6第六章革兰阳性球菌

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1、第六章第六章 革兰阳性球菌革兰阳性球菌 李向阳李向阳革兰阳性球菌n n是指革兰染色为阳性的一群球菌，与医学是指革兰染色为阳性的一群球菌，与医学 有关的兼性厌氧球菌有有关的兼性厌氧球菌有9属属n n通常引起化脓性感染，故又称化脓性球菌通常引起化脓性感染，故又称化脓性球菌（pyogenic cocci）n n本章主要介绍本章主要介绍n n葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属。葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属。葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属。葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属。n n专性厌氧球菌在第十六章厌氧菌中介绍。专性厌氧球菌在第十六章厌氧菌中介绍。 第一节 葡萄球菌属n n葡萄球菌属（葡萄球菌属（Stap

2、hylococcus）在自然界广在自然界广泛分布。泛分布。n n存在于人和动物的皮肤黏膜上的菌株存在于人和动物的皮肤黏膜上的菌株n n可致多种化脓性感染可致多种化脓性感染n n疖、痈、脓肿、菌血症等疖、痈、脓肿、菌血症等疖、痈、脓肿、菌血症等疖、痈、脓肿、菌血症等n n烫伤样皮肤综合症烫伤样皮肤综合症烫伤样皮肤综合症烫伤样皮肤综合症n n毒性休克综合症毒性休克综合症毒性休克综合症毒性休克综合症一、分类n n葡萄球菌属目前有葡萄球菌属目前有葡萄球菌属目前有葡萄球菌属目前有3535个种、个种、个种、个种、1717个亚种个亚种个亚种个亚种n n凝固酶凝固酶凝固酶凝固酶n n凝固酶阳性葡萄球菌凝固酶阳

3、性葡萄球菌凝固酶阳性葡萄球菌凝固酶阳性葡萄球菌n n凝固酶阴性葡萄球菌凝固酶阴性葡萄球菌凝固酶阴性葡萄球菌凝固酶阴性葡萄球菌 （CoagulaseCoagulase negative staphylococcus, negative staphylococcus, CoNSCoNS ）n n噬菌体分型噬菌体分型噬菌体分型噬菌体分型n n可将金黄色葡萄球菌分成可将金黄色葡萄球菌分成可将金黄色葡萄球菌分成可将金黄色葡萄球菌分成4 45 5群群群群2626型型型型n n质粒分型、血清学分型、抗生素分型和细菌质粒分型、血清学分型、抗生素分型和细菌质粒分型、血清学分型、抗生素分型和细菌质粒分型、血清学分

4、型、抗生素分型和细菌DNADNA的的的的RFLPRFLP或或或或PFGEPFGE分型，用来研究细菌的致病性、耐分型，用来研究细菌的致病性、耐分型，用来研究细菌的致病性、耐分型，用来研究细菌的致病性、耐 药性、流行病学特点和细菌鉴别的关系药性、流行病学特点和细菌鉴别的关系药性、流行病学特点和细菌鉴别的关系药性、流行病学特点和细菌鉴别的关系分类n n引起人类疾病的重要菌种有引起人类疾病的重要菌种有引起人类疾病的重要菌种有引起人类疾病的重要菌种有n n金黄色葡萄球菌（金黄色葡萄球菌（金黄色葡萄球菌（金黄色葡萄球菌（S.aureusS.aureus）n n表皮葡萄球菌（表皮葡萄球菌（表皮葡萄球菌（表皮

5、葡萄球菌（S.epidermidisS.epidermidis）n n头状葡萄球菌（头状葡萄球菌（头状葡萄球菌（头状葡萄球菌（S.capitisS.capitis）n n人葡萄球菌（人葡萄球菌（人葡萄球菌（人葡萄球菌（S.hominisS.hominis）n n腐生葡萄球菌（腐生葡萄球菌（腐生葡萄球菌（腐生葡萄球菌（S.saprophyticusS.saprophyticus）n n其余尚有一些能在人体中分离到其余尚有一些能在人体中分离到其余尚有一些能在人体中分离到其余尚有一些能在人体中分离到n n溶血葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、模仿葡萄球菌、里昂溶血葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、模仿葡萄球菌、里昂溶血

6、葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、模仿葡萄球菌、里昂溶血葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、模仿葡萄球菌、里昂葡萄球菌、施氏葡萄球菌、巴氏葡萄球菌、耳葡萄球葡萄球菌、施氏葡萄球菌、巴氏葡萄球菌、耳葡萄球葡萄球菌、施氏葡萄球菌、巴氏葡萄球菌、耳葡萄球葡萄球菌、施氏葡萄球菌、巴氏葡萄球菌、耳葡萄球菌、孔氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌、解糖葡萄球菌、菌、孔氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌、解糖葡萄球菌、菌、孔氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌、解糖葡萄球菌、菌、孔氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌、解糖葡萄球菌、山羊葡萄球菌、普氏葡萄球菌、中间葡萄球菌等。山羊葡萄球菌、普氏葡萄球菌、中间葡萄球菌等。山羊葡萄球菌、普氏葡萄球菌、中间葡萄球菌等。山羊葡萄球菌

7、、普氏葡萄球菌、中间葡萄球菌等。二、临床意义n n凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌是人类重要致病菌凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌是人类重要致病菌凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌是人类重要致病菌凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌是人类重要致病菌n n可引起社区和医院感染可引起社区和医院感染可引起社区和医院感染可引起社区和医院感染n n感染常以急性、化脓性为特征，如果未经有效治疗，感染常以急性、化脓性为特征，如果未经有效治疗，感染常以急性、化脓性为特征，如果未经有效治疗，感染常以急性、化脓性为特征，如果未经有效治疗，感染可扩散至周围组织或经菌血症转移至其他器官感染可扩散至周围组织或经菌血症转移至其他器官感染可扩散至周围组

8、织或经菌血症转移至其他器官感染可扩散至周围组织或经菌血症转移至其他器官n n常见的感染常见的感染常见的感染常见的感染n n疖、痈、外科切口、创伤等局部化脓性感染和骨髓炎、化脓疖、痈、外科切口、创伤等局部化脓性感染和骨髓炎、化脓疖、痈、外科切口、创伤等局部化脓性感染和骨髓炎、化脓疖、痈、外科切口、创伤等局部化脓性感染和骨髓炎、化脓性关节炎、肺炎、心内膜炎、脑膜炎、菌血症等全身性感染性关节炎、肺炎、心内膜炎、脑膜炎、菌血症等全身性感染性关节炎、肺炎、心内膜炎、脑膜炎、菌血症等全身性感染性关节炎、肺炎、心内膜炎、脑膜炎、菌血症等全身性感染临床意义n n致病性主要与各种侵袭性酶类和多种毒素有关致病性主

9、要与各种侵袭性酶类和多种毒素有关致病性主要与各种侵袭性酶类和多种毒素有关致病性主要与各种侵袭性酶类和多种毒素有关n n肠毒素引起食物中毒，表现为急性胃肠炎肠毒素引起食物中毒，表现为急性胃肠炎肠毒素引起食物中毒，表现为急性胃肠炎肠毒素引起食物中毒，表现为急性胃肠炎n n噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体IIII群产生的剥脱毒素（或称表皮溶解素）可引群产生的剥脱毒素（或称表皮溶解素）可引群产生的剥脱毒素（或称表皮溶解素）可引群产生的剥脱毒素（或称表皮溶解素）可引起人类烫伤样皮肤综合征起人类烫伤样皮肤综合征起人类烫伤样皮肤综合征起人类烫伤样皮肤综合征n n多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人多见于新生儿、幼

10、儿和免疫功能低下的成人多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人n n皮肤呈弥漫性红斑和水疱形成，继以表皮上层大量脱落皮肤呈弥漫性红斑和水疱形成，继以表皮上层大量脱落皮肤呈弥漫性红斑和水疱形成，继以表皮上层大量脱落皮肤呈弥漫性红斑和水疱形成，继以表皮上层大量脱落n n由噬菌体由噬菌体由噬菌体由噬菌体群产生的毒性休克综合征毒素群产生的毒性休克综合征毒素群产生的毒性休克综合征毒素群产生的毒性休克综合征毒素- -I I（Toxic Toxic shock syndrome toxin I, TSST-1shock syndrome toxin I, TSST-1）n

11、 n属超抗原家族，刺激属超抗原家族，刺激属超抗原家族，刺激属超抗原家族，刺激T T细胞诱发细胞诱发细胞诱发细胞诱发TNFTNF和和和和IL-1IL-1n n可致机体多个器官的功能紊乱或引起毒性休克综合征可致机体多个器官的功能紊乱或引起毒性休克综合征可致机体多个器官的功能紊乱或引起毒性休克综合征可致机体多个器官的功能紊乱或引起毒性休克综合征(TSS)(TSS)临床意义n nCoNSCoNS是人体皮肤黏膜正常菌群之一是人体皮肤黏膜正常菌群之一是人体皮肤黏膜正常菌群之一是人体皮肤黏膜正常菌群之一n n是医院感染的主要病原菌是医院感染的主要病原菌是医院感染的主要病原菌是医院感染的主要病原菌n n表皮葡

12、萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌n n人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管感染、腹膜透析性腹膜炎、人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管感染、腹膜透析性腹膜炎、人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管感染、腹膜透析性腹膜炎、人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管感染、腹膜透析性腹膜炎、血管移植物感染和人工关节感染等血管移植物感染和人工关节感染等血管移植物感染和人工关节感染等血管移植物感染和人工关节感染等n n腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌n n女性尿路感染的重要病原菌女性尿路感染的重要病原菌女性尿路感染的重要病原菌女性尿路感染的重要病原菌n n其他凝固酶阴性葡萄球菌其他凝固酶阴性葡萄球菌其他凝固酶阴性葡萄

