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1、实验六实验六家兔呼吸运动的调节家兔呼吸运动的调节实验目的掌握家兔耳缘静脉注射法家兔颈部手术操作、神经血管分离、气管插管技术记录家兔呼吸曲线观察 血液中化学因素（CO2，O2和H+）及药物对呼吸运动的影响迷走神经对呼吸运动的调节了解各种因素影响呼吸运动的机制实验原理o呼吸运动是受呼吸中枢控制的呼吸肌节律性活动，伴随着压力变化而使气体进出呼吸道。o呼吸运动受神经以及血液中PO2，PCO2，H+等因素的调节。o药物能作用于呼吸中枢而影响呼吸运动。o肺牵张反射的传入神经是迷走神经，通过此反射弧完成正常地节律性呼吸。实 验 材 料1、动 物：家兔2、器 械：动物手术器材（手术刀、手术剪、止血钳、玻璃分针
2、,动脉夹，丝线，注射器，兔手术台），气管插管，橡皮管（长1 m以上，短10-20 cm），体重秤，呼吸换能器（或张力换能器），生物信号处理系统等。3、药品和试剂：20%乌拉坦、3%乳酸、生理盐水等。实 验 方 法一、一、仪器连接与标定仪器连接与标定二、二、称重、麻醉称重、麻醉三、三、固固定定、剪剪毛毛四、四、颈颈部部手手术术五、五、气气管管插插管管六、分离迷走神经六、分离迷走神经七、腹部手术七、腹部手术八、项八、项目目观观察察1、仪器的连接与标定、仪器的连接与标定换能器和微机记录系统的信号输入通道连换能器和微机记录系统的信号输入通道连接，刺激电极与刺激输出通道连接接，刺激电极与刺激输出通道连接
3、设定记录呼吸运动的参数设定记录呼吸运动的参数水水压压计呼吸通道定标（已定标）计呼吸通道定标（已定标）o捉拿捉拿：实验家兔多数饲养在笼内，所以抓取较为方便，一般以右手抓住兔颈部的毛皮提起，然后左手托其臀部或腹部，让其体重重量的大部分集中在左手上，这样就避免了抓取过程中的动物损伤。不能采用抓双耳或抓提腹部。1、2、3均为不正确的抓取方法（1可损伤两肾，2可造成皮下出血，3可伤两耳），4、5为正确的抓取方法。颈后部的皮厚可以抓，并用手托兔体。2、捉拿、称重、麻、捉拿、称重、麻醉醉称重、麻 醉麻醉麻醉o兔耳缘静脉注射：兔耳缘静脉注射：20%氨基甲酸乙酯（1）注射液剂量）注射液剂量 o5ml/kg体重，
4、根据动物状态调整剂量，每次增加，每次增加10%左右左右o抽吸麻醉液时先取下针头，多吸一部分，多吸一部分，排出气泡排出气泡；（2）进针）进针注射姿势调整注射姿势调整o选择耳缘静脉，用耳缘静脉，用酒精刺激后血管较粗；按压住血管根部，血管酒精刺激后血管较粗；按压住血管根部，血管鼓起再进针，比较容易鼓起再进针，比较容易o从远心端远心端开始；循序向根部移动，每次移动距离不要太大，以免注射不成功或加药时无法注射。左右耳o针头扎进1/3至1/2，并用拇指固定住，以免兔挣扎时退出。o注射时推动液体先快后慢先快后慢（前1/3快，后面慢慢推进） 随时观察动物状态。o剩余麻醉液需回收；兔耳缘静脉注射时的注意事项o麻
5、醉前应正确选用麻醉药品、用药剂量及给药途径；o进行静脉麻醉时，先将总用药量的三分之一快速注入，使动物迅速渡过兴奋期，余下的三分之二量则应缓慢注射，并密切观察动物麻醉状态及反应，以便准确判断麻醉深度；o如麻醉较浅，动物出现挣扎或呼吸急促等，需补充麻醉药以维持适当的麻醉。一次补充药量不宜超过原总用药量的五分之一；o麻醉过程中，应随时保持呼吸道通畅，并注意保温；麻醉效果的观察o呼吸：深慢而平稳o角膜反射：明显迟钝o肌张力：全身肌肉松弛o皮肤夹捏反射消失。3. 家兔固定和剪毛l固定用细绳固定用细绳回收回收l固定头部要点：固定头部要点：门牙门牙拉直以使颈部挺拉直以使颈部挺起，便于手术起，便于手术剪毛：剪
6、毛：剪刀剪刀贴住贴住皮肤剪毛；皮肤剪毛；提起毛再剪，易剪破皮肤提起毛再剪，易剪破皮肤4. 颈部手术v颈部正中切口分离软组织暴露气管钝性分离双侧迷走神经各自穿2根丝线备用v钝性分离气管，底下穿棉线备用v气管倒T形切口，插入Y形气管插管，棉线固定o手术刀割开皮肤手术刀割开皮肤一手绷紧皮肤，一手绷紧皮肤，另一手用力另一手用力一次性割开皮肤一次性割开皮肤o分离软组织分离软组织用剪刀、镊子分离出气管用剪刀、镊子分离出气管除净气管外表的除净气管外表的结缔组织结缔组织等等棉花条棉花条清除气管内的淤血、粘液等清除气管内的淤血、粘液等穿穿线线备备用用5.5.气管插管气管插管气管插管术示意图气管插管术示意图-示气
