第六章No003ENZYME

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1、寿寿宏攀硬强挚蒙薪螺画刑粱酒矣忙淮厨耙裙仪酣撞形旋尊怕蜒铣饵喇屏第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME第六章第六章 酶酶申川军申川军 广州中医药大学生物化学教研室广州中医药大学生物化学教研室桃辫乖兰顺象溢梅卖囚咆镊菊俄据毅痒臼锭汉柒嘎屈桑跳囊凄汐艾类口预第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME酶的分子结构酶的分子结构(掌握)(掌握)酶促反应的特点酶促反应的特点(掌握)(掌握)与机制与机制(了解)(了解)酶促反应动力学酶促反应动力学(熟悉)(熟悉)酶的命名、分类酶的命名、分类(了解)(了解)和活性测和活性测定定(熟悉)(熟悉)酶与医学的关系酶与医学的关系

2、(了解)(了解)内内 容容建柄兢才删拣刊侥袁词悼当垂坤首欲媳靶这枢椰痈菌万希喂奈寓振勋趣庭第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME酶的定义:酶的定义: 是由活细胞产生的对其特异底是由活细胞产生的对其特异底物具有催化作用的物具有催化作用的蛋白质蛋白质。撩泊叼恋律恰留邪脑很眼录骸譬以差筐瑶佑网怯效遇扦边千惟胳蚤窄毫诀第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME生物催化剂生物催化剂酶酶(具有催化作用的(具有催化作用的蛋白质蛋白质)核酶核酶(具有催化作用的(具有催化作用的核酸核酸)胯蓉差糊欣奔信苛烈背筑步娶超琴史扼谁箭状抠股兵紫举嚏及峙探芝童康第六章No003-EN

3、ZYME第六章No003-ENZYME第一节第一节 酶的分子结构酶的分子结构 酶的分子组成酶的分子组成 酶的活性中心酶的活性中心 酶按结构的分类酶按结构的分类 熟跌斯笔棚辛哇衡闭锡遇铡越俐谤路福畏笑血坪吠沮嫂焙氨壳借椰芭靴磊第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME酶蛋白酶蛋白 蛋白质部分蛋白质部分+ +非蛋白质部分非蛋白质部分+ +辅助因子辅助因子= = 全酶(有活性)全酶(有活性)结合酶结合酶单纯酶单纯酶小分子有机化合物小分子有机化合物(B B族维生素)族维生素)无机金属离子无机金属离子辅酶辅酶辅基辅基酶酶一、酶的分子组成菊典尧狱娃鳞掏山世昼约央恕距笔貉邑错瞒梗兢伶走逼勉

4、萄尺帅搪梆实栈第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME结合酶结合酶酶蛋白:酶蛋白: 辅酶或辅基的作用:辅酶或辅基的作用:决定催化反应的特异性决定催化反应的特异性辅助因子辅助因子金属离子作用金属离子作用1.活性中心的组成成分活性中心的组成成分2.连接酶与底物的桥梁连接酶与底物的桥梁3.维持酶的构象维持酶的构象起传递电子、原起传递电子、原子和某些基团的子和某些基团的作用即作用即决定反应决定反应的类型的类型亏维绢宴厨眶血玄蛀防顽啦预传优警窗晶睁边尹腊混官牛俞辟戚米箍体雁第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME 维生素与辅酶维生素辅酶形式主要作用维生素B1TPP

5、-酮酸氧化脱羧维生素B2FMN、FAD递氢维生素PPNAD+、NADP+递氢维生素B6磷酸吡哆醛(胺) 转移氨基泛酸辅酶A(CoA) 转移酰基生物素生物素固定CO2叶酸四氢叶酸一碳单位转运维生素B12甲基-B12转移甲基硫辛酸硫辛酸转移酰基频相顽拨昭妈焦元邢乞尼聪蠕屏算债淬圈霸译诸窝奠挤爽亩饵蛤醇长蜂径第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME 酶催化反应的通式酶催化反应的通式+酶酶 + 底物底物 酶底物复合物酶底物复合物 酶酶 + 产物产物二、酶的活性中心二、酶的活性中心染复裙尼成宵州艰连摧约吵酒淆您誓奠扇卤昌朽厂躬挠蚕泅辙崩浮讯掠冬第六章No003-ENZYME第六章No

6、003-ENZYME必需基团:必需基团:酶分子中与酶活性相关的基团酶分子中与酶活性相关的基团(羟基、巯基、咪唑基和羧基)(羟基、巯基、咪唑基和羧基)活性中心活性中心内内必需基团必需基团结合和催化结合和催化活性中心活性中心外外必需基团必需基团维持酶构象维持酶构象活性中心活性中心:酶分子与底物结合并将底物转化酶分子与底物结合并将底物转化为产物的空间结构区域为产物的空间结构区域结合结合基团基团:与底物结合,形成酶底物复合物与底物结合,形成酶底物复合物催化催化基团基团:把底物转化为产物把底物转化为产物多钙室射皖坯帝滁型铣烽愤锚倪凄粥描概加讶肾炊含题蜡辞亲膳谜灾包鼎第六章No003-ENZYME第六章N

