,像一串串葡萄。 如金黄色葡萄球菌如金黄色葡萄球菌(Staphylococ

6、cus Staphylococcus aureusaureus) ) 葡萄球菌葡萄球菌葡萄球菌球球菌菌的的分分裂裂方方式式2.2.杆菌杆菌 杆菌是细菌中种类最多的类型杆菌是细菌中种类最多的类型, ,因因菌种不同菌种不同, ,菌体细胞的长短、粗细等菌体细胞的长短、粗细等都有所差异。都有所差异。短杆菌短杆菌长杆菌长杆菌梭状芽孢杆菌梭状芽孢杆菌 大肠杆菌 大肠杆菌 大肠杆菌的培养特征棒状杆菌大肠杆菌梭状芽孢杆菌(腐肉中毒)杆菌细胞两端的形态特征杆菌细胞两端的形态特征2.杆杆菌菌螺旋菌干酪螺菌干酪螺菌弧菌例:霍乱弧菌、逗号弧菌例:霍乱弧菌、逗号弧菌螺旋体梅毒密螺旋体梅毒密螺旋体3、螺旋菌、螺旋菌螺螺旋

7、旋菌菌的的排排列列方方式式弧弧菌菌螺菌螺菌螺旋体螺旋体弯曲弯曲1 122弯曲弯曲66螺旋菌 细菌的特殊形态细菌的特殊形态培培养养时时间间、培培养养温温度度、培培养养基基成成分分、浓浓度度、pH值值等环境条件对细菌形态都有明显的影响。等环境条件对细菌形态都有明显的影响。一一般般处处于于幼幼龄龄阶阶段段和和生生长长条条件件适适宜宜时时,细细菌菌形形态态正正常、整齐,表现出特定的形态。常、整齐,表现出特定的形态。在在较较老老的的培培养养物物中中,或或不不正正常常的的条条件件下下,细细胞胞常常出出现现不不正正常常形形态态,尤尤其其是是杆杆菌菌,有有的的细细胞胞膨膨大大,有有的的出出现现梨梨形形,有有的

8、的产产生生分分枝枝,有有时时菌菌体体显显著著伸伸长长以以至至呈呈丝丝状状等等异异常常形形态态。若若将将它它们们转转移移到到新新鲜鲜培培养养基基中中或或适适宜宜的培养条件下又可恢复原来的形态的培养条件下又可恢复原来的形态。影响细菌形态的因素影响细菌形态的因素细菌的大小细菌的大小细菌大小的测定:细菌大小的测定:(1)测量:测量:测微尺测微尺(2)长度单位:微米长度单位:微米(m)(亚细胞构造用亚细胞构造用nm)(3)表示:表示:球菌:直径球菌:直径杆菌:杆菌:宽宽长长螺菌:螺菌:宽、长、螺距宽、长、螺距二、二、 细细 菌菌 的的 大大 小小细菌染色法细菌染色法革兰氏染色法革兰氏染色法抗酸性染色法抗

9、酸性染色法芽孢染色法芽孢染色法姬姆萨染色法姬姆萨染色法简单染色法简单染色法鉴别染色法鉴别染色法正染色法正染色法死菌死菌负染色:荚膜染色法负染色:荚膜染色法活菌:用美兰或活菌:用美兰或TTC(氯化三苯基四氮唑)(氯化三苯基四氮唑)细菌的染色革兰氏染色法是细菌细胞的复合染色法,由丹麦革兰氏染色法是细菌细胞的复合染色法,由丹麦医生医生HansChristianGram于于1884年年创立。创立。基本步骤:基本步骤:涂片固定涂片固定结晶紫初染结晶紫初染1min碘液媒染碘液媒染1min95%乙醇脱色乙醇脱色0.5min沙黄复染沙黄复染1min结果结果:革兰氏革兰氏阳性菌阳性菌紫色紫色;革兰氏革兰氏阴性菌

10、阴性菌红色。红色。革革兰氏染色法兰氏染色法(二)细菌的细胞构造(二)细菌的细胞构造基本结构基本结构细胞壁细胞壁细胞膜细胞膜细胞质细胞质细胞核细胞核特殊结构特殊结构鞭毛鞭毛菌毛菌毛糖被(荚膜和粘液层)糖被(荚膜和粘液层)芽孢芽孢细菌细胞结构细菌细胞结构(一)细菌细胞的基本结构(一)细菌细胞的基本结构(1)细胞壁的功能)细胞壁的功能固定细胞外形和提高机械强度,使其免受渗透压等外力固定细胞外形和提高机械强度,使其免受渗透压等外力的损伤;的损伤;为细胞的生长、分裂和鞭毛运动所必需;为细胞的生长、分裂和鞭毛运动所必需;阻拦大分子有害物质(抗生素和酶)进入细胞;阻拦大分子有害物质(抗生素和酶)进入细胞;与

11、细菌的抗原性致病性和对噬菌体的敏感性密切相关。与细菌的抗原性致病性和对噬菌体的敏感性密切相关。1、细胞壁、细胞壁约占细胞干重的约占细胞干重的10%25%。化学组成:化学组成: 成分成分 占细胞壁干重的占细胞壁干重的% %革兰氏阳性细菌革兰氏阳性细菌革兰氏阴性细菌革兰氏阴性细菌 肽聚糖肽聚糖 磷壁酸磷壁酸 类脂质类脂质 蛋白质蛋白质含量很高(含量很高(30-9530-95)含量较高(含量较高(5050)一般无(一般无(22) 无无含量很低(含量很低(5-05-0) 无无含量较高(含量较高(2020)含量较高含量较高革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌细胞壁成分比较革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌细胞壁成

