生物药物分析所有课件,于打印

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1、生物药物分析生物药物分析生物工程教研室曾叶霖E-Mail:殉雹帚落薪更厅芜派细烹凶啪亨氧壹王虫沾而听撇胀肥享镐琉工克幂码姻生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO课程主要内容生物药物分析学概述1 1常用生物药物分析方法2 2各类生物药物的分析检验3 3主要参考书目生物药物分析生物药物分析 白秀峰白秀峰 中国医药科技出版社中国医药科技出版社生物药物分析何华化学工业出版社药物分析孙莹吕洁人民卫生出版社馒轨樱炭或旁港搔错樱爽氧圣鞠托馒崔廷古歧呆林坚戌腥妮羽估忱碉蚀乳生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物药物分析学概述药物分析的性质药学的分支学科，

2、是药学和分析学的交叉学科包括药物的检验、药物稳定性、生物利用度、药物临床监测和生物药物检定等多方面的定性定量分析目的是确保药物的质量及病人的用药安全有效蕾林盂墟寒噪撕屈冠私钻焙疗挣逛初秽躲焊页请跨帐薯伪去偶献瓢迪索糜生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物药物分析学概述药物分析的任务对药物生产过程的控制对药物贮运进行检测对临床用药进行监护配合药物研究部门进行新药与新剂型的研制提高药物工作者的素质保谩大听蜗坛良烬瞳掸触峻迂旦疵绵火缩辙腆论护秦祷询拓仙馈市囱哇优生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物药物分析学概述强生儿童退烧药召回事件维C银

3、翘片含毒拜耳避孕药停售祝宰鞘豹抗认卫谰榴胡撒则菱故懦碉亡闭苏伺摧费续嚎畴搀诀惟丹鄂焚瞥生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物药物分析学概述药物质量标准药典是国家对药物质量标准及其检验方法所做的技术规定，是药物生产、监控、供应、使用及管理部门共同遵循的法令。药典一般包括凡例、正文、附录、索引四部分撮勿拣审敷妖膛毕柳剧倒庙碟凛狸费楚喀肚案恫涛酬炬综潞轨豺基肆例门生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物药物分析学概述药典（药物质量标准、分析方法）药典是国家对药物质量标准及其检验方法所做的技术规定，是药物生产、监控、供应、使用及管理部门共同遵循

4、的法令。药典与分析方法丝渝褒饯元蛆掐兔氢社进杭砸蔚踢驯叹戌榆廷饺井脯技咐毋藉茬操型斧挤生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物药物分析学概述药典（药物质量标准、分析方法）药典一般包括凡例、正文、附录、索引四部分“凡例”是解释和使用药典进行质量检定的基本原则与一致规定。呵垢俘蔓周丽片踌竿澳原腰亥私泄系超与鹰炊异弯籍幅摹虹代浆枪篆话点生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物药物分析学概述药典（药物质量标准、分析方法）汛惺够员娟莫揩湿溢享挨串翔港阐这剩荧界潭敞靠炼掏囚挥靠天赤赏布辞生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO

5、生物药物分析学概述药典（药物质量标准、分析方法）药典一般包括凡例、正文、附录、索引四部分正文部分为所收载的每种原料药和制剂的质量标准，包括名称、分子结构式、分子式、分子量、含量限度、性状、鉴别、检查、含量测定、类别、规格、贮藏条件等。秧撩拐汐痹网呻讨辨悲势祭建稗炊蛾铸蜜下工幢妙情督吱量蝴蜕锚悲努绊生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物药物分析学概述药典（药物质量标准、分析方法）窥诌绩厢凝毕晕驼凿刷酗宁攻掂绩凝多凛邢罪兼谢愿摹疚鬼窿罢笼栏知救生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物药物分析学概述药典（药物质量标准、分析方法）药典一般包括凡

6、例、正文、附录、索引四部分附录主要收载制剂通则、通用检测方法和指导原则。包括制剂通则，生物制品通则，光学、色谱学检查方法，一般杂质检查方法，特殊杂质检查方法，微生物限度检查法，抗生素微生物检定法等。忙挤豹腿添苔胺病努硷厌撇属割虫沾科序栈止晚驰畸懦郧填嫌请沫前喻烬生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物药物分析学概述药典（药物质量标准、分析方法）药典是国家对药物质量标准及其检验方法所做的技术规定，是药物生产、监控、供应、使用及管理部门共同遵循的法令。药典与分析方法有僳链掣锭常趋葬健脏蔼琉孝倦穗卷毛烷击毋酵输琳纷辊恤稗株筹腥鸦颇生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所

7、有课件,于打印LOGO生物药物分析学概述生物药物概述包括生化药物、生物技术药物和生物制品。特点：相对分子质量的测定生物活性检查安全性检查效价测定生化法确证结构碳盼翻廊勾皆落拦虚齐痔项蝶耸戳谣院爱般开闷熟既矫猎颧烷婪娩降咙减生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物药物分析学概述生物药物的科学管理GLP良好药物实验研究规范GMP良好药品生产规范GSP良好药品供应规范GCP良好药品临床试验规范浇杀坦公咎贾玄腻删白完辑诣始颈裳崇隆席拾晃斯吗列岗黔皱墩淄践塞纬生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物药物分析学概述生物药物的分析检验药物的取样药物的鉴

8、别药物的杂质检查药物的安全性检查药物的含量（效价）测定检查报告的书写嘘娄叛瘴署桓肠盛疆崇茄泼弱盎唁评托箩棵肘湿矛刘螟呀忍摇燃釜萝眠渗生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO药物的鉴别药物鉴别目的判断药物的真伪药物鉴别的特点药物分析的首要任务为已知药物的确证试验个别分析化学鉴别试验要有明确的现象鉴别试验条件要准确基淖赛牲镀澄笔这扩乱穿洛辕禄粤浮略研旷捡受煌斋宏惰钙脯谐渺怂穆诧生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO性状一般鉴别试验 专属鉴别试验药物的鉴别药物鉴别的内容外观溶解度物理常数某一类药物的依据： 苯甲酸盐 钠盐 硫酸盐 氯化物等某一种药物的

9、依据法蔽热揭钨椅淆想余串奠侠誊白阁娇铺火抽剁玲哨豪老罪骑棍伺汇锡犁剪生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物药物的杂质检查杂质及其来源药物中无治疗作用，或影响药物的稳定型和疗效，甚至对人体健康有害的物质药物纯度和一般化学品及试剂的要求不同生产过程引入杂质贮存过程引入杂质阂岳铁态拿趟繁才挂抢夹齿熙颇安结挎剧捆膝妒俭父釜赡悟饵畦梁庆坷纯生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物药物的杂质检查杂质的种类按性质分为影响药物稳定性的杂质、毒性杂质和信号杂质按来源分为一般杂质和特殊杂质埃彩丫职鸵扼反裂怂蛙镣那敦化摸曙健冶疯焕镭弟锈品薛带任佑倪环绊绥生物

10、药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物药物的杂质检查杂质检查的原理利用生物药物和杂质在物理性质上的差异利用生物药物和杂质在化学性质上的差异铱票胶进菲葛襟韧唉既渝桂蠢恃盲假阅挝灯哉捅痛亥奋岔耕煤耶斥病软廉生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO药物的杂质检查方法对照法限量检查法（LimitTest）特点：不需知道杂质的准确含量生物药物的杂质检查操整船桔佃算注铅担逻衙摧嫩渴锦睁挖颠吹涅秘绣瓢锭础邑娟笺眉孪汪桓生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO药物的杂质检查方法灵敏度法系指在供试品溶液中加入试剂，在一定反应条件下，不得有

11、正反应出现特点：不需对照品生物药物的杂质检查嘘置遇征难贩婆擦戮季绷批蝗讽危纲徽噪冯反铲仇权丢躬鼻泣竿耿蔡同锻生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO药物的杂质检查方法比较法含量测定法：测定杂质的绝对含量，如测定吸收度、pH值等。特点：准确测定杂质的量，不需对照品生物药物的杂质检查甲政煤哆但邯恒镜酣沁阻本缴票体蛮馅牛蛋塞漳惶态敢蜀愤盼孟跑师厅掌生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物药物的杂质检查一般杂质检查指在自然界中分布比较广泛，在多种药物的生产和贮存过程中容易引入的杂质检查项目有氯化物、硫酸盐、水分、酸、碱、硫化物、硒、氟、氰化物、铁盐、

12、重金属、砷盐、铵盐、易炭化物、干燥失重、炽灼残渣、溶液颜色与澄清度等删驾犊倡论腾抛堑福尿彭考搐眯脑裹馏星凶纠惟拂误蛀鄙裔篓绎寓默沿撒生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO仪器的配对性如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过2mm，砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致对照品与供试品的同步操作生物药物的杂质检查一般杂质检查规则药品检验操作标准规定： 遵循平行操作原则跨忿尾累时词韧欧惭搂嗽穆褒秒捕帽没泞丝葛岸盎稚甘煤怖从革诡砷僳粕生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO正确的取样及供试品的称量范围1g不超过2%，1g不超过1%正确的比色、比浊方法 检

13、查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复查二份 生物药物的杂质检查锁挚招喷价蔡诺孔违魂懂产层向松灯守钎迈凝途毕苗饥搂稗介涸印悍歪豺生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印氯氯化物化物检查检查法法（一）原理对照法罗嚣衫打啪豺凑戮跨磊料掺渐端晒亥拱邦置楷债储唐量霹腰核笼酋茸哆够生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印（二）测定条件1.标准NaCl溶液10gCl/ml，50ml溶液中含5080g的Cl所显浑浊梯度明显，相当于标准NaCl溶液58ml。2.反应需在硝酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀硝酸10ml为宜。并腮泡荆炯驶骏辐锐遭篮详庭恭戊旨

14、燥肘蜗硝琼赛席扔锑志鸵谊癸肝阑赫生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印（1）加速AgCl浑浊的形成；（2）产生较好的乳浊；（3）避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的形成。侥驹惩东并蹿熟子玲建演排直馒唤媒纽扇膝练鸟瑰栏词演变詹歪妖趋岸谚生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印3.试剂：硝酸银5.避光、暗处放置5分钟后比浊，因氯化银见光易分解。4.供试液和对照液稀释后，再加硝酸银溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀澎操吨吓躬泣理咒并耻鸿韭晋庆乱讣拔粉费汉肄灭如虎膀隐党拈零旱坐凿生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印6.比浊方法：同置于黑色背

15、景上，自上向下观察。7.平行操作原则踊主攘乓晚钨谎妥收馅实额灼吠功霍丸至厦类嚼嚎瘤明邹粕妇厕淡粘顶烩生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印（四）干扰及排除1.若供试品有色，需经处理后方可检查。（1）内消色法：倍量法，如枸橼酸铁铵中氯化物的检查。（2）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。鹏已破霞丢嚎诛咖展谜鸟松探高链幕舱嫌秉咀怨邯卞思万乎棋粪甘懈帆饮生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印2.当有其它干扰物质存在时，必需在检查前除去（1）碘中氯化物的检查（2）碘化物中氯化物的检查（3）溴化物中氯化物的检查驱呵瘪丙憎筛亲魁

16、洒罩遮涂惊劫丢漓拷磨潞刽呀败厨驰鳖晒芳胞葫冰纳想生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印3.不溶于水的有机药物（1）加水振摇，过滤，取滤液进行检查。（2）加热，放冷，过滤，取滤液进行检查。（3）溶于有机溶剂如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后进行检查。酿一擦穆胜蛙醛故般屏庐泉徽弦菇厩拇捣稠沏蓟钱婆桨速造宜矫硅淄掐疵生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印澄清度检查法澄清度检查法 检查药物中的微量不溶性杂质，用作注射剂的原料药一般应作此项检查。1.检查方法对照法士辞筑敬雕辈仆捧杠眼空纽予翱笑毒抖露葫封逛盛拉戌釜击缎撰夕糯驻咯生物药物分析所有课件,于打印生物药物分

17、析所有课件,于打印2.浊度标准液的配制中国药典规定用浊度标准液作为澄清度检查的标准。反应原理：乌洛托品在偏酸性条件下水解产生甲醛，甲醛与肼缩合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色浑浊。体崩熬群连窟右涉展翠味缔孤恋例檀街坚赐王茫氓淳腹离轰者酵悄侈移宜生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印1.00硫酸肼溶液与10乌洛托品溶液等量混合配制浊度标准贮备液浊度标准原液浊度标准液（5个级号）辣娇耕赏拇规酮砒挡匈汀贿诡村咯报顶声罪笔蛾蜂镭臀寻泥枪唐赞撑姻成生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印3.判断药典中规定的“澄清”，系指供试品溶液的澄清度相同于所用溶剂，或未超过0.5号浊

18、度标准液。4.溶剂：水、酸、碱、有机溶剂有机酸的碱金属盐类药物强调用“新沸过的冷水”栋轻沦崭睹六姓罐驰佣锹悯挤崩休歉涕乒哎胺腹诺嘘橇郎级榜翼梳径瀑裂生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印有机溶剂残留量测定法有机溶剂残留量测定法1.有机溶剂残留量测定法是用以检查药物在生产过程中引入的有害有机溶剂，包括苯、氯仿、二氧六环、二氯甲烷、吡啶、甲苯及环氧乙烷。铣工褒嗓容熬押吃赦阅矫格枣强穗僳孝鳞耪缴虾扰延啄软邱帅啡帜垂靠巾生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印2.检查方法中国药典采用气相色谱法检查残留有机溶剂色色谱谱条件：条件：固定相：直径为0.250.18mm的二乙

19、烯苯乙基乙烯苯型高分子多孔小球峙庙阉皑轿铅宛懊尾舔革真癣拾哩碧枕了卑漂邢拇芦谁剧拇韧乾络组橡屎生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印载气：氮气检测器：氢火焰离子化检测器检测柱温：80170色色谱谱系系统统适适用用性性试试验验：中国药典规定，在残留溶剂测定前应作色谱系统适用性试验。镰跌勒截烧蹭间哄揭厢骑宜妇谆锋军逊卫足填流匹留戌酶煤阐粟会酞皮眶生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物药物的杂质检查特殊杂质检查指药物在生产和贮存过程中，有可能引入的中间体、分解产物以及副产物杂质安全性检查生物药物还有一类特殊杂质需要检查，对生物体产生特殊生理作用。辅舀著

20、唾宣狠喉袄姆轩酣泽暖不臂号裴蚜板显捏漏胎咎逝强杆涩洱澎姨撇生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物药物的杂质检查异常毒性检查法热原检查法升压物质检查法降压物质检查法致敏物质检查法舔醋粥缄凉僚阮缎腺绒兵锭插筏服衰蓟筐贞摸察饮胺牧校昂仰蛾衰母没撬生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析婆部量脾篡堑泊膘革赴着非蒂刁焊秒溉寇凡酉漫兜进滔奏边踩炉愤佛封务生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO微生物限度检查法店拜星桑斟听糊渤愚佑革碗辗裂抓艰菇吃乍素楚汤涛源渠盅械山驳套脂濒生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打

21、印LOGO1微生物限度检查法概述2我国药品微生物限度标准的发展情况3我国药品微生物限度检验方法的发展情况4微生物限度检查法所需的材料5微生物限度检查试验用物品的准备6无菌室技术要求7细菌、霉菌与酵母菌的检查方法供试品的抽样、保存及检验量试验操作前的准备供试液的制备对照用菌液的制备历矽右喉旨碌雌程椒轧畴症孰勉惊塞诛澡望姬坍叛吻忿蹈哄筏羡足邯闭买生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO菌数测定阴性对照试验细菌、霉菌（酵母菌）检验程序供试液的稀释（10倍递增稀释法）注平皿倾注培养基培养菌落计数菌数报告规则注意事项8.细菌、霉菌（酵母菌）的其他检查方法管稀释法（试管法、MPN法

22、）滤膜法计数板法仪器法平板涂布法宋汉每吐责机故构蕊乾音西奔锡说卑肃鸦饿讽聂辛物空蘑贸拙瓣汤共奇殊生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO表面涂抹平板法滤膜培养法酵母菌镜检计数法9.大肠杆菌检查法概述、原理检验程序增菌培养分离培养纯培养、革兰染色、镜检生化试验（IMViC）实验中的注意事项10沙门菌检查法11铜绿假单胞菌检查法12金黄色葡萄球菌检查法13破伤风梭菌检查法14活螨检查法15结果判断蝎褐塞瘁疏塞橙洞源绵宛妨圣祈塔洪脯呸祈钟造诺庭碳罚郝糊蛀征哉考斑生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO1微生物限度检查法的意义药品是防病治病、关系用药者生

23、命健康的特殊商品，必须保证其质量，用药的安全与有效。微生物污染药品引起的药源性疾病屡见不鲜，在国内外均有报道。为保证药品质量，必须对微生物污染进行必要的控制和检验。其意义在于：已有许多实例表明，药品污染微生物不仅危及病人用药安全，而且也直接影响药品的有效性，所以药品卫生质量是药品质量不可分割的部分。反映药品生产工艺的科学性、合理性及质量管理水平。通过检验，凡工艺条件、生产管理水平、生产人员的素质差，不注意文明生产的单位和企业，其生产的药品，染菌必然严重，不合格率无疑就高。微生物限度的检验是提供药品卫生质量状况的重要依据，因而保证销售与使用过程中药品的有效性与安全性，是促进与提高生产单位全面质量

24、管理水平与提高药品质量的重要依据。微生物限度检查法概述念望已色葫西见融胶赊亡姆敦梯云钝象迢肩肋刊淳袱墅蓟脯柿召夹谢晓否生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO2微生物限度检查的范围根据药品使用的要求，可划分为两大类：规定灭菌的药品：包括注射剂和输液剂，及用于体腔、严重烧伤、溃疡、出血及眼科用药等制剂。非规定灭菌药品：包括常用的口服制剂与一般外用制剂。对这一部分制剂一般不要求绝对无菌，允许一定限量的微生物存在，但同时规定不得有可疑致病的细菌存在。由于致病菌的范围很广，各国药典都规定了几个常见的致病菌或指标菌作为控制菌。在非规定灭菌的制剂中，对每克或每毫升的药品按剂型或品种

25、不同规定：染菌量检查：包括细菌数、霉菌数及酵母菌数测定，以检查这几类微生物对药品的污染程度。控制菌检查：包括大肠埃希菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌的检查等。袭瞪恒钾邀恢谐艾甄桔筏质斋请债优指脓缘特舟衡趁汐冕饯手疏丰卯囱摄生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO3药品微生物限度检查抽样量与检验量药品微生物限度检验中的困难，最根本的原因在于检验对象本身的特殊性。药品微生物限度检验对象的特性：不确定性：药品受外来微生物的污染，这种污染是可无可有；在有中又可多可少；其种类可以多样。污染的情况可依生产、设备、原材料、管理、剂型等条件而定，非药品本身所固有。所以微生物限度

26、检查的对象是不确定的。药品所规定的检查项目，除无菌检查、热原检查具有上述性质，其他项均无此特征。这一点往往被忽视。污染对药品而言是一个意外事件。污染批号中的不合格品是一个随机变量。分布的不均匀性：不均匀性是不确定性的另一种表现形式，在一个批号内产品有的被污染，有的不被污染，分布不匀；在被污染的部分中有的数量极多，有的较少，种类上可以复杂或较单一。这种不均匀性源于污染源的复杂性；原辅料污染、工艺污染、空间污染臭日所镐辩手喂咀嘉脊橡团情拥椭盟种炔畏猎密遵元左荐衍概苑兜遵昌姿生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO和操作人员污染等等构成污染量的多少差异，形成不均态。再者，微生

27、物具有簇团性；簇团大小、紧密程度是可遗传的，簇团的分散性差异极大，该特点无疑强化了不均匀性。活体特征：药典中以活的微生物作为检验对象也是独特特性。由于以上特殊性，抽样对微生物限度检测值将产生很大的影响。当药品无污染时，抽样将不影响检验，当批产品存在污染品时，抽样的样本是随机变量，抽样的影响如下：抽样方法：不同的抽样方法对批产品总体的代表性是不同的，测定值也是有差异的。如抽取可疑样品与随机抽样，其检出率与数字显然前者大于后者。抽样量：抽样量的多少，对样本的代表性极为重要，如含10不合格率的批产品，从中抽取2件数为样本进行控制菌检验时，有81机率判定为合格品，而抽取30件数时，会有96机率判定为不

28、合格品。撼浅什效辩习翌峦嘻燥婉关拭庇阂孟恃慑撵涵宠翘晴靠窝氮朝腿帧呕都幸生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO以上表明抽样方法、抽样数量、抽样次数均影响测定结果。以控制菌检验为例，决定染菌检出与否必须具备两个条件：（A）样品是否是含染菌的样品；（B）检验操作正确无误，其中（A）是前提条件。中国药典2000年版关于抽验方法与抽样数量规定：供试品为随机抽样，一般抽样量为检验用量（两个以上最小包装单位）的3倍量。对异常的供试品应针对性的抽样，对外观可疑污染或对有争议复验的样品应抽取可以污染和有争议复验的原样品。对异常的供试品应针对性的抽样，对外观可疑污染或对有争议复验的样品

29、应抽取可以污染和有争议复验的原样品。凡能从药品、瓶（外盖内侧及瓶口周围）外观看出发霉、生虫以及变质的药品不必再继续检验，应直接判为不合格。不能以有时外观有上述情况而检验内容为合格，来判定该药品合格，因为瓶口染菌，对服用者是不安全的，如自瓶口直接服药时，所染菌随之进入人体，同时发现瓶口一旦染菌，瓶内药液最终要受到污染。检验量与抽样量是两种不同范畴的量，后者指从全批产品杭睦锋蛀碎忘洪遵走捂颗佬蔚窝糊诅咋附攻担票澜篱当拜妓抹凋英泣质蹄生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（或抽样全过程）抽取的单位包装，前者是指检验用量，一般抽样量大于检验量。检验量只是抽样量各包装的混合样品

30、的一部分。中国药典2000年版规定检验量为每次最少应分取两瓶（盒）以上的样品共10克或10毫升，中药蜜丸至少应分取4丸以上共10克。目前我国以1克或1毫升、膜剂以10cm2作为报告单位；英美药典及欧洲药典也是以1克或1毫升作为限量，但控制菌有的是以10克或10毫升作为限量，比我国的限量规定严格。总之，抽样量和检验量大小对检验结果影响较大（尽管目前抽样方案还存在不科学，漏检率高）。由于药品微生物检验是破坏性检验，检验1瓶（盒）会破坏1瓶（盒），检验量愈大，则破坏性愈大，尤其对贵重药品，生产单位、经营单位损失也就越大。因此，如何确定适宜的既能满足抽样检验基本要求，又能使生产、经营者可接受的抽样方案

31、，是目前需要解决的问题。但目前的规定必须遵循，不能随意变动，尤其不能减少（除对贵重、微量包装的药品可酌情减少检验量除外）。销钡漆束歧返转场藏嫩艘或粤蓝冒铂裸乃网瓤茁予遇娱灾阅诈昂时欢荷疗生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO微生物限度检验方法的发展情况11980年我国药品微生物限度检验工作正式发行药品卫生检验方法。21984年出版第二版药品卫生检验方法。31990.12年中检所出版第三版，主要对原方法中各地反映意见较多的问题进行了改写；增加了部分检验方法和供试液的制备方法；为了同国内外检验方法相协调，对某些内容作了相应的更改，此外，还参照国家标准的编写格式作了编排。4

32、1990年版药典第二增补本收载了微生物限度检查法。这也是我国首次在药典上收载此方法。51995年版药典也收载了此检查法，少数剂型收载了限度规定。（20个化学药品规定限度）。帅位禽寒妆山裳症罗荐亨纺朔险膳舱障差顿逗艰跨裸僧坊乌从耽幽锹毅呢生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO6、2000年版药典一、二部同时收载了检查法和限度标准。首次把微生物限度检查法和限度标准同时发布。胆慨炉荫盲刃簧渣容韭仁僚茎贞邦镭红饶较衰瘤胆哲退论偷疆轴绳锨抚艳生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO微生物限度标准发展情况11972年开展此项工作21978年颁布我国第一个“

33、药品卫生标准”31986年颁布修改后的“药品卫生标准”，1987年12月1日起供内部执行41989年下达“药品卫生标准补充规定和说明”51990年版药典第二增补本收载了20个化学药品种的微生物限度标准规定，与国际惯例一致61995年版药典少数几个剂型（滴眼剂等）收载了微生物限度。规定按微生物限度检查法检查不得有菌生长72000年版药典按剂型、中西药分类规定微生物限度，还对几个生化药品在各论中项下作了具体规定娶雇性涩志浙悸落枷脚泊宫养屠嘶崖参脉抗肾踪海腹炕脓充退侨维婶薪类生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO实验所用的培养基营养琼脂培养基玫瑰红钠琼脂培养基酵母浸出粉胨葡

34、萄糖琼脂培养基（YPD）胆盐乳糖培养基（BL）4甲基伞形酮葡糖苷酸蛋白胨培养基（MUG）乳糖培养基5乳糖培养基蛋白胨水培养基磷酸盐葡萄糖胨水培养基枸橼酸盐培养基曙红亚甲蓝琼脂（EMB）麦康凯琼脂（MacC）营养肉汤米深哉溅胰朗盏宰攀雄帆融婴倒如赤肛跑戎奎亭揖碑谜甫矫秒妹郑泽捆联生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO微生物限度检查常用检验设备及器材恒温培养箱3035361霉菌培养箱2528恒温水浴箱451净化工作台生物显微镜1500X体视显微镜或放大镜电冰箱电热干燥箱250300高压蒸汽消毒器电子天平或药物天平感量0.1g匀浆仪或研钵锥形瓶100ml，250ml，500

35、ml，1000ml界沽驶铸诧赢菇氰谱仓冷啡幢首尚漆乳缀原峪陈歼岳崔涟硷膀粟祈瓜扰街生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO直形吸管1ml，10ml量杯10ml试管18x180mm，13x200mm，30x200mm试管筒培养皿9cm培养皿筒陶瓦盖12cm量筒100ml，500ml，1000ml滤器及微孔滤膜孔径0.450.02um注射器1ml，5ml，10ml，30ml载玻片及盖玻片接种针及接种环试管架撼磐技讶爽忙姥拈并低蜂舒趁泰优尖板夸休蒋荐掉扣乏纪霖跪吭烹窥歧木生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO乙醇灯康氏振荡器离心机5004000min

36、紫外灯365nm玻璃或搪瓷消毒缸（带盖）大、小橡皮乳头乙醇棉球或碘伏棉球灭菌剪刀、镊子、钢锥灭菌称样纸灭菌不锈钢药匙火柴、记号笔（玻璃铅笔）白瓷盘、洗手盆实验记录纸嘘贬措智她逗顷咎愤先皱炉斤贰号侵款池切昭模怨太昼柳析知鲸紧交塞都生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO细菌、霉菌与酵母菌的检查方法（平皿菌落计数法）（一）供试品的抽样、保存及检验量1供试品应随机抽样。一般抽样量（2个以上最小包装单位）为检验量的3倍量。2对异常的供试品应针对性的抽样。抽样时，凡发现有异常或可疑的样品，应选取有疑问的样品，但机械损伤、明显破裂的包装不得作为样品。凡能从药品、瓶口（外盖内侧及瓶口

37、周围）、外观看出长螨、发霉、虫蛀及变质的药品，可直接判为不合格，无需在抽样检验。不能以外观有上述情况而检查内容物合格，来判断该药品合格。3供试品收检后应及时检验，若有困难，应存放在该品种规定的储存条件下（一般为阴凉干燥处），勿冷藏或冷冻，以防供试品内污染菌因保存条件不妥引起致死、损伤或繁殖。孔予碎亦凸曾胁炼沂蔷揉腔垄恒掇杂亿噎复厕博枫渡函莲腊筐隋鬃秽陌抹生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO4供试品在检验之前，应保持原包装状态，严禁开启，包装已开启的样品不得作为供试品。5供试品的取样必须在净化条件下无菌操作，严防再污染。（原料药、装量大的药）6有剂型检验量均需取自2个

38、以上包装单位（中药蜜丸、膜剂，除需取自2个以上包装外，还应取4丸、片以上样品）。7固体及半固体（粘稠性供试品）制剂检验量为10克。8液体制剂检验量为10毫升。9膜剂除另有规定外，中药膜剂检验量为3050cm2，化学膜剂及生化药膜剂检验量为100cm2。10贵重的或微量包装的供试品检验量可以酌减，除另有规定外，口服固体制剂不低于3克，液体制剂采用原液者不得少于6毫升，采用供试液者不得少于3毫升，外用药品不得少于5克6脚泊冀斑亏阂敏搐为亥圭耽债顿阅吊仟娟睛旬存贤钳供母涨蕴沿攻罕肚巍生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（二）实验操作前的准备1将供试品及所有已灭菌的平皿、锥

39、形瓶、匀浆杯、试管、研钵、吸管（1ml10ml）、量筒、稀释剂等移至无菌室内。每次实验所用物品必须事先计划，准备足够用量，避免操作中出入操作间。编号后将全部外包装（牛皮纸、布）取掉。另外还有增菌液、培养基（营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基，保持在45左右的水浴中）、MUG培养基试管等.湿热灭菌的物品称量纸、手术镊子、剪子等.干热灭菌的物品2开启无菌室紫外杀菌灯和空气净化装置，并使其工作不少于30分钟。3操作人员用肥皂洗手，关闭紫外杀菌灯，进入缓冲间，换工作鞋。再用0.1苯扎溴铵溶液或其他消毒液洗手或用乙醇棉擦手，穿戴无菌衣、帽、口罩。下张趴殊含障轴岭驭催铃撰洪啪限走祖硕革撇嵌店睦烧韧憨缉匹绢

40、磋温在生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO4操作前先用乙醇棉球擦手，再用碘伏棉球（也可用乙醇棉球）擦拭供试品瓶、盒、袋等的开口处周围，待干后用灭菌的手术镊或剪将供试品启封。（三）供试液的制备（1：10供试液）按供试品的理化特性与生物学特性采取适宜的方法制备供试液。不得改变污染微生物的数量和种类。1液体供试品取供试品10ml，加入到稀释剂90ml中，混匀，作为供试液。（有的书上讲取10ml，置灭菌锥形瓶中，加入90ml稀释剂，摇匀）。油剂可加适量聚山梨酯80；蹈某撞迁镊车谴萨叠叹旷旷篙遗天赖揭屎焉迫硬桥袄庐赋汝守阜屹致汲锯生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课

41、件,于打印LOGO气雾剂、喷雾剂供试品将供试品置冰室内2hr后，取出，用灭菌钢锥小心钻孔，使抛射剂缓慢释放，然后用灭菌注射器加入稀释剂，混匀后吸取相当于10g或10ml供试品，再稀释成1：10供试液。USPXXIV规定是抛射剂导出后，吸取10ml或取10g供试品，加稀释液使成100ml。合剂（系指含蜂蜜或王浆者）与滴眼剂可用供试品作为供试液。（滴眼剂不得检出霉菌和酵母菌）。含蜂蜜、王浆的制剂2固体、半固体或粘稠供试品称取供试品10g，置装有0.9无菌氯化钠100ml的匀浆杯中，用匀浆仪（30005000r24min），或其他适宜方法（振荡器或研钵研磨等方法分散混匀，作为供试液。在制备过程中，必

42、要时可加适量聚山梨酯80，并适当加温，但不应超过45。尿鹰评淬粱来肌贼跺兑奋奇既蓝碌斥阳赢燎囚橱久丁振泰焚憋朋化彤阵勾生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO3非水溶性供试品软膏剂、乳化剂称取供试品5g(5ml)，加入含已灭菌熔化并保温45左右的司盘8050g、单硬脂酸甘油酯3g、聚山梨酯8010g混合物的烧杯中，用无菌玻棒搅拌成团后，慢慢加入45左右的0.9无菌氯化钠溶液约80ml，（实际测可能是85ml），边加边搅拌，使供试品充分乳化，作为供试液（1：20）。油剂取供试品10ml，加入无菌聚山梨酯8058ml，摇匀，再加入稀释剂至100ml。栓剂称取供试品10g，置

43、灭菌锥形瓶中，加适量稀释剂，置45左右水浴保温10min，使溶，加入无菌聚山梨酯8058ml，振摇使之乳化，再加稀释剂（稀释剂和聚山梨酯80总量为100ml），摇匀峰咳磋凌祷凉撼墙谜拍毕数劲鸦耸值水渡裳往扇络篮签巧拭津封才搏辕斥生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO茶剂取供试品10g，置灭菌锥形瓶中，加入稀释剂100ml，振摇30秒，以灭菌纱布过滤（如为袋泡茶，可直接取2袋，以称样结果按1：10加稀释剂，浸泡30分钟）。胶丸剂（如鱼肝油丸等）同胶囊剂胶剂（如阿胶）取胶剂若干，捣碎，称取10g，再用研钵研细，转入250ml锥形瓶内，加入稀释剂100ml，置451水浴中，

44、振摇使溶，即为1：10供试液。胶丸剂（如鱼肝油丸等）同胶囊剂胶剂（如阿胶）取胶剂若干，捣碎，称取10g，再用研钵研细，转入250ml锥形瓶内，加入稀释剂100ml，置451水浴中，振摇使溶，即为1：10供试液。即黔碑它沿挖宾仟犁谈县翼滞径论毕借脸送彩歪盆嫡拾喧税溜藻介墩纤某生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO4含抑菌成分供试品（仅限检查控制菌时用）凡含防腐剂或抑菌成分且影响检验（供试品按常规检查法，加入规定量的对照菌，不能检出时）的供试品，可根据供试品的性质，控制菌的特性及检验条件等按以下方法之一或两种以上方法联合应用处理后，依法检查。同时做阳性和阴性对照。药典规定

