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1、KTApurifierKTApurifier 层析仪使用操作规程层析仪使用操作规程1 1、 开机开机打开仪器的主电源,打开电脑电源。待仪器自检完毕(CU950 上面的 3 个指示灯完全点亮并不闪烁)。双击桌面上 UNICORN 图标,进入操作界面。2 2、 准备工作溶液和样品准备工作溶液和样品所有的工作溶液和样品必须经过 0.45m 的滤膜过滤,样品也可高速离心后取上清备用。当缓冲液中含有有机溶剂(如乙腈、甲醇),需在使用前用低频超声脱气 10min。3 3、 清洗及管道准备清洗及管道准备首先将 A1 管道放入缓冲液或平衡液,binding buffer 中,将 B1 管道放入高盐溶液中或 e
2、lution buffer,在 system control 窗口点击工具栏内的 manual,选择 pumppump wash basic,选中 A1,B1 管道为 ON, execute。泵清洗将自动结束。4 4、 安装层析柱安装层析柱在 manual 里选择 pumpflow rate,输入流速 1ml/ml,insert;选择 Alarm&monalarm pressure,设置 high alarm(输入填料的耐受压力,可在填料说明书中查到),insert,execute。待 InjectionValve 的 1 号位管道流出水后接入柱子的柱头,稍微拧紧后将柱下端的堵头卸掉接入管道连
3、上紫外流动池。5 5、 开始纯化:开始纯化:1)等待柱子平衡好了(观察电导 COND,pH 的数值和变化趋势)就准备上样了。此时将紫外调零,选择 Alarm&monautozero,exectue。2)用样品环上:将样品吸进注射器,推掉气泡,从 injectionValve 的 3 号位推入(进样量不得低于样品环的体积的 2 倍)推好后不要取下注射器。在 manual 里选择flowpathinjectionValveinject,execute。3)用泵上样:点击 pause,将 A1 放入样品中,点击 countine,待样品上完后,再将 A1 放入到平衡液中继续清洗柱子。2),3)选择一
4、种方式4)洗脱:上样后用缓冲液尽量将穿透峰洗回基线。在 manual 里选择 pumpgradient,按照自己的工艺选择 targetB(100)和 length(10CV)。5)设定收集:选择 Fracfractionation_900,输入每管收集体积,exectue。结束固定体积收集选择 Fracfractionation_stop_900,exectue。6 6、 清洗泵及卸下层析柱清洗泵及卸下层析柱:将 A1 和 B1 入口放入纯水中,启动 pump wash purifier 功能冲洗 A 泵和 B 泵及整个管路。然后再将 A1 和 B1 入口放入 20乙醇中,同样操作将乙醇冲满整个管路保存。系统给柱子一个慢流速,设置系统保护压力,然后先拆柱子的下端,正在滴水的时候将堵头拧上,再拆柱子的上端,最后拧上上端的堵头。整个过程防止气泡进入。7 7、关闭电源:关闭电源:从软件控制系统的第一个窗口 unicorn manager 点击退出,其他窗口不能单独关闭。然后关闭 AKTA 主机电源,关闭电脑电源。