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1、9393年實驗動物飼養管理訓練課程年實驗動物飼養管理訓練課程年實驗動物飼養管理訓練課程年實驗動物飼養管理訓練課程實驗動物品質管制及疾病簡介實驗動物品質管制及疾病簡介財團法人國家實驗研究院財團法人國家實驗研究院 國家實驗動物中心國家實驗動物中心張毓秀張毓秀2024/8/172024/8/171 1实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程內容綱要內容綱要n n實驗動物品質管制的目的n n影響實驗動物品質的因素n n實驗動物的疾病簡介n n如何維持實驗動物的品質2024/8/172024/8/172 2实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程何謂實驗動物的品質何謂實驗動物的品質n n
2、實驗動物的規格規格及標準標準包括包括: 遺傳一致性遺傳一致性 健康狀態健康狀態 微生物狀態微生物狀態2024/8/172024/8/173 3实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程實驗動物品質管制的目的實驗動物品質管制的目的n n達到並維持既定的品質規格與標準達到並維持既定的品質規格與標準n n得到理想的動物實驗結果得到理想的動物實驗結果 準確性高準確性高 誤差度小誤差度小 再現性高再現性高n n降低風險降低風險2024/8/172024/8/174 4实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程影響實驗動物品質的因素影響實驗動物品質的因素n遺傳n環境n微生物狀態2024/8/1
3、72024/8/175 5实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程影響實驗動物品質的因素影響實驗動物品質的因素n遺傳遺傳n環境n微生物狀態2024/8/172024/8/176 6实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程遺傳因素對實驗動物的影響遺傳因素對實驗動物的影響n n外表與生理結構n n生理功能表現n n行為表現n n對外在環境因素的感受性 外在環境因素外在環境因素: : 微生物微生物, , 藥物藥物, , 光線光線, , 噪音噪音等等 2024/8/172024/8/177 7实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程遺傳因素對實驗動物遺傳因素對實驗動物外表及生理
4、結構的影響外表及生理結構的影響例1. 毛色國家實驗動物繁殖及研究中心國家實驗動物繁殖及研究中心. . 民國民國8888年年. . 實驗小鼠遺傳彙編實驗小鼠遺傳彙編. . 第二版第二版. . 第六章第六章 突變突變(Mutation).(Mutation).第第 3838頁頁. .2024/8/172024/8/178 8实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程遺傳因素對實驗動物遺傳因素對實驗動物外表及生理結構的影響外表及生理結構的影響例例2 2 缺趾的小鼠缺趾的小鼠n nSM/Ckc SM/Ckc 近親品系小鼠之不近親品系小鼠之不正規突變表型正規突變表型n n每足皆缺中部三趾或無趾每足
5、皆缺中部三趾或無趾n nDac Dac ( (位於位於Xsome 19)Xsome 19)與與mdac mdac ( (位於位於Xsome 13)Xsome 13)的交的交互作用互作用: :DacDac/+, /+, mdacmdac/ /mdacmdac 趾異常趾異常趾異常趾異常DacDac/+, /+, mdacmdac/+ /+ 趾正常趾正常趾正常趾正常國家實驗動物繁殖及研究中心國家實驗動物繁殖及研究中心. . 民國民國8888年年. . 實實驗小鼠遺傳彙編驗小鼠遺傳彙編. .第二版第二版. .第六章第六章 突變突變(Mutation).(Mutation).第第 6161頁頁. .20
6、24/8/172024/8/179 9实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程遺傳因素對實驗動物遺傳因素對實驗動物生理功能表現的影響生理功能表現的影響An n 代謝機能旺盛代謝機能旺盛n n 紅血球內之紅血球內之 Na/KNa/K比例低比例低n n 對甲狀腺激素對甲狀腺激素 ( (ThyroxineThyroxine) )反應敏銳反應敏銳n n 平均壽命平均壽命- M: 467-682- M: 467-682日日; F: 566-673; F: 566-673日日n n 繁殖繁殖-不孕率不孕率: 35-40%; : 35-40%; 一窩平均離乳仔數一窩平均離乳仔數: 4.6-6.0:
7、4.6-6.0AKRn n 代謝機能低代謝機能低n n 對高脂肪與高膽固醇飼料無大反應對高脂肪與高膽固醇飼料無大反應, , 不易產生動脈硬化不易產生動脈硬化n n 平均壽命平均壽命- M: 326- M: 326日日; F: 276; F: 276日日n n 繁殖繁殖-不孕率不孕率: 16.3%; : 16.3%; 一窩平均離乳仔數一窩平均離乳仔數: 4.1-6.0: 4.1-6.0BALB/cn n 紅血球內之紅血球內之 Na/KNa/K比例高比例高n n 心跳次數低心跳次數低n n平均壽命平均壽命- M: 539- M: 539日日; F: 575; F: 575日日n n 繁殖繁殖-不孕