12、分比较(2)细胞壁的化学组成与结构)细胞壁的化学组成与结构细胞壁的基本骨架细胞壁的基本骨架肽聚糖肽聚糖肽聚糖:肽聚糖:是由是由N-乙酰胞壁酸(乙酰胞壁酸(NAM)和)和N-乙酰葡乙酰葡糖胺(糖胺(NAG)以及少数氨基酸短肽链组成的亚单)以及少数氨基酸短肽链组成的亚单位聚合而成的大分子复合体。位聚合而成的大分子复合体。肽聚糖单体:肽聚糖单体:是由是由NAG、NAM、肽尾、肽桥构、肽尾、肽桥构成。成。化学结构:化学结构:革兰氏阳性细菌肽聚糖单体革兰氏阴性细菌肽聚糖单体细胞壁的基本骨架细胞壁的基本骨架肽聚糖肽聚糖肽肽肽肽聚糖网格状聚糖网格状聚糖网格状聚糖网格状结结结结构构构构细胞壁的基本骨架细胞壁的

13、基本骨架肽聚糖肽聚糖v由肽聚糖和磷壁酸组成由肽聚糖和磷壁酸组成磷壁酸:磷壁酸:磷壁酸:磷壁酸:占占占占40%40%。GG+ +菌所特有菌所特有菌所特有菌所特有, ,其主链由数其主链由数其主链由数其主链由数十个磷酸甘油或磷酸十个磷酸甘油或磷酸十个磷酸甘油或磷酸十个磷酸甘油或磷酸核糖醇组成核糖醇组成核糖醇组成核糖醇组成, ,有的还有有的还有有的还有有的还有由由由由D-AlaD-Ala和还原糖组和还原糖组和还原糖组和还原糖组成的侧链成的侧链成的侧链成的侧链。肽聚糖肽聚糖:占占30-70% ,30-70% ,不同菌种中不同菌种中 肽聚糖肽聚糖( (肽链肽链) )组分不同组分不同革兰氏阳性菌细胞壁革兰氏

14、阳性菌细胞壁内壁层:内壁层:紧贴胞膜紧贴胞膜,仅由仅由12层肽聚糖分子构成层肽聚糖分子构成,占细占细胞壁干重胞壁干重510%,无磷壁酸。无磷壁酸。外膜层:外膜层:位于肽聚糖层的外部。位于肽聚糖层的外部。 外膜蛋白外膜蛋白 脂多糖脂多糖 脂蛋白、脂蛋白、 包括包括: : 蛋白质层蛋白质层 外膜蛋白外膜蛋白 孔蛋白孔蛋白; ; 孔蛋白孔蛋白 磷脂磷脂. .革兰氏阴性菌细胞壁革兰氏阴性菌细胞壁v由外膜层和内壁层组成由外膜层和内壁层组成细胞壁的结构细胞壁的结构(G+细菌与细菌与G 细菌细胞壁构造的比较)细菌细胞壁构造的比较)革兰氏阳性细菌(革兰氏阳性细菌(G+)革兰氏阴性细菌(革兰氏阴性细菌(G )肽

15、聚糖肽聚糖肽聚糖肽聚糖外膜外膜第一步:第一步:结晶紫使菌体染成紫色结晶紫使菌体染成紫色第二步:第二步:碘和结晶紫形成大分子复合物,分子大,能被细胞壁碘和结晶紫形成大分子复合物,分子大,能被细胞壁阻阻留在细胞内。留在细胞内。第三步:第三步:酒精脱色,细胞壁成分和构造不同,出现不同的反应。酒精脱色,细胞壁成分和构造不同,出现不同的反应。第四步:第四步:沙黄复染。沙黄复染。G+菌:菌:细胞壁厚,肽聚糖含量高,交联度大,当乙醇脱色时,肽细胞壁厚,肽聚糖含量高,交联度大,当乙醇脱色时,肽聚糖因脱水而孔径缩小,故结晶紫聚糖因脱水而孔径缩小,故结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内,细碘复合物被阻留在细胞内,细胞不

16、能被酒精脱色,仍呈紫色。胞不能被酒精脱色,仍呈紫色。G菌:菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,因肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,因其含脂量高其含脂量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细碘复合物溶出细胞壁,酒精将细胞脱色,细胞无色,沙黄复染后呈红色。胞壁,酒精将细胞脱色,细胞无色,沙黄复染后呈红色。v革兰氏染色的机理革兰氏染色的机理阳性菌阳性菌阴性菌阴性菌ABBBABAA(1)初染(结晶紫)初染(结晶紫60S)革革兰兰氏氏染染色色程程序序和和结结果果ABBBABAA革革兰兰氏氏染染色色程程序序和和结结果果(2)媒染剂(碘

17、液)媒染剂(碘液60S)ABBBABAA革革兰兰氏氏染染色色程程序序和和结结果果(3)脱色()脱色(95%乙醇乙醇30S)ABBBABAA革革兰兰氏氏染染色色程程序序和和结结果果(4 4)复染(蕃红)复染(蕃红120S120S)A:革兰氏阳性细菌G+B:革兰氏阴性细菌G(1 1)初染(结晶紫)初染(结晶紫60S60S)(2 2)媒染剂(碘液媒染剂(碘液60S60S) (3 3)脱色(脱色(95%95%乙醇乙醇30S30S)(4 4)复染(蕃红复染(蕃红120S120S)比较项目比较项目G细菌细菌G-细菌细菌革兰氏染色反应革兰氏染色反应肽聚糖层肽聚糖层磷壁酸磷壁酸外膜外膜脂多糖(脂多糖(LPS)

18、类脂和脂蛋白含量类脂和脂蛋白含量鞭毛结构鞭毛结构产毒素产毒素对机械力的抗性对机械力的抗性细胞壁抗溶菌酶细胞壁抗溶菌酶能阻留结晶紫染成紫色能阻留结晶紫染成紫色厚,层次多厚,层次多多数含有多数含有无无无无低低基体上着生基体上着生2个环个环以外毒素为主以外毒素为主强强弱弱可经脱色而复染成红色可经脱色而复染成红色薄,一般单层薄,一般单层无无有有有有高高基体上着生基体上着生4个环个环以内毒素为主以内毒素为主弱弱强强G+细菌和细菌和G-一系列生物学特性的比较一系列生物学特性的比较思考:为什么通过革兰氏染色思考:为什么通过革兰氏染色G+G+呈呈兰色,兰色,G-G-呈红色?呈红色?脱色剂脱色剂-95%-95%