13、球菌其他凝固酶阴性葡萄球菌n n重要的条件致病菌和免疫受损患者的感染菌重要的条件致病菌和免疫受损患者的感染菌重要的条件致病菌和免疫受损患者的感染菌重要的条件致病菌和免疫受损患者的感染菌n n产生荚膜多糖或糖萼有关产生荚膜多糖或糖萼有关产生荚膜多糖或糖萼有关产生荚膜多糖或糖萼有关n n增强细菌与外来物质（生物性瓣膜、导管等）表面的增强细菌与外来物质（生物性瓣膜、导管等）表面的增强细菌与外来物质（生物性瓣膜、导管等）表面的增强细菌与外来物质（生物性瓣膜、导管等）表面的粘附或在其表面形成一层生物膜而保护细菌对抗杀菌粘附或在其表面形成一层生物膜而保护细菌对抗杀菌粘附或在其表面形成一层生物膜而保护细菌对

14、抗杀菌粘附或在其表面形成一层生物膜而保护细菌对抗杀菌物质作用。物质作用。物质作用。物质作用。 三、生物学特性n n直径直径直径直径0.51.50.51.5mm、革兰阳性球菌革兰阳性球菌革兰阳性球菌革兰阳性球菌n n呈单个、成双、短链（液体培养基或脓汁中）或成簇排呈单个、成双、短链（液体培养基或脓汁中）或成簇排呈单个、成双、短链（液体培养基或脓汁中）或成簇排呈单个、成双、短链（液体培养基或脓汁中）或成簇排列呈葡萄串样，无鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜列呈葡萄串样，无鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜列呈葡萄串样，无鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜列呈葡萄串样，无鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜n n在金

15、黄色葡萄球菌的细胞壁有葡萄球菌在金黄色葡萄球菌的细胞壁有葡萄球菌在金黄色葡萄球菌的细胞壁有葡萄球菌在金黄色葡萄球菌的细胞壁有葡萄球菌A A蛋白，具有抗蛋白，具有抗蛋白，具有抗蛋白，具有抗原性原性原性原性n n大多为兼性厌氧菌大多为兼性厌氧菌大多为兼性厌氧菌大多为兼性厌氧菌, ,对营养要求不高，最适生长条对营养要求不高，最适生长条对营养要求不高，最适生长条对营养要求不高，最适生长条件件件件35373537，pH7.47.6pH7.47.6。普通培养基上形成直径普通培养基上形成直径普通培养基上形成直径普通培养基上形成直径2323mmmm不透明的圆形凸起菌落不透明的圆形凸起菌落不透明的圆形凸起菌落不

16、透明的圆形凸起菌落n n产生金黄色、白色、柠檬色等非水溶性色素附着在产生金黄色、白色、柠檬色等非水溶性色素附着在产生金黄色、白色、柠檬色等非水溶性色素附着在产生金黄色、白色、柠檬色等非水溶性色素附着在菌落上。菌落上。菌落上。菌落上。生物学特性生物学特性n n金黄色葡萄球菌血琼脂平板上菌落周围有透金黄色葡萄球菌血琼脂平板上菌落周围有透金黄色葡萄球菌血琼脂平板上菌落周围有透金黄色葡萄球菌血琼脂平板上菌落周围有透 明溶血环。能在含明溶血环。能在含明溶血环。能在含明溶血环。能在含10%15% 10%15% NaClNaCl琼脂中生长琼脂中生长琼脂中生长琼脂中生长n n该菌的抵抗力比其他无芽胞细菌强，耐

17、干燥该菌的抵抗力比其他无芽胞细菌强，耐干燥该菌的抵抗力比其他无芽胞细菌强，耐干燥该菌的抵抗力比其他无芽胞细菌强，耐干燥n n近年来耐药性增强，对多种抗菌药物不敏感近年来耐药性增强，对多种抗菌药物不敏感近年来耐药性增强，对多种抗菌药物不敏感近年来耐药性增强，对多种抗菌药物不敏感n n生化反应活泼、能分解多种糖类和蛋白质，生化反应活泼、能分解多种糖类和蛋白质，生化反应活泼、能分解多种糖类和蛋白质，生化反应活泼、能分解多种糖类和蛋白质， 触酶阳性触酶阳性触酶阳性触酶阳性n n该属细菌该属细菌该属细菌该属细菌DNA G+C mol%DNA G+C mol% 为为为为30393039酶和毒素n n葡萄球

18、菌属产生多种酶和毒素葡萄球菌属产生多种酶和毒素n n产生产生2种血浆凝固酶种血浆凝固酶n n结合凝固酶或聚集因子结合凝固酶或聚集因子结合凝固酶或聚集因子结合凝固酶或聚集因子n n是结合在菌体表面的凝固酶，能与血浆中的纤维蛋是结合在菌体表面的凝固酶，能与血浆中的纤维蛋是结合在菌体表面的凝固酶，能与血浆中的纤维蛋是结合在菌体表面的凝固酶，能与血浆中的纤维蛋白原交联使菌体快速凝集白原交联使菌体快速凝集白原交联使菌体快速凝集白原交联使菌体快速凝集n n游离凝固酶游离凝固酶游离凝固酶游离凝固酶n n是细菌分泌到菌体外的凝固酶，能被血浆中的协同是细菌分泌到菌体外的凝固酶，能被血浆中的协同是细菌分泌到菌体外

19、的凝固酶，能被血浆中的协同是细菌分泌到菌体外的凝固酶，能被血浆中的协同因子（因子（因子（因子（cofactorcofactor）激活形成复合物，再使纤维蛋白激活形成复合物，再使纤维蛋白激活形成复合物，再使纤维蛋白激活形成复合物，再使纤维蛋白原转变成纤维蛋白，而使血浆凝固原转变成纤维蛋白，而使血浆凝固原转变成纤维蛋白，而使血浆凝固原转变成纤维蛋白，而使血浆凝固酶和毒素n n耐热核酸酶耐热核酸酶耐热核酸酶耐热核酸酶n n葡萄球菌溶素葡萄球菌溶素葡萄球菌溶素葡萄球菌溶素n n有有有有 、 、 、 等等等等n n破坏红细胞、白细胞、血小板以及肝细胞等破坏红细胞、白细胞、血小板以及肝细胞等破坏红细胞、白

20、细胞、血小板以及肝细胞等破坏红细胞、白细胞、血小板以及肝细胞等n n肠毒素肠毒素肠毒素肠毒素n n是一组对热稳定的可溶性蛋白质，耐热是一组对热稳定的可溶性蛋白质，耐热是一组对热稳定的可溶性蛋白质，耐热是一组对热稳定的可溶性蛋白质，耐热100 100 3030min ,min ,分子量为分子量为分子量为分子量为26263030kDakDa，能够抵抗胃肠液中蛋白酶的水能够抵抗胃肠液中蛋白酶的水能够抵抗胃肠液中蛋白酶的水能够抵抗胃肠液中蛋白酶的水解作用解作用解作用解作用n n根据抗原性和等电点的不同可分为根据抗原性和等电点的不同可分为根据抗原性和等电点的不同可分为根据抗原性和等电点的不同可分为A A

21、、B B 、C1C1、C2C2、 C3 C3、DD、E E、G G和和和和HH等等等等9 9个血清型，以个血清型，以个血清型，以个血清型，以A A、D D 型多见型多见型多见型多见n n编码肠毒素基因大多位于染色体上（编码肠毒素基因大多位于染色体上（编码肠毒素基因大多位于染色体上（编码肠毒素基因大多位于染色体上（DD型由质粒编码）型由质粒编码）型由质粒编码）型由质粒编码）酶和毒素n n毒性休克综合征毒素毒性休克综合征毒素n n透明质酸酶、磷脂酶、触酶、杀白细胞透明质酸酶、磷脂酶、触酶、杀白细胞 素和表皮剥脱毒素等素和表皮剥脱毒素等n n携带诱导性的青霉素酶和乙酰基转移酶质粒，携带诱导性的青霉素

22、酶和乙酰基转移酶质粒，通过转导进行质粒的转移通过转导进行质粒的转移n n部分菌株通过获得外源性的部分菌株通过获得外源性的macA基因而基因而 产生青霉素结合蛋白产生青霉素结合蛋白2a（PBP2a），），导致对导致对所有所有内酰胺类抗生素耐药内酰胺类抗生素耐药 四、微生物检验四、微生物检验四、微生物检验四、微生物检验 （一）检验程序（一）检验程序（一）检验程序（一）检验程序 （二）标本采集n n根据感染的部位，采集不同的标本。根据感染的部位，采集不同的标本。n n该属细菌广泛分布在人体皮肤和黏膜，采该属细菌广泛分布在人体皮肤和黏膜，采取时避免病灶周围正常菌群污染取时避免病灶周围正常菌群污染。 （

23、三）标本直接检查n n无菌体液如脑脊液和关节穿刺液可使用涂无菌体液如脑脊液和关节穿刺液可使用涂 片、革兰染色后直接显微镜检查，查见细菌片、革兰染色后直接显微镜检查，查见细菌 具有重要临床价值。具有重要临床价值。n n其他体液标本如同时伴有炎性细胞时则直接其他体液标本如同时伴有炎性细胞时则直接 显微镜检查结果也具有参考价值。显微镜检查结果也具有参考价值。n n涂片检查发现有形态相似的革兰阳性球菌，涂片检查发现有形态相似的革兰阳性球菌， 则可初步报告则可初步报告“查见类似葡萄球菌属革兰阳查见类似葡萄球菌属革兰阳性性 球菌球菌”，并进一步进行分离和鉴定予以证实。，并进一步进行分离和鉴定予以证实。 （

24、四）分离培养与鉴定n n脓液、分泌物等脓液、分泌物等n n接种于血琼脂平板接种于血琼脂平板接种于血琼脂平板接种于血琼脂平板n n有污染的标本如粪便等有污染的标本如粪便等n n应接种在选择平板上，如甘露醇高盐平板、哥应接种在选择平板上，如甘露醇高盐平板、哥应接种在选择平板上，如甘露醇高盐平板、哥应接种在选择平板上，如甘露醇高盐平板、哥伦比亚多粘菌素奈啶酸平板伦比亚多粘菌素奈啶酸平板伦比亚多粘菌素奈啶酸平板伦比亚多粘菌素奈啶酸平板n n血液标本则用肉汤增菌培养基血液标本则用肉汤增菌培养基 葡萄球菌属内各菌种鉴定方法 1.菌落性状 n n金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌n n