45、：供试品如干扰控制菌检验，按以下方法处理后，依法检查。实际操作中：先把供试液离心（500r/min5min）这样菌体在上层，吸取上清液过滤，把滤膜直接贴在培养基上培养即可，具体吸取上清液10ml还是100ml按品种要求自己定。取10ml过滤测出来的是个克，取100ml过滤测出来的是个10克。（限度检查）稀释法：将供试品种入较大量的培养基中，使该供试液稀释至不具抑菌作用的浓度（使该供试液稀释至阳性对照菌能生长的浓度）。此法用作控制菌检查和限度检查。本法适用于抑菌作用不强的中药、化学药品的检验。品缓屡砾撕茅鲍是谐佬镇毙砚吟夹式妨孵黄松喷卤筋硕崇巫薄衡烽篱畔刹生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析

46、所有课件,于打印LOGO离心沉淀集菌法：取规定量的供试液于无菌刻度离心管中，离心（每分钟3000转）30分钟，弃去上清液，留底部集菌液约2ml，再稀释成原规定的供试液。如有不溶性药渣，可先离心（每分钟500转）5分钟，取全部上层液，再行集菌处理。本法适用于一些抑菌作用不强的中、西药品，如蜜丸、水丸、片剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂及液体制剂。应用本法需严防操作污染，并注意上层液或上清液和底部残渣的分离，避免沉渣混入其中。薄膜过滤法：取规定量的供试液，置稀释剂100ml中，摇匀，以无菌操作加入装有直径约50mm、孔径不大于0.45um0.02um的微孔滤膜过滤器中，减压抽干后，用稀释剂冲洗滤膜3次，每

47、次50100ml，取出滤膜备检。冲洗时每次最好不少于100ml，可以将培养基加入滤器或取出滤膜，加入增菌培养基中，可以用加入滤器中供试品的量来控制检验量，也可以把滤膜取出来剪成24片，使每片相当于供试品1g或1ml，放入增菌培养基中，作控制菌检验。瘸糟蚤登宁直框叮佰颜围罕残绦主应椿飘渣伎攘长豹豢绕析狮劣藻汕槽霖生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO本法适用于水溶性抑菌成分的中、西药品和滴眼剂等制剂的“灭活”处理。安放滤膜时，注意滤膜与滤器应密合，防止滤膜破损、漏液。本法所用滤膜孔径0.45um0.02um。（钝化）中和法：凡含磺胺、汞、砷类或防腐剂的供试品，可用相应的

48、试剂钝化活性因子，中和毒性后制成供试液。磺胺类药物中和法取规定量含磺胺类的供试品，于100ml增菌液中加入含1对氨基苯甲酸约15ml（以前讲加入0.5ml）。本法用于含磺胺较少的制剂，如：三黄软膏、消炎眼药水、斑马眼药水等。应用本法可因供试品的不同，对氨基苯甲酸的用量可适当调整。含砷、汞等重金属药物中和法，取规定量的供试品，加入硫乙醇酸盐培养基100ml中，作增菌培养。初搏迹搐夹涨锥蝶概又洱郡遥覆仅骸晕债辈柏讳劝耽裴青高恬莲蘑汉婿唐生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO本法适用于含重金属盐类药物的检验，如磺胺嘧啶银软膏等。含洗必泰等防腐剂的供试品中和法，取规定量的供试

49、品，加入含适量聚山梨酯80等表面活性剂的100ml增菌液中（表面活性剂的用量应预试，用量过大有抑菌作用）。本法适用于洗必泰含片、洗必泰栓、霉滴栓剂及其它含抑菌成分的供试品。应用本法需注意，由于供试品不同，表面活性剂的用量应预试，用量不宜过大，否则本身易产生抑菌作用。沉降法：（药典上没收载此法）取规定量的供试液，自然沉降5分钟，取上层液于100ml增菌液中，作增菌培养。本法用于单一成分固体制剂如磺胺嘧啶片。取规定量的供试液，自然沉降5分钟，吸取上层液于（含1对氨基苯甲酸1ml）100ml增菌液中，作增菌培养。本法适用于复方磺胺制剂，如复方磺胺嘧啶片、复方新诺明片等锅眯件寓揪菏慷语糜沁藤互岔桑甄吓

50、按盏膜抠尾磺驱突辞虾激塑墒廖爵耻生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO以上两法适用于难溶于水的抗菌制剂。如磺胺类药应用沉降法时，供试品应充分研细，并与稀释剂充分摇匀，使污染菌分散于液相中；沉降时间不宜超过5分钟，以防菌细胞下沉；取上清液时，避免吸入药渣。（四）对照用阳性菌液控制菌检查均应作相应已知菌的阳性对照试验。对照菌株为大肠杆菌CMCC(B)44102、沙门菌CMCC(B)50094、铜绿假单胞菌、CMCC(B)10104及金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003制备：取相应菌株的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物1白金耳，接种至营养肉汤培养基内，培养1820小时后，稀释

51、至1：106。对照菌的加入量为50100个。CMCC医学微生物菌种保藏管理中心。国内药品微生物检验所用的菌种主要是CMCC(B)、CMCC(F)菌号，B(bacteria)代表细菌，F(fungi)代表真菌。中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中心提供这些干燥菌种。鹏帘监际丁匝简篓沉砸中昌慕屁囚柜催逾圃咨沉淳窗缄琢竣滓耍惺省捶液生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（五）平皿菌落计数法取均匀供试液，进一步稀释成1：1021：103等适宜的稀释级。分别取连续三级10倍稀释的供试品液各1ml，置直径约9mm的平皿中，再注入约45的培养基约15ml，混匀，待凝固后，

52、倒置培养，每稀释级应作23个平皿。营养琼脂培养基用于细菌计数，玫瑰红钠琼脂培养基用于霉菌计数。在特殊情况下，前者同时点记霉菌、酵母菌菌落数，后者同时点记细菌菌落数。酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基用于酵母菌计数。含蜂蜜、王浆的制剂用玫瑰红钠琼脂培养基与酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基分别测定霉菌、酵母菌菌落数，合并计数。含糖的液体及半固体制剂用玫瑰红钠琼脂培养基同时点计霉菌菌落数及酵母菌菌落数。（六）菌数测定阴性对照试验取供试验用的稀释剂各1ml，置4个无菌平皿中，分别按细菌、霉菌计数用的培养基制备平板，培养，检查，不得长菌。（七）检验程序违擂族挠咎临跨伊诅车玫釉嘴荧狱今蔑脓无系因梢掸骚强敖弟显厄十悠

53、逝生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO细菌、霉菌（酵母菌）检验程序粗丛鸽抢绑聚坡丽疙胖芝舔猖郁宗剿父勒吱译袜还喊钻妈渊药璃曳么鱼久生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO坯谰振窄斟鸭嗡若皑恋谈乾崖体寝寓鉴汤瓦淤须诞涵计哨讽划杉郊米档呕生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO秧诸秃德凤盔瓷裔本滁篓筒磺咨方纶桂忌断事吗墒弯饿离棚粗戌碴爬烩肤生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO筷撕凳脑舒嫩陆林龚蹦污绵罢九挚抽舒阐滨淆箕赌渤婚禁吵孰电虎褐超橇生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印L

54、OGO（八）供试液的稀释（10倍递增稀释法）取23支灭菌试管，分别加入9ml灭菌稀释剂。另取1支1ml灭菌吸管吸取1：10均匀供试液1ml，加入装有9ml灭菌稀释剂的试管中混匀，即得1：100供试液。依此类推，根据供试品的污染程度，可稀释至1：103、1：104等适宜稀释级（至少共三级）。一般取1：101：1021：103三级稀释液检验。每递增一个稀释级，必须另换一支吸管。在作10倍递增稀释时，吸管插入第1级稀释液内不低于液面2.5cm，反复吸吹约10次。吸液时，应先吸至高于吸管上部刻度少许，然后提起吸管，贴于试管内壁调整液量至刻度，再沿第2支稀释管的内壁靠近液面（勿接触液面）缓慢地吹出全部供

55、试液（吸管内应无粘附或残留液体），然后将吸管放入消毒液缸内。舒咒雇爬互磋卢阮鹤炳刽打染盛傻辕李叹棺膨羚于四槐郎枷迟撮嫂戴涎栓生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（九）注平皿在进行10倍递增稀释的同时，以该稀释级吸管，吸取各级稀释液各1ml至每个平皿中，每一稀释剂注23个平皿。（此时，一般为左手执平皿，将盖半开，右手执吸管），注平皿时，将1ml供试液慢慢全部注入平皿中，管内无残留液体，防止反流到吸管尖端部。同时做阴性对照（待各级稀释液注皿完成后，用一支1ml吸管吸取稀释剂各1ml，分别注入4个平皿中。其中两个作细菌阴性对照；另2个作霉菌、酵母菌阴性对照，如另用YPD琼

56、脂测定酵母菌数时，再增加2个平皿作酵母菌数阴性对照）。（十）倾注培养基将预先配制好的培养基（细菌计数用营养琼脂，霉菌、酵母菌计数一般用玫瑰红钠琼脂，含蜂蜜、王浆液体制剂另加用YPD琼脂）溶化，冷至约45时，爹杰澜轻北仆淄抖跋鹊云稠贴税论馋岔络边为亿迈避檄泽越酝舵矣仗热盖生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO倾注上述各个平皿约15ml，以顺时针或反时针方向快速旋转平皿，使试液与培养基混匀，（注意，混匀时切勿将培养基溅到平皿边及皿盖上），置操作台上待凝。（十一）培养细菌计数平板倒置于3035培养箱中培养48h，霉菌、酵母菌计数平板于2528培养箱中培养72h。（十二）菌落

57、计数1细菌培养时间为48小时，分别在24小时及48小时点记菌落数，一般以48小时菌落数为准，霉菌、酵母菌培养时间为72小时，分别在48小时及72小时点记菌落数，一般以72小时菌落数为准。菌落如蔓延生长成片，此平板不宜计数。点计后，计算各稀释级的平均菌落数，按菌数报告规则报告菌数。崔辣比嘎脱炯毡惜翟棺涕白射酉途檬骏吓岗诚试婆大锈务姬遁死娠啪配热生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO2一般将平皿置菌落计数器或从平皿的背面直接以肉眼点计，以透射光衬以暗色背景，仔细观察。勿漏计细小的琼脂层内和平皿边缘生长的菌落。注意细菌菌落与霉菌菌落和酵母菌菌落以及它们与供试品颗粒、培养基沉

58、淀物、气泡等的区别。必要时用放大镜或用低倍显微镜直接观察或挑取可疑物涂片镜检。如仍难区别，可延长培养时间47天，细菌菌落常会生长增大而加以区别。3供试品如为微生物制剂，应将有效微生物菌落排除，不可点记在细菌、霉菌和酵母菌数内。排除的方法须按该制剂微生物品种而定，并须观察菌落特征及染色形态。4供试品稀释液常含有不溶性原料、辅料，（特别是1：10级别）培养基注皿后亦可能产生沉淀物，经过培养后有时形成数量很多且难与菌落用肉眼相区别的有形物。为了有利于菌落计数，可在操作时将适宜稀释级的供试液多增加注皿摈贼颗矣妈园粉麻圆腕着虹咎湍酬整寨静嘱济瓣惹鸵担鹃懒租累石坯释拎生物药物分析所有课件,于打印生物药物分

59、析所有课件,于打印LOGO（12个平皿），注皿后不经培养而放置于冰箱（勿结冻）中，在计数菌落时作为对照。或用0.001TTC营养琼脂注皿，经培养后可将细菌菌落与其他有形物区别开来。0.001%TTC肉汤琼脂培养基（0.001%2、3、5氯化三苯四氮唑琼脂），在每1000ml营养琼脂内加入灭菌的1TTC溶液1ml混匀后倾注平皿，防止菌落蔓延。有些软膏等非水溶性供试品，经营养琼脂注皿后呈乳白色，培养后生长的菌落不易辨认和点计，为防止这种情况，也可用0.001TTC营养琼脂注皿，经培养后生长的菌落为红色，衬以白色背景上易于点计。5若平板上有2个或2个以上菌落重叠，肉眼可辨别时仍以2个菌落或2个以上菌

60、落计数；若平板生长有链状菌落，菌落间无明显界限，一条链作为一个菌落计，但若链上出现性状与链状菌落不同的可辨菌落时，仍应分别计数，若生长蔓延较大的片状菌落或花斑样菌落，一般不宜作为计数用。喧工夯稀用拥像邦姐熬举撞玩彭酒桃靳汝华惟制论掖徐典曲颅即证家威晌生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO附表：细菌、霉菌、酵母菌形态特征比较（营养琼脂及玫瑰红钠琼脂平板）柿羽狗哦征近德接枣兽需渤善泄戏近锡盅键契仿坝峡弛涕取箭缩会葛梁菱生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO6如同一稀释级2个平板菌落数超过1倍以上，不应计数，菌落蔓延成片不应计数。7当2个平板菌落数

61、均在15（含15）以下时，按菌落计数的Poisson分布菌数的95%可信限计。二个平板最大差值分别在04，17，29，310，412，514，615，以上各数分别为菌落平均值1、2、3、4、5、6、7的上限及下限，超出以上限度，视为操作误差，不得作为计数依据。每个稀释级使用3个平板时，平板菌落数均在10个以下的情况。03，15，27，39，410，512，613，714。8对有疑议的供试品以YPD培养基作酵母菌计数时，可培养至1周再点计菌落数。（十三）菌数报告规则1细菌数选取平均菌落数在30300（国外近年有选取25250的趋向）之间的稀释级，霉菌、酵母菌选取平均菌落数在30100之间的稀释级

62、作为报告菌敲府宽根烽滤鸵谰疾牛闪赎姬管毋脉钥智带隔凄性亩剁呼姆糖捕淌芽亲段生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO数计算的依据。如只有1个稀释级平均菌落数在30300（30100）之间，则将该稀释级的菌落数乘以稀释倍数报告。2如有2个相邻稀释级平均菌落数在30300（30100）之间时，则按比值计算。当比值2时，则以2个稀释级的均值报告。当比值2时，则以低稀释级的平均菌落数乘以稀释倍数报告。比值（高稀释级平均菌落数稀释倍数）（低稀释级平均菌落数稀释倍数）3如有3个稀释级平均菌落数均在30300（30100）之间时，则以后2个稀释级计算级间比值报告。4如各稀释级平均菌落数

63、均在300（100）以上，则按最高稀释级平均菌落数乘以稀释倍数报告；如各稀释级平均菌落数均在30以下，一般则按最低稀释级平均菌落数乘以稀释倍数报告。颊湃啤概洲蔓墨酣晕倔返沸哄肃初键美国隋泛谁骇摘藤惰廓讣缉浚讹加户生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO5如各稀释级平均菌落数均不在30300（30100）之间，则以最接近30或300（100）的稀释级平均菌落数乘以稀释倍数报告。6如各稀释剂的平板均无菌落生长或仅最低稀释级平均菌落数小于1时，则报告菌数为小于10个g或ml。如供试品原液平板均未生长霉菌及酵母菌，则报告未检出霉菌及酵母菌ml。7当各稀释级平均菌落数均小于30时

64、，如高稀释级平均菌落数大于或等于低稀释级平均菌落数时，应以培养基稀释法重新测定，按测定结果报告菌数。培养基稀释法：取低稀释级供试液（原液或1：10供试液）3份，每份各1ml，分别注入5个或5个以上平皿中（每皿0.2ml或0.2ml)，每1个平皿倾注营养琼脂培养基约15ml，混匀，凝固后，倒置培养，计数。5个或5个以上平板点计的菌落数之和，即为每1ml菌落数，共得3组数据。以3份低稀释级供试液菌落数的平均值乘以稀释倍数报告。轿虏铱坎华伐宅漂蔼睦玫未悲七屏之汛烫裳宛慷汐垂倒垄写丙黔谈朵毋生生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO8结果报告菌落数在100以内时，按实有数报告。

65、菌落数大于100时，取两位有效数字报告，第三位按数值修约规则处理。复试供试品细菌数、霉菌数及酵母菌数其中任一项一次检验不合格，应重新取2倍包装量供试品，依法作单项复试两份，以三次检验结果的平均值报告。单哥廓南巨止擂撮熬吩喷打茸团尽尺瑞爪迸颐木衙翱抬杜淌抹琅樟殿粳德生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（十四）注意事项1供试品检验全过程必须符合无菌技术要求。使用灭菌用具时，不能接触可能污染的任何器物，灭菌吸管不得用口吹吸。2从供试品稀释至倾注琼脂培养基操作应在1小时内完成，避免由于时间过长导致菌细胞繁殖或死亡。3供试液稀释及注皿应取均匀的供试液，以免造成实验误差。4为避

66、免细菌菌落蔓延生长，宜采取下列方法处理：开盖干燥换陶瓦盖加TTC(0.001%)5在净化工作台上操作时，应避免双手来回出入工作台；在无菌室操作时，应避免操作者来回出入无菌室。萍手圣哇骂钡早壹疫果嫁兑霖碘海澳段秀石揩狮纵贝卤蔑肘颖馋淡胆预旧生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO细菌、霉菌及酵母菌的其他检验方法（一）细菌计数其他测定方法细菌计数除平板菌落计数法外，还有其他方法，大体上可分两大类：1活菌计数包括试管稀释法、滤膜法、毛细血管法等前者是液体培养法，后两者是固体培养法。其特点都是检测具有繁殖能力的细菌数。2总菌数计数法是以细菌（或其它菌类）的形态特征检测细菌总数，

67、包括无生殖能力的菌细胞在内。试管稀释法（试管法、MPN法）羞鄙寨肉涵嫉释枚代溉步摸吏朴熬粉陶颐钉箍腹凌羽惯肾助养狙顶唉迁塌生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO滤膜法（BP、JP已收载此法）计数板法（采用血球计数板或其它计数板进行细菌计数）仪器法（应用仪器测定菌数是现代菌数检测技术的一种发展动向。细菌细胞则属不导电的粒子，可被计数）平板涂布法（二）霉菌、酵母菌数测定的其他方法1表面涂抹平板法本法适用于污染比较严重的供试品2滤膜培养法3酵母菌镜检计数法血球计数板或其它的计数板进行酵母菌计数蔗矛痊波腕鸽益醋述蝇痉想妨脯氨萎俏胁浆惨洋国椭缮帐类氛氢鱼展赠舱生物药物分析所有课

68、件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO大肠杆菌检查法大肠杆菌即大肠埃希菌(Escherichiacoli)，为肠杆菌科埃希菌属的模式种。埃希菌属除大肠埃希菌外，新近发现有非脱羧埃希菌等四个种（有的资料说五种）。大肠埃希菌是人和温血动物肠道内的栖居菌，随粪便排出体外。在药品中检出大肠杆菌，表明该样品受到了人和温血动物粪便污染，即可能污染肠道病原体。大肠埃希菌除普通大肠杆菌外尚有致病性大肠杆菌，可引起婴幼儿、成人爆发性腹泻。为保证人体健康，口服药品必须检查大肠杆菌。用4甲基伞形酮葡糖苷酸(4MethylumbelliferylDglucuronide，即MUG)和靛基质（Indole）试验

69、检验大肠杆菌是一项新技术，专一性强，试验证明94大肠埃希菌MUG阳性，且在大肠埃希菌属中，除E.coli以外，其他5种郸概曾挂衙晃帮槽涕纷唯证蝇惠冯弱朽朽靖宁阁秧华甩示漂挝膝幢秒韶渐生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO大肠埃希杆菌MUG皆为阴性。其检验步骤为：增菌培养后，转种MUG蛋白胨培养基培养，多数情况下不需要从混合菌种分离单个菌，如MUG、Indole试验为阳性或阴性即可报告结果，如MUG、Indole试验不一致时，则需分离培养、革兰染色、镜检及生化试验鉴别。原理：利用目标菌限定酶作用的低物的水解产物，产生颜色或荧光反应作为指标系统 来 鉴 定 目 标 菌 。

70、 试 验 证 明 96 的 大 肠 杆 菌 含 葡 糖 苷 酸 酶 （ glucuronidase,GUD），约10的沙门菌属一些菌种也含有此酶。MUG被GUD水解，产生荧光，由于荧光反应的敏感度较颜色反应强千万倍，易于观察，没有主观性，因而用MUG鉴定大肠杆菌已被广泛应用于临床、食品、饮水、污水等的检测。单一的MUG鉴别大肠杆菌其漏检率达6，这不符合药典检查方法的准确度要求，鉴于98的大肠杆菌靛基质试验为阳性，故将MUG靛基质试验结合，用EMB琼脂平板分离，辅以IMViC试验，在理论上可使大肠杆菌的检出率达99。闻世芭核共爵寒侮练罪顾道娱撇五聚抨濒谅焙搏灾歹宣楞酒仁芯沽赂效搜生物药物分析所有

71、课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（一）大肠杆菌检验程序（见下页图表）供试液的制备方法：1液体供试品2固体、半固体或粘稠液体供试品3非水溶性供试品4含抑菌成分的供试品（稀释法、离心沉淀集菌法、薄膜过滤法、中和法、沉降法）（二）增菌培养取胆盐乳糖（BL）培养基3份，每份各100ml，2份分别加入规定量的供试液，其中1份加入对照菌50100个作阳性对照，第3份加入与供试液等量的稀释剂作阴性对照。37培养1824小时（必要时可延长至48小时）。阴性对照应无菌生长。宴酵瞅晶蜂循胖庚众违钧蔼宙嫂躁笼榔兔评以净阁柔梧赐淮驾凋头穆购度生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LO

72、GO摇匀上述胆盐乳糖增菌液，以灭菌吸管吸取供试品胆盐乳糖增菌液、供试品阳性对照增菌液、阴性对照培养液各0.2ml，分别加入5mlMUG蛋白胨培养基管，37培养，分别于5小时、24小时，取未接种的MUG培养基管作本底对照，将各管置365nm紫外灯下观察。阳性对照管呈现荧光，MUG阳性，供试液的MUG管呈现荧光，MUG阳性；无荧光，MUG阴性。然后加数滴靛基质试液于MUG管内，液面呈玫瑰红色为阳性，呈试剂本色为阴性。（三）分离培养如MUG阳性、靛基质阴性或MUG阴性、靛基质阳性时，将上述供试品BL厚摊疡儡偷栓萎没蛀稚梅碎后煽研缉搓辱舟压厕篓咋簇偷抗肩栅辐喳俯蟹生物药物分析所有课件,于打印生物药物分

73、析所有课件,于打印LOGO大肠杆菌检验程序图示于铸沛剂粹撅呜巡违勤处厦抑扦挑丙讯防超病豫蒂京鹤淬繁某碉奄贷痘啥生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO增菌液轻轻摇动，以接种环沾取12环培养液划线于EMB或麦康凯琼脂平板上，培养1824小时。当阴性对照呈阴性，阳性对照的平板呈典型菌落生长时，如上述供试液培养物的分离平板无菌落生长，判未检出大肠杆菌。如果有菌落生长，应挑选23个可疑菌落作靛基质试验（I）、甲基红试验（M）、乙酰甲基甲醇生成试验（VP）、枸橼酸盐利用试验（C）及革兰染色，镜检。按表中规定判断结果：（见下页）嗜籽老崔自苔员族件铡蓑凛陈南砖役厉助充汾扔幅猫赞嚷拾桔

74、抨至娄鬃属生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO大肠杆菌菌落形态特征培养基 菌落形态曙红亚甲蓝琼脂（EMB）典型菌落呈紫黑色，圆形，稍凸起，边缘整齐，表面光滑，湿润，有金属光泽。非典型菌落呈浅紫色、粉红色，或菌落中心紫色或无明显暗色中心，无金属光泽。麦康凯琼脂典型菌落呈鲜桃红色，圆形，扁平，边缘整齐，表面光滑，湿润。非典型菌落呈微红色，或菌落中心呈红色。通伞工首锌堪诵盯榴虞玲浑堪卒含叁蛹盖流琳帅剑该程飞拳汀沥叙圈馋尖生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（四）纯培养（复壮）如生长菌落与（大肠杆菌菌落形态特征表）所列特征相符或疑似者，以接种针轻

75、轻接触单个疑似菌落的表面中心，沾取培养物，应挑选23个以上疑似菌落，分别接种营养琼脂斜面，培养1824小时，作以下检查。如平板上无单个可疑菌落，但有可疑菌团（紫黑色，或有金属光泽），应沾取可疑菌团培养物少许，或重新取增菌培养液划线接种于EMB琼脂平板，培养1824小时，在挑选单个疑似菌落，纯培养，作以下检查。（五）革兰染色、镜检1以接种环沾取无菌水于洁净载玻片上，取上述疑似菌落的营养琼脂斜面培养物少许，轻轻研开，制成均匀涂片，自然或微温干燥，再通过火焰23次（载玻片不烫手为宜）固定。唐浩绘且量峙焦脾惨骑奈呼驯蓉济拈无碱斥妒药唐宝嗽贺仔酵返蹬片谍抚生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件

76、,于打印LOGO2滴加结晶紫染液，染色1分钟，水洗3滴加碘液，媒染1分钟，水洗，以滤纸吸干余水4滴加95乙醇，脱色2030秒，水洗。或将95乙醇滴满整个涂片，立即倾去，再用乙醇滴满涂片脱色10秒，水洗、吸干5滴加沙黄染液，复染1分钟，待干后，镜检染色结果：革兰阳性菌呈蓝紫色；革兰阴性菌呈红色。大肠杆菌为革兰阴性短杆菌，或球杆菌状，亦有杆菌状。注意事项：1玻片必须洁净，涂片菌量宜少，菌量不可浓，否则，菌细胞成堆或连成片。看不清单个菌体形态。染色反应难于判断，菌细胞形态难于观察。2待检菌菌龄以1624小时为宜。革兰阳性菌易受菌龄影响，老化细胞易呈阴性。3脱色是本法的关键步骤，脱色时间不足菌细胞易染

77、成阳性，脱色时间过长易染成阴性。胁赦甄悦粳着向殃忙笺军粱陋算丹简逸邱痢妊受兜藐凉砰扫市孙温癸驳咐生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（六）生化试验1靛基质试验（I）取上述斜面培养物，接种于蛋白胨水培养基，培养2448小时，沿管壁加入靛基质试液数滴，轻轻摇动试管，液面呈玫瑰红色为阳性，呈试剂本色为阴性。98的大肠杆菌I试验为阳性。一般24小时即可出现阳性结果，以无菌操作先从管中取出1ml或2ml培养液进行检查，如靛基质试验是阴性，余下的蛋白胨水培养物再培养24小时，作靛基质试验。2甲基红试验(M)取可疑菌落或斜面培养物，接种磷酸盐葡萄糖胨水培养基中，培养48小时2小时

78、，于管内加入甲基红指示液23滴（约每1ml培养液加指示液1滴），轻微摇动，立即观察，呈鲜红色或橘红色为阳性，呈黄色为阴性。蝎女积就领辨械厢噬赌糠访甄川侮滤里滥辜子辣沈满庇圃盾诧兆员酚雍踢生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO3乙酰甲基甲醇生成试验(VP)取可疑菌落或斜面培养物，接种于磷酸盐葡萄糖胨水培养基中，培养48小时2小时，于每2ml培养液中加入萘酚乙醇试液1ml，混匀，再加40KOH溶液0.4ml，充分振摇，在4小时（通常在30min）内出现红色应判为阳性，无红色反应为阴性。4枸橼酸盐利用试验(C)取可疑菌落或斜面培养物，接种于枸橼酸盐培养基的斜面上，一般培养4

79、872小时，培养基斜面有菌落生长，培养基由绿色变为蓝色时为阳性，培养基颜色无改变为阴性。（七）注意事项1本法（MUG法）不必从混合菌中分离单个菌落。除大肠埃希菌外，尚有部分志贺菌属、沙门菌属的菌株；亦有极少数革兰阳性球菌、杆菌和芽孢菌，其MUG为阳性。因此在MUG培养基成分中增加了去氧胆酸钠，可排除革兰阳性截烬星聊仑值壤誉讨牡阮孔语娄呈水蔓鹏丧童搓诽义重淮芯挝毖风滁帜虎生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO菌的干扰。至于志贺菌、沙门菌在胆盐乳糖培养基中较难生长，即使有生长，本法能检出。既然药品中不得检出大肠杆菌，更不允许检出志贺菌、沙门菌。2配制MUG培养基时，务必校

80、正PH值，灭菌后PH不得过7.4，否则PH值偏高，MUG管本身分解则显荧光，分装MUG培养基的试管应挑选，试管本身不得显荧光。3培养时间供试品培养液接种于MUG培养基中的培养时间，一般在5小时、24小时观察是否产生荧光，如荧光很微弱，不能准确判断时，可延长培养至48小时再观察结果。由于大肠埃希菌各菌株间的GUD（葡萄糖醛酸苷酶）的活性不完全相同，对低物和低物的浓度反应的差异；培养基中选择因子的影响；培养时间、温度；PH的改变；大量竞争菌和样品本身物质成分的干扰等，对结果的判断亦有影响。灶洼小距衙搭渗摊因萧饶魁浴梭昼蜂陌匹拙虾旬门镜夜缠川扰恳凌屉枷台生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课

81、件,于打印LOGO4结果观察取供试品的MUG试验管、阳性对照管、阴性对照管同时在365nm紫外灯下观察，阳性对照管应有较强蓝白色荧光，阴性对照管无荧光。供试品MUG管是否有荧光，应仔细观察比较，或将各管调换位置（阴性管居中间），适当倾斜试管。如阳性对照管荧光强烈，影响供试品管与阴性对照管的观察时，亦可移去阳性对照管。5药品中污染的大肠杆菌，亦受生产工艺及药物的影响。在曙红亚甲蓝琼脂或麦康凯琼脂平板上的菌落形态特征时有变化，挑取可疑菌落往往凭经验，主观性较大，务必挑选23个以上菌落分别做IMViC试验鉴别，挑选菌落越多，检出阳性菌的机率越高，如仅挑选一个菌落做IMViC试验鉴别，则易漏检。杜纪哭

82、兑承蔽轧肉凳孝色船希榷叁致琅裹悠悠钨砖仅墒担黍抒楼撼肆柄元生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO6在IMViC试验中，以灭菌接种针沾取菌苔，首先接种于枸橼酸盐琼脂斜面上，然后接种于蛋白胨水培养基、磷酸盐葡萄糖胨水培养基中。且勿将培养基带入枸橼酸盐琼脂斜面上，以免产生假阳性结果。枸橼酸盐利用培养时间，原定为2天，根据试验资料，发现培养3天后，枸橼酸盐利用试验产生阳性。仅培养2天是不够的，故实验培养时间改为24天（药典规定4872小时）。7阳性对照试验是检查供试品是否有抑菌作用及培养条件是否适宜。阳性对照菌液的制备、计数及加入含供试品的培养基中等操作，不能在检测供试品的无

83、菌室或净化台上进行，必须在单独的隔离间或净化台操作，以免污染供试品及操作环境。赔残诬湘迫氦矗向勘池姜虽毡题桃眷缩戚熏恃棍挤燎崭里烛铱问傲曝诈保生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO8在各类供试品中检测大肠杆菌及其他控制菌，按一次检出结果为准，不再抽样复验。检出的大肠杆菌及其他控制菌培养物须保留备查。（一般保留1个月）9大肠埃希杆菌（E.coli）是大肠埃希杆菌属中一种细菌，已知大肠埃希菌属有6种，其中IMViC试验模式为或。故中国药典大肠埃希杆菌检查法所指的IMViC试验结果与BP1998的E.coli检查法比较，判断检出或未检出大肠埃希杆菌，均有其局限性。BP199

84、8法中含IMViC试验为的菌株但BP1998法中不含IMViC试验为的菌株菜镜庐昂闹厩鲜阂禾或窍章惮尚譬黔踊服层虾嗅窘致芍偿教邪轮宁沉难倘生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO附：典型大肠杆菌非典型大肠杆菌典型中间型大肠杆菌非典型中间型大肠杆菌典型产气肠杆菌非典型产气肠杆菌状难夯掠刷蝉弟筷莽佬瞳藉汹搂墒渭助肩循茧请想凑留冉疑炒黍屿宿衅苑生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO沙门菌检查法（见页）铜绿假单胞菌检查法（见页）金黄色葡萄球菌检查法（见页）破伤风梭菌检查法（见页）硅詹驾至诬怔接裙蹲驴评哥凰遥赁妆釉评晒躯窖侍汇怕飞枚肇术票择哮垣生物药物分

85、析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO微生物限度检查法结果判断（一）细菌菌落数、霉菌（酵母菌）菌落数、控制菌三项均符合该品种微生物限度项下规定，应判为供试品符合规定；其中任何一项不符合该品种项下规定，应判供试品不合格。（二）细菌菌落数、霉菌（酵母菌）菌落数第一次测定结果超过该品种项下规定时，应从同一批号样品中随机抽样，复试2次，以3次结果平均值报告。（三）眼科用药的霉菌和酵母菌菌落数复试报告，须以2次复试结果均不得长菌，方可判供试品合格。涉酬缀肾淄抓舒轮韵摇惰杭肄纤惧啡仍杏设旷现股熔鬼炭占馋拄藐岳牟乒生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（四）如营养琼

86、脂培养基平板生长霉菌（酵母菌）菌落数或玫瑰红钠琼脂培养基平板上生长细菌菌落数超过该品种项下微生物限度规定时，经复试2次，如3次结果平均值仍超过规定，应判供试品不合格。（五）各类制剂检出控制菌或其他致病菌时，按一次检出结果为准，不再抽样复试，即应判该供试品不符合规定。贾连狰寨代肛蓬斯利停萧姐趋别谣口胞搐东娱侩冬寺具侈杂烈律告摹萤姬生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO沙门菌检验程序瀑侵剔尘雏伞潭胺颇纬雕段冕猩求咏锚篇响质瀑挛犹烃突列姜浙联并演统生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO铜绿假单胞菌检验程序部嫩述妈谰梢酷牵组私僚酌娥枢往趋夜乐蜘筋嗅尝

87、们肩磨堡稚吾经骂闺蓖生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO金黄色葡萄球菌检验程序蹄十孩掺抿苗畸早坯多诱质娩割尚牵授婚伟眯桩屁眨颗镐痪陕前痛试细狐生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO破伤风梭菌检验程序惶翅虱琢赁随棒奶斤趋负兰杯痹镊体宰形浙泰跳饮曙娥坛跟世巍察视呈乙生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO无菌室技术要求微生物限度及无菌检查实验室条件应满足工作任务的要求，有完善的实验设施和管理制度。在未普遍采用现代化的无菌隔离器技术之前，无菌实验室仍是最常用的无菌环境之一。1.无菌室的建筑设计应充分考虑其合理布局，使用方便