19、乙醇为脂溶剂破坏乙醇为脂溶剂破坏GG的外膜、的外膜、肽聚糖层和细胞质膜,于是被乙醇溶解的结晶紫肽聚糖层和细胞质膜,于是被乙醇溶解的结晶紫和碘的复合物从细胞中渗漏出来,当再用藩红复和碘的复合物从细胞中渗漏出来,当再用藩红复染时,显现红色。染时,显现红色。但在但在G+G+细胞中,乙醇使厚的肽聚糖层脱水,导细胞中,乙醇使厚的肽聚糖层脱水,导致孔隙变小,由于结晶紫和碘的复合物分子较大,致孔隙变小,由于结晶紫和碘的复合物分子较大,不能通过细胞壁,保持紫色。不能通过细胞壁,保持紫色。v青霉素的作用青霉素的作用作用于肽聚糖肽桥的作用于肽聚糖肽桥的联结,即抑制肽聚糖联结,即抑制肽聚糖的合成,故仅对生长的合成,

20、故仅对生长着的菌有效,主要是着的菌有效,主要是G+菌。菌。2、细胞膜、细胞膜 细胞膜是紧贴细胞壁内侧包围细胞质的一层柔软、富有弹性细胞膜是紧贴细胞壁内侧包围细胞质的一层柔软、富有弹性的半透明薄膜。的半透明薄膜。(1)细胞膜的化学组成细胞膜的化学组成蛋白质蛋白质磷脂磷脂糖类糖类少量核酸少量核酸主要包括主要包括 膜是由球形蛋白与磷脂膜是由球形蛋白与磷脂按照二维排列方式构成的流按照二维排列方式构成的流体镶嵌式,流动的脂类双分体镶嵌式,流动的脂类双分子层构成了膜的连续体,而子层构成了膜的连续体,而蛋白质象孤岛一样无规则地蛋白质象孤岛一样无规则地漂流在磷脂类的海洋当中。漂流在磷脂类的海洋当中。细胞膜液态

21、镶嵌模型细胞膜液态镶嵌模型(2)细胞膜的结构细胞膜的结构1972年年Singer和和Nicolson提出的细胞膜液态镶嵌模型。提出的细胞膜液态镶嵌模型。(3)(3)细胞膜的功能细胞膜的功能细胞膜的功能细胞膜的功能 能选择性控制细胞内、外的营养物质和代谢产物的运送能选择性控制细胞内、外的营养物质和代谢产物的运送能选择性控制细胞内、外的营养物质和代谢产物的运送能选择性控制细胞内、外的营养物质和代谢产物的运送 是维持细胞内正常渗透压的结构屏障是维持细胞内正常渗透压的结构屏障是维持细胞内正常渗透压的结构屏障是维持细胞内正常渗透压的结构屏障 是合成细胞壁和糖被有关成分(如肽聚糖、磷壁酸、脂是合成细胞壁和

22、糖被有关成分(如肽聚糖、磷壁酸、脂是合成细胞壁和糖被有关成分(如肽聚糖、磷壁酸、脂是合成细胞壁和糖被有关成分(如肽聚糖、磷壁酸、脂多糖和荚膜多糖)的重要场所多糖和荚膜多糖)的重要场所多糖和荚膜多糖)的重要场所多糖和荚膜多糖)的重要场所 膜上含有与氧化磷酸化或光合磷酸化等能量代谢有关的膜上含有与氧化磷酸化或光合磷酸化等能量代谢有关的膜上含有与氧化磷酸化或光合磷酸化等能量代谢有关的膜上含有与氧化磷酸化或光合磷酸化等能量代谢有关的酶系,是细胞的产能基地酶系,是细胞的产能基地酶系,是细胞的产能基地酶系,是细胞的产能基地 是鞭毛基体的着生部位,并可提供鞭毛旋转运动所需的是鞭毛基体的着生部位,并可提供鞭毛

23、旋转运动所需的是鞭毛基体的着生部位,并可提供鞭毛旋转运动所需的是鞭毛基体的着生部位,并可提供鞭毛旋转运动所需的能量。能量。能量。能量。间体:由细胞膜内褶形成的一种管状、层状或串状物,一间体:由细胞膜内褶形成的一种管状、层状或串状物,一般位于细胞分裂的部位或附近。般位于细胞分裂的部位或附近。间体间体间体的功能间体的功能: :参与隔膜形成参与隔膜形成与核分裂有关与核分裂有关类线粒体功能类线粒体功能3、拟核(或核质体、核区)、拟核(或核质体、核区) 由大型环状双链由大型环状双链DNADNA纤丝不规则地折叠或缠绕而构成纤丝不规则地折叠或缠绕而构成的无核膜、核仁的区域的无核膜、核仁的区域。 细菌细菌细菌

24、细菌DNADNA:长度一般为:长度一般为:长度一般为:长度一般为1313mmmm例:大肠杆菌的例:大肠杆菌的例:大肠杆菌的例:大肠杆菌的DNADNA长约长约长约长约1mm1mm。生长迅速的细菌在核分裂之后细胞往生长迅速的细菌在核分裂之后细胞往生长迅速的细菌在核分裂之后细胞往生长迅速的细菌在核分裂之后细胞往往来不及分裂往来不及分裂往来不及分裂往来不及分裂, ,所以细胞中常有所以细胞中常有所以细胞中常有所以细胞中常有2424个个个个核,而生长缓慢的细菌细胞中一般只核,而生长缓慢的细菌细胞中一般只核,而生长缓慢的细菌细胞中一般只核,而生长缓慢的细菌细胞中一般只有有有有1212个核。个核。个核。个核。