8、率不孕率: 25.4% (BALB/: 25.4% (BALB/cJcJ), 52.9% (BALB/), 52.9% (BALB/cHeAncHeAn); ); 一窩平均離乳仔數一窩平均離乳仔數: 5.2-6.2: 5.2-6.22024/8/172024/8/171010实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程遺傳因素對實驗動物遺傳因素對實驗動物行為表現的影響行為表現的影響BALB/cn n 系內鬥爭性強系內鬥爭性強n n 不喜飲酒不喜飲酒n n 不善轉輪運動不善轉輪運動 C3Hn n 系內侵犯性低系內侵犯性低n n 尋食能力低尋食能力低n n 短期記憶好短期記憶好, , 長期記憶
9、不佳長期記憶不佳 C57BLn n 嗜酒嗜酒, , 嗜甜味嗜甜味, , 不喜鹹味不喜鹹味n n 轉輪活動強轉輪活動強n n 尋食能力強尋食能力強n n 抵抗聲音誘發痙攣抵抗聲音誘發痙攣n n 對對 IsovalericIsovaleric acid acid氣味初感氣味初感 不敏銳不敏銳 ( (可作為特殊嗅覺脫失可作為特殊嗅覺脫失 模式動物模式動物) )DBA/2n n 對聲音誘發痙攣極端敏感對聲音誘發痙攣極端敏感n n 長期記憶強長期記憶強 ( (與與C3HC3H比較比較) )2024/8/172024/8/171111实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程遺傳因素對實驗動物對遺傳
10、因素對實驗動物對外在環境因素感受性的影響外在環境因素感受性的影響例例1. 1. 遺傳因素對微生物感受性的影響遺傳因素對微生物感受性的影響AgentsAgentsSusceptible Susceptible Resistant Resistant Ectromelia virusEctromelia virusA, CBA, C3H, DBA/2, A, CBA, C3H, DBA/2, BALB/c miceBALB/c miceC57BL/6, C57BL/10C57BL/6, C57BL/10Sialodacryoadnitis Sialodacryoadnitis virus (SDA
11、V)virus (SDAV)LEW, SHR ratsLEW, SHR ratsWI, SD, LE ratsWI, SD, LE ratsCorynebacterium Corynebacterium kutscherikutscheriSwiss miceSwiss miceC57BL/6 miceC57BL/6 miceSalmonella enteritidisSalmonella enteritidisDBA/1, BALB/c, DBA/1, BALB/c, C3H/HeN, C57BL/6, C3H/HeN, C57BL/6, micemiceDBA/2, A/J, C3H/He
12、J DBA/2, A/J, C3H/HeJ micemice2024/8/172024/8/171212实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程遺傳因素對實驗動物對遺傳因素對實驗動物對外在環境因素感受性的影響外在環境因素感受性的影響例例2. 2. 遺傳因素對藥物感受性的影響遺傳因素對藥物感受性的影響A An n Resistant to leukemia and liver tumor induction by DMBA Resistant to leukemia and liver tumor induction by DMBA (7,12(7,12-Demethlbenanthra
13、cene-Demethlbenanthracene) given ) given neonatallyneonatallyn n Sensitive to chloroform toxicitySensitive to chloroform toxicityBALB/cBALB/cn n Susceptible to leukemiaSusceptible to leukemia but resistant to liver but resistant to liver tuumortuumor inducted by DMBAinducted by DMBA given given neon
14、atally neonatally n n Sensitive to chloroform toxicitySensitive to chloroform toxicityC57BL/6C57BL/6n n Resistant to pulmonary tumors and leukemia inducted by Resistant to pulmonary tumors and leukemia inducted by DMBA given DMBA given neonatallyneonatally n n Resistant to chloroform toxicity Resist
15、ant to chloroform toxicity2024/8/172024/8/171313实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程基因污染的可能原因與後果基因污染的可能原因與後果原因原因後果後果n n 意外引入未知基因意外引入未知基因 ( (例如例如: : 非近親交配非近親交配, , 失去失去 homozygosityhomozygosity), ), 導致基因多導致基因多樣化樣化. .n n 記錄保存不良記錄保存不良n n 兩種品系雜交兩種品系雜交 ( (例如例如: : 相同相同毛色毛色) )n n Genotype Genotype Phenotype Phenotypen
