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2、周周质粒粒DNADNA的的转化化第第1212周周目的基因的目的基因的PCRPCR扩增与增与检测第第1313周周原核蛋白原核蛋白质SDS-PAGESDS-PAGE电泳泳第第1414周周考考试 1、55 *30s90s*7min45s1. 取一个0.2ml eppendorf管，添加以下各种成分反应液 ddH2O 12.1 l 模板模板DNA 0.5 l（20-40ng）原质粒进行）原质粒进行1：20倍稀释倍稀释 上游引物上游引物(100mol/L) 0.3l 下游引物下游引物(100mol/L) 0.3 l dNTP mixture(10mmol/L) 2 l 10倍倍缓冲液缓冲液 2.5l Taq酶酶 0.4l 总体积总体积 20 l 2. 稍作离心，将反应管放入PCR仪中。 2、反应体系: (CYP6B6)3. 设定反应程序： 94条件下使模板DNA预变性5min。 变性 94 30s 退火 55 45s 30 cycles 延伸 72 90s 最后在72条件进行延伸7min。 4 保温4. 取8 l反应液用0.7%琼脂糖凝胶进行电泳，鉴定PCR产物是否存在以及大小。