25、直径直径直径直径6 6 6 6 8mn8mn8mn8mn，金黄色或橙色，菌落周围出现或不出现透明溶血环金黄色或橙色，菌落周围出现或不出现透明溶血环金黄色或橙色，菌落周围出现或不出现透明溶血环金黄色或橙色，菌落周围出现或不出现透明溶血环n n表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌n n直径为直径为直径为直径为5 5 5 5 6 6 6 6mmmmmmmm，某些产粘液菌株能粘附在琼脂平板表面，无色或白色某些产粘液菌株能粘附在琼脂平板表面，无色或白色某些产粘液菌株能粘附在琼脂平板表面，无色或白色某些产粘液菌株能粘附在琼脂平板表面，无色或白色n n溶血葡萄球菌溶血葡萄球菌溶血葡萄球菌溶血葡萄

26、球菌n n直径直径直径直径5 5 5 5 9 9 9 9mmmmmmmm，不透明，无色素或奶油色、黄色，不透明，无色素或奶油色、黄色，不透明，无色素或奶油色、黄色，不透明，无色素或奶油色、黄色n n里昂葡萄球菌里昂葡萄球菌里昂葡萄球菌里昂葡萄球菌n n直径直径直径直径4 4 4 4 7 7 7 7mmmmmmmm，边缘整齐稍扁，奶色、黄色和沃氏葡萄球菌相似边缘整齐稍扁，奶色、黄色和沃氏葡萄球菌相似边缘整齐稍扁，奶色、黄色和沃氏葡萄球菌相似边缘整齐稍扁，奶色、黄色和沃氏葡萄球菌相似n n腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌n n直径直径直径直径5 5 5 5 8 8 8 8mmmmm

27、mmm，白色或柠檬色白色或柠檬色白色或柠檬色白色或柠檬色n n菌落外观疑为葡萄球菌者应进行革兰染色证实菌落外观疑为葡萄球菌者应进行革兰染色证实菌落外观疑为葡萄球菌者应进行革兰染色证实菌落外观疑为葡萄球菌者应进行革兰染色证实n n甘露醇高盐平板上金黄色葡萄球菌菌落为黄色甘露醇高盐平板上金黄色葡萄球菌菌落为黄色甘露醇高盐平板上金黄色葡萄球菌菌落为黄色甘露醇高盐平板上金黄色葡萄球菌菌落为黄色2凝固酶试验 n n有玻片法和试管法两种有玻片法和试管法两种n n玻片凝固酶试验玻片凝固酶试验-测定结合型凝固酶测定结合型凝固酶n n试验时挑取少数菌落培养物（不能用生试验时挑取少数菌落培养物（不能用生 长高盐琼

28、脂上的菌落）加入长高盐琼脂上的菌落）加入1滴血浆，滴血浆，10 秒内观察细菌聚集和凝块形成秒内观察细菌聚集和凝块形成n n金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌呈现金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌呈现 阳性反应阳性反应2凝固酶试验n n试管凝固酶试验试管凝固酶试验试管凝固酶试验试管凝固酶试验- -测定分泌型凝固酶测定分泌型凝固酶测定分泌型凝固酶测定分泌型凝固酶n n以孵育过夜的牛心脑浸液肉汤培养物和血浆在以孵育过夜的牛心脑浸液肉汤培养物和血浆在以孵育过夜的牛心脑浸液肉汤培养物和血浆在以孵育过夜的牛心脑浸液肉汤培养物和血浆在3737水浴中孵育水浴中孵育水浴中孵育水浴中孵育4 4h h，观察凝块形成。如试验

29、结果为阴性观察凝块形成。如试验结果为阴性观察凝块形成。如试验结果为阴性观察凝块形成。如试验结果为阴性者再置室温者再置室温者再置室温者再置室温18241824h h，因某些菌种（中间葡萄球菌、因某些菌种（中间葡萄球菌、因某些菌种（中间葡萄球菌、因某些菌种（中间葡萄球菌、猪葡萄球菌）的凝集出现所需时间长于猪葡萄球菌）的凝集出现所需时间长于猪葡萄球菌）的凝集出现所需时间长于猪葡萄球菌）的凝集出现所需时间长于4 4h hn n必须注意必须注意必须注意必须注意n n某些菌株产生的葡激酶在延长孵育时间后可使凝块溶解某些菌株产生的葡激酶在延长孵育时间后可使凝块溶解某些菌株产生的葡激酶在延长孵育时间后可使凝块

30、溶解某些菌株产生的葡激酶在延长孵育时间后可使凝块溶解使之产生假阴性使之产生假阴性使之产生假阴性使之产生假阴性n n若使用的不是无菌血浆可产生假阳性或假阴性结果；若使用的不是无菌血浆可产生假阳性或假阴性结果；若使用的不是无菌血浆可产生假阳性或假阴性结果；若使用的不是无菌血浆可产生假阳性或假阴性结果；n n细菌不是纯培养物或污染可导致假阳性细菌不是纯培养物或污染可导致假阳性细菌不是纯培养物或污染可导致假阳性细菌不是纯培养物或污染可导致假阳性3耐热核酸酶试验 n n大多数金黄色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、大多数金黄色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、中间葡萄球菌、猪葡萄球菌能产生耐热核中间葡萄球菌、猪葡萄球菌能产

31、生耐热核酸酶。酸酶。n n表皮葡萄球菌、模仿葡萄球菌、肉葡萄球表皮葡萄球菌、模仿葡萄球菌、肉葡萄球菌含微弱耐热核酸酶。菌含微弱耐热核酸酶。4磷酸酶试验 n n 大多数的表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌、大多数的表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、中间葡萄球菌和猪葡萄球施氏葡萄球菌、中间葡萄球菌和猪葡萄球菌为阳性。菌为阳性。n n将待测菌种点种在加有硝基酚磷酸盐的将待测菌种点种在加有硝基酚磷酸盐的pH5.66.8 MH琼脂上，孵育琼脂上，孵育1824h，菌落菌落周围出现黄色为阳性。周围出现黄色为阳性。5吡咯烷酮芳基酰胺酶试验 n n 溶血葡萄球菌、里昂葡萄球菌、施氏葡萄溶血葡萄球菌、里昂葡萄

32、球菌、施氏葡萄球菌和中间葡萄球菌为阳性。球菌和中间葡萄球菌为阳性。n n将孵育将孵育24h斜面培养物接种在含吡咯烷酮斜面培养物接种在含吡咯烷酮-萘基酰胺（萘基酰胺（PYR）肉汤中，使细菌浓度调肉汤中，使细菌浓度调整为整为2号麦氏管浊度，号麦氏管浊度，35孵育孵育2h，加入加入PYR试剂后试剂后2分钟内呈现深紫红色为阳性。分钟内呈现深紫红色为阳性。6其他鉴定试验 n n常用的葡萄球菌属种间细菌的鉴定生化试常用的葡萄球菌属种间细菌的鉴定生化试验验n n鸟氨酸脱羧酶试验、脲酶试验、鸟氨酸脱羧酶试验、脲酶试验、鸟氨酸脱羧酶试验、脲酶试验、鸟氨酸脱羧酶试验、脲酶试验、-半乳糖苷酶、半乳糖苷酶、半乳糖苷酶

33、、半乳糖苷酶、3-3-羟基丁酮酸试验、新生霉素敏感试验、多粘羟基丁酮酸试验、新生霉素敏感试验、多粘羟基丁酮酸试验、新生霉素敏感试验、多粘羟基丁酮酸试验、新生霉素敏感试验、多粘菌素菌素菌素菌素B B耐药试验、糖产酸试验耐药试验、糖产酸试验耐药试验、糖产酸试验耐药试验、糖产酸试验（五）肠毒素检测n n动物学试验动物学试验动物学试验动物学试验n n经典的方法是采用幼猫腹腔注射经典的方法是采用幼猫腹腔注射经典的方法是采用幼猫腹腔注射经典的方法是采用幼猫腹腔注射( (肉汤培养物或呕吐物肉汤培养物或呕吐物肉汤培养物或呕吐物肉汤培养物或呕吐物) )，4 4h h 内发生呕吐腹泻和体温升高或死亡等现象者，提内

34、发生呕吐腹泻和体温升高或死亡等现象者，提内发生呕吐腹泻和体温升高或死亡等现象者，提内发生呕吐腹泻和体温升高或死亡等现象者，提示金黄色葡萄球菌肠毒素存在示金黄色葡萄球菌肠毒素存在示金黄色葡萄球菌肠毒素存在示金黄色葡萄球菌肠毒素存在n n 琼脂扩散试验或琼脂扩散试验或琼脂扩散试验或琼脂扩散试验或ELISAELISA法测定法测定法测定法测定n n用琼脂扩散试验测定待测标本中的金黄色葡萄球菌肠用琼脂扩散试验测定待测标本中的金黄色葡萄球菌肠用琼脂扩散试验测定待测标本中的金黄色葡萄球菌肠用琼脂扩散试验测定待测标本中的金黄色葡萄球菌肠毒素与相应抗毒素在琼脂糖中进行双相扩散，观察有毒素与相应抗毒素在琼脂糖中进

35、行双相扩散，观察有毒素与相应抗毒素在琼脂糖中进行双相扩散，观察有毒素与相应抗毒素在琼脂糖中进行双相扩散，观察有无沉淀线产生无沉淀线产生无沉淀线产生无沉淀线产生n n将抗毒素包被在固相载体中以双抗体夹心将抗毒素包被在固相载体中以双抗体夹心将抗毒素包被在固相载体中以双抗体夹心将抗毒素包被在固相载体中以双抗体夹心ELISAELISA法检测法检测法检测法检测样本中的肠毒素样本中的肠毒素样本中的肠毒素样本中的肠毒素第二节 链球菌属n n链球菌属（链球菌属（Streptococcus）n n细菌种类多，分布广细菌种类多，分布广n n其中某些菌种为毒力强的致病菌其中某些菌种为毒力强的致病菌其中某些菌种为毒力

