药物分析教学课件：第八章 杂环类药物的分析

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1、第八章第八章 杂环类药物的分析杂环类药物的分析 杂环化合物：指环状有机杂环化合物：指环状有机化合物的碳环中夹杂有非碳元化合物的碳环中夹杂有非碳元素原子（如素原子（如O、S、N等）的化等）的化合物合物第一节第一节 吡啶类药物的分析吡啶类药物的分析异烟肼异烟肼（isoniazid）吡啶吡啶（pyridine） 尼可刹米（尼可刹米（nikethamide）硝苯地平（硝苯地平（nifedipine）尼群地平（尼群地平（Nitrendipine）尼莫地平尼莫地平（Nimodipine）一、结构与性质一、结构与性质 1.吡啶环 弱碱性 pKb8.8非水碱量法含量测定或沉淀反应鉴别 吡吡啶啶环环可可发发生生

2、开开环环反反应应，可可用用于吡啶类药物的鉴别于吡啶类药物的鉴别 2. 取代基：（1）异烟肼 位上酰肼基 还还原原性性 氧氧化化还还原原反反应应鉴鉴别别或或氧氧化化还原滴定法含量测定还原滴定法含量测定 可可与与某某些些羰羰基基试试剂剂发发生生缩缩合合反反应应 鉴别或比色法含量测定鉴别或比色法含量测定 酰胺键易水解酰胺键易水解引入特殊杂质引入特殊杂质游离肼游离肼 （2）尼可刹米 位上酰胺基 易易水水解解，遇遇碱碱水水解解后后，释释放放出出具具有有碱碱性性的的二二乙乙胺胺，能能使使湿湿润润的的红红色色石石蕊蕊试试纸纸变变蓝蓝色色，故故可可以以此此进进行行鉴别。鉴别。（3）硝苯地平、尼群地平、尼莫地平

3、3. UV 和和 IR 二、鉴别试验二、鉴别试验 （一）吡啶环的反应 1. 沉淀反应 （1）与氯化汞的反应）与氯化汞的反应 （2）与铜盐的反应）与铜盐的反应尼可刹米尼可刹米 Ch.P（2005）【鉴鉴别别】（3）取取本本品品 2 滴滴，加加水水 1 ml ，摇摇匀匀，加加硫硫酸酸铜铜试试液液 2 滴滴与与硫硫氰氰酸酸胺胺试试液液 3 滴滴，即即生生成成草草绿绿色色沉淀。沉淀。2. 吡啶环的开环反应 （1）戊烯二醛反应（Knig反应） 适适用用于于吡吡啶啶 、 未未取取代代，以以及及 、 为烷基或羧基的衍生物为烷基或羧基的衍生物尼可刹米尼可刹米 Ch.P（2005） 【鉴鉴别别】（2）取取本本品

4、品 1 滴滴，加加水水 50 ml，摇摇匀匀，分分取取 2 ml，加加溴溴化化氰氰试试液液 2 ml与与 2.5% 苯苯胺胺溶溶液液 3 ml，摇匀，溶液渐显黄色。，摇匀，溶液渐显黄色。异烟肼：异烟肼： （2）二硝基氯苯反应 Ch.P（2005） 烟酸烟酸BP（2005） 异烟肼注射液异烟肼注射液异烟肼不经处理的反应异烟肼不经处理的反应：（二）酰肼基的反应 1. 还原反应 异烟肼异烟肼 Ch.P（2005） 【鉴别鉴别】 （2）取异烟肼约）取异烟肼约10 mg，置试管中，加水，置试管中，加水2 ml溶解后，加溶解后，加氨制硝酸银试液氨制硝酸银试液1 m1，即发生气，即发生气泡与黑色浑浊，并在试

5、管壁上生泡与黑色浑浊，并在试管壁上生成银镜。成银镜。 2. 缩合反应 异烟肼异烟肼 Ch.P（2005） 【鉴别鉴别】 （1）取本品约）取本品约0.1 g，加水，加水5 ml溶解后，加溶解后，加10香草醛的乙醇溶香草醛的乙醇溶液液1 m1，摇匀，微热，放冷，即析出，摇匀，微热，放冷，即析出黄色结晶，滤过，用稀乙醇重结晶，黄色结晶，滤过，用稀乙醇重结晶，在在105干燥后，测定熔点，其熔点干燥后，测定熔点，其熔点为为228231，熔融时同时分解。，熔融时同时分解。 （三）分解产物的反应 1. 水解反应水解反应尼可刹米尼可刹米 Ch.P（2005） 【鉴鉴别别】 （1）取取本本品品 10 滴滴，加加

6、氢氢氧氧化化钠钠试试液液 3 ml ，加加热热，即即发发生生二二乙乙胺胺的的臭臭气气，能能使使湿湿润润的红色石蕊试纸变蓝色。的红色石蕊试纸变蓝色。2. 脱羧反应脱羧反应（四）二氢吡啶的解离反应（四）二氢吡啶的解离反应尼群地平尼群地平 Ch.P（2005） 【鉴别鉴别】 （1）取本品）取本品 约约50mg，加，加丙酮丙酮1ml，加，加20%氢氧化钠试液氢氧化钠试液 3 5滴滴 ，溶液显橙红色。，溶液显橙红色。（五）紫外分光光度法 硝苯地平硝苯地平 Ch.P（2005） 【鉴鉴别别】（2）取取本本品品适适量量，加加三三氯氯甲甲烷烷2ml使使溶溶解解，加加无无水水乙乙醇醇制制成成每每1 ml 约约含

