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1、栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术第第2节节DNA片段的片段的扩扩增增PCR技技术术评咙旨包废瓜捷峡忻食挪笺瞒拔踢佛潦酝夫治腔矣衫川寡姆怨僚颁模灰阂高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术学习导航学习导航1.理解理解PCR扩扩增增DNA片段的
2、原理。片段的原理。重点重点2.尝试尝试PCR技技术术的基本操作和的基本操作和应应用。用。 难难点点寂蝉炭儿啦裙介铂轩钩碟毡耙了绝抚崩垢淮诀咀袖什哺誓噶沪苛馏圆意俏高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术新知初探思维启动新知初探思维启动一、一、DNA在在细细胞内的复制胞内的复制1.所所需需的的酶酶：_酶酶、DNA聚聚合合酶酶和和RNA聚合聚合酶酶等。等。2.引物：
3、引物：_。3.原料：原料：_。4.原原则则：_。DNA解旋解旋一段一段RNA四种脱氧核苷酸四种脱氧核苷酸碱基互碱基互补补配配对对原原则则籽哈彭奄抢颜刀捻鲁淆舔消蒸衅及边袄瞳枝田袍晰诡傅京锑淤犀魏厕笆蝗高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术二、二、PCR及其及其过过程程1.概念：概念：PCR即聚合即聚合酶酶链链式反式反应应，实际实际上是上是在在_模模拟细拟细胞内
4、的胞内的_，形，形成大量成大量_的的DNA片段。片段。体外体外DNA复制复制过过程程特异性特异性话齐闷仪名俩搭瞳守钡撩纹期距哀雪搅师荷帖妇辐夺傍霹灼困主刊刽辈咳高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术2.过过程程条件条件过过程程加加样样 室温室温把把PCR缓缓冲液、冲液、_、一一对对引物、四种脱氧核苷酸、引物、四种脱氧核苷酸、DNA聚合聚合酶酶、Mg2等成分加等
5、成分加入到微量离心管中入到微量离心管中DNA模板模板德舞多讯咬碍凤跪侨掸称斯剧尸凤预蚤徐展悟崇评拆驼悦价笨芥市壳板堡高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术氢键氢键一对引物一对引物DNA聚合聚合脱氧核苷酸脱氧核苷酸蝶盖笔湛苫捉崖酚矮割偶渍困等用颐桃藩煽奶咙族剑咏捡眶拇鸟鬃作佳禄高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DN
6、A片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术判一判判一判(1)细细胞胞内内DNA复复制制和和PCR技技术术所所需需的的引引物物一一样样，都是，都是RNA。()(2)经经PCR技技术术合合成成的的DNA分分子子中中，每每条条单单链链都含有引物。都含有引物。()(3)PCR实实验验的的原原理理和和操操作作都都十十分分复复杂杂，不不易于操作。易于操作。()(4)经过经过高温高温变变性、低温复性和中温延伸三步性、低温复性和中温延伸三步操作，操作，DNA片段可
7、呈指数增片段可呈指数增长长。()磊染丢遭晴吭级蛊讹矗贮已翱储皆恩赔炬雷荡这昏宣喷咀型可际桐火尊茎高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术三、三、实验实验操作操作1.准准备备(1)为为了了避避免免_等等因因素素的的污污染染，PCR实实验验中中使使用用的的微微量量离离心心管管、吸吸头头、缓缓冲冲液液 以以 及及 蒸蒸 馏馏 水水 等等 在在 使使 用用 前前 必必
8、须须 进进 行行_。(2)如果没有如果没有PCR仪仪，可以，可以设设置置3个恒温水浴个恒温水浴锅锅，温度分，温度分别为别为_、_和和_，然后按要求在然后按要求在3个水浴个水浴锅锅中来回中来回转转移移PCR的的微量离心管即可。微量离心管即可。外源外源DNA高高压灭压灭菌菌95 55 72 峭摆有渍琐埠拴苔厦社歪莫况拙患功礁独征因却蜗兢无糠操官减主耕妮记高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋
9、白质和蛋白质和DNA技术技术PCR热热循循环环260 nm盛帐悦打藐涤裕吐独栅管墟蘸劲琐晋用欣淳廷床刺妈左恶斜袒钉覆幂转敦高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术想一想想一想决定决定PCR反反应应特异性的原因有哪些？特异性的原因有哪些？【提示】【提示】待待扩扩增增DNA片段的特异性。片段的特异性。脸收盖吼萨驭帕徊皇扬潮黑逢调些啊把惫瓷惕塞崎精鸟泳驹豪霉栅救焕把高
10、中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术要点突破讲练互动要点突破讲练互动要点一要点一PCR技技术术与体内与体内DNA复制的比复制的比较较细细胞内复制胞内复制PCR反反应应解旋解旋在解旋在解旋酶酶作用下作用下,细细胞提供能量，胞提供能量，部分解开部分解开加加热热至至90 以以上上时时，双，双链链全全部解开部解开酶酶DNA解旋解旋酶酶、DNA聚合聚合酶酶耐高温的耐高温
11、的DNA聚合聚合酶酶引物引物一小段一小段RNA单链单链DNA增雹迹柴台弓俏龚换毖屯歪伴姬步煤咋沂诚膨剐巡陈仕匣怠夹鲜堵仔獭先高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术细细胞内复制胞内复制PCR反反应应能量能量ATP不加不加循循环环次数次数生物自身控制生物自身控制30多次多次子子链链合成合成一条一条链连续链连续合成合成,另一条另一条链链不不连续连续合成合成两条子两条
12、子链为连续链为连续合成合成,温度温度为为72 产产物物完整完整DNADNA片段片段相同点相同点需提供需提供DNA复制的模板复制的模板四种脱氧核苷酸四种脱氧核苷酸为为原料原料碱基互碱基互补补配配对对原原则则子子链链延伸的方向都是从延伸的方向都是从5端到端到3端端躯酚伸瓣童旱稍沁打浑段稚磺轰谩抖颓黔冬妖宦函怪雄卫里威含足旱呕诲高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术
13、特特别别提提醒醒PCR反反应应需需要要可可变变的的温温度度，而而体体内内DNA复制需要复制需要稳稳定的温度。定的温度。DNA解旋解旋酶酶的作用是使的作用是使DNA两条两条链链的的氢键氢键断开；断开；DNA聚合聚合酶酶的作用是将的作用是将单单个脱氧核苷个脱氧核苷酸加到已有的酸加到已有的单链单链片段的片段的3端上，需要模板端上，需要模板; DNA连连接接酶酶连连接的是两条接的是两条DNA片段的缺口，片段的缺口，不需要模板。不需要模板。驻枚炙摸奔捻疙枫容职抢逆锻等亿隆苍冻持示焉仙檬圆普润棘缔喷诚绩瞪高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PC
14、R技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术 PCR过过程程与与细细胞胞内内的的DNA复复制制过过程程相相比，主要有两点不同，它比，主要有两点不同，它们们是是()PCR过过程程需需要要的的引引物物是是人人工工合合成成的的单单链链DNAPCR过过程不需要程不需要DNA聚合聚合酶酶PCR过过程程中中DNA的的解解旋旋不不依依靠靠解解旋旋酶酶，而而是通是通过对过对反反应应温度的控制来温度的控制来实现实现的的PCR过过程中，程中，DNA不需要解旋，直接以双不需要解旋，直接以
15、双链链DNA为为模板模板进进行复制行复制例例1严瓦伞嗓踪蒋脓广弃医自塌姥士冒拌宦叁谭旁宰俞淆刺拿章割凉嘘含骄蓬高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术A BC D【解解析析】PCR过过程程与与细细胞胞内内的的DNA复复制制过过程程相相比比较较，主主要要有有两两点点不不同同：PCR过过程程需需要要的的引引物物是是人人工工合合成成的的单单链链DNA，长长度度通通常常
16、为为1540个个核核苷苷酸酸。PCR过过程程中中，DNA解解旋旋不不依依赖赖解解旋旋酶酶，而而是是通通过过对对反反应应温温度度的的控控制制来来实现实现的。的。【答案】【答案】C烧冶鹿翱谰壳塔度看协罐仆粤拂秩岗抱捕爹追沮蒸粒琼绅彤闷屈芭含畅峻高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术变变式式训练训练(2012成成都都七七中中高高二二检检测测)下下列列关关于于DNA复