36、强的致病菌其中某些菌种为毒力强的致病菌n n另一些则是作为正常菌群栖居于宿主的呼吸道、另一些则是作为正常菌群栖居于宿主的呼吸道、另一些则是作为正常菌群栖居于宿主的呼吸道、另一些则是作为正常菌群栖居于宿主的呼吸道、消化道、泌尿生殖道消化道、泌尿生殖道消化道、泌尿生殖道消化道、泌尿生殖道n n还有一些是皮肤上的过路菌和黏膜上的定居菌还有一些是皮肤上的过路菌和黏膜上的定居菌还有一些是皮肤上的过路菌和黏膜上的定居菌还有一些是皮肤上的过路菌和黏膜上的定居菌一、分类n n链球菌属的分类较为复杂链球菌属的分类较为复杂n n传统分类传统分类n n以血平板上溶血现象以血平板上溶血现象以血平板上溶血现象以血平板上

37、溶血现象n nLancefieldLancefield抗原血清分型抗原血清分型抗原血清分型抗原血清分型n n种系分类法种系分类法n n链球菌属的分类较以前的分类有较大的变化链球菌属的分类较以前的分类有较大的变化链球菌属的分类较以前的分类有较大的变化链球菌属的分类较以前的分类有较大的变化传统分类n n根据链球菌属各种细菌在血平板上的溶血现象根据链球菌属各种细菌在血平板上的溶血现象根据链球菌属各种细菌在血平板上的溶血现象根据链球菌属各种细菌在血平板上的溶血现象n n甲型（甲型（甲型（甲型（ ）溶血性链球菌溶血性链球菌溶血性链球菌溶血性链球菌n n乙型（乙型（乙型（乙型（ ）溶血性链球菌溶血性链球菌

38、溶血性链球菌溶血性链球菌n n不出现溶血的丙型（不出现溶血的丙型（不出现溶血的丙型（不出现溶血的丙型（ ）链球菌链球菌链球菌链球菌n n根据根据根据根据LancefieldLancefield抗原血清分型抗原血清分型抗原血清分型抗原血清分型n n分为分为分为分为A A、B B、C C、DD、等等等等2020群群群群n n血清群与溶血特性没有相关性。对人类致病的主血清群与溶血特性没有相关性。对人类致病的主血清群与溶血特性没有相关性。对人类致病的主血清群与溶血特性没有相关性。对人类致病的主要是要是要是要是A A群群群群种系分类法n n根据种系分类法的研究结果根据种系分类法的研究结果根据种系分类法的

39、研究结果根据种系分类法的研究结果n n原来归属为原来归属为原来归属为原来归属为DD群链球菌的肠球菌和群链球菌的肠球菌和群链球菌的肠球菌和群链球菌的肠球菌和NN群链球菌已分别独群链球菌已分别独群链球菌已分别独群链球菌已分别独立为肠球菌属（立为肠球菌属（立为肠球菌属（立为肠球菌属（EnterococcusEnterococcus）和乳球菌属和乳球菌属和乳球菌属和乳球菌属（lactococcuslactococcus）n n遗传学和血清学分型不能统一遗传学和血清学分型不能统一遗传学和血清学分型不能统一遗传学和血清学分型不能统一n n在遗传学上相关的同种细菌其抗原可出现异质性在遗传学上相关的同种细菌其

40、抗原可出现异质性在遗传学上相关的同种细菌其抗原可出现异质性在遗传学上相关的同种细菌其抗原可出现异质性n n毫无相关的菌种可出现同一抗原。毫无相关的菌种可出现同一抗原。毫无相关的菌种可出现同一抗原。毫无相关的菌种可出现同一抗原。n n根据伯杰鉴定细菌手册第根据伯杰鉴定细菌手册第根据伯杰鉴定细菌手册第根据伯杰鉴定细菌手册第9 9版，链球菌目前分为版，链球菌目前分为版，链球菌目前分为版，链球菌目前分为4040个种和亚种个种和亚种个种和亚种个种和亚种传统的分类方法n n 溶血性链球菌溶血性链球菌溶血性链球菌溶血性链球菌n nA A、C C、G G群抗原群抗原群抗原群抗原n n菌落直径大于菌落直径大于菌

41、落直径大于菌落直径大于0.50.5mm mm n nA A群的化脓性链球菌（群的化脓性链球菌（群的化脓性链球菌（群的化脓性链球菌（S. S. pyogenespyogenes）、）、）、）、C C群、群、群、群、G G群的马链球菌群的马链球菌群的马链球菌群的马链球菌（S.equiS.equi）和似马链球菌（和似马链球菌（和似马链球菌（和似马链球菌（S.equismilisS.equismilis）n n菌落直径小于菌落直径小于菌落直径小于菌落直径小于0.50.5mmmm具具具具A A、C C、G G群抗原，统称米勒链球菌群抗原，统称米勒链球菌群抗原，统称米勒链球菌群抗原，统称米勒链球菌（S.m

42、illeriS.milleri）n n咽喉炎链球菌、中间型链球菌和星座链球菌咽喉炎链球菌、中间型链球菌和星座链球菌咽喉炎链球菌、中间型链球菌和星座链球菌咽喉炎链球菌、中间型链球菌和星座链球菌n n还有还有还有还有 溶血和不溶血的细菌溶血和不溶血的细菌溶血和不溶血的细菌溶血和不溶血的细菌n nB B群抗原群抗原群抗原群抗原n n无乳链球菌（无乳链球菌（无乳链球菌（无乳链球菌（S.agalactiaeS.agalactiae）传统的分类方法n n溶血性链球菌溶血性链球菌n n包括肺炎链球菌包括肺炎链球菌包括肺炎链球菌包括肺炎链球菌（S.pneumoniaeS.pneumoniae）n n草绿色链球

43、菌群（草绿色链球菌群（草绿色链球菌群（草绿色链球菌群（ViridansViridans streptococci streptococci）n n不溶血不溶血D群链球菌群链球菌n n牛链球菌（牛链球菌（牛链球菌（牛链球菌（S S.bovis.bovis）二、临床意义n n化脓性链球菌是致病力最强的一种链球菌化脓性链球菌是致病力最强的一种链球菌化脓性链球菌是致病力最强的一种链球菌化脓性链球菌是致病力最强的一种链球菌n n能产生多种毒素能产生多种毒素能产生多种毒素能产生多种毒素n n链球菌溶素链球菌溶素链球菌溶素链球菌溶素OO和和和和S Sn n红疹毒素红疹毒素红疹毒素红疹毒素n nMM蛋白、脂磷

44、壁酸蛋白、脂磷壁酸蛋白、脂磷壁酸蛋白、脂磷壁酸n n酶（链激酶、链道酶、透明质酸酶等）酶（链激酶、链道酶、透明质酸酶等）酶（链激酶、链道酶、透明质酸酶等）酶（链激酶、链道酶、透明质酸酶等）n n可引起急性咽炎、呼吸道感染、丹毒、脓疱病、可引起急性咽炎、呼吸道感染、丹毒、脓疱病、可引起急性咽炎、呼吸道感染、丹毒、脓疱病、可引起急性咽炎、呼吸道感染、丹毒、脓疱病、 软组织感染、心内膜炎和脑膜炎等软组织感染、心内膜炎和脑膜炎等软组织感染、心内膜炎和脑膜炎等软组织感染、心内膜炎和脑膜炎等n n产毒株还可引起猩红热产毒株还可引起猩红热产毒株还可引起猩红热产毒株还可引起猩红热n n可致感染后的变态反应性疾

45、病如急性肾小球肾炎、可致感染后的变态反应性疾病如急性肾小球肾炎、可致感染后的变态反应性疾病如急性肾小球肾炎、可致感染后的变态反应性疾病如急性肾小球肾炎、 风湿热等风湿热等风湿热等风湿热等n n近年来报道引起毒素休克综合征近年来报道引起毒素休克综合征近年来报道引起毒素休克综合征近年来报道引起毒素休克综合征临床意义n n无乳链球菌是新生儿菌血症和脑膜炎的常见菌无乳链球菌是新生儿菌血症和脑膜炎的常见菌无乳链球菌是新生儿菌血症和脑膜炎的常见菌无乳链球菌是新生儿菌血症和脑膜炎的常见菌n n该菌定居于妇女生殖道该菌定居于妇女生殖道该菌定居于妇女生殖道该菌定居于妇女生殖道n n能导致新生儿感染能导致新生儿感

46、染能导致新生儿感染能导致新生儿感染n n早发型新生儿感染多发病于出生后早发型新生儿感染多发病于出生后早发型新生儿感染多发病于出生后早发型新生儿感染多发病于出生后2424h h，以肺炎为主以肺炎为主以肺炎为主以肺炎为主n n晚发型为产后晚发型为产后晚发型为产后晚发型为产后7 7天至天至天至天至3 3月内，以脑膜炎和菌血症为主月内，以脑膜炎和菌血症为主月内，以脑膜炎和菌血症为主月内，以脑膜炎和菌血症为主n nB B群链球菌对成人侵袭力较弱群链球菌对成人侵袭力较弱群链球菌对成人侵袭力较弱群链球菌对成人侵袭力较弱n n主要有肾盂肾炎、子宫内膜炎主要有肾盂肾炎、子宫内膜炎主要有肾盂肾炎、子宫内膜炎主要有

47、肾盂肾炎、子宫内膜炎n n糖尿病、泌尿生殖道功能失调、肿瘤和免疫机能低下糖尿病、泌尿生殖道功能失调、肿瘤和免疫机能低下糖尿病、泌尿生殖道功能失调、肿瘤和免疫机能低下糖尿病、泌尿生殖道功能失调、肿瘤和免疫机能低下者易受者易受者易受者易受B B群链球菌感染群链球菌感染群链球菌感染群链球菌感染临床意义n nC、G群群溶血性链球菌溶血性链球菌n n与化脓性链球菌有相似的毒力因子，引起上述与化脓性链球菌有相似的毒力因子，引起上述与化脓性链球菌有相似的毒力因子，引起上述与化脓性链球菌有相似的毒力因子，引起上述相似的感染相似的感染相似的感染相似的感染n n米勒链球菌是人体口腔、上呼吸道、消化米勒链球菌是人体