7、含 15 g 的的溶溶液液，照照紫紫外外-可可见见分分光光光光度度法法（附附录录A）测测定定，在在 237 nm 波波长长处处有有最最大大吸吸收收，在在320355nm波波长处有较大的宽幅吸收。长处有较大的宽幅吸收。（六）（六）IR 异异烟烟肼肼、尼尼可可刹刹米米、硝硝苯苯地地平平、尼群地平、尼莫地平尼群地平、尼莫地平尼可刹米尼可刹米 Ch.P（2005） 【鉴鉴别别】（4）本本品品的的红红外外光光吸吸收收图图谱谱应应与与对对照照的的图图谱谱（光光谱谱集集 135 图）一致。图）一致。三、特殊杂质检查三、特殊杂质检查 杂质来源杂质来源 原料引入、降解产生原料引入、降解产生 （一）异烟肼中游离肼

8、的检查（一）异烟肼中游离肼的检查 1. 薄层色谱法（薄层色谱法（TLC） （1） Ch.P（2005） 杂质对照品法杂质对照品法 取本品，加水制成每取本品，加水制成每 1ml 中含中含 50mg的溶液，作为供试品溶液。另取硫酸肼加的溶液，作为供试品溶液。另取硫酸肼加水制成水制成每每 1ml中含中含 0.20mg（相当于游离肼（相当于游离肼50g） 的溶液，作为对照品溶液。照薄层的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录色谱法（附录B），吸取供试品溶液），吸取供试品溶液 10l 与对照品溶液与对照品溶液 2l 分别点于同一硅胶分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醇丙酮（薄层板上，以异丙醇丙酮（3

9、2）为展）为展开剂，展开后，晾干，喷以乙醇制对二甲开剂，展开后，晾干，喷以乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液，氨基苯甲醛试液，15分钟后检视。分钟后检视。在供试在供试品主斑点前方与对照品溶液主斑点相应的品主斑点前方与对照品溶液主斑点相应的位置上，不得显黄色斑点。位置上，不得显黄色斑点。 （2） BP（2005） 游离肼游离肼 杂质对照品法杂质对照品法 有关物质有关物质 高低浓度对比法高低浓度对比法2. 比浊法比浊法 JP（15） 检查方法检查方法 灵敏度法灵敏度法 反应原理反应原理 游离肼游离肼+水杨醛水杨醛水杨醛腙水杨醛腙 优点：优点：不用对照品，价廉、简不用对照品，价廉、简单易行单易行 缺点：缺点

10、：专属性差专属性差（二）尼可刹米中有关物质的检查（二）尼可刹米中有关物质的检查 Ch.P（2005） TLC 高低浓度对比法高低浓度对比法 配制两种不同浓度的对照溶液配制两种不同浓度的对照溶液（三）二氢吡啶类药物中有关物质（三）二氢吡啶类药物中有关物质的检查的检查 Ch.P（2005）、）、USP（30） HPLC 杂质来源杂质来源 光解产生光解产生 第二节第二节 喹啉类药物的分析喹啉类药物的分析2硫酸奎宁2硫酸奎尼丁盐酸环丙沙星磷酸氯喹（磷酸氯喹（Chloroquine Phosphate） 氧氟沙星（氧氟沙星（Ofloxacin） 一、结构与性质一、结构与性质1. 碱性碱性2. 旋光性旋光

11、性3. UV与与IR4. 荧光特性荧光特性二、鉴别试验二、鉴别试验 1. 绿奎宁反应绿奎宁反应 硫酸奎宁、硫酸奎尼丁硫酸奎宁、硫酸奎尼丁2. 光谱特征光谱特征（1）UV（2）产生荧光的反应）产生荧光的反应 硫酸奎宁、硫酸奎尼丁硫酸奎宁、硫酸奎尼丁+稀硫酸稀硫酸蓝蓝色荧光色荧光（3） IR3. 硫酸盐、氯化物、磷酸盐硫酸盐、氯化物、磷酸盐的反应的反应4. HPLC 盐酸环丙沙星、氧氟沙星盐酸环丙沙星、氧氟沙星三、特殊杂质检查三、特殊杂质检查 1. 硫酸奎宁中特殊杂质的检查硫酸奎宁中特殊杂质的检查 （1）酸度）酸度 （2）三氯甲烷）三氯甲烷乙醇中不溶物乙醇中不溶物 （3）其他金鸡纳碱）其他金鸡纳碱

12、 Ch.P TLC 高低浓度对比法高低浓度对比法 BP HPLC2. 氧氟沙星中有关物质的检查氧氟沙星中有关物质的检查 HPLC 3. 盐酸环丙沙星中特殊杂质的盐酸环丙沙星中特殊杂质的检查检查（1）氟喹啉酸）氟喹啉酸 Ch.P（2005） TLC杂质对照品法杂质对照品法（2）有关物质）有关物质 HPLC Ch.P（2000） 面积归一化法面积归一化法Ch.P（2005）不加校正因子的主成）不加校正因子的主成分自身对照法分自身对照法（3）甲苯与乙醇）甲苯与乙醇 GCCh.P（2005）照残留溶剂测定法测）照残留溶剂测定法测定定第三节第三节 托烷类药物的分析托烷类药物的分析硫酸阿托品氢溴酸东莨菪碱

