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1、实训三细菌染色法 8/20/202411.细菌染色法革兰染色法复染色法单染色法负染色：正染色死菌活菌：抗酸染色法芽孢染色法姬姆萨染色法荚膜染色法用美蓝或TTC等作活菌染色8/20/20242 常用染料l碱性染料：带正电荷，如美蓝、结 晶紫、碱性复红等 l酸性染料：带负电荷，如伊红、酸 性复红或刚果红等酸性染料染色l中性染料：又称复合染料，如伊红 美兰、伊红天青等 2.染色原理：小、色差染色法：简单、革兰染色8/20/202433.染色方法（1）单染色法：菌种枯草芽孢杆菌（观察芽孢）（2）革兰染色法：菌种金黄色葡萄球菌或大肠埃希菌（观察革兰染色性）8/20/20244涂片干燥固定结晶紫 1min
2、 （1）单染色步骤：枯草芽孢杆菌镜检水洗干燥记录结果教师评分l无菌操作l两环菌液l直径约1cml晾干l烘干l等全干l过外焰3次l目的l不烫l染液不干l全干再看l用油镜8/20/20245（2）经典染色法革兰染色法革兰阳性菌 G+（紫色）革兰阴性菌 G-（红色）革兰染色法由丹麦医生革兰于1884年创立。8/20/20246涂片干燥固定结晶紫 1min 碘液 1min水洗95乙醇 30s水洗 蕃红 2-3min水洗镜检水洗水洗干燥干燥革兰染色步骤:金黄色葡萄球菌或大肠埃希菌 8/20/202478/20/20248 G+（紫）（紫）1000 G （红）（红）1000革兰染色意义:鉴别；致病性；药物选择8/20/20249革兰染色影响因素：l菌 龄培养18-24小时的幼龄菌l涂片厚度宜薄不宜厚l各试剂作用时间l脱色时间关键步骤，一般30秒 过长 假阴性 过短 假阳性8/20/2024104.实训结果:2片/人,单染色30分;革兰染色50分l评分标准：染色结果是否正确找到目标是否最佳目标目标是否清晰光线是否适宜菌名颜色革兰染色性放大倍数教师评分单染:枯草芽孢杆菌8/20/2024115.思考题：1和26.实训总结：（实训结束后完成）分析实训过程的收获、存在的问题和解决的方法8/20/202412