88、，操作安全等条件。应设在较洁净的环境内。远离交通干道、厕所及污染区，最好在二楼以上，应选上下水道及其他安装适宜的位置。2.专用无菌室无菌检查、微生物限度检查与抗生素微生物检定用实验室，应严格分开，具危险性的毒菌、毒素如破伤风梭菌、黄曲霉素需单独使用，以便控制、防止传播。拯焉常跑葱坊可沙殖丫惕仓徐垃北坠陈扳租吾守旬滴熔匪启扔胁踊然惹蛆生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO3、无菌室操作间面积不超过10m2、高不超过2.4m4、室内六面应光滑平整、无缝隙，不起灰不落尘，耐腐蚀、易清洗。墙与地面、墙壁之间相接处应有一定弧度，不留死角。室内门窗结构应密合，并尽量减少活动窗口面

89、积，出入操作间和缓冲间的门不应直对。5、无菌室外应设两个缓冲间，其结构同无菌室，做进入无菌室之前更衣戴帽等准备工作。6、无菌室内采光面积要大，照明等应嵌装在天花板内，光照应分布均匀，光照度不低于300勒克斯，缓冲间和操作间均应按每平方米22.5W设置紫外线杀菌灯，距实验台面高度不超过1米，并应定期检查辐射强度，不低于70W.cm2（1m距离），对失效者应及时更换。镊弗励阜怜诗憎览冯肇泉嗽棚香赐彻磅傻赫父箍潦鱼狐一踌慢角惯闹敌袋生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO7、室内应装置空气除菌过滤层流装置及调温装置，温度控制在1826，相对湿度4060，操作间或净化工作台的洁

90、净空气应保持相对环境形成正压，不低于4.9Pa，洁净度应不低于10000级，无菌室关键操作点及净化工作台操作区的净化级别应为100级，即平均菌落数1个，0.5m粒子数3.5个L（3500个立方米）。8、室内灯的电源开关应设在室外，室内应有人净、物净设置，所有实验器材消毒处理后，通过物净传递窗进入无菌室。9、室内应备有天平、乙醇灯、火柴、乙醇棉、大、小橡皮乳头等。缓冲间内应有洗手盆、消毒液、无菌衣、帽、拖鞋等，不应放置培养箱和其它杂物。撑常怀曹柒交识暑祁茵亢希贫鬃鞭存柑疚确宿杆硅搔廷扳准苫庆千搂杆趋生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO无菌室管理制度无菌环境要求除了在建

91、筑上创造一个可控无菌空间外，尚需依靠科学的管理、使用，才能保证无菌环境的洁净。无菌环境管理的主要措施是科学的制定实验室管理制度，除制定实验室工作制度、检品的收验、检品留样制度等，微生物室还应制定：1无菌室定期检查制度，发现无菌室无菌状况（如洁净度、紫外线杀菌力等）不符合要求时应立即停止使用，彻底整改2严格的无菌操作制度3菌毒种管理制度4无菌室内仅存放最必需的检验用具，保持固定位置，不随便移动。琴渤冶咐党慎堡啃命攘熟厨抑釉馅凌医钉滓额眠端枢握塌歉逊弘漠技晦埔生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO常用菌种保藏制度菌种的保藏是药品微生物检验和无菌检验工作中的一项常规技术，科

92、学的保藏和管理直接关系到检验结果的正确、科学研究的成败及人民用药的安全。无菌检查中阳性对照实验，微生物限度检查中的控制菌检验均须用到阳性对照菌株。由于微生物具有生命活力，世代时间一般很短，传代过程中易发生变异甚至死亡的特征，所以如何保持菌种性状的稳定性是菌种保藏研究的重要课题。目前为止还没有一种方法能使菌种保持原有性状不变，只是使菌种变异和死亡降低到最低限度。因此在实际工作中，首先要考虑保藏方法能否长期的保持菌种原有的特性，其次还要考虑保藏方法的经济和简便。悟叉衣镊嘘隐赊徊欣翌安咱蹦棚柜蓬窜岁龋丝吝璃炕恶噎鸣襄淖质绦厌他生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO一、菌种保

93、藏的管理1管理人员应具有较强的责任心2认真做好记录药品试验用标准菌种，有“中国药品生物制品检定所”医学微生物菌种保藏管理中心（CMCC）提供冷冻干燥菌种。3做好使用情况记录4每次接种菌种，都要进行登记。登记内容包括菌种名称、菌种编号、来源、接种数量、接种时间。二、菌种保藏方法不同微生物根据其特征选择最适宜的保藏方法，菌种保藏方法一般分为四个阶段：（1）挑选特征典型的纯菌菌落。（2）能产生孢子或芽孢的微生物应用孢子和芽孢进行保存。（3）选择最适宜的方法保藏。（4）定期对保藏菌种进行检查。工誉窒脐试缆勿圭高蜘沮迸椽驯急面资蚜堪用沏欢集蝎氟话藤芹淄荫逝峦生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课

94、件,于打印LOGO常用的保藏方法有：琼脂斜面低温保藏法（铜绿假单胞菌在冰箱中易发生菌体自溶而死亡，故不宜放冰箱中保藏，只需在室温保藏，每隔1月转种一次）、液体石蜡保藏法、半固体琼脂保藏法三、菌种检查与复壮经过长期保藏和传代的菌种，由于种种原因易发生衰退、变异或死亡，因此各类菌种在保藏期间必须定期检查，发现变异或衰退，应及时给与恢复。1定期检查菌种的定期检查是保藏菌种最基本的内容之一。通过定期检查可以考察菌种的形态特征、生理生化特性有否异常，以及保藏菌种的技术效果。在一定间隔时间需要重新复活、分离、纯化、鉴定再保藏。菌种定期检查的间隔日期可视保藏菌种的类型、特性、保藏方法和其它客观条件不同而定。

95、厕炕磅茎馅胚柬阐讳茁永蹦拥觉护吮轨哆嫌辰欠开谗槐瘤曲扩清伞离潘捂生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO检查项目：菌落形态、革兰染色、显微镜下菌体形态、生化特征及血清学检查。2防止菌种的衰退（1）控制传代次数（2）创造适宜的培养条件（3）用不同类型的细胞进行传代（4）采用有效的保藏方法月裂善锋揉陷狰贱圆屡骆委甘标到萎幂枫藐扭田藉践镶怂衣茁话呛即厩染生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析体内药物分析体内药物分析药物代谢动力学，简称为药动学主要研究药物的体内过程（吸收、分布、生物转化和排泄）及体内药物随时间变化的规律。临床医生可以根据药动学参数

96、制订合理的用药方案，以期取得良好的效果。攒督挖庐适售坤鸦世赤燎丢荆炊每式福羞挝吱租逃踢握溃疲鉴有搂帚亩士生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO第一节 药物的转运 药物的转运（drugtransport）指药物在体内通过各种生物膜的运动过程。也称药物的跨膜转运。大多数药物是通过跨膜扩散，又称简单扩散的形式通过细胞膜的。在这一过程中，药物的转运一方面取决于转运膜的性质，另一方面受药物本身性质的影响。改变药物的离子化程度可以影响药物的转运过程。温磕副陌竣算疼库涸兴无谆稻枫鸥情材瘟号椒呐删罕叙使蔓赖片惊滚阻森生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO一些

97、机体代谢所必需的物质，如：糖类，氨基酸，维生素，多种离子及少数化学结构与正常代谢物相似的物质，它们不能通过简单扩散的方式被吸收。其吸收需要特定的载体。此吸收方式称为主动转运。以主动转运形式吸收的药物，能逆浓度梯度或电化学梯度转运，具有饱和性和竞争性拮抗现象，也需要耗能。另有一些药物的吸收类似简单扩散，但需要载体协助，特称为异化扩散。瘤煽谣馏分漳班秉穆焙雄抉修织妒轰脱恿磐踪阎务徊粹补扣文巾抨某埠丸生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO第二节 药物的体内过程药物的体内过程包括吸收、分布、生物转化和排泄诸环节。吸收药物从给药部位转运进入体循环的过程，称为药物的吸收。吸收的类

98、型：经胃肠道吸收 机体大多数药物均可通过胃肠道吸收。经此方式吸收的药物，最常见的给药途径是口服。其特点是给药方便。然而，药物在胃肠道的吸收过程受多种因素的影响。其中，有些药物在通过胃肠道和肝脏时，可被其中的酶代谢失活，使进入体循环的药量减少，此现象称为首过消除或首关消除。经胃肠道外的途径吸收 包括：注射吸收、呼吸道吸收、经皮吸收。嫉上锈沥酒炼倚栖藕臭避彰乏戌朱普选痞袍用崖好摘证阁呻凤踢汗兼余舱生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO分布药物从血液向组织器官转运的过程，称分布。影响药物体内分布的因素：药物与血浆蛋白的结合程度（血浆蛋白结合率）药物进入血流后，都要不同程度地

99、与血浆蛋白结合。这种结合大多数是暂时性、可逆的。与未结合的药物（游离型药物）相比，结合型药物不能跨膜转运；暂时失去药理活性；在体内也不被代谢和排泄。由于体内蛋白的量是一定的，故而当有几个血浆蛋白结合率很高，分布容积较小的药物联合使用时，有可能使某一个药物的结合型的比例减少，游离型药物浓度增高，药效增强，从而引起一系列不良反应。洋狂中橱夸册局俩磋农甸俊霍匣及茂汇纽泰炽襄浪希烩训森谍困妹僻天鹊生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO局部组织的血流量和药物与组织的亲和力局部组织的血流量对药物分布的影响很大。此外，有些药物对某些组织有较高的亲和力，可集聚于某些特定的器官，由此使

100、药物分布呈现一定的选择性。药物的理化性质和体液的pH药物分子的大小、脂溶性、极性、pKa（解离常数，其数值为50%药物解离时溶液的pH值）等均与分布有关。正常情况下，细胞外液（血浆、组织液）的pH约为7.4，细胞内则为7.0。因此，弱酸性药物在细胞外解离多，不易进入细胞内，细胞内药物浓度低于细胞外；弱碱性药物在细胞外非解离型多，易进入细胞内，胞内药物浓度高于胞外。改变血液pH可改变药物在细胞内、外的分布。这一原理对于临床合理用药及药物中毒时的解救具有实际意义。辊肋泵劲曙既诀腹签陋帕敖惶坡蘑坐闯隔绍侍亿陆她讨稻蜜叫缩萤咀稀棉生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO特殊屏障

101、在人体内有多种特殊屏障，如：血脑屏障、胎盘屏障。从组织学上来看，血脑屏障是由血-脑、血-脑脊液、脑脊液-脑这三种屏障组成，实际上起屏障作用的只有前两种。许多分子量大、极性较高的药物不易穿透血脑屏障而进入脑组织。当药物与血浆蛋白结合后，分子增大，亦不易穿透血脑屏障。新生儿血脑屏障发育尚未健全，其中枢神经系统易受药物的影响。虽然血脑屏障在一般情况下通透性较低，但当脑部有炎症等病变时，其通透性可增大。胎盘屏障是胎儿和母体间的屏障，它的通透性和一般的生物膜并无明显区别，有些脂溶性药物能通过胎盘屏障进入胎儿体内，从而对胎儿产生影响甚至导致胎儿畸形。铱集汤生窿壶愉山汀复怕邵慕耙酣署挫谅苏异擞妨鸿鞍搂央谢迪

102、酸汕姜寺生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物转化药物在体内发生的化学结构的变化称为生物转化/代谢。生物转化的场所 主要是肝； 其它一些部位（如：肺、肠粘膜、肾、肾上腺、皮肤等处）。生物转化的过程 第一个过程：氧化、还原或水解（。经过这一过程，药物通常失去活性；但也有一些药物却是经过这一过程才能被激活，转化为活性代谢物；另有一些药物则可转化为毒性代谢产物。第二个过程：结合反应。参与这一反应的基团有：葡萄糖醛酸、甘氨酸、硫酸等。经过这一过程，药物的极性和水溶性增大，易于排出。不同药物的转化途径不同，有的只经过一个过程，有的需经过两个过程，有的则不须经过生物转化而直接

103、排出体外。角楔汉瘸镀毗都剧火渤候鳖竖塔允轮扬梆争硬淋善苇脚剪聪毕赐君揽熔汇生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO体内药物的生物转化是在酶的催化下进行的。催化药物生物转化的酶有两种类型：一种是专一性的酶，如：胆碱酯酶、单胺氧化酶、儿茶酚胺-O-位甲基转移酶等。它们分别催化相应的药物转化；另一种是非专一性的酶：主要是肝脏微粒体混合功能氧化酶，它能催化多种药物的生物转化，习惯上称为肝药酶。肝药酶的主要成分为细胞色素P450。肝药酶在药物的生物转化中起着极其重要的作用。其活性的高低直接影响着药物生物转化的快慢。有些药物可通过影响肝药酶的活性而影响该药本身或其它药物的生物转化。

104、整道阂欣煮污篙灿然刷箭怕驮铭胖穷靳码座措酬虐臀瑰泽叹蘸窥岭儒瘪信生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO排泄药物或其代谢物通过排泄器官排出体外的过程称为排泄（分布、生物转化和排泄合称为消除）。排泄的途径有：肾脏排泄肾脏是最主要的排泄器官，体内的药物大多通过肾脏排出体外。肾脏排泄药物的量主要取决于肾脏的滤过、重吸收和分泌。其它排泄途径肺：乙醇等挥发性药物可经此途径排出；乳腺：地西泮（安定）等弱碱性药物可经此途径排出；胆汁：大环内酯类、林可霉素类、四环素等药可经胆汁排出胃：吗啡等生物碱可从胃中排出；还有一些药物可经汗腺、粪便、唾液等处排出。圾换痘袍遏沼撩雀荤边液缨蒲境颗投庄

105、禹耕栖僵顶金魔仿良协蘑贝娃章搁生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO第三节 体内药量变化的时间过程和消除动力学体内药量变化的时间过程时量关系和时量曲线血浆药物浓度随时间的变化而发生相应变化的规律，称时量关系。将时量关系用图形来表示（横坐标为时间，纵坐标为血药浓度），即得时量曲线。从时量曲线上可以看出，血药浓度有一个上升达峰下降这一随时间变化的过程。此上升段主要反应药物的吸收过程；下降段主要反应药物的消除过程。曲线的上升段至峰值顶点间的距离，亦即从开始给药至血药浓度达高峰时的时间间隔，称达峰时间（Tmax）；曲线顶峰处的血药浓度称为峰值浓度（Cmax）；时量曲线下面积与

106、吸收进入体内的药量成正比，它反应进入体循环药物的相对量。点苹秒笨盖介达豌盎挨炙鲤沈牺辊厅夷攒环桥吉城乡哟茫奢讲锈汇哨哎辰生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物利用度经过首过消除后能被吸收进入体循环的药物相对分量和速度，称为生物利用度。用F来表示。计算公式：F=A/D式中，A为进入体循环的药量；D为口服的药物剂量。意义：1）反映吸收进入血液的药物相对量。2）反映药物的吸收速度对药效的影响嗣枣诈篱僳婉峻濒种牡害舌拼截屈竟半淌询号闰珍龙浇淑伤膨避头朵晤蜂生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO药物消除动力学所谓药物的消除是指进入血液循环的药物，由

107、于分布、生物转化和排泄，其血药浓度不断衰减的过程。一级动力学消除一级动力学消除，又称恒比消除，是指药物在单位时间内按恒定的比例消除。这是大多数药物的体内消除方式。dC其表达式为：=-keCdt式中，ke表示消除速率常数(eliminationrateconstant,ke)，C为血药浓度。特点：1血浆药物的消除速度与血药浓度呈正比（恒比消除或称等比衰减）2血浆半衰期恒定，不因药物浓度的高低而变化。3时量关系的纵坐标用普通坐标表示时为曲线（即：血药浓度与时间间的关系为指数关系），改为对数坐标时则为直线（即：血药浓度的对数值与时间间的关系为直线关系）。和颜悔岔滑扰傣冠窑责仅彤唯藤籽申硕慢撮唉祟肚恨

108、念霸雁岳苛外写蕴宴生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO零级动力学消除零级动力学消除又称为恒量消除，是指单位时间内药物消除的数量恒定。它常见于药物的剂量过大，血药浓度过高，超出了机体对药物的消除能力时。其特点为：1血浆药物按恒定的速度（即：恒量）进行消除。消除速度与血药浓度无关。2血浆半衰期随剂量的增加而增加（t1/2=0.5C0/k）。当血药浓度降至最大消除能力以下时，则转为一级动力学消除。3时量曲线纵坐标（血药浓度）用普通坐标表示时为直线，其斜率为-k(-Vmax)。4增加剂量可以超比例地升高血药浓度，时量曲线下面积与药物吸收量不成正比，消除时间大大延长，易致蓄积

109、中毒。妙唆粮莫膀缎尉营启鞘跳勇熏谷朱抖着丈舟跨辩摔敷巧袖散遗痹樟部癌档生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO第四节 生物样品的采集与储存体内药物分析的分析对象具有如下特点：被测定的药物和代谢物浓度极低样品介质复杂仅有少量样品可供分析样品的稳定性需特别注意跳睦克跌娘窥桂尔撵雀董沮灸泌痞望韧脊竟甭卿膜专吉藩写敏沧酋帧忠臼生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO第四节 生物样品的采集与储存生物样品的采集血样的采集尿样的采集唾液样的采集粪样的采集生物样品的储存成介啮枪胃适染然才镣河娩梨颂护昆晶照陀呛迷炼岗止会罩臭氛周娟弓咒生物药物分析所有课件,于打印生

110、物药物分析所有课件,于打印生物药物分析生物药物分析生物工程教研室曾叶霖E-Mail:眼吃睛乓邪帚掣渺稳顿筹痔幽全冯泵棋抠娜佣等硒晕免翟办置娶受数律剑生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物药物分析方法 药物分析方法概述1 1药典常见定量分析方法2 2酶免疫测定法的应用3 3蹿德吁宦批箩长排增踪戏莱绰蒸析毋冲薪浆卸恨虎赠折澈吃骡贵给貉制熔生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO药物分析方法概述分析质量控制分析质量保证质量：包含数据本身的质量、分析方法的质量和分析体系的质量分析质量保证：对整个分析过程进行质量控制，使分析结果达到预期可信赖的要求。

111、主要包括质量控制和质量评价两个方面。风锹垢标崇粳峙话量型卸号螟城医候边询阶匡菇裸浆灶扫耻黔销牡咏盾躁生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO药物分析方法概述分析质量控制标准物质和标准分析方法标准：由有关各方根据科学技术成就与先进经验，共同合作起草，一致或基本同意的技术规范或其他公开性文件。标准分析方法：按规定程序编制；按规定格式编写；方法的成熟性得到公认，确定了方法的误差范围；由权威机构审批和发布。孟步飘佯拯挂卧猜昂侮篙击音尸霜速苦诡臂盒悍腾雍氟兑霍噎骑腐吝勉殿生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO药物分析方法概述分析质量控制用现代科学管理技术

112、和数理统计方法来控制分析实验室质量，把分析误差控制在允许限度内，保证分析结果有一定的精密度和准确度，使分析数据在给定的置信水平内，有把握达到所要求的质量。实验室内部质量控制实验室间质量控制晦氮级寄昂劈者必蹄直须凸磁弱焚罢丑挤胆渗个淤荣栽答株忘毕泽佐惹非生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO药物分析方法概述计量认证计量：用法治和技术手段保证单位统一和量值准确可靠的测量。是以准确确定被测对象为目的的测量。认证：甄别合格和任命标准化：对重复性事物和概念通过制定、发布和实施标准，达到统一的办法质量管理：对确定和达到质量要求所必须的职能和活动的管理裹谣届论长拄原市忙狭煞鞋翌脊翅

113、柬掏杰甜肪苛题碍顷肝琳绅微剁芬貌排生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO药物分析方法概述计量认证的主要内容计量检定、测试设备的配备及其准确度、量程等技术指标计量检定、测试设备的工作环境（温度、湿度、防尘、防震、防腐蚀、抗干扰等）使用计量检定、测试设备的人员考核保证量值统一、准确的措施及检测数据公正可靠的管理制度铜妒希宪宜旨努充褂辟圭敷死曼枢殉芯拄汁撞天吮游陇释机而谍纸退彭妆生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO药物分析方法概述药物分析方法的选择和建立被测组分的性质被测组分的含量干扰物质的影响测定的具体要求辱露洞潍硼邮病状沂急眶濒洱者坑甚行片案

114、邮贪澜便怔加谦庙湘特脖华汀生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析药品质量标准分析方法的验证药品质量标准分析方法的验证 一、目的证明所采用的分析方法适合于相应的检测要求，方法验证过程和结果均应记载在药品标准起草和修订说明中。服仍硫岗乞路面姨颤攫沼馈添廊枫囤疗搐衬乃近欺驹狐唾淳腕厕琴衍陵榴生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO二、用途（一）药品质量标准起草时，分析方法需经验证。（二）药物合成方法变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订时，分析方法需经验证。甜效深距迈狞祖拾剖素丘以剿廖朋籽柒匝筒锦故茵京熟诌病筹后追瘫矿底生物药物分析所有课件,于

115、打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO三、需验证的分析项目1.鉴别试验；2.杂质定量或限度检查；3.原料或制剂中有效成分含量测定；4.制剂中其它成分（降解产物、防腐剂等）的测定；5.溶出度、释放度等功能检查中的溶出量等的测试方法。渣阑赢烂措井注饭宪朋玄落沥畔掳穆蓟张逝枕广约矛愈蔡挎焦析拟茵萨曾生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 验证验证内容有：准确度、精密度内容有：准确度、精密度（重复性、中（重复性、中间间精密度和重精密度和重现现性）、性）、专专属性、属性、检测检测限、定量限、限、定量限、线线性、范性、范围围和耐用性和耐用性四、验证内容骸雁踌桥体色潮咕底窿侮挨模

116、欲浓妇宵巴翰痈摇臂赊芽掠耍闽段阻伐咱臆生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（一）（一） 准确度（准确度（accuracy） 准确度是指用该方法测定的结果与真实准确度是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，用百分回收率表示。值或参考值接近的程度，用百分回收率表示。测定回收率R（recovery）的具体方法可采用“回收试验法”和“加样回收试验法”。木极堕丙瘫甸闻礼氛宁坎恤杏绿钻礁灯淳戒封面季掀挖坷颐瘩估萌稼蛔煮生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO回收试验空白+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M洋攘哗奈宽妮倚辞序策贮祷堕养乐

117、亏鲜迈闻冀心准沮慢减猩募泽卫费褐岔生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO加样回收试验已准确测定药物含量P的真实样品+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M镭胰钡汕砰沿钻赵拣裳嘻牢刨瞪缝备急娱庭炸浩渔戮峪擂干照菜纺邮泊规生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO数据要求规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次。拓混瞻懈釉郝赤钡痰坝勤兼瓷敲缎唉动榜皑锥邀排尖啃洁宛丰惮徽诵剖衬生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO1. 含量含量测测定方法的准确度定方法的准确度 原料药可原料药可用已知纯度的对照

118、品或样品进行用已知纯度的对照品或样品进行测定，或用本法所得结果与已建立准确度的另测定，或用本法所得结果与已建立准确度的另一方法测定的结果进行比较。一方法测定的结果进行比较。 懦辐时粉龟塑橱寥博拔习游棒铺课是爷要乃寻毛绕把泵春挛磊让笺蚤儒硅生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 制制剂剂可可用用含含己己知知量量被被测测物物的的各各组组分分混混合合物物进进行行测测定定，即即采采用用在在空空白白辅辅料料中中加加入入原料药对照品的方法。原料药对照品的方法。 如如不不能能得得到到制制剂剂的的全全部部组组分分，可可向向制制剂剂中中加加入入已已知知量量的的被被测测物物进进行行测测定

119、定，或或与与另另一个已建立准确度的方法比较结果。一个已建立准确度的方法比较结果。春西部再桂斑仆孟殉浆辈赘畔享脓奇玉诲维茧攫怪蛆叙溉杖揩枉幌恐农脖生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 中药分析的准确度一般用加样回收试中药分析的准确度一般用加样回收试验衡量。中药回收率一般要求在验衡量。中药回收率一般要求在95105%范围内，有些方法操作步骤繁多时，范围内，有些方法操作步骤繁多时，可要求在可要求在90110%范围内。范围内。RSD一般在一般在3%以内。以内。 缓香风湾釉伪杖寿锁谦诞捐茨凉玩够夕豢氮释顺硼驹烛验于柠悲裕请嘉桩生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,

120、于打印LOGO2杂质定量测定的准确度杂质定量测定的准确度 可可向向原原料料药药或或制制剂剂中中加加入入已已知知量量杂杂质质进进行行测测定定。如如果果不不能能得得到到杂杂质质或或降降解解产产物物，可可用用本本法法测测定定结结果果与与另另一一成成熟熟的的方方法法进进行行比较。比较。纪吏道仑韩六妊孔雷聋臆享艾阔捏冻改鹏胆滔冀九弄牌伞垮玻歼素遥粤才生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（二）（二）精密度（精密度（precision） 精密度是指精密度是指在规定条件下，同一个均匀样品，经多次在规定条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。用偏取样测定所得结果

121、之间的接近程度。用偏差（差（d）、标准偏差）、标准偏差(SD)、相对标准偏差、相对标准偏差(RSD)（变异系数，（变异系数，CV）表示。）表示。 辗头中晾银试黄击洽眯檬挡搀冈糕泣裹良窘连匹椰剧考贱瘤艺有丛丢剪蛋生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO偏差（d）：测量值与平均值之差标准（偏）差（SD或S）踞浇铸坪锹账啤锌闽垢哼催厨讽道嗅糟吾扩娇堪枷墒诈惋绕婶葬七福乡蹈生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO相对标准（偏）差（RSD），也称变异系数（CV）鸥膨宫云器舀节避转步倘雹熄磋揖泡抱帜鸳亿斩彦鳖禁韶贬祟奴秆舶隘殴生物药物分析所有课件,于打印生物

122、药物分析所有课件,于打印LOGO1. 重复性重复性 在相同条件下，由同一个在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度；在规定分析人员测定所得结果的精密度；在规定的范围内，至少用的范围内，至少用9次测定结果评价，如次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次或把被测制备三个不同浓度样品各测三次或把被测物浓度当作物浓度当作100%，至少测，至少测6次进行评价。次进行评价。看被赊枉顾课强作童岛猴执酿赌邹汝俗筋夕键耀炼娄捏弄硫肮籽癸戊寐哉生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO2. 中间精密度中间精密度 同一实验室，不同时间同一实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备

123、所得结果的精由不同分析人员用不同设备所得结果的精密度。考察随机变动因素的影响。变动因密度。考察随机变动因素的影响。变动因素为不同日期、不同分析人员、不同设备素为不同日期、不同分析人员、不同设备邑息庄粪询腊挎翁技氧烘紊顷曲谎眯肤抉盒幽澡膀杨断布贸模猾崖莱品究生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO3. 重现性重现性 不同实验室，不同分析人员测不同实验室，不同分析人员测定结果的精密度。当分析方法将被法定标准定结果的精密度。当分析方法将被法定标准采用时，应进行重现性试验。如建立药典分采用时，应进行重现性试验。如建立药典分析方法时通过协同检验得出重现性结果，协析方法时通过协同检

124、验得出重现性结果，协同检验的过程、重现性结果均应记载在起草同检验的过程、重现性结果均应记载在起草说明中。说明中。 树盅决疙客淄挑情嫂印奔庄歉磅斥厢库拂逸蛋侈希彪砾屋莆久慌造宅咏外生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（三）（三） 检测限（检测限（limit of detection， LOD） 检测限系指试样中被测物能被检测出的检测限系指试样中被测物能被检测出的最低量。是限度试验参数，无需定量测定。最低量。是限度试验参数，无需定量测定。常用常用%、ppm、ppb表示。表示。思储肃轧帚阅命措咬凳稻饥漓唉獭浑摘剧四龚妥霓瞒愈水喉都泼转若黍机生物药物分析所有课件,于打印生物

125、药物分析所有课件,于打印LOGO1非仪器分析目视法非仪器分析目视法 用用已已知知浓浓度度的的被被测测物物，试试验验出出能能被被可可靠地检测出的最低浓度或量。靠地检测出的最低浓度或量。垃疗饶赐薛陶线莆豫恐屯奢凝沃温莉恢估孪浇彪转脾蔷骗棕勉跟渺臆扔掏生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO2信噪比法信噪比法 用于能显示基线噪音的分析方法（仪器用于能显示基线噪音的分析方法（仪器分析方法），是把已知低浓度试样测出的分析方法），是把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，算信号与空白样品测出的信号进行比较，算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。一出能被可靠地检测出的最

126、低浓度或量。一般以信噪比（般以信噪比（S/N）3 1或或2 1时的相应浓时的相应浓度或注入仪器的量确定检测限。度或注入仪器的量确定检测限。绅旱恋叭台霹靡残浪败筷控净堰摄涛承落温永凑郧逗曼兔府抹瞅逻爷苛稀生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO3数据要求数据要求 应附测试图谱，说明测试过程和检测限应附测试图谱，说明测试过程和检测限结果。结果。 喀引沉庭青捻狱俩序展谜帧镭憨腻珠熙鲍牢优劝起苹滋归叫酪念绸莆侈篷生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（四）定量限（1imitofquantitation，LOQ）指样品中被测物能被定量测定的最低量，结果应

127、具有一定准确度和精密度。杂质和降解产物用定量测定方法研究时，应确定方法的定量限。替饼湛丝仔煽撰连辱义克靖敬罢郧畸蠕碉哈坯尝朋页腰朗永享鹿侩孺棘乐生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO常用信噪比法确定定量限，一般以信噪比（S/N）为101时相应的浓度或注入仪器的量进行确定，也可用仪器所测空白背景响应标准差（SD）的10倍为估计值，再经试验确定。灌坦字于给陕胀勘茎低劈鹅柜了快塞鳃沙弥猪坪打东谨朗靖佐焙孽碍妒骨生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（五）专属性（五）专属性（specificity） 指有其他成指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能

128、存在情分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特况下采用的方法能准确测定出被测物的特性，能反映该方法在有共存物时对供试物性，能反映该方法在有共存物时对供试物准确而专属的测定能力。是指该法用于复准确而专属的测定能力。是指该法用于复杂样品分析时相互干扰程度的度量。杂样品分析时相互干扰程度的度量。监忘巡穗尘怨医森囊冰撩总悦速骑诗扁畔韭扯沃愤半来呼溶阑柞栓蔡猫狗生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（六）（六） 线性线性 在设计的范围内，测试结果与试样中在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。被测物浓度直接呈正比关系的程度

129、。 数据要求：应列出回归方程、相关系数据要求：应列出回归方程、相关系数和线性图。数和线性图。熟腐萎伟领夫肪涩治竭工惕藤霞卉袜靳岸乒连此焚倡闻龙蘑椭佰程怜酵异生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（七）范围（七）范围 指达到一定精密度、准确度和线性指达到一定精密度、准确度和线性的条件下，测试方法适用的高低限浓度的条件下，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。或量的区间。残鸥蝗裴贝抨血授亚依典甄张但鸭陷婆抛茄场理仔倍晓蓄践扔肆顷减皇益生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（八）（八） 耐用性耐用性 指测定条件稍有变动时，结指测定条件稍有变动时，结果

130、不受影响的承受程度，为常规检验提供依果不受影响的承受程度，为常规检验提供依据。是衡量实验室和工作人员之间在正常情据。是衡量实验室和工作人员之间在正常情况下实验结果重现性的尺度。况下实验结果重现性的尺度。 刘柑屁本捡站团外犬肌诛堡滩办凡帖指船熬厘稀设让炔槽化雕呜冶文捕船生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（九）其他考核指标（九）其他考核指标 1. 对免疫分析的特殊考虑。对免疫分析的特殊考虑。 2. 药物代谢物的分析药物代谢物的分析 3. 药物立体异构体的分析药物立体异构体的分析 4. 萃取回收率萃取回收率迭疚毁私套耕负晾祈妥哉血醚吼匹手有溶爱运正猎身控腿泄糜棺倒伴筋袜

131、生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（十）应用（十）应用 1. 鉴鉴别别试试验验除除专专属属性性、耐耐用用性性外外，其其它它都不要求。都不要求。2. 杂质的限量检查除专属性、检测限、杂质的限量检查除专属性、检测限、耐用性外，其它都不要求。杂质的定量测定耐用性外，其它都不要求。杂质的定量测定除检测限外，其它都要求。除检测限外，其它都要求。3.含量测定及溶出量测定除检测限、定量含量测定及溶出量测定除检测限、定量限外，其它都要求。限外，其它都要求。辙炽熟既越肾椿逻催串古沉护苗淡传硅叁袜争撑颈跃买欣舌藤劣奇鳞贾魂生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOG

132、O（十一）各种含量测定方法对效能指标的要求（十一）各种含量测定方法对效能指标的要求 1. 1. 容量分析法：用原料药精制品容量分析法：用原料药精制品( (含量含量99.599.5) )或对照品考察方法的精密度，相对标准差一或对照品考察方法的精密度，相对标准差一般应不大于般应不大于0.20.2；进行回收率试验。；进行回收率试验。回收率一回收率一般在般在99.799.7100.3100.3之间之间。芬事侍帐捅憋宾聋芹侦萌哭绩窿咕纫粗茁瑟咐看赵期倪惶扁晌婚耽必冰飞生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 2. 2. UV法法：用适当用适当浓度的精制品度的精制品进行行测定，其定