17、复制和制和PCR的描述中，正确的是的描述中，正确的是()ADNA聚聚合合酶酶不不能能从从头头开开始始合合成成DNA，只只能从能从5端延伸端延伸DNA链链BDNA复制不需要引物复制不需要引物C引引物物与与DNA母母链链通通过过碱碱基基互互补补配配对对进进行行结结合合DPCR扩扩增的增的对对象是氨基酸序列象是氨基酸序列撮沮狰惶刚诬踢滨温滑帅摧猫告蓑逗葫线墅意坪争生毫韭句隙讥叔打淘狭高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧
18、夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术解析：解析：选选C。由于。由于DNA聚合聚合酶酶不能从不能从头头开始开始合成合成DNA，只能从，只能从3端延伸端延伸DNA链链，故，故DNA复制需要引物，而且它与复制需要引物，而且它与DNA母母链链通通过过碱基碱基互互补补配配对结对结合。合。PCR扩扩增的增的对对象是象是DNA，而，而不是氨基酸。不是氨基酸。肯鹃勇轨觅迫蛋耙畜靠乃茫慑镑癣祝米骗俏隆丛钩属韵特鳖端样傲弹揪滞高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要
19、点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术扔照润绽滥耕讣剧行父织窑挖捶窘呻氰黔致语摄狸贵湾茁今翠奶术小毋脂高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术2.PCR扩扩增增过过程程变变性性复性复性延伸延伸预变预变性性95 ，5 min55 ，1 min72 ，1 min重复重复30次次95 ，30 s55
20、，30 s72 ，1 min最后一最后一次循次循环环72 ，1 min颓舅痰刑擅裙通象优糊蛛梭韩娄乞缠突鳖没拌企规捶特带茨漫耳托焚午早高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术图图示：示：歼盘丙口课扩迄危荔舟外面氮楚城邦滞潦谭飘蒲作千筷桶肤霞摆逢进夷狞高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版
21、选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术3.DNA扩扩增数目的理增数目的理论计论计算算理理论论上上DNA扩扩增呈指数增增呈指数增长长。若只有一条。若只有一条DNA模板，模板，则则复制复制n次后有次后有2n条；若一开始有条；若一开始有m条条DNA模板，模板，则则复制复制n次后有次后有m2n条；条；实实际际操作操作过过程中，由于无关程中，由于无关变变量的影响，一般量的影响，一般来来说实验值说实验值要略小于理要略小于理论值论值。秘胆木及柬卜诵鼎叹壶脯编嘛瑚咱罕祝谬战簧遥讫搁葬然乖
22、簇瘟扑揉才衡高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术 近近20年来，年来，PCR技技术术(多聚多聚酶酶链链式反式反应应)成成为为分子生物学分子生物学实验实验室的一种常室的一种常规实验规实验手手段，其原理是利用段，其原理是利用DNA半保留复制，在半保留复制，在试试管管中中进进行行DNA的人工复制的人工复制(如如图图)，在短，在短时间时间内内,将将DNA扩扩增几百万
23、倍甚至几十增几百万倍甚至几十亿亿倍，从而使倍，从而使实验实验室所需要的室所需要的遗传遗传物物质质不再受限于活的生不再受限于活的生物体。物体。例例2捧惯氨辞憋巢匹骡灾价夸鼻划料速咎误量欧耸额募闹涎昨挝齿活扬狂哇躺高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术(1)加加热热使使DNA双双链间链间的的_键键完全完全打开，称打开，称为为_；而在；而在细细胞中是在胞中是在_酶酶
24、的作用下的作用下进进行的。行的。论泪拳夺玉伦歌鱼诀瞄殷粳芹免杨嗽川阳东则艇嵌蜂醛蔗娘爹亲杭除侍学高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术(2)如果只需要大量克隆模板如果只需要大量克隆模板DNA中中间间的某的某个特定区段，个特定区段，应该应该加入加入_种特定的种特定的引物。当温度降低至引物。当温度降低至55 C时时，引物与两条，引物与两条“舒展舒展”的模板的特定位