25、功能:负载遗传信息。功能:负载遗传信息。功能:负载遗传信息。功能:负载遗传信息。 拟核拟核 质粒:细菌染色体外的遗传物质,由共价闭合环状双链质粒:细菌染色体外的遗传物质,由共价闭合环状双链DNA分子组成分子组成分子量约为分子量约为100106D.携带携带1100个基因个基因,一个菌细胞一个菌细胞可有一至数个质粒。可有一至数个质粒。质粒的特点:质粒的特点:质粒的特点:质粒的特点:qq可自我复制,稳定遗传。对生存不是必可自我复制,稳定遗传。对生存不是必可自我复制,稳定遗传。对生存不是必可自我复制,稳定遗传。对生存不是必 要要要要的。复制与染色体分开,但同步进行。的。复制与染色体分开,但同步进行。的

26、。复制与染色体分开,但同步进行。的。复制与染色体分开,但同步进行。qq不同质粒携带不同遗传信息。不同质粒携带不同遗传信息。不同质粒携带不同遗传信息。不同质粒携带不同遗传信息。qq无质粒细菌可通过接合、转化、转导等无质粒细菌可通过接合、转化、转导等无质粒细菌可通过接合、转化、转导等无质粒细菌可通过接合、转化、转导等 方方方方式获得,不能自发产生。式获得,不能自发产生。式获得,不能自发产生。式获得,不能自发产生。例:细菌抗药性因子、大肠杆菌例:细菌抗药性因子、大肠杆菌例:细菌抗药性因子、大肠杆菌例:细菌抗药性因子、大肠杆菌F F F F因子。因子。因子。因子。 质粒质粒质粒质粒应用应用应用应用:

27、: : :基因工程,体外重组。基因工程,体外重组。基因工程,体外重组。基因工程,体外重组。4、核糖体:、核糖体: 是分散在细胞质中的颗粒状结构,由核糖体核酸是分散在细胞质中的颗粒状结构,由核糖体核酸(占(占60%)和蛋白质(占)和蛋白质(占40%)组成。)组成。细菌的核糖体细菌的核糖体沉降系数为:沉降系数为:70S,由,由50S大亚基和大亚基和30S小亚基构成。小亚基构成。功能:是细胞合成蛋白质功能:是细胞合成蛋白质的机构。的机构。5、细胞质及其内含物、细胞质及其内含物细胞质功能:细胞质中含有丰富的酶系,是营养物质合成、转化、代谢的场所。细胞质:细胞质:是在细胞膜内除核区以外的细胞物质。细胞质

28、是无色、透明、粘稠状物质。主要成分为水,蛋白质,核酸,脂类、少量糖和无机盐。内含物:内含物:气泡:气泡:由蛋白质膜构成的充满气体的泡状物。由蛋白质膜构成的充满气体的泡状物。有些细菌有些细菌 细细胞质中含有几个或多个气泡。胞质中含有几个或多个气泡。气泡的功能:气泡的功能:调节细胞比重,以使其漂浮调节细胞比重,以使其漂浮在合适的水层中。在合适的水层中。气泡吸收空气,空气中的氧气泡吸收空气,空气中的氧气可供代谢需要。气可供代谢需要。例:例:许多许多光合细菌和水生细光合细菌和水生细菌、盐杆菌常含有气泡。菌、盐杆菌常含有气泡。颗粒状内含物:颗粒状内含物:细菌细胞质中含有各种颗粒状内含物,它们大多数为细细

29、菌细胞质中含有各种颗粒状内含物,它们大多数为细胞胞贮藏物,颗粒状内含物的多少因细菌的种类、菌龄及培贮藏物,颗粒状内含物的多少因细菌的种类、菌龄及培养条养条件不同而改变。件不同而改变。主要有:异染粒、聚主要有:异染粒、聚-羟丁酸、肝糖粒、淀粉粒、脂肪粒、羟丁酸、肝糖粒、淀粉粒、脂肪粒、硫粒和液泡等等。硫粒和液泡等等。异染粒:异染粒:异染粒大小为异染粒大小为0.51m,是多聚偏磷酸盐的聚合物,分,是多聚偏磷酸盐的聚合物,分子子呈线状。对某些染料有特殊反应呈线状。对某些染料有特殊反应,产生与所用染料不同产生与所用染料不同的的颜色颜色,因此得名异染颗粒。因此得名异染颗粒。功能:贮存磷元素和能量,降低渗

30、透压。功能:贮存磷元素和能量,降低渗透压。聚聚聚聚- - 羟丁酸颗粒是许多细菌细胞质内羟丁酸颗粒是许多细菌细胞质内羟丁酸颗粒是许多细菌细胞质内羟丁酸颗粒是许多细菌细胞质内常含有的碳源类储藏物。常含有的碳源类储藏物。常含有的碳源类储藏物。常含有的碳源类储藏物。PHBPHB不溶于不溶于不溶于不溶于水,易被脂溶性染料水,易被脂溶性染料水,易被脂溶性染料水,易被脂溶性染料( (如苏丹黑如苏丹黑如苏丹黑如苏丹黑) )着色。着色。着色。着色。功能功能功能功能: :贮存碳源、能源和降低渗透压。贮存碳源、能源和降低渗透压。贮存碳源、能源和降低渗透压。贮存碳源、能源和降低渗透压。许多好氧菌和光合厌氧菌都含有聚许

31、多好氧菌和光合厌氧菌都含有聚许多好氧菌和光合厌氧菌都含有聚许多好氧菌和光合厌氧菌都含有聚 - -羟羟羟羟丁酸颗粒。丁酸颗粒。丁酸颗粒。丁酸颗粒。聚聚-羟丁酸颗粒羟丁酸颗粒(PHB)硫粒硫粒形成:形成:是硫元素的贮藏体。是硫元素的贮藏体。取决于环境硫化物含量,当环境取决于环境硫化物含量,当环境中中S含量高时,在体内积累;当含量高时,在体内积累;当缺缺S时,氧化成硫酸被菌利用。时,氧化成硫酸被菌利用。功能:功能:a.好氧硫细菌的能源好氧硫细菌的能源b.厌氧硫细菌的电子供体厌氧硫细菌的电子供体肝糖肝糖粒和淀粉粒粒和淀粉粒:都是都是-1,4或或-1,6糖苷键的葡萄糖聚合物。这些糖苷键的葡萄糖聚合物。这