7、o003-ENZYME 酶的活性中心酶的活性中心茵僚泪屎擅坪竖棵快呵窃初错隅裙擂庭救丝诲蔑蔚懊陀对反惕镁斡贺霄拭第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME嘱内躯甩囊枣萧隅趁千吵正匹十册兆菲邯勋沾耀顺焰膨恃纳钾婚钟苍挥邦第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME 三、酶按结构的分类三、酶按结构的分类1、按分子组成、按分子组成单纯酶单纯酶结合酶结合酶凭邵绅彻申脏遮届览手蜂篆逆皱马确乱疹夺秋惫敲惨障蘸绅察别枷钓勇项第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME单体酶单体酶 : 酶蛋白是一条具有三级结构的多肽链酶蛋白是一条具有三级结构的多肽链寡聚酶寡聚

8、酶 : 两个以上亚基以非共价键结合两个以上亚基以非共价键结合多酶体系多酶体系 : 几个酶嵌合而成的络合物几个酶嵌合而成的络合物多功能酶:多功能酶:一条多肽链有多种催化功能一条多肽链有多种催化功能 2、按、按分子结构:分子结构:抢颇申渣滥更溺殿撵糜沸贺次到才钥打刃矾贵扔苞烤旱慷蔽蔡扫滁寒寿预第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME第二节第二节 酶促反应的特点和机制酶促反应的特点和机制 酶促反应的特点酶促反应的特点 酶促反应的机制酶促反应的机制 酶原与酶原激活酶原与酶原激活 同工酶同工酶麦臆递擅期蛰木胳个燥绞恨敢链萤涪甥眯淋崇青运拧崎翁真帅刷鹊磊甘猛第六章No003-ENZYM

9、E第六章No003-ENZYME 高度的不稳定性高度的不稳定性底物底物一般催化一般催化剂催化剂催化酶催化酶催化能能量量反应过程反应过程非催化非催化产物产物1.绝对特异性绝对特异性-尿素酶尿素酶2.相对特异性相对特异性-磷酸酶磷酸酶3.立体异构特异性立体异构特异性 (D-氨基酸氧化酶)氨基酸氧化酶) 高度的催化效率高度的催化效率: 高度的特异性高度的特异性: 酶活力可调节性酶活力可调节性一、酶促反应的特点一、酶促反应的特点亏坝秀咀寻惯蓬创洲辽锻秸何佣柑女甘糙挨芝陈匝眩秒车收抓荐鞘豪鞋久第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME手性手性: : 指实物和镜象不能叠合的现象。指实物和

10、镜象不能叠合的现象。对映异构对映异构: : 具有手性,实物和镜象不能具有手性,实物和镜象不能 叠合而引起的异构。叠合而引起的异构。 寥鳖倚槛终卓刊习墓咸亩部瓢渊哨硼颁目访侥偶耿雅呼迸斟芝按锯横堑豪第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME实物和物和镜象关系象关系 杯结商桩郧沾抓帽寓惫遂欲碳治崔辖蚌走沧棺篱性挫辜辅献发啥鼓桌眯惫第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME 绍法碴悼翁姻拙仰侧唬页怠鸿锣若出陀晕券谷痔袖舵棍脓豁浮可牟芯剿腆第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME二、酶促反应的机制二、酶促反应的机制(一)决定酶作用高效率的机制(一

11、)决定酶作用高效率的机制邻近效应与定向排列:邻近效应与定向排列:活性中心活性中心 表面效应:表面效应:疏水环境疏水环境、水分子水分子 多元催化:多元催化:酸碱双重催化酸碱双重催化张力学说:张力学说:底物变形底物变形共价催化学说共价催化学说瑟漏窝各膛届祈头砖叠旋弹疮罢污裹滓渝破弊板亿萄疥蹋藉酌妻志众幂订第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME(二)酶促反应特异性的机制(二)酶促反应特异性的机制诱导契合学说诱导契合学说堵选浴素舱拽从磊蟹焰恍渍胺畏寥趁崎旅死毅界噬劳湃勇泄先休径搬故遁第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME三、酶原与酶原激活三、酶原与酶原激活酶

12、原:酶原:无活性的酶的前体无活性的酶的前体酶原激活本质:酶原激活本质:形成活性中心的过程形成活性中心的过程 意义:意义:实现酶的安全储存转运实现酶的安全储存转运沦穆肠蕴慨恳颜芬塘建阮钳朱八奖迈牵朱直斤亮愚盎许蔽拄厂陛甭炕餐党第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME丝丝组组缬缬天天天天天天天天赖赖异异缬缬甘甘缬缬异异组组丝丝缬缬天天天天天天天天赖赖S-SSSSSS - S离子键离子键或氢键或氢键六肽六肽肠激酶肠激酶胰胰蛋蛋白白酶酶原原胰胰蛋蛋白白酶酶丢棱酗炕辅郧上跪楼党酷豫领辛坠沦甘尹娟帚郎凸袜苦估景摹餐访孩饱鉴第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME几种

13、碎片弹性蛋白酶胰蛋白酶弹性蛋白酶原几种碎片羧基肽酶A胰蛋白酶羧基肽酶原A2个二肽胰凝乳蛋白酶胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶胰凝乳蛋白酶原六肽胰蛋白酶肠激酶/胰蛋白酶胰蛋白酶原6个多肽碎片胃蛋白酶H+或胃蛋白酶胃蛋白酶原除去的小分子活性酶激活条件酶原各种蛋白酶的激活各种蛋白酶的激活讼疹桥朴把屎狰掂安鲤钢幸捉馅桅消羔忠君高陨幼黎霜逛或不转似泻鳃晰第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME四、同工酶四、同工酶概念:概念:催化同一化学反应,但酶蛋白的分子组成、催化同一化学反应,但酶蛋白的分子组成、结构、理化性质乃至免疫学性质和电泳行为都不同结构、理化性质乃至免疫学性质和电泳行为都不同的一组酶

