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1、USP467残留溶剂残留溶剂1绪绪 言言 与国外的质控理念接轨与国外的质控理念接轨逐渐采用先进的分析方法和分析理念逐渐采用先进的分析方法和分析理念v专属的专属的HPLC方法替代传统的容量法与生物法方法替代传统的容量法与生物法v重视对组分、相关物质（包括光学异构体）的控制重视对组分、相关物质（包括光学异构体）的控制v重视对残留溶剂的控制重视对残留溶剂的控制v重视对粒度的控制重视对粒度的控制v重视对晶型的控制重视对晶型的控制v用细菌内毒素检查法替代热原检查法用细菌内毒素检查法替代热原检查法v基本取消了异常毒性检查基本取消了异常毒性检查2简介ICH关于残留溶剂的定义关于残留溶剂的定义药物中的残留溶剂
2、系指在原料药或辅料的生产工艺药物中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产工艺中，以及在制剂制备过程中使用过或产生的有机挥中，以及在制剂制备过程中使用过或产生的有机挥发物。它们在实际的生产工艺中未能被完全去除。发物。它们在实际的生产工艺中未能被完全去除。由于残留溶剂没有疗效，故所有的残留溶剂应尽可由于残留溶剂没有疗效，故所有的残留溶剂应尽可能除去，以符合产品规范、能除去，以符合产品规范、GMP或其它基本的质量或其它基本的质量要求。要求。3残留溶剂的基本特征残留溶剂的基本特征v在药品生产过程中使用过；在药品生产过程中使用过；在药品生产过程中使用过；在药品生产过程中使用过；v在药品生产过程中应当去除而未
3、除尽；在药品生产过程中应当去除而未除尽；在药品生产过程中应当去除而未除尽；在药品生产过程中应当去除而未除尽；v特指有机挥发性化合物。特指有机挥发性化合物。特指有机挥发性化合物。特指有机挥发性化合物。4药品中残留溶剂的特点药品中残留溶剂的特点种类相对固定，种类相对固定，ICH规定了规定了69种；种；在具体样品中具有不确定性；在具体样品中具有不确定性；残留量相对较低，一般在痕量或微量范围残留量相对较低，一般在痕量或微量范围同一样品中不同溶剂的残留量相差较大同一样品中不同溶剂的残留量相差较大5适用范围适用范围包包括括原原料料、辅辅料料或或制制剂剂中中所所含含残残留留溶溶剂剂，因因此此，当当药药品品生
4、生产产或或纯纯化化过过程程中中会会出出现现这这些些溶溶剂剂时时，必必须须检检测测残残留留溶溶剂剂。但但仅仅需需检检测测原原料料药药、辅辅料料和和制制剂剂生生产产或或精精制制过过程程中中使使用用或或产产生生的的残残留留溶溶剂。剂。适用于所有的剂型和给药途径。短期（适用于所有的剂型和给药途径。短期（30天或天或6 更短）使用或局部使用时，提高残留溶剂的水平更短）使用或局部使用时，提高残留溶剂的水平可以接受，应根据具体情况具体分析的方式，提可以接受，应根据具体情况具体分析的方式，提出使用这种残留溶剂水平的正当理由。出使用这种残留溶剂水平的正当理由。不适用于临床研究阶段的可能的新原料药、辅料不适用于临
5、床研究阶段的可能的新原料药、辅料和在临床研究阶段研发的制剂，也不适用于已存和在临床研究阶段研发的制剂，也不适用于已存在的市售制剂。在的市售制剂。 7残留溶剂按风险评估的分类残留溶剂按风险评估的分类 “ “ 每日允许接触量每日允许接触量”（PDE）用于定义药物中可接）用于定义药物中可接受的有机溶剂的最大摄入量。受的有机溶剂的最大摄入量。应采用多种灵敏度高、应采用多种灵敏度高、选择性好、线形范围宽的检测器选择性好、线形范围宽的检测器按对人类健康的潜在危险分为如下三类按对人类健康的潜在危险分为如下三类一类一类v应该避免使用应该避免使用v公认的对人体有致癌作用公认的对人体有致癌作用v非常可疑为对人体有
