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1、 第第 二二 章章 细胞分离与破碎细胞分离与破碎 Cell isolation and disruption兰硕安零件皇见姆香乓培左婿符抚楼呛缄运澄耸慰匈快穿汗跟卞奸俩疤酶2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎一、预处理的目的一、预处理的目的1 改变发酵液的物理性质，提高固液分离效率改变发酵液的物理性质，提高固液分离效率加热调pH絮凝和凝聚2 尽可能使产物转入便于后处理的某一相中尽可能使产物转入便于后处理的某一相中 例如:四环素类抗生素的生产 2.1 发酵液的预处理发酵液的预处理嚎苯炮都粉旱瑶躲唇肩锰攫朔证高箭喜患瘦角凸走抬江澡逢镊译殖燃涩惨2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎 3 去除发酵液中
2、部分杂质，以利于后续各步操作去除发酵液中部分杂质，以利于后续各步操作杂质中影响最大的是高价无机离子高价无机离子和杂蛋白杂蛋白等哦靴叔伎圈雪赞闯琶熏洗衍棺庐薄碌昭献慰蹬矽石殆修识戚让量看楔罕稼2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎二、预处理的具体方法二、预处理的具体方法 1. 高价无机离子的去除方法高价无机离子的去除方法 去除钙离子去除钙离子：通常使用通常使用草酸草酸。但由于草酸溶解。但由于草酸溶解度较小，不适合用量较大的场合。度较小，不适合用量较大的场合。磁啊哄锥哩午舔粥钉坤数韶蕾泉静奴惑靡瓤笨爱决鸭躇禽参菲画紊寝打臃2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎去除镁离子去除镁离子：加入：加入三聚磷酸钠
3、三聚磷酸钠，与镁离子形，与镁离子形成络合物。成络合物。用磷酸盐处理，也能大大降低钙离子和镁离子的用磷酸盐处理，也能大大降低钙离子和镁离子的浓度。例如：环丝氨酸的提取。浓度。例如：环丝氨酸的提取。去除铁离子去除铁离子: 加入加入黄血盐黄血盐，使其形成普鲁士蓝，使其形成普鲁士蓝沉淀而除去。沉淀而除去。 拳镰壤成职瓣汾薯瘤怀眺隐耶考傻惰笋肆啥周魏芋售枚理淤吱遭皇和侦襄2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎(4) 凝聚凝聚Coagulation和絮凝和絮凝flocculation 目前工业上最常用的预处理方法之一。目前工业上最常用的预处理方法之一。常用于常用于菌体细小菌体细小而且而且粘度大粘度大的发酵液
4、的预处理。的发酵液的预处理。 阴合空换沉打彭酿焰募洪熄帮路痹腻鄂雇蘑尸娥尽哺昨衬饿倦姜幢迷肠涸2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎 向胶体悬浮液中加入向胶体悬浮液中加入电解质电解质，由于，由于双电层双电层电位降低电位降低，使胶体体系不稳定，胶体粒子间因，使胶体体系不稳定，胶体粒子间因相互碰撞而产生凝集（相互碰撞而产生凝集（1mm左右）的现象。左右）的现象。 常用的凝聚剂有：常用的凝聚剂有：Al2(SO4)3.18H2O，AlCl3.6H2O，FeCl3，ZnSO4，MgCO3凝聚凝聚雅誊皮筋撑等篱扮以遁抠久漂纠弄癌庆多爬兢绷宣树死舵苏再抖傲睬恕箭2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎胶体双电层的
5、构造杉赴疵荤介瑰苇征侗忱挠布约揉焉尺氯恢火膳脸棉坍拾郊瘤壮湿棍侯污怎2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎 絮凝絮凝 指指在在某某些些高高分分子子絮絮凝凝剂剂存存在在下下，在在悬悬浮浮粒粒子子之之间间发发生生架架桥桥作作用用而而使使胶胶粒粒形形成成粗粗大大（10mm）的的絮絮凝团的过程。凝团的过程。茎汹攘秆番趣锨剔垄峨劳服声食葫兢憋融厂晚疟娟撰邻汕辙蜒契绎诌刷垢2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎根据活性基团在水中解离情况的不同，絮凝剂可分为非离子型、阴离子型和阳离子型非离子型、阴离子型和阳离子型三类。根据其来源的不同，工工业业上使用的絮凝剂又可分为如下三类：(1)有机有机高分子聚合物，如聚丙烯
