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1、动物细胞培养动物细胞培养问题讨论烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植,但对于大面积烧伤病人来讲,健康皮肤很有限,请同学们想一想如何来治疗该病人?取该患者的皮肤进行细胞培养取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植获得足量的细胞后再移植动物细胞培养请同学们阅读课本后,简述动物细胞培养的基本过程?思考题1、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗?、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗?、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的吗?、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的吗?、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢?、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢?、
2、如何将动物组织分散成单个的细胞呢?、如何将动物组织分散成单个的细胞呢?、胰蛋白酶的作用是什么呢?由此可说明细胞间的物质、胰蛋白酶的作用是什么呢?由此可说明细胞间的物质是什么成份?是什么成份?没有没有是是成块的组织细胞靠在一起成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖彼此限制了细胞的生长和增殖先用剪刀剪碎先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理后用蛋白酶处理胰蛋白酶水解蛋白质胰蛋白酶水解蛋白质 细胞间的成份是蛋白质细胞间的成份是蛋白质思考题、细胞膜的主要成份是什么?、细胞膜的主要成份是什么?、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗?、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗?、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉,那将动物组织分散、既然胰
3、蛋白酶能将细胞消化掉,那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢?成单个细胞要注意什么问题呢?、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗?为什么?、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗?为什么?、动物细胞培养取材时,一般是取胚胎组织或幼、动物细胞培养取材时,一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官,请解释原因?龄动物的组织或器官,请解释原因?蛋白质和磷脂蛋白质和磷脂能能注意时间的控制注意时间的控制不能,因为两的最适不能,因为两的最适PH不同,而正常组织细胞的生存环不同,而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适境与胰蛋白酶的最适PH较接近较接近胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛胚胎组织或幼龄动物的组织或器官
4、分裂、增殖旺盛思考题11、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒?、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒?12、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖?、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖?13、如此时细胞数量并未达到人们的需求,应该怎样办?、如此时细胞数量并未达到人们的需求,应该怎样办?易于培养细胞贴壁,进行生长增殖易于培养细胞贴壁,进行生长增殖当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞分裂当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞分裂就会停止分裂增殖,这种现象叫接触抑制。就会停止分裂增殖,这种现象叫接触抑制。将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理,然后继续增殖。将贴满细胞壁的细胞用胰蛋
5、白酶处理,然后继续增殖。这样的过程叫做传代培养这样的过程叫做传代培养思考题14、如何理解原代培养和传代培养?、如何理解原代培养和传代培养?15、传代培养的细胞能一直传代下去吗?、传代培养的细胞能一直传代下去吗?16、有些为何能一直传下去吗?、有些为何能一直传下去吗?17、动物细胞培养就是为了得到这些细胞吗?、动物细胞培养就是为了得到这些细胞吗?18、人类一般保存的是哪类细胞呢?为什么?、人类一般保存的是哪类细胞呢?为什么?上述过程中,在第一培养瓶中培养就是原代培养,上述过程中,在第一培养瓶中培养就是原代培养,之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养不都能不都
6、能发生突变,朝着癌细胞方向发展发生突变,朝着癌细胞方向发展不是不是保存保存10代以内的细胞,因为代以内的细胞,因为1050部分细胞的细胞核型部分细胞的细胞核型可能发生变化,有少部分还发生突变向癌细胞方向发展可能发生变化,有少部分还发生突变向癌细胞方向发展动物动物胚胎胚胎或或幼龄幼龄动动物的组织、器官物的组织、器官胰蛋白酶胰蛋白酶剪碎剪碎单个细胞单个细胞加培养液加培养液制成制成细胞细胞悬浮悬浮液液原代培原代培养养细胞增殖细胞增殖部分细胞部分细胞无限传代无限传代去掉组织去掉组织间蛋白间蛋白动物细胞培养不能动物细胞培养不能最终培养成生物体最终培养成生物体传代培传代培养养请总结出动物细胞培养的定义动物
7、细胞培养就是从动物机体内取出动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织,将它分散成单个细胞,相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。细胞生长和增殖。思考题多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中,根据你所学的知识,认为体培养细胞应该模拟内环境的哪些内容呢?无菌、无毒无菌、无毒全部的营养物质全部的营养物质适宜的温度和适宜的温度和PH值值必要的气体条件必要的气体条件动物细胞培养条件:动物细胞培养条件:1、无菌、无毒的环境、无菌、无毒的环境 (添加一定量的抗生素,定期更换培养液)(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)2、营养、营养
8、(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。)3、温度和、温度和PH 36.5+(-)0.5度, 7.2-7.44、气体环境:、气体环境: O2和和CO2(95%空气和空气和5% CO2 )保证细胞顺利的保证细胞顺利的生长增殖生长增殖获得细胞获得细胞细胞的全能性细胞的全能性植物体植物体培养结果培养结果或细胞产物或细胞产物快速繁殖快速繁殖、培育培育无病毒植株等无病毒植株等培养目的培养目的葡萄糖、葡萄糖、动物动物血清血清蔗糖、植物蔗糖、植物激激素素培养基特有成分培养基特有成分液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基培养基性质培养基性质细胞增殖细胞增殖原理原理动物细胞培养动物细胞培养植物组织培养植物组织培养比较项目比较项目植物细胞和动物细胞培养的比较植物细胞和动物细胞培养的比较细胞群体细胞群体请举出动物细胞培养应用的实例同学们来学校和回家的路上要注意安全同学们来学校和回家的路上要注意安全