32、些贮藏物通常较均匀地分布在细胞质内,颗粒较小。贮藏物通常较均匀地分布在细胞质内,颗粒较小。若这类贮藏物大量存在时,用碘使对其染色,若这类贮藏物大量存在时,用碘使对其染色,肝糖肝糖粒能被碘粒能被碘液液染成红色,淀粉粒被碘成蓝色。染成红色,淀粉粒被碘成蓝色。脂肪粒:脂肪粒:脂肪粒的折光性较强,它可被脂溶性染料染色;脂肪粒的折光性较强,它可被脂溶性染料染色;细细胞胞生长旺盛时,脂肪粒增多,细胞遭破坏后,脂肪粒可游离生长旺盛时,脂肪粒增多,细胞遭破坏后,脂肪粒可游离出来。出来。液泡:液泡:许多活细菌细胞内有液泡,液泡主要成分是水和可溶许多活细菌细胞内有液泡,液泡主要成分是水和可溶性性盐类,被一层脂蛋白

33、的膜包围。可用中性红染色使之显现盐类,被一层脂蛋白的膜包围。可用中性红染色使之显现出来。出来。液泡具有调节渗透压的功能,还可与细胞质进行物质液泡具有调节渗透压的功能,还可与细胞质进行物质交换。交换。(二)细菌细胞的特殊构造(二)细菌细胞的特殊构造1糖被糖被 层次厚层次厚(大荚膜)(大荚膜) 在壁上有固定层次在壁上有固定层次 层次薄层次薄: :微荚膜微荚膜 包裹在单个细胞上包裹在单个细胞上 松散,未固定在壁上松散,未固定在壁上: :粘液层粘液层 包裹在细胞群上:菌胶团包裹在细胞群上:菌胶团 糖糖被被糖被的功能糖被的功能大量极性基团可保护菌体免受干旱损伤;可防止噬菌体大量极性基团可保护菌体免受干旱

34、损伤;可防止噬菌体 的的吸附和裂解;一些动物致病菌的荚膜可保护它们免受宿吸附和裂解;一些动物致病菌的荚膜可保护它们免受宿 主主白细胞的吞噬;白细胞的吞噬;贮藏养料以备营养缺乏时重新利用;贮藏养料以备营养缺乏时重新利用;作为透性屏障和离子交换系统,以保护细菌免受重金属作为透性屏障和离子交换系统,以保护细菌免受重金属 离离子的毒害;子的毒害;表面附着作用;表面附着作用;细菌间的信息识别作用;细菌间的信息识别作用;堆积代谢废物。堆积代谢废物。鞭毛的着生方式:鞭毛的着生方式:周生周生2鞭毛鞭毛鞭毛的化学组成:鞭毛的化学组成:主要由鞭毛蛋白构成,还含有少量的多糖、主要由鞭毛蛋白构成,还含有少量的多糖、脂

35、类和核酸等。脂类和核酸等。鞭毛起源于细胞质膜内侧的基粒。鞭毛起源于细胞质膜内侧的基粒。细胞质区内有一个颗粒状小体,此小体为基粒,鞭毛自细胞质区内有一个颗粒状小体,此小体为基粒,鞭毛自基基粒长出穿过细胞壁延伸到细胞外部。粒长出穿过细胞壁延伸到细胞外部。 鞭毛的结构:鞭毛的结构:鞭毛丝鞭毛丝鞭毛鞭毛 鞭毛钩鞭毛钩 基体基体注意:注意:G细菌和细菌和G-细菌鞭毛的区别细菌鞭毛的区别鞭毛的观察:鞭毛的观察:电镜电镜特殊鞭毛染色,在光学显微镜下观察特殊鞭毛染色,在光学显微镜下观察半固体穿刺培养半固体穿刺培养从固体培养基上的菌落形态判断从固体培养基上的菌落形态判断一般情况下:一般情况下:菌落形状大,薄且不

36、规则,边缘极不平整,可能有鞭毛。菌落形状大,薄且不规则,边缘极不平整,可能有鞭毛。菌落十分圆滑,边缘平整且相对较厚,可能没有鞭毛。菌落十分圆滑,边缘平整且相对较厚,可能没有鞭毛。3纤毛(或线毛、菌毛、伞毛)纤毛(或线毛、菌毛、伞毛)某些菌体表面存在的短而多的附属物。某些菌体表面存在的短而多的附属物。纤毛比鞭毛更短、更细,且又直又硬。数量很多,不具有运纤毛比鞭毛更短、更细,且又直又硬。数量很多,不具有运动功能,但与菌的致病性吸附等有关。动功能,但与菌的致病性吸附等有关。4芽孢芽孢 某些菌在其生长发育后期,细胞内形成一个圆形、厚壁、某些菌在其生长发育后期,细胞内形成一个圆形、厚壁、含水量低、抗逆性

37、强的休眠构造。含水量低、抗逆性强的休眠构造。芽芽孢孢能形成芽孢的细菌种类:能形成芽孢的细菌种类:杆菌种类杆菌种类较多,球菌和螺旋菌较少。较多,球菌和螺旋菌较少。芽孢杆菌属芽孢杆菌属梭状芽孢杆菌属梭状芽孢杆菌属芽孢乳杆菌属芽孢乳杆菌属生孢八叠球菌属生孢八叠球菌属( (其中的一个种其中的一个种) )芽孢的组成和结构芽孢的组成和结构多层结构,主要包括孢外壁、芽孢衣、皮层和核心。多层结构,主要包括孢外壁、芽孢衣、皮层和核心。芽孢的结构芽孢的结构芽孢的外壁层厚而致密,主要成分为芽孢的外壁层厚而致密,主要成分为脂蛋白,通透性差脂蛋白,通透性差,不易着色。不易着色。核心含有大量的核心含有大量的DNA、RNA