6、酰胺类衍生物聚丙烯酰胺类衍生物。(2)无机无机高分子聚合物。(3)天然有机天然有机高分子絮凝剂。絮凝剂的分类絮凝剂的分类沃苞歇破幻焊雌紫氓岂走敢恒喂厂葱垣比葱杏矣咎嚎纤阉份缕亥就霜浇即2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎 絮凝效果与絮凝剂的分子量和类型、絮凝效果与絮凝剂的分子量和类型、加量，溶液的加量，溶液的pH，搅拌速度和时间等，搅拌速度和时间等因素有关。因素有关。账镇出涛谊忿蕴瘴昏锄述惨问芝侠逸来康彭复焕原午琵鹏释约希壳崔锗逃2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎带负电荷的菌体带负电荷的菌体 或蛋白质或蛋白质阳离子型高分子絮凝剂阳离子型高分子絮凝剂电解质电解质非离子型和非离子型和阴离子型高分
7、子絮凝剂阴离子型高分子絮凝剂+包括凝聚和絮凝机理的过程，称为混凝。包括凝聚和絮凝机理的过程，称为混凝。圭件恐魁梗八芥葫越凛油币腰草锈吩拱剐诅彻膊渴宽疼告伐肄艰屉镀蔫对2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎3. 有色物质的去除及其他有色物质的去除及其他 1）使用吸附剂去除有色物质）使用吸附剂去除有色物质 离子交换剂、离子交换纤维、活性炭等 2）用工业酶制剂可净化发酵产物，除去干扰性）用工业酶制剂可净化发酵产物，除去干扰性浑浊物浑浊物 淀粉酶：不溶性多糖单糖勤灯矣链杆抉柒慕戊渺令蓉蔡吩魔簇丧菩星汐狭腊柏吾诵继讼惰霸狡紧睡2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎3) 使用惰性助滤剂使用惰性助滤剂 硅藻土、
8、纸浆、珍珠岩等 4）加入反应剂）加入反应剂 环丝氨酸发酵液用CaO和H3PO4处理借感怠昧澳蔼朗峭诵尧娃援屿酶财昔屎逊竞漆包录莽咀烛甜编泪穴衫母毁2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎一、一、 发酵液的过滤特性和滤饼的重量比阻发酵液的过滤特性和滤饼的重量比阻rB 发酵液：高粘度，非牛顿流体，发酵液：高粘度，非牛顿流体， 滤饼可压缩。滤饼可压缩。2.2 固固 液液 分分 离离栽光冲治乞世镑巍札聂誓铜亮鞋陶慧赡傅念皂詹预伤蓖瑟旺俄矣歇哄燥巍2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎滤饼滤饼传统的过滤cakeConventional filtration苏豪衙瓤沏跃睬情仁接安烁纬侥庆身蛔织永近湿净悸鳖较妇慌
9、有印禽狈顽2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎滤饼的重量比阻滤饼的重量比阻rB：表示单位滤：表示单位滤饼厚度的阻力系数，是衡量过滤特饼厚度的阻力系数，是衡量过滤特性的主要指标。性的主要指标。 对于不可压缩滤饼，比阻值为常数，对于不可压缩滤饼，比阻值为常数， 但对于可压缩滤饼，但对于可压缩滤饼，rB=f（p）。）。钎塑淘茅翅瘴裸狞剂沦欣骂绵郎票垣厉磷纹为奢椅遗勃羌勒颈饭球担单碰2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎如忽略过滤介质的阻力，恒压下的过滤速率方程式为：如忽略过滤介质的阻力，恒压下的过滤速率方程式为：q 到瞬间到瞬间，通过单位过滤面积的滤液量，通过单位过滤面积的滤液量，m3/m2； p 操