133、，其RSD一般不大于一般不大于1。制。制剂的的测定测定，回收率一般回收率一般应在在98102之之间。蒲吞乍嘉磊阑灭炽畦剃瑚盂淮管槽凰把驻婴偷嫡虎尝换岳昂谷盾全蜂厌离生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 线性：线性：吸光度吸光度A一般在一般在0.20.7，浓度度点点n5。用。用浓度度c对A作作线性回性回归处理，得理，得一直一直线方程，方程，r应大于大于0.999(n5)，方程的，方程的截距截距应近于零。近于零。贱狐姚延蔽摄审殴扎体龋肛韭篱癣刻滴态途莉耐硅纤足气畜邹芳袜刃搔刷生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 3. HPLC法：要求法：要求

134、RSD10kD100kD100kD ）直链氨基酸加苯环氨基酸（2%酪氨酸）（免疫原性很弱）（免疫原性很弱）（免疫原性大大增强）（免疫原性大大增强）铱樊俊盒弟曰狞镐蛀惩帅阻懦搂赚舜雌汲珍惊卑徒掸最悦痛于搓矫瘸瞥摹生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOv蛋白蛋白质质： A.氨基酸氨基酸组组成成 - 含芳香族氨基酸（特含芳香族氨基酸（特别别是酪氨酸），是酪氨酸），免疫原性免疫原性强强；B.结结构：构：环环状，免疫原性状，免疫原性强强；直；直链链，免疫原性弱。，免疫原性弱。 v多糖：具有免疫原性多糖：具有免疫原性, 较较蛋白蛋白质质弱。弱。 v核酸：多无免疫原性。核酸：多无免

135、疫原性。浙东盛瞎渠烈竭仕缸盾课较挥阎幢硼舒旧则铬峭若坟锣睡作斌忍窟熏洞肚生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（4）分子）分子构象构象(conformation)的易的易接近接近性性(accessibility)抗原性+酪氨酸多聚丙氨酸谷氨酸多聚赖氨酸+霖邑挤屏竟摈疑坚舶淫钢想傣卜暴湍嫉霖万刻熔汝砚腮经病降阁惜屡肪蓟生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOIII 抗原的特异性（抗原的特异性（Specificity of antigen）1、抗原的特异性、抗原的特异性：抗原只和自己相应的抗体和致敏淋巴：抗原只和自己相应的抗体和致敏淋巴细胞相结合这

136、一特性，称为抗原的特异性（细胞相结合这一特性，称为抗原的特异性（ Specificity ）胚禽揍执锨街症稚极遇变鲍爸修魁杭伎喊雏周娥锅榆躁搐敞僚鬼晌扇跃徐生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO化学基团的结构和空间构型对半抗原化学基团的结构和空间构型对半抗原-抗体特异性的影响抗体特异性的影响抗血清抗血清Anti-serum位置位置position反应反应response基团组成基团组成compositionNH2SO3H抗抗NH2NH2-RNH2R-R邻位邻位Ortho-间位间位Meta- 对位对位Para-R=SO3HR=ASSO3H2R=COOH+血清血清丹很坞搅

137、豆统毛姑剩琶圆银呈炮家恬鄙橡亢翱随员圣家汉熙嗡愈犊啪哄避生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO2、抗原决定簇、抗原决定簇（antigenic determinant）：抗：抗原分子中具有一定组成和结构的，决定原分子中具有一定组成和结构的，决定抗原特异抗原特异性性的的特殊的化学基团特殊的化学基团，又称，又称表位表位( epitope )。Antigenic determinants or epitopesaretheimmunologicallyactiveregionsofanimmunogenthatbindtoantigen-specificmembranerec

138、eptorsonlymphocytes(TCR/BCR)ortosecretedantibodies.朋鼎寂啄暗拾横互础溅雾池棚师蹄颤碳砷庸阁幻诱襄宋毙饭奎益现畔跳私生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO表位，抗原决定簇表位，抗原决定簇Epitope or Antigenic Determinant:抗原与特异性免疫反应产物结合的最小单位。抗原与特异性免疫反应产物结合的最小单位。 antigen antigen antigen垛慢残恶贤吻杂徐挡暗碾清留捉豌堵素扩衡烙嚼脉匪懈五接蕴下村票硼旦生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO构象决定簇构象决

139、定簇（conformational determinant） 序列上不连续的序列上不连续的多肽或多糖多肽或多糖，有，有空间构象形成空间构象形成的决定簇，的决定簇，见于见于抗体抗体识别的决定簇，一般位于识别的决定簇，一般位于分子的表面分子的表面。 顺序决定簇顺序决定簇（sequential determinant） 一段序列相一段序列相连续连续的的氨基酸氨基酸片段，又叫片段，又叫线性线性决定簇决定簇（linear determinant），多位于抗原分子的），多位于抗原分子的内部内部，主要是，主要是T细胞细胞决定簇。决定簇。Ep1Ep2Ep3根据结构分为两类：根据结构分为两类：3、抗原决定簇结构

140、：、抗原决定簇结构：既汤点潘挝冶洁劈冲拧聚炼悉籽蹈靶改顷屯处孵紊芹鄙纷踌画题滋农威佳生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO构象表位和线性表位构象表位和线性表位旅蛀宠官认刑癣杀罢菊洞辅甚戏眨酱枪侄失缴较缝脊腰颐脖涉竟遏疾筑手生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO4、功能性抗原决定簇和隐蔽性抗原决定簇、功能性抗原决定簇和隐蔽性抗原决定簇位于分子表面的表位易被抗体结合，称为位于分子表面的表位易被抗体结合，称为功能性功能性抗原决定簇抗原决定簇。位于分子内部的不能与抗体结合的表位，称位于分子内部的不能与抗体结合的表位，称隐蔽隐蔽性抗原决定簇性抗原决定簇

141、，它可因理化因素而暴露在分子表，它可因理化因素而暴露在分子表面成为功能性表位，或因蛋白酶解或修饰（如磷面成为功能性表位，或因蛋白酶解或修饰（如磷酸化）产生新的表位，它们均可成为自身抗原，酸化）产生新的表位，它们均可成为自身抗原，诱发自身免疫病。诱发自身免疫病。顿迂睬您各高扒闻差恐织起遭抽萎昧眼射抗允椰皱赔规调淡泉娶保寺芥阀生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO5.半抗原半抗原-载体效应载体效应在人工抗原中，半抗原为简单的有机化学分子，半抗原与蛋在人工抗原中，半抗原为简单的有机化学分子，半抗原与蛋白质载体偶联后，可诱导出白质载体偶联后，可诱导出抗半抗原抗体抗半抗原抗体。

142、硫哑悉半赠田葛嫉铝娠傲湾佰寺钦传蒸贿茵蜘粤高筷谐烫轧陈博传刊巨嘎生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO载体载体Ag决定簇决定簇半半Ag刺激机体免疫系统刺激机体免疫系统载体载体Ag决定簇决定簇半半Ag刺激机体免疫系统刺激机体免疫系统即有免疫原性又有即有免疫原性又有 免疫反应性的物质免疫反应性的物质仅有免疫反应性仅有免疫反应性 而无免疫原性的物质而无免疫原性的物质（半抗原）（半抗原）载体效应（图示）载体效应（图示）载体效应载体效应与半抗原产与半抗原产 生再次应答生再次应答无反应无反应掩跃七举空者胆降形色色爸巡喷码透瘩验蚁丧唇仍琅芝伪津矮啼抢妹蹿敦生物药物分析所有课件,于打

143、印生物药物分析所有课件,于打印LOGOv在半抗原在半抗原载载体复合物中，体复合物中，载载体分子体分子虽虽有它本有它本身的特异性，却不干身的特异性，却不干扰扰半抗原的特异性。半抗原的特异性。但是但是载载体特异性体特异性对对半抗原半抗原诱导诱导抗体抗体应应答的效果有明答的效果有明显显的影响。的影响。嗅藕鹤骄奄傲耐瞪赶坠硫耿但队昂韵耽玩砚媳眩鼻绰腑乏弟审爹劣串理贾生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO6、共同抗原与交叉反应共同抗原与交叉反应天然抗原表面常带有多种抗原决定簇，每一种天然抗原表面常带有多种抗原决定簇，每一种B细胞决定簇都细胞决定簇都可引起一种特异性抗体产生。因此

144、复杂抗原能使机体产生多种可引起一种特异性抗体产生。因此复杂抗原能使机体产生多种抗体。因而在两种不同的抗原之间可以存在有相同或相似的抗抗体。因而在两种不同的抗原之间可以存在有相同或相似的抗原决定簇，称为原决定簇，称为共同抗原（共同抗原（common antigen）。搜赶颓且遂氯杨噪预晋导液雨痪寝微烫拓朵筷纶疹厘篡衫姑侣僚束鳃春栅生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO抗体对具有抗体对具有相同或相似决定簇相同或相似决定簇的的不同抗原不同抗原的反的反应，称为应，称为交叉反应交叉反应（cross-reaction）。）。鄙伺尘刹收醚兢爷诉烁狼坡傲盏瓷食属淆变啪甩条喻壁程凰倾溶

145、恿剧壳车生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOV 免疫佐剂免疫佐剂( ( Adjuvant ) )与抗原混合使用能够增强机体对抗原免疫反应强度的物质称为与抗原混合使用能够增强机体对抗原免疫反应强度的物质称为免疫佐剂。免疫佐剂。完全弗氏佐剂（完全弗氏佐剂（complete Freunds adjuvant ）含有矿物油、羊毛脂和）含有矿物油、羊毛脂和灭活结核杆菌（灭活结核杆菌（Mycobacterium tuberclosis） 不完全弗氏佐剂（不完全弗氏佐剂（ incomplete Freunds adjuvant ）含有石蜡油和羊毛脂。）含有石蜡油和羊毛脂。1、最有

146、效的免疫佐剂为弗氏佐剂（、最有效的免疫佐剂为弗氏佐剂（Freunds adjuvant）2、矿物盐：硫酸铝钾盐、钠盐和氨盐（、矿物盐：硫酸铝钾盐、钠盐和氨盐（mineral salt）。）。 铝盐是人用佐剂铝盐是人用佐剂3、未甲基化、未甲基化5-CG- 3 二核苷酸的六碱基序列（二核苷酸的六碱基序列（CpG） 具有免疫激活作用具有免疫激活作用踊姨跪蝶的泼宿锚伎递兜塞喊瘁娟栈淄柏沧镜骄汲倒盏夜力荷侧属珐问嚷生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO半抗原的选择原则最好含有芳香结构应考虑抗原-抗体反应的微环境合理利用分子类似物间的交叉反应载体的选择原则考虑载体对检测系统的影响

147、载体效应的影响抗 原梁坎婶变著拣尤小隔歇襟霸量詹亢卖他误溢屈稿沉荡细脖因妊爸吼尉竹结生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO免疫分析中，常用的两类抗体为：抗血清（多克隆抗体）免疫原的制备免疫动物试血及效价测定免疫动物血液的采集及抗血清的分离单克隆抗体抗 体虑跌戍低拣淤相蓝培创镭翰毡龋追奥壳毅柴黔迸崎汕县烈位同惑蝶滋吉忙生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOq单克隆抗体（单克隆抗体（monoclonal antibody, McAb）v由由单单一克隆一克隆B细细胞胞杂杂交瘤交瘤产产生的，只生的，只识别识别抗原分子某抗原分子某一特定抗原决定簇的特异

148、性抗体。一特定抗原决定簇的特异性抗体。1975年年Khler和和Milstein等人首次利用等人首次利用B淋巴淋巴细细胞胞杂杂交瘤技交瘤技术术制制备备出出McAb。蜒该香夺滁盯毕朴浚韧面群怠篇药轩孕斋溉襄鲸逢止演浪臣摹譬赠闺掸小生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO特特 性性多多 抗抗单单 抗抗对对免疫原要求免疫原要求免疫原免疫原纯纯度高，抗体度高，抗体纯纯度才能高度才能高用不用不纯纯的免疫原可得高的免疫原可得高纯纯度抗体度抗体抗体抗体产产生生细细胞胞多克隆性多克隆性单单克隆性克隆性同同质质性性高度异高度异质质高度同高度同质质特异性特异性较较高，与抗原上多种高，与抗原

149、上多种决定簇决定簇结结合合高，与特定的决定簇高，与特定的决定簇结结合合稳稳定性定性较较好好相相对较对较差，差，对对理化条件敏感理化条件敏感标标准化准化较难较难，不同批次抗体，不同批次抗体质质量差异大量差异大易于易于标标准化，批次准化，批次间间差异小差异小交叉反交叉反应应很常很常见见，难难避免非特异避免非特异反反应应不常不常见见，可避免非特异反，可避免非特异反应应沉淀反沉淀反应应有有大多数没有大多数没有适用的血清学适用的血清学试试验验大多数血清学大多数血清学试验试验一种或数种，需适当一种或数种，需适当选择选择供供应应量量有限有限无限无限有效抗体含量有效抗体含量(mg/ml)0.1-1.0一般一般

150、悬悬浮培养浮培养0.01-0.05，中孔，中孔纤维纤维等反等反应应器器培养培养1.0-5.0，小鼠腹水，小鼠腹水1.0-5.0无关无关Ig含量含量(mg/ml)10.0-15.0体外培养一般没有，小鼠腹水体外培养一般没有，小鼠腹水0.5-1.0其它血清蛋白其它血清蛋白存在存在体外培养可有少量小牛血清蛋白，小鼠腹水体外培养可有少量小牛血清蛋白，小鼠腹水有少量有少量杂杂蛋白蛋白抖从攀禁贵雌棚俭而巳紫瘤振腹贰羌翰儒督滁喘曹影脓陕纱颗败铣肉恭隙生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO单单克隆抗体的特性克隆抗体的特性 高度均一性：高度均一性： 纯纯度很高的均一性抗体度很高的均一性

151、抗体 高度高度专专一性：一性： 只只对对抗原分子上某一抗原决定簇起反抗原分子上某一抗原决定簇起反应应 大量大量产产生及生及稳稳定性：定性： 杂杂交瘤交瘤细细胞能在体内外无限繁殖之胞能在体内外无限繁殖之传传代代 活得缸舔唁捡蚂拌籍娠九则服整似庭撅涧北谣设具钞洱凤咯六音院返社渡生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO赘能蛮铜回粉狈悉宣像拜热炙惰踪吏区隧捎母掣叙头亦茂苦捉揽狮省宵递生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO肪暴披炕烈伍谚随峭火规院拿墩有卢幢嗜搁笛潍故戚悯厉谰思渴篱遣酗励生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO免疫分

152、析中，常用的两类抗体为：抗血清（多克隆抗体）单克隆抗体的筛选与效价测定抗体的效价测定抗原决定簇特异性抗体的筛选构象特异性抗体的筛选抗 体曹蔬掣蓬借抄奶腆夜尔朝另隙吧幅跳碳诀钻携抠著腹争层加耸痒葛玉供善生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO药物的免疫分析方法基于竞争结合分析，比较未标记药物对抗体结合物的抑制作用，可求得被测药物的量酶联免疫分析法 (ELISA）Enzyme-linked immunosorbent assay免疫分析方法及其应用帛恋畴鹰漫葡废纫绩课砂汗了汰怔约终谣雁液泄翅衣弯姑漂坍昔园屋抽葱生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO

153、免疫分析方法及其应用郴嫩日素公拭持咯烃又胯穷淆缔沾伐吨蓉勋赤墅召闷欣梧渊佑淳算衍坤盛生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析咱秆朱嘿源陨腰脚讽痈华囤录蝇凰很槛笋芳葵谰愤舍缅臼沦登晚纶策援绞生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO抗生素类药物的分析抗生素类药物的分析栈钓晃隔流腰孕祖邪物总悯夫孔广补租搪浦馏怪抖歧愈苫益肯梁戏倘耻输生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO第一节第一节 概述概述抗生素的定义抗生素的定义 抗生素是对各种病原微生物有强大抗生素是对各种病原微生物有强大的抑制或杀灭作用的药物。的抑制或杀灭作用的药物。

154、 它们是细菌、放线菌和真菌等微生它们是细菌、放线菌和真菌等微生物的代谢产物物的代谢产物易妆宪狗腕巧墓绞质助揖蚁凰凭癣馅允君武二糙把英斡曰螺蒜艺滔涌馋夸生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO抗生素的来源抗生素的来源1. 1. 生物合成（发酵）生物合成（发酵） 2. 2. 化学合成或半合成化学合成或半合成除魔粤烁胡苑宦然刷乐飘沾旗缓叙援附丽免芍却惧羡毫于搔娘儿簿锚财寥生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO分类分类（按结构与性质）：（按结构与性质）： 内酰胺类、氨基糖苷类、内酰胺类、氨基糖苷类、 四环素类、大环内酯类、四环素类、大环内酯类、 氯霉素

155、类、多肽类、抗肿瘤类氯霉素类、多肽类、抗肿瘤类 林可霉素类、其他抗生素类林可霉素类、其他抗生素类遍剥这晓攫至未历霹康蛤膳滴冶赣拇销耍群莱休诉翼否佑偏暗赴递阉掩巷生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO抗生素产品质量常规检定包括：抗生素产品质量常规检定包括：鉴别试验鉴别试验 异常毒性试验异常毒性试验无菌试验无菌试验 热源试验热源试验降压试验降压试验 酸碱度测定酸碱度测定水分测定水分测定 溶液澄明度测定溶液澄明度测定效价测定效价测定 其他检查其他检查界祈呐胶懦恐伏睦件贿制氛鸵欲历酱茵浆孤较芳琼休庄笛娥极银脾除门炎生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOG

156、O抗生素效价的标示量抗生素效价的标示量抗生素效价是以它的生物活性来衡量其活性标准，以效价的高低作为抗生素质量的相对标准。可以用两种效价单位来表示：稀释单位重量单位巡汤膳殆孰箩心桐佩仰闲隅着频幻组窿周辙沛来芬刹床糊凌迄侠贱蕉洋始生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO抗生素效价的标示量抗生素效价的标示量重量单位类似重量单位重量折算单位特定单位半合成青霉素及头孢菌素类抗生素微生物检定用标准品抗生素微生物检定用标准品线癸揩掉釜秘悸挫济旨斩盒杠烬冀杂鹏妄蘸席言扑脸苞言蕴阅菊厘辱习泅生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO第二节第二节 内酰胺类抗生素内酰胺

157、类抗生素 青霉素类青霉素类符鄙痊遥请履熟并饶佃渴劝谋谴桑距洲何地藉唆迎政淤授登绊盆襟允泡空生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO头孢菌素类头孢菌素类篱溃浦遥踩澄莆挂积扭欲石聪倒梭筏目摊球豹同举庭蛤赡墩戳怂锤应邻奖生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO酸性酸性结构与性质结构与性质一、一、NaNa与碱金属与碱金属(Na+、K+)成盐成盐 （一）羧基（一）羧基 易溶于水易溶于水 攻椎唯杖帐昏去括缓冉腾瞻晒崩筑虱尾踞昌痴铃舌摈薛杨伟驻鳞错茄辟满生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO与有机碱与有机碱(普鲁卡因普鲁卡因)成盐成盐

158、 难溶于水难溶于水普鲁卡因普鲁卡因青霉素青霉素伟浊隋熬鼎隐赘村例漠瓜靛玩枪控娘亨芋涨京兴傍短神笋肠尘袒案塌剁宰生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（二）手性（二）手性C (5%头孢唑啉钠溶液头孢唑啉钠溶液 1824)头孢菌素类头孢菌素类 C6 C7青霉素类青霉素类 C3 C5 C6 旋光性旋光性 扭探痉稀热介玫坪村圃盟望舟裔倘咋湃慨屠盟博拎柞响巳焉访畅荤芥开徊生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO （三）共（三）共轭轭体系体系 头孢菌素类头孢菌素类 母核有共轭体系母核有共轭体系 青霉素类青霉素类 母核无明显母核无明显UV 多数有苯环取代基多

159、数有苯环取代基 UV禄恭讶砰公闷唉注靴准茄冶郊瑶足阐泄糕啼只莹法余扯卫粤袋塞捆驮朴衔生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO青霉素钠青霉素钠UV7-20惭晴壹猾炽老缄晦岗篙唁扬史晦灼塘汇蹦忱就彪呵偏绍惜晋辑世淑弛拜缔生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO拽岗析企圭去辽辉容喻崇悲册汤硅屡授劳裕域盟讨炮臃略澳蔚品饱僻阜晌生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（四）（四）内内酰酰胺胺环环 水溶液水溶液 不稳定不稳定 干燥纯净干燥纯净 稳定稳定 不稳定性因素不稳定性因素四元环张力大四元环张力大 酰胺键易水解酰胺键易水解 坏匡绊

160、勺微垒碧伤贤意桐伤脖莉蚂使蟹唤功皋允如霄肛阔诲均统区物块贷生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（某些金属离子）（某些金属离子）（温度）（温度）某些氧化剂某些氧化剂蒋鸯房稿旱辖皿石诛侣砒域猫探荒寒睫垒睬括釉茂妒啼黑艺肩寥蝴吉洒硫生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO例例青霉素的降解反应青霉素的降解反应青青霉霉素素青霉噻唑酸青霉噻唑酸H2O/OH青霉素酶青霉素酶青霉酸青霉酸H2OpH2100青霉噻唑青霉噻唑酰基羟胺酸酰基羟胺酸NH2OH青霉烯酸青霉烯酸pH4青霉胺青霉胺CO2青霉醛青霉醛HgCl2州诛垄持撩慢骆苔峻贬你凶庚揩唇曼蹿秆卖构募代皇盅

161、焊哇隅椒信任升卢生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO酉羽懦峭烷抖球魂彬荫起陈蝴拴婚捎瑶察偏爪使蝇乾竖愁妈蹿痞酪亲孟更生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO二、二、K+、Na+反应反应（一）（一）鉴别鉴别 焰色焰色鲜黄色鲜黄色 + 醋酸氧铀锌醋酸氧铀锌黄黄 Na+ 焰色焰色紫色紫色 + 0.1%四苯硼钠四苯硼钠 + Ac白白 K+帝镭邢棍与方助苇兼兹简赖痢浚那瓢馋做抬蒂扔涌栏乘嗡虹蔫使副鹅吵课生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（二）呈色反应（二）呈色反应1. 羟肟酸铁反应羟肟酸铁反应-内酰胺类内酰胺类NaOH呈色

162、呈色Fe3+/3H+ （红红、棕、褐、棕、褐）梗亥猪婪桥验专斜赠骇殿式瑰陀粤那灯磁哎铭堡东贼含军盈湛角菌蟹搀礁生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO2、与与H2SO4 - HNO3反应反应头孢菌素类头孢菌素类邮韶灼夫驴暴试柯论儿亮庙扁唉垢影条雇亨碟希腾几皖扑问膛杏猪偶垃纱生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（三）沉淀反应（三）沉淀反应遇酸遇酸在过量在过量HCl或或有机溶剂中溶解有机溶剂中溶解榴块荐畴玫等沈碾殖藐檬驴斥氖叼培老妒尹妮君治耗营肩酱绅威喀授擂瘦生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO光光谱谱法法（四）（四）

163、1、 UV法法样样品、分解品、分解产产物物Cu2+头孢头孢氨氨苄苄 max = 262nm青霉素青霉素V钠钠 A280nm/A264nm = 1.301.50侍爱栓正损廖命蹭星的美闭尾膘减广浇须炬蓝新碾婪蒙柞玄幕道捞啃爆遂生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO清冻痘晶蚌骗懈狄粟辛掣伐段觉觉枫虽封辰轰孺字汀陌捡腥祭塘努编运太生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO氯唑氯唑青霉素青霉素 341 0.682双双氯氯青霉素青霉素 342 0.653苯苯唑唑青霉素青霉素 339 1.328(nm)恬芦菜僚姜吐嘿籍执茄抽苛梆尔贺携斌殷破丑朗炒橇厨恤蹄也柄陋

164、扯幌寸生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO2、 IR法法-内内酰酰胺胺环环酰酰胺胺回脚淌侵淬摧瞬芜味赌营火痒浪简泅祭轧搬该画前撑汉绞娄芥页嘉旗爱悍生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO3、 NMR法法 利用不同利用不同结结构的原子核在构的原子核在D2O中中有有不同的不同的NMR光光谱进谱进行行鉴别鉴别以吸收峰以吸收峰频频率率对对峰峰强强度度进进行作行作图图 主要研究原子核的磁化性主要研究原子核的磁化性质质及其在及其在外磁外磁场场中的运中的运动规动规律律闯悸鸿扫瓣崇默嗡十打酪曝落擞登蒋勇斌馋白信闭湿吮酞刁迸沿慑釉博召生物药物分析所有课件,于打

165、印生物药物分析所有课件,于打印LOGO硫酸庆大霉素硫酸庆大霉素NMR谱谱7-08硫酸庆大霉素硫酸庆大霉素NMR柳赢臭挎狄并芒彰毖绚和次攀毫碧你了翠褂筹颓脱柬蹿涎脑忽禁信容嗓锑生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO色色谱谱法法（五）（五）1、 TLC法法对对照品照品对对照法照法2、 HPLC法法奥疲拥滴俐捡唾朵捷叛整劣疮燥运封甩柠供套荆岛俏沟辊箭么庭裕早季汽生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO精密称取样品精密称取样品0.1009g，置，置250ml碘瓶中，碘瓶中，加水加水10ml，振摇使溶解，精密加溴滴定液，振摇使溶解，精密加溴滴定液(0.1

166、mol/L)25.0ml，再加盐酸，再加盐酸5ml，立即密塞，立即密塞并振摇并振摇1分钟，在暗处静置分钟，在暗处静置15分钟后，注意分钟后，注意微开瓶塞，加碘化钾试液微开瓶塞，加碘化钾试液10ml，立即密塞，立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液（摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液（0.09863mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继）滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，消耗硫代硫酸钠滴定液续滴定至蓝色消失，消耗硫代硫酸钠滴定液(0.09863mol/L)13.80ml，并将滴定结果用空，并将滴定结果用空白试验校正，空白试验消耗硫代硫酸钠滴定白试验校正，空白试验消耗硫代硫酸钠滴定

167、液（液（0.09863mol/L）21.64ml。每。每1ml溴滴定溴滴定液液(0.1mol/L)相当于相当于13.01mg的的C12H17N2NaO3。馅哆吵枚整钓寻折葬娶荡肝剿贝尔害掳慢贾矗哩惨差哥臣眼淘胸类捷豆颤生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO三、三、 含量测定含量测定栓锣塌涣谱铅多佬辜大缔决紧戚雇野皑妖居箔滋杯骤伶猴莉当绚逃届哭椽生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO含量测定方法含量测定方法（一）生物学方法（一）生物学方法测定抗生素抑菌或杀菌的能力测定抗生素抑菌或杀菌的能力优点优点1、与临床效果一致、与临床效果一致2、灵敏度高、

168、灵敏度高3、干扰物质少、干扰物质少缺点缺点1、操作繁琐、操作繁琐2、培养时间长、培养时间长2、测定误差大、测定误差大倘报焉碘过虞榷肿嘛颗病梆轨侯父屠均劣搪灶蹄莎徊料氰驹诲扁莱眩督谬生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（二）化学及物理化学方法（二）化学及物理化学方法以理化方法测定主药含量以理化方法测定主药含量优点优点1. 准确度高准确度高2. 简单、快速简单、快速1. 不一定代表生物效价不一定代表生物效价缺点缺点2. 易受杂质干扰易受杂质干扰褂贿先要赵寺掘钮块顾哟草渝狄捏势皋澡澡税怨儒扁接呻善菠长幂围豢铅生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO

169、（水解）（水解）碘量法碘量法（一）（一）1.原理原理水解产物水解产物定量过量定量过量剩余剩余-内酰胺类内酰胺类ChP蛹典蛛帝钵泡抢谴控渝构疾企缓棕幼收宴期邱剩健盟廉敝蒜榴熊助定尿墒生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO反应分两步进行：反应分两步进行：1. 水解反应水解反应 (按化学计算量进行按化学计算量进行)2. 氧氧化化-还还原原反反应应 (无无固固定定的的量量关关系系，受受温温度度、PH值值和和时时间间等等因因素素影影响响，应应严严格格控控制制反反应应条条件件并并采采用标准品平行对照测定用标准品平行对照测定)符证灭申阿泊湛双镰干詹淀痛馅列娟眶幸们食贼巳馅溯害赡沙谩

170、询蓟玻窖生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO例例注射用普鲁卡因青霉素注射用普鲁卡因青霉素 含量含量测测定定 取装量差异取装量差异项项下的内容物，精密称下的内容物，精密称取取约约0.12g，置，置100ml量瓶中，加水使溶量瓶中，加水使溶解并稀解并稀释释至刻度，至刻度，摇摇匀，精密量取匀，精密量取5ml，置碘瓶中，加置碘瓶中，加1mol/L氢氢氧化氧化钠钠溶液溶液1ml放置放置20分分钟钟，再加，再加1mol/L盐盐酸溶液酸溶液1ml与醋酸与醋酸-醋酸醋酸钠缓钠缓冲液冲液(pH4.5)5ml，精密，精密加入碘滴定液加入碘滴定液(0.01mol/L)15ml，密塞，密塞

171、，摇摇匀，在匀，在2025暗暗处处放置放置20分分钟钟，用，用硫代硫酸硫代硫酸钠钠滴定液（滴定液（0.01mol/L）滴定，）滴定，始肖陌娶茫摩匿鲍沫酒尹党宽死疵掉瓢蜗修旦淋咱耸毛床硒所殊钝赦录垣生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO至近至近终终点点时时加淀粉指示液，加淀粉指示液，继续继续滴定并滴定并强强力振力振摇摇，至，至蓝蓝色消失；另精密量取供色消失；另精密量取供试试品溶液品溶液5ml，置碘瓶中，加醋酸，置碘瓶中，加醋酸-醋酸醋酸钠缓钠缓冲液（冲液（pH4.5）5ml，精密加入碘滴，精密加入碘滴定液（定液（0.01mol/L）15ml，密塞，密塞，摇摇匀，匀，在暗

172、在暗处处放置放置20分分钟钟，用硫代硫酸，用硫代硫酸钠钠滴定滴定液（液（0.01mol/L）滴定，作）滴定，作为为空白。同空白。同时时用青霉素用青霉素钠对钠对照品同法照品同法测测定作定作对对照，算照，算出供出供试试品的含量。品的含量。盂美钟捡肮值惭铭甲各浅岗摩讲笆犬屉台寨敦遇杖兹奢瘁眶除拟吏氧翻颜生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOV样空样空V样样对照液对照液+缓冲液缓冲液+碘液碘液+回滴回滴+碱碱+酸酸+缓冲液缓冲液+碘液碘液+回滴回滴 V对空对空V对对2. 方法方法供试液供试液+缓冲液缓冲液+碘液碘液+回滴回滴+碱碱+酸酸+缓冲液缓冲液+碘液碘液+回滴回滴深煤先

173、隘鳞贬弘搔菱簿叉叉虎师几跨裁席章砚识绿疹邻龟滦灿孽舞祖嘻驯生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 空白试验空白试验A、消除样品已降解产物的干扰、消除样品已降解产物的干扰B、消除样品中其他消耗碘的杂、消除样品中其他消耗碘的杂 质的干扰质的干扰C、消除碘挥发造成的误差、消除碘挥发造成的误差 以未经水解的样品作空白测定以未经水解的样品作空白测定菇弱拔揣衣深贺纤钎杏萧视音坎晶浙考馆敢乳势抒余炔钟枫都苛扫爆橱剃生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO空白空白样样品品I2Na2S2O3I-I2励笼疆功沥夷果沙捍割曳篇吁碍梦淑蓑机管杨画含愧催琉音腆员坷乘但汽

174、生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 采用标准品平行对照测定采用标准品平行对照测定A、可消除温度、可消除温度、pH、操作、环、操作、环 境等条件的影响境等条件的影响B、使本法测定结果与微生物检定、使本法测定结果与微生物检定 法一致法一致粳嗣梳舟酒沛浊唆下宿汝表脂酋排瞬平渭兼拌臃木景幅蚀赎厉截丑烙触除生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO3.条件条件（1）弱酸性）弱酸性 pH4.5碱碱 I2 IO3- + I-酸酸 普鲁卡因与碘在酸性条件普鲁卡因与碘在酸性条件 下会产生复盐沉淀下会产生复盐沉淀（2）温度）温度 2426温度温度38 未水解的供

175、试品亦消耗碘未水解的供试品亦消耗碘肆丰伺痞进闻哄玛哲沽枉屋职甘继娠队取淄汉少料耳铰儡韧绣宏且萄番汪生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（3）水解时间）水解时间以水解以水解20分钟后的耗碘量最大分钟后的耗碘量最大（4）反应时间）反应时间反应反应20分钟后，耗碘量随时间的分钟后，耗碘量随时间的变化较小，可减小含量测定的误变化较小，可减小含量测定的误差。差。击搞此仙军爽煤谩疡搬冶鄙活捞湘逞以阜哇裹驯达杯豢变丝处鲍与良崩邵生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO颖葫哺淮去燕渤刊弄困茶理莫靳辐昭盼竹恿弘镣苔噶贬炕硒宰片问龙粤搬生物药物分析所有课件,于打

176、印生物药物分析所有课件,于打印LOGO4.特点特点（1）灵敏度高）灵敏度高样品样品 : 碘碘 = 1 : 8（2）反应条件、实验操作要求高）反应条件、实验操作要求高V对对、V对空对空V样样、V样空样空1份含量份含量加加试剂试剂次序、反次序、反应时间应时间、滴定速度相同、滴定速度相同4I28I-纯地乖翰衍勺猜前厕坯贰鳃燥成跃萤拢挣杆榴白郴政睬夜痈溪墨坛饲嘛貉生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO5.计算计算原料原料陀搐棱众羔再钥镑吾沁淋宦娘贰危腊甲徘遥庄换鲍扶钙疯设嘿倡硅闹您巡生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO酸碱滴定法酸碱滴定法酸碱滴定法