6、致癌作用非常可疑为对人体有致癌作用v对环境有危害作用对环境有危害作用8二类二类v应该限制使用应该限制使用v对对动物无遗传毒性，但可能存在其他不可逆的毒性，动物无遗传毒性，但可能存在其他不可逆的毒性，如神经毒性、致畸性。如神经毒性、致畸性。v非常可疑存在其他潜在的严重的可逆毒性。非常可疑存在其他潜在的严重的可逆毒性。三类三类 溶剂的潜在毒性较低（多数没有进行长期毒性或致癌溶剂的潜在毒性较低（多数没有进行长期毒性或致癌研究）研究） 残留溶剂种类及限量残留溶剂种类及限量9确定接触限度的方法确定接触限度的方法 方案方案方案方案一一一一：以以以以ppmppm为单位的浓度限度为单位的浓度限度为单位的浓度限
7、度为单位的浓度限度 ；方案二方案二方案二方案二：制剂中每一种成分不必符合方法制剂中每一种成分不必符合方法1给给定的限度定的限度 环氧乙烷的限度环氧乙烷的限度 注：环氧乙烷只有在各论中注：环氧乙烷只有在各论中有规定时才需要测定。有规定时才需要测定。 标准溶液参数和测定标准溶液参数和测定的操作方法在各论中都有规定。除另有规定外，的操作方法在各论中都有规定。除另有规定外，限量是限量是1010g/ /g。 10 分析方法分析方法 残留溶剂通常使用代表性的色谱技术进行检测，残留溶剂通常使用代表性的色谱技术进行检测，如果可行，工厂应该使用任何描述在药典中，协如果可行，工厂应该使用任何描述在药典中，协调通过
8、的检测残留溶剂含量的方法。另外，工厂调通过的检测残留溶剂含量的方法。另外，工厂也可针对特殊的用途自由选择更合适的、经验证也可针对特殊的用途自由选择更合适的、经验证的分析方法。若仅存在三类溶剂，可用非专属性的分析方法。若仅存在三类溶剂，可用非专属性的方法如干燥失重来检查。残留溶剂的方法验证的方法如干燥失重来检查。残留溶剂的方法验证应符合方法学的相关内容。应符合方法学的相关内容。11残留溶剂的报告水平残留溶剂的报告水平 制剂生产商为了满足指南的标准，需要确定在辅料制剂生产商为了满足指南的标准，需要确定在辅料或原料药中残留溶剂含量的信息。以下阐述了辅料或原料药中残留溶剂含量的信息。以下阐述了辅料或原
9、料药供应商应提供给制剂生产商的信息的一些或原料药供应商应提供给制剂生产商的信息的一些例子。供应商应适当选择以下的一项。例子。供应商应适当选择以下的一项。仅可能存在三类溶剂，干燥失重小于仅可能存在三类溶剂，干燥失重小于0.5。仅可能存在二类溶剂仅可能存在二类溶剂X、Y，全部应低于方法一，全部应低于方法一的限度（这里供应商应将二类溶剂用的限度（这里供应商应将二类溶剂用X、Y）仅可能存在二类溶剂仅可能存在二类溶剂X、Y和三类溶剂，残留的和三类溶剂，残留的二类溶剂低于方法二类溶剂低于方法1的限度，残留的第三类溶剂低于的限度，残留的第三类溶剂低于0.5。12如果可能存在一类溶剂，应进行鉴别并界定。如果可