16、n 實驗結果無再現性實驗結果無再現性n n 不同批次的實驗結果無法不同批次的實驗結果無法比較比較n n 產生可疑的實驗結果產生可疑的實驗結果2024/8/172024/8/171414实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程影響實驗動物品質的因素影響實驗動物品質的因素n遺傳n環境環境n微生物狀態2024/8/172024/8/171515实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程環境因素對動物品質的影響環境因素對動物品質的影響環境因素包括: 1) 營養- 飼料, 飲水 2) 飼育環境- 空調, 光線, 墊料, 空間大小.等 3) 飼養管理方式2024/8/172024/8/171
17、616实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程因營養缺乏引起的問題因營養缺乏引起的問題壞血症壞血症 (Scurvy): (Scurvy): 天竺鼠缺乏天竺鼠缺乏 Vit.CVit.CFox et al. 1984. Laboratory Animal Medicine. Chapter 6. Biology and disease of Guinea pigs. P. 171. Academic Fox et al. 1984. Laboratory Animal Medicine. Chapter 6. Biology and disease of Guinea pigs. P. 1
18、71. Academic press.press.2024/8/172024/8/171717实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程因飼養環境因素引起的問題因飼養環境因素引起的問題環狀尾症環狀尾症 (Ring tail)(Ring tail)n n常發生於出生後常發生於出生後7-7-1515天之幼鼠天之幼鼠n n可能由於相對溼度可能由於相對溼度過低過低 (40%)(80(80 F)F)之環境所之環境所誘發誘發.ccac.ca/french/educat/modul2024/8/172024/8/171818实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程因空間太小引起的問題因空間太小
19、引起的問題咬傷2024/8/172024/8/171919实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程影響實驗動物品質的因素影響實驗動物品質的因素n遺傳n環境環境n微生物狀態微生物狀態2024/8/172024/8/172020实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程實驗動物品質不良實驗動物品質不良疾病疾病/ 感染感染n n微生物為引起實驗動物疾病的重要因素 n n微生物感染大部分是潛在性的感染 Diseases2024/8/172024/8/172121实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程微生物感染對實驗的影響微生物感染對實驗的影響 疾疾病病n n 會影響某些疾病模式
20、動物的表現型n n 使實驗結果難以解釋n n 使待測藥物劑量失準n n 增加同群個體間的差異, 以致必須 使用的實驗動物頭數增加n n 污染細胞株 2024/8/172024/8/172222实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程Mycoplasma pulmonis 感染感染 n n實驗動物長期實驗期間容易死亡或產生疾病實驗動物長期實驗期間容易死亡或產生疾病n n改變呼吸道方面的實驗結果改變呼吸道方面的實驗結果, , 如致癌性如致癌性, , 氣管纖毛功能氣管纖毛功能, , 免疫功能免疫功能 ( (增加小鼠增加小鼠 nature killer cell nature killer c
21、ell 活性活性)等等n n生殖道感染會影響繁殖率生殖道感染會影響繁殖率n n污染細胞株污染細胞株 sequenced_genomes/g. sequenced_genomes/g.Baker, HJ, Lindsey, JR and Weisbroth, SH. 1979. The Laboratory Rat. Vol.I. p. 245,248. Academia Press. USA2024/8/172024/8/172323实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程Mouse Hepatitis Virus (MHV) 感染感染n n傳染性高傳染性高n n臨床症狀常出現於未離乳
22、小鼠臨床症狀常出現於未離乳小鼠n n裸鼠會出現裸鼠會出現 “ “wasting syndrome”, wasting syndrome”, 下痢下痢. .n n改變改變 MicrophageMicrophage的吞噬活性的吞噬活性n n改變肝臟之酵素活性改變肝臟之酵素活性n n減緩肝臟的再生減緩肝臟的再生n n增加動物對某些病原的感受性增加動物對某些病原的感受性, , 如如 K virus, LeukovirusK virus, Leukovirus等等MHVNormalFoster, HL, Small, JD, Fox, JG. 1982. The Mouse in Biomedical