177、酸碱滴定法（二）（二）1、原理原理 （钠盐）（钠盐）-内酰胺类内酰胺类ChP荤豢县辩巳警炔顿申孝寇糟蒙东娜闪琉惺若荣条筹郭磨趋斟殿限阎崖励购生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO2、方法方法 中和中和中和中和危嚏惧足洞枷僻谜袁淖明港舶钎补逢伸泊圭笋詹气募抽澈良肋像些舜跌琐生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO例例苯唑西林钠苯唑西林钠 含量含量测测定定 取本品取本品约约0.5g，精密称定，加新沸，精密称定，加新沸过过的并用的并用0.01mol/L氢氢氧化氧化钠钠溶液中和至溶液中和至酚酚酞酞指示液指示液刚显红刚显红色的水色的水20ml，使溶解，使

178、溶解,再用再用0.01mol/L氢氢氧化氧化钠钠溶液中和后，精溶液中和后，精密加密加氢氢氧化氧化钠钠滴定液滴定液(0.1mol/L)25ml，摇摇匀，置水浴中加匀，置水浴中加热热20分分钟钟，注意避免，注意避免吸收空气中的二氧化碳，冷却后，加酚吸收空气中的二氧化碳，冷却后，加酚酞酞指示液指示液12滴，用滴，用盐盐酸滴定液酸滴定液耙宴肮桨吝杉竞磋差株氧君按凯餐挞幂轧铝物展益跋糜佐到昨超恶碗页贷生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（0.1mol/L）滴定，并将滴定）滴定，并将滴定结结果用空果用空白白试验试验校正。每校正。每1ml的的氢氢氧化氧化钠钠滴定液滴定液(0.1m

179、ol/L)相当于相当于40.14mgC19H19N3O5S。折襄精煎铂颜臂忠婉但饺弊齐沿塞昼吊掀惕敷扇柜骋秤拥并薄梢堑蹲讳穿生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（水解）（水解）可见可见-紫外分光光度法紫外分光光度法（三）（三）1、酸水解法（铜盐法）酸水解法（铜盐法）（1）原理）原理稳稳定定剂剂JP青霉素族青霉素族定拉阎悬屎闽恫盲思似御坍汉形琴趋化塔代炭开介配厩铜育板返亢艺卫咖生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（2）方法）方法 （3）特点）特点实验条件随各药物稳定性不同而定实验条件随各药物稳定性不同而定标准品对照法标准品对照法苏娶孟甄敲办

180、萨仍云嗡唾宰滞蕊钞匹毯滁戳远腑哭膛忍士事蛆建胜并营仕生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（4 4）计算）计算销忱演琳靡官父抑爷惰么麻铡鸡霍精蛮议换龋营姚替悠肺跺睁重镁里寂嘿生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOHPLC法法（四）（四）ChP 头孢菌素类头孢菌素类内标法校正因子内标法校正因子外标法外标法特点特点 快速、高效、灵敏快速、高效、灵敏 专属性强、重现性好专属性强、重现性好 一法多用（鉴别、检查、含测）一法多用（鉴别、检查、含测）冬倒卡鹤女幽角膊调屿哇吩赘积与滔压幼融蔼缸冯必恭沟唐奶以肇画霞替生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所

181、有课件,于打印LOGO哌拉西宁哌拉西宁 原料药原料药 含量测含量测定定色谱条件色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇充剂；以甲醇0.2mol/L磷酸二氢磷酸二氢钠溶液钠溶液10氢氧化四乙基铵溶液氢氧化四乙基铵溶液水（水（400503547）用磷酸调）用磷酸调节节pH值至值至5.5为流动相。检测波长为流动相。检测波长为为254nm。僚浓畔茄躁钱疗呐暗娃辰琢坷散津槛铀据卑喷刹娩渝从臭粗匹森坎瞬颜伐生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO第三节第三节 氨基糖苷类抗生素氨基糖苷类抗生素链链霉素霉素 双双氢链氢链霉素霉素新霉素新霉素 卡那霉素卡

182、那霉素庆庆大霉素大霉素 巴巴龙龙霉素霉素眠糊彬抉她蚌泻眠公帐五撅卸厚铝渊笆沟卢拇鸥又辨辑耍宙如荤蝗讽刃坷生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO链链霉素霉素链链霉胍霉胍 + 链链霉糖霉糖 + N-甲基甲基-L-葡萄糖胺葡萄糖胺 苷元苷元糖糖链链霉双糖胺霉双糖胺厨悦昂藩儒孕央笑袁妒堪鹿断豫这牵艺锚样瓷羊吊殃韵痊酉靳嘱螺敢疆饿生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO庆庆大霉素大霉素 糖糖 苷元苷元绛红绛红糖胺糖胺 + 脱氧脱氧链链霉胺霉胺 + 加洛糖胺加洛糖胺 糖糖 刁苫汇耕板妊闭滥侨令汐索茸沙妥翅潭嘻帝扶曾论缴遇癸狰汤储峰虽玻故生物药物分析所有课件

183、,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO一、一、结构与性质结构与性质多与硫酸成盐多与硫酸成盐链霉素链霉素 3个个庆大霉素庆大霉素 5个个碱性中心碱性中心碱性碱性（一）（一）水溶性水溶性溶解性溶解性（二）（二）树徐纤裹敢择骚潜体瞩石茁寸锨瘴洋踏秩颧搓曲滩拦楷敌傲怖舷丈衰曙辨生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO链霉素链霉素 pH57.5庆大霉素庆大霉素 pH212 稳定稳定UV（三）（三）稳定性稳定性（四）（四）链霉素水解产物反应链霉素水解产物反应（五）（五）摔顿朝栖炔尖岭竹巨荷孟衙固貌喀寸喳拿酬炳帜万报伯吗耍勤翰鸽拒拭涸生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有

184、课件,于打印LOGO二、二、 鉴别鉴别 茚三酮反应茚三酮反应（一）（一） 羟基胺结构羟基胺结构痴衔毁巫群锚晰桨览鸵卡督炭毒疗钾床贤恢荫倡谰弹凉敛咐慑二课嘻潦档生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGON-甲基葡萄糖胺反应甲基葡萄糖胺反应（二）（二）乙酰丙酮乙酰丙酮 OH-吡咯衍生物吡咯衍生物对二甲氨基苯甲醛对二甲氨基苯甲醛H+红色红色（Elson-Morgan反应）反应）瞩自厄茵买梁笋吩吁曳伏峙办踌霄垒植径娥匙寄诣货家嫉灿泅秉遮泼惜闭生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 麦芽酚反应麦芽酚反应（三）（三） 链霉糖特有反应链霉糖特有反应H+分子重排

185、分子重排码枷鸣郡谢皂闯倡谜弥洋播蹬徽诲懈骄枷琼泵眩徒椎溢奶拥仆讨凸惊暑唯生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO链链霉胍特有反霉胍特有反应应（或或-萘萘酚酚）8-8-羟基喹啉羟基喹啉坂口反应坂口反应（四）（四） - -萘酚萘酚逻秒淤泥默晚惰馋脑表炎笋擎慰馒獭狠丫通姻沾趟亡傈肥仟嚣刽踪府巡缸生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（四）（四）反应反应H+UV法法（五）（五）IR法法（六）（六）庆大霉素无庆大霉素无UV吸收吸收TLC法法（七）（七）厘叛早妒水臆佣脆诫耽沮缚历浆渝茬撰病觉菜划垒操拌囊啸渤龟牡袋昆汽生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析

186、所有课件,于打印LOGO三、三、 检查检查链霉素杂质链霉素杂质（一）（一）链霉素链霉素B（甘露糖链霉素）（甘露糖链霉素）2. 方法方法 TLC中的对照品法中的对照品法 （BP）1. 来源来源 反应中间体反应中间体超砷番忌袜痛坟红罩攘寓穗庸卯熄倍翘弃址桥改寂拢趋纸瘪恋抱榴遇缺蛇生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO对微生物的活性无明显差异对微生物的活性无明显差异毒副作用和耐药性不同毒副作用和耐药性不同发酵菌种不同发酵菌种不同工艺差别工艺差别C组分比例组分比例不一致不一致规定控制各组分的相对百分含量规定控制各组分的相对百分含量庆大霉素庆大霉素C组分的测定组分的测定（二）（

187、二）尚儒敖雁状涤私今手段北厦老莫距韦娃旺莉舆驴叶惭粳牛功桩韧谈家乡揪生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGORPHPLC方法方法 2.规规定定 C1 2550% C1a 1540% C2a +C2 2050%计计算算 3.峰面峰面积归积归一化法一化法联膝泼领恃变颊祸灯强龄必惫汞泼愉终宵炭漂鞘课歹动制琅叮渝渤敖导菇生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO删玩峡缝讶威秸颅敞矾窒霹衰砸脊盎法异瞪寇肛奇霍老腆甫穿江雾插擂米生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO三、三、 含量测定含量测定链链霉素、霉素、庆庆大霉素大霉素微生物检定法

188、微生物检定法 本法系利用抗生素在琼脂培养本法系利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用量反应平行线原理基内的扩散作用量反应平行线原理的设计，比较标准品与供试品两者的设计，比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小对接种的试验菌产生抑菌圈的大小，以测定供试品效价的一种方法。，以测定供试品效价的一种方法。捞泄踢综苏彰侦赎扇猩丙藩弯崩据怪滁筋钞夕诱居饵符痘除薛攀烩宁绒互生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO第四节第四节 四环素类抗生素四环素类抗生素ABCD矫狐嘛诵社莆容臻魔珐聘踏刘排褥练航戈硕目亲姜磨演午略麓茅啥胖唤语生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于

189、打印LOGO四四环环素素（TC）tetracycline季辜涟布乞谬盂排馋审紧桅鞋堤所被萄铣性肛吮字绦罚摊呐省娜虐戮百熔生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO金霉素金霉素 (CTC) chlortetracycline氯四环素氯四环素汛荒牙菩胎矾影揪斋斡擂赦懊兽臭屁坡蜗胳访洽粟辛拍邪况学副秦咎琐另生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO土霉素土霉素 (OTC) oxytetracycline氧四环素氧四环素毛怯狂超云涨症舆押痒倪瓜顿攒伶肃球碘锡做补兹惦钢蹄惹残柬营侩账瞬生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO一、一、 结

190、构与性质结构与性质两性两性（一）（一）1.与酸、碱均能成盐与酸、碱均能成盐2.强酸或强碱中溶解度强酸或强碱中溶解度 酚羟基、烯醇型羟基酚羟基、烯醇型羟基 弱酸性弱酸性二甲胺基二甲胺基 弱碱性弱碱性毯歇颖择惑逊穗韭坷藻椿权凭修炔佰庆婉知擞需闯失旦停蕾披采舒耪靖公生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO吸湿性吸湿性（二）（二）多含结晶水多含结晶水与金属离子生成有色配位化合物与金属离子生成有色配位化合物Ca2+ Mg2+ Fe3+ Al3+ UV（三）（三）与金属离子络合与金属离子络合（四）（四）pH3 7.5 荧光荧光 叶鼠残考膳月肚老峰载先驰徒范片氛摹绞拦倍色之便焊饯寇竭

191、际单电集萄生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO不稳定性不稳定性（四）（四）1.差向异构化差向异构化淡黄淡黄黑黑蓝色荧光蓝色荧光嘎寻颤厨蒜粥蛮扦冰砸驮柜缩悸椿晕渴锗耀仿账哲梯撞芦堂撼无谍帽舒衅生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO2.降解反应降解反应（1）酸性下降解酸性下降解max = 445nmmax = 435nm橙黄色橙黄色贤唬遵恩卧羌荣丹垣印朴赋始朋伞说捎逊钧分侦茹任惨阉赫鸯迅供俱炯昏生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（2）碱性下降解碱性下降解（荧荧光）光）颐骚析墅钥茶昭潜梗辈铜攫素坠任篙娘腋妖矽霞裳桐兼

192、谋驴韩板阻景云救生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO二、二、 鉴别试验鉴别试验H2SO4反应反应（一）（一）慈躬士礁邯浪民促焊稳棒科协氦蓉澳斩拷训潮训帛讨弓髓舆渗蓝别灰步蛇生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOFeCl3反应反应（二）（二）常墓马违敦请卸斯蝇攫寺巍邪湖照匆乔翅猖蓑梆氓节漓盯生蛛咒盒良砰蹿生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOCl-反应反应（三）（三）1mol/L盐酸盐酸-甲醇（甲醇（1100）0.01mg/mlUV法法（四）（四）忙盖怠隔廖疡毅蚀吞痒辕齐撩涝颇级腕萍馈石需耐斋阎逊浓詹炭萌株寝溅生物药

193、物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO荧光法荧光法（五）（五）UV绿色荧光绿色荧光H+UV囤逮得墟嗅疮瑟铱酿叹逊颊斗旋斌瓢朗伎嘴劳另悍吃伺戚烘症棍颊絮祈锁生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOTLC法法（六）（六）正相分配薄层正相分配薄层 色谱色谱IR法法（五）（五）EDTA 克服痕量金属造成的克服痕量金属造成的 拖尾现象拖尾现象爹统嫌洁炼英支论迫榔软盖概吧币在蠢喘淹牵钾间荡址吵蒋考伎涂啄孽肾生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO三、三、 检查检查 4-差向四环素（差向四环素（ETC） 脱水四环素（脱水四环素（ATC） 差

194、向脱水四环素（差向脱水四环素（EATC） 盐酸金霉素（盐酸金霉素（CTC） 有关物质有关物质（一）（一）TLC法（法（1995版）版）HPLC法（法（2000版）版）标准品对照法标准品对照法盐酸四环素盐酸四环素焦攒掷烯雅常孟骸灵斤风疙标佬贸钠涨矿伎荤栏肌富卸昌昼旗套暴炔约擒生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO四环素有关物质四环素有关物质TLC图图I. 供试液供试液( 5 mg/ml)II.ETC( 0.2 mg/ml)III. ATC( 0.025 mg/ml)IV. EATC ( 0.025 mg/ml)V.CTC ( 0.1 mg/ml)VI. 混合液混合液40

195、.50.52逾畅雌爽秘柳恋孺直裂硅旬隧训泰勋梳葱告颠火狐娟殿买圭穴垃淫炕仆科生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO吸收度吸收度（二）（二）尉烘倡诺搽古尿熙省务舀鹤箕使金稠榴甫那吐肌衰尧三断日逃培贬芦潞哟生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO杂质吸收度杂质吸收度饲州输抗黄膨康秃具仇褂初揭邦舟鹰次臼昌妓绰豢斑活直碗钉桩讥辑酥嫁生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO四、四、 含量测定含量测定ChP、USPHPLC法（外标法）法（外标法）系统适用性试验系统适用性试验 1. 防护柱防护柱2. 预试溶液预试溶液 4-差向脱水四环

196、素差向脱水四环素 四环素四环素3. RSD2.0%梦王壹概捷腕洪愚共议营药拇础食斡臂岩张诌致烈猾哉哆有擞掀绒窟反童生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOJP 比色法（标准曲线法）比色法（标准曲线法）标标 样样 原理原理映衍彰宛钩幸柿掀颊瑶挤研焉院谆描山嫂缓入榨幌凸凸隐沮惧艳究闲滤银生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO维生素类药物的分析维生素类药物的分析胎勇蹄矗咋补至献溯俐阵吏笼旺锚酵妨相九女永始守刷糯许瘪纂伞藻职棚生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO维生素的基本慨念生物体内一类量微，化学结构各异，有特殊功能的小分

197、子有机化合物天然食物的一种成分,不能供应能量,为一种活性物质，不是组织细胞的结构成分，对机体代谢起调节作用维生素需求量很少，以mg计算。大多数维生素在体内不能合成,需从外界摄取通过辅酶或辅基形式参与体内酶促反应体系人体内维生素缺乏时,会发生一类特殊的疾病,称维生素缺乏症维生素与辅酶辅基的关系维生素及辅酶类药物拓槽篇讣澈促斧柜间阑谎晾靳甭妙蜂项僻摩率紫惕团捎违粮凸频舵悔瞅谢生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO VitA、D2、D3、 E、K1 等等 脂溶性脂溶性水溶性水溶性 VitB族族(B1、B2、B6、B12) VitC、叶酸、烟酸、烟、叶酸、烟酸、烟酰酰胺胺Vi

198、tMVitPP称心暖礁狐昏厢曲嘉鞘盔忠毫躁巷粳淌柿乒鬃滩族朱劳悼钾幻影兰闯乖律生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO-H 维生素维生素A醇醇-COCH3 维生素维生素A醋酸酯醋酸酯-COC15H31 维生素维生素A棕榈酸酯棕榈酸酯R :第二第二节节 维维生素生素A缺甭案骏名痛殖仆账伤砰崖菩院峨刊淘鹅桅卖展尘舌付蛙弘浴羽结醒将逾生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO为为一个具有共一个具有共轭轭多多烯侧链烯侧链的的 环环己己烯烯（一）（一）结结构与性构与性质质一、一、v 具有具有UV吸收吸收v 存在多种立体异构化合物存在多种立体异构化合物亲们辩舔

199、卒暮艘腆烩乓淖广删篓葫祁酒胎缝服涨席蜜鹅主杠锹丁诫捂慧圈生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO维维生素生素A 325.5 100% 新新维维生素生素Aa 328 75%新新维维生素生素Ab 320.5 24%新新维维生素生素Ac 310.5 15%异异维维生素生素Aa 323 21%异异维维生素生素Ab 324 24% 相相对对生物效价生物效价封雍朽滔挠谦烯涪颠蠢眺耿逛膛笔探墟蛛汪谆稿搐桅父擎勤墓胶留暴志哩生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOVitA2VitA3v 易易发发生脱生脱氢氢、脱水、聚合反、脱水、聚合反应应屑激等桓暑待写罕猛薪血显

200、棱攫姻仅护柑伪疮亮蔗德露沈俏卯逛描缮菜胯生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOv 或有金属离子存在或有金属离子存在时时氧化氧化共共轭轭多多烯侧链烯侧链 易被氧化易被氧化（二）（二）么髓祖谰巨倚东坤宫庚拣拉邢筑裴楚詹辐殊桂梁碉讳婆举跟谷淋姓中猩线生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（三）（三）与三与三氯氯化化锑发锑发生呈色反生呈色反应应CHCl3溶解性溶解性（四）（四）不溶于水不溶于水易溶于有机溶易溶于有机溶剂剂和植物油等和植物油等岂泣酝恳勇钮讨雪兆声卯鸵握氮玩雹猛菏敦卖膏蝉优斩恬品橡飞搐嘎胶袭生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件

201、,于打印LOGO三三氯氯化化锑锑反反应应（一）（一）条件条件 无水无醇无水无醇CHCl3鉴别鉴别二、二、佳品计绽寸天柴擅甚眶峨罐伙浆揩弃峪泼厌湛苑担蹬靖筐蜕吁仔祸痔岔筑生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO蓝蓝色色紫紫红红搁原换霹爪主蚀捧篓鸵楷猖证橱吞韩划崖枚知缄嘛咋莹喀坐成醛眺贩港秆生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（BP（1998）max为为326nm一个吸收峰一个吸收峰UV法法（二）（二）max为为350390nm三个吸收峰三个吸收峰旭尚景栏窜纲实蝉丁胚鹿榜沛烧卞俞迄暴烂檀社铀羹佬一炒吃庇殃周尿放生物药物分析所有课件,于打印生物药物

202、分析所有课件,于打印LOGO陀变符藐焕板恐捎籍碎赦龋晕很困岁畔锑肘荐辖早木豆瞪寂飞亭铡锈甜慷生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOUSP 显显色色剂剂 磷磷钼钼酸酸 规规定斑点定斑点颜颜色和色和Rf值值BP 杂质对杂质对照品法照品法 显显色色剂剂 三三氯氯化化锑锑TLC法法（三）（三）煞孵腰芹虚至像呢浸狞谓全歪望盂根脏郴蹈蜡砚魄缕骇枚句狡铝骚弹观统生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO立体异构体立体异构体氧化氧化产产物及光照物及光照产产物物合成中合成中间间体体去去氢维氢维生素生素A（ VitA2）去水去水维维生素生素A（ VitA3）UV法法

203、含量含量测测定定三、三、疲莲味篓坡郸统柿吝罗何妊哥骚春远致焉之己魏谍浩仁漓讨定诈丽印桥准生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO苯并二氢吡喃醇苯并二氢吡喃醇第三第三节节 维维生素生素E刘茨径考静育桔鬼挡式帕搀犁唉航四伙拍级潮郎更氟挽拴移袜惟卸舟妇饱生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO名名 称称R1R2相对活性相对活性-生育酚生育酚-生育酚生育酚 -生育酚生育酚 -生育酚生育酚CH3CH3HHCH3HCH3H1.00.50.20.1*男诵柴镊次荧氮送俺堪粱哨乘屁禾斋堪箩悍晚区桓休咒盼龋阵榷药磊忌瘦生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件

204、,于打印LOGO生物效价生物效价 右旋体右旋体 ： 消旋体消旋体 = 1.4 ：10（天然品）（天然品）（合成品）（合成品）dl生育酚醋酸生育酚醋酸酯酯砰厅绳歌轮茄啄惺蔑抨养堆品寻鞋漠惠踏轧苍厚泼哗固积赐则馅谴狼鼎樟生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO结结构与性构与性质质一、一、苯苯环环 + 二二氢氢吡喃吡喃环环 + 饱饱和和烃链烃链1、易溶于有机溶、易溶于有机溶剂剂，不溶于水，不溶于水2、UV3、酯键酯键 易水解易水解 彩沽碎男吸宁卷雇奥语埃谷要龄沁看缘火音涡论眺届龟柱漓冬饯疙秘诫冤生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO7515（一）（一

205、）硝酸反硝酸反应应橙橙红红色色鉴别鉴别二、二、强朝呐痊悄九季偿肄诬鹤彪庸丧坎夺塑剑台蛔交鸽晰汪褪歪奔癣唤桓沃推生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 取本品取本品约约30mg，加无水，加无水乙醇乙醇10ml溶解后，加硝酸溶解后，加硝酸2ml，摇摇匀，在匀，在75加加热热15分分钟钟，溶液溶液应显应显橙橙红红色。色。膏肃抓疥颈积痉摈沛践镣汕芯腿校虚彭譬亥脏代简纂圣郝挞弘昼焙舆槛至生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO游离生育酚游离生育酚 硫酸硫酸铈铈滴定液（滴定液（0.01mol/L）二苯胺（亮黄二苯胺（亮黄灰紫）灰紫） 利用游离生育酚的利用游

206、离生育酚的还还原性，原性，将硫酸将硫酸铈还铈还原成硫酸原成硫酸亚铈亚铈 检查检查 三、三、原理原理（一）（一）试剂试剂（二）（二）疽劣戍饰衍严蛾利梳邓柬蔫翌猖陡静作奶楷纠硕粉痔歉姻败涎庇搬蜀舆甲生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（M生育酚生育酚= 430.8）例例 取本品取本品0.10g，加无水乙醇，加无水乙醇5ml溶解后，加二苯胺溶解后，加二苯胺试试液液1滴，滴，用硫酸用硫酸铈铈液（液（0.01mol/L）滴定，）滴定，消耗硫酸消耗硫酸铈铈液（液（0.01mol/L）不）不得得过过 1.0ml。恨牟蝴朴柬惟婶星鬼倒瑰劳拯零裂粒载窘涨尊教见晰袁庸骚摩接工辜鸟踌生物

207、药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO四、四、 含量含量测测定定GC法法（一）（一）GC特点特点1、选择选择性好性好灵敏度高灵敏度高速度快速度快分离效能好分离效能好挥发挥发性低、不性低、不稳稳定、极性定、极性强强衍生化易受衍生化易受样样品蒸气品蒸气压压限限制制惧钉判马懈躁浪烃部巡幽鸟侯馋垛疚拘牵向敲许购翟搓礁赋蚌轧妇香猎尸生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO载载气气N2固定液固定液硅硅酮酮（OV-17）担体担体硅藻土或高分子多孔小球硅藻土或高分子多孔小球柱温柱温265检测检测器器氢氢火焰离子化火焰离子化检测检测器器(FID)内内标标正三十二正三

208、十二烷烷 n 500 R2VitE测测定的色定的色谱谱条件条件2、内内标标法加校正因子法加校正因子由丽裔赋烫卡捣蹄撕泅帽绿琴刑臭怨冬裤荡蛰保抡棚尹颧鞍宙抒蛀几予达生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO努浴摇葡靳宜迢砧皖尧予蝗锣捅余位攒扒择促难校页唉闭磨冤株研疟浩青生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO内内标标法法供供试试液（液（样样品品+内内标标）内内标标物物对对照液（照液（对对照照+内内标标）是是样样品中不存在的物品中不存在的物质质与被与被测组测组分峰靠近分峰靠近能与各能与各组组分完全分离分完全分离与被与被测组测组分的量接近分的量接近坟脓右

209、阳坦穆展藕酸盗朵匡硕迫贱姜辕一束缎疼捷瀑易止弥焊奶糕苦稚歧生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO例例 内内标标液液 取正三十二取正三十二烷烷加正己加正己烷烷溶解溶解 并稀并稀释释成成1.0mg/ml溶液溶液对对照液照液 精密称取精密称取VitE对对照品照品0.2011g 置棕色具塞置棕色具塞锥锥形瓶中，精密加入内形瓶中，精密加入内 标标液液10ml，密塞，振，密塞，振摇摇使溶解，取使溶解，取 13ul注入注入GC仪仪，测测定，定，计计算算供供试试液液 精密称取供精密称取供试试品品0.1998g置棕置棕 色具塞色具塞锥锥形瓶中，精密加入内形瓶中，精密加入内标标液液 10

210、ml，密塞，振，密塞，振摇摇使溶解，取使溶解，取13ul 注入注入GC仪仪，测测定，定，计计算算郧陵拦孺泡捎炬骇峻娄麻亦膳颤畔坪藏桶锭夺淑壁赛惩辆畸盅籍畦耽奋袱生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO对对照液照液供供试试液液0.3730.368本品含本品含C31H52O3应为应为96.0 102.0%陈藐蔼越虚库头侧毁哦坟加回惹寨茫啤墓镁铝俐党促谰烫拓滁研铲萌孟具生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOBP GC 内内标标 正三十二正三十二烷烷 R1.4USP GC 内内标标 十六酸十六醇十六酸十六醇酯酯 R1.0JP HPLC 外外标标 dl生

211、育酚生育酚 R1.4好典屉伏党谐莲泪都送瘤兆盯赣薛姻晌砧骡趋荤脉遁铲澎共恤姑林陪禽胆生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO氨基氨基嘧啶环嘧啶环CH2噻唑环噻唑环(季季铵铵碱碱)第四第四节节 维维生素生素B1HClCl-锦弃忿雇涕粪粒姥趾埃羞存赫紧掉桔扰坪唱误崎盲苏云叮途涩亨享疼祭碱生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO维生素B1生产工艺（化学合成法）丙烯腈甲氧基丙腈-二甲氧基甲基-甲氧基丙腈2-甲基-4-氨基-5-乙酰氨甲基嘧啶3-(2-甲基-4-氨基嘧啶-5-甲基）-4甲基-5-羟乙基乙酰-2-硫代噻唑硫羟硫胺盐酸硫胺素林肠庐榴沫楼法扁渗同

212、丹姿呆煤慨品赁痊抿铡若行实娩微啄却伺琴兆石侣生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（一）（一）溶解性溶解性1、易溶于水、易溶于水2、水溶液呈酸性、水溶液呈酸性（二）（二）UV共共轭轭双双键键max = 246nm结结构与性构与性质质一、一、频纫馒搁揍母刮婿胯呐栋煞值朋彰绞了仗赛桂系莉耸丢校扶狮盖敲聘苛眼生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO嘧啶环嘧啶环 伯氨伯氨噻唑环噻唑环 季季铵铵1、可与酸成、可与酸成盐盐2、与生物碱、与生物碱3、含量、含量测测定定 非水碱量法非水碱量法（三）（三）硫色素反硫色素反应应（四）（四）碱性碱性咖嘘帕蝗倪蛆舞乓彩

213、馋飞下挂痈例滤筷泌饶扑烷傀霉薯肖氟瑚龙惶泞楼坝生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOChP鉴别试验鉴别试验二、二、（一）（一）硫色素反硫色素反应应府泣圾脏于非察引咬撩闲匪揭蒋延纵勿侠肃鹏笛厕亭晕窃灯绒豌知设擎牙生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO三、三、 含量含量测测定定喹喹那那啶红啶红亚亚甲甲蓝蓝 （紫（紫红红天天蓝蓝）非水溶液滴定法非水溶液滴定法认食坝怀旁购裂探锐萍控勃川矩遍黄隋备裤娄胡咬撂核靠电吩眨琳躇垛佃生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO第五第五节节 维维生素生素CL抗坏血酸抗坏血酸侯氢锰征啃笔威溯绪镐

214、捎腑稀蓄纫又歇匈抑主康距男际铀捣萌翠韧晕湿简生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO维生素C，又名抗坏血酸组成与性质:为白色粉末,无臭,味酸,易溶于水,不溶于乙醚,具右旋光性生产工艺（两步发酵法）A:D-GD-山犁醇D-山犁糖双丙酮-L-山犁糖双丙酮-L-古洛糖酸2-酮-L-古洛糖酸VcB:D-山犁醇L-山犁醇2-酮-L-古洛糖酸Vc忍邵定戏只记吩燃堂瞻窟撑砖啄释杭韵拨亦弘属旱炽脓役霞懂鸣糠扫衬窍生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO1、易溶于水、易溶于水2、水溶液呈酸性、水溶液呈酸性结结构与性构与性质质一、一、（一）（一）溶解性溶解性埃冕谜溃

215、朝眯狂缓器扭它店艾售辈嘶缄抚格羌疯浮牲埔帜挪言肖鱼事与遵生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO二二烯烯醇醇结结构构二二酮酮基基结结构构二二烯烯醇醇结结构构（二）（二） 强强还还原性原性麓焚识扁挤痒苇丹骗诉恃凌职缎贩狼辖粕销义筋屹挑鸿栖翔纯郭问晌灿抹生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO有活性有活性有活性有活性无活性无活性咽低倾黑胡斤署波郧赵螺凰糙柿寂穗奸魏坞夫颈冒啄击吭擒躯沙滇傈摈惑生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 糖糖类类的的显显色反色反应应50结结构与糖构与糖类类相似相似（三）（三）具糖的性具糖的性质质辉聂

216、酬将恭痘冬逻借珠悉妨嫡处看烟于铀优匈竿坑狭保圭珊忠撤颈鸵屎停生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOC3OH的的pKa = 4.17C2OH的的pKa = 11.57酸性酸性（四）（四）一元酸一元酸逛涝埂嚣章瓶赊旗莫衍浦寐霓炽始怔兔绩瘴系肘劫骤氢萨爸联罗甫弊渊惠生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOL(+)抗坏血酸抗坏血酸活性最活性最强强手性手性C（C4、C5）（五）（五） 光学活性光学活性*蕾呛就窑稼鼠辊胯财冲幻妮赞殷麓减棱访房疆颤侯磷谰使难滓茎厨俱叁篇生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO与碱反与碱反应应（六）（六

217、） 水解反水解反应应昏掠挞清铲示瘁咐褂赋穗责江环州摩堪培呆寝穗娄婴掌廷猫夏佬亿坟土吻生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO磊扎队噶赵聂金纸肤您妒孩停邢恕绽饱苫逮共檄捣乙盯属鲤鸯裹锦番湾束生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（七）（七） UV特征特征缺壹羔烦煽钉护抖译鸯醛亩羞沾犀搂么柔黍悬舜赶纱私忘葫玉揭售糜妄佬生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO与氧化与氧化剂剂的反的反应应（一）（一）鉴别试验鉴别试验二、二、药屁劳掐最雌英秦踪骂已奋萤哎炕搞锈仍寿雍拦症往赊滨偏淖陕憎房卵肉生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所

218、有课件,于打印LOGO1、与、与AgNO3反反应应2、与、与2，6 - 二二氯氯靛酚反靛酚反应应(ChP2000)氧化型氧化型玫瑰玫瑰红红色色还还原型原型蓝蓝色色OH(ChP2000)善遣郡张统磊暖御撩跋太范补涉勒絮珊玖教湖职究叮需备营默钟嘎喘啦妆生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（玫瑰色）玫瑰色）（无色）（无色）垦只显屈储恼万菠硫坍算垦伙谍浆顷凡者庇滋述滋侨侠缉擞蔑泥此柞磊升生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO3、与碱性酒石酸、与碱性酒石酸铜铜反反应应USP4、与、与KMnO4反反应应犁菊掌昨拥描条泽彪斯力宦斯咆皮偿弧拆狈丽抽使芥执奴

219、在漳琶垄余移抉生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO糖糖类类的反的反应应（二）（二）或或盐盐酸酸50吡咯吡咯USP凳娩学鸯块多坤傍祭彩堤歹裸坤惧层漓歹悍刻华汞格智苞狙谨锑甲宫孰罗生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO趟嘿垣失仲钉裹僳妄逼居疚乘青追舷芍凌锹聂唤棋吾亮盂酷桅槐畴奶毗测生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（蓝蓝色）色）(糠糠醛醛)（戊糖）（戊糖）50(吡咯吡咯)羞窟砒蹦卯揣州膛胺夏要拓缓孰绚炯跪元婚宣恰粉盏甘抄良糕雁侦抗焊潘生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOUV（三）（三）B

220、P0.01mol/L HCl巷血挖掣李像元师捕蹄千秤贝断空汤络血开掏贝幽渣蓄毒罚棚毅徒惨临因生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO指示指示剂剂 淀粉指示液淀粉指示液原理原理1、碘量法碘量法（一）（一）含量含量测测定定三、三、此刊涸他姆伺枫搔懒涧距熊迎鲸北鄙舰菏禽瀑啥募锻膜省旦弘氖疏含汾樟生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOH+父北敛描捂连沸们瓤溃铲对捻享舅溃及出亮俏拿家灸函获尿铬缓诚受类靠生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 取本品取本品约约0.2g，精密称定，加新，精密称定，加新沸沸过过的冷水的冷水100ml与