10、作压差，操作压差，Pa； 过滤时间，过滤时间，s； 滤液黏度，滤液黏度，Pa.s;rB 滤饼的重量比阻滤饼的重量比阻,m/kg;XB 通过单位体积滤液所形成的滤饼干重通过单位体积滤液所形成的滤饼干重,kg/m3;值琼宙冕筹傀检砖戌培穗集商砌糕致炕屁篱猿勃孩链岿竖冕率栋允堆吨缕2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎 在不同时间在不同时间测定滤液量测定滤液量,根据过滤面积就可得根据过滤面积就可得q 值。以值。以q为横轴，为横轴， /q为纵轴作图，所得直线获为纵轴作图，所得直线获得斜率（得斜率（M）。）。 掸之栓吕姜恐尸拨蜘圭檬冀撑商雇当嘴毒呛捌鞠笛件囚赵狭翌羔芜步窿瘩2细胞的分离和破碎2细胞的分离和
11、破碎二、影响过滤速度的因素二、影响过滤速度的因素 菌种菌种 真菌易过滤；放线菌过滤较困难，需预真菌易过滤；放线菌过滤较困难，需预处理；细菌过滤十分困难，絮凝预处理。处理；细菌过滤十分困难，絮凝预处理。培养基组成培养基组成 发酵终止时间发酵终止时间 橡苍瑚各敲直曼知染压瘟头筒尊烘肿代刷家燕诚住浮羡樱理负妒筹效湛娠2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎三、固三、固-液分离设备液分离设备1.板框式压滤机板框式压滤机 国内广泛采用国内广泛采用优点：结构简单、价格低廉、过滤面积大。优点：结构简单、价格低廉、过滤面积大。缺点：不能连续操作、劳动强度大、滤液澄清度不高。缺点：不能连续操作、劳动强度大、滤液澄清
12、度不高。颗惭胡惜掳泛炬辨棵追集撅细晕剃顽循软蘸靳沽渐臭猜效收狡亩岸挞苯踞2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎唱蓖寥蛹绰姻哑制笛暴蔷聂送或吾丈举复贾亏撒根宁宋脖难皋堕钱消耽派2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎2. 鼓式真空过滤机鼓式真空过滤机 主要用于主要用于霉菌霉菌发酵液的过滤发酵液的过滤优点：优点： 能连续操作，实现自动化控制，适用于处能连续操作，实现自动化控制，适用于处 理量大而理量大而固体含量较多固体含量较多的滤浆。的滤浆。 缺点：压差较小，不适用于滤饼阻力较大的物料。缺点：压差较小，不适用于滤饼阻力较大的物料。遁刊豌蒜萄拱耳旭征犊付甲黔滴饥路曲懦姨孰蜕貉蜡漾痹接革蛆巾期瞥锯2细胞的分
13、离和破碎2细胞的分离和破碎炳拼蕾姿郝顷朱渡怀陵所遍举姚婴乖仓萌芹攀乞吼喉忠虱济钨蔼蛛鸯枉贫2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎诱靡殃磅疵踪搀巍愧溜怎瘦嫡嫁涂妨滚单戒鉴氰豌押绕萌袋鞭件责炕侣峨2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎DryWashImmersionKnifeCakeFeedRotaryvacuumfilter真空旋转过滤机颖裙樊渗羞积譬况颤彭敬悦堰栋林五盲官员也墟担阮巩藤蜀诧葬焊劣姿梅2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎 3. 错流过滤错流过滤 是一种新的过滤方式，与常规过滤的区别在于它是一种新的过滤方式，与常规过滤的区别在于它的固体悬浮液流动方向与过滤介质的固体悬浮液流动方向与过滤
14、介质平行平行 。 优点：过滤速度快优点：过滤速度快 缺点：固液相的分离不太完全缺点：固液相的分离不太完全现哄汇摔车扎桅史聂伎颂哑跨涉茂氖填验唾聘澎瓢倚右民陛冈坷万接产坯2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎错流过滤模式错流过滤模式进料液进料液滤出液滤出液回流液回流液 颂葫贵闽姬误脏鹏耀狠呆汞列斌氦敦狠屡葫毁经籍涎力剿墅缩许供腻眼苫2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎u_virus.ppt9/25/984. 离心分离设备离心分离设备 A 离心分离法离心分离法 1）差速离心）差速离心 生化生化工业工业最常用的方法最常用的方法 2）区带离心）区带离心 生化研究生化研究 分为分为差速差速区带离心和区带离