23、Research. P. 164, 175, 180. Academia Press. USA.2024/8/172024/8/172424实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程Lactose Dehydrogenase-Elevating Virus (LDHV)感染感染n n無特殊臨床症狀n n改變血漿內的酵素濃n n改變腫瘤在動物體生長的情形n n改變免疫系統功能Foster, HL, Small, JD, Fox, JG. 1982. The Mouse in Biomedical Research. P. 193. Academia Press. USA.2024/8/17
24、2024/8/172525实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程Lactose Dehydrogenase-Elevating Virus (LDHV)感染感染cont.Plasma Enzyme Elevated in Plasma of Mice Plasma Enzyme Elevated in Plasma of Mice Infected with LDVInfected with LDVEnzymeEnzymeDegree ofDegree of elevation elevationLactate dehydrogenaseLactate dehydrogenase8-
25、 8- to 11-foldto 11-foldIsocitrate dehydrogenaseIsocitrate dehydrogenase5- 5- to 8-foldto 8-foldMalate dehydrogenaseMalate dehydrogenase2- 2- to 3-foldto 3-foldPhosphoglucose isomerasePhosphoglucose isomerase2- 2- to 3-foldto 3-foldGlutathione reductaseGlutathione reductase2- 2- to 3-foldto 3-foldAs
26、partate transaminaseAspartate transaminase2- 2- to 3-foldto 3-foldGlutamate-oxalacetate Glutamate-oxalacetate transaminasetransaminase2- 2- to 3-foldto 3-foldAlanine transaminaseAlanine transaminaseSlightSlightFoster, HL, Small, JD, Fox, JG. 1982. The Mouse in Biomedical Research. P. 195, 197. Acade
27、mia Press. USA.2024/8/172024/8/172626实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程有些病原會經由細胞株傳染有些病原會經由細胞株傳染n nMycoplasma spp.: M. pulmonis, M. arthritidisetc.n nViruses: MHV, Ectromelia virus, LDHV, MMTVetc. 2024/8/172024/8/172727实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程微生物的潛在性感染會在動物微生物的潛在性感染會在動物免疫力降低時引發疾病免疫力降低時引發疾病微生物微生物疾病疾病受影響的動物受影響的動物
28、Citrobacter rodentiumCitrobacter rodentium腸胃炎腸胃炎, , 十二指腸潰瘍十二指腸潰瘍小鼠小鼠Clostridium piliformeClostridium piliformeTyzzers diseaseTyzzers disease小鼠小鼠, , 大鼠大鼠, , 倉鼠倉鼠Corynebacterium Corynebacterium kutscherikutscheri假性結核假性結核 (pseudotubercurosis)(pseudotubercurosis)小鼠小鼠Klebsiella pneumoniaeKlebsiella pneum
29、oniae死亡死亡小鼠小鼠Pseudomonas aeruginosaPseudomonas aeruginosa菌血菌血, , 肝臟壞死肝臟壞死, , 體重減輕體重減輕小鼠小鼠Salmonella Salmonella spp.spp.腸胃炎腸胃炎大鼠大鼠Staphylococcus Staphylococcus spp.spp.呼吸道疾病呼吸道疾病大鼠大鼠Streptobacillus Streptobacillus monilifomismonilifomis脾臟腫大脾臟腫大小鼠小鼠資料來源: Hansen, AK. 2000. Handbook of laboratory animal
30、 bacteriology. p5. CRC press.2024/8/172024/8/172828实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程實驗動物的品質需生產單位與實驗動物的品質需生產單位與使用單位共同維護使用單位共同維護國家實驗動物中心國家實驗動物中心檢疫室檢疫室 國家實驗動物中心國家實驗動物中心動物房動物房運輸途中運輸途中各研究單位動物房各研究單位動物房紙箱是否完整紙箱是否完整健康證明健康證明/ /對方的健康對方的健康監測報告監測報告馬上開箱察看馬上開箱察看檢疫檢疫檢疫期間的飼養管理檢疫期間的飼養管理良好的飼養管理良好的飼養管理例行性健康監測例行性健康監測例行性環境監測例行性環
