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1、 包涵体是病毒感染细胞后,在宿主细胞内形成的一种在包涵体是病毒感染细胞后,在宿主细胞内形成的一种在光学显微镜下可见的光学显微镜下可见的蛋白质小体蛋白质小体。三三. 病毒的群体形态病毒的群体形态(1 1)包涵体()包涵体(inclusion bodyinclusion body) 多为圆形、卵圆形或不定形。多为圆形、卵圆形或不定形。在细胞中呈现的大小数量不一在细胞中呈现的大小数量不一也有在细胞质和细胞核内都存在的类型。也有在细胞质和细胞核内都存在的类型。多数位于细胞质内,具嗜酸性;多数位于细胞质内,具嗜酸性;少数位于细胞核内,具嗜碱性;少数位于细胞核内,具嗜碱性;包包涵涵体体质型多角体质型多角体
2、核型多角体核型多角体包包涵涵体体的的类类型型是病毒的聚集体是病毒的聚集体是病毒蛋白和与病毒感染有关的蛋白是病毒蛋白和与病毒感染有关的蛋白非病毒性包涵体非病毒性包涵体大多数由动物病毒引起的包涵体,大多数由动物病毒引起的包涵体,是病毒的合成部位。是病毒的合成部位。病病毒毒包包涵涵体体的的应应用用用于病毒病的诊断用于病毒病的诊断用于生物防治用于生物防治(2 2)噬菌斑()噬菌斑(plaqueplaque) 将少量的噬菌体与大量的宿主细胞的混合液与将少量的噬菌体与大量的宿主细胞的混合液与45左右的琼脂培养基在培养皿中充分混匀,铺平后左右的琼脂培养基在培养皿中充分混匀,铺平后培养培养10小时左右,肉眼可
3、见一个个透亮不长菌的小圆小时左右,肉眼可见一个个透亮不长菌的小圆斑,即为斑,即为噬菌斑噬菌斑(plaque),),是由噬菌体在菌苔上是由噬菌体在菌苔上形成的形成的“负菌落负菌落”。(3 3)空斑)空斑(plaque) 由动物病毒在宿主单层细胞培养物上形成一由动物病毒在宿主单层细胞培养物上形成一个与噬菌斑类似的肉眼可见的局部病损区域,称个与噬菌斑类似的肉眼可见的局部病损区域,称之为之为蚀斑蚀斑或称或称空斑空斑(plaque)。)。 Dulbecco和和Vogt于于1953年发明了单层动物细年发明了单层动物细胞上的病毒空斑计数法,可进行有活性的动物病胞上的病毒空斑计数法,可进行有活性的动物病毒粒子
4、的计数。毒粒子的计数。 由植物病毒在植物叶片上形成的局部坏死由植物病毒在植物叶片上形成的局部坏死斑,称之为斑,称之为枯斑枯斑(lesion,病斑)。,病斑)。(4 4)枯斑)枯斑( lesion )五、五、3类典型形态的病毒及其代表类典型形态的病毒及其代表1. 螺旋对称的代表螺旋对称的代表烟草花叶病毒烟草花叶病毒 烟草花叶病毒烟草花叶病毒简称简称TMV(tobaco mosaic virus),是一种植物病毒,在病毒学发展史上有其,是一种植物病毒,在病毒学发展史上有其独特的地位。它是发现最早、研究最深入和了解最独特的地位。它是发现最早、研究最深入和了解最清楚的一种病毒。清楚的一种病毒。直接影响
5、烤烟的产量和质量直接影响烤烟的产量和质量感病植物症状:感病植物症状: 花叶(黄绿相间的斑驳)、叶片轻度扭曲,在表现花叶的植株中下部叶片有花叶(黄绿相间的斑驳)、叶片轻度扭曲,在表现花叶的植株中下部叶片有时会出现沿叶脉形成的橡胶树叶状(闪电状)坏死条纹。当天气干燥和炎热的时候,时会出现沿叶脉形成的橡胶树叶状(闪电状)坏死条纹。当天气干燥和炎热的时候,下部叶容易受到花叶烧伤。早期感病植株还表同矮化症状。下部叶容易受到花叶烧伤。早期感病植株还表同矮化症状。 由由6390个核苷酸构成,它位于距轴个核苷酸构成,它位于距轴中心中心4nm处以相等的螺距盘绕于蛋白质处以相等的螺距盘绕于蛋白质外壳内,每外壳内,
6、每3个核苷酸与一个蛋白质亚个核苷酸与一个蛋白质亚基相结合,每圈为基相结合,每圈为49个核苷酸。个核苷酸。 衣壳含衣壳含2130个皮鞋状的蛋白亚基(衣个皮鞋状的蛋白亚基(衣壳粒)每个亚基含壳粒)每个亚基含158个氨基酸,亚基以个氨基酸,亚基以逆时针方向作螺旋状排列,共围逆时针方向作螺旋状排列,共围130圈。圈。5 ssRNA95衣壳蛋白衣壳蛋白烟草花叶病毒的形态和结构烟草花叶病毒的形态和结构2. 二十面体对称的代表二十面体对称的代表腺病毒腺病毒 腺病毒腺病毒(Adenovirus)是一类动物病毒,于是一类动物病毒,于1953年首次从手术切除的小儿扁桃体中分离到。年首次从手术切除的小儿扁桃体中分离