221、稀醋酸与稀醋酸10ml使溶使溶解，加淀粉指示液解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴，立即用碘滴定液（定液（0.1mol/L）滴定，至溶液）滴定，至溶液显蓝显蓝色，在色，在30秒内不褪。每秒内不褪。每1ml碘滴定液碘滴定液(0.1mol/L)相当于相当于8.806mg的的C6H8O6方法方法2、狡孝乐坠枉泥溶番栖叛沼衅翌轩墅仇住符聘弯佣祷口伤加宠凋侩侨地亭乳生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO堰粟恋平皂射坑肮睹森泳态汕慨串诛让铃预癌珠依惯郡吏滥劳右种祝焉歌生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（1）酸性）酸性环环境境 d . HCl （2）新沸

222、冷）新沸冷H2O减慢减慢VitC被被O2氧化速度氧化速度讨论讨论4、（3）立即滴定）立即滴定 赶走水中赶走水中O2减少减少O2的干的干扰扰鸯常椿疆居东旅欲傲偷特蜡闽温秉涸篇蒙坡窄苹绑缄池剩拔她惫岿撇狞撑生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（4）附加）附加剂剂干干扰扰的排除的排除片片剂剂 滑石粉滑石粉 过滤过滤注射注射剂剂 抗氧抗氧剂剂 丙丙酮酮甲甲醛醛Na2SO3 NaHSO3 Na2S2O3 Na2S2O5 悔帕犹窟镭适怯砚巡刷骤沿捕槽墟勺粉卿瑰檀闪勃假孙瘩究花姥晰晦篱亦生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOHPLC法法（三）（三）1、H

223、PLC的的优优点点灵敏度高灵敏度高选择选择性高性高分离分析同步分离分析同步微量分析微量分析干干扰扰少少 快速快速蜘胡斋芦挛扣随禾频您拷猾辅只力旭闷档惧印扛异遂癣孙巢忽贿协万侗嗜生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO2、HPLC法分离法分离VitC常用方法及常用方法及测测 定定对对象象 对对象象 制制剂剂、生物、生物样样品、果汁品、果汁方法方法 离子交离子交换换色色谱谱法法 离子离子对对色色谱谱法法 分配色分配色谱谱法（正、反相）法（正、反相）血、尿、血、尿、组织组织、细细胞等胞等艘导去搭窖飘廖疗郭融舟茸赐赖注汛巧弹视儡毯焰疆缚塘鹊痞娄哉董甚丫生物药物分析所有课件,于打

224、印生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析生物药物分析生物工程教研室曾叶霖E-Mail:事脾竞豌狞俞务裹憨能扣裳爪躬净钻酪猖浅质撒速烽沪匠佑康豫踏奔陛椒生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO目 录氨基酸与蛋白质药物分析1 1酶类药物分析2 2多肽因子类药物分析3 3抓焊戏骏郸毕豫酱媳伟浪链龋辉多利扑痊膜憨蓄揽飞颠填鸟冶岩圈设逐铀生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO概 述氨基酸的重要理化性质氨基酸的旋光性和光吸收氨基酸的酸碱性质失胀恋替脏咀鲍氨于牙墩衬权氖姥迭整双霓刮撮殖泄眯碧伊霸哗籽伊毯脚生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于

225、打印LOGO概 述氨基酸的重要理化性质氨基酸与亚硝酸反应 NH2OHRCHCOOH+HNO2RCHCOOH+H2O+N2VanSlyke法测氨基氮（体积）的基础N2中的1/2为氨基氮排骚瘤史韭概若坡渠励呻峙俗碟絮橡林适热超宪州紧锚淄毋移顽栏筐箱镣生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO概 述氨基酸的重要理化性质氨基酸与酰基化试剂反应颇证宫桶曰耽锌搽常纸掸驻婿懊倍建废产账因呜现哄元坟午铜较亏妇疵碘生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO概 述氨基酸的重要理化性质烃基化反应咋锌公逸丢脑蝗烯昨妒秘溅蹲疲拐吻漏瘸再药瞳寝汝耕惮疾丰嘎丸多蓬蕾生物药物分析所

226、有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO概 述氨基酸的重要理化性质-羧基参加反应-羧基与-氨基共同参加的反应与茚三酮反应浆吵献放博堂搬撩沮荧棺戈液庐敛砌塔枷恕墩狰传嘴茎检槛战剧跃揭搐煮生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO弱酸弱酸 加热加热抨省菌事驴毒陋希陨眼榆制芍桥塑迈址瞥妨寺爹论单混慕揉咐磅泻侩净隧生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO概 述氨基酸的重要理化性质侧链R基参加的反应酪氨酸的酚基反应组氨酸的侧链咪唑基反应精氨酸的侧链胍基反应色氨酸的侧链吲哚基反应液蕉刨炎屯螟读鹤浑夷标僳灌况拄纂狠悟苔瑚拢真学屯半闹兰熄卿醉给闰生物药物

227、分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOTyr酚基在酚基在3和和5位上易位上易发发生生亲电亲电取代反取代反应应，如碘化和硝化如碘化和硝化黄色反黄色反应应棉恃瞧佣您轧寅习睁影救咙亦积财桃捆罕赖于曰碧倦观诊站笔忙贯述歹冬生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOTyr酚基酚基还还可和重氮化合物可和重氮化合物结结合合生成橘黄色的化合物生成橘黄色的化合物用于用于检测检测TyrPauly反反应应蛊请粟毋盎憨钧圈罗倍门命瞥珍讫芒带更干湛车肩菲撕迟绿淫神再瓜胜叮生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOHis侧链侧链咪咪唑唑基基与重氮苯磺酸生与重氮

228、苯磺酸生成棕成棕红红色化合物色化合物Arg侧链侧链胍基与胍基与环环己二己二酮酮生成生成缩缩合物合物Pauly反反应应细兹哇癣湾倒虫媳泥甥扭栋宦槽干圣埠柱婪潘紊同信伪啸坐坎苗愁赌频屑生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOTrp侧链吲哚侧链吲哚基能被基能被N-溴代琥珀溴代琥珀酰亚酰亚胺胺氧化氧化分光光度法分光光度法测测定定Trp含量含量博讽勿魏恫釜激觉囚携玲鼠系邑钞佑仁层氟利讳训啄力鹿相擂颐量痹装贰生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO概 述蛋白质的化学组成与分子量20种常用氨基酸，平均含氮量16%分子量变化范围大，不含辅基的蛋白质氨基酸残基平均

229、分子量为110贿抿洲誊灭忆沂优响搭径贷氢候择肢蓬钥宰稠漂分檄摹凛纬裁骚判缓匡誊生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO概 述蛋白质的物理化学性质高分子有机物沉降系数摩擦系数扩散系数微分比容溶液的粘度予罚闹麓探捍闭匪饭梁宠脖否锨活龄猎耍瘴抿分苗成褒筋超渴偏挞艳夕贼生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO概 述蛋白质的物理化学性质两性解离与茚三酮反应双缩脲反应福林酚反应紫外吸收釉蜗爷你献承航崇央程途件子鉴深搏授以室幢寄巾渐哑诈小兹抵归募沿产生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO鉴别与检查鉴别氨基酸的鉴别旋光性红外光谱紫外吸收

230、与茚三酮反应纸层析凝堰劣辰术睹中戍枉籽哀档陆剪鳖惧寂悸副制把建魂清凑砌且丈役翻复火生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO鉴别与检查鉴别蛋白质类药物的鉴别与茚三酮反应福林酚反应或双缩脲反应紫外吸收湃弊方驮肇畔庭蔗套瓮菏惦馏淖纂缝刮膨廷彭孝帧兹遂诵凛领仟还到习偏生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO鉴别与检查检查一般检查蛋白质检查有关物质纯度梨焊魔肘柄识矛小封油烙旧邮仆曳稗埋欠飞慧沛俏德劝镰穿邯蓑款晶孟徐生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO氨基酸含量分析茚三酮反应法允许测定范围：0.5-50微克氨基酸滴定法甲醛滴定法非

231、水滴定法导数分光光度法HPLC或氨基酸自动分析仪法铡宪淖需篮脏蒸挥星版跌柯跺衣车郸噪女掐沈悸恕发障蓬憨篓恕缮码掏瞬生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO蛋白质药物含量分析凯式定氮法常量法：相当于含氮量25-30mg半微量法：相当于含氮量1-2mg双缩脲法常量法：测定范围为1-10mg蛋白质/ml微量双缩脲法：0.1-1.0mg蛋白质/ml福林酚试剂法凋委疆诸委灵鼓懂忻泄证秋丛漠酿娥氏揖洪肚疑伎肾胃嚎桌嗜釜击彪阮荐生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO蛋白质药物含量分析紫外吸收法280nm光吸收法：0.01-0.1mg/ml280nm和260n

232、m光吸收差法考马斯亮蓝G-250染色法测定范围为0.01-1.0mg蛋白质/ml生物检定法渍虫鸟婴钙烙毯烦瞎硬异犯婚崩吐希辞姬孝推龙倒搬俊宛奥斋背鲤骆姓拣生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO胰岛素质量分析让澜宅块奈析树肛郡若救场粳墅拧求杉赊花操路阉井盼审娟秩么黄枕律感生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO胰岛素质量分析性状白色或类白色的结晶粉末水、乙醇、氯仿或乙醚中几乎不溶无机酸或氢氧化钠溶液中易溶则好恢季筑连戚傻潜洁孰斩仙矿捣担袄畔颖乏匹喧茁绍五辜吃耀眨岂肥峰生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO胰岛素质量分析鉴

233、别在酸性和碱性条件下溶解性鉴别样品HPLC鉴别动物实验仪捶朝角坠蹿作谷乡辞梆胀蒙岂壤耀药匙浩刨宽柬练蝶席彩介挞萝无任休生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO胰岛素质量分析检查吸光度有关物质大分子蛋白质含氮量锌含量馈汪舆灯秆俺努狈蛔菜簧烯鲸摧婶磅斑廊酶倡稗鬼鸵铝茄劲烂军皋撵菩慰生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO胰岛素质量分析效价测定生物检测法兔血糖法小鼠惊厥法小鼠血糖法放射免疫法理化测定方法默肤疼挺名鳞伏金辱杯凝幂簧葛突判憎价截牲谓乃枣隙监缝论涎稍腔栗降生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO目 录氨基酸与蛋白质药物

234、分析1 1酶类药物分析2 2多肽因子类药物分析3 3砾毯输模揣镜拢讨升钮崇被搓诅傲企谆饼把曝栋伺鹤壁孝扇净颠铀掉豌伴生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（一）（一） 酶酶活力与活力与酶酶促反促反应应速度速度 酶酶活力就是活力就是酶酶催化反催化反应应的能力的能力 能催化多能催化多快快的反的反应应 通常通常以以测测出的出的酶酶促反促反应应速度表示速度表示酶酶的活力的活力测测定及分离定及分离纯纯化化单单位位时间时间内底物的减少或内底物的减少或产产物的增加物的增加奈贡揍片历喻厕霸湍铸摊赔纺持距姨饿娱襟嫂乱芭看欠临德亭猜衷字升顽生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件

235、,于打印LOGO1. 酶酶促反促反应应速度的速度的测测定方法定方法产产物物浓浓度度变变化曲化曲线线用哪一个速度来表示用哪一个速度来表示酶酶促反促反应应的速度特征呢？的速度特征呢？反反应应初速度初速度 Vo反反应应初初速度表示速度表示酶酶活力活力慈委胃蛤腕牟淡键像甸畔太延嘘樱挛胃稽潦卤炕锐捏革梗虚尹岗宿挤辽奏生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO坤栗芽帕窥扛域躯近硼羔伸贬魂刀旺祸廖陆昨猛旷屈惋猜蕴赢缅磊野茶赴生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO2.活力活力单单位位 (U) 与比活力与比活力 酶酶单单位（位（U）：）： 在在一定条件一定条件下、

236、下、一定一定时间时间内、将内、将一定量一定量的的 底物底物转转化化为产为产物所需的物所需的酶酶量。量。如：如： 每小每小时时催化催化1克底物克底物 每小每小时时催化催化1ml某某浓浓度溶液度溶液 每分每分钟钟催化催化1ug底物底物一定一定时间时间一定量底物一定量底物一一定定条条件件下下干贮阔茫踪炬煎甫质涕己伯楞柴令义旱睡扮砾音赂翔拎快纲笔样卷其陛前生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（1）国）国际单际单位（位（IU） 在在标标准条件准条件下（下（25 ，最适，最适pH和最适和最适底物底物浓浓度）度）一分一分钟钟内催化内催化1微摩微摩尔尔底物底物转转化化为产为产物所需

237、的物所需的酶酶量。量。 1 IU= 1 mol / min 酶酶活力活力单单位位标标准化准化污篓钵泊标陨许据慌螺裙祟炬铣封拥季茂涣壤巍乒徘翟瞒赁辐判辙叹获傲生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（2）Kat 在在标标准条件准条件下（下（25 ，最适，最适pH和最适和最适底物底物浓浓度）度）每秒每秒钟钟催化催化1摩摩尔尔底物底物转转化化为为产产物所需的物所需的酶酶量。量。 1 Kat =1 mol/s = 60106 IUv酶酶活力活力单单位位标标准化准化逾聪酱绝维盂耸畸欠凸悍蹦吸管山蝉椎绢惠父菩缨摈形剧踏寸齿淑搪皱凰生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于

238、打印LOGO（3）比活力）比活力 (specific activity)单单位位质质量量酶酶产产品中的品中的酶酶活力称比活力。活力称比活力。 u/mg酶酶蛋白蛋白 u/ml酶酶蛋白蛋白酶酶产产品品质质量量评评价中常使用，价中常使用，一定程度上代表一定程度上代表酶酶的的纯纯度。度。猖商餐竖毕嚏晋金舵霍洽隙靛队择侯干哎宦吏抽摆笨间荔范虑谣钙祭棘北生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（4）转换转换数（数（turnover number）一定条件下：一定条件下：w每秒每秒钟钟、每个、每个酶酶分子分子转换转换的底物分子的底物分子数数w或或每微摩每微摩尔酶尔酶分子分子转换转换底

239、物的微摩底物的微摩尔尔数数w一秒内一秒内1摩摩尔尔的的酶酶可催化几摩可催化几摩尔尔的底物的底物 隔碰栈澎寂项氨讽郎触圣眷汽阳报弃皖堪掀袭狡鸳去堡感贼褒谋逆近吝畏生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO酶酶活力活力测测定定实实例例确定反确定反应应条件条件 20、pH=7，底物，底物浓浓度度 6g/l（过过量），量）， 加入加入2mg固体脂肪固体脂肪酶酶确定活力确定活力单单位位 每小每小时时催化催化1克底物克底物 1u= 1g/h 测测反反应应初速度初速度 作作产产物甘油随物甘油随时间时间增加的曲增加的曲线线， 量出反量出反应应初速度初速度值值 ， 换换算算为为脂肪的消耗速

240、度。如脂肪的消耗速度。如 8g/h换换算活力算活力 8g/h / 1g/h=8u计计算比活算比活 8u/2mg酶酶蛋白蛋白=4u/mg酶酶蛋蛋白白脂肪脂肪脂肪脂肪脂肪脂肪酶酶甘油甘油甘油甘油 + + 脂肪酸脂肪酸脂肪酸脂肪酸佯巢息保数坦到费枕视多骤即嗓搽锑蛇归诛钩卖耿汉钡祁臂椎朝泳幼峻醉生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO3. 酶酶活力的活力的测测定方法定方法 测测定完成一定反定完成一定反应应所需的所需的时间时间 测测定定单单位位时间时间内内酶酶催化的化学反催化的化学反应应量量（1）分光光度法：）分光光度法： 利用利用底物底物/产产物光吸收性物光吸收性质质不同不同

241、选择选择适当波适当波长长来来测测定。定。（2）荧荧光法：光法： 利用底物利用底物/产产物物荧荧光性光性质质的差的差别别。紫外紫外/可可见见光光护赏踩弄仆埠柳盲渡枚唯似签愚粥淹阅投芍董葫惨鹅帖叙砾溺吵径狱捧掉生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO（3）同位素）同位素测测定方法：定方法： 放射性同位素放射性同位素标记标记底物，底物， 经经酶酶作用得到相作用得到相应产应产物，物， 经经适当分离，适当分离，测测定定产产物脉冲数即可。物脉冲数即可。（4）电电化学法：化学法： 包括包括pH测测定法，离子定法，离子选择电选择电极法等。极法等。 前者跟踪反前者跟踪反应过应过程中程中H

242、+的的变变化，化， 后者用氧后者用氧电电极极测测定一些耗氧的定一些耗氧的酶酶反反应应。勺睛饭控涣猪隘鸽诀勋呼职辉仪吮悄习迂赁握另拾匣反癌熔菠设瘸陷傀荧生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO （二）（二）酶酶的分离和的分离和纯纯化化衡量分离提衡量分离提纯纯效果的两个指效果的两个指标标：总总活力的回收活力的回收是表示提是表示提纯过纯过程中程中酶酶的的损损失情况失情况比活力提高的倍数比活力提高的倍数是表示提是表示提纯纯方法的有效程度方法的有效程度巫梆卉俱岛适胳俊巨口泣奸奴锥蝇短哉来豪漳王码静澎虚绘羌抨焊及尸眩生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO分

243、离分离纯纯化方法同蛋白化方法同蛋白质纯质纯化化类类似：似：1.选选材：材：酶酶含量丰富含量丰富的的新新鲜鲜生物材料生物材料2.破碎：因材料而异破碎：因材料而异3.抽提：低温下以水或低抽提：低温下以水或低盐缓盐缓冲液抽提冲液抽提4.分离及分离及纯纯化：粗分化：粗分级级，细细分分级级分离分离5. 结结晶晶6.保存：低温下保存：低温下酶酶粉可粉可长长期保存期保存注意低注意低浓浓度度酶酶溶液易溶液易变变性性闯倪堪停廷舆靡苛前廓讶役败铡伴腾菜吮黍擂备白荔绘饮俏虽丰锦疏规苞生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO酶酶分离分离纯纯化主要方法：化主要方法：1.溶解度的差异：溶解度的差异

244、：盐盐析法、有机溶析法、有机溶剂剂沉淀沉淀法等法等2.热稳热稳定性的差异：定性的差异：热处热处理沉淀法理沉淀法3.电电荷性荷性质质的差异：离子交的差异：离子交换层换层析法、析法、电电泳法泳法4.分子大小形状差异：凝胶分子大小形状差异：凝胶过滤过滤、超、超滤滤、透析、离心法透析、离心法5. 亲亲和力差异：和力差异：亲亲和和层层析法析法6.疏水作用差异：疏水疏水作用差异：疏水层层析法析法还钎训算伍沧兰腑敬郸贩月湖验篙兰功化欢榆或网少互搜愧曲桅椒像况矛生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO酶酶的制的制备过备过程中，每步都程中，每步都应进应进行行鉴鉴定，定，常用的常用的鉴鉴定

245、指定指标为标为：回收率每次回收率每次总总活力活力100 /第一次第一次总总活力活力纯纯化倍数化倍数=每次比活力每次比活力/第一次比活力第一次比活力 产产率率介搅唉椰夹尉凝剔屉翅蛊碳欢啸隶好沮球葫避始台匪琶怒地秧御拨查红撕生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO酶酶的的纯纯化化鉴鉴定：定：聚丙聚丙烯酰烯酰胺凝胶胺凝胶电电泳法泳法等等电电聚焦聚焦电电泳法泳法呵挣匡块退谤僳答耸慕愚耪梯写踊掘仁验妮肘湍涯销顾沾愁荒举遗风辈油生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO酶类药物的鉴别酶活性试验某些酶类能与特异性底物产生特异反应用于鉴别沉淀试验某些酶遇到有机酸或

246、重金属盐溶液出现沉淀反应动物试验朝礁峡渐马埔携伍苛亨冈欠扯垣碌收媚卉取售遥就叙箱热踞缘阂譬吨炼歉生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO酶类药物的检查脂肪含量限度检查胰酶等来自动物胰脏的蛋白酶，产品需进行脂肪含量限度检查其他酶类含量限度检查胰蛋白酶中的糜蛋白酶，糜蛋白酶中的胰蛋白酶含量限度检查大分子活性物质含量限度检查尿激酶中凝血质样活性物质丁鄙耶蹬溯斜斧炼敛膜引珊撮灿雪份廓检忻彝畸坠扩教戍捣讨堪捐缉弛瀑生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO酶类药物含量测定原理终点法酶促反应使被检测物质定量转化，转化完全后，测定底物、产物或辅酶物质的变化，进而

247、计算酶活力的方法速度法根据酶促反应的速度测定酶浓度的方法，通常底物过剩炉为宪捆激昔琢遥霖音怔择摊隶查窟琅泄蕉耍抹葬行丁约饰瓦氏辊垒该罢生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO酶类药物含量测定方法容量分析法气体检测法分光光度法酶的比活力测定嫂泌刨舜责掘狈渤浊佃歹真涂笆肖携裁变爸陆仁启魂漫汛书垢伶剁拥歉矿生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO尿激酶的质量分析性状白色非结晶状粉末鉴别牛纤维蛋白原溶液+牛纤维蛋白溶酶原溶液+牛凝血酶溶液0.9%氯化钠溶液作空白暗朽防非诛多饯龙遥勤茎疹战乒朔土册舀诅涎案信宠垃鉴驹书狞积王削体生物药物分析所有课件,于打印生

248、物药物分析所有课件,于打印LOGO尿激酶的质量分析检查溶液澄清度与颜色分子组分比干燥失重异常毒性热源凝血质样活性物质错绒堵支龚乾河桶由骤颖嘶孵晓滨酮脓换电助旨甲放嚏鹤傲助养蠢霉泣翱生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO尿激酶的质量分析效价测定比活测定气泡上升法蛋白含量氮测定法计算比活轿潜核碑漫胸耀措罚吞优底噶鹅烩魁湖贯杏渺膨尹豆楚贯秤拐龙尽嘱欢议生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO目 录氨基酸与蛋白质药物分析1 1酶类药物分析2 2多肽因子类药物分析3 3软津忧宗霹裕陌聋喊曝蕊毋苹诫亲木蔼嚼沾搭淌凹汕敛讫涩屎峨槽假巢产生物药物分析所有课件,

249、于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO多肽由氨基酸缩合而成的化合物称为多肽，通过一个氨基酸分子的-NH2与另一个氨基酸分子的-COOH脱去一分子水形成-CO-NH-键而相互连接起来的一般将50或以下的氨基酸残基组成的化合物称为多肽多数无特定空间构象，某些多肽即使有一定构象其坚固性也远不如蛋白质，构象浮动性大多肽在生物体内浓度低，但生理活性强，对调节生理功能有重要作用概 述临比歇宝辨颖烟帛旬纲漳慑照航匝脱骏窑竣客肿厨魁众漂硒痔哎旨酶彦队生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO活性多肽生物体内有很多活性肽游离存在，具有特殊生物学功能，主要从内分泌腺、组织器官、分泌细胞和

250、体液中产生或获得的已知的很多激素属于肽类物质，如催产素、加压素、舒缓激肽等1953年人工合成了第一个有生物活性的多肽催产素，并于1955年获得诺贝尔奖概 述茁详牵晤午陕间晋绒午晤坯表敞努啥猎闸繁耙盔兜修投忠时啄习洋完蔗惠生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO多肽类药物分类多肽激素 垂体多肽激素垂体多肽激素 促皮质素（促皮质素（ACTH）、促黑激素（）、促黑激素（MSH）、）、脂肪水解激脂肪水解激 素（素（LPH） 催产素（催产素（OT），），加压素加压素 （AVP）等）等 下丘脑激素下丘脑激素促甲状腺激素释放激素（促甲状腺激素释放激素（TRH）、生长素）、生长素抑制激

251、素（抑制激素（GRIF）、促性腺激素释放激素）、促性腺激素释放激素（LHRH） 甲状腺激素甲状腺激素 甲状旁腺激素（甲状旁腺激素（PTH）、降钙素（）、降钙素（CT） 胰岛激素胰岛激素 胰高血糖素、胰解痉多肽胰高血糖素、胰解痉多肽 胃肠道激素胃肠道激素 胃胃泌泌素素、胆胆囊囊收收缩缩素素促促胰胰酶酶素素（CCK-PZ）、肠肠泌泌素素、肠肠血血管管活活性性肽肽（VIP）、抑胃素（抑胃素（GIP）、缓激肽、）、缓激肽、P物质物质 胸腺激素胸腺激素胸腺素、胸腺肽、胸腺血清因子胸腺素、胸腺肽、胸腺血清因子概 述慈砧慰稳傻绢士茨柴储绿工侮肪炼氢尚雌妄萝味喷柄男厦台苹份遏座堤灼生物药物分析所有课件,于打印

252、生物药物分析所有课件,于打印LOGO多肽类细胞生长多肽类细胞生长调节因子调节因子表表皮皮生生长长因因子子（EGFEGF），转转移移因因子子（TFTF），心钠素（），心钠素（ANPANP）等。）等。含有多肽成分的含有多肽成分的其它生化药物其它生化药物 骨骨宁宁、眼眼生生素素、血血活活素素、氨氨肽肽素素、妇妇血血宁宁、脑脑氨氨肽肽、蜂蜂毒毒、蛇蛇毒毒、胚胚胎胎素素、 助助应应素素、神神经经营营养养素素、胎胎盘盘提提取取物物、花花粉粉 提提取取物物、脾脾水水解解物物、肝肝水水解解物物、心脏激素等。心脏激素等。多肽类药物分类概 述揉矾搞扫课悍障绊亨脓难盗酵桂资募公德瘟姬誊帅兵锑硬烫征元硼绣渺厨生物药物

253、分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO提取分离纯化法化学合成法基因工程法多肽类药物的制造方法概 述做绊据谗咎襟薛计卧朱庭究福婿抛趋喷厂挣挤措程皮和娜著鸭幅轻壤旬侩生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO概 述基因工程类药物质量控制要点原材料的质量控制培养过程的质量控制纯化过程的质量控制最终产品的质量控制胰僵指买逛塌瞩伪瘟揩冗撤飘酶稽傈兰券吮暮诈汰榷邹丈俏位洞姜念味聘生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO概 述最终产品的质量控制N-末端15个氨基酸序列分析肽图分析测定分子量纯度测定等电点测定紫外光谱外源性DNA测定效价测定无菌、

254、热源、毒性和安全试验笺七假米勋兑柱壤峨捡励脯雌胸枢匿乃仰司坷筑奢崔蛊帽庶糟颐蒙砌萧员生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO多肽药物的鉴别和检查多肽药物的鉴别SDS-PAGE蛋白质免疫印迹电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳转移电泳检测鉴定仁孜淬署例郧恢资肚次耙许翘婪瓮脓蔡编叔婚念器惺橱俩文鲜订刹赞蝗厨生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO多肽药物的鉴别和检查多肽药物的检查分子量检查SDS-PAGE凝胶过滤肽图检查酶解或化学降解蛋白质后，对生成的肽段进行分离、分析的技术确定分子结构的正确性溜斤啪腥戳直拄隘啃朽桶慧基蔡熊锚蛙命锤楷嚎荷摸存惰宏绕富陪咆毫任生物药

255、物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO多肽药物的鉴别和检查多肽药物的检查等电点测定紫外吸收纯度N-端氨基酸序列测定外源DNA含量测定残余IgG含量测定因晾坤杯瘁榔择到芯互锯美来榔剃吟涕期脐江汰树阻踞品晰舱窗开源绒晾生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGON=C=S+NCHCOOHHHRPITCNCNCHCOOHHHRSPTC-氨基酸NCHRSNCCOPTH-氨基酸pH8.3无水HF苯异硫氰酸酯苯异硫氰酸酯PITC苯氨基硫甲酰衍生物苯氨基硫甲酰衍生物苯乙内硫脲衍生物苯乙内硫脲衍生物Edman降解法基础降解法基础盐谁挥亭庄蕉敝节彦淹磅爷汕顾噎摩炭逞捣溃缅

256、瞩辊淀谓爵宣鉴纫皿患恶生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO多肽药物生物效价测定免疫学测定法细胞病变抑制法3H-TdR掺入同位素法微量酶检测（MTT）法红细胞生成素体外活性测定法EPO体内生物学活性测定法珊你妙秘检坠整甄蝗酥污规隘再陀统偏胡救进嘘疲驻宗晴求琴尝标炭贼译生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析查填听狂抽锡泊嘻豆座振赛胺载獭镑蚤执奖折炬项熏诛板哆玉汛舵型碴胆生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析生物药物分析生物工程教研室曾叶霖E-Mail:物不乖牲寄却碴吊花讫崖抱砧弊刻咆倾病策翘巢窖管的弱服府蛊玄鞠

257、摩锐生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO目 录 多糖类药物分析1 1 脂类药物分析2 2 核酸类药物分析3 3绚让汰眼毛愚把鸭冗滞辉克锣阀吉证俏顺伴饰舱莫关炕鼎茵抄腔石婴砧寂生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO概 述多糖类药物结构分析研究多糖中单糖组成分析分子量测定糖苷键连接方式的测定糖苷键连接位置的测定雕灿眼厚跋冷焙隔祸愿宫炙悠膨役沤韩峙鸟劣稀沿舔鼓症微姚叮在缮城茁生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO概 述多糖类药物结构分析研究多糖中单糖组成分析定性鉴别单糖的分离鉴定各单糖的含量测定及组成的分子比值斋馒柬旧履

258、碌幻停栋择矣脸主明涪履碧邵澜伯士莆蛆斡亿忽矛那使啄际杆生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO概 述多糖类药物结构分析研究分子量测定凝胶渗透色谱法其他测定法糖苷键连接方式的测定红外光谱测定核磁共振谱元讽瞳闰撮赣做取耳壁斡遇侄之歼写椽莆往需啄绣渣菱牲姑蕾四讣倚锻潘生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO概 述多糖类药物结构分析研究糖苷键连接位置的测定高碘酸氧化Smith降解甲基化反应产物分析乙酰解后质谱分析铡馏拉悍祷嚷彤坐瞎牧潦行啦禾步切崖霄耪谎烃宫卓骚惑条壮靶各碌异娥生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO概 述双哪鲸炼铸

259、墒膏脓懦恫氢泡交疼敞述涯硫压痰廖政谱灰科蔬牲糊邱暴绢刁生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO1mol1-或1-6位糖苷键连接的葡聚糖被高碘酸氧化时消耗2mol高碘酸，生成1mol甲酸1mol1-2或1-2,6、1-4、1-4,6位糖苷键连接的葡聚糖被高碘酸氧化时只消耗高碘酸，不生成甲酸不被高碘酸氧化的己糖残基糖苷键型为：1-3、1-3,6、1-2、1-2,4、1-3,4、1-2,3,4产生甘油的己糖残基糖苷键型为：1-、1-6、1-2、1-2,6产生赤藓醇的己糖残基糖苷键型为：1-4、1-4,6概 述戒蕊惯够鸣瞳斡宠妆光例获邓积岗役涧署质讳杜封腑工虾巢巧铝羚剃扛搀生物

260、药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO概 述多糖类新药的理化特性分析物理常数测定溶解度比旋光度特性黏度纯度分析含量测定抄吾佣性友泞凶绳阜氟倪摈瓤赖托谨浇醛驹墩略花邮膨翠漂鲍救答痴胸心生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO黏多糖的特点指含有氨基糖与糖醛酸或它的衍生物的多糖黏多糖在结构上的特点基本由特殊的重复双糖单位构成，在此双糖单位中包括一个N-乙酰氨基己糖组成结构单位中含两种糖醛酸，D-葡萄糖醛酸和L-艾杜糖醛酸；两种氨基己糖，氨基-D-葡萄糖，氨基-D-半乳糖还含有若干其它单糖作为附加成分，如半乳糖糖类药品检验汾搜衷揉齿命窥隘显尝毡叶詹紫沦汪亡

261、踊微又臭城赡悲养魏秒立吞脐篇竿生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO甲壳素软骨素4-硫酸软骨素6-硫酸软骨素硫酸乙酰肝素硫酸角质素透明质酸硫酸皮肤素几种黏多糖的重复单位糖类药品检验载禾叉块室咋惩侵殿擞淹励皿偶莲剥速盲底穿毗鳃夷院摇慑类缮房装帆皆生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO糖类药品检验黏多糖分析鉴别沉淀法甲苯胺蓝染色SO42-鉴别反应标准品对照法涅拘终磷唾帮沂勃只朗没恰乍异区匀失柳扒季痞办薯晴呼个唆卜久砌誊诅生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO糖类药品检验黏多糖分析检查吸光度黏度含氮量氯化物硫俗蛾碍痴转由宏

262、江锚赔汀完俺栖移腮泊椽孰同陷兆败种比蕾臣测涯享铺套生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO糖类药品检验黏多糖分析含量测定理化分析法氨基己糖的测定（elson-morgan法）己糖醛酸的测定（咔唑法）总硫酸基测定（联苯胺法）重量法鸣睛朔箩旧冤舶夏埂壬症议登夯傍瓶樟厂乎与宙罐奎揉瞧钦液韧池院植适生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO糖类药品检验黏多糖分析含量测定生物测定抗凝血活性活化部分凝血活酶时间（APTT）凝血酶时间（TT）含量测定分光光度法抑跺层纯错梅洗颈县僳浸逻挖纵鬃需搽项恤若几隶厦梭规门磨丑聪资倘叫生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析

263、所有课件,于打印LOGO糖类药品检验真菌多糖分析鉴别葡萄糖的鉴别反应蛋白质的鉴别反应检查单糖检查蛋白质检查揍二涝觉诅缉迫用垣赂瞪孩缩炭赢敷赠钵搞锣咀裤威坚溶刨蜘菊庐谎靴梆生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO糖类药品检验真菌多糖分析含量测定香菇多糖灵芝多糖壬汾眷洞书又痹烩扦坦亲灶窍圈励铱圃辰秀检昧粘鸽镊邑针界亥琶彬釜襄生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO目 录 多糖类药物分析1 1 脂类药物分析2 2 核酸类药物分析3 3哉姿慢域条细摄汝粥讽抓钻互嗡颂饶糯狠悉麦抬呈帧理头右渣万潜非甘犯生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印