31、境監測例行性遺傳監測例行性遺傳監測適當動物頭數適當動物頭數/ /箱箱充足的水充足的水, , 飼料飼料, , 墊料墊料良好的空調良好的空調紙箱是否完整紙箱是否完整儘快開箱儘快開箱( (檢疫檢疫) )良好的飼養管良好的飼養管 理理( (例行監測例行監測) )自國外引進種源移入SPF飼育區申購出售(送貨)交貨實驗告一段落2024/8/172024/8/172929实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程如何維護實驗動物的品質如何維護實驗動物的品質n n飼養管理飼養管理 動物照顧動物照顧; ; 營養營養; ; 飼飼, ,墊墊, ,物料之滅菌與進出管制物料之滅菌與進出管制; ; 繁殖動物房之光線
32、繁殖動物房之光線, , 溫度溫度, , 濕度控制濕度控制, , 廢棄物處理廢棄物處理等等n n人員進出管制與行為約束人員進出管制與行為約束 進入飼育區的更衣沐浴動作進入飼育區的更衣沐浴動作; ; 飼育區禁止飲食飼育區禁止飲食, , 嘻鬧嘻鬧, , 抽煙抽煙; ; 生物性材料進出限生物性材料進出限制制, , 實驗操作的限制實驗操作的限制等等 n n例行監測例行監測 2024/8/172024/8/173030实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程監測制度為實驗動物監測制度為實驗動物品質管制的方式品質管制的方式n檢疫n例行性遺傳監測n例行性環境監測n例行性實驗動物健康監測2024/8/1
33、72024/8/173131实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程檢疫檢疫n n檢疫的目的檢疫的目的使所有新進動物適應新環境，並且經過適當的檢查使所有新進動物適應新環境，並且經過適當的檢查以便做到動物品質保證，防止疾病感染。以便做到動物品質保證，防止疾病感染。 n n檢疫期間的長短檢疫期間的長短依各國政府法令規定依各國政府法令規定國家實驗動物中心國家實驗動物中心: 10-14: 10-14日日( (囓齒類動物囓齒類動物) )2024/8/172024/8/173232实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程實驗動物供應單位應定期提供實驗動物供應單位應定期提供最近期健康監測報告
34、最近期健康監測報告2024/8/172024/8/173333实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程遺傳監測的目的遺傳監測的目的n確保近親品系實驗動物之遺傳特性不變2024/8/172024/8/173434实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程何謂近親品系何謂近親品系 (Inbred strain)n n兄妹交配20代後或相當於兄妹交配20代後的其他交配方式所育成2024/8/172024/8/173535实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程近親品系的特性近親品系的特性n nHomozygosityHomozygosity Two genes at any l
35、ocus are Two genes at any locus are identical identical by descent. by descent. Two genes are copies of one of the genes carried by the Two genes are copies of one of the genes carried by the common ancestorcommon ancestor. .n nIsogenecityIsogenecity All individuals All individuals within an inbred
36、strainwithin an inbred strain should be should be generally identicalgenerally identicaln nPhenotypic uniformityPhenotypic uniformity As a result of being isogenic, inbred strains are also As a result of being isogenic, inbred strains are also phenotypically more phenotypically more uniformuniform t
37、han outbred stocks. Such as immunological and biochemical than outbred stocks. Such as immunological and biochemical responses.responses.n nIndividualityIndividuality Each inbred strain is a unique combination of genetic material giving Each inbred strain is a unique combination of genetic material