48、口腔、上呼吸道、消化道、泌尿生殖道正常菌群道、泌尿生殖道正常菌群n n尽管在化脓性感染病灶中能分离到该菌，但大尽管在化脓性感染病灶中能分离到该菌，但大尽管在化脓性感染病灶中能分离到该菌，但大尽管在化脓性感染病灶中能分离到该菌，但大都是手术和创伤引起的内源性感染都是手术和创伤引起的内源性感染都是手术和创伤引起的内源性感染都是手术和创伤引起的内源性感染临床意义n n肺炎链球菌肺炎链球菌n n大叶性肺炎、支气管炎大叶性肺炎、支气管炎大叶性肺炎、支气管炎大叶性肺炎、支气管炎n n中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑膜炎和菌血症中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑膜炎和菌血症中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑膜炎和菌血症中耳炎、乳

49、突炎、鼻窦炎、脑膜炎和菌血症n n肺炎链球菌的荚膜在细菌的侵袭力上起着肺炎链球菌的荚膜在细菌的侵袭力上起着重要作用重要作用n n肺炎链球菌的溶血素、神经氨酸酶也是其主要肺炎链球菌的溶血素、神经氨酸酶也是其主要肺炎链球菌的溶血素、神经氨酸酶也是其主要肺炎链球菌的溶血素、神经氨酸酶也是其主要致病物质致病物质致病物质致病物质临床意义n n草绿色链球菌草绿色链球菌n n人体口腔、消化道、女性生殖道的正常菌群，人体口腔、消化道、女性生殖道的正常菌群，人体口腔、消化道、女性生殖道的正常菌群，人体口腔、消化道、女性生殖道的正常菌群，n n可引起心脏瓣膜异常患者的亚急性细菌性心内可引起心脏瓣膜异常患者的亚急性

50、细菌性心内可引起心脏瓣膜异常患者的亚急性细菌性心内可引起心脏瓣膜异常患者的亚急性细菌性心内膜炎膜炎膜炎膜炎n n从血液中分离出该菌常被认为是污染的细菌从血液中分离出该菌常被认为是污染的细菌从血液中分离出该菌常被认为是污染的细菌从血液中分离出该菌常被认为是污染的细菌n n血液链球菌血液链球菌、温和链球菌温和链球菌、格氏链球菌格氏链球菌、 口腔链球菌口腔链球菌、中间型链球菌中间型链球菌n n常分离自深部脓肿，特别是肝和脑的脓肿常分离自深部脓肿，特别是肝和脑的脓肿常分离自深部脓肿，特别是肝和脑的脓肿常分离自深部脓肿，特别是肝和脑的脓肿三、生物学特性三、生物学特性1形态n n链球菌是直径小于链球菌是直

51、径小于2m的球形或卵圆形革兰的球形或卵圆形革兰阳性球菌，呈链状排列，链的长短和细菌阳性球菌，呈链状排列，链的长短和细菌的种类及生长环境有关的种类及生长环境有关肺炎链球菌呈矛尖状，宽端相对尖端向肺炎链球菌呈矛尖状，宽端相对尖端向外，成双排列，无芽胞、无动力，但能外，成双排列，无芽胞、无动力，但能形成荚膜和粘液层形成荚膜和粘液层 2培养特性n n兼性厌氧菌兼性厌氧菌兼性厌氧菌兼性厌氧菌n n肺炎链球菌和草绿色链球菌某些种需要肺炎链球菌和草绿色链球菌某些种需要肺炎链球菌和草绿色链球菌某些种需要肺炎链球菌和草绿色链球菌某些种需要COCO2 2n n营养要求高营养要求高营养要求高营养要求高n n须在培养

52、基中加入血液、血清。最适生长温度须在培养基中加入血液、血清。最适生长温度须在培养基中加入血液、血清。最适生长温度须在培养基中加入血液、血清。最适生长温度35373537，pH7.47.6pH7.47.6n n血平板上形成灰白色小菌落血平板上形成灰白色小菌落血平板上形成灰白色小菌落血平板上形成灰白色小菌落n n不同菌种的菌落可形成不同菌种的菌落可形成不同菌种的菌落可形成不同菌种的菌落可形成 、 、 三种特征性溶血现象三种特征性溶血现象三种特征性溶血现象三种特征性溶血现象n n液体培养基中表现为絮状和颗粒沉淀液体培养基中表现为絮状和颗粒沉淀液体培养基中表现为絮状和颗粒沉淀液体培养基中表现为絮状和颗

53、粒沉淀n n肺炎链球菌肺炎链球菌肺炎链球菌肺炎链球菌n n荚膜多糖使菌落呈粘液状荚膜多糖使菌落呈粘液状荚膜多糖使菌落呈粘液状荚膜多糖使菌落呈粘液状n n产生自溶酶，培养产生自溶酶，培养产生自溶酶，培养产生自溶酶，培养4848h h后出现后出现后出现后出现“ “脐窝状脐窝状脐窝状脐窝状” ”菌落菌落菌落菌落3生化特性和抵抗力n n发酵葡萄糖和多种糖，不产气，乳酸为代发酵葡萄糖和多种糖，不产气，乳酸为代谢终末产物，触酶阴性谢终末产物，触酶阴性n n链球菌基因链球菌基因DNA中中G+C mol%为为3446n n抵抗力抵抗力n n本菌属大多数细菌对干燥和消毒剂敏感本菌属大多数细菌对干燥和消毒剂敏感本

54、菌属大多数细菌对干燥和消毒剂敏感本菌属大多数细菌对干燥和消毒剂敏感n n本菌属细菌较少引起细菌耐药性本菌属细菌较少引起细菌耐药性本菌属细菌较少引起细菌耐药性本菌属细菌较少引起细菌耐药性n n近年对青霉素耐药甚至多重耐药的肺炎链球菌的出近年对青霉素耐药甚至多重耐药的肺炎链球菌的出近年对青霉素耐药甚至多重耐药的肺炎链球菌的出近年对青霉素耐药甚至多重耐药的肺炎链球菌的出现并在全球播散，引起高度关注现并在全球播散，引起高度关注现并在全球播散，引起高度关注现并在全球播散，引起高度关注抗原结构n n抗原结构复杂抗原结构复杂n n多糖抗原多糖抗原多糖抗原多糖抗原n n位于细胞壁以此可将链球菌分类为位于细胞壁

55、以此可将链球菌分类为位于细胞壁以此可将链球菌分类为位于细胞壁以此可将链球菌分类为A A、B B、C C、DD、F F、G G等等等等2020群群群群n n蛋白抗原蛋白抗原蛋白抗原蛋白抗原n n主要有主要有主要有主要有MM蛋白、蛋白、蛋白、蛋白、F F蛋白和蛋白和蛋白和蛋白和G G蛋白等蛋白等蛋白等蛋白等四、微生物检验n n检验程序检验程序 （二）标本采集n n咽拭子、痰液、脓汁和血液等标本采集后在咽拭子、痰液、脓汁和血液等标本采集后在2h内运送到实验室，立即进行检查和接种内运送到实验室，立即进行检查和接种n n对对B群溶血链球菌的检查，用无菌棉签采集群溶血链球菌的检查，用无菌棉签采集第第35周

56、周37周妊娠妇女的阴道分泌物，置于周妊娠妇女的阴道分泌物，置于含多粘菌素含多粘菌素(10g/ml)和萘啶酸和萘啶酸(15g/ml)选选择性培养肉汤中孵育择性培养肉汤中孵育1824h，再作分离培养再作分离培养 （三）标本直接检查n n直接显微镜检查直接显微镜检查直接显微镜检查直接显微镜检查 n n标本涂片、革兰染色、显微镜检查见链状排列革兰标本涂片、革兰染色、显微镜检查见链状排列革兰标本涂片、革兰染色、显微镜检查见链状排列革兰标本涂片、革兰染色、显微镜检查见链状排列革兰 阳性球菌有助于无正常菌群污染标本的诊断阳性球菌有助于无正常菌群污染标本的诊断阳性球菌有助于无正常菌群污染标本的诊断阳性球菌有助

57、于无正常菌群污染标本的诊断n n荚膜肿胀试验用于检查肺炎链球菌荚膜肿胀试验用于检查肺炎链球菌荚膜肿胀试验用于检查肺炎链球菌荚膜肿胀试验用于检查肺炎链球菌n n直接检测抗原直接检测抗原直接检测抗原直接检测抗原n n咽拭标本的咽拭标本的咽拭标本的咽拭标本的A A群链球菌和女性生殖道标本的群链球菌和女性生殖道标本的群链球菌和女性生殖道标本的群链球菌和女性生殖道标本的B B群链群链群链群链 球菌可用抗原检测球菌可用抗原检测球菌可用抗原检测球菌可用抗原检测n n用凝集试验或用用凝集试验或用用凝集试验或用用凝集试验或用ELISAELISA方法等检测方法等检测方法等检测方法等检测n n该方法特异性和敏感度高

58、，当标本所含的菌数太少该方法特异性和敏感度高，当标本所含的菌数太少该方法特异性和敏感度高，当标本所含的菌数太少该方法特异性和敏感度高，当标本所含的菌数太少 可出现假阴性可出现假阴性可出现假阴性可出现假阴性 （四）分离培养与鉴定n n用羊血琼脂平板培养有助于识别溶血特性和进一步用羊血琼脂平板培养有助于识别溶血特性和进一步用羊血琼脂平板培养有助于识别溶血特性和进一步用羊血琼脂平板培养有助于识别溶血特性和进一步 鉴定鉴定鉴定鉴定n n初代分离需用初代分离需用初代分离需用初代分离需用5%5%COCO2 2环境，环境，环境，环境，35373537孵育孵育孵育孵育2424h hn n观察菌落性状观察菌落性

59、状观察菌落性状观察菌落性状n n菌落周围呈现透明溶血环的为菌落周围呈现透明溶血环的为菌落周围呈现透明溶血环的为菌落周围呈现透明溶血环的为 溶血性链球菌，菌落直径溶血性链球菌，菌落直径溶血性链球菌，菌落直径溶血性链球菌，菌落直径大于大于大于大于0.50.5mmmm或小于或小于或小于或小于0.50.5mmmm。草绿色溶血环的为草绿色溶血环的为草绿色溶血环的为草绿色溶血环的为 溶血性链溶血性链溶血性链溶血性链球菌。有些菌落灰白色不出现溶血环球菌。有些菌落灰白色不出现溶血环球菌。有些菌落灰白色不出现溶血环球菌。有些菌落灰白色不出现溶血环n n革兰染色为革兰阳性球菌，链状或短链状排列革兰染色为革兰阳性球