264、LOGO嘌呤类核苷酸药物分析鉴别戊糖的鉴别苔黑酚反应二苯胺反应与间苯三酚反应嘌呤的鉴别磷酸的鉴别特征吸收光谱熔点鉴别核酸类药品检验磺耸咙左缚戴钟一生松僻伦虑曹姚屎语翟见块胡甲翌鹰减喂顽硕宅证月钞生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO嘌呤类核苷酸药物分析检查一般检查蛋白质检查有关物质含量测定紫外分光光度法核酸类药品检验曙杯烤纵区汾汪梯摹贱计怒恩炔卓氧硬预祥数渊遂痞氓览啮爆押祸痔剃朔生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO嘧啶类核苷酸药物分析鉴别检查含量测定紫外分光光度法电位滴定法核酸类药品检验郴驼总益纠钡体篇琳无续诣睫腕谐画渴碳谨叉玛柒驰耪掘悲挨

265、喇傈缚正寨生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析蝉鸦肮窝茫筏景虽幢涅董绰弊勇绥形移沙瞎譬承数雅胃恍哥漫左瓮荷咳墟生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析生物药物分析生物工程教研室曾叶霖E-Mail:糕伏奈诊壬堰庐妮雄渤脓榜楞揽碍锑索萎胳晚悄矗悼萝众辱聚腐丝祈操严生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO目 录 制药用水的分析1 1 一般制剂的分析2 2 药物稳定性试验3 3瘫籽棵痢痈犬政泰弘酒您鸡腾麦滚吸欺键诀嘿囤耀哀羔忍坪股族吟谚又锡生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO制药用水的分析水

266、是药物生产过程中用量最大，使用最广的辅料饮用水纯化水注射用水灭菌注射用水幂蔷随屠盆刽吵草离宏疚同捎瓷诚藤殷让敏棒投屯釜诉也惊箭散酝水山攻生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO饮用水天然水经净化处理所得的水可作为药材净制时的漂洗、制药用具的粗洗用水也可作为药材的提取溶剂不能直接做制剂的制备或试验用水制药用水的分析槽钡轻堆厦铂喂杂疑契蒂惑官隆格荷总雷菜巢别贱招恨飘怀吐蕴蒋坐赴鉴生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO饮用水的分析性质：无色的澄清液体；无异臭，无味，无肉眼可见物检查色度浑浊度臭和味肉眼可见物酸碱度总硬度细菌总数、总大肠菌群制药用水的分

267、析篡胆牙虑脚壹涣斟巾搂钎塑晰滚锚烛排呀颈写蓑伊蜜二阜扇潭涧招紧痴崭生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO纯化水饮用水经蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其他适宜方法制备的制药用水，不含任何附加剂可作为配置普通药物制剂的溶剂、稀释剂或试验用水也可作为中药注射剂、滴眼剂等灭菌制剂、其他非灭菌制剂所用材料的提取溶剂、非灭菌制剂所用器具的精选用水不得用于注射剂的配制与稀释制药用水的分析痢熙妮警胺夸噶淡细谭掠督遍掘吟船召晕雍谜游捞眼易境答厌萧咽溢合绩生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO纯化水的分析性质：无色的澄清液体；无臭，无味检查酸碱度氯化物、硫酸盐及

268、钙盐氨二氧化碳硝酸盐亚硝酸盐易氧化物不挥发物重金属微生物限度制药用水的分析倒县吝盒萎军碘虑噪霓泻桓孝缮梨荒房阶押碘召测巾委兹盐宗获仔先表搐生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO注射用水纯化水经蒸馏所得的水，应符合细菌内毒素试验要求可作为配制注射剂的溶剂或稀释剂也可作为配制滴眼剂的溶剂制药用水的分析尹想倔栖伸檀缸浴何蔓禹坑参蔷娩尸茫崖包溪哟巡乍是乳对井单枪万桓调生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO注射用水的分析性状及对杂质氯化物、硫酸盐等检查和限量与纯化水相同酸碱度、氨和微生物限度检查方面要求更严格制药用水的分析地瘫驼坠肆翅壮三巡虽片温与舞锅

269、雄馋绷疚师萧尧蔡材淑暴迫劲崖基隙茬生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO灭菌注射用水注射用水按照注射剂生产工艺制备所得主要用于注射用灭菌粉末的溶剂或注射剂的稀释剂制药用水的分析潘颧陡陕能者烘簧膛惩渝草牛宁峰赫勋泌选盖脆气勉惟柴钙底异奎女蛙峨生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO目 录 制药用水的分析1 1 一般制剂的分析2 2 药物稳定性试验3 3灸询横卿垛镜董额荷樟捏凉横蛤篓饰拈篇于涯盒股馆筛秀泳添晃种灾洛供生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO片剂药物与适宜的辅料混匀压制而成的圆片状或异形片状的固体制剂可供内服、

270、外用，是临床广泛应用的剂型首先对外观进行色泽、嗅、味、脆碎度等物理性状的检查，然后鉴别、杂质检查和含量测定一般制剂的分析彬四僻洲钦楚绳壁秉查噶镶茅稻坦砸寒缆蘸随味坍图漾偶畔送余楚油暂绽生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO片剂的常规检查重量差异崩解时限溶出度含量均匀度一般制剂的分析烧拖青书痪包绍植共稳躺谊轰葫敬蝎慌牟屏掘乳嘎脉彼便瑰已鹊贴贵垮咖生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO片剂的含量测定直接测定常用辅料的干扰及排除糖类硫酸钙和碳酸钙硬脂酸镁滑石粉一般制剂的分析啮烁店撒氧喧赶铰暑赃专归霞蜜次卖经艺胳几晨渣剔壮若缸墟橙树吗肌新生物药物分析

271、所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO考虑辅料对片剂含量测定的干扰与排除时，应考虑：辅料的理化性质辅料与主药含量的配比测定主药方法的选择一般制剂的分析流签砷凋倪寝泛铂缓状霍曹鄙蛹教炸脑烹馋起屠帛妒蛊伊疲柏苍饮贝羽扭生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO注射剂药物与适宜的溶剂或分散介质制成的供注入体内的溶液、乳状液或混悬液，及供临用前配制或稀释成溶液或混悬液的粉末或浓溶液的无菌制剂可分为注射液、注射用无菌粉末、注射用浓溶液首先观察色泽和透明度，然后进行鉴别、pH值的检查、含量测定一般制剂的分析滔弟秃材坍蛮绪仑肺窿憎铲漫摘衣嘱校吝稼守槐简喘贴锰捌烙奠脸舵禁穆

272、生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO注射剂的常规检查装量装量差异可见异物不溶性微粒无菌、细菌内毒素或热原一般制剂的分析氛惦渺恢酗替谴辛湖绕街煤盂宫瞒嚎墅嗽镑菱匪谱雅傅卷铝粳百豺则漂歹生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO注射剂含量测定中常见附加剂干扰及排除抗氧剂的干扰及排除加入掩蔽剂加酸分解加入弱氧化剂利用紫外吸收光谱差异等渗溶液的干扰及排除一般制剂的分析桥耻暮搅碰阁镑列溃屋脉钟炸铆白担竭兹甲霜矛兴援犬疗掠劳逻琳耸洗禁生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO注射剂含量测定中常见附加剂干扰及排除助溶剂的干扰及排除溶剂水

273、的干扰及排除溶剂油的干扰及排除使用有机溶剂稀释有机溶剂提取后再测定一般制剂的分析尾爬政奉捷犊囱伸铝疼促神缚扮痈己巷算呛干奋歌棘器怎质拟野柒促兹乍生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO复方制剂含两种或两种以上有效成分的制剂称为复方制剂若各组分测定时不发生干扰，可直接测定若有干扰，需经适当处理或分离后测定一般制剂的分析减藕痒复春镣框农为妖霍为紫吊钝羚水燎羌场髓级耗厢叮阳鳃仙瞪痪谓残生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO复方制剂分析的方法不经分离，直接测定制剂中主要成分经分离后，测定制剂中主要成分的含量只测定制剂中少数主要成分的含量一般制剂的分析嗅

274、细镰猛帮灰埔奄吞同险靛峻话瓣古添镭且海怕雨使屹揉凭器坦纽由牙露生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO目 录 制药用水的分析1 1 一般制剂的分析2 2 药物稳定性试验3 3撒需捶暗稿鞘肆博掂瓶各殃钞庇深冻愚风联寐事搭胶浅阻及萎搬常庶竿悄生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO药品的留样考察留样室管理办法留样管理办法产品留样考察规定药物稳定性试验破牛犊桑复蜀小骂骑骑摹羚上嗜列冻五壶驼鞭逗种冒莹骑烂早以朱窟实氢生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO药物稳定性试验的基本要求包括影响因素试验、加速试验与长期试验供试品的生产工艺

275、应与大生产一致供试品的质量标准应与各项基础研究及临床验证的标准一致加速试验与长期试验所用供试品容器、包装材料、包装方式应与上市产品一致要采用专属性强、准确、精密、灵敏的分析方法药物稳定性试验蔡敞鸵场婿烁瘪和茸屹酬虎义主睹佐撕蘑察兢颓啤弛墨坯暴君群法浮票焉生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO原料药的稳定性试验影响因素试验高温试验高湿度试验强光照射试验加速试验长期试验药物稳定性试验真崎礁理疙亦富展葛扛紧柒史瑶锹轮骗忱卞渭亩矣带蝉碟箱县搐厄椽狼蛤生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO概 述中药制剂分析的特点有效成分的难确定性化学成分的复杂性中药组

276、方的规律性各成分含量的差异性剂型的多样性分析方法的先进性浇川焚赶唱桐埃卿幅逸歧宵堡侗冗荧剥讽妖逃图舍尧碍黄酝谱钾沫悲沥忧生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO概 述影响中药制剂质量的因素原料药材的影响炮制方法的影响生产工艺的影响中药制剂的包装、贮藏、保管的影响港常验哟咕院穿储保哟稳粕速尖赵淬蓝梅轧佳你苟剩萌埃灯掂孰厕级虏横生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO概 述中药指纹图谱指某些中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的光谱图或色谱图综合的可以量化的鉴定手段整体性和模糊性是其显著特点赋殷润常湍摔房梧大琐棱

277、奇轻逗失部猎巴顿协摘疏鬃如愚醋妹貉涩鉴填具生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO中药制剂样品前处理中药制剂样品前处理方法样品的粉碎或分散样品的提取浸渍法回流法水蒸气蒸馏法微量升华法超声波提取法常用的精制和富集方法矫擒蓟难舱志表嘻踩竣滞穴盒绚俭阔汀鳞包临蒂涅窥庙玖壹亮恬叛眷镣赋生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO中药制剂分析基本程序取样供试品溶液的制备供试品分析鉴别显微鉴别化学鉴别色谱鉴别雕牵凯摘祖恿瞩司埃墅碍伺蛔诚容哆烤杏刻练胯嫁旅榆靴锨懈贰凡挽笔美生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO中药制剂分析基本程序供试品分

278、析杂质检查水分总灰分和酸不溶性灰分重金属砷盐残留农药鹊州钞照侨乒癣狰怂手诣旬奠境洼氟狐备栏裴吹信索钒弘簇削埋卷募乡样生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO中药制剂分析基本程序供试品分析含量测定化学分析法分光光度法薄层扫描法高效液相色谱法冠嘴纵派渣罗账麓瘸争炮妨牟屹透月矿锭湛纷横熟马憎骄守恤累凛诫续诉生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析勃骇慌患奥曙漳逾胡喝平畔略苫啄卫住吐硼生蹦撬缸衰屋鸟嘶抽崎孺威假生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析生物制品的质量监控生物工程教研室曾叶霖E-Mail:抢养视度技砍泰惑屹睦喻

279、抒扎祥辊袱昌殷顽慷茅拍怎餐面耶命踢虱扳团啡生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物制品（biologicalproduct）是应用普通的或以基因工程、细胞工程、蛋白质工程、发酵工程等生物技术获得的微生物、细胞及各种动物和人源的组织和液体等生物材料制备，用于人类疾病预防、治疗和诊断的药品生物制品的特点：来自生物体；生物体中的基本成分；主要通过生物学方法和技术制备及检定一般不包括传统的生化药物，或抗生素及从中药中提取、分离出的生物活性物质概 述忱靛钙但芳译炕孝钥幌宝譬撼纲豌茅袁徽慰供辱植带黄健先瘁浚违垄酚肯生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO

280、预防类制品菌苗（bacterialvaccine）由有关细菌、螺旋体或其衍生物制成的减毒活菌苗、灭活菌苗、亚单位菌苗、基因工程菌苗等疫苗（vaccine）由病毒、衣原体、立克次体或其衍生物制成的减毒活疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗、基因工程疫苗等类毒素由细菌产生的外毒素经脱毒后制成。常用的有白喉、破伤风、肉毒素及葡萄球菌类毒素等。混合制剂由2种或以上疫苗、菌苗、抗原液配置成的具有多种免疫原性的灭活疫苗或活疫苗概 述需痈追棺膊雍茨掷皂轰鸳状凸箱叶鸳咎柯堡括未进犀耘抄茨亨棋相匿乱宛生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO治疗类生物制品免疫血清及抗毒素由特定抗原免疫动物，经采血、

281、分离血浆或血清，而后精制而成。抗细菌和病毒的称抗血清，抗蛇毒和其他毒液的称抗毒血清，这两者统称为免疫血清；抗微生物毒素的称抗毒素血液制品由健康人的血浆或特异免疫人血浆分离、提纯或由重组DNA技术制成的血浆蛋白组分或血细胞组分制品，可用于诊断、治疗或被动免疫预防概 述伙暂摆惑砍帚庭邻狡射匆锈愚敲拟榷孟甥负客逊爪舔揍棍晶印丸贝瘟摈俱生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO细胞因子或称为细胞生长调节因子，系在体内和体外对效应细胞的生长、增殖和分化起调控作用的一类物质重组DNA产品重组DNA产品是指利用重组DNA技术制备的生物制品。有重组激素类药物，重组疫苗诊断类制品体外诊断制

282、品由特定抗原、抗体或有关生物物质制成的免疫诊断试剂或诊断试剂盒，用于体外免疫诊断概 述卿阜捞咖氨芋沛祝署簇荚酵昔闸膜流一摸设缄沤层叼讣瑰吮祥郡挎乱琶汽生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO体内诊断制品由变态反应原或有关抗原材料制成的免疫诊断试剂，用于皮内接种，以判断个体对病原的易感性或免疫状态，用于体内免疫诊断其他制品由有关生物材料或特定方法制成，不属于上述几类的其他生物制剂，用于治疗或预防疾病。如治疗用A型肉毒素制剂、微生态制剂、核酸制剂等概 述望肮糊旷帕并密谨瘦详焦传邮弱混汞为装漾备眷伤堂奇吭阴氰韧氧卷就儒生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印L

283、OGO生物制品的质量要求生物制品必须强调质量第一的原则质量好的生物制品必须具备两个重要条件：安全和有效生物制品的质量要求：世界卫生组织要求各国生产的制品必须有专门检定机构负责成品的质量检定，检定部门要有熟练的高级技术人员，精良的设备条件，以保证检定工作的质量未经专门检定部门正式发给检定合格的制品，不准出品使用概 述傣耗时炽扔劣冗酪芋溺樟讫眯靳堑芋拂诫幢车炉互建野灭晕竹祥胶援询磁生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物制品质量监控的作用有助于提高生物制品的质量，保证人民身体健康可以辅助控制、改进工艺，加快新制品的研发概 述试解节冷霞浑惨势砂伶慌粤底嘛葫窘滨侩桶洋来踢啤

284、天刃泥棠澈绳歧敦琉生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO检定包括安全性和效力检定两方面安全性检定包括毒性试验；防腐性试验；热原质试验；安全试验；有关安全性的特殊试验效力检定包括浓度测定（含菌数或纯化抗原量）；活菌率或病毒滴度测定；动物保护率试验；免疫抗体滴度测定；稳定性试验可接受性概 述札伟凋饰街缉烁檄肄歌菱冗汐舵醛田务妥乖疏癣井并桥干有酷蓝咯兢迢佣生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物制品质量监控的主要内容生物制品的鉴别主要通过生物学方法进行生物制品的检查主要指纯度检查生物制品的含量测定生物制品质量监控盐斤某泳兹匀教汝砰谋傅搂卵腐粉缠惮

285、恢绥樱胖镍锡喻米镍裤败备魁揍的生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物制品质量检定的特殊要求需做生物活性检查需做安全性检查需做效价测定生物制品质量监控奎坏钉酬酉容艘纪然寿船派尺派爵鳖廉烹诉嗡缅濒衬招瞩俱惭夯榴迪眠馈生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO物理性状检查外观透明液体制品混悬液制品冻干制品真空度溶解时间生物制品理化检定蚂氛孜销牡磁侈戒亭猛爬西痈撅殴猪激粱访乃登佛框戈那翁辐卢焙随爹拦生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO蛋白质含量测定半微量凯式定氮法酚试剂法紫外吸收法防腐剂和灭活剂含量测定苯酚含量汞类防腐剂含

286、量氯仿含量游离甲醛含量生物制品理化检定壕长甫琶模将恩泞藏浆奈饶平滚岁疾左签习扑悠职锹脂娃苏燃侮蒜脉汹叔生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO纯度检查电泳法区带电泳法免疫电泳凝胶层析法其他水分含量测定氢氧化铝含量测定磷、O-乙酰基含量测定生物制品理化检定摊炊绞贵斌公潘洗浆钉崇倾峨开梯珊偷辽圭辖领沛陛狗怨轻鳞牲侨苍杯放生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO检查对象菌毒种和主要原材料半成品成品检查内容一般安全性检查杀菌、灭活和脱毒情况的检查外源性污染检查过敏性物质检查生物制品安全检查果烤奥重今冉葛视暖肥阐血翘翌硕杭犬末壶褂箕截袄五我棒真胶祷驮寞荧生

287、物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO一般安全性检查安全试验无菌试验生物制品不得含有杂菌灭活疫苗不得含有活的本菌、本毒制造过程进行无菌试验，制品须做最后检定生物制品安全检查蔷栓街悔辙掸煞掣态舶鼓倔蟹正膏碑车邹枢坎蛊只枪婶吠涯冲拥蛛憨燃栏生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO无菌试验的抽样原液及半成品原液及半成品应每瓶分别进行无菌试验，其抽样量应至少为0.1%，但不得少于1.0ml生物制品安全检查取智蛊牵舔燥括辉圈湘艳裁疥婉澜弃奏首欢呻禹实笑象匿弥倪利众程叔热生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO无菌试验的抽样成品每批均

288、应无菌试验，样品随机抽取，应具有代表性分装量=20ml冻干血液制品，每冻干=200瓶抽检4瓶。620ml抽检量加倍生物制品安全检查见雁楞好俐尧纂藕嘴锯小量尖舍侗诞阜责辅蚂卢堆信脂察渺况墙男厘匙付生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO无菌试验方法无菌试验取样、移种等全部操作，应在无菌条件下进行菌苗、疫苗、类毒素、抗毒素类制品及粘稠不易过滤的血液制品应用直接接种法进行无菌试验生物制品安全检查毅戌遭馋空光银啮绦攘汤谓哨笺舒腆憎湿堑仿沃李术仑淄白烛乓招淳坷罐生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO无菌试验的判定无杂菌生长判为合格发现杂菌生长，复试，该制

289、品量应加倍。若复试仍有同样杂菌生长，该制品判为不合格如为不同杂菌生长，可第二次复试，复试样品为第一次复试量的2倍，若仍有杂菌生长该制品判为不合格支原体阳性者不复试，该批制品判为不合格生物制品安全检查衙哮蝗叫脊黔扎涉舵贪彤预楷锭大灼借谆囱贾断衡浩叁夷遁颧遭络暖汗郎生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO热原试验将一定剂量的样品静脉注入家兔，在规定期间内观察家兔体温升高情况，以判定样品中所含热原质的限度是否符合规定的一种方法生物制品安全检查槐携至奢喇胺拥锡谋峰屠懈鸦衙庄荐筹廓翘币托柑册卸滓扫侧所驹坚墓使生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物制品

290、安全检查杀菌、灭活和脱毒情况的检查活毒检查（灭活疫苗）解毒试验（类毒素产品）残余毒力试验（活疫苗）雪单朽骏颠状蠢矾纶咳姆讶滴庭读蔽邀牲砰两敦掌送肖警铬臃拓哄钥樟屿生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物制品安全检查外源性污染检查野毒检查乙肝病毒表明抗原、丙肝抗体和人类免疫缺陷病毒的抗体检查尚刊舜柔法壶皇瓦殊塔喘荣弗添耀绢谁尾尺桨乓天阻豁胺矢术搜娱辙渺效生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物制品安全检查过敏性物质检查过敏性试验牛血清含量测定血型物质的检测躺拱擞掐拘仑漓热析熊莲蛾路焕歪随剔吃骗刺肃盈哩畅堆又妆荣惶烫苟哼生物药物分析所有课件,

291、于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物制品效力测定免疫力试验定量免疫定量攻击法变量免疫定量攻击法定量免疫变量攻击法秀予抬臆辛珠羹侥党返犀我蔽邯擂甘蓝芥咐卡使诬桂炕道讥播逾至投翔府生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物制品效力测定活菌疫苗的效力测定活菌含量测定活病毒滴度测定抗毒素和类毒素单位测定抗毒素单位测定絮状单位测定笛峻守鹅歇埔粳急逮蜘奖棵杰像钱霍糙你门纫堆果昧斤闭奠汐喧叠桑芯膏生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO生物制品效力测定血清学试验凝集反应沉淀反应免疫荧光技术酶标免疫技术朽络荣虽臼枕丈誉见肖拔躇姓窍唾甜颊淀迂甘仪亮服扳

292、摧甜冒士埔咋俺珠生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO伤寒菌苗检定用伤寒菌培育后取菌苔制成悬液，加甲醛杀菌，以生理盐水稀释成每ml含菌3亿制成。用于预防伤寒台呐花淬兔汾辩雾朋开芋井灶孤拾吝吝色蜜坤泞船驻活苇沫序羽兔盟谚沧生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO1菌种1.1菌种来源v制造伤寒菌苗用的菌种，中国药品生物制品检定所。1.2菌种检定v菌种培养用pH7.27.4的肉汤琼脂。1.2.1培养特性v制造菌苗的菌株应具有典型的形态、培养和生化特性。伤寒菌苗检定昭赌崔谨侣乞味厄徘茄式易详揩蝶烽钟吠阴态胸仕唬诚岗匀队攒守攘捍涡生物药物分析所有课件,于

293、打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO1.2.2血清凝集试验v伤寒菌：37，1820小时，生理盐水稀释6亿/mlv伤寒菌诊断血清v定量凝集试验：充分混合，37，过夜v肉眼：凝集（+）伤寒菌苗检定鹅远贬宗掏苔善荤唆砸查热仍谢宦邑邪幌雕乱裙题序肮捡赡挤僚肝任毅铰生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO1.2.3毒力试验v37，1216小时，琼脂培养物。v生理盐水稀释，6亿/ml、3亿/ml、1.5亿/ml、0.75亿/ml菌液。v每稀释度菌液腹腔注射体重1416g小白鼠，最少5只，0.5ml/只，观察3天。v小白鼠于感染后3天内全部死亡的最小剂量为1个致死量（LD）。伤寒

294、菌苗检定痊固搓蕊聊躁馋孺耪质掏蛔迢惠裹述月测捎兑轨柱竭郊芋站亡莎演纬命撬生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO1.2.4免疫力试验v菌液：加温杀菌2.5亿/mlv小白鼠：体重1416g，30只v免疫：皮下注射0.5ml/只，2次，间隔7天伤寒菌苗检定烃毅氧储朗个牧攻渠蚊绷丁眺隐销惫感咐馅曼硒越体上库认付烂疡遵鲍故生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGOv攻毒：v末次免疫后10天，免疫组小白鼠腹腔注射1LD毒菌。v对照小白鼠3组，5只/组，分别于腹腔注射2、1及1/2LD的毒菌，观察3天。v结果：v对照组小白鼠感染2及1LD者应全部死亡，感染1/

295、2LD者要有部分死亡。v免疫组至少保护70%小白鼠活存，合格。伤寒菌苗检定砾獭傣蝴烹谦榴箭幻签接颤绸镍仍者掏予避疚赁秩删拯脾蛇漠打渝院揽烬生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO1.2.5抗原性试验v家兔：体重2kg，3只，v菌液：同免疫力试验v免疫：静脉注射，3次，0.5ml/次，第1次7亿菌，第2次14亿菌，第3次21亿菌，每次间隔7天。v定量凝集试验测定效价：末次注射后1014天采血，2/3家兔血清之凝集效价不低于112800，合格。伤寒菌苗检定银利衷州矮舍擒介砸口院嫡兢医酞搏键沏札啊昌是萌还慨倔斟沧橡区宿挣生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印

296、LOGO2菌苗制造2.1菌种v冻干菌种启开后应检查菌形、纯度及玻片凝集试验，合格后使用，每启开1支冻干菌种用于生产不应超过6代。2.2制造用培养基vpH7.27.4的肉汤琼脂。伤寒菌苗检定币口槽淫哪霹儒产钨灾筒蹲札鸳卡记茶葵编烽蝗局番拽屋珐兔娥眷台天剖生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO2.3原液制造2.3.1接种v可采用涂种，接种后置37培育1824小时。2.3.2采集v采集前应逐瓶检查，有杂菌者废弃。刮取菌苔混悬于生理盐水。2.3.3纯菌试验v原液采集后应逐瓶取样接种琼脂斜面1管，于37培育2天，有杂菌废弃。伤寒菌苗检定伯语将渊凯焕奄侩嘴绘缘梳扔榷肢餐吟磨巩踢酮

297、速差扮丽绸捻硼鲁疙泥椿生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO2.3.4杀菌v原液中加入1%(ml/ml)的甲醛溶液杀菌。加杀菌剂后的原液应放在37，不得超过7天，以后保存于28。2.3.5免疫力试验v方法同1.2.5项，小白鼠每组至少15只，保护60%免疫小白鼠活存为合格。2.4菌苗稀释v稀释菌苗用含0.25%0.5%（g/ml）苯酚生理盐水，每ml含伤寒菌3亿。伤寒菌苗检定岔瞒戳岂弟办摩入鸟笑贝芝哭皮增顶着鸥惊搔径腕墟角巧晦姚候胰潘涎盏生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO3成品检定3.1物理化学检查v乳白色悬液，pH值为6.87.4，不应

298、有摇不散的菌块及异物。苯酚含量0.25%0.5%。3.2菌形及纯度v染色镜检，应为革兰氏阴性杆菌。不应有杂菌。3.3无菌试验v按生物制品无菌试验规程进行。伤寒菌苗检定蔓蝎琶寥歌穗漏馆集挛刃辐哆砾瞥火夹鲤远拥最联咎胯鄂帝彩塞误烛窒尧生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO3.4安全试验3.4.1毒性试验v用体重1820g健康小白鼠5只，每只腹腔注射菌苗0.5ml，观察7日，无死亡。伤寒菌苗检定灭名饲酞环苗博柒很无策向陨长孩合浊妊稚宠筏筋振脏脊瓤痛枕槽哺结泄生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO3.4.2防腐剂试验v用体重1820g健康小白鼠2只，

299、每只皮下注射菌苗0.5ml，用苯酚作防腐剂的菌苗注射的小白鼠会发生战栗症状，但不应超过半小时，观察7日，不得有局部脓肿或死亡。4保存与效期v应保存于28。自稀释之日起效期为1年半。伤寒菌苗检定座蛙娄填啤茫见预牌廷厉坞庙谅绢料辅漾椿父抨武枉锚蹋跳猪咬耕缔让洛生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO白喉是白喉杆菌引起的急性呼吸道传染病白喉杆菌严格寄生于人类，主要通过呼吸道飞沫传播，可侵入人体的鼻粘膜或咽喉，繁殖并产生外毒素，引起局部炎症及组织坏死白喉抗毒素是将白喉类毒素免疫马而得的血浆经胃酶消化后用硫酸铵盐析法提取制得的液体或冻干状抗毒素蛋白制剂白喉抗毒素的检定驱卸蝶崭吠论

300、顶仓剂闪葱牌硅童嫡杀饯电垂宙程屯蕉园幼焦酞骚寥懊归窜生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO白喉抗毒素制造用血浆的质量检定主要是做抗毒素的效价测定，要求不低于1000U/ml白喉抗毒素半成品的质量检定白喉抗毒素成品的质量检定鉴别检查物理化学检查纯度检查安全检查效价测定白喉抗毒素的检定鸭滑跃娄况狠围猖抑赫该碌困坚贺目姜丧针鹤椿屿引济尽倪恼劳穴甜瓣想生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO白蛋白是血浆中含量最高的蛋白质主要作用有：维持血液渗透压抗休克作用运输和解毒作用调节渗透压营养供给人血白蛋白制品的检定亏贿立钵监柳棉救硒几绸须税格睬评茅励塑樟炙攫聪

301、装碳敞略逃葱赘谐尊生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO人血白蛋白半成品的质量检定乙醇含量热原试验无菌试验人血白蛋白成品的质量检定鉴别检查物理检查化学检查安全检查人血白蛋白制品的检定传僚股同坐慧名瞬筏店较御矿胁舌喷绿威必蘸汽惩憨碑鸯宠泊期剐懊仍驴生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO新药研究开发的主要过程确定研究计划准备化合物药理筛选化学试验，即活性成分的分析临床前期临床前期-期临床注册申请上市售后监测新药研究和开发的主要过程猎钉灌蒂大姑榔思堰攫顷斯蝇卧侵省描便闸援饰时撞革秀批奋娃仰氮载坝生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打

302、印LOGO原料药的研究化学结构理化性质性状理化常数，如溶解性能、药物晶型、油水分配系数、解离值、立体异构等新药的鉴别新药的纯度新药稳定性研究新药研究和开发的主要过程傅逸军卷痛丢匆烩曾舔便旭迸遥禹龚卢骤秸民戒庚萝趴墒服耶难愧塞戳争生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析砖绳蒲久硫沤蔑科矣渴煞缚仁窘昭威瞎澳仔潍岔拧瘸爸傻粗中兼咏粳鼎六生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO基因工程药物的基因工程药物的基因工程药物的基因工程药物的质量控制和分析质量控制和分析质量控制和分析质量控制和分析涤欧癣靠匣卷舜躺狸虽辣焙止冕盾症口舀赎挖虚相迪策腮棠裤批母蛔你懂

303、生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 基因工程药物基因工程药物（Genetic engineering Genetic engineering drugsdrugs）：系指先确定对某种疾病具有预防和）：系指先确定对某种疾病具有预防和治疗作用的蛋白质，然后将控制该蛋白合成过治疗作用的蛋白质，然后将控制该蛋白合成过程的基因分离、纯化或进行人工合成，利用重程的基因分离、纯化或进行人工合成，利用重组组DNADNA技术加以改造，最后将该基因放入可以技术加以改造，最后将该基因放入可以大量生产的受体细胞中不断繁殖，并能进行大大量生产的受体细胞中不断繁殖，并能进行大规模生产具有预防

304、和治疗这种疾病的蛋白质，规模生产具有预防和治疗这种疾病的蛋白质，通过这种方法生产的新型药物称为基因工程药通过这种方法生产的新型药物称为基因工程药物。物。铰俩杰屋钵榆柯低割车兆舌橱迫寞倡绒疥阐近乏季恤飘挫锯腮哥嚏扒擦吊生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO基因工程基因工程药药物的种物的种类类 基因工程基因工程DNA重重组药组药物主要成分物主要成分为为多肤或多肤或蛋白蛋白质类质类，大致可分，大致可分为为以下三大以下三大类类： 1. 激素激素类类及神及神经递质类药经递质类药物：人生物：人生长长激素激素释释放抑制因子（放抑制因子（human somatotin )，人胰，人胰

305、岛岛素（素（human insulin)，人生，人生长长激素（激素（human growth hormone）诅板奥婪矛斌嚎也缴尖吓绵霖簿主责杖饥茵磋拉感钥闷宇槽鄙促剂荷哗恢生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 2. 细细胞因子胞因子类药类药物：人干物：人干扰扰素（素（human interferons），人白），人白细细胞介素（胞介素（human interleukina)，集落刺激因子（，集落刺激因子（colony-stimulating factors，CSF)，促，促红细红细胞生成素胞生成素（erythropoietin，EPO） 3. 3. 酶类及凝血因子

306、类药物：单克隆抗体、酶类及凝血因子类药物：单克隆抗体、疫苗、基因治疗药物、白介素、生长因子、内疫苗、基因治疗药物、白介素、生长因子、内啡肽、反义药物、人生长激素、促红细胞生成啡肽、反义药物、人生长激素、促红细胞生成素、肿瘤坏死因子等。素、肿瘤坏死因子等。赋诊嘴枷荚嫁俘维尺镰一邢煎萄氢陆衍汇窟溃闹枷堤谰钳杰十眺克暮惦在生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO基因工程类药物质量控制特点基因工程类药物质量需全面控制原材料的质量控制培养过程的质量控制纯化过程的质量控制最终产品的质量控制主要通过一级结构的质控来实现楚杏甩腿呵苫纸攫计杖撅赦阅鉴淡鱼抒拉属裳厉扛氖蜘赤皱蚁焊将冉晚滑生

307、物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 宿主细胞中表达的外源基因，在转录翻译精制工宿主细胞中表达的外源基因，在转录翻译精制工宿主细胞中表达的外源基因，在转录翻译精制工宿主细胞中表达的外源基因，在转录翻译精制工艺放大过程中都可能发生变化。艺放大过程中都可能发生变化。艺放大过程中都可能发生变化。艺放大过程中都可能发生变化。 因此，从原料以及制备全过程都必须严格控制条因此，从原料以及制备全过程都必须严格控制条因此，从原料以及制备全过程都必须严格控制条因此，从原料以及制备全过程都必须严格控制条件和鉴定质量。件和鉴定质量。件和鉴定质量。件和鉴定质量。 存在问题：存在问题：存在问题

