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1、血细胞镜检规则的制定和应用血细胞镜检规则的制定和应用 北京和睦家医院北京和睦家医院 孙芾孙芾 制定规则的目的保证血细胞检查结果准确性提供正确的细胞形态学信息提高工作效率为临床诊断提供依据为临床治疗方案提供依据血细胞显微镜检查的重要性目前普遍采用自动血细胞分析仪进行白细胞、红细胞和血小板分析，仪器不仅提供细胞的常规计数和计算结果，同时还可得到白细胞三项或五项分类结果，大大提高了工作效率。由于人体细胞的多样性和复杂性，仪器仅依靠分析细胞体积、电导性、光闪射等物理特性很难提供准确的分类结果。因此血细胞显微镜检查仍然是必不可少的分析手段。影响细胞计数准确性的因素电阻抗细胞计数原理白细胞分类计数计算方法
2、示意图有核红细胞或疟原虫干扰血小板聚集干扰不完全溶解的红细胞干扰血小板聚集影响分类准确性的因素影响分类准确性的因素Injector TipVCS Focused laserFocused laserbeambeamSheath fluidPurdue University Cytometry Laboratories血细胞显微镜检查标准制定方法根据自己实验室所用的血细胞计数仪测定出的结果制定出显微镜检查的标准，以保证每个结果的准确性。制定规则需考虑的因素和指标1有无白细胞自动分类结果无结果必须进行显微镜检查且要给出白细胞形态和分类计数结果2白细胞总数上限和下限WBC25.0x109/L制定规则
3、需考虑的因素和指标3白细胞自动分类各种白细胞百分比的上限与下限五分类：Mono15%,Eos15%,Baso3%,Lym60%(成人）或Lym80（儿童），Neu85%三分类：Mono10%,Lym60%(成人）或Lym80（儿童），Neu85%4.仪器分析结果是否有如下提示：大血小板、血小板聚集、小红细胞/红细胞碎片、有核红细胞、异形淋巴、未成熟粒细胞/杆状核粒细胞和幼稚细胞等。计数结果后有星号提示（查看是否有有核红细胞）血小板后有星号提示（查看是否有凝块）制定规则需考虑的因素和指标5血红蛋白、MCV、RDWHb70g/L，MCV或RDW严重异常6.血小板数量减少PLT5.0x109/L制定
4、规则需考虑的因素和指标8同一病人上一次分类计数的时间24小时内不必再次计数8医生申请或特殊病人群体（新生儿）9各种病人的特点化疗放疗孕妇Atypical Lymphocyte血细胞显微镜检查包括：白细胞分析和分类计数包括：分类计数的白细胞数量、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸细胞、嗜碱细胞、分叶核粒细胞、杆状核粒细胞、晚幼粒细胞、中幼粒细胞、早幼粒细胞、原幼细胞、异形淋巴细胞、中毒颗粒和空泡变性等。红细胞形态大红细胞、有核红细胞、靶形红细胞、椭圆形红细胞、小红细胞、镰状红细胞、球形红细胞、裂红细胞、泪滴形红细胞、低色素、高色素、红细胞大小不等、嗜碱性点彩、多色素、豪-周氏小体、异形红细胞等。血小板形态
5、和数量估计小血小板、大血小板、血小板聚集、血小板数量评估等其它异常：寄生虫等。显微镜复检方法和注意事项：1良好的涂片和染色2合适的读片位置：红细胞相接排列但很少重叠3红细胞形态分析油镜读片位置 红细胞形态显微镜复检方法和注意事项：4白细胞分析白细胞分析白细胞数量评估WBC4.0-7.0x109/L:2-4白细胞/hpf(x40)WBC7.0-10.0x109/L:4-6白细胞/hpf(x40)WBC10.0-13.0x109/L:6-10白细胞/hpf(x40)WBC13.0-18.0x109/L:10-12白细胞/hpf(x40)分类计数的白细胞数量WBC1.0x109/L-30.0x109
6、/L:计数100个白细胞WBC30.0x109/L:计数200个白细胞WBC0.5x109/L-1.0x109/L:每1.0x109/L计数10白细胞WBC0.5x109/L:不进行显微镜计数显微镜检查方法和注意事项：5血小板形态分析和数量判断，有无凝聚1个血小板/油镜读片视野10x109/L如果数量判断结果与仪器计数结果差距较大，需复检仪器结果或进行血小板人工显微镜计数血小板计数减低，显微镜见聚集存在时，需要重新采集标本测定。标本持续凝集，要用枸橼酸钠抗凝重新测定。6疑难血片和特殊病例应请上级主管复查大血小板血细胞显微镜检查报告方式白细胞形态分析和分类计数形态和白细胞总数正常不报告分类计数结
7、果，注明白细胞正常形态或白细胞总数异常报告分类计数结果及形态红细胞形态未见异常异常时注明何种异常如小细胞、低色素、大细胞、疟原虫等血小板形态和数量有无血小板聚集大或小血小板增多估计数量与实际数量相差较多时，报手工计数结果量体裁衣根据自己医院的特点制定了血细胞显微镜检查的规则，并应得到临床医生的认可。各医院检验科需根据自己的实际情况来制定自己的标准草案，与临床有关人员讨论后做出决定。复检规则应用效果评价和睦家医院对MAXM检测的9992份结果进行了统计分析：仪器结果正常不需复检：7062份，阴性率70.7%复检标本2930份，占29.3%其中镜检异常942份，占32.2%总体真阳性率9.4%总体
8、假阳性率19.9%复检原因分析复检原因数量比率_仪器白细胞分类计数异常144449其它异常提示52718医生要求分类计数46216新生儿标本2899.9血小板减低923.1白细胞计数异常722.5血红蛋白异常240.8无仪器分类计数结果200.7论文已发表:中华检验医学杂志2005，第二期155页国际联合小组提出的复检规则成员来自6个国家的17个实验室，仪器包括BeckmanCoulter,Sysmex,Bayer,Advia,Abbott生产的多种型号血细胞分析仪论文已发表：TheinternationalConsensusGroupforHematologyReview:Suggested
9、CriteriaforActionFollowingAutomatedCBCandWBCDifferentialAnalysis.LaboratoryHematology,2005,11:83-90规则有41条，在15个实验室进行了评估国际联合小组复检筛查规则简介指标处理方法（基于初次或随诊检测）_新生儿浏览血片WBC:30.0浏览血片PLT:100或1000浏览血片HGB:200g/L浏览血片，注意细胞形态MCV:105fl浏览血片，注意细胞形态MCHC:38浏览血片，注意细胞形态RDW:22浏览血片，注意细胞形态无白细胞分类结果浏览血片，手工分类中性粒细胞值：20.0浏览血片淋病细胞值：5.0（成人）浏览血片单核细胞值：1.5（成人）浏览血片嗜酸细胞值：2.0浏览血片嗜碱细胞值：0.5浏览血片异常提示浏览血片,注意提示内容评价结果共检测13298份病人标本真阳性率11.2%假阳性率18.6%真阴性率67.3%假阴性率2.9%各实验室评价结果接近讨论和建议临床实验室忽视显微镜复检，将仪器结果直接发出，造成漏检。检验科必须根据自己医院和所用仪器的特点制定出血细胞复检规则。向临床医生宣传该规则，加强配合，提高工作效率利用实验室信息系统、血细胞分析仪提示功能，保证复检规则正确应用。谢谢大家