60、菌，链状或短链状排列革兰染色为革兰阳性球菌，链状或短链状排列革兰染色为革兰阳性球菌，链状或短链状排列n n触酶试验阴性，触酶试验阴性，触酶试验阴性，触酶试验阴性，6.5%6.5%NaClNaCl不生长者不生长者不生长者不生长者n n可确定为链球菌属细菌可确定为链球菌属细菌可确定为链球菌属细菌可确定为链球菌属细菌链球菌属内的鉴定试验溶血性链球菌鉴定n n 溶血性链球菌鉴定溶血性链球菌鉴定溶血性链球菌鉴定溶血性链球菌鉴定n nLancefieldLancefield群特异性抗原鉴定群特异性抗原鉴定群特异性抗原鉴定群特异性抗原鉴定n n根据根据根据根据LancefieldLancefield分群的要

61、求提取各菌落的抗原，与分群的要求提取各菌落的抗原，与分群的要求提取各菌落的抗原，与分群的要求提取各菌落的抗原，与相应的分群血清进行凝集试验。相应的分群血清进行凝集试验。相应的分群血清进行凝集试验。相应的分群血清进行凝集试验。n n与与与与B B群抗血清凝集的菌株可直接确认为无乳链球菌群抗血清凝集的菌株可直接确认为无乳链球菌群抗血清凝集的菌株可直接确认为无乳链球菌群抗血清凝集的菌株可直接确认为无乳链球菌n n与与与与F F群抗血清凝集并且菌落直径群抗血清凝集并且菌落直径群抗血清凝集并且菌落直径群抗血清凝集并且菌落直径0.50.5mmmm可确定为米勒可确定为米勒可确定为米勒可确定为米勒链球菌链球菌

62、链球菌链球菌n n与与与与A A、C C、G G群抗血清凝集的菌株不能确定种类，还需群抗血清凝集的菌株不能确定种类，还需群抗血清凝集的菌株不能确定种类，还需群抗血清凝集的菌株不能确定种类，还需根据菌落大小和生化反应进一步鉴定根据菌落大小和生化反应进一步鉴定根据菌落大小和生化反应进一步鉴定根据菌落大小和生化反应进一步鉴定 溶血性链球菌鉴定n nPYR试验试验n n化脓性链球菌产生的吡咯烷酮芳基酰胺酶水解吡化脓性链球菌产生的吡咯烷酮芳基酰胺酶水解吡化脓性链球菌产生的吡咯烷酮芳基酰胺酶水解吡化脓性链球菌产生的吡咯烷酮芳基酰胺酶水解吡咯烷酮咯烷酮咯烷酮咯烷酮-萘基酰胺，加入萘基酰胺，加入萘基酰胺，加入

63、萘基酰胺，加入NN，N-N-二甲氧基肉桂醛二甲氧基肉桂醛二甲氧基肉桂醛二甲氧基肉桂醛试剂后产生桃红色试剂后产生桃红色试剂后产生桃红色试剂后产生桃红色n n杆菌肽（杆菌肽（bacitracin）敏感试验敏感试验n n化脓性链球菌为阳性，有别于其他化脓性链球菌为阳性，有别于其他化脓性链球菌为阳性，有别于其他化脓性链球菌为阳性，有别于其他PYRPYR阳性的阳性的阳性的阳性的 溶血性细菌（猪链球菌、海豚链球菌）和溶血性细菌（猪链球菌、海豚链球菌）和溶血性细菌（猪链球菌、海豚链球菌）和溶血性细菌（猪链球菌、海豚链球菌）和A A群小群小群小群小菌落菌落菌落菌落 溶血性链球菌（米勒链球菌）溶血性链球菌（米勒

64、链球菌）溶血性链球菌（米勒链球菌）溶血性链球菌（米勒链球菌）n n此法可作为筛选试验此法可作为筛选试验此法可作为筛选试验此法可作为筛选试验溶血性链球菌鉴定n nVPVP试验试验试验试验n n挑取平板上孵育过夜菌落置于挑取平板上孵育过夜菌落置于挑取平板上孵育过夜菌落置于挑取平板上孵育过夜菌落置于2 2ml VPml VP肉汤中，孵育肉汤中，孵育肉汤中，孵育肉汤中，孵育6 6h h后后后后加入加入加入加入VPVP试剂，摇匀试剂，摇匀试剂，摇匀试剂，摇匀3030秒，出现桃红色者为阳性秒，出现桃红色者为阳性秒，出现桃红色者为阳性秒，出现桃红色者为阳性n n该试验可鉴别该试验可鉴别该试验可鉴别该试验可鉴

65、别A A、C C、G G群群群群 溶血的大、小两种不同菌落溶血的大、小两种不同菌落溶血的大、小两种不同菌落溶血的大、小两种不同菌落n nCAMPCAMP试验试验试验试验n n无乳链球菌能产生无乳链球菌能产生无乳链球菌能产生无乳链球菌能产生CAMPCAMP因子，它可促进金黄色葡萄球菌因子，它可促进金黄色葡萄球菌因子，它可促进金黄色葡萄球菌因子，它可促进金黄色葡萄球菌溶血能力，使其产生显著的协同溶血作用溶血能力，使其产生显著的协同溶血作用溶血能力，使其产生显著的协同溶血作用溶血能力，使其产生显著的协同溶血作用n n本法可作为无乳链球菌的初步鉴定试验本法可作为无乳链球菌的初步鉴定试验本法可作为无乳链

66、球菌的初步鉴定试验本法可作为无乳链球菌的初步鉴定试验溶血性链球菌鉴定n n此外鉴别此外鉴别溶血链球菌还有溶血链球菌还有BGUR（B-D葡葡糖糖醛酸酶试验）糖糖醛酸酶试验）n nC C、G G群菌落为阳性反应，群菌落为阳性反应，群菌落为阳性反应，群菌落为阳性反应，C C、G G群米勒链球菌群米勒链球菌群米勒链球菌群米勒链球菌则为阴性反应。则为阴性反应。则为阴性反应。则为阴性反应。2非溶血链球菌鉴定 n n通过血清学测定抗原群，可将通过血清学测定抗原群，可将通过血清学测定抗原群，可将通过血清学测定抗原群，可将B B群链球菌、群链球菌、群链球菌、群链球菌、非非非非 溶血的菌株溶血的菌株溶血的菌株溶血

67、的菌株和肺炎链球菌得以鉴定和肺炎链球菌得以鉴定和肺炎链球菌得以鉴定和肺炎链球菌得以鉴定n nLancefieldLancefield的的的的DD群抗原可以存在于牛链球菌、肠球菌属和片群抗原可以存在于牛链球菌、肠球菌属和片群抗原可以存在于牛链球菌、肠球菌属和片群抗原可以存在于牛链球菌、肠球菌属和片球菌属，因此需要进行生化反应予以鉴别。球菌属，因此需要进行生化反应予以鉴别。球菌属，因此需要进行生化反应予以鉴别。球菌属，因此需要进行生化反应予以鉴别。菌菌菌菌 种种种种 optochinoptochin敏感试验敏感试验敏感试验敏感试验 胆汁溶菌试验胆汁溶菌试验胆汁溶菌试验胆汁溶菌试验 胆汁七叶苷试验胆

68、汁七叶苷试验胆汁七叶苷试验胆汁七叶苷试验 肺炎链球菌肺炎链球菌肺炎链球菌肺炎链球菌S S+ +草绿色链球菌草绿色链球菌草绿色链球菌草绿色链球菌R R牛链球菌牛链球菌牛链球菌牛链球菌R R+ +草绿色链球菌鉴定 n n草绿色链球菌是人体正常菌群一部分，通常不致病，目前借草绿色链球菌是人体正常菌群一部分，通常不致病，目前借草绿色链球菌是人体正常菌群一部分，通常不致病，目前借草绿色链球菌是人体正常菌群一部分，通常不致病，目前借助于常规方法鉴定到种有一定困难，通常将其鉴定到群。助于常规方法鉴定到种有一定困难，通常将其鉴定到群。助于常规方法鉴定到种有一定困难，通常将其鉴定到群。助于常规方法鉴定到种有一定

69、困难，通常将其鉴定到群。n n根据根据根据根据1616SrRNASrRNA可分为温和链球菌群（可分为温和链球菌群（可分为温和链球菌群（可分为温和链球菌群（mitismitis group group）、）、）、）、米勒米勒米勒米勒链球菌群（链球菌群（链球菌群（链球菌群（miller groupmiller group）、）、）、）、变异链球菌群（变异链球菌群（变异链球菌群（变异链球菌群（mutansmutans groupgroup）和唾液链球菌群和唾液链球菌群和唾液链球菌群和唾液链球菌群（salivriussalivrius group group）菌菌菌菌 群群群群VPVP脲酶脲酶脲酶脲酶

70、精氨酸精氨酸精氨酸精氨酸七叶苷七叶苷七叶苷七叶苷甘露醇甘露醇甘露醇甘露醇山梨醇山梨醇山梨醇山梨醇温和链球菌群温和链球菌群温和链球菌群温和链球菌群变异链球菌群变异链球菌群变异链球菌群变异链球菌群唾液链球菌群唾液链球菌群唾液链球菌群唾液链球菌群/米勒链球菌群米勒链球菌群米勒链球菌群米勒链球菌群/ /商品化鉴定系统n nAPI-StrepAPI-Strep系统系统系统系统n nID32 strepID32 strep系统系统系统系统n nMicroscanMicroscan系统系统系统系统抗链球菌溶素O抗体检测n n常用于风湿热的辅助诊断常用于风湿热的辅助诊断n n活动性风湿热患者抗体效价一般超过活

71、动性风湿热患者抗体效价一般超过400单位单位 肠球菌属Enterococusn n广泛分布在自然界广泛分布在自然界n n常栖居在人、动物的肠道和女性生殖道常栖居在人、动物的肠道和女性生殖道n n为医院感染的重要病原菌为医院感染的重要病原菌一、分类n n肠球菌属原归类于链球菌属肠球菌属原归类于链球菌属n n于于1984年将其命名为肠球菌属年将其命名为肠球菌属n n至今，经由至今，经由16SrRNA序列分析和核酸杂交序列分析和核酸杂交 等，证实肠球菌可分为等，证实肠球菌可分为5群群19个种个种n n临床标本分离的肠球菌多属于第临床标本分离的肠球菌多属于第2群群二、临床意义n n肠球菌所致感染最多见