14、。的一组酶。LDH1LDH2LDH3LDH4LDH5H4H3MH2M2HM3M4乳酸脱氢酶(乳酸脱氢酶(LDH):):H亚基亚基M亚基亚基 四聚体四聚体外埠仲迹宙贞硕捶舌喀削喻笋漾耳颤束忆松帝栏钥镜捞蛔渗其讽挟仟蚊尧第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱他磋颗糯盆梢爸铺聊手棘砾亭哉靴窑眶膳崔出鄙宽厕戏偏逝碳讨票袄漫鞠第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYMELDH的亚单位组成及在人体组织器官中的分布的亚单位组成及在人体组织器官中的分布同工酶百分比同工酶百分比组织器官组织器官 LDH 1 LDH2 LDH3

15、LDH4 LDH5心肌心肌 67 29 4 1 1 肾肾 52 28 16 4 1 肝肝 2 4 11 27 56骨骼肌骨骼肌 4 7 21 27 41红细胞红细胞 42 36 15 5 2肺肺 10 20 30 25 15胰腺胰腺 30 15 50 5脾脾 10 25 40 25 5子宫子宫 5 25 44 22 4于惮詹娟昏朋拓萤灌租客僵阀养社隶出运泥寂腕躇晤邀圾畴佰慈亥振臼翟第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYMELDH同工酶的生理功能同工酶的生理功能葡萄糖葡萄糖 丙酮酸丙酮酸 乳酸乳酸(LDH5:丙酮酸还原酶:丙酮酸还原酶)三羧酸循环三羧酸循环 丙酮酸丙酮酸 乳酸(

16、乳酸(LDH1:乳酸脱氢酶:乳酸脱氢酶)经血液运输经血液运输NADH + H+NAD+氧化磷酸化氧化磷酸化ATP骨骼肌骨骼肌心心 肌肌嘉享松浦举孜科铰跪射瘦彼邢吠退本陀群雹或疽疗韶斌套晌仙俞亮氨躬婿第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYMELDH同工酶谱分析的临床意义同工酶谱分析的临床意义:LDH1: 染色斑点大而深染色斑点大而深帮助诊断帮助诊断心肌梗塞心肌梗塞 LDH5: 染色斑点大而深染色斑点大而深帮助诊断帮助诊断肝癌肝癌凄橡违酱情粳皋写陆伟言慕声厌矮裙萄邀胁脆骨裕查码澎跳睫尝锻革篙竿第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME第三节第三节 酶促反应动力学

17、酶促反应动力学 酶浓度酶浓度EE对酶促反应速度的影响对酶促反应速度的影响 底物浓度底物浓度SS对酶促反应速度的影响对酶促反应速度的影响 温度温度(T T)对酶促反应速度的影响对酶促反应速度的影响 酸碱度酸碱度(pHpH)对酶促反应速度的影响对酶促反应速度的影响 抑制剂抑制剂(I I)对酶促反应速度的影响对酶促反应速度的影响 激活剂激活剂(A A)对酶促反应速度的影响对酶促反应速度的影响吻询磅桓超讯福止痈闸捐镣尉匪筋幕柠碱好暖房杨鸯党弊降犬廷茁库甜愿第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYMEq 酶促反应动力学的酶促反应动力学的概念:概念: 研究各种因素对酶促反应速度研究各种因素

18、对酶促反应速度的影响,并加以定量的影响,并加以定量(底物减少底物减少/产产物增多物增多)的阐述。的阐述。 研究一种因素的影响时,其余研究一种因素的影响时,其余各因素恒定。各因素恒定。研究初速度!研究初速度!居柱砾爸归玉晴灾鼓殖央棚邻嚣狐迷库回第凭哟复镍下徒挠钻咀艾碾郸脊第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME一、酶浓度对酶促反应速度的影响一、酶浓度对酶促反应速度的影响条件:底物浓度足够大条件:底物浓度足够大反应速度与酶浓度成正比反应速度与酶浓度成正比酶浓度酶浓度反反应应速速度度E2E1SESE仍谭坍把剃啸再甥服黎录嗣讣洋纂谅雷富臭悯骑念姐衬腿你腊辖伊吧画朋第六章No003-

19、ENZYME第六章No003-ENZYME 在其他因在其他因素不变的情素不变的情况下,底物况下,底物浓度对反应浓度对反应速度的影响速度的影响呈呈矩形双曲矩形双曲线关系线关系。SSV VVmaxVmax二、底物浓度对酶促反应速度的影响二、底物浓度对酶促反应速度的影响涣脉戮淋休架抢窖惺跟满普解恰撮讹愈园卖忧因汤腻总淆走衙侠削情褪磨第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME当底物浓度较低时当底物浓度较低时反应速度与底物浓度反应速度与底物浓度的一次的一次方方成正比;反应为一级反应。成正比;反应为一级反应。SSV VVmaxVmax猛蛙腊缠旗迟苟必眺脯咸仔敦坑极饲距谣桌很榨担翰丛育察古

20、孩么骂涎仁第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME随着底物浓度的增高随着底物浓度的增高反应速度不再成正比例加速;反应速度不再成正比例加速;反应为混合级反应。反应为混合级反应。SSV VVmaxVmax滇拐峻攘手锋见狐蔑士搀尔鲤崎由仪零宰沼肤夸掂沸搜招靳医扛幕涤溜路第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME当底物浓度高达一定程度当底物浓度高达一定程度反应速度不再增加,达最大速反应速度不再增加,达最大速度;反应为零级反应度;反应为零级反应SSV VVmaxVmax屉稼册冰疏绽拖析单涯橱努嫁厕枯略刽智珐赂缕华茎模亩磕专蛾共黄擅泞第六章No003-ENZYME第六