25、置的模板的特定位置结结合，在合，在DNA聚合聚合酶酶的作用下，只能在引物的的作用下，只能在引物的_端端连连接接脱氧核苷酸，两条子脱氧核苷酸，两条子链链的延伸方向都是的延伸方向都是_。饿卢铡聘败标画镇芭伟捡腊母沈镑富寡不瓜而倒形噪滑痉赘锑谓媒揉锯供高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术(3)PCR技技术术的的必必需需条条件件，除除了了模模板板、原原料料、酶酶之之
26、外外，至至少少还还有有三三个个条条件件，即即液液体体环环境境、适适宜宜的的_和和_，前前者者由由_自自 动动 调调 控控 ， 后后 者者 则则 靠靠_来来维维持。持。(4)通通过过PCR技技术术使使DNA分子大量复制，如果分子大量复制，如果将一个用将一个用15N标记标记的的DNA分子放入分子放入试试管中，以管中，以14N标记标记的脱氧核苷酸的脱氧核苷酸为为原料，原料，连续连续复制四次复制四次之后，之后，则则15N标记标记的的DNA分子占全部分子占全部DNA分子分子总总数的比例是数的比例是_。羚崎草刃革宝兵恒忠拈争钦舞嚣椅剖辨帛挂便韧彬赦赫摈田诽滴服熬裔涉高中生物同步课件：62DNA片段的扩增P
27、CR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术贺苯要率秒锻凿鸳枚愈五褐亲追逆银呀钎墅所禄九秽翘躇雄厢钟教碳荡枣高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术【解析】【解析】(1)P
28、CR技技术术利用利用热变热变性原理使性原理使DNA双双链链之之间间的的氢键氢键断裂，称断裂，称为变为变性，而在性，而在细细胞内是在解旋胞内是在解旋酶酶的作用下使的作用下使氢键氢键断裂。断裂。(2)PCR分分为为三个基本反三个基本反应应步步骤骤:变变性性(95 )、复性复性(55 )、延伸、延伸(72 )，其特异性依，其特异性依赖赖于于与靶序列互与靶序列互补补的引物，引物是两段与待的引物，引物是两段与待扩扩增增DNA序列互序列互补补的片段，两引物之的片段，两引物之间间的距离决的距离决定定扩扩增片段的增片段的长长度。度。辗少打坑批梦抉瑚孜蹲苑诞溅檀骨懈聚娄饼降呕仇肺段缝稼崩锈澄害冻画高中生物同步课
29、件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术由于由于DNA聚合聚合酶酶不能从不能从头头开始合成开始合成DNA，只，只能从引物的能从引物的3端延伸端延伸DNA链链，则则DNA的合成的合成方向方向总总是从子是从子链链的的5端向端向3端延伸。端延伸。(3)PCR技技术术与与细细胞内的胞内的DNA复制不完全相同，除了需复制不完全相同，除了需要模板、原料、要模板、原料、酶酶以外，至少以外，
30、至少还还需要液体需要液体环环境境(稳稳定的定的缓缓冲液冲液)，每一个步，每一个步骤骤需要适宜的需要适宜的温度和酸碱度等。温度和酸碱度等。(4)一个一个DNA分子分子连续连续复制复制四次之后，形成四次之后，形成16个个DNA分子，分子，15N标记标记的的DNA分子有分子有2个，个，则则15N标记标记的的DNA分子占全分子占全部部DNA分子分子总总数的比例数的比例为为1/8。捣存来印耳避都诛拥八创涪戌衷袒擦柞铁旧昌越哩徊澎派幅凤兵蔼辙箍惑高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思
31、维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术【答案】【答案】(1)氢氢变变性解旋性解旋(2)两两3从子从子链链的的5端向端向3端延伸端延伸(3)温度酸碱度温度酸碱度PCR仪仪缓缓冲液冲液(4)1/8逾纱啤滤丹澎苇腾腐盎传栋噪展萌拓罢焚评挂皱袭级遏靠俩饥详磐魂泊皱高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA
32、技术技术互互动动探究探究(1)PCR中由碱基中由碱基错错配而引起哪种配而引起哪种变变异？异？(2)假假设设对对一一个个DNA进进行行扩扩增增，第第一一次次循循环环时时某某一一条条模模板板链链上上发发生生碱碱基基错错配配，则则扩扩增增若若干干次次后后检检测测所所用用DNA的的扩扩增增片片段段，与与原原DNA相相应应片段相同的占多少？片段相同的占多少？【提示】【提示】(1)基因突基因突变变。(2)50%。践铣脂搀晕寄饥意去影周箕掀波菜络围衙咙展褐额唐卵蓉盯诫芜熟勒饼淹高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引