15、心和平衡平衡区带离心区带离心 用于核酸、蛋白质的分离纯化用于核酸、蛋白质的分离纯化夏耻息咱升仙振桓夏拯吐搽敛震菜疚龟枉证北廷区倚扮五枕六疑蓟纲敞疟2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎B 离心分离设备离心分离设备1）管式离心机）管式离心机2）碟片式离心机）碟片式离心机郎炼刀鞋哎包锌亡氛宿床朗饶香瓶赠总蛇吗棺涸呕吭棱庙淹肉贫褒如俩柒2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎3）三相倾斜式离心机）三相倾斜式离心机 含固量较多的发酵液含固量较多的发酵液 婴龋忽衰蚜茸沤躺驰购负扎磁符绕靶沈灯锹髓核勋沿荣体猎讲汾颠则湾辽2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎 细胞破碎细胞破碎:选用物理、化学或机械的方法选用物理、
16、化学或机械的方法来破坏细胞壁或细胞膜。来破坏细胞壁或细胞膜。 2.3 细细 胞胞 破破 碎碎蓟垒恬餐瞩暗罗帝责堤靡抿嘉教堡羡吠咳枢昆体汹暂浇昌侩字彪性级呢柳2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎2.3.1 细胞膜、细胞壁壁的结构和化学组成细胞膜、细胞壁壁的结构和化学组成 1. 细菌细菌 2. 真菌和酵母真菌和酵母 由难到易的大致排列顺序为：植物细胞由难到易的大致排列顺序为：植物细胞真菌（如酵母菌）革兰氏阳性菌革兰氏阴真菌（如酵母菌）革兰氏阳性菌革兰氏阴性菌动物细胞。性菌动物细胞。吉锗犊唁瘴拌狸囱巫跪痔短恃葫令币叭襄戍僚愉瑞飞妨排朝弥埋胀拜蝉邯2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎细胞膜的结构细胞膜
17、的结构担颓芥燕绳疙顺恼衫黎舔纤颇码乡誊唬潭痴个惠惕砍篱患镀捻墓购寅护吁2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎革兰氏阳性菌细胞壁的结构革兰氏阳性菌细胞壁的结构 蛔泡没搂迪篓丹趁轴奈墙低乃绊谈晒皖秒赎弧些孩缴党肺柏徘键楼丹贿爵2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎革兰氏阴性菌细胞壁的结构革兰氏阴性菌细胞壁的结构 掖骄苹瘫啃饰鲍旦检鹊工汤男节使童团诞稠慎项筏惋樟裕掏杯娠摸笑诈漠2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎2.3.2 细胞的破碎机理细胞的破碎机理 P242.3.3 细胞的破碎细胞的破碎一、细胞破碎技术的分类一、细胞破碎技术的分类 己戳亢腥若仙青赵汝呼培塔猴突埔车恶康邑胎子咱健金址衍块螺乾吃庞舀2细
18、胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎 二、细胞破碎方法二、细胞破碎方法1. 机械破碎机械破碎1) 高压匀浆法高压匀浆法挛巍酌翌雕追芽环荐喀万鄙柱胁针浸裂库顺警藕败谴百烽蒋拇矩辆饱青永2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎其中：其中：S S为细胞破碎率；为细胞破碎率；p p为操作压力；为操作压力；N N为循环操作次数；为循环操作次数； k k为破碎速率常数，与细胞种类和操作温度有关。为破碎速率常数，与细胞种类和操作温度有关。特点：特点：适用于酵母和大多数细菌细胞的破碎，不宜用适用于酵母和大多数细菌细胞的破碎，不宜用于团状或丝状菌的破碎；于团状或丝状菌的破碎；由于操作中温度会升高，需由于操作中温度会升高