38、giving rise to a rise to a unique phenotypeunique phenotype. . 2024/8/172024/8/173636实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程不同品系會有不同的不同品系會有不同的 GenotypeRussell Russell et al. et al. 1993.1993. Lab. Anim. Sci. 43(5):460-165 Lab. Anim. Sci. 43(5):460-1652024/8/172024/8/173737实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程Genetical contamin
39、ationRussell Russell et al. et al. 1993.1993.Lab. Anim. Sci. 43(5):460-165Lab. Anim. Sci. 43(5):460-1652024/8/172024/8/173838实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程遺傳監測的方法遺傳監測的方法 n nDaily observation by animal techniciansDaily observation by animal technicians Coat color, Behavior, breeding performanceetc.Coat col
40、or, Behavior, breeding performanceetc. n nImmunologicalImmunological techniques techniques a) Serological assays, Antiserum production, a) Serological assays, Antiserum production, Cellular assay Cellular assay b) Strain-restricted typing sera b) Strain-restricted typing sera c) c) Testing for Testi
41、ng for isohistogeneityisohistogeneity (Skin grafting) (Skin grafting) n nBiochemical techniquesBiochemical techniques STAGE, CAE, PAGE, IEFSTAGE, CAE, PAGE, IEFn nCytogeneticCytogenetic techniques techniquesn nMolecular genetic methodsMolecular genetic methods 2024/8/172024/8/173939实验动物饲养管理训练课程实验动物饲
42、养管理训练课程皮膚移植皮膚移植 (Skin grafting)Hans J. Hedrich. 1990. Genetic Monitoring of Inbred Hans J. Hedrich. 1990. Genetic Monitoring of Inbred Strains of Rats. Chapter 4. Laboratory Methods to Strains of Rats. Chapter 4. Laboratory Methods to Determine Polymorphic Loci and Other Variants. P.108. Determine P
43、olymorphic Loci and Other Variants. P.108. Gustav Fischer Verlag. New York Gustav Fischer Verlag. New York 2024/8/172024/8/174040实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程皮膚移植的原理皮膚移植的原理n nTo determine whether individuals carry an identical set of transplantation antigens. Whether they are isohistogenetic.n nThe skin
44、grafts can be successfully exchanged between the members of an inbred strain as long as they are of the same sex.2024/8/172024/8/174141实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程皮膚移植的原理皮膚移植的原理cont.n nDifferences at the MHC (Major histocompatibility complex) generally induce a strong rejection reaction. The products of
45、 the donors H genes in the grafted skin are potential antigens that induce graft rejection if recongnized as non-self by the recipient. 2024/8/172024/8/174242实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程生化標記圖譜生化標記圖譜 (Biochemical markers)Pep-3品系品系Pep-3Pep-3NZB/BiNJNZB/BiNJC CNZW/LacJNZW/LacJB BBALB/cByJBALB/cByJA ABALB/c
46、AnNBALB/cAnNA A近親品系大小鼠常用生化標記圖譜. 民國90年. 國家實驗動物中心. 2024/8/172024/8/174343实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程生化標記圖譜的原理生化標記圖譜的原理n nThe genotype determines the overall phenotype via a The genotype determines the overall phenotype via a chain of steps:chain of steps: DNA DNA RNA RNA Proteins Proteinsn nFor structura
47、l genes, alleles that yield For structural genes, alleles that yield at least one at least one amino-acid differenceamino-acid difference at the protein level if one gene at the protein level if one gene code is different.code is different.n nThe variants in protein level The variants in protein lev
48、el differing in net chargediffering in net charge that that can be differenciated using electrophoresis techniques.can be differenciated using electrophoresis techniques.2024/8/172024/8/174444实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程環境監測的目的環境監測的目的n n確保與實驗動物直接接觸之飼料, 墊料, 水及其他相關物品滅菌完全n n確保實驗動物飼養環境消毒完全n n避免外在環境因素帶入感染源20
49、24/8/172024/8/174545实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程環境監測的內容環境監測的內容n n滅菌功能測試滅菌功能測試.偵菌瓶偵菌瓶, ,滅菌後器具表面落滅菌後器具表面落 菌菌n n水質微生物監測水質微生物監測.主要針對綠膿桿菌主要針對綠膿桿菌n n飼墊料微生物監測飼墊料微生物監測n n人員體表微生物監測人員體表微生物監測n n器具表面落菌數檢查器具表面落菌數檢查.消毒或滅菌效果檢查消毒或滅菌效果檢查n n空氣落菌空氣落菌.動物房消毒後動物房消毒後, , 重新啟用重新啟用 前前2024/8/172024/8/174646实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课
50、程空氣落菌檢測適用於動物房空氣落菌檢測適用於動物房消毒後消毒後,引進動物前引進動物前2024/8/172024/8/174747实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程空氣落菌與落塵量無絕對關係空氣落菌與落塵量無絕對關係採樣點編號採樣點編號落落 塵塵 量量落落 菌菌 量量有有HEPAHEPA 無無HEPAHEPA有有HEPAHEPA 無無HEPAHEPA14614665265262122621220 00 014714793393364700647000 00 014814886686656094560940 00 021621621750217501248831248830 01 1
51、218218168751687555052550520 00 0219219135681356858221582210 00 02212216151615150667506670 02 2226226130511305153344533441 10 02272277923792373609736091 11 12024/8/172024/8/174848实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程實驗動物健康監測的目的實驗動物健康監測的目的n n 於受測族群中, 發現有無感染病原n n 不是不是用於評估特定一種感染或疾病在一族群中的流行情況 (prevalence)2024/8/17202
52、4/8/174949实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程實驗動物健康監測的內容實驗動物健康監測的內容 檢驗類別檢驗類別方法方法病理病理肉眼病變肉眼病變, , 組織學組織學(H&E)(H&E)寄生虫寄生虫鏡檢鏡檢微生物微生物培養培養, , 血清學血清學 ( (如如ELISA, IFA),ELISA, IFA),分子生物學分子生物學 ( (如如PCR)PCR)病毒病毒血清學血清學 ( (如如ELISA, IFA),ELISA, IFA),分子生物學分子生物學 ( (如如PCR)PCR)2024/8/172024/8/175050实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程各單位應訂
53、定自己專屬的各單位應訂定自己專屬的管制病原菌一覽表管制病原菌一覽表 (SPF list)( (例例: : 國家實驗動物中心管制病原菌一覽國家實驗動物中心管制病原菌一覽表表) )管制病原菌一覽表訂定原管制病原菌一覽表訂定原則則: :n n病原的重要性病原的重要性n n對實驗的影響對實驗的影響n n環境環境n n經濟能力經濟能力n n工作人員的能力與經驗工作人員的能力與經驗2024/8/172024/8/175151实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程健康監測的採樣健康監測的採樣2024/8/172024/8/175252实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程抽檢的動物應涵蓋
54、抽檢的動物應涵蓋兩性別與不同年齡層兩性別與不同年齡層抽檢動物之年齡層一般分為 2群:n n 年幼動物年幼動物年幼動物年幼動物 對病原的感受性較高對病原的感受性較高 病原菌分離病原菌分離n n 年輕成鼠年輕成鼠年輕成鼠年輕成鼠 (90(90日齡日齡) )及淘汰種鼠及淘汰種鼠及淘汰種鼠及淘汰種鼠(Retire breeders)(Retire breeders) 血清學檢測血清學檢測 年輕成鼠年輕成鼠- - 檢測新近之病毒感染檢測新近之病毒感染 淘汰種鼠淘汰種鼠- - 檢測所屬族群過去是否受過感染檢測所屬族群過去是否受過感染2024/8/172024/8/175353实验动物饲养管理训练课程实验动
55、物饲养管理训练课程衛兵鼠衛兵鼠 (Sentinel animals)的用途的用途用於下列條件之實驗動物微生物監測用於下列條件之實驗動物微生物監測n n珍貴品系n n實驗進行中, 不適宜犧牲動物n n動物族群小 2024/8/172024/8/175454实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程衛兵鼠的條件衛兵鼠的條件n未受標的病原污染n不會帶新的污染源給待測族群n受到標的病原感染時, 能監測得到2024/8/172024/8/175555实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程衛兵鼠的使用方法衛兵鼠的使用方法n n一般飼養台車一般飼養台車 (Rack), (Rack), 35
56、cages/Rack 35 cages/Rackn n換墊料換墊料/1/1次次/1/1週週/1/1房房n n取取 2 Rack2 Rack墊料給衛兵鼠墊料給衛兵鼠/1/1週週n n衛兵鼠衛兵鼠: Germ free CD-1 (ICR): Germ free CD-1 (ICR)n n取待測族群取待測族群 35cage35cage舊墊料舊墊料 混合混合n n取上述舊墊料取上述舊墊料1/3-1/21/3-1/2混入新墊混入新墊料料1/3-1/21/3-1/2給衛兵鼠使用給衛兵鼠使用R1R1R6R6R2R2R7R7R3R3R8R8R4R4R9R9R5R5R10R102024/8/172024/8/
57、175656实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程衛兵鼠的使用方法衛兵鼠的使用方法cont.月份月份1 12 23 3週數週數1 12 23 34 45 56 67 78 89 9101011111212受監測受監測Rack No.Rack No.R1,2R1,2R3,4R3,4R5,6R5,6R7,8R7,8 R9,10R9,10 R1,2R1,2R3,4R3,4R5,6R5,6R7,8R7,8 R9,10R9,10 R1,2R1,2R3,4R3,4衛兵衛兵鼠鼠第第第第1 1批批批批第第第第1 1批送出監測批送出監測批送出監測批送出監測 第第第第2 2批批批批月份月份4 45 56
58、 6週數週數1313 14141515161617171818191920202121222223232424受監測受監測Rack No.Rack No.R5,6R5,6R7,8R7,8 R9,10R9,10 R1,2R1,2R3,4R3,4R5,6R5,6R7,8R7,8 R9,10R9,10 R1,2R1,2R3,4R3,4R5,6R5,6R7,8R7,8衛兵衛兵鼠鼠第第第第2 2批送出監測批送出監測批送出監測批送出監測 第第第第3 3批批批批2024/8/172024/8/175757实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程衛兵鼠的使用方法衛兵鼠的使用方法cont.優點優點n n
59、不會犧牲珍貴或實驗進行中的動物n n無監測空窗期n n每季監測一次, 節省人力與時間缺點缺點n n傳染途徑非經飼, 墊料接觸者不適用2024/8/172024/8/175858实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程結語結語n n品質管制的目的, 在於維持動物的既定品質標準與規格n n監測制度為實驗動物品質管制的方式n n訂定屬於自己的 SPF listn n實驗動物的品質需要生產單位與使用單位共同合作維持2024/8/172024/8/175959实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程Thank you for your attention! 2024/8/172024/8/176060实验动物饲养管理训练课程实验动物饲养管理训练课程