10、能存在一类溶剂，应进行鉴别并界定。如果可能存在一类溶剂，应进行鉴别并界定。如果可能存在一类溶剂，应进行鉴别并界定。“ “可能存在可能存在可能存在可能存在” ”指用于工艺最后一步的溶剂和那些用指用于工艺最后一步的溶剂和那些用指用于工艺最后一步的溶剂和那些用指用于工艺最后一步的溶剂和那些用于较前几步工艺的溶剂，经验证的工艺不能全部于较前几步工艺的溶剂，经验证的工艺不能全部于较前几步工艺的溶剂，经验证的工艺不能全部于较前几步工艺的溶剂，经验证的工艺不能全部除去。除去。除去。除去。如果第二类溶剂高于方法如果第二类溶剂高于方法如果第二类溶剂高于方法如果第二类溶剂高于方法1 1的限度或三类溶剂高于的限度或
11、三类溶剂高于的限度或三类溶剂高于的限度或三类溶剂高于0.50.5，应鉴别并界定，应鉴别并界定，应鉴别并界定，应鉴别并界定。 13残留溶剂的鉴别、控制以及量化残留溶剂的鉴别、控制以及量化 v参照参照ICH规定的药品中常见的残留溶剂为对象，建立的药品中规定的药品中常见的残留溶剂为对象，建立的药品中残留溶剂测定知识库，利用这个知识库可以在未知药品生产残留溶剂测定知识库，利用这个知识库可以在未知药品生产工艺时快速、准确、全面地鉴别和检测残留溶剂。工艺时快速、准确、全面地鉴别和检测残留溶剂。v测试时，样品应被溶解并释放残留溶剂，测试时，样品应被溶解并释放残留溶剂，因为因为USP不仅涉及不仅涉及制剂、还包
12、括活性成分和辅料，有些情况下，某些处方的组制剂、还包括活性成分和辅料，有些情况下，某些处方的组成不能完全溶解成不能完全溶解，这种情况下，制剂的残留溶剂应该被撵成，这种情况下，制剂的残留溶剂应该被撵成粉末以便于释放残留溶剂，为了防止挥发性溶剂的损失，这粉末以便于释放残留溶剂，为了防止挥发性溶剂的损失，这一操作过程应该尽可能快，一操作过程应该尽可能快，14为避免给色谱系统带来干扰，下列操作过程要求使用为避免给色谱系统带来干扰，下列操作过程要求使用“无有机物水无有机物水”。一类和二类残留溶剂一类和二类残留溶剂 v水溶性物质水溶性物质 方法方法A 溶液制备溶液制备 一类标准贮备液移取USP一类残留溶剂
13、混合液RS1.0ml到100-ml容量瓶中，加入9ml二甲基亚砜，用水稀释到刻度，摇匀。移取1.0ml此溶液到另一100-ml容量瓶中，加水稀释到刻度，摇匀。移取1.0ml此溶液到10-ml容量瓶中，用水稀释到刻度，摇匀。 15一类标准溶液移取1.0ml一类标准贮备液到适宜的顶空瓶中，加入5ml水，加盖密封，摇匀 2类标准贮备液：移取1.0ml USP2类溶剂A到100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，此为2类标准贮备液A。移取1.0mlUSP2类溶剂B到100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，此为2类标准贮备液B。2类混合A标准溶液：移取1.0ml2类标准贮备液A到合适的顶空瓶中，加5.0ml水，密
14、封，加盖 。2类混合B标准溶液：移取5.0ml2类标准贮备液B到合适的顶空瓶中，加1.0ml水，密封，加盖。 供试贮备液精密称取供试品约250mg到25-ml容量瓶，用水溶解并稀释到刻度，摇匀。 16供试液移取5.0ml供试贮备液到适宜的顶空瓶中，加入1.0ml水，加盖密封，摇匀。一类系统适应性溶液移取1.0ml一类标准贮备液到合适的顶空瓶中，加入5.0ml供试贮备液，加盖密封，摇匀。气相色谱系统（见色谱法气相色谱系统（见色谱法） 色谱柱：0.32-mm 30-m的弹性石英色谱柱，液膜厚1.8-m 的G43，或0.53-mm 30-m的多孔性色谱柱，液膜厚3.0-m 的G43载气：氮气（或氦气
15、）线速度约为35cm/s分流比为1：5 （为了优化灵敏度，可适当调节）柱温：先在40维持20分钟，再以10/min的升温速率升至240，并维持20分钟进样口温度：140FID检测器温：25017测试步骤测试步骤系统适应性测试 进样一类标准溶液，一类系统适应性溶液，二类混合A标准溶液，并记录如下参数：一类标准溶液中1,1,1-三氯乙烷的S/N不得小于5；一类系统适应性溶液每个峰的S/N不得小于3；二类混合A标准溶液乙睛与二氯甲烷的分离度R不得小于1.0。 样品测试 选择表5中顶空进样操作参数中的一种，分别进样1.0ml一类标准溶液、二类混合A标准溶液、二类混合B标准溶液、供试液，记录色谱图，并测
16、定主峰响应。若供试液除1,1,1-三氯乙烷的任一峰响应大于或等于一类标准溶液或二类标准溶液（包括混合A和混合B）相应的峰面积或1,1,1-三氯乙烷的峰响应大于或等于150倍1类标准溶液1,1,1-三氯乙烷的峰响应，则需继续按照规程B鉴别该峰；反之，符合本次检测要求。18表5. 顶空进样操作参数19操作步骤操作步骤B 溶液制备溶液制备 一类标准贮备液、一类标准溶液、二类标准贮备液、二类混合A标准溶液、二类混合B标准溶液、供试贮备液、供试液、一类系统适应性溶液照操作方法A配制。气相色谱系统（见色谱法气相色谱系统（见色谱法） 色谱柱：0.32-mm 30-m的弹性石英色谱柱，液膜厚0.25-m的G1
17、6，或0.53-mm 30-m的多孔性色谱柱，液膜厚0.25-m的G16 载气：氮气（或氦气）线速度约为35cm/s分流比为1：5 （为了优化灵敏度，可适当调节） 20柱温：先在50 维持20分钟，然后以6/min的速率升温至165 ，并维持20分钟。进样口温度：140FID检测器温：250测试步骤测试步骤系统适应性测试 进样一类标准溶液、一类系统适应性溶液、二类混合A标准溶液，并按操作方法记录峰响应：一类标准溶液中苯的S/N不得小于5；一类系统适应性溶液每个峰的S/N不得小于3；二类混合A标准溶液中乙睛和1，2-二氯乙烯的分离度R不得小于1.0。 样品测试 选择表5中顶空进样操作参数中的一种
18、，分别进样1.0ml一类标准溶液、二类混合A标准溶液，2类混合B标准溶液，测试溶液，记录主峰的响应，若测试溶液中在步骤A中被鉴别的溶剂的峰的响应大于或等于一类标准溶液或二类混合A或B标准溶液中相应的溶剂峰响应，则进行步骤C进行定量， 反之，该物质符合本次检测要求 21操作步骤C 溶液制备1类标准贮备液，1类标准溶液，2类标准贮备液A，2类混合A标准溶液，测试贮备液，测试溶液和1类系统适应性溶液配制方法同步骤A.标准溶液：（分别单独配制通过步骤A和步骤B鉴别和确认的各峰对应的标准溶液。除1,1,1-三氯乙烷溶剂外，1类其它溶剂按照步骤A中的1类标准贮备液的第一步稀释制备第一步稀释溶液。）准确量取
19、通过A步和B步鉴别和确认的各USP参比标准组分到合适的容器中，用水定量稀释浓度为表1或表2对应浓度限量的1/20，如有必要，可逐级稀释.移取1.0ml该溶液到合适的顶空瓶中，加5.0ml水，加盖，密封，摇匀。定位溶液：分别单独配制通过步骤A和B鉴别和确认的定位测试溶液。移取5.0ml测试贮备液到合适的顶空瓶中，加1.0ml标准溶液，加盖，密封，摇匀。22气相色谱系统（见色谱法气相色谱系统（见色谱法） 注注若操作方法若操作方法B B得到的色谱图比操作方法得到的色谱图比操作方法A A的色谱图好，的色谱图好，则采用操作则采用操作方法B的色谱系统。的色谱系统。 色谱柱：0.32-mm 30-m的弹性石
20、英色谱柱，液膜厚1.8-m 的G43，或0.53-mm 30-m的多孔性色谱柱，液膜厚3.0-m 的G43载气：氮气（或氦气）线速度约为35cm/s分流比为1：5 （为了优化灵敏度，可适当调节）柱温：先在40维持20分钟，再以10/min的升温速率升至240，并维持20分钟。进样口温度：140FID检测器温：25023测试步骤测试步骤系统适应性测试 进样一类标准溶液，一类系统适应性溶液，二类混合A标准溶液，记录峰响应：一类标准溶液的1,1,1-三氯乙烷的S/N不得小于5；一类系统适应性溶液每个峰的S/N不得小于3；二类标准溶液乙睛和二氯甲烷的分离度R不得小于1.0。 样品测试 选择表5中顶空进
21、样操作参数中的一种，分别进样1.0ml标准溶液、供试液，记录色谱图，并测定主峰响应。按以下公式计算供试品中每一种残留溶剂的量，以ppm计：5(C/W)rU/(rST-rU) 式中，C标准溶液中相应的USP标准溶剂的浓度，ug/ml；W供试品的称量值，g； rU、rST分别表示供试液和定位测试溶液中各溶剂峰响应。 24非水溶性物质 v操作步骤A（下列DMSO可以作为DMF的替代溶剂 ） 溶液制备1类标准储备液：移1.0mlUSP一类溶剂到盛有80mlDMF100ml容量瓶中，用DMF定容。移取1.0ml该溶液到盛有80mlDMF100ml容量瓶中，用DMF定容，保留一部分该溶液作为一类系统适应性
22、溶液。移取1.0ml该溶液到10ml容量瓶中，用DMF定容。1类标准溶液：移取1.0ml1类标准贮备液到合适的盛有5.0ml水的顶空瓶中，加盖密封。2类混合A标准贮备液：移取1.0mlUSP2类混合A溶剂到盛有80mlDMF100ml容量瓶中，用DMF定容。2类混合A标准溶液：移取1.0ml2类混合A标准贮备液到合适的盛有5.0ml水的顶空瓶中，加盖密封252类混合B标准贮备液：移取0.5mlUSP2类混合B溶剂到10ml容量瓶中，用DMF定容。2类混合B标准溶液：移取1.0ml2类混合B标准贮备液到合适的盛有5.0ml水的顶空瓶中，加盖密封供试贮备液：取500mg样品，精密称定，置10ml容
23、量瓶中，用DMF溶解并定容。 供试液：移取1.0ml测试贮备液到合适的盛有5.0ml水的顶空瓶中，加盖密封。 1类系统适应性溶液：混合5ml测试贮备液和0.5ml储存的1类标准贮备液，移取1.0ml该溶液到合适的盛有5.0ml水的顶空瓶中，加盖密封 气相色谱系统（见色谱法气相色谱系统（见色谱法） 色谱柱：0.53-mm 30-m硅胶柱，膜厚3.0-m，G43或0.53-mm 30-m膜厚3.0-m，G43。 26载气：氮气线速度约为35cm/s分流比为1：3（为了优化灵敏度，可适当调节）柱温：40 保持20min，然后以10 /min的速度升到240保持20min 。进样口温度：140FID检
24、测器温：250测试步骤测试步骤系统适应性测试 进样一类标准溶液，一类系统适应性溶液，2类混合A标准溶液，记录色谱图：1类标准溶液中1,1,1-三氯乙烷的信噪比不得小于5；1类系统适应性溶液中各色谱峰的信噪比不得小于3，2类混合A标准溶液中乙睛与二氯甲烷的分离度不得小于1.0 。 27供试品测试 选择表5中顶空操作参数3 with a vial pressure of 10psi,进大约1ml1类标准溶液，2类混合A标准溶液，二类混合B标准溶液和测试溶液，记录色谱图：测试溶液中除1,1,1-三氯乙烷外其他色谱峰的响应大于或相当于1类标准溶液或2类混合标准溶液A或B中相应溶剂响应，或测试溶液中1,
25、1,1-三氯乙烷大于或等于150倍1类标准溶液中1,1,1-三氯乙烷的响应；进行步骤B确认鉴别色谱峰，反之，该物质符合本次检测要求。 v操作步骤B 溶液制备溶液制备 1类标准贮备液，1类标准溶液，1类系统适应性溶液，2类标准贮备液，2类混合A标准溶液，2类混合B标准溶液，测试贮备液，测试溶液制备方法同步骤A 。气相色谱系统（见色谱法气相色谱系统（见色谱法） 色谱系统同水溶性步骤B，分流比为1：3，为了优化灵敏度度，可调节分流比 28测试步骤 按照表5的顶空进样操作参数3 with a vial pressure of 10psi ，进大约1.0ml1类标准溶液，2类混合A标准溶液，2类混合B标
26、准溶液，测试溶液，记录色谱图，记录主峰响应，若测试溶液中在步骤A中鉴别的色谱峰大于或等于一类标准溶液或2类混合标准溶液A或B，进行步骤C，反之，该物质符合本次检测要求。v操作步骤操作步骤C 溶液制备溶液制备一类标准贮备液，一类标准溶液，一类系统适应性溶液，二类标准贮备液A，二类混合A标准溶液制备方法同步骤A。标准贮备液：分别单独制备在步骤A和步骤B鉴别和确认的溶剂对应的标准溶液。精密量取按照步骤A和B鉴别和确认的溶剂一定量到合适的容器中，并用水定量稀释，如有必要，可逐级稀释，得到最终浓度为表1或表2浓度限度的1/20 标准溶液：移取1.0ml标准贮备液到合适的盛有5.0ml水的顶空瓶中，加盖密
27、封。 29供试贮备液制备方法同步骤A供试液移取1.0ml测试 贮备液到盛有5.0ml水的合适顶空瓶中，加盖密封 定位测试溶液分别单独制备步骤A和B鉴别和确认的溶剂的定位测试溶液。移取1.0ml测试贮备液到到合适的顶空瓶中，加入1.0ml标准贮备液和4.0ml水，加盖密封。 气相色谱系统（见色谱法气相色谱系统（见色谱法） 色谱系统同水溶性步骤C测试步骤测试步骤 选择表5中顶空参数3with a vial pressure of 10psi，分别进大约1.0ml标准溶液，测试溶液，定位测试溶液，记录色谱图：记录主峰响应，按照下式计算各残留溶剂量，ppm10(C/W)rU/(rST-rU)式中，C为
28、标准溶液的浓度g/mL，W为测试贮备液制备时样品的称量值，rU 和 rST分别代表测试溶液和定位测试溶液中各溶剂峰响应 30三类残留溶剂三类残留溶剂 v如果存在溶剂为3类，当专论中有干失项目或其它特定的溶剂测试方法也是可以的，如果专论中没有干失项目，或者专论中3类溶剂大于50mg /天，则须进行鉴别和定量,程序同上，标准溶液可做适当调整，v采用以上的操作方法。反之则需要适当的验证程序。需要时应该使用USP标准品。表1是残留溶剂测定试验应用的流程图。v其它分析操作方法其它分析操作方法 ( (已被终止使用已被终止使用) ) 下面的测试程序在具体专论中应用时，可能会做必要的改动。 31v 方法 以下
29、操作方法需要具有程序升温功能的气相色谱仪，多孔涂层的开口柱，FID检测器。 溶液制备溶液制备标准溶液：用无有机物水或各论规定的溶剂配制溶液，使每ml溶液中含有12.0g二氯甲烷，7.6g1,4-二氧六环，1.6 g1，1，2-三氯乙烯，1.2 g氯仿。注每日新鲜配制。供试液精密称取一定量的供试品，用无有机物水或各论规定的溶剂溶解并稀释，使得到的溶液中每ml含有20mg供试品。32气相色谱系统（见色谱法气相色谱系统（见色谱法） 色谱柱：0.53-mm 30-m的弹性石英分析柱，液膜为厚5-m 的化学交联G27固定相，和0.53-mm 5-m的石英保护柱，去活化苯甲基硅氧烷 载气：氦气，线速度约为