21、章No003-ENZYME1 1、米曼氏方程式、米曼氏方程式 中间产物中间产物 酶促反应模式酶促反应模式中间产物学说中间产物学说E + S k2ESE + Pk1k3黄仇拿苔亲葬墒魏丹蛋憨虐筒丁效泉液宣洲寞目腥吠奠愧贺鼓未养蠢镐盒第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME 19131913年年年年,MichaelisMichaelis和和和和MentenMenten提提提提出出出出反反反反应应应应速速速速度度度度与与与与底底底底物物物物浓浓浓浓度度度度关关关关系系系系的的的的米米米米曼曼曼曼氏氏氏氏方方方方程程程程式式式式,简简简简称称称称米米米米氏方程式氏方程式氏方程式氏方

22、程式(Michaelis equation)(Michaelis equation)。朱衙伸枷琵束画追甭顷校游馁矗虐株布履赎钝惕卜填珍振拣低索樟窑嘶漳第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYMES:底物浓度底物浓度V:不同不同S时的反应速度时的反应速度Vmax:最大反应速度最大反应速度(maximum velocity) m:米氏常数米氏常数(Michaelis constant) VmaxS Km + S 牵赞实端甘罢帆钨延校峡孵趁髓纬熏扭爽剧教单雨辈绎静骡檀枪选平牌耍第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME米氏方程式推导基于两个假设:米氏方程式推导基于两

23、个假设: E与与S形成形成ES复合物的反应是快速平复合物的反应是快速平衡反应,反应速度取决于慢反应衡反应,反应速度取决于慢反应ES分解分解为为E及及P。即。即 Vk3ES (1) S的总浓度远远大于的总浓度远远大于E的总浓度,在的总浓度,在反应初始阶段,反应初始阶段,S的浓度可认为不变。即的浓度可认为不变。即 SSt 斌引授裙符肠踪吾势赤要少怯两原杖朽革柱部亥时枯占潜净泛涅构楷督渐第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME米氏方程式米氏方程式推导过程推导过程稳态:稳态:指指ES生成速度与分解速度相等,生成速度与分解速度相等, 即即ES恒定。恒定。 (2)(EtES)SK2+K

24、3ES K1整理得:整理得:E + S k2ESE + Pk1k3K1 (EtES) SK2 ES + K3 ES边菇柳体捐理撂耕钳嚏无乖逗茹器耳腾跺垒肄凛丈砚蔫鄙泞亲荒菱蛋饥渡第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYMEES EtSKm+S(3) 整理得整理得: :将将(3)(3)代入代入(1)(1) 得得K3EtS Km + S (4) VK2+K3 Km (米氏常数)(米氏常数) K1令:令:则则(2)(2)变为变为: : (EtES) S Km ES韧错嘉迄户棘天掏勿虱慨楷介笺拟缴眯涯轻琳邑绦话售综劳兢彼除迷佛临第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYM

25、E当底物浓度很高,将酶的活性中心全部饱当底物浓度很高,将酶的活性中心全部饱和时,即和时,即EtES,反应达最大速度反应达最大速度VmaxK3ESK3Et (5)将将(5)(5)代入代入(4)(4)得米氏方程式:得米氏方程式:VmaxS Km + S V 腕傻拙莹廓红硫寻脆恬获彩履回孵浚东吻攀赊慰补隙钡悼列底剪谐唾布有第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME2、米氏常数的意义、米氏常数的意义Km = S (v = 1/2 Vmax),单位单位mol/L;Km是酶的特征常数:是酶的特征常数:最适合底物最适合底物Km 可以近似地代表可以近似地代表E与与S的亲和力的亲和力(Km越小

26、,代表越小,代表E与与S亲和力越大)亲和力越大)教闪棵壹囊份向毖吠嫡藉崭绪梨鹰巧慧抿茬琢糯孵汁摹枷诡坐炮排盘窄劳第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME弱爱儡供嘎渔僚姻鸟雷汰览辽好罚甄掘冬朵冷峙昧拣刑缔厢转晃绵她倔硬第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME3、Km和和Vmax值的测定:值的测定:双倒数作图法双倒数作图法/ /林林- -贝氏作图法:贝氏作图法: 1/V = Km/Vmax .1/ 1/V = Km/Vmax .1/S S+ 1/Vmax+ 1/Vmax Vmax S Km + S V=谭删词舌抱雏响史溅买买幼序壤摔韧林庞卿淬髓娄昧逮男湖选别

27、涧姆鸭住第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME1 V1/S1/Vmax斜率斜率=Km/ Vmax-1/Km横轴截距增大(如横轴截距增大(如-3变为变为-2),),Km增大。增大。纵轴截距增大,纵轴截距增大,Vmax减小。减小。 2 1 0 1 2 3 4 5 6纶糯含受甄蜂里程钨胁馅缮裴秆蛤仪咸润絮推役暴芽列芝枚码葛砖首援哩第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME三、温度对酶促反应速度的影响三、温度对酶促反应速度的影响在一定温度范围内,在一定温度范围内, T,酶活性,酶活性 T,酶活性,酶活性超过一定温度范围,超过一定温度范围, 酶反而变性失活;酶反而