38、、蛋白、蛋白质酶等物质,还含有质酶等物质,还含有2,6-吡啶二羧酸吡啶二羧酸(DPA),DPA是芽孢特有的成分。一是芽孢特有的成分。一般以般以DPA-Ca的形式存在的形式存在皮层主要含芽孢肽聚糖、皮层主要含芽孢肽聚糖、DPA-Ca,皮层体积大,比较致密。皮层体积大,比较致密。芽孢平均含水量低芽孢平均含水量低,约约40%.芽孢的特性芽孢的特性具有很强的具有很强的抗热、抗干燥、抗辐射、抗化学药物能力。抗热、抗干燥、抗辐射、抗化学药物能力。含水量低、壁厚而致密,通透性差含水量低、壁厚而致密,通透性差,不易着色。不易着色。新陈代谢几乎停止,处于休眠状态。新陈代谢几乎停止,处于休眠状态。一个芽孢萌发产生

39、一个个体。一个芽孢萌发产生一个个体。芽孢的抗热机制芽孢的抗热机制目前尚不清楚,但可能与以下因素有关,如含水量低、壁目前尚不清楚,但可能与以下因素有关,如含水量低、壁厚而致密,芽孢中的酶分子量小,比较耐热。过去认为芽孢厚而致密,芽孢中的酶分子量小,比较耐热。过去认为芽孢抗热与抗热与DPA有关,现在已否认了这种假设。有关,现在已否认了这种假设。在杆菌中能形成芽孢的种类在杆菌中能形成芽孢的种类较多,在较多,在球菌和螺旋菌中只有少数菌种可形成球菌和螺旋菌中只有少数菌种可形成芽孢。芽孢。产生芽孢的几个属:产生芽孢的几个属:芽孢杆菌属芽孢杆菌属梭状芽孢杆菌属梭状芽孢杆菌属芽孢八叠球菌属芽孢八叠球菌属能形成

40、芽孢的细菌种类能形成芽孢的细菌种类轴丝轴丝形成形成形成前芽形成前芽孢孢前芽前芽孢孢隔膜形成隔膜形成前芽前芽孢发孢发育成熟育成熟芽芽孢孢形成形成芽芽孢孢囊囊裂解裂解芽芽孢孢的形成的形成过过程程芽孢的本质芽孢的本质即不是细菌生活周期的必经阶段,也不即不是细菌生活周期的必经阶段,也不是细菌繁殖的一种形式,又不是对环境是细菌繁殖的一种形式,又不是对环境的消极反应,而是一种生命形式,一种的消极反应,而是一种生命形式,一种独立的休眠体。独立的休眠体。一般为无性繁殖,一般为无性繁殖,二分裂法。二分裂法。(裂殖)(裂殖)同形裂殖:裂殖后形成的子同形裂殖:裂殖后形成的子细胞大小相等。细胞大小相等。异形裂殖:分裂

41、产生两个大异形裂殖:分裂产生两个大小不等的子细胞。小不等的子细胞。细菌分裂过程:细菌分裂过程:核分裂核分裂形成横隔壁形成横隔壁子细胞分离子细胞分离 芽殖芽殖(三)细菌的繁殖(三)细菌的繁殖菌苔菌苔: :大量分散的纯种细胞密集生长大量分散的纯种细胞密集生长, ,结果长成的各结果长成的各“菌落菌落”连接成一片。连接成一片。(1)(1)平板培养平板培养二、细菌的群体形态二、细菌的群体形态1.1.固体培养固体培养固体培养固体培养(2) (2) 斜面培养斜面培养菌落:菌落:在固体培养基上在固体培养基上, ,以母细胞为核以母细胞为核心的一堆心的一堆肉眼可见的,有一定形态、构肉眼可见的,有一定形态、构造等特

42、征的子细胞集团。造等特征的子细胞集团。Streptomyces coelicolor-1铜绿假单孢粘质沙雷氏菌沙门氏菌费氏志贺氏菌对于一个样品,针对微生物来说对于一个样品,针对微生物来说最想了解的问题(首要问题)最想了解的问题(首要问题)存在的微生物种类存在的微生物种类各类微生物的数量各类微生物的数量各类微生物的作用各类微生物的作用说明:说明: 只是针对可人工培养的微生物来说,只是针对可人工培养的微生物来说,乐观估计可人工培养的部分只占总数的乐观估计可人工培养的部分只占总数的10%(保守估计只有(保守估计只有1%);); 证据来源有两方面证据来源有两方面分子生物学的分子生物学的探索;和原位培养

43、的比较。探索;和原位培养的比较。一、微生物的形态和菌落特征的比较表一、微生物的形态和菌落特征的比较表单细胞微生物单细胞微生物单细胞微生物单细胞微生物菌丝状微生物菌丝状微生物菌丝状微生物菌丝状微生物细菌细菌细菌细菌酵母菌酵母菌酵母菌酵母菌放线菌放线菌放线菌放线菌霉菌霉菌霉菌霉菌主主主主要要要要特特特特征征征征菌菌菌菌落落落落含水状态含水状态含水状态含水状态很湿或较湿很湿或较湿很湿或较湿很湿或较湿较湿较湿较湿较湿干燥或较干燥干燥或较干燥干燥或较干燥干燥或较干燥干燥干燥干燥干燥外观形态外观形态外观形态外观形态小而突起或大而平坦小而突起或大而平坦小而突起或大而平坦小而突起或大而平坦大而突起大而突起大而