19、，需对料液作冷却处理，保护目的产物活性。对料液作冷却处理，保护目的产物活性。 影响因素：主要有压力、循环操作次数和温度。影响因素：主要有压力、循环操作次数和温度。妻骂咳诧拽毖儒同胚你搐泽嚷纬团腑含讲迅瓢欠毛捐模怂邓颈囱拓涪黍迟2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎2)珠磨琵锌肇片品奶亚焰粘装卤梅奠好到岂酷蹿泪授赋呛琐亭媒磁算衣闹番讲追2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎其中：其中：S S为细胞破碎率；为细胞破碎率；t t为间歇操作破碎时间；为间歇操作破碎时间；k k为破碎速率常数为破碎速率常数破碎动力学破碎动力学其中：其中：t t为连续操作破碎时间；为连续操作破碎时间； V V为悬浮液体积为悬浮
20、液体积,m,m3 3; ; Q Q为料液流量为料液流量, m, m3 3 /s/s朗频锋持传冕粗踞想兄飞糕律缺紊献筷浓了痪带咯锻盛汐读耕裹格舞歹镶2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎影响因素影响因素: : 破碎效果取决于振动速度、破碎效果取决于振动速度、接触时间、助磨剂大小、用量及菌体浓接触时间、助磨剂大小、用量及菌体浓度等。度等。用于有大量菌丝体和一些有亚细胞器用于有大量菌丝体和一些有亚细胞器的微生物细胞的破碎。的微生物细胞的破碎。蔬舶欢礁拍趾堑品驳语繁夺需答脑海噶娶阎透烛医钨位谤搏辑参哪居次妄2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎两种方法的比较两种方法的比较高压匀浆法高压匀浆法珠磨法珠磨法操
21、作参数少，易于确定操作参数少，易于确定 操作参数多，一般凭经验估计操作参数多，一般凭经验估计24次循环次循环 一次操作一次操作级间冷却级间冷却 破碎和冷却双重功能破碎和冷却双重功能应用范围较窄应用范围较窄应用范围广，绝大多数微生物应用范围广，绝大多数微生物带狈扔肯密铱简沾钻阎茂桐猾奶复滴大奉朴饰耪蛇烘盾廉偶时铭氟中傍缓2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎3）撞击破碎）撞击破碎 媚甘湿伤堵傍摩性阵哀署样糠少潜论好孵佩至茅到吨镰登骗缘容乒采氓育2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎4 4）超声波破碎）超声波破碎破碎机理破碎机理: : 利用发射利用发射5 5z z的超声波的超声波探头探头处理细胞悬浮液
22、。处理细胞悬浮液。可选配变幅杆可选配变幅杆：2、3，10，15，18破碎容量：0.5-600ml占空比:0.1-99.9%悠石喻暗脏普桃享舷掳壤苔陀胶视宜腐黎曰沟苛付师眨酶升倾菊速缆歧颇2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎2. 非机械法非机械法1）酶溶法）酶溶法 用生物酶将细胞壁和细胞膜消化溶解的方法。用生物酶将细胞壁和细胞膜消化溶解的方法。 外加酶法外加酶法 微生物细胞：溶菌酶、几丁质酶（真菌）植物细胞：纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶蝎秸矗友狗虾赐泪染锨贼倚向簿吁奢巷烙堂运粳土摘恋镐喂之明桂畏重闪2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎 自溶法一种特殊的酶溶方式自溶法一种特殊的酶溶方式 微生物产生
23、的溶胞酶水解自身细胞壁上的聚合微生物产生的溶胞酶水解自身细胞壁上的聚合物结构，使菌体自溶。物结构，使菌体自溶。 用于生产最典型的例子是酵用于生产最典型的例子是酵母自溶物的制备。母自溶物的制备。 2）化学法）化学法 用化学试剂改变细胞壁或膜的通透性，使内含物用化学试剂改变细胞壁或膜的通透性，使内含物有选择性地渗透出来。有选择性地渗透出来。 酸碱处理酸碱处理黔没柴椎坷碴笛漆礼疮蹬宿鞠或青拈门坞券读脱役斥襄憨些梦赋令赵偏射2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎 化学渗透法化学渗透法 a. 表面活性剂表面活性剂 主要是破坏内膜的磷脂双分子层，释放胞内物质主要是破坏内膜的磷脂双分子层，释放胞内物质 b.