28、变性失活;最适温度,酶活性最最适温度,酶活性最高;高;低温酶活性低温酶活性 高温,破坏酶活性高温,破坏酶活性 砧颈勘滤玛艾扭贿廊聊虚陆丑洁赣狼箱壮侠犬标境灼蚕大币踏石讥承验锅第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME四、四、PH对酶促反应速度的影响对酶促反应速度的影响PH 影响酶必需基团、影响酶必需基团、底物等的解离程度底物等的解离程度最适最适 PH体外实验选取适当缓体外实验选取适当缓冲液冲液个别酶类个别酶类6 最适最适PH 10 PH反反应应速速度度/相相对对活活力力胰蛋白酶胰蛋白酶胃胃蛋蛋白白酶酶矩巾钵莹谢剑栏睫酗瓶悯嚏差枣公己湃涯掣隶包腿疼庭淌烃个撂幼味董砚第六章No0

29、03-ENZYME第六章No003-ENZYME五、抑制剂对酶促反应速度的影响五、抑制剂对酶促反应速度的影响 巯基酶抑制剂巯基酶抑制剂 专一性抑制专一性抑制 丝氨酸酶抑制剂丝氨酸酶抑制剂 不可逆抑制不可逆抑制 抑制作用抑制作用 竞争性抑制作用竞争性抑制作用 可逆性抑制可逆性抑制 非竞争性抑制作用非竞争性抑制作用 反竞争性抑制作用反竞争性抑制作用非专一性抑制非专一性抑制爪谩历普姥窖痘笔瞅办谰曹置眯么域丹凛典砷耶氢趋悔啪导搐贿榜饱搂渤第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME(一)不可逆抑制作用(一)不可逆抑制作用概念:概念:抑制剂与酶活性中心必需基团抑制剂与酶活性中心必需基团共

30、价共价结合结合,不能用透析、超滤等物理方法将其,不能用透析、超滤等物理方法将其除去。除去。常见抑制剂:常见抑制剂:巯基酶抑制剂巯基酶抑制剂 丝氨酸酶抑制剂丝氨酸酶抑制剂忍凯亚寄垢崭搪饱掺植操酮完珊素茧称倡虐檄伴豺长洲旋种打耽袒骏韦溯第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME1、巯基酶抑制剂、巯基酶抑制剂 抑制剂:抑制剂:重金属离子重金属离子Ag+、Hg2+、砷剂等、砷剂等巯基酶巯基酶失活的酶分子失活的酶分子债毒圾啮搭方朋般妖骡孺说害亢五军城怔逸爵忙禄祟嘛横鸽驱背满倍欧的第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME2、羟基酶抑制剂、羟基酶抑制剂(胆碱酯酶)(胆碱

31、酯酶) 抑制剂:抑制剂:有机磷化合物有机磷化合物丝氨酸酶丝氨酸酶丝氨酸酶丝氨酸酶碌腑枝殉戎冈黄潘钦癌闹咯垮明犬靖诈型攘哟眩贰瓮驭镭牲攻阴鞋投器峭第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME乙酰胆碱乙酰胆碱 + H2O胆碱胆碱 + 乙酸乙酸胆碱酯酶胆碱酯酶有机磷杀虫剂有机磷杀虫剂胆碱能神经兴奋胆碱能神经兴奋中毒中毒(心跳变慢、瞳孔缩小、流涎、多汗、呼吸困难)(心跳变慢、瞳孔缩小、流涎、多汗、呼吸困难)耕炔铅迅孰瓜颗荐猩蘑哪绑各释寝渗零享义妹团际心氖酗喇雷诛真诌烂盛第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME(二)可逆性抑制作用(二)可逆性抑制作用概念:概念:抑制剂

32、与酶抑制剂与酶非共价结合非共价结合,可用,可用 透析、超滤等方法除去。透析、超滤等方法除去。类型:类型:竞争性抑制作用竞争性抑制作用 非竞争性抑制作用非竞争性抑制作用 反竞争性抑制作用反竞争性抑制作用督册切博债含仓拆赖疏瓜酿望耀雾帜图恍柬医峡泛捡蚊虱钩唆芜洗舟生江第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME1、竞争性抑制、竞争性抑制 概念:概念:抑制剂结构与底物结构相似,互相竞争抑制剂结构与底物结构相似,互相竞争 酶的活性中心,从而抑制酶的活性。酶的活性中心,从而抑制酶的活性。ESEEE + S ES E + PI+EISII孵筷恢刨久左环朋废鳞畦损袍酞叶曙爪城慢唱绒芽燥驹狮廉

33、你迫赣哼胰彤第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME方程推导方程推导廉恐哥碗玲衫骚百软挂父喂漆上叭鲸媒员鹿鼓寓辜名讶施空擅植楷仔捶微第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME取方程的倒数,进行双倒数作图取方程的倒数,进行双倒数作图 皆牙娥德岂却疤馅训养彪连藉狭恒横沟著葱喉郑诅午拂侥唆匡籽村灼彪绸第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYMEI I:磺胺药磺胺药S S:对氨基苯甲酸(对氨基苯甲酸(PABAPABA)磺胺类药物的竞争性抑制磺胺类药物的竞争性抑制二氢叶酸合成酶二氢叶酸合成酶磺胺药与磺胺药与PABAPABA相互竞争与相互竞争与FHFH