44、突起大而突起小而紧密小而紧密小而紧密小而紧密大而疏松或大而致密大而疏松或大而致密大而疏松或大而致密大而疏松或大而致密细细细细胞胞胞胞相互关系相互关系相互关系相互关系单个分散或有一定排列单个分散或有一定排列单个分散或有一定排列单个分散或有一定排列方式方式方式方式单个分散或假丝状单个分散或假丝状单个分散或假丝状单个分散或假丝状丝状交织,紧密丝状交织,紧密丝状交织,紧密丝状交织,紧密丝状交织丝状交织丝状交织丝状交织形态特征形态特征形态特征形态特征小而均匀,个别有芽孢小而均匀,个别有芽孢小而均匀,个别有芽孢小而均匀,个别有芽孢大而分化大而分化大而分化大而分化细而均匀细而均匀细而均匀细而均匀粗而分化粗而

45、分化粗而分化粗而分化参参参参考考考考特特特特征征征征菌落透明度菌落透明度菌落透明度菌落透明度透明或稍透明透明或稍透明透明或稍透明透明或稍透明稍透明稍透明稍透明稍透明不透明不透明不透明不透明不透明不透明不透明不透明菌落与培养菌落与培养菌落与培养菌落与培养基结合程度基结合程度基结合程度基结合程度不结合不结合不结合不结合不结合不结合不结合不结合牢固结合牢固结合牢固结合牢固结合较牢因结合较牢因结合较牢因结合较牢因结合菌落颜色菌落颜色菌落颜色菌落颜色多样多样多样多样单调,一般呈乳脂或矿单调,一般呈乳脂或矿单调,一般呈乳脂或矿单调,一般呈乳脂或矿烛色,少数红色或黑色烛色,少数红色或黑色烛色,少数红色或黑色

46、烛色,少数红色或黑色十分多样十分多样十分多样十分多样十分多样十分多样十分多样十分多样菌落正反面菌落正反面菌落正反面菌落正反面颜色的差别颜色的差别颜色的差别颜色的差别相同相同相同相同相同相同相同相同一般不同一般不同一般不同一般不同一般不同一般不同一般不同一般不同菌落边缘菌落边缘菌落边缘菌落边缘一般看不到细胞一般看不到细胞一般看不到细胞一般看不到细胞可见球状,卵圆状或假可见球状,卵圆状或假可见球状,卵圆状或假可见球状,卵圆状或假丝状细胞丝状细胞丝状细胞丝状细胞有时可见细丝状细胞有时可见细丝状细胞有时可见细丝状细胞有时可见细丝状细胞可见粗丝状细胞可见粗丝状细胞可见粗丝状细胞可见粗丝状细胞细胞生长速度

47、细胞生长速度细胞生长速度细胞生长速度一般很快一般很快一般很快一般很快较快较快较快较快慢慢慢慢一般较快一般较快一般较快一般较快气味气味气味气味一般有臭味一般有臭味一般有臭味一般有臭味多带酒香味多带酒香味多带酒香味多带酒香味常有泥腥味或抗生素气常有泥腥味或抗生素气常有泥腥味或抗生素气常有泥腥味或抗生素气味味味味往往有霉味往往有霉味往往有霉味往往有霉味二、细菌菌落形态的多样性(示意图)二、细菌菌落形态的多样性(示意图)延展性较强的一些霉菌菌丝(松散)延展性较强的一些霉菌菌丝(松散)平板中菌落形态平板中菌落形态三、菌落特征描写方法三、菌落特征描写方法大小大小大小大小 大、中、小、针尖状。可先将整个平大

48、、中、小、针尖状。可先将整个平大、中、小、针尖状。可先将整个平大、中、小、针尖状。可先将整个平板上的菌落粗略观察一下,再决定大、中、小的板上的菌落粗略观察一下,再决定大、中、小的板上的菌落粗略观察一下,再决定大、中、小的板上的菌落粗略观察一下,再决定大、中、小的标准,或由教师指出一个大小范围。标准,或由教师指出一个大小范围。标准,或由教师指出一个大小范围。标准,或由教师指出一个大小范围。 颜色颜色颜色颜色 黄色、金黄色、灰色、乳白色、红色、黄色、金黄色、灰色、乳白色、红色、黄色、金黄色、灰色、乳白色、红色、黄色、金黄色、灰色、乳白色、红色、粉红色等。粉红色等。粉红色等。粉红色等。 干湿情况干湿

49、情况干湿情况干湿情况 干燥、湿润、粘稠干燥、湿润、粘稠干燥、湿润、粘稠干燥、湿润、粘稠 形态形态形态形态 圆形、不规则等圆形、不规则等圆形、不规则等圆形、不规则等 高度高度高度高度 扁平、隆起、凹下扁平、隆起、凹下扁平、隆起、凹下扁平、隆起、凹下 透明程度透明程度透明程度透明程度 透明、半透明、不透明透明、半透明、不透明透明、半透明、不透明透明、半透明、不透明 边缘边缘边缘边缘 整齐、不整齐整齐、不整齐整齐、不整齐整齐、不整齐注意:注意:注意:注意:可以进一步细分描述可以进一步细分描述可以进一步细分描述可以进一步细分描述菌落形态可因培养基成分不同而发生菌落形态可因培养基成分不同而发生显著变化(

50、枯草芽孢杆菌在营养缺乏显著变化(枯草芽孢杆菌在营养缺乏时形成的雪花状菌落)时形成的雪花状菌落)三、平板菌落计数的表述及计算三、平板菌落计数的表述及计算 因为微生物不易完全分散成单个细胞;因为微生物不易完全分散成单个细胞;因为微生物不易完全分散成单个细胞;因为微生物不易完全分散成单个细胞; 菌落的来源也并非完全为单个细胞;菌落的来源也并非完全为单个细胞;菌落的来源也并非完全为单个细胞;菌落的来源也并非完全为单个细胞; 因此其测定结果比实际菌数偏低;因此其测定结果比实际菌数偏低;因此其测定结果比实际菌数偏低;因此其测定结果比实际菌数偏低; 引入菌落形成单位(引入菌落形成单位(引入菌落形成单位(引入