7、到。 主要侵染呼吸道、眼结膜和淋巴组织,是急性咽主要侵染呼吸道、眼结膜和淋巴组织,是急性咽炎、咽结膜炎、流行性角膜结膜炎和病毒性肺炎等的炎、咽结膜炎、流行性角膜结膜炎和病毒性肺炎等的病原体。病原体。有有12个角、个角、20个面、个面、30条棱。条棱。衣壳由衣壳由252个个衣壳粒衣壳粒组成,包括组成,包括核心核心是由是由36500bp(碱基对)的(碱基对)的线状双链线状双链DNA(dsDNA)构成。)构成。六邻体(六邻体(hexon)的衣壳粒的衣壳粒240个(均匀个(均匀分布在分布在20个面上);个面上);五邻体(五邻体(penton)的衣壳粒的衣壳粒12个(分布个(分布在在12个顶角上);每个
8、五邻体上突出一个顶角上);每个五邻体上突出一根末端带有顶球的蛋白纤维,称为根末端带有顶球的蛋白纤维,称为刺突刺突(spike)。有有12个角、个角、20个面、个面、30条棱。条棱。衣壳由衣壳由252个个衣壳粒衣壳粒组成,包括组成,包括核心核心是由是由36500bp(碱基对)的(碱基对)的线状双链线状双链DNA(dsDNA)构成。)构成。六邻体(六邻体(hexon)的衣壳粒的衣壳粒240个(均匀个(均匀分布在分布在20个面上);个面上);五邻体(五邻体(penton)的衣壳粒的衣壳粒12个(分布个(分布在在12个顶角上);每个五邻体上突出一个顶角上);每个五邻体上突出一根末端带有顶球的蛋白纤维,
9、称为根末端带有顶球的蛋白纤维,称为刺突刺突(spike)。有有12个角、个角、20个面、个面、30条棱。条棱。衣壳由衣壳由252个个衣壳粒衣壳粒组成,包括组成,包括核心核心是由是由36500bp(碱基对)的(碱基对)的线状双链线状双链DNA(dsDNA)构成。)构成。六邻体(六邻体(hexon)的衣壳粒的衣壳粒240个(均匀个(均匀分布在分布在20个面上);个面上);五邻体(五邻体(penton)的衣壳粒的衣壳粒12个(分布个(分布在在12个顶角上);每个五邻体上突出一个顶角上);每个五邻体上突出一根末端带有顶球的蛋白纤维,称为根末端带有顶球的蛋白纤维,称为刺突刺突(spike)。 腺病毒只能
10、培养在人的组织细胞(腺病毒只能培养在人的组织细胞(羊膜、羊膜、HeLaHeLa或或Hep-2Hep-2细胞株等细胞株等),尤其适合长在),尤其适合长在人胎肾组织细胞人胎肾组织细胞上,上,并能在宿主的细胞核中进行增殖和装配,并能使宿主并能在宿主的细胞核中进行增殖和装配,并能使宿主细胞形成包涵体。细胞形成包涵体。3. 双对称的代表双对称的代表T偶数噬菌体偶数噬菌体 E.coli 的的T偶数偶数(even type)噬菌体噬菌体共有共有3种,即种,即T2、T4和和T6。它们是病毒学和分子遗传。它们是病毒学和分子遗传学基础理论研究中的极好材料。学基础理论研究中的极好材料。T4噬菌体由椭圆形的二十面体头
11、部、噬菌体由椭圆形的二十面体头部、颈部和螺旋对称的尾部三个部分构颈部和螺旋对称的尾部三个部分构成,是病毒中复合对称的代表。成,是病毒中复合对称的代表。头部内的核心是头部内的核心是dsDNA头部与尾部相连处有一构造简单的头部与尾部相连处有一构造简单的颈部,由颈环和颈须构成。颈部,由颈环和颈须构成。尾部由尾鞘、尾管、基板、刺突和尾部由尾鞘、尾管、基板、刺突和尾丝五部分组成。尾丝五部分组成。 T4通过尾丝吸附于宿主通过尾丝吸附于宿主E.coli 表面。吸附后,由于基板受到构表面。吸附后,由于基板受到构象上的刺激,中央孔开口,释放溶菌酶并水解部分细胞壁,接着尾象上的刺激,中央孔开口,释放溶菌酶并水解部分细胞壁,接着尾鞘蛋白收缩,把尾管插入宿主细胞中。鞘蛋白收缩,把尾管插入宿主细胞中。皮鞋状的亚基有规律皮鞋状的亚基有规律地沿着中心轴地沿着中心轴(RNA)呈螺旋排列,呈螺旋排列,进而形成高度有序、进而形成高度有序、对称的稳定结构。对称的稳定结构。螺旋对称壳体:螺旋对称壳体: