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1、 动物组织学与胚胎学2第一章第一章 动物组织学绪论动物组织学绪论 一、动物组织学的定义及其研究内容一、动物组织学的定义及其研究内容二、组织学发展简史二、组织学发展简史三、组织学研究方法三、组织学研究方法四、组织学的地位及学习方法四、组织学的地位及学习方法五、教学内容五、教学内容3一一 、动物组织学、动物组织学(Animal Animal histologyhistology)的定义及的定义及 其研究内容其研究内容1 1、动物组织学定义、动物组织学定义 研究正常动物体研究正常动物体微细结构微细结构及其相关功能的一门科学。及其相关功能的一门科学。 光镜结构光镜结构 (显微结构)(显微结构) 微细结
2、构微细结构 (Light microscopyLight microscopy,LMLM) microstructure microstructure 电镜结构电镜结构 (超微结构)(超微结构) (Electron microscopyElectron microscopy,EMEM) 42 2、研究、研究内容内容 细胞细胞 Cell 组成有机体的结构和功能的基本单位组成有机体的结构和功能的基本单位 组织组织 Tissue构成:构成: 细胞细胞 和和细胞间质细胞间质 cytoplasmcytoplasm分类:分类: 四种基本组织(四种基本组织(primary tissueprimary tis
3、sue) 上皮组织上皮组织 Epithelial tissueEpithelial tissue 结缔组织结缔组织 connective tissueconnective tissue 肌组织肌组织 muscle tissuemuscle tissue 神经组织神经组织 nervous tissuenervous tissue器官器官 Organ系统系统 System5 二、组织学发展简史二、组织学发展简史6(一)、(一)、“细胞细胞”的发现的发现 (1665)(1665) (Robert Hooke 16351703 )7(二(二)、)、细胞学说的提出细胞学说的提出1919世纪世纪3030年
4、代,德国植物学家施莱登与动物学家年代,德国植物学家施莱登与动物学家施旺共同提出了施旺共同提出了“一切动植物都是由细胞组成的,细一切动植物都是由细胞组成的,细胞是一切动植物的基本单位胞是一切动植物的基本单位”的细胞学说的细胞学说 (三)、组织学创立初期(框架)(三)、组织学创立初期(框架)发展与光学技术、切片技术和染料化学工业的进步有发展与光学技术、切片技术和染料化学工业的进步有密切关系密切关系8(四)(四) 、现代组织学发展(逐渐完善)、现代组织学发展(逐渐完善) 20世纪40年代,电子显微镜电子显微镜问世,经过不断的改进,如今可将标本放大几十万倍到上百万倍。近30年来,新的技术和方法新的技术
5、和方法不断涌现并应用于组织学(如组织培养术、细胞融合术、免疫组织化学和免疫细胞化学术、放射自显影术、荧光和激光术、原位杂交术、图像分析和立体计量术等)。这些技术的运用,使研究内容不断充实,研究领域不断扩大,因而出现了各学科间基本理论互相渗透,基本技术互相引用、促进,关系日益密切。9 三、组织学的研究方法三、组织学的研究方法(一)(一) 一般光学显微镜术技术一般光学显微镜术技术(二)(二) 电子显微镜术电子显微镜术(三)(三)其它方法与技术其它方法与技术( (自学自学) ) : :如组织化学和细胞化学如组织化学和细胞化学10(一)一般光学显微镜技术(light microscope, LM)分辨
6、率:区别两点的最短距离。人眼 0.2 mm 光镜 0.2 m1mm = 1000 m 1m = 1000 nm11 切片切片section: 石蜡切片石蜡切片 paraffin sectionparaffin section 冰冻切片冰冻切片 frozen sectionfrozen section 涂片涂片smear: 血液血液bloodblood 分泌物分泌物 铺片铺片strecthed preparationstrecthed preparation: 疏松结缔组织(疏松结缔组织(LCTLCT) 肠系膜、胸膜、腹膜肠系膜、胸膜、腹膜 磨片磨片ground sectionground se
7、ction: 骨、牙骨、牙 12取材-固定-石蜡包埋(脱水-透明-浸蜡-包埋)-切片-染色-封片石蜡切片制作流程图13HE染色染色:苏木精(:苏木精(HematoxylinHematoxylin)伊红()伊红(EosinEosin)染色)染色碱性染料碱性染料将酸性物质染成蓝色将酸性物质染成蓝色酸性染料酸性染料将碱性物质染成红色将碱性物质染成红色细胞核中的染色质细胞核中的染色质细胞质中的核糖体细胞质中的核糖体 多数细胞的细胞质多数细胞的细胞质染染 色色 (stainingstaining)14 嗜碱性嗜碱性嗜碱性嗜碱性(basophilia):(basophilia):(basophilia):
8、(basophilia): 易被碱性染料着色的性质易被碱性染料着色的性质易被碱性染料着色的性质易被碱性染料着色的性质. . . . 细胞核内的染色质与细胞质内的核糖体呈嗜碱性细胞核内的染色质与细胞质内的核糖体呈嗜碱性细胞核内的染色质与细胞质内的核糖体呈嗜碱性细胞核内的染色质与细胞质内的核糖体呈嗜碱性( ( ( (LM:LM:LM:LM:蓝紫蓝紫蓝紫蓝紫 色色色色) ) ) ) 嗜酸性嗜酸性嗜酸性嗜酸性(acidophilia):(acidophilia):(acidophilia):(acidophilia): 易被酸性染料着色的性质易被酸性染料着色的性质易被酸性染料着色的性质易被酸性染料着色
9、的性质. . . . 多数细胞的细胞质呈嗜酸性多数细胞的细胞质呈嗜酸性多数细胞的细胞质呈嗜酸性多数细胞的细胞质呈嗜酸性( LM:( LM:( LM:( LM:粉红色粉红色粉红色粉红色 ) ) ) ) 中中中中 性性性性(netrophilia):(netrophilia):(netrophilia):(netrophilia): 与酸性和碱性染料的亲和力都不强与酸性和碱性染料的亲和力都不强与酸性和碱性染料的亲和力都不强与酸性和碱性染料的亲和力都不强 15H.E 染色16甲苯胺蓝甲苯胺蓝 肥大细胞中颗粒肥大细胞中颗粒 异染性异染性 metachromasia: 苏丹法苏丹法 脂肪脂肪 氯化金法氯
10、化金法 运动终板运动终板其它染色方法:其它染色方法:银染法银染法神经细胞、嗜银颗粒神经细胞、嗜银颗粒 亲银性亲银性 argentaffin : 嗜银性嗜银性 argyrophilia:17神经元两种染色方法 HE染色银 染18( (二二) )电子显微镜电子显微镜(electron microscope, EM)技术技术 电镜分辨率电镜分辨率 0.2 nm 1mm = 1000 m 1m = 1000 nm 1 透射电镜术透射电镜术 transmission electron microscopy TEM 2 扫描电镜术扫描电镜术 scanning electron microscopy SEM
11、191、透射电镜(transmission electron microscope,TEM)技术用于观察组织、细胞内部超微结构,分辨率0.2nm。标本制备:固定 (戊二醛等)包埋(环氧树脂) 切片(50-80nm) 染色(醋酸铀和柠檬酸铅等重金属盐)电子密度高电子密度低202、扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)技术特点:用于观察组织表面的立体结构,分辨率5-7nm(低),但立体感强。巨噬细胞扫描电镜图巨噬细胞扫描电镜图2122(三)其它技术(自学)组织化学和细胞化学术免疫细胞化学术同位素示踪法核酸分子杂交技术23多糖多糖PA氧化氧化醛醛Schiff试剂
12、试剂紫红色沉淀紫红色沉淀组织化学与细胞化学组织化学与细胞化学(Histochemistry and Cytochemistry) 试剂试剂 + 组织中待检物质组织中待检物质 有色沉淀有色沉淀 (多糖、酶、脂类、核酸)多糖、酶、脂类、核酸) 过碘酸过碘酸- -雪夫氏反应雪夫氏反应( periodic acid Schiff reaction ,PAS反应反应): 是确定组织或细胞中有无多糖的方法。是确定组织或细胞中有无多糖的方法。 原理:原理:24PAS反应 PAS阳性部位为多糖存在的部位25四、组织学与胚胎学的地位及学习方法四、组织学与胚胎学的地位及学习方法(一) 组织学与胚胎学在畜牧兽医中的
13、地位组织学与胚胎学在畜牧兽医中的地位组织学与胚胎学是动物科学与动物医学专业专业中一门专业基础课,是建立在动物学、解剖学等学科基础之上,是学习病理、产科、繁殖学等后续课程的基础261.1.理论和实践密切联系理论和实践密切联系 2.2.结构与功能的关系结构与功能的关系3.3.平面和立体的关系平面和立体的关系4.4.从静态结构了解动态结构的变化从静态结构了解动态结构的变化5.分析比较。纵横联系,融会贯通分析比较。纵横联系,融会贯通(二)组织学与胚胎学的学习方法(二)组织学与胚胎学的学习方法27结构与功能结构与功能舒张状态舒张状态收缩状态收缩状态28平面与立体平面与立体不能不能 以点代面,以面代全!29静态与动态静态与动态30 五、教学内容五、教学内容1 、细胞学基础2 、组织(四种基本组织)3 、器官与系统4 、胚胎学31主要参考书目主要参考书目、高英茂主编组织学与胚胎学第一版北京: 人民卫生出版社,20012 、沈霞芬主编家畜组织学与胚胎学第三版 北京:中国农业出版社,20003 、王树迎,王政富主编动物组织学与胚胎学 北京: 中国农业出版社,2000