13、氢溴酸后马托品硫酸莨菪碱一、结构与性质一、结构与性质1. 碱性碱性2. 含酯键，易水解含酯键，易水解3. 旋光性旋光性4. UV和和IR二、鉴别试验二、鉴别试验 1. Vitali反应反应 托烷生物碱托烷生物碱 2. 氧化反应氧化反应5. 硫酸盐与溴化物的反应硫酸盐与溴化物的反应4. IR3. 沉淀反应沉淀反应溴化物的反应溴化物的反应 药典附录药典附录“一般鉴别试验一般鉴别试验”。 （1）沉淀反应）沉淀反应 （2）氧化还原反应）氧化还原反应 三、特殊杂质检查三、特殊杂质检查（一）氢溴酸东莨菪碱中特殊杂质检查（一）氢溴酸东莨菪碱中特殊杂质检查 1. 酸度酸度 2. 其他生物碱其他生物碱 3. 易

14、氧化物易氧化物（二）硫酸阿托品中特殊杂质检查（二）硫酸阿托品中特殊杂质检查 1. 莨菪碱莨菪碱 旋光法旋光法 2. 其他生物碱其他生物碱 第四节第四节 吩噻嗪类药物的分析吩噻嗪类药物的分析 吩噻嗪类药物的基本结构 奋乃静奋乃静癸氟奋乃静癸氟奋乃静盐酸氟奋乃静盐酸氟奋乃静盐酸三氟拉嗪盐酸三氟拉嗪苯苯磺磺酸酸美美索索达达嗪嗪一、结构与性质一、结构与性质（一）结构分析 1. 硫氮杂蒽母核 （1）含S、N的三环共轭的大体系，S、N与苯环形成p-共轭具有紫外吸收光谱特征 （2）硫氮杂蒽环上硫原子为-2价，具有还原性，易氧化呈色 （3）硫氮杂蒽环上硫原子有两对孤对电子，易与金属离子络合呈色 2. 取代基

15、R：脂烃胺基、哌嗪基、哌啶基，具碱性 R：卤素 （二）性质 1. 紫紫外外与与红红外外吸吸收收光光谱谱 本本类类药药物物的的紫紫外外特特征征吸吸收收，主主要要由由母母核核三三环环的的系系统统所所产产生生，一一般般具具有有三三个个峰峰值值。即即在在 204209nm（205nm附附近近）、250265nm（254nm附附近近）和和300325nm（300nm附附近近）。最最强强峰峰多多在在 250265nm。 2位位上上的的取取代代基基（R）不不同同，会会引起吸收峰发生位移。引起吸收峰发生位移。 其其结结构构中中-2 价价的的硫硫，易易氧氧化化，氧化产物砜及亚砜有四个吸收峰。氧化产物砜及亚砜有四

16、个吸收峰。 吩吩噻噻嗪嗪类类药药物物随随取取代代基基 R 和和R的不同，产生不同的红外吸收光谱。的不同，产生不同的红外吸收光谱。 2. 易被氧化呈色易被氧化呈色 3. 易与金属离子络合呈色易与金属离子络合呈色 4. 碱性碱性二、鉴别试验二、鉴别试验 （一）（一）UV和和IR奋乃静奋乃静 Ch.P（2005）【鉴鉴别别】 （2）取取本本品品，加加无无水水乙乙醇醇制制成成每每1ml 中中含含 7 g 的的溶溶液液，照照紫紫外外-可可见见分分光光光光度度法法（附附录录A）测测定定，在在 258nm 的的波波长长处处有有最最大大吸吸收收，吸吸光光度约为度约为0.65。 （3）本品的红外光吸收图谱）本品

17、的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集应与对照的图谱（光谱集 243 图）一致图）一致（二） 显色反应 1. 氧化剂氧化显色氧化剂氧化剂 硫酸、硝酸、过氧化氢硫酸、硝酸、过氧化氢奋乃静奋乃静 Ch.P（2005）【鉴鉴别别】 （1）取取本本品品 5mg，加加盐盐酸酸与与水水各各 1ml，加加热热至至80，加加入入过过氧氧化化氢氢溶溶液液数数滴滴，即即显显深深红红色色；放放置置后后，红色渐褪去。红色渐褪去。 盐酸异丙嗪盐酸异丙嗪 Ch.P（2005）【鉴别鉴别】 （1）取本品约）取本品约 5mg，加硫，加硫酸酸5ml 溶解后，溶液显樱桃红色；放溶解后，溶液显樱桃红色；放置后，色渐变深。置后，色渐

18、变深。（2）取本品约）取本品约 0.1g，加水，加水 3ml 溶解溶解后，加硝酸后，加硝酸 1ml，即生成红色沉淀；，即生成红色沉淀；加热，沉淀即溶解，溶液由红色转变加热，沉淀即溶解，溶液由红色转变为橙黄色。为橙黄色。癸氟奋乃静癸氟奋乃静 Ch.P（2005）【鉴别鉴别】 （2）取本品约）取本品约 50mg，加，加甲醇甲醇2ml 溶解后，加溶解后，加 0.1% 氯化钯溶氯化钯溶液液 3ml，即有沉淀生成，并显红色，即有沉淀生成，并显红色，再加过量的氯化钯溶液，颜色变深。再加过量的氯化钯溶液，颜色变深。 2. 与钯离子配合显色（三）分解产物的反应癸氟奋乃静癸氟奋乃静 Ch.P（2005）【鉴别鉴