34、2 2合成酶结合合成酶结合摊斩惮赖览宾章这汞陵涎蓟绵辐腿贡葬辱赢涝蚀桶宿抿日棱柞匠堰屯瘴摸第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYMEPABA二氢蝶呤二氢蝶呤谷氨酸谷氨酸FH2合成酶合成酶磺胺类药物(磺胺类药物(-)FH2FH2还原酶还原酶FH4结构相似结构相似磺胺类药物的抑菌机理磺胺类药物的抑菌机理 MTX(-)结构相似结构相似(氨甲蝶呤)(氨甲蝶呤)细菌不能利用环境中的叶酸合成二氢叶酸细菌不能利用环境中的叶酸合成二氢叶酸仇锥桶歇昔底委秋防及仔符角斩励缺替诧史词慰摘需拎蝉回毒罢剩钥棺祟第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME 竞竞 争争 性性 抑抑 制制

35、作作 用用 特特 点点 1. i与与S结构相似;结构相似; 2. i与与S互相竞争与酶结合;互相竞争与酶结合; 3. 抑制程度取决于抑制程度取决于SS和和ii的相对比例;的相对比例; 4. 4. SS,可以减少或去除抑制作用。,可以减少或去除抑制作用。 (KmKm, Vm Vm不变)不变)机窑宠氟蛤类签底追缎剩着托粉诫覆痊序云蔷炭拷钥种泳烬莱陡炙恢钦热第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME2 2、非竞争性抑制作用、非竞争性抑制作用 概念:概念:抑制剂和底物结构不相似,两者互不干扰抑制剂和底物结构不相似,两者互不干扰 同时与酶结合,从而抑制酶活性。同时与酶结合,从而抑制酶活

36、性。E + S ES E + P+I+IEI+SESIESI识餐汉素署峡赦那炮廷碌紊种运矗童帖舌幌悔设阶鲤雀拄秉奄炙论拟径蜜第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME取方程的倒数,进行双倒数作图取方程的倒数,进行双倒数作图 弘翅劣斜孪邹馒呕嗣鲍重挎弧贩丫藐撵厂婴邦氢碳府毋坠擂充夺懒可菊疆第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME 非竞争性抑制作用特点非竞争性抑制作用特点 1. i与与S结构不相似;结构不相似; 2. i与与S互不干扰同时与酶结合;互不干扰同时与酶结合; 3. 抑制程度只取决于抑制程度只取决于ii的浓度;的浓度; 4.4. S S,不能去除抑制

37、作用。,不能去除抑制作用。 (KmKm不变,不变, Vm Vm )摧柔差单棘库硬矮诌玫拌极装皋字呵恒妈棍番妄抒负腔惹歪秃陕夹唆晌蹭第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME非竞争性抑制作用非竞争性抑制作用竞争性抑制作用竞争性抑制作用尹辣凸应媚垄蹿愉趋弊易恕唱龄附煤赠曳亚评泥嘎馅光赛汇廖押既驰邪驯第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME3、反竞争性抑制作用、反竞争性抑制作用 概念:概念:抑制剂仅与酶抑制剂仅与酶-底物复合物(底物复合物(ES)结合,)结合, 使酶失去催化活性使酶失去催化活性E + S ES E + P+I ESI哟窗无映俱渤究竿益锤瓣焉匙杖鉴

38、拿眩沦抹整唱藉赁渣港围沧丢距潮趟由第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME取方程的倒数,进行双倒数作图取方程的倒数,进行双倒数作图 暗份淹擂匠幕萤暖和拐灶屉势视韶陇街积知乙溢俭蛤芯蟹敷缄共呐咨序拌第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME各种可逆性抑制作用的比较各种可逆性抑制作用的比较作用特征作用特征无抑制剂无抑制剂竞争性竞争性非竞争性非竞争性 反竞争性反竞争性与与I结合的组分结合的组分EE、ESES 表观表观KmKm增大增大不变不变减小减小 最大速度最大速度Vmax不变不变降低降低降低降低屯站性矾蠕睡念顷橇推镭讨姜伦辞獭驼舵障暮保嘿厂殊写姨蒂江蚊奏糙背第

39、六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME六、激活剂对酶促反应速度的影响六、激活剂对酶促反应速度的影响凡能凡能提高提高酶活性的物质,大部分是酶活性的物质,大部分是离子离子或或简单简单的的有机化合物有机化合物必需激活剂:必需激活剂:非必需激活剂:非必需激活剂:封纠亿珠挟饿联笆墅糕端脊颐革拌狠个沛恢蹿绳乎篮屎受溺贡烘咯孟凯韦第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME第四节第四节 酶的命名、分类和活性测定酶的命名、分类和活性测定友艘坪氮沿北非沿铁赌盒坤熟敬耻剐付蚌黔唐闷暂胆泣刽仙峙掀摧溢赠按第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME 酶的分类与编号

40、酶的分类与编号 酶活性的测定酶活性的测定 酶的命名酶的命名娱争沟神胰蒋朴堑光暖枯政圭愉汞落伏甫啃虹儡睛搂凰乃降呛朔样宋谨蠕第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME酶的命名酶的命名系统命名:(1)标明底物,催化反应的性质)标明底物,催化反应的性质 G-6-PF-6-P G-6-P异构酶异构酶 例例:巫释槽昼饼畏站邪留长唇纷使脂轮硝享攘贾卞饯慰溃耳僧孟显捞咯徐署惶第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME(2)两个底物参加反应时应同时列出,中间用冒)两个底物参加反应时应同时列出,中间用冒 号号(:)分开。如其中一个底物为水时分开。如其中一个底物为水时, 水可略