7、管切口示气管切口环环状状软软骨骨下下1 1c cm m , ,做做倒倒T T型型切切口口气管插管术示意图气管插管术示意图-示固定插管示固定插管将将三三通通管管向向肺肺方方向向插插入入，固固定定6.分离神经分离神经o由里向外翻出气管一侧组织由里向外翻出气管一侧组织颈动脉鞘：颈动脉鞘：粗粗迷走神经迷走神经中中交感神经交感神经细细减压神经减压神经神经分离示意图神经分离示意图神经分离示意图神经分离示意图-示迷走神经示迷走神经7、腹部手术o切开胸骨下端剑突部位切开胸骨下端剑突部位的皮肤的皮肤，再沿腹白线切开，再沿腹白线切开长约长约2ml的切口。细心的切口。细心分离表面的组织（勿伤及分离表面的组织（勿伤及
8、胸骨），暴露出剑突与骨胸骨），暴露出剑突与骨柄（注意不要伤害膈肌）。柄（注意不要伤害膈肌）。o2、将系有长线的金属、将系有长线的金属钩钩住或用线系住胸骨柄钩钩住或用线系住胸骨柄，线的，线的另一端接张力换能另一端接张力换能器器。o连接实验装置连接实验装置o选实验项目：选实验项目：呼吸运动的调节呼吸运动的调节8、观察正常呼吸曲线正常呼吸曲线的频率和幅度7. 观察呼吸运动的影响因素1. 增加无效腔（观察呼吸频率和幅度变化）2. 窒息：夹闭两侧气管软管（几秒到几十秒，时间不要太长，否则会引起窒息死亡）（观察呼吸频率和幅度变化）3. 吸入 CO2：肺活量较大的同学呼出的CO2，10s以上吹气（不要对着软
9、管直接吹，用手捧住软管，相对密闭，吹气）。（观察呼吸频率和幅度变化）4. 吸气末吹气，呼气末抽气。5. 静脉内注入3乳酸 2ml（观察呼吸频率和幅度变化）6. 切断右侧迷走神经，观察呼吸频率和幅度。再切断左侧迷走神经，观察呼吸频率和幅度变化。 连续电脉冲刺激迷走神经中枢端（靠近头部的一端）， 观察呼吸频率和幅度变化。实验结果“呼吸运动调节呼吸运动调节”实验分析实验分析实验项目实验项目呼吸运动呼吸运动预期结果预期结果分析要点分析要点增加吸入气中的CO2加深加快1）血中CO2CO2经血脑屏障进入脑脊液生成H2CO3解离出H+刺激中枢化学感受器延髓呼吸中枢兴奋呼吸加深加快2）血中CO2直接刺激颈动脉
10、窦，主动脉弓外周化学感受器呼吸加深加快注射乳酸加深加快同上，但H+不易通过血脑屏障，主要通过外周化学感受器起作用。吸入纯N2（缺氧）加深加快血中PO2呼吸加深加快；刺激外周化学感受器感受器呼吸加深加快长管呼吸（增大无效腔）加深1）PO2机制同上；2）PCO2机制同上；3）呼吸肌本体感受性反射影响切断双侧迷走N加深变慢牵张反射因传入神经切断而中断点刺激迷走N中枢端呼吸最终终止肺扩张反射和肺缩小反射的传入神经都在迷走N内，点刺激中枢端会导致呼吸运动改变，持续给予点刺激，呼吸运动最终停止。注意事项注意事项o手术中，若遇到出血，常用的止血方法有手术中，若遇到出血，常用的止血方法有:钳夹止血法，压钳夹止
11、血法，压迫止血法，结扎止血法，烧烙止血法迫止血法，结扎止血法，烧烙止血法o分离神经时不能用分离神经时不能用尖的或锋利的金属机械尖的或锋利的金属机械；o实验观察中，在刺激开始、撤除时，应做好实验观察中，在刺激开始、撤除时，应做好标记标记。o剪辑和打印结果时，尽量把剪辑和打印结果时，尽量把波形压缩波形压缩，显示，显示变化趋势变化趋势即可，即可，不需要每个波的细节。不需要每个波的细节。o刺激神经之前，应先检查是否有刺激电流输出。刺激神经之前，应先检查是否有刺激电流输出。o神经需刺激时才拉出，不要一直由保护电极勾住，神经需刺激时才拉出，不要一直由保护电极勾住，防止神经防止神经干燥干燥。o每一实验项目必须在前一项目对动物的影响基本恢复之后才每一实验项目必须在前一项目对动物的影响基本恢复之后才能进行。能进行。思考题思考题o分析增加呼吸无效腔，呼吸运动改变的原因。o双侧切断迷走神经以后，呼吸运动的变化说明什么问题？o分析注射乳酸后呼吸运动变化的原因。