19、别】 （1）取本品）取本品 15 20mg，加，加碳酸钠与碳酸钾各约碳酸钠与碳酸钾各约0.1g，混匀，在，混匀，在 600 炽灼炽灼 1520分钟，放冷，加水分钟，放冷，加水2ml 使溶解，加盐酸溶液（使溶解，加盐酸溶液（12）酸化，）酸化，滤过，滤液加茜素锆试液滤过，滤液加茜素锆试液 0.5ml，应显，应显黄色。黄色。（四）氯化物的反应盐酸氯丙嗪盐酸氯丙嗪 Ch.P（2005）【鉴别鉴别】 （4）本品的水溶液显氯）本品的水溶液显氯化物的鉴别反应（附录化物的鉴别反应（附录 ）。）。三、有关物质检查三、有关物质检查 TLC 高低浓度对比法高低浓度对比法第五节第五节 苯并二氮杂卓苯并二氮杂卓类药物

20、的分析类药物的分析 环庚三烯环庚三烯草草卓卓奥沙西泮奥沙西泮三三唑唑仑仑一、结构与性质一、结构与性质 1. 苯并二氮杂卓母核苯并二氮杂卓母核 弱碱性，弱碱性，UV 2. 结构中的环一般比较稳定，但在酸结构中的环一般比较稳定，但在酸性溶液中可水解，形成相应的二苯甲酮性溶液中可水解，形成相应的二苯甲酮衍生物。衍生物。 3. 含卤素含卤素二、鉴别试验二、鉴别试验 （一）化学鉴别 1. 沉淀反应沉淀反应 氯氮卓氯氮卓 Ch.P（2005）【鉴别鉴别】（1）取本品约）取本品约 10mg，加盐酸溶液（加盐酸溶液（91000）10ml 溶溶解后，加碘化铋钾试液解后，加碘化铋钾试液 1 滴，即滴，即生成橙红色

21、沉淀。生成橙红色沉淀。阿普唑仑阿普唑仑 Ch.P（2005）【鉴别鉴别】 （1）取本品约）取本品约 5mg，加盐，加盐酸溶液（酸溶液（91000）2ml 溶解后，分溶解后，分为两份：一份加硅钨酸试液为两份：一份加硅钨酸试液 1 滴，即滴，即生成白色沉淀；另一份加碘化铋钾试生成白色沉淀；另一份加碘化铋钾试液液 1 滴，即生成橙红色沉淀。滴，即生成橙红色沉淀。2. 水解后重氮化水解后重氮化偶合反应偶合反应 氯氮卓、奥沙西泮氯氮卓、奥沙西泮 氯氮卓氯氮卓 Ch.P（2005）【鉴别鉴别】 （3）取本品约）取本品约 10mg，加，加盐酸溶液（盐酸溶液（12）15ml，缓缓煮沸，缓缓煮沸 15 分钟，放

22、冷，溶液显芳香第一胺类分钟，放冷，溶液显芳香第一胺类的鉴别反应（附录的鉴别反应（附录）。）。 3. 水解后呈茚三酮反应水解后呈茚三酮反应 地西泮地西泮 4. 硫酸硫酸荧光反应荧光反应地西泮地西泮 Ch.P（2005）【鉴别鉴别】 （1）取本品约）取本品约 10mg，加，加硫酸硫酸3ml，振摇使溶解，在紫外灯，振摇使溶解，在紫外灯（365nm）下检视，显黄绿色荧光。）下检视，显黄绿色荧光。 氯氮卓氯氮卓黄色黄色艾司唑仑艾司唑仑亮绿色亮绿色硝西泮硝西泮淡蓝色淡蓝色5. 分解产物的反应分解产物的反应 地西泮地西泮 Ch.P（2005）【鉴别鉴别】 （4）取本品）取本品 20mg，照氧，照氧瓶燃烧法（

23、附录瓶燃烧法（附录 C）进行有机破）进行有机破坏，以坏，以 5% 氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液 5ml 为吸收为吸收液，燃烧完全后，用稀硝酸酸化，并液，燃烧完全后，用稀硝酸酸化，并缓缓煮沸缓缓煮沸 2 分钟，溶液显氯化物的鉴分钟，溶液显氯化物的鉴别反应（附录别反应（附录 ）。）。 （二）（二）UV 和和 IR （三）色谱法（三）色谱法三、特殊杂质的检查 1. 氯氮卓中有关物质的检查氯氮卓中有关物质的检查 USP TLC 氧化物、氨基物氧化物、氨基物 杂质对照品法杂质对照品法 其他杂质其他杂质 高低浓度对比法高低浓度对比法 BP TLC 氨基物氨基物 杂质对照品法杂质对照品法 其他杂质其他杂质 高低

24、浓度对比法高低浓度对比法 Ph.Eur HPLC Ch.P 酸性溶液的澄清度法酸性溶液的澄清度法 2. 三唑仑中有关物质的检查三唑仑中有关物质的检查 Ch.P 、USP GC峰面积归一化法峰面积归一化法一、非水溶液滴定法一、非水溶液滴定法 Ch.P（2005）共收载二法。）共收载二法。第第一一法法 非非水水碱碱量量法法，测测定定有有机机碱碱及及其盐类或有机酸的碱金属盐类其盐类或有机酸的碱金属盐类第二法第二法 非水酸量法，非水酸量法，测定有机弱酸测定有机弱酸第六节第六节 含量测定含量测定非水碱量法非水碱量法（一）原理（一）原理 有机碱及其盐类在水溶液中滴有机碱及其盐类在水溶液中滴定突跃不明显，在