72、于泌尿道感染肠球菌所致感染最多见于泌尿道感染,是重是重要的医院感染病原菌要的医院感染病原菌n n多与泌尿道器械操作、留置导尿、尿路结构异多与泌尿道器械操作、留置导尿、尿路结构异多与泌尿道器械操作、留置导尿、尿路结构异多与泌尿道器械操作、留置导尿、尿路结构异常有关常有关常有关常有关n n腹腔和盆腔创伤时也是常见的感染菌腹腔和盆腔创伤时也是常见的感染菌腹腔和盆腔创伤时也是常见的感染菌腹腔和盆腔创伤时也是常见的感染菌n n肠球菌引起的菌血症常发生于有严重基础疾患肠球菌引起的菌血症常发生于有严重基础疾患肠球菌引起的菌血症常发生于有严重基础疾患肠球菌引起的菌血症常发生于有严重基础疾患的老年人、长期住院接

73、受抗菌药物治疗的免疫的老年人、长期住院接受抗菌药物治疗的免疫的老年人、长期住院接受抗菌药物治疗的免疫的老年人、长期住院接受抗菌药物治疗的免疫功能低下患者功能低下患者功能低下患者功能低下患者二、临床意义n n近年来不断上升的肠球菌感染率和广泛使用近年来不断上升的肠球菌感染率和广泛使用 抗菌药物出现的耐药性有关抗菌药物出现的耐药性有关n n在临床诊断前应认真评估分离菌的临床意义在临床诊断前应认真评估分离菌的临床意义n n临床标本中分离的临床标本中分离的80%90%是粪肠球菌是粪肠球菌n n屎肠球菌约占屎肠球菌约占5%10%n n很少分离到肠球菌属的其它种很少分离到肠球菌属的其它种三、生物学特性形态

74、：形态： n n肠球菌为革兰阳性球菌、呈单个，成对或短链肠球菌为革兰阳性球菌、呈单个，成对或短链状排列，琼脂平板上生长的细菌呈球杆状状排列，琼脂平板上生长的细菌呈球杆状n n液体培养基中呈卵圆形、链状排列液体培养基中呈卵圆形、链状排列n n无芽胞和荚膜，个别菌种有稀疏鞭毛无芽胞和荚膜，个别菌种有稀疏鞭毛培养特性n n兼性厌氧，最适生长温度兼性厌氧，最适生长温度35，10和和45均能生长均能生长n n营养要求不高。部分粪肠球菌菌株在含有营养要求不高。部分粪肠球菌菌株在含有兔血、马血或人血的平板上出现兔血、马血或人血的平板上出现溶血，而溶血，而在羊血平板上不出现。其它菌种出现在羊血平板上不出现。其

75、它菌种出现溶血溶血或不溶血或不溶血n n所有菌株在含所有菌株在含6.5%NaCl肉汤中能生长肉汤中能生长生物学特性n n在在40%胆汁培养基中能分解七叶苷，多数菌种胆汁培养基中能分解七叶苷，多数菌种具有吡咯烷酮芳基酰胺酶，能水解吡咯烷酮具有吡咯烷酮芳基酰胺酶，能水解吡咯烷酮-萘基酰胺（萘基酰胺（PYR）n n不含细胞色素氧化酶和触酶不含细胞色素氧化酶和触酶n n但粪肠球菌培养于含血的培养基中，可合成细胞但粪肠球菌培养于含血的培养基中，可合成细胞但粪肠球菌培养于含血的培养基中，可合成细胞但粪肠球菌培养于含血的培养基中，可合成细胞色素或触酶或两者皆有，因而某些菌株表现为触色素或触酶或两者皆有，因而

76、某些菌株表现为触色素或触酶或两者皆有，因而某些菌株表现为触色素或触酶或两者皆有，因而某些菌株表现为触酶弱阳性酶弱阳性酶弱阳性酶弱阳性n n含链球菌含链球菌D群抗原。群抗原。G+Cmol%为为3745抵抗力n n对头孢菌素类、林可霉素类和磺胺类抗菌对头孢菌素类、林可霉素类和磺胺类抗菌药物耐药药物耐药n n近年来获得性耐药菌株不断增多，表现为近年来获得性耐药菌株不断增多，表现为对氨基糖苷类耐药和对万古霉素耐药。对对氨基糖苷类耐药和对万古霉素耐药。对万古霉素的耐药是由万古霉素的耐药是由van A、van B和和van C等基因介导等基因介导四、微生物检验四、微生物检验（一）检验程序 （二）标本采集（

77、二）标本采集n n常规方法采集血、尿、创伤标本和其他拭子，常规方法采集血、尿、创伤标本和其他拭子， 标本于标本于1小时内接种完毕。小时内接种完毕。（三）标本直接检查（三）标本直接检查n n涂片染色显微镜检查可见单个、成双或短链涂片染色显微镜检查可见单个、成双或短链 排列卵圆形革兰阳性球菌排列卵圆形革兰阳性球菌（四）分离培养与鉴定n n标本接种于含血琼脂平板标本接种于含血琼脂平板标本接种于含血琼脂平板标本接种于含血琼脂平板n n若送检标本中含革兰阴性杆菌可选用选择鉴别培养若送检标本中含革兰阴性杆菌可选用选择鉴别培养若送检标本中含革兰阴性杆菌可选用选择鉴别培养若送检标本中含革兰阴性杆菌可选用选择鉴

78、别培养基，常用的有：基，常用的有：基，常用的有：基，常用的有：n n叠氮胆汁七叶苷琼脂，可抑制革兰阴性菌生长，而肠球叠氮胆汁七叶苷琼脂，可抑制革兰阴性菌生长，而肠球叠氮胆汁七叶苷琼脂，可抑制革兰阴性菌生长，而肠球叠氮胆汁七叶苷琼脂，可抑制革兰阴性菌生长，而肠球菌分解七叶苷产生黑色菌落；菌分解七叶苷产生黑色菌落；菌分解七叶苷产生黑色菌落；菌分解七叶苷产生黑色菌落；n n哥伦比亚多粘菌素哥伦比亚多粘菌素哥伦比亚多粘菌素哥伦比亚多粘菌素- -萘啶酸琼脂萘啶酸琼脂萘啶酸琼脂萘啶酸琼脂(CAN)(CAN)和苯乙基乙醇琼脂和苯乙基乙醇琼脂和苯乙基乙醇琼脂和苯乙基乙醇琼脂(PEA)(PEA)n n由于耐万古

79、霉素肠球菌发生率增高，为早期检出耐由于耐万古霉素肠球菌发生率增高，为早期检出耐由于耐万古霉素肠球菌发生率增高，为早期检出耐由于耐万古霉素肠球菌发生率增高，为早期检出耐 药菌株，可使用含万古霉素琼脂筛选方法（详见第药菌株，可使用含万古霉素琼脂筛选方法（详见第药菌株，可使用含万古霉素琼脂筛选方法（详见第药菌株，可使用含万古霉素琼脂筛选方法（详见第 三十五章）三十五章）三十五章）三十五章） 细菌鉴定方法如下n n菌属的鉴定菌属的鉴定菌属的鉴定菌属的鉴定 n n肠球菌属细菌革兰染色阳性，卵圆形，单个、成双或短链排列。肠球菌属细菌革兰染色阳性，卵圆形，单个、成双或短链排列。肠球菌属细菌革兰染色阳性，卵圆

80、形，单个、成双或短链排列。肠球菌属细菌革兰染色阳性，卵圆形，单个、成双或短链排列。n n触酶阴性、胆汁七叶苷和触酶阴性、胆汁七叶苷和触酶阴性、胆汁七叶苷和触酶阴性、胆汁七叶苷和PYRPYR阳性、阳性、阳性、阳性、6.5% 6.5% NaClNaCl肉汤中能生长肉汤中能生长肉汤中能生长肉汤中能生长菌属菌属菌属菌属万古霉素万古霉素万古霉素万古霉素分解葡萄糖分解葡萄糖分解葡萄糖分解葡萄糖产气产气产气产气PYRPYR胆汁七叶苷胆汁七叶苷胆汁七叶苷胆汁七叶苷6.5%6.5%NaClNaCl生长温度生长温度生长温度生长温度 10104545 肠球菌属肠球菌属肠球菌属肠球菌属敏感敏感敏感敏感乳球菌属乳球菌属

81、乳球菌属乳球菌属敏感敏感敏感敏感V VV V链球菌属链球菌属链球菌属链球菌属敏感敏感敏感敏感a aV V明串珠菌属明串珠菌属明串珠菌属明串珠菌属耐药耐药耐药耐药V Vb bV VV V肠球菌属间的菌种鉴定n n根据对甘露醇，山梨醇和精氨酸的代谢分五群根据对甘露醇，山梨醇和精氨酸的代谢分五群根据对甘露醇，山梨醇和精氨酸的代谢分五群根据对甘露醇，山梨醇和精氨酸的代谢分五群n n第一群第一群第一群第一群: :分解甘露醇、山梨糖产酸，不水解精氨酸分解甘露醇、山梨糖产酸，不水解精氨酸分解甘露醇、山梨糖产酸，不水解精氨酸分解甘露醇、山梨糖产酸，不水解精氨酸n n第二群第二群第二群第二群: :分解甘露醇和水

82、解精氨酸分解甘露醇和水解精氨酸分解甘露醇和水解精氨酸分解甘露醇和水解精氨酸n n第三群第三群第三群第三群: :水解精氨酸，不分解甘露醇、山梨醇和山梨水解精氨酸，不分解甘露醇、山梨醇和山梨水解精氨酸，不分解甘露醇、山梨醇和山梨水解精氨酸，不分解甘露醇、山梨醇和山梨糖糖糖糖n n第四群第四群第四群第四群: :不分解甘露醇，山梨糖，不水解精氨酸不分解甘露醇，山梨糖，不水解精氨酸不分解甘露醇，山梨糖，不水解精氨酸不分解甘露醇，山梨糖，不水解精氨酸n n第五群第五群第五群第五群: :分解甘露醇不分解山梨糖，不水解精氨酸分解甘露醇不分解山梨糖，不水解精氨酸分解甘露醇不分解山梨糖，不水解精氨酸分解甘露醇不分