51、菌落形成单位(colony-forming unitscolony-forming units,cfucfu)来表示,)来表示,)来表示,)来表示,而不以绝对菌体数量来表示样品的活菌含量。而不以绝对菌体数量来表示样品的活菌含量。而不以绝对菌体数量来表示样品的活菌含量。而不以绝对菌体数量来表示样品的活菌含量。 计算公式:计算公式:计算公式:计算公式:计算公式说明:计算公式说明:计算公式说明:计算公式说明:如样品来源为液体其表示为如样品来源为液体其表示为如样品来源为液体其表示为如样品来源为液体其表示为CFU/mlCFU/ml;所加样品量为每个平板所加入的相应稀释液的体积(所加样品量为每个平板所加入

52、的相应稀释液的体积(所加样品量为每个平板所加入的相应稀释液的体积(所加样品量为每个平板所加入的相应稀释液的体积(mlml)。)。)。)。四、菌落计数原则(六条)四、菌落计数原则(六条)1 1、先计算相同稀释度的平均菌落数。、先计算相同稀释度的平均菌落数。若其中一个平板有较大片状菌苔生长时,若其中一个平板有较大片状菌苔生长时,则不应采用,而应以则不应采用,而应以无片状菌苔无片状菌苔生长的平生长的平板作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌板作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌苔的大小不到平板的一半,而其余的一半苔的大小不到平板的一半,而其余的一半菌落分布又很均匀时,则可将此一半的菌菌落分布又很均匀时,则

53、可将此一半的菌落数乘落数乘2 2以代表全平板的菌落数,然后再以代表全平板的菌落数,然后再计算该稀释度的平均菌落数。计算该稀释度的平均菌落数。 2 2、首先选择平均菌落数在、首先选择平均菌落数在3030300300之间之间的,当只有一个稀释度的平均菌落数符合此的,当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,则以该平均菌落数乘其稀释倍数即范围时,则以该平均菌落数乘其稀释倍数即为该样品的细菌总数(见下表,例为该样品的细菌总数(见下表,例1 1)。)。 3 3、若有两个稀释度的平均菌落数均在、若有两个稀释度的平均菌落数均在3030300300之间,则按两者菌落总数之比值来决定。之间,则按两者菌落总数之比

54、值来决定。若其比值小于若其比值小于2 2,应采取两者的平均数;若大,应采取两者的平均数;若大于于2 2,则取其中稀释度,则取其中稀释度( (倍数倍数) )较小的计算菌落较小的计算菌落总数(见下表,例总数(见下表,例2 2及例及例3 3)。)。 4 4、若所有稀释度的平均菌落数均大于、若所有稀释度的平均菌落数均大于300300,则应按稀释度,则应按稀释度( (倍数倍数) )最高的平均菌落数最高的平均菌落数乘以稀释倍数(见下表,例乘以稀释倍数(见下表,例4 4)。)。 5 5、若所有稀释度的平均菌落数均小于、若所有稀释度的平均菌落数均小于3030,则应按稀释度,则应按稀释度( (倍数倍数) )最低

55、的平均菌落数乘最低的平均菌落数乘以稀释倍数(见下表,例以稀释倍数(见下表,例5 5)。)。 6 6、若所有稀释度的平均菌落数均不在、若所有稀释度的平均菌落数均不在3030300300之间,则以最近之间,则以最近300300或或3030的平均菌落数的平均菌落数乘以稀释倍数(见下表,例乘以稀释倍数(见下表,例6 6)。)。计算菌落总数方法举例(加样量为计算菌落总数方法举例(加样量为1mL)例次例次例次例次不同稀释度的平均菌落数不同稀释度的平均菌落数不同稀释度的平均菌落数不同稀释度的平均菌落数两个稀两个稀两个稀两个稀释度菌释度菌释度菌释度菌落数之落数之落数之落数之比比比比菌落总数菌落总数菌落总数菌落

56、总数(个(个(个(个mLmL)备注备注备注备注1010-1-11010-2-21010-3-31365136516416420201.64101.64104 4一般采用科学一般采用科学一般采用科学一般采用科学计数法;取两计数法;取两计数法;取两计数法;取两位小数位小数位小数位小数 ;“ “无无无无法计数法计数法计数法计数” ”和和和和“ “0”0”在这里是两个在这里是两个在这里是两个在这里是两个概念概念概念概念前者前者前者前者是指因稀释倍是指因稀释倍是指因稀释倍是指因稀释倍数掌握不好或数掌握不好或数掌握不好或数掌握不好或其它原因造成其它原因造成其它原因造成其它原因造成不能计数,后不能计数,后不

57、能计数,后不能计数,后者指平板上无者指平板上无者指平板上无者指平板上无微生物菌落生微生物菌落生微生物菌落生微生物菌落生长。长。长。长。2760276029529546461.61.63.78 103.78 104 42890289027127160602.22.22.71 102.71 104 4无法计无法计无法计无法计数数数数165016505135135.13 105.13 105 5272711115 52.70 102.70 102 2无法计无法计无法计无法计数数数数30530512123.05 103.05 104 4针对计数原则的说明针对计数原则的说明1、比较时要换算至同一个稀释度进行;、比较时要换算至同一个稀释度进行;2、霉菌可能难以完全遵循此六项计数原、霉菌可能难以完全遵循此六项计数原则,菌落大,漫延性强,则,菌落大,漫延性强,30300个个/皿皿时,菌落过密重叠而无法计数。时,菌落过密重叠而无法计数。3、牛肉膏培养基:、牛肉膏培养基: 只计只计细菌细菌的数量的数量 高氏高氏1号培养基:只计号培养基:只计放线菌放线菌的数量的数量 马丁氏培养基:马丁氏培养基: 只计只计霉菌霉菌的数量的数量2.2.液体培养基液体培养基液体培养基液体培养基3.3.半固体培养半固体培养半固体培养半固体培养

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