25、非水介质中，定突跃不明显，在非水介质中，碱性增强，使滴定顺利进行碱性增强，使滴定顺利进行 。 1. 溶剂溶剂 酸酸性性溶溶剂剂：冰冰醋醋酸酸、冰冰醋醋酸酸+醋醋酐酐、醋酐醋酐 惰性溶剂：甲苯、三氯甲烷惰性溶剂：甲苯、三氯甲烷 能能影影响响溶溶质质的的解解离离情情况况和和能能影影响响酸酸碱碱强强度度很很大大的的溶溶剂剂：硝硝基基甲甲烷烷、丙丙酮、二氧六环酮、二氧六环 2. 滴定剂：高氯酸的冰醋酸溶液高氯酸的冰醋酸溶液 或高氯酸的二氧六环溶液或高氯酸的二氧六环溶液 注意滴定时温度，因为冰醋酸的体注意滴定时温度，因为冰醋酸的体积膨胀系数较大（积膨胀系数较大（1.110 3/），其），其体积随温度改变

26、较大，温度和贮存条体积随温度改变较大，温度和贮存条件都影响标准溶液的浓度。件都影响标准溶液的浓度。 若滴定供试品与标定高氯酸滴定若滴定供试品与标定高氯酸滴定液时的温度差别超过液时的温度差别超过10 ，则应重新，则应重新标定；若未超过标定；若未超过10 ，则可根据公式，则可根据公式将高氯酸滴定液的浓度加以校正。将高氯酸滴定液的浓度加以校正。3. 指示终点的方法 电位法电位法：玻璃：玻璃甘汞电极系统甘汞电极系统 指示剂法：指示剂法：结晶紫、结晶紫、喹哪啶红等喹哪啶红等 有有机机碱碱及及其其盐盐类类及及有有机机酸酸碱碱金金属盐类原料药的含量测定属盐类原料药的含量测定8pKb10 冰醋酸作溶剂冰醋酸作

27、溶剂10pKb12 冰醋酸冰醋酸+醋酐醋酐pKb12 醋酐醋酐 （二）适用范围 一般采用半微量法一般采用半微量法。 中中国国药药典典（2005年年版版）的的第第一一法法：精精密密称称取取供供试试品品适适量量约约消消耗耗高高氯氯酸酸滴滴定定液液（0.1 mol/L）8 ml，加加冰冰醋醋酸酸1030 ml使使溶溶解解，加加各各品品种种项项下下规规定定的的指指示示液液12滴滴，用用高高氯氯酸酸滴滴定定液液（0.1mol/L）滴滴定定。终终点点颜颜色色以以电电位位滴滴定定时时的的突突跃跃点点为为准准，并并将滴定的结果用将滴定的结果用空白试验校正空白试验校正。 （三）一般测定方法（三）一般测定方法 游

28、离弱碱性药物可直接测定游离弱碱性药物可直接测定 Ch.P（2005）尼可刹米、地）尼可刹米、地西泮、氯氮卓西泮、氯氮卓 取取本本品品约约 0.15g，精精密密称称定定，加加冰冰醋醋酸酸 10ml与与结结晶晶紫紫指指示示液液 1滴滴，用用高高氯氯酸酸滴滴定定液液（0.1mo1/L）滴滴定定，至至溶溶液液显显蓝蓝绿绿色色，并并将将滴滴定定的的结结果果用用空空白白试试验验校校正正。每每 1ml 高高氯氯酸酸滴滴定定液液（0.1mol/L）相当于）相当于 17.82mg 的的C10H14N2O。尼可刹米尼可刹米 Ch.P（2005）（四）有机碱盐类的滴定（四）有机碱盐类的滴定 置换滴定：置换滴定： 无

29、机酸在冰醋酸中的酸性次序为：无机酸在冰醋酸中的酸性次序为：高氯酸氢溴酸硫酸盐酸高氯酸氢溴酸硫酸盐酸硝酸磷酸有机酸硝酸磷酸有机酸 由由于于有有机机酸酸系系弱弱酸酸，被被高高氯氯酸酸置置换换出出的的HA，对对滴滴定定无无干干扰扰，能准确滴定。能准确滴定。 1. 有机酸盐的测定有机酸盐的测定 取取本本品品约约 60mg，精精密密称称定定，加加冰冰醋醋酸酸 20ml 溶溶解解后后，加加结结晶晶紫紫指指示示液液 1滴滴，用用高高氯氯酸酸滴滴定定液液（0.05mo1/L）滴滴定定，至至溶溶液液显显蓝蓝绿绿色色，并并将将滴滴定定的的结结果果用用空空白白试试验验校校正正。每每 1ml 高高氯氯酸酸滴滴定液（定

30、液（0.05mol/L）相当于）相当于 22.07mg 的的C19H23N3O2 C4H4O4。马来酸麦角新碱马来酸麦角新碱 Ch.P（2005） 若若被被置置换换出出的的有有机机酸酸不不溶溶于于冰冰醋醋酸酸，应应先先将将样样品品碱碱化化，有有机机溶溶剂剂提提取取游游离离碱碱后后，再再非非水水碱碱量量法法测定。测定。2. 氢卤酸盐的测定 供试品溶液如为氢卤酸盐，应在加供试品溶液如为氢卤酸盐，应在加入入Hg(Ac)2 试液试液35ml后，再进行滴后，再进行滴定。定。 Hg(Ac)2与氢卤酸生成在冰醋酸与氢卤酸生成在冰醋酸中难解离的卤化汞，可消除氢卤酸对中难解离的卤化汞，可消除氢卤酸对滴定的干扰。

31、滴定的干扰。 取取本本品品约约 0.2g，精精密密称称定定，加加醋醋酐酐10ml，振振摇摇溶溶解解后后，加加醋醋酸酸汞汞试试液液 5ml与与橙橙黄黄指指示示液液 1滴滴，用用高高氯氯酸酸滴滴定定液液（0.1mo1/L）滴滴定定至至溶溶液液显显玫玫瑰瑰红色红色，并将滴定的结果用空白试验校，并将滴定的结果用空白试验校正正 。 每每 1ml 高高 氯氯 酸酸 滴滴 定定 液液（0.1mol/L）相当于相当于 35.53mg 的的C17H19ClN2S HCl。盐酸氯丙嗪盐酸氯丙嗪 Ch.P（2005） 有有机机碱碱的的硫硫酸酸盐盐，在在冰冰醋醋酸酸介介质质中中只只能能被被滴滴定定至至有有机机碱碱的的

32、硫硫酸酸氢氢盐。盐。 （1）直接滴定）直接滴定3. 硫酸盐的测定A. 硫酸阿托品 HClO4直接滴定时，反应摩尔比为11B. 硫酸奎宁 HClO4直接滴定时，反应摩尔比为13 （2）加加入入高高氯氯酸酸钡钡消消除除硫硫酸酸的的干干扰后滴定扰后滴定 硫酸奎宁硫酸奎宁 反应摩尔比为反应摩尔比为1 2 硫酸阿托品硫酸阿托品 一元碱不能滴定一元碱不能滴定 因因HNO3具具有有氧氧化化性性，可可使使指指示示剂剂变变色色，一一般般电电位位法法指指示示终终点点。如硝酸士的宁、硝酸毛果芸香碱如硝酸士的宁、硝酸毛果芸香碱 4. 硝酸盐的测定 取取本本品品约约 0.3g，精精密密称称定定，加加冰冰醋醋酸酸 20m

33、l，振振摇摇使使溶溶解解，照照电电位位滴滴定定法法（附附录录 A），用用高高氯氯酸酸滴滴定定液液（0.1mo1/L）滴滴定定，并并将将滴滴定定的的结结果果用用空空白白试试验验校校正正。每每 1ml 高高氯氯酸酸滴滴定定液液 （ 0.1mol/L） 相相 当当 于于 39.74mg的的C21H22N2O2 HNO3。硝酸士的宁硝酸士的宁 Ch.P（2005） 按常法测定，按常法测定，如磷酸氯喹、如磷酸氯喹、磷酸可待因磷酸可待因 5. 磷酸盐的测定 简简便便、快快速速、准准确确、精精密密、取取样量小，测定的是生理活性部分。样量小，测定的是生理活性部分。 如有酸性或碱性成分存在时会如有酸性或碱性成分

34、存在时会影响，专属性差，不能直接用于制影响，专属性差，不能直接用于制剂分析，只能用于原料药测定。剂分析，只能用于原料药测定。 （五）特点（五）特点（1）一一般般是是取取一一定定量量样样品品在在水水浴浴上上蒸蒸干干，在在一一定定温温度度下下干干燥燥后后按按原原料料药药物物项项下下的的方方法法进进行行。主药对热稳定主药对热稳定（六）制剂分析（六）制剂分析1. 注射剂注射剂 精精密密量量取取本本品品 10ml，置置水水浴浴上上蒸蒸干干，在在 105 干干燥燥 1h，放放冷冷，加加冰冰醋醋酸酸 10ml，与与醋醋酸酸汞汞试试液液 6ml 使使溶溶解解，加加结结晶晶紫紫指指示示液液 1滴滴，用用高高氯氯

35、酸酸滴滴定定液液（0.1mo1/L）滴滴定定，至至溶溶液液显显绿绿色色，并并将将滴滴定定的的结结果果用用空空白白试试验验校校正正。每每 1ml 高高氯氯酸酸滴滴定定液液（0.1mol/L）相相当当于于37.58mg 的的C20H21NO4 HCl。盐酸罂粟碱注射液盐酸罂粟碱注射液 Ch.P（2005）（2）碱碱化化，经经有有机机溶溶剂剂反反复复提提取取完完全全，蒸蒸去去溶溶剂剂后后，再再按按原原料料药药方方法法进进行行。主药对热不稳定主药对热不稳定二盐酸奎宁注射液二盐酸奎宁注射液 Ch.P（2005） 精精密密量量取取本本品品适适量量，加加水水定定量量稀稀释释制制成成每每1ml中中含含15mg

36、的的溶溶液液，精精密密量量取取10ml，置置分分液液漏漏斗斗中中，加加水水使使成成20ml，加加氨氨试试液液使使成成碱碱性性，用用三三氯氯甲甲烷烷分分次次振振摇摇提提取取，第一次第一次 25ml，以后每次各，以后每次各 10ml，至至奎奎宁宁提提尽尽为为止止，每每次次得得到到的的三三氯氯甲甲烷烷液液均均用用同同一一份份水水洗洗涤涤 2 次次，每每次次 5 ml，洗洗液液用用三三氯氯甲甲烷烷 10ml 振振摇摇提提取取，合合并并三三氯氯甲甲烷烷液液，置置水水浴浴上上蒸蒸去去三三氯氯甲甲烷烷，加加无无水水乙乙醇醇 2ml再再蒸蒸干干，在在 105 干干燥燥 1h，放放冷冷，加加醋醋酐酐 5ml 与

37、与冰冰醋醋酸酸 10ml使使溶溶解解，加加结结晶晶 紫紫 指指 示示 液液 1滴滴 ， 用用 高高 氯氯 酸酸 滴滴 定定 液液（0.1mo1/L）滴滴定定至至溶溶液液显显蓝蓝色色，并并将将滴滴定定的的结结果果用用空空白白试试验验校校正正。每每 1ml 高高氯氯酸酸滴滴定定液液（0.1mol/L）相相当当于于19.87mg 的的C20H24N2O2 2HCl。 片片剂剂中中许许多多赋赋形形剂剂如如硬硬脂脂酸酸盐盐、苯苯甲甲酸酸盐盐、羧羧甲甲基基纤纤维维素素钠钠等等都都消消耗耗高高氯氯酸酸，因因此此片片剂剂的的测测定定一一般般需需提取分离并经干燥后才可进行。提取分离并经干燥后才可进行。2. 片剂

38、片剂如硫酸奎宁片、硫酸奎尼丁片如硫酸奎宁片、硫酸奎尼丁片 碱化、有机溶剂提取后，碱化、有机溶剂提取后，HClO4滴定时，反应摩尔比为滴定时，反应摩尔比为1 4 硫酸奎宁片硫酸奎宁片 Ch.P（2005） 取取本本品品 10 片片，除除去去包包衣衣后后，精精密密称称定定，研研细细，精精密密称称取取适适量量（约约相相当当于于硫硫酸酸奎奎宁宁 0.3g），置置分分液液漏漏斗斗中中，加加氯氯化化钠钠0.5g 与与 0.1mol/L 氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液10ml，混混匀匀，精精密密加加三三氯氯甲甲烷烷50ml，振振摇摇10分分钟钟，静静置置，分分取取三三氯氯甲甲烷烷液，用干燥滤纸滤过。液，用干燥滤纸

39、滤过。精精密密量量取取续续滤滤液液25ml，加加醋醋酐酐5ml 与与二二甲甲基基黄黄指指示示液液2滴滴，用用高高氯氯酸酸滴滴定定液液（0.1mo1/L）滴滴定定至至溶溶液液显显玫玫瑰瑰红红色色，并并将将滴滴定定的的结结果果用用空空白白试试验验校校正正。每每1ml 高高氯氯酸酸滴滴定定液液（0.1 mol/L）相相当当于于19.57mg的的（C20H24N2O2）2 H2SO42H2O。二、二、氧化还原滴定法 （一）溴酸钾法溴酸钾法Ch.P（2005）异烟肼原料及制剂）异烟肼原料及制剂反应摩尔比反应摩尔比 3 2 取取本本品品约约 0.2g，精精密密称称定定，置置 100ml量量瓶瓶中中，加加水

40、水使使溶溶解解并并稀稀释释至至刻刻度度，摇摇匀匀；精精密密量量取取25m1，加加水水50m1、盐盐酸酸20ml与与甲甲基基橙橙指指示示剂剂1滴滴，用用溴溴酸酸钾钾滴滴定定液液（0.01667mo1/L）缓缓缓缓滴滴定定（温温度度保保持持在在1825）至至粉粉红红色色消消失失。每每1ml的的溴溴酸酸钾钾滴滴定定液液（0.01667mol/L）相相当当于于3.429mg的的C6H7N3O。 （二）（二）铈量法铈量法 1. 二氢吡啶类二氢吡啶类 以以Ce(SO4)2为标准溶液，邻为标准溶液，邻二氮菲作指示剂。二氮菲作指示剂。 反应摩尔比为：反应摩尔比为：1 2 自身指示终点或电位法、永自身指示终点或

41、电位法、永停法指示终点停法指示终点 2. 吩噻嗪类药物的测定吩噻嗪类药物的测定优点：优点： 硫酸铈作滴定剂具有高的氧硫酸铈作滴定剂具有高的氧化电位，且为一价还原；不存在化电位，且为一价还原；不存在对环取代基的副反应，专属性高。对环取代基的副反应，专属性高。 本法既可用于原料，亦可用本法既可用于原料，亦可用于片剂的测定于片剂的测定 1. 基本原理 在适当的pH介质中 （一）酸性染料比色法（一）酸性染料比色法 制剂三、比色法三、比色法1. 水相中反应水相中反应 离离子子对对BH+In-被被有有机机溶溶剂剂提提取取，使使有有机机相相呈呈色色。剩剩余余的的酸酸性性染染料料留留于水相于水相2. 有机溶剂

42、提取有机溶剂提取 定定量量分分离离出出有有机机提提取取液液，脱脱水水后后，测定测定A，求出有机碱含量，求出有机碱含量 3. 比色法测定比色法测定 （1）水水相相的的最最适适pH值值 如如果果水水相相pH值值过过小小，酸酸性性染染料料几几乎乎仍仍以以分分子子状状态态存存在在；如如果果水水相相pH值值过过大大，则则生生物物碱几乎全部以游离碱的形式存在碱几乎全部以游离碱的形式存在 （2）有机溶剂的选择）有机溶剂的选择 CHCl3、CH2Cl2 2. 影响定量分析的因素（3）酸酸性性染染料料及及其其浓浓度度的的选选择择 常常用用溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝（溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝（BTB）等）等（5）有色杂

43、质的排除）有色杂质的排除（4）水分的影响）水分的影响 严防水分的混入严防水分的混入 有有机机层层可可加加入入无无水水硫硫酸酸钠钠等等脱脱水水剂剂或经干燥滤纸滤过或经干燥滤纸滤过 （3）准准确确度度差差，不不能能用用于于原原料料药药的的测定，只能用于制剂分析测定，只能用于制剂分析3. 特点特点 （1）专属性强（选用适当）专属性强（选用适当pH缓冲液缓冲液可消除干扰）可消除干扰）（2）灵敏度高、供试品用量少）灵敏度高、供试品用量少 氢氢溴溴酸酸东东莨莨菪菪碱碱片片、硫硫酸酸阿阿托托品片品片 Ch.P（2005）片剂片剂 对照法对照法4. 应用应用硫酸阿托品注射液硫酸阿托品注射液 Ch.P（2005

44、）注射液注射液 对照法对照法注射液：注射液：（二）钯离子比色法 反应在反应在 pH20.1 的缓冲液中进行的缓冲液中进行优点：优点： 钯钯离离子子比比色色法法可可选选择择性性地地用用于于未未被被氧氧化化的的吩吩噻噻嗪嗪类类药药物物的的测定测定 四、紫外分光光度法（一）直接分光光度法（一）直接分光光度法 盐酸异丙嗪盐酸异丙嗪：片剂测定波长为：片剂测定波长为249nm（ 为为910）；注射液为了）；注射液为了消除抗氧剂维生素消除抗氧剂维生素C（ max 243nm）对测定的干扰，测定波长改为对测定的干扰，测定波长改为299nm（ 为为108）。）。 同理，同理，盐酸氯丙嗪盐酸氯丙嗪片剂测定波长片剂

45、测定波长为为254nm（ 为为915）；注射液测定）；注射液测定波长改为波长改为306nm（ 为为115）。 （二）萃取后分光光度法（二）萃取后分光光度法 盐酸氯丙嗪注射液盐酸氯丙嗪注射液 USP（三）萃取双波长分光光度法1. 原理原理 在在待待测测组组分分（a）的的最最大大吸吸收收波波长长（测测定定波波长长， 1）处处测测定定待待测测组组分分和和干干扰扰组组分分（b）吸吸收收度度的的总总和和；另另选选一一适适当当波波长长（参参比比波波长长， 2）测测定定吸吸收收度度，并并使使干干扰扰组组分分在在测测定定波波长长和和参参比比波波长长处处的的吸吸收收度度相相等等，即即 ，而而待待测测组组分在这两

46、个波长处吸收度的差值足够大。分在这两个波长处吸收度的差值足够大。2. 定量依据 样品在二波长下吸收度差值（A）： 即，吸收度差值（A）仅与待测组分的浓度有关，而与干扰组分无关，干扰组分的干扰被消除。 3. 必要条件（1）干扰组分在两个波长处吸收度相等（2） 待测组分在两个波长处吸收度相差足够大 4. 应用 （1）萃取 除去抗氧剂的干扰 （2）双波长分光光度法测定 排除氧化产物的干扰排除氧化产物的干扰 测定波长测定波长 254nm 参比波长参比波长 277nm 对照法定量对照法定量（四）二阶导数分光光度法（四）二阶导数分光光度法 干扰物的二阶导数光谱近似为接干扰物的二阶导数光谱近似为接近基线的一

47、条直线，不干扰测定近基线的一条直线，不干扰测定 因此可从二阶导数光谱量取峰因此可从二阶导数光谱量取峰谷距离，对照法定量谷距离，对照法定量 不不论论是是游游离离碱碱还还是是其其盐盐类类，均是以游离碱出峰均是以游离碱出峰五、气相色谱法五、气相色谱法如硫酸莨菪碱注射液如硫酸莨菪碱注射液 USP pH9.0 条件下，二氯甲烷提条件下，二氯甲烷提取，取，GC法测定，内标法定量法测定，内标法定量六、高效液相色谱法六、高效液相色谱法 （一）反相（一）反相 HPLC 分析有机碱分析有机碱类药物的特点类药物的特点 色谱峰拖尾，分离效能下降，色谱峰拖尾，分离效能下降，保留时间过长，甚至长期地保留保留时间过长，甚至长期地保留在色谱柱上。在色谱柱上。 1. 加加扫扫尾尾剂剂法法 分分离离依依据据物物质质的的极极性性及及溶溶解解性性。在在流流动动相相中中加加入入扫扫尾尾剂，最常用的扫尾剂是三乙胺剂，最常用的扫尾剂是三乙胺2. 用用经经特特别别封封口口处处理理的的化化学学键键合合固固定相定相（二）解决方法（二）解决方法3. 离子对高效液相色谱法离子对高效液相色谱法七、液七、液- -质联用法质联用法