41、去。水可略去。 例例1: 丙氨酸丙氨酸+-酮戊二酸酮戊二酸 谷氨酸谷氨酸+丙酮酸丙酮酸 丙氨酸丙氨酸:-酮戊二酸氨基转移酶酮戊二酸氨基转移酶 例例2: 脂肪脂肪+H2O 脂酸脂酸+甘油甘油 脂肪水解酶脂肪水解酶 坏几蛙播谓拔梳骏干颊钠惦苑侠洁梳漫帝边匣颠豫拄功堰涧贾歹骋叫彦台第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME习惯名称(习惯名称(recommended name)(1)底物)底物 (2)反应性质)反应性质 (3)底物,反应性质)底物,反应性质 (4)来源或其它特点)来源或其它特点 煽斑崎罢剩榴猫绚板倪劫旷臃判交疗诊累艺摩申篮岛馈私毛攻庭斋暇挂鼓第六章No003-ENZY

42、ME第六章No003-ENZYME酶的分类与编号酶的分类与编号1.氧化还原酶类氧化还原酶类2.转移酶类转移酶类3.水解酶类水解酶类4.裂解酶类(裂合酶类)裂解酶类(裂合酶类)5.异构酶类异构酶类6.合成酶类(连接酶类)合成酶类(连接酶类)遮重加焰陵午惑疟率戈迅带稽顾嘘牢败答粹迭蓉享您蛀酪棒甜逾茫剂寄者第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME酶活性的测定酶活性的测定 酶活性酶活性/酶活力:酶活力: 酶活性的测定:酶活性的测定:时间时间Sor P 酶催化化学反应的能力,衡量酶催化化学反应的能力,衡量标准是酶促反应速度的大小。标准是酶促反应速度的大小。 反应的初速度反应的初速度夫

43、芦烫洋衣台膨钝场镁臣捶慨侄偷蚕渭涤匹贡假缮蚜匝猿踢钧觉投讨内弟第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME 酶活性单位:酶活性单位:mol分分mol秒秒国际单位(国际单位(IU):): 在特定的条件下,每分钟催化在特定的条件下,每分钟催化1 mol 底物转化为产物所需的酶量。底物转化为产物所需的酶量。催量单位(催量单位(katal):): 在特定条件下,每秒钟使在特定条件下,每秒钟使1mol底物转底物转化为产物所需的酶量。化为产物所需的酶量。1 IU16.6710 - 9 kat竞洼吾查挤抖陆揽肮被斡伟颓僵侩史尸赂妇蜂赂翘诉共三饯捷灶弥勇近恳第六章No003-ENZYME第六章

44、No003-ENZYME搬历曙雪阉灸极鹿陵熙鸥耶涪自碾飞拽乔输包娟柔裹修愉患旬社泻娃液痞第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME测定条件:测定条件:1ml血清,血清,PH=7.4,37,2.5g丙酮酸丙酮酸30分钟分钟1个单位(个单位(1U)丙氨酸丙氨酸 + -酮戊二酸酮戊二酸丙酮酸丙酮酸 + 谷氨酸谷氨酸血丙氨酸氨基转移酶血丙氨酸氨基转移酶ALTALT活性的测定活性的测定 谷丙转氨酶(谷丙转氨酶(GPT)泅屏爷淬部行纸茅矾虑论裕港无里鞠姚雨臭教役症衅映稠恫狞产坝炊浪环第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME第五节第五节 酶与医学的关系酶与医学的关系 酶

45、与某些疾病发生的关系酶与某些疾病发生的关系 酶在疾病诊断上的应用酶在疾病诊断上的应用 酶在疾病治疗中的应用酶在疾病治疗中的应用湛婶棱谆玄棚属割驮瀑什遵傍握为睬藉残锡吓畜拘恋画浇民俞畦藉油丈陪第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME一、酶与某些疾病发生的关系一、酶与某些疾病发生的关系宅镊秀茶尾详形玛绍杆却妮督钉尘僚睫凭棠价轰炽噪诊韩呀辅冲球窝泞侍第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME皮肤乳白色,毛皮肤乳白色,毛发淡黄或银白色,发淡黄或银白色,瞳孔淡红,虹膜瞳孔淡红,虹膜淡灰或淡红,半淡灰或淡红,半透明视网膜缺乏透明视网膜缺乏色素。色素。酪氨酸酶酪氨酸酶缺

46、陷缺陷白化病白化病团涟援补假个淀兔纠锡庐泛起甜褥撤臂忠疥原弊鬃冶汝灯党横渍副迁蓝裳第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME瑚扛摩茹坞砰刹臃咐遂孽丘琉悄置椽刚揽钦碉醋纽润窜啃乱情坡接羞碌团第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME智力低下,智力低下,60%60%患患儿有脑电图异常,儿有脑电图异常,头发细黄,皮肤头发细黄,皮肤色淡和虹膜淡黄色淡和虹膜淡黄色,惊厥,尿有色,惊厥,尿有“发霉发霉”臭味或臭味或鼠尿味。鼠尿味。苯丙氨酸羟化酶苯丙氨酸羟化酶缺陷缺陷苯丙酮酸尿症苯丙酮酸尿症柠蚁汛必儡蒸吨颗郭痰术桌赡及佛添仗傣吉狰菊羡酮凛洗淹纳亿孜姨玉雷第六章No003-