83、解山梨糖，不水解精氨酸触酶阳性的其它革兰阳性球菌n n微球菌属（微球菌属（微球菌属（微球菌属（MicrococcusMicrococcus）n n巨球菌属巨球菌属巨球菌属巨球菌属( (MacrococcusMacrococcus) )n n动球菌属动球菌属动球菌属动球菌属( (PlanococcusPlanococcus) )n n考氏考克氏菌考氏考克氏菌考氏考克氏菌考氏考克氏菌( (KocuriaKocuria kristinaekristinae) )n n触酶微弱阳性的差异球菌属触酶微弱阳性的差异球菌属触酶微弱阳性的差异球菌属触酶微弱阳性的差异球菌属( (AlloiococcusAllo

84、iococcus) )和粘性罗和粘性罗和粘性罗和粘性罗氏菌氏菌氏菌氏菌( (RothiaRothia mucilaginosamucilaginosa) )n n这些菌属细菌在人体和动物体表广泛存在，常在临这些菌属细菌在人体和动物体表广泛存在，常在临这些菌属细菌在人体和动物体表广泛存在，常在临这些菌属细菌在人体和动物体表广泛存在，常在临 床标本中分离到，一般认为是非致病菌。床标本中分离到，一般认为是非致病菌。床标本中分离到，一般认为是非致病菌。床标本中分离到，一般认为是非致病菌。n n偶尔在某些免疫抑制或缺陷的患者中引起机会感染偶尔在某些免疫抑制或缺陷的患者中引起机会感染偶尔在某些免疫抑制或缺

85、陷的患者中引起机会感染偶尔在某些免疫抑制或缺陷的患者中引起机会感染 如心内膜炎、脑膜炎、肺炎等。如心内膜炎、脑膜炎、肺炎等。如心内膜炎、脑膜炎、肺炎等。如心内膜炎、脑膜炎、肺炎等。微球菌属n n以往曾将葡萄球菌属、微球菌属、口腔球菌以往曾将葡萄球菌属、微球菌属、口腔球菌属和动球菌属共同归类为微球菌科。属和动球菌属共同归类为微球菌科。n n细菌为革兰阳性，直径为细菌为革兰阳性，直径为11.8m的球菌，常的球菌，常成对、四联或呈不规则排列成对、四联或呈不规则排列n n在大多数临床标本中由于形态与葡萄球菌属在大多数临床标本中由于形态与葡萄球菌属相似，触酶阳性而混淆。本菌属氧化酶阳性，相似，触酶阳性而

86、混淆。本菌属氧化酶阳性，对杆菌肽敏感、呋喃唑酮耐药可以与葡萄球对杆菌肽敏感、呋喃唑酮耐药可以与葡萄球菌属区别。菌属区别。差异球菌属n n是需氧的革兰阳性球菌，成对或簇排列。触酶是需氧的革兰阳性球菌，成对或簇排列。触酶试验弱阳性，氧化酶试验阴性，常在中耳炎患试验弱阳性，氧化酶试验阴性，常在中耳炎患者的标本中分离到。者的标本中分离到。粘性罗氏菌n n是兼性厌氧菌，触酶可变的革兰阳性球菌，成是兼性厌氧菌，触酶可变的革兰阳性球菌，成簇排列，在簇排列，在5%NaCl琼脂上不能生长，可与葡琼脂上不能生长，可与葡萄球菌属、微球菌属区别。萄球菌属、微球菌属区别。巨球菌属n n菌体直径为菌体直径为1.32.5m

87、，革兰阳性球菌，触革兰阳性球菌，触酶、氧化酶阳性，对溶葡萄球菌素敏感。酶、氧化酶阳性，对溶葡萄球菌素敏感。 二、触酶阴性的革兰阳性球菌n n临床标本中分离到的触酶阴性的革兰阳性球菌除临床标本中分离到的触酶阴性的革兰阳性球菌除临床标本中分离到的触酶阴性的革兰阳性球菌除临床标本中分离到的触酶阴性的革兰阳性球菌除了链球菌属和肠球菌属外，还经常分离到了链球菌属和肠球菌属外，还经常分离到了链球菌属和肠球菌属外，还经常分离到了链球菌属和肠球菌属外，还经常分离到n n乳球菌属（乳球菌属（乳球菌属（乳球菌属（LactococcusLactococcus）n n气球菌属（气球菌属（气球菌属（气球菌属（Aeroc

88、occusAerococcus）n n片球菌属（片球菌属（片球菌属（片球菌属（PediococcusPediococcus）n n孪生球菌属（孪生球菌属（孪生球菌属（孪生球菌属（GemellaGemella）n n白联球菌属（白联球菌属（白联球菌属（白联球菌属（LeuconostocLeuconostoc）n n生活力缺损菌属（生活力缺损菌属（生活力缺损菌属（生活力缺损菌属（AbiotrophiaAbiotrophia）乳球菌属n n原归属于原归属于Lancefield N群链球菌群链球菌n nBE、6.5%NaCl生长及生长及PYR试验阳性，试验阳性，45 不生长不生长n n可从血液、尿道及

89、创口分泌物中分离到，可从血液、尿道及创口分泌物中分离到，在免疫缺陷患者中可引起菌血症在免疫缺陷患者中可引起菌血症气球菌属n n为成簇四联排列，血平板上有为成簇四联排列，血平板上有为成簇四联排列，血平板上有为成簇四联排列，血平板上有 溶血溶血溶血溶血n n绿色气球菌（绿色气球菌（绿色气球菌（绿色气球菌（A.viridansA.viridans）常被认为是临床标本的污染常被认为是临床标本的污染常被认为是临床标本的污染常被认为是临床标本的污染菌，偶尔引起菌血症或心内膜炎，菌，偶尔引起菌血症或心内膜炎，菌，偶尔引起菌血症或心内膜炎，菌，偶尔引起菌血症或心内膜炎，PYRPYR阳性，阳性，阳性，阳性，6.

90、5%6.5% NaClNaCl生长，但不能在生长，但不能在生长，但不能在生长，但不能在1010或或或或4545生长，生长，生长，生长，V-PV-P阴性阴性阴性阴性n n尿气球菌（尿气球菌（尿气球菌（尿气球菌（A.urinaeA.urinae）常从尿道感染的患者尿液中分离常从尿道感染的患者尿液中分离常从尿道感染的患者尿液中分离常从尿道感染的患者尿液中分离到并被认为是尿道炎的病原体，对磺胺类和氨基糖苷到并被认为是尿道炎的病原体，对磺胺类和氨基糖苷到并被认为是尿道炎的病原体，对磺胺类和氨基糖苷到并被认为是尿道炎的病原体，对磺胺类和氨基糖苷 类药物耐药，类药物耐药，类药物耐药，类药物耐药，PYRPYR

91、阴性，阴性，阴性，阴性，LAPLAP和和和和BGURBGUR阳性。阳性。阳性。阳性。白联球菌属和片球菌属n n万古霉素耐药万古霉素耐药n n革兰阳性、触酶阴性球菌，革兰阳性、触酶阴性球菌，PYR阴性阴性n n片球菌属具有片球菌属具有Lancefield D群抗原群抗原n n虽有从免疫抑制患者血液中分离到的报虽有从免疫抑制患者血液中分离到的报 道，但临床意义有待进一步确认道，但临床意义有待进一步确认孪生球菌属n n溶血孪生球菌（溶血孪生球菌（G.haemolysans）n n可从心内膜炎、脑膜炎患者中分离到可从心内膜炎、脑膜炎患者中分离到n n在兔血平板上有在兔血平板上有溶血，有氧环境下生长较溶

92、血，有氧环境下生长较好。羊血平板上与草绿色链球菌相似好。羊血平板上与草绿色链球菌相似n n生长缓慢的菌株容易与生活力缺损菌属混生长缓慢的菌株容易与生活力缺损菌属混 淆，可通过淆，可通过“卫星卫星”试验加以鉴别试验加以鉴别生活力缺损菌属n n在培养时，培养基中必须含有足够的维生素在培养时，培养基中必须含有足够的维生素在培养时，培养基中必须含有足够的维生素在培养时，培养基中必须含有足够的维生素B B6 6或硫或硫或硫或硫醇衍生物才能生长。未添加维生素醇衍生物才能生长。未添加维生素醇衍生物才能生长。未添加维生素醇衍生物才能生长。未添加维生素B B6 6的血平板或巧的血平板或巧的血平板或巧的血平板或巧

93、克力平板营养不够，生长不良克力平板营养不够，生长不良克力平板营养不够，生长不良克力平板营养不够，生长不良n n革兰染色呈现多形性，显微镜下同时可见阳性球菌革兰染色呈现多形性，显微镜下同时可见阳性球菌革兰染色呈现多形性，显微镜下同时可见阳性球菌革兰染色呈现多形性，显微镜下同时可见阳性球菌及杆菌及杆菌及杆菌及杆菌n n与金黄色葡萄球菌一起培养可出现与金黄色葡萄球菌一起培养可出现与金黄色葡萄球菌一起培养可出现与金黄色葡萄球菌一起培养可出现“ “卫星卫星卫星卫星” ”现象现象现象现象n n能发酵葡萄糖和蔗糖，不能水解七叶苷，能发酵葡萄糖和蔗糖，不能水解七叶苷，能发酵葡萄糖和蔗糖，不能水解七叶苷，能发酵葡萄糖和蔗糖，不能水解七叶苷，6.5%6.5%NaClNaCl不生长不生长不生长不生长n n可从血液标本、脓液及胸腔积液中分离到。约有可从血液标本、脓液及胸腔积液中分离到。约有可从血液标本、脓液及胸腔积液中分离到。约有可从血液标本、脓液及胸腔积液中分离到。约有 5%6% 5%6%的心内膜炎由此菌引起的心内膜炎由此菌引起的心内膜炎由此菌引起的心内膜炎由此菌引起