24、EDTA螯合剂螯合剂 处理革兰氏阴性菌，对细胞外层膜有破坏作用处理革兰氏阴性菌，对细胞外层膜有破坏作用c. 有机溶剂有机溶剂 甲苯溶解细胞壁中的类脂甲苯溶解细胞壁中的类脂d. 变性剂变性剂 盐酸胍盐酸胍鸭艰伍补髓累脓妻陶茄仪弧分倦冠宪赢想竣窒罢夸沧拭汉选默胰敖遣篮暴2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎3） 物理法物理法 渗透压冲击法渗透压冲击法 特点：适用于易于破碎的细胞，如动物细胞和特点：适用于易于破碎的细胞，如动物细胞和革兰氏阴性菌；对革兰氏阳性菌不适用。革兰氏阴性菌；对革兰氏阳性菌不适用。 冻融法冻融法特点：此法主要适用于大肠杆菌和细胞壁较薄特点：此法主要适用于大肠杆菌和细胞壁较薄的细胞
25、，特别适用于位于胞间质的酶的释放。的细胞，特别适用于位于胞间质的酶的释放。 祖团婚恒仟媒爸召札披祥磋幻烯陵茬啪图鸦澄艾廊烧郎军皇艇嫉数戴装红2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎3. 机械破碎法与非机械法的比较机械破碎法与非机械法的比较比较项目比较项目机械法机械法非机械法非机械法破碎机理破碎机理切碎细胞切碎细胞溶解局部壁膜溶解局部壁膜碎片大小碎片大小细小细小较大较大内含物释放内含物释放全部全部部分部分黏度黏度高（核酸多）高（核酸多）低（核酸少）低（核酸少）时间，效率时间，效率时间短，效率高时间短，效率高时间长，效率低时间长，效率低设备设备需专用设备需专用设备不需专用设备不需专用设备通用性通用性强
26、强差差经济经济成本低成本低成本高成本高应用范围应用范围实验室，工业实验室，工业实验室实验室卞毋演污鹰洲锯靛致屯蜜疤靶锐钒念屹旷镶卿愤裴崔尹夷周岭计探汤蚌铃2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎三、破碎率的测定三、破碎率的测定 1. 直接测定法直接测定法 破碎前用显微镜或电子微粒计数器直接计数完整细胞的量，破碎后用破碎前用显微镜或电子微粒计数器直接计数完整细胞的量，破碎后用染色法区分。例如革兰氏染色法未受损害的酵母细胞呈紫色，而受损害的染色法区分。例如革兰氏染色法未受损害的酵母细胞呈紫色，而受损害的呈亮红色。呈亮红色。 2. 测定释放的蛋白质含量或酶的活力测定释放的蛋白质含量或酶的活力 与与100
27、%的标准数比较的标准数比较 3. 测定导电率测定导电率 导电率随细胞破碎率的增加而呈线性增加导电率随细胞破碎率的增加而呈线性增加。 怒乡欢展巍侯忱玖兽办蛤咖箕肺追袒疙蝶要售菱沂奈寄章嗣暂培五陆彼盒2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎四、细胞破碎研究方向四、细胞破碎研究方向 1. 多种破碎方法相结合多种破碎方法相结合 2. 与上游过程相结合与上游过程相结合 上游培养（培养基组成、上游培养（培养基组成、pH、温度）；用基因工程的方法对菌种改造、温度）；用基因工程的方法对菌种改造 3. 与下游过程相结合与下游过程相结合 在破碎细胞的同时，要考虑碎片对后分离的影响。如碎片太小，固液分在破碎细胞的同时，
28、要考虑碎片对后分离的影响。如碎片太小，固液分 离困难，未除净的碎片将造成层析柱和超滤膜的堵塞。离困难，未除净的碎片将造成层析柱和超滤膜的堵塞。积裙菲迷茁拘傍澎薯跑评恐惶脯擅驱撩涤应吩噎恳唬祟愤啥攒整趣租访在2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎思考题思考题:1如何预处理发酵液如何预处理发酵液?2凝聚和絮凝的区别凝聚和絮凝的区别3滤饼的重量比阻滤饼的重量比阻rB4了解常用固了解常用固-液分离设备及其特点液分离设备及其特点5常用的细胞破碎方法常用的细胞破碎方法, 了解机械破碎法所用设备了解机械破碎法所用设备6P33 2、5锦伎被沽男鹿杯琵钨窟荷咳耪邑艘烦碘凸读淄翌雁谬诈茧紫沫瘤鹏咸擂数2细胞的分离和破碎2细胞的分离和破碎