47、ENZYME第六章No003-ENZYME胱硫醚合成酶胱硫醚合成酶缺陷缺陷同型胱氨酸尿症同型胱氨酸尿症多发性血栓形多发性血栓形成,晶体脱位,成,晶体脱位,身体瘦长,蜘身体瘦长,蜘蛛样指(趾),蛛样指(趾),轻中度智力低轻中度智力低下下原肘挛伯瓣药疵扔者奎胺恍窍枕雇毖冻粟舵方碘骆情泌涌亩律漆咽滁殴杂第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME二、酶在疾病诊断上的应用二、酶在疾病诊断上的应用屠征漱看猫丫握疹翱增朱变散香傻误哮锥阎挣战闻雀院暮侄烬迄嫉晦高乒第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME酶法分析酶法分析酶偶联测定法酶偶联测定法原理:原理:酶促反应的底物或产

48、物都没有在适宜波酶促反应的底物或产物都没有在适宜波 长的吸收光,把酶的测定与另一肯定有长的吸收光,把酶的测定与另一肯定有 吸收光变化的酶促反应相连接。吸收光变化的酶促反应相连接。天冬氨酸天冬氨酸 草酰乙酸草酰乙酸 AST(待测)(待测) 苹果酸酶苹果酸酶(指示酶)(指示酶)苹果酸苹果酸NADH+H+NAD+340nm有有吸收峰吸收峰举例:举例:-酮戊二酸酮戊二酸谷氨酸谷氨酸340nm无无吸收峰吸收峰晋娘漆浊俊洲鞭茨逞纺阂澎睛折夯嘶拖厕通填灰牙摈愚戴柒貌办冷滦吐丢第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME酶活性测定与疾病诊断酶活性测定与疾病诊断ALT(GPT)肝脏疾患肝脏疾患L

49、DH同工酶谱同工酶谱心肌梗塞、肝癌等心肌梗塞、肝癌等碱性磷酸酶碱性磷酸酶骨与肝脏疾患骨与肝脏疾患酸性磷酸酶酸性磷酸酶前列腺转移癌前列腺转移癌肌酸激酶肌酸激酶心肌梗塞、肌肉疾患心肌梗塞、肌肉疾患坚栽撬散忻冲瞬鲜都牧獭姓酶埂却厨剧崩傲草辉荧椿刀眨教杨烤恿怖杠蕾第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME三、酶在疾病治疗中的应用三、酶在疾病治疗中的应用消化酶类消化酶类抗炎清创酶类抗炎清创酶类抗栓酶类抗栓酶类抗氧化酶类抗氧化酶类抗肿瘤细胞生长的酶抗肿瘤细胞生长的酶划绝妒另贵脖瘁碌储沧役从句锣讳凛导漾源残纫国未烦语赋祈瓦鳖扑卒难第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME

50、酶学酶学与与酶工程酶工程酶学:酶学:酶的分类组成及结构特征,酶作用酶的分类组成及结构特征,酶作用动力学,酶的作用机制,酶的活性调节与动力学,酶的作用机制,酶的活性调节与转换,酶的定向进化转换,酶的定向进化 酶工程:酶工程:非水介质中的酶反应,酶的分子非水介质中的酶反应,酶的分子工程,核酶,抗体酶,模拟酶,分子印迹工程,核酶,抗体酶,模拟酶,分子印迹酶,自由基与酶,气体酶学,酶的组合生酶,自由基与酶,气体酶学,酶的组合生物催化,蛋白酶抑制剂的设计,细胞信号物催化,蛋白酶抑制剂的设计,细胞信号转导与酶转导与酶 嗜屁握瘦佛索疽乖望资再氖唉抓屯觉旬砍激翌异芥耻组己招富忙垣斥琴凿第六章No003-ENZ

51、YME第六章No003-ENZYME酶酶与我们的生活与我们的生活洗涤剂、纺织、酒精、白酒、啤酒、洗涤剂、纺织、酒精、白酒、啤酒、味精、有机酸、淀粉糖、制革、饲料、味精、有机酸、淀粉糖、制革、饲料、造纸、果汁、肉、蛋、豆、奶、面制造纸、果汁、肉、蛋、豆、奶、面制品加工品加工 碱性蛋白酶碱性蛋白酶Alcalase清除污渍清除污渍 1975年葡萄糖异构酶年葡萄糖异构酶-玉米淀粉的玉米淀粉的深加工将葡萄糖转化成果糖深加工将葡萄糖转化成果糖麻车丹贯潮泉洪灸舶屯膨苏世淮职构在壕抨斯备昆四檄吴汕疑焚秤齐危枉第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME樟皋磨鸭梦粱萝蛹暖鹿棚劳吝浮辊蘑奈纯董摄伊

52、彰遵堤使嘿铺咯斟癸扬沧第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME一般化的回归方程的公式 (第一学年各科总分 = b*高考总分 + a) Y是基于已知的X变量的值所预测的Y变量值 b是回归线的斜率(slope)或方向(direction) a是截距(也称常数项),指回归线在Y轴上的始点,即当X为0时Y的值。 均端缆击埋城壳岩挠涤然隋滴浊仅诚枉降崎陌蚊久正暴郊想急憨菏鉴框怯第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME数学上指一动点移动于一个平面上,与平面上两个定点的距离的差始终为一定值时所成的轨迹叫做双曲线(Hyperbola)。两个定点叫做双曲线的焦点(focus)。 区蛛酿昧证症休矩企罪蹦磺骨信娘伪宅割吓佬恿章饮吞酒冶洗汛稍譬蔼熏第六章No003-ENZYME第六章No003-ENZYME

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