30、35cm/s（注：如有尾吹气体，可选用氮气 ）分流比为1：3（为了优化灵敏度，可适当调节）柱温：在35维持5分钟，然后以8/min的速率升至175，接着以35/min的速率升温至260，并在260至少维持16分钟。进样口温度：70FID检测器温：260测试步骤测试步骤 33系统适应性测试系统适应性测试 取标准溶液进样，记录峰响应：合适的系统应该能使标准溶液中所有成分都能在色谱图上体现出来；任何两种成分的分离度R不得少于1.0；重复进样后各峰响应的相对标准偏差不得大于15。供试品测试供试品测试 取约1L标准溶液、供试液分别进样，记录色谱图，并测定峰响应。 定性定性 测试溶液中溶剂峰的鉴别是基于保
31、留时间，色谱图中鉴别的色谱峰可能是下表中列出的有机挥发性杂质，或与之有相同保留的其他挥发性杂质，可以通过质谱检测确定的色谱峰或通过更换固定相的另一支色谱柱。 34 除另有规定外，原料中每种有机挥发性杂质的含量不得超过除另有规定外，原料中每种有机挥发性杂质的含量不得超过下表给定的限量。下表给定的限量。 有机挥发性杂质 限量 (g/g) 氯仿 60 1,4-二氧六环 380 二氯甲烷 600 三氯乙烯 80 35v方法方法 溶液制备溶液制备标准溶液按方法配制标准溶液。用移液管移取5ml溶液到带隔膜瓶盖的进样瓶中，加入1g无水硫酸钠，密封。将封好的瓶子在80加热60分钟。供试液精密称取100mg供试
32、品到瓶中，加5.0ml水或各论规定的溶剂，加1g无水硫酸钠，加盖密封。除另有规定外，将密封好的瓶子在80加热60分钟。36色谱系统及操作方法色谱系统及操作方法 注:可以使用自动转移测定体积的顶空进样装置。顶空进样操作无需使用保护柱。除顶空进样（或用加热的气体密封针）为1ml，其它按方法操作。 v方法方法 溶液制备溶液制备 标准溶液和供试液按方法配制。色谱系统（见色谱法色谱系统（见色谱法） 色谱柱：0.53-mm 30-m的弹性石英分析柱，固定相为3.0-m G43，0.53-mm 5-m的石英保护柱，去活化苯甲基硅氧烷载气：氦气，线速度约为35cm/s柱温：在40维持20分钟，然后迅速升温至2
33、40，维持20分钟。进样口温度：140FID检测器温：26037测试步骤测试步骤系统适应性测试 取标准溶液进样，记录色谱图: 合适的系统应该能使标准溶液中所有成分都能在色谱图上体现出来；任何两种成分的分离度R不得少于3；重复进样后各峰响应的相对标准偏差不得大于15。供试品测试 按方法操作，进样量为1L。v方法方法 溶液制备溶液制备标准溶液和供试液按方法配制 。38色谱系统色谱系统（见色谱法（见色谱法） 带FID检测器。色谱柱和柱温，按各药品项下规定从下表选择（见表6）。载气、线速度或流速、检测器和进样口温度需与下表的柱参数、柱温对应。测试步骤测试步骤系统适应性测试 取标准溶液进样，记录峰响应：系统适宜时，能使标准溶液中所有成分都能在色谱图上体现出来；任何两种成分的分离度R不得少于1.0；重复进样后各峰响应的相对标准偏差不得大于15。 供试品测试 按方法操作，进样体积为1L。表6.方法的色谱条件（page13） 39
