分子荧光分析课件

《分子荧光分析课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《分子荧光分析课件（19页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、第四章 分子荧光分析分子荧光分析PPT课件第一节 基本原理分子荧光分析PPT课件1、激发光谱曲线和荧光光谱曲线 固定测量波长为荧光最大发射波长，然后改变激发波长，根据所测得的荧光（磷光）强度与激发光波长的关系，即得激发光谱曲线 固定激发光波长为其最大激发波长，然后测定不同的波长时所发射的荧光或磷光强度，即得荧光或磷光光谱曲线分子荧光分析PPT课件1）荧光发射光谱的形状与激发波长无关2） Stokes位移2、荧光发射光谱的特性3）镜像规则 分子荧光分析PPT课件3、 荧光效率与荧光分子结构的关系荧光效率荧光效率 (荧光量子产率荧光量子产率)F F越大越大，化合物的荧光越强化合物的荧光越强。有有分

2、分析析应应用用价价值值的的荧荧光光化化合合物物, 其其荧荧光光量量子子产产率率通通常常在在 0.11 之间之间F F = =发射的光子数发射的光子数吸收的光子数吸收的光子数kfkf + + k 1 1 kf ：辐射跃迁的速率常数：辐射跃迁的速率常数 k：各种非辐射跃迁过程的速率常数之和：各种非辐射跃迁过程的速率常数之和= =分子荧光分析PPT课件从分子结构来说,绝大多数能发荧光的物质为含有低能的* 跃迁能级的芳香环或杂环化合物1)共轭效应电子的共轭程度越大，就越容易被激发,分子的荧光效率越大,而且其最大荧光波长也会相应地“红移”向长波长方向移动分子荧光分析PPT课件2)刚性结构和共平面效应分子

3、荧光分析PPT课件给电子取代基给电子取代基, 产生产生n-共轭效应共轭效应, 加强荧光。加强荧光。3)取代基的影响a.吸电子取代基吸电子取代基, ,会使荧光减弱会使荧光减弱, ,如硝基苯无荧光。如硝基苯无荧光。分子荧光分析PPT课件4)化学环境对荧光的影响温度：温度：温度越低，温度越低，F F越大越大分子荧光分析PPT课件5)5)溶剂溶剂分子荧光分析PPT课件6) pH值的影响值的影响 分子荧光分析PPT课件4、荧光的猝灭荧光物质的分子与溶剂分子或其它溶质分子相互作用，引起其荧光强度降低，消失或荧光强度与浓度不呈线性关系的现象原因：原因：猝灭剂分子与荧光物质发生化学反应猝灭剂分子与荧光物质发生

4、化学反应 溶解氧的存在溶解氧的存在 : 氧化荧光物质氧化荧光物质自猝灭自猝灭 : 高浓度时发生高浓度时发生(自碰撞失活自碰撞失活)分子荧光分析PPT课件第二节 荧光分光光度计分子荧光分析PPT课件第三节 分子荧光分析法的应用分子荧光分析PPT课件分子荧光分析PPT课件Zhao, et al. JACS, 2003, 125,11474 Fluorescence基于硅纳米球的DNA分析技术分子荧光分析PPT课件loopstem“分子信标分子信标”的检测原理的检测原理分子荧光分析PPT课件应用：实时定量荧光PCR探针与DNA杂交时产生荧光 -变性过程：产生非特异性荧光 -退火过程：产生特异性荧光，检测荧光信号 -延伸过程：不产生荧光分子荧光分析PPT课件新型纳米荧光材料量子点( quantum dots, QDs ) Goldman, et. al. Anal. Chem. 2004, 76, 684-688. 分子荧光分析PPT课件