33、导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术【误误区警示】区警示】关于关于DNA的的扩扩增方向容易增方向容易发发生混淆，生混淆，为为了明确表示了明确表示DNA的方向，通常将的方向，通常将DNA的的羟羟基基(OH)末端称末端称为为3端，磷酸基端，磷酸基团团的末端称的末端称为为5端，子端，子链链从引物从引物3端开始延伸，端开始延伸，而子而子链链的合成方向是从的合成方向是从5端向端向3端延伸。端延伸。闭歉断恨蹿郧滤荒照绿皇傈急疼泼负外袭写浆佳愉恿复模晌琶纷帝政陷崇高中生物同步课件：62DNA片段的扩增
34、PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术要点三要点三实验实验操作与操作与结结果分析果分析1.检测检测PCR扩扩增效果的增效果的过过程程扣疏石卿咐甸陪雏中从玩湍拇妆毫竭廉脊耸怕瘤撼溉鄙劈被旁斑踊核镀馏高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能
35、演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术2.结结果分析果分析DNA片段的片段的扩扩增是否成功的判断增是否成功的判断(1)对对于于电电泳泳检检测测的的方方法法，可可以以通通过过在在紫紫外外线线下下直直接接观观察察DNA带带的的分分布布及及粗粗细细程程度度来来评评价价扩扩增的效果。增的效果。(2)扩扩增不成功的可能原因有：增不成功的可能原因有：漏加了漏加了PCR的反的反应应成分；成分；各反各反应应成分的用量不当；成分的用量不当；PCR程序程序设设置不当等。置不当等。姿狡宽灰昼筹略订吨山姬刁缔科藩弗屡告齿变诵缄掳房窗回萎器教哄馏津高中生物同步课件：62DNA片段的扩增
36、PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术 在在PCR扩扩增增DNA的的实实验验中中，预预计计一一分分子子DNA经经过过30次次循循环环后后，应应该该得得到到230个个DNA分分子子，但但是是结结果果只只有有约约210个个DNA分分子子，那么不是出那么不是出现该现现该现象的原因是象的原因是()ATaq DNA聚聚合合酶酶的的活活力力不不够够，或或活活性性受受到抑制到抑制B系系统设计统设计欠妥欠妥C循循
37、环环次数不次数不够够D复性复性时时，部分，部分亲链亲链与与亲链结亲链结合合例例3钮卡缴耙镍入土咙娄虎汹痪谢口烤豁端骨溪纵剁差砰贰被耗蔷兵艇骇逼党高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术【解解析析】如如果果Taq DNA聚聚合合酶酶活活力力不不够够，或或活活性性受受到到抑抑制制，则则导导致致催催化化效效率率降降低低，得得到到的的产产物物比比预预期期的的少少。如如果
38、果PCR系系统统设设置置不不妥妥，达达不不到到预预期期的的结结果果。复复性性时时，模模板板链链既既可可以以和和引引物物结结合合，互互补补的的模模板板链链也也可可相相互互结结合，从而合，从而导导致致产产物减少。物减少。【答案】【答案】C伸燃储访迟咬磐悉茨谦馋格澜抒仰社闰峰遏英初箭咙亢欢诌孝垫氰异就虐高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1栏目栏目导引导引新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠第六章第六章 蛋白质和蛋白质和DNA技术技术变变式式训练训练DNA在在_nm的的紫紫外外线线波波段段存存在在一一强强烈烈的的吸吸收收峰峰，其其峰峰值值的的大大小小与与DNA含含量量有有关关()A220 B240C260 D280解析：解析：选选C。DNA在在260 nm的紫外的紫外线线波段存在波段存在一一强强烈的吸收峰，其峰烈的吸收峰，其峰值值的大小与的大小与DNA含量含量有关。据此，可以有关。据此，可以进进行行DNA含量的含量的测测定。定。肢拎互哟弥隘榷朗云蕾拯召褪蹬癌售经袄配指借贩褒得旧愈缠哈娥振韵放高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1高中生物同步课件：62DNA片段的扩增PCR技术中图版选修1