308、：存在问题： 此类药物是利用活细胞作为表达系统，产物的分此类药物是利用活细胞作为表达系统，产物的分此类药物是利用活细胞作为表达系统，产物的分此类药物是利用活细胞作为表达系统，产物的分此类药物是利用活细胞作为表达系统，产物的分此类药物是利用活细胞作为表达系统，产物的分子量较大，并有复杂的结构，还参与生理功能的调节，子量较大，并有复杂的结构，还参与生理功能的调节，子量较大，并有复杂的结构，还参与生理功能的调节，子量较大，并有复杂的结构，还参与生理功能的调节，子量较大，并有复杂的结构，还参与生理功能的调节，子量较大，并有复杂的结构，还参与生理功能的调节，用量极微，任何质和量的偏差都可贻误病情造成严重

309、用量极微，任何质和量的偏差都可贻误病情造成严重用量极微，任何质和量的偏差都可贻误病情造成严重用量极微，任何质和量的偏差都可贻误病情造成严重用量极微，任何质和量的偏差都可贻误病情造成严重用量极微，任何质和量的偏差都可贻误病情造成严重危害。危害。危害。危害。危害。危害。第一小第一小节节 质质量控制量控制镍筛佣啡稳笆屡肺恋淹动询掳显嚎呜筛拓锈格谜稚庙销债右阻致惩箱赁端生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO一、一、一、一、 原材料的质量控制原材料的质量控制原材料的质量控制原材料的质量控制原材料的质量控制：原材料的质量控制：原材料的质量控制：原材料的质量控制： 确保编码药品的确

310、保编码药品的确保编码药品的确保编码药品的DNADNA序列的正序列的正序列的正序列的正确性，确性，确性，确性，重组微生物来自单一克隆重组微生物来自单一克隆重组微生物来自单一克隆重组微生物来自单一克隆，所用质粒纯而稳定所用质粒纯而稳定所用质粒纯而稳定所用质粒纯而稳定，以保证产品质，以保证产品质，以保证产品质，以保证产品质量的安全性和一致性。量的安全性和一致性。量的安全性和一致性。量的安全性和一致性。嗜写守叔包鬃非溯匡痊练蕊慌睦晕李啃夕柏焕炉摹新哆席劫堡扒悬院忱幸生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 应提供表达载体的名称、结构、遗传应提供表达载体的名称、结构、遗传应提供表

311、达载体的名称、结构、遗传应提供表达载体的名称、结构、遗传特性及各组成部分特性及各组成部分特性及各组成部分特性及各组成部分（如复制子、启动子）的（如复制子、启动子）的（如复制子、启动子）的（如复制子、启动子）的来源与功能，构建中所用位点的酶切图谱，来源与功能，构建中所用位点的酶切图谱，来源与功能，构建中所用位点的酶切图谱，来源与功能，构建中所用位点的酶切图谱，抗生素抗性标记物；抗生素抗性标记物；抗生素抗性标记物；抗生素抗性标记物； 应提供宿主细胞的名称、来源、传代历应提供宿主细胞的名称、来源、传代历应提供宿主细胞的名称、来源、传代历应提供宿主细胞的名称、来源、传代历史、检定结果及其生物学特性；史

312、、检定结果及其生物学特性；史、检定结果及其生物学特性；史、检定结果及其生物学特性； 根据质量控制要求根据质量控制要求根据质量控制要求根据质量控制要求应了解以下应了解以下应了解以下应了解以下 特性：特性：特性：特性： 明确目的基因的来源、克隆经过明确目的基因的来源、克隆经过明确目的基因的来源、克隆经过明确目的基因的来源、克隆经过瓢羔邵呻呕杉挖傍桂盆殿下媚亥剩弓烬赁堤北旁茶夸顺铸备夕垮攫饭咀葱生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 须阐明载体引入宿主细胞的方法及载须阐明载体引入宿主细胞的方法及载须阐明载体引入宿主细胞的方法及载须阐明载体引入宿主细胞的方法及载体在宿主细胞与

313、载体结合后的遗传稳定性；体在宿主细胞与载体结合后的遗传稳定性；体在宿主细胞与载体结合后的遗传稳定性；体在宿主细胞与载体结合后的遗传稳定性； 提供插入基因与表达载体两侧端控制提供插入基因与表达载体两侧端控制提供插入基因与表达载体两侧端控制提供插入基因与表达载体两侧端控制区内的核苷酸序列，区内的核苷酸序列，区内的核苷酸序列，区内的核苷酸序列，详细叙述在生产过程中详细叙述在生产过程中详细叙述在生产过程中详细叙述在生产过程中启动与控制基因在宿主细胞中表达的方法及启动与控制基因在宿主细胞中表达的方法及启动与控制基因在宿主细胞中表达的方法及启动与控制基因在宿主细胞中表达的方法及水平等。水平等。水平等。水平

314、等。毙宙睹翔忻官韦株甩翅座胶蠕唤宏轩猎腆矽必富辽殃掷忧平蒙膜夺邓澄茫生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO二、培养过程的质量控制二、培养过程的质量控制 在工程菌的贮存中，要求种子在工程菌的贮存中，要求种子在工程菌的贮存中，要求种子在工程菌的贮存中，要求种子克隆纯而稳定；克隆纯而稳定；克隆纯而稳定；克隆纯而稳定； 在培养过程中，要求工程菌所在培养过程中，要求工程菌所在培养过程中，要求工程菌所在培养过程中，要求工程菌所含的质粒稳定，始终无突变；含的质粒稳定，始终无突变；含的质粒稳定，始终无突变；含的质粒稳定，始终无突变； 在重复生产发酵中，工程菌表在重复生产发酵中，工程菌

315、表在重复生产发酵中，工程菌表在重复生产发酵中，工程菌表达稳定；达稳定；达稳定；达稳定； 始终能排除外源微生物污染。始终能排除外源微生物污染。始终能排除外源微生物污染。始终能排除外源微生物污染。苹兜缉扮毕娩砌另矽莉感痢贬台献腻先釉社彪款骸朱霉估水槽啸询粉岿痔生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 生产基因工程产品应有种子生产基因工程产品应有种子生产基因工程产品应有种子生产基因工程产品应有种子批系统，并证明种子批不含有致批系统，并证明种子批不含有致批系统，并证明种子批不含有致批系统，并证明种子批不含有致癌因子，无细菌、病毒、真菌和癌因子，无细菌、病毒、真菌和癌因子，无细菌

316、、病毒、真菌和癌因子，无细菌、病毒、真菌和支原体等污染，并由原始种子批支原体等污染，并由原始种子批支原体等污染，并由原始种子批支原体等污染，并由原始种子批建立生产用工作细胞库。建立生产用工作细胞库。建立生产用工作细胞库。建立生产用工作细胞库。卒原滨发攒门顾捕杆烟幽拾蕊掏破浪翼俺恿估掂干等信代流澄期宠懦蜂裂生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 原始种子批须确证克隆基因原始种子批须确证克隆基因原始种子批须确证克隆基因原始种子批须确证克隆基因DNADNADNADNA序列，详细叙序列，详细叙序列，详细叙序列，详细叙述种子批来源、方式、保存及预计使用期，保存述种子批来源、方式

317、、保存及预计使用期，保存述种子批来源、方式、保存及预计使用期，保存述种子批来源、方式、保存及预计使用期，保存与复苏时宿主载体表达系统的稳定性。与复苏时宿主载体表达系统的稳定性。与复苏时宿主载体表达系统的稳定性。与复苏时宿主载体表达系统的稳定性。 对生产种子，应详细叙述细胞生长与产品生成对生产种子，应详细叙述细胞生长与产品生成对生产种子，应详细叙述细胞生长与产品生成对生产种子，应详细叙述细胞生长与产品生成的方法和材料，并控制微生物污染；提供培养生的方法和材料，并控制微生物污染；提供培养生的方法和材料，并控制微生物污染；提供培养生的方法和材料，并控制微生物污染；提供培养生产浓度与产量恒定性数据，依

318、据宿主细胞产浓度与产量恒定性数据，依据宿主细胞产浓度与产量恒定性数据，依据宿主细胞产浓度与产量恒定性数据，依据宿主细胞- - - -载体系载体系载体系载体系统稳定性，确定最高允许传种代数；统稳定性，确定最高允许传种代数；统稳定性，确定最高允许传种代数；统稳定性，确定最高允许传种代数； 在培养过程中，应测定被表达基因分子的完整在培养过程中，应测定被表达基因分子的完整在培养过程中，应测定被表达基因分子的完整在培养过程中，应测定被表达基因分子的完整性及宿主细胞长期培养后的基因型特征；依宿主性及宿主细胞长期培养后的基因型特征；依宿主性及宿主细胞长期培养后的基因型特征；依宿主性及宿主细胞长期培养后的基因

319、型特征；依宿主细胞细胞细胞细胞- - - -载体稳定性与产品恒定性，规定持续培养时载体稳定性与产品恒定性，规定持续培养时载体稳定性与产品恒定性，规定持续培养时载体稳定性与产品恒定性，规定持续培养时间，并定期评价细胞系统和产品。间，并定期评价细胞系统和产品。间，并定期评价细胞系统和产品。间，并定期评价细胞系统和产品。福娜榴今剐即抖氨熬沮窒灸骨船肖瞪广斧云指戎素睹买土敷斤配水发投背生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 培养周期结束时，应监测宿主细胞培养周期结束时，应监测宿主细胞培养周期结束时，应监测宿主细胞培养周期结束时，应监测宿主细胞- - - -载体载体载体载体系统

320、的特性，如质粒拷贝数、宿主细胞中表系统的特性，如质粒拷贝数、宿主细胞中表系统的特性，如质粒拷贝数、宿主细胞中表系统的特性，如质粒拷贝数、宿主细胞中表达载体存留程度，含插入基因载体的酶切图达载体存留程度，含插入基因载体的酶切图达载体存留程度，含插入基因载体的酶切图达载体存留程度，含插入基因载体的酶切图谱等。谱等。谱等。谱等。 爵兹蚌慧精捌需阁址客液撑缎凌跟哪畔够俊翌苍哦旬憎占残阎僵凶幌醚榔生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO三、纯化工艺过程的质量三、纯化工艺过程的质量三、纯化工艺过程的质量三、纯化工艺过程的质量控制控制控制控制产品要有足够的生理和生产品要有足够的生理和

321、生产品要有足够的生理和生产品要有足够的生理和生物学试验数据，确证提纯物分物学试验数据，确证提纯物分物学试验数据，确证提纯物分物学试验数据，确证提纯物分子批间保持一致性；外源蛋白子批间保持一致性；外源蛋白子批间保持一致性；外源蛋白子批间保持一致性；外源蛋白质、质、质、质、DNADNA与热源质控制在规定与热源质控制在规定与热源质控制在规定与热源质控制在规定限度以下。限度以下。限度以下。限度以下。溶揖砒鸣恐拷婉脾茄痒印劈董渺搪皆冬瘸毁俊蝎垂钉菌昂喳送馁臭杜箩涪生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 在精制过程中能清除宿主在精制过程中能清除宿主在精制过程中能清除宿主在精制过程

322、中能清除宿主细胞蛋白质、核酸、糖类、病毒细胞蛋白质、核酸、糖类、病毒细胞蛋白质、核酸、糖类、病毒细胞蛋白质、核酸、糖类、病毒、培养基成分及精制工序本身引、培养基成分及精制工序本身引、培养基成分及精制工序本身引、培养基成分及精制工序本身引入的化学物质，并有检测方法。入的化学物质，并有检测方法。入的化学物质，并有检测方法。入的化学物质，并有检测方法。桂囤鼓威搭措蛹鞋弦鲜屡亦散雌漫片荧笨渔梯坯羊句碗常萨雨起姿状豪努生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO四、目标产品的质量控制四、目标产品的质量控制四、目标产品的质量控制四、目标产品的质量控制 基因工程药物的质量控制主要基因工程

323、药物的质量控制主要基因工程药物的质量控制主要基因工程药物的质量控制主要包括以下几项要求包括以下几项要求包括以下几项要求包括以下几项要求: :产品的鉴别、纯产品的鉴别、纯产品的鉴别、纯产品的鉴别、纯度、活性、安全性、稳定性和一致度、活性、安全性、稳定性和一致度、活性、安全性、稳定性和一致度、活性、安全性、稳定性和一致性。它需要利用生物化学、免疫学、性。它需要利用生物化学、免疫学、性。它需要利用生物化学、免疫学、性。它需要利用生物化学、免疫学、微生物学、细胞生物学和分子生物微生物学、细胞生物学和分子生物微生物学、细胞生物学和分子生物微生物学、细胞生物学和分子生物学等多学科的理论与技术所建立的学等多

324、学科的理论与技术所建立的学等多学科的理论与技术所建立的学等多学科的理论与技术所建立的鉴定方法。鉴定方法。鉴定方法。鉴定方法。湖蚤何攻袭佑毗荐痪既扣斧挪狡涡康俱敲喧刨现佃樱箕定怔艾娃想龚碉患生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO五、基因工程药物的开发五、基因工程药物的开发五、基因工程药物的开发五、基因工程药物的开发研制研制研制研制工工工工程程程程细细细细胞胞胞胞的的的的构构构构建建建建与与与与实实实实验验验验室室室室小小小小量量量量研研研研究究究究试验阶段试验阶段试验阶段试验阶段中试与质量检定阶段中试与质量检定阶段中试与质量检定阶段中试与质量检定阶段临床研究临床研究临床

325、研究临床研究试生产与正式生产阶段试生产与正式生产阶段试生产与正式生产阶段试生产与正式生产阶段吾讹窥蠢香深锰寡恿灌巧饭柱洽退蛮猴撞姨谴重毒明毒沏冯熔汤闽宜京瓤生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO六、基因工程药物制造检定规六、基因工程药物制造检定规六、基因工程药物制造检定规六、基因工程药物制造检定规程程程程选取生产菌种选取生产菌种选取生产菌种选取生产菌种发酵培养发酵培养发酵培养发酵培养收集菌体收集菌体收集菌体收集菌体浓缩和分离纯化浓缩和分离纯化浓缩和分离纯化浓缩和分离纯化除菌除菌除菌除菌最终产品的质量控制最终产品的质量控制最终产品的质量控制最终产品的质量控制光泡拢嗜停她

326、呼膝虾立亨睫缔铁券阳纂碴狙延遍敝藻藏淀施韶仓觉捻间匈生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO最终产品的质量控制N-末端15个氨基酸序列分析肽图分析测定分子量纯度测定等电点测定紫外光谱外源性DNA测定效价测定无菌、热源、毒性和安全试验讽叭玄斯刘窒砷推乾须描古闲镣注箍质开剔檄灯舒戎兆冬共英瓷期删拼喝生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO第二小第二小节节 产产品品药药物的分析物的分析溯挪扣锁结狮承系起俭悉六禁奴疤器捣颤辨赣辆汛兢涧焉湾云奢纲仪持泽生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO一、一、 产品的鉴别产品的鉴别 常用的鉴定

327、方法常用的鉴定方法常用的鉴定方法常用的鉴定方法: : 电泳方法电泳方法电泳方法电泳方法: SDS-PAGE: SDS-PAGE、等电聚焦、等电聚焦、等电聚焦、等电聚焦、 免疫电泳免疫电泳免疫电泳免疫电泳 免疫学方法免疫学方法免疫学方法免疫学方法: : 放射免疫放射免疫放射免疫放射免疫(RIA)(RIA)、酶联、酶联、酶联、酶联免疫免疫免疫免疫(ELISA)(ELISA) 电振领凤砷镣范羌商回皖版热紊与馏葵操程桑辊抄职窿爸诬豢毒痛孩茬诛生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO受体结合试验受体结合试验高效液相色谱高效液相色谱(HPLC)、肽图分析法、末端序列分析、肽图分析法

328、、末端序列分析、圆二色谱、核磁共振圆二色谱、核磁共振颊捕洱副迅筋腆鲜族谰绊千需殷港滋展星车绚举肖拙邱另被杰行帧琅纯执生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 肽图分析肽图分析肽图分析肽图分析 肽图分析是用酶法或化学法降解肽图分析是用酶法或化学法降解肽图分析是用酶法或化学法降解肽图分析是用酶法或化学法降解目的蛋白质目的蛋白质目的蛋白质目的蛋白质, , 对生成的肽段进行分离分对生成的肽段进行分离分对生成的肽段进行分离分对生成的肽段进行分离分析。析。析。析。它是检测蛋白质一级结构最有效它是检测蛋白质一级结构最有效它是检测蛋白质一级结构最有效它是检测蛋白质一级结构最有效的方法，

329、的方法，的方法，的方法，该技术灵敏高效是对基因工该技术灵敏高效是对基因工该技术灵敏高效是对基因工该技术灵敏高效是对基因工程药物的分子结构和遗传稳定性进行程药物的分子结构和遗传稳定性进行程药物的分子结构和遗传稳定性进行程药物的分子结构和遗传稳定性进行评价和验证的首选方法。常用评价和验证的首选方法。常用评价和验证的首选方法。常用评价和验证的首选方法。常用HPLCHPLC、毛细管电泳。毛细管电泳。毛细管电泳。毛细管电泳。获犹裁捐阅秩罢澄盯疗轻毒辆哩纤裕韶苇卢夕禄菌似们赠釜诱韶苏拌蘸滞生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 氨基酸成分分析氨基酸成分分析氨基酸成分分析氨基酸成分

330、分析 50 50个氨基酸较理想个氨基酸较理想个氨基酸较理想个氨基酸较理想 部分氨基酸序列分析部分氨基酸序列分析部分氨基酸序列分析部分氨基酸序列分析 N N端端端端1515个氨基酸可作为重个氨基酸可作为重个氨基酸可作为重个氨基酸可作为重 组蛋白质和多肽的重要鉴组蛋白质和多肽的重要鉴组蛋白质和多肽的重要鉴组蛋白质和多肽的重要鉴 定指标。定指标。定指标。定指标。馒先销饱古占汲丧校恶诡胆职留矗挡剪苗颧赛员蚁壤合正挣椽馆镶萝漠沾生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 重组蛋白质浓度测定和相对分重组蛋白质浓度测定和相对分重组蛋白质浓度测定和相对分重组蛋白质浓度测定和相对分子量的测

331、定子量的测定子量的测定子量的测定 蛋白质浓度测定方法有蛋白质浓度测定方法有蛋白质浓度测定方法有蛋白质浓度测定方法有: : : :福林福林福林福林- - - -酚法、双缩脲法酚法、双缩脲法酚法、双缩脲法酚法、双缩脲法 蛋白相对分子量的测定蛋白相对分子量的测定蛋白相对分子量的测定蛋白相对分子量的测定: :凝胶凝胶凝胶凝胶过滤法、过滤法、过滤法、过滤法、SD-SPAGESD-SPAGE法法法法归浊挑羚啦枝辙密赠脂撤驳署嘱三妈惯桂撅膝瞥螟当爽割椭讽储髓像匝等生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 蛋白质二硫键分析蛋白质二硫键分析蛋白质二硫键分析蛋白质二硫键分析 测定方法有测定

332、方法有测定方法有测定方法有: : : : 对氯汞苯甲酸法等对氯汞苯甲酸法等对氯汞苯甲酸法等对氯汞苯甲酸法等 5 5 5 5，5 5 5 5 - - - -二硫基双二硫基双二硫基双二硫基双-2-2-2-2-硝基苯甲酸硝基苯甲酸硝基苯甲酸硝基苯甲酸法法法法坛谢儡骇饿启铜惩娥穗乎迫哦蒂谗丹钵根厩特妻阑狗赫思抬辛额善捅绵胺生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO二、纯度分析二、纯度分析二、纯度分析二、纯度分析 1 1 1 1、蛋白质含量测定、蛋白质含量测定、蛋白质含量测定、蛋白质含量测定 SDS-PAGE SDS-PAGE SDS-PAGE SDS-PAGE、等电聚焦、各种、等

333、电聚焦、各种、等电聚焦、各种、等电聚焦、各种HPLCHPLCHPLCHPLC、 毛毛毛毛细管电泳细管电泳细管电泳细管电泳2 2 2 2、杂质、杂质、杂质、杂质 蛋白类杂质蛋白类杂质蛋白类杂质蛋白类杂质 残留宿主细胞蛋白残留宿主细胞蛋白残留宿主细胞蛋白残留宿主细胞蛋白 采采采采用免疫分析的方法用免疫分析的方法用免疫分析的方法用免疫分析的方法 嫌朽窄寸氮官眉肪肿澡抚镐优贱擞丑砂你镭稍尔斟凑嚼溉个胃般吉嫌斜藏生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO非蛋白类杂质非蛋白类杂质非蛋白类杂质非蛋白类杂质非蛋白类杂质主要有非蛋白类杂质主要有非蛋白类杂质主要有非蛋白类杂质主要有: : :

334、 :病毒、细菌等微生物、热原、病毒、细菌等微生物、热原、病毒、细菌等微生物、热原、病毒、细菌等微生物、热原、内毒素、致敏源及内毒素、致敏源及内毒素、致敏源及内毒素、致敏源及DNADNADNADNA。懊挚贤幽帜枪次壤昌透讲雌峨烤些威勇替取喷棚帜淑秋檬妙另喉拐二池岂生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO常用检测方法：常用检测方法：常用检测方法：常用检测方法：杂质和污染物杂质和污染物杂质和污染物杂质和污染物 检检检检 测测测测 方方方方 法法法法内毒素内毒素内毒素内毒素 鲎试剂、家兔热原法鲎试剂、家兔热原法鲎试剂、家兔热原法鲎试剂、家兔热原法宿主细胞蛋白宿主细胞蛋白宿主细胞

335、蛋白宿主细胞蛋白 免疫分析、免疫分析、免疫分析、免疫分析、SDS-PAGESDS-PAGESDS-PAGESDS-PAGE、CECECECE其它蛋白杂质其它蛋白杂质其它蛋白杂质其它蛋白杂质 免疫分析、免疫分析、免疫分析、免疫分析、SDS-PAGESDS-PAGESDS-PAGESDS-PAGE、 HPLC HPLC HPLC HPLC、CECECECE残余残余残余残余DNA DNADNA DNADNA DNADNA DNA杂交、紫外光谱、蛋白结合杂交、紫外光谱、蛋白结合杂交、紫外光谱、蛋白结合杂交、紫外光谱、蛋白结合蛋白变异蛋白变异蛋白变异蛋白变异 肽谱、肽谱、肽谱、肽谱、HPLCHPLCHP

336、LCHPLC、 IEF IEF IEF IEF、 CE CE CE CE甲酰蛋氨酸甲酰蛋氨酸甲酰蛋氨酸甲酰蛋氨酸 肽谱、肽谱、肽谱、肽谱、HPLCHPLCHPLCHPLC、 IEF IEF IEF IEF、 CE CE CE CE蛋氨酸氧化蛋氨酸氧化蛋氨酸氧化蛋氨酸氧化 肽谱、肽谱、肽谱、肽谱、HPLCHPLCHPLCHPLC、 质谱、氨基酸分析质谱、氨基酸分析质谱、氨基酸分析质谱、氨基酸分析产物变性或聚和脱氨基产物变性或聚和脱氨基产物变性或聚和脱氨基产物变性或聚和脱氨基 SDS-PAGE SDS-PAGE SDS-PAGE SDS-PAGE、IEFIEFIEFIEF、HPLCHPLCHPLC

337、HPLC、 CE CE CE CE、质谱、质谱、质谱、质谱、 凝胶过滤凝胶过滤凝胶过滤凝胶过滤韶鹃误挺咙涛圭推冈衙撒僻出摩延戍邯艇款操倘刻抽俏虚显未规苯蜀窟辊生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO杂质和污染物杂质和污染物杂质和污染物杂质和污染物 检检检检 测测测测 方方方方 法法法法单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体 SDS-PAGE SDS-PAGE SDS-PAGE SDS-PAGE、免疫分析、免疫分析、免疫分析、免疫分析氨基酸取代氨基酸取代氨基酸取代氨基酸取代 氨基酸分析、肽谱、质氨基酸分析、肽谱、质氨基酸分析、肽谱、质氨基酸分析、肽谱、质 谱、谱、谱、谱

338、、CECECECE微生物微生物微生物微生物 微生物学检查微生物学检查微生物学检查微生物学检查支原体支原体支原体支原体 微生物学检查微生物学检查微生物学检查微生物学检查病毒病毒病毒病毒 微生物学检查微生物学检查微生物学检查微生物学检查缄腑班迸露沙末拙舰恭酮阀引抱档弗吠稻扑庐颓逞匹跟搅琶涟兜钳氦甥构生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 生物学活性测定生物学活性测定生物学活性测定生物学活性测定 需通过动物体内试验和通过细胞培养需通过动物体内试验和通过细胞培养需通过动物体内试验和通过细胞培养需通过动物体内试验和通过细胞培养 进行体外效价测定。进行体外效价测定。进行体外效价测

339、定。进行体外效价测定。 稳定性考查稳定性考查稳定性考查稳定性考查 是药品有效性安全性的重要指标，是药是药品有效性安全性的重要指标，是药是药品有效性安全性的重要指标，是药是药品有效性安全性的重要指标，是药品贮藏条件和使用期限的主要依据。品贮藏条件和使用期限的主要依据。品贮藏条件和使用期限的主要依据。品贮藏条件和使用期限的主要依据。 产品一致性的保证产品一致性的保证产品一致性的保证产品一致性的保证柏哎者误弄嚼班捻唯挽蓑龋槛唐飞年额柠卑稗妻锌杨各商赫干钱铸停帜爽生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO第三小第三小节节 基因工程基因工程药药物物临临床前安全性床前安全性评评价价窃

340、冻队腺博梗布废屉武儿奇姑抓笼坛轴突省为肃矛冈赤隙及三洲灼针佩订生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO临临临临床床床床前前前前安安安安全全全全性性性性试试试试验验验验的的的的一一一一般般般般指指指指导导导导原则原则原则原则选择相关动物种属选择相关动物种属选择相关动物种属选择相关动物种属动物的数量动物的数量动物的数量动物的数量给药方案给药方案给药方案给药方案免疫原性免疫原性免疫原性免疫原性使使使使用用用用过过过过程程程程中中中中受受受受试试试试动动动动物物物物的的的的稳稳稳稳定定定定性性性性和和和和量量量量的的的的恒定恒定恒定恒定浚猜砌雁鞭蔽率赔壕捍擞屈台级阐弃钠捅面大控

341、蝶瘴酚痈哦蛮鲤俩上勤师生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO安全性试验的要求安全性试验的要求安全性试验的要求安全性试验的要求安全药理学安全药理学安全药理学安全药理学暴露水平评价暴露水平评价暴露水平评价暴露水平评价单单单单次次次次给给给给药药药药毒毒毒毒性性性性研研研研究究究究和和和和重重重重复复复复给给给给药药药药毒毒毒毒性性性性评评评评价价价价免疫毒性研究免疫毒性研究免疫毒性研究免疫毒性研究生殖和发育毒性研究生殖和发育毒性研究生殖和发育毒性研究生殖和发育毒性研究遗传毒性研究遗传毒性研究遗传毒性研究遗传毒性研究致癌性研究致癌性研究致癌性研究致癌性研究局部耐受性研究局部

342、耐受性研究局部耐受性研究局部耐受性研究敞枝搪敢概楔磊狈娱届晾弥尊推驰魂乍域怒延炳皑悼溜财阮吼辱桥稠软霖生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO附：基因工程药物制造附：基因工程药物制造附：基因工程药物制造附：基因工程药物制造实例实例实例实例 干扰素（干扰素（干扰素（干扰素（interferoninterferoninterferoninterferon，IFNIFNIFNIFN）是人体细）是人体细）是人体细）是人体细胞分泌的一种活性蛋白质，具有广泛胞分泌的一种活性蛋白质，具有广泛胞分泌的一种活性蛋白质，具有广泛胞分泌的一种活性蛋白质，具有广泛的抗病毒抗肿瘤和免疫调节活性，

343、是的抗病毒抗肿瘤和免疫调节活性，是的抗病毒抗肿瘤和免疫调节活性，是的抗病毒抗肿瘤和免疫调节活性，是人体防御系统的重要组成部分。根据人体防御系统的重要组成部分。根据人体防御系统的重要组成部分。根据人体防御系统的重要组成部分。根据分子结构和抗原性的差异分为分子结构和抗原性的差异分为分子结构和抗原性的差异分为分子结构和抗原性的差异分为、等等等等4 4 4 4个类型。个类型。个类型。个类型。型干扰素在分为型干扰素在分为型干扰素在分为型干扰素在分为1b 2a 2b1b 2a 2b1b 2a 2b1b 2a 2b等亚型。等亚型。等亚型。等亚型。长道桶嚏针问既赁迈解疤末卢寒并远剖砖藩歹笋油巢帘杖藉面禽磨于又

344、索生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO一、基因工程菌的组建诱生的白细胞诱生的白细胞 提取全提取全RNA RNA 通过寡通过寡dT-dT-纤维素柱纤维素柱 蔗糖密度梯度蔗糖密度梯度 获得寡获得寡A A的的mRNA mRNA 离心提取离心提取12s12s 的的 mRNA mRNA 逆转录成逆转录成cDNA cDNA 双链双链cDNAcDNA接上接上dTdT或或dGdG尾尾 pBR322 pBR322质粒质粒 pBR322 pBR322质粒加上质粒加上dAdA或或dCdC佑芋谅侣鲜爱扦昂湿杠什皖依骗肝艾尔窃贾妥政栅蜕餐壁针晶衡膝蔼侠到生物药物分析所有课件,于打印生物药物分

345、析所有课件,于打印LOGO退火获的杂交质粒退火获的杂交质粒退火获的杂交质粒退火获的杂交质粒 转化大肠杆菌转化大肠杆菌转化大肠杆菌转化大肠杆菌 扩增杂交质粒扩增杂交质粒扩增杂交质粒扩增杂交质粒 筛选抗青霉素但对氨苄筛选抗青霉素但对氨苄筛选抗青霉素但对氨苄筛选抗青霉素但对氨苄 用杂交翻译法挑选用杂交翻译法挑选用杂交翻译法挑选用杂交翻译法挑选 青霉素敏感细菌克隆青霉素敏感细菌克隆青霉素敏感细菌克隆青霉素敏感细菌克隆 含干扰素含干扰素含干扰素含干扰素cDNAcDNA克隆克隆克隆克隆 将干扰素将干扰素将干扰素将干扰素cDNAcDNA克隆入表达载体克隆入表达载体克隆入表达载体克隆入表达载体 在大肠杆菌在大

346、肠杆菌在大肠杆菌在大肠杆菌 中进行高效表达中进行高效表达中进行高效表达中进行高效表达留鬃撂知沮酸广成邯弛糯酮条胃栖汹臆瑞潦弊署凌恐哩肿厌挂味掉栽算佩生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO二、基因工程干扰素的制备二、基因工程干扰素的制备二、基因工程干扰素的制备二、基因工程干扰素的制备启开种子启开种子启开种子启开种子 制备种子液制备种子液制备种子液制备种子液 发酵培养发酵培养发酵培养发酵培养 粗提粗提粗提粗提精提精提精提精提 半成品制备半成品制备半成品制备半成品制备 半成品检定半成品检定半成品检定半成品检定 分装分装分装分装冻干冻干冻干冻干 成品检定成品检定成品检定成品检

347、定 成品包装成品包装成品包装成品包装效眼捶钻残帚晓坍锣稽鞋纠夷陶盼御笺站皖揍渠孺痞廉堕常勒遭滔武湃回生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO2b2b2b2b干扰素生产过程干扰素生产过程干扰素生产过程干扰素生产过程1.1.1.1.发酵发酵发酵发酵 工程菌：工程菌：工程菌：工程菌：SW-IFN-2b/E.SW-IFN-2b/E.SW-IFN-2b/E.SW-IFN-2b/E.colicolicolicoli DH5 DH5 DH5 DH5，质粒用启动子，含氨苄青霉素抗性，质粒用启动子，含氨苄青霉素抗性，质粒用启动子，含氨苄青霉素抗性，质粒用启动子，含氨苄青霉素抗性基因。培养

348、基含基因。培养基含基因。培养基含基因。培养基含1%1%1%1%蛋白冻蛋白冻蛋白冻蛋白冻0.5%0.5%0.5%0.5%酵母提酵母提酵母提酵母提取物取物取物取物0.5%NACl0.5%NACl0.5%NACl0.5%NACl。摇床培养。摇床培养。摇床培养。摇床培养30 C30 C30 C30 C，10h10h10h10h，发酵种子。发酵种子。发酵种子。发酵种子。15L15L15L15L发酵罐培养，发酵罐培养，发酵罐培养，发酵罐培养， 30 C 30 C 30 C 30 C，8h8h8h8h。然后。然后。然后。然后42 C42 C42 C42 C，3h3h3h3h。离心去上清。离心去上清。离心去上

349、清。离心去上清。ooo散括才儡酥宽能雾兆块狂沛细确彻繁蹋丛拭酬咎金帆阀往销毖歌棉混席粕生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO 2.2.2.2.产品的提取与纯化产品的提取与纯化产品的提取与纯化产品的提取与纯化 湿菌超声破碎，离心，上清超滤浓湿菌超声破碎，离心，上清超滤浓湿菌超声破碎，离心，上清超滤浓湿菌超声破碎，离心，上清超滤浓 缩，缩，缩，缩，Sephadex G50 Sephadex G50 Sephadex G50 Sephadex G50 分离。分离。分离。分离。 经经经经SDS-PAGESDS-PAGESDS-PAGESDS-PAGE检查。检查。检查。检查。

350、在经在经在经在经DE-52DE-52DE-52DE-52柱纯化柱纯化柱纯化柱纯化。看惩牡蹲泌厉裴凄苍沫梅党辛猖布按怎曼颁蒲铣律椿轨驰投扇窄馋时动某生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO三、三、三、三、质量控制标和要求质量控制标和要求质量控制标和要求质量控制标和要求半成品检定半成品检定半成品检定半成品检定干扰素效价测定干扰素效价测定干扰素效价测定干扰素效价测定蛋白质含量测定蛋白质含量测定蛋白质含量测定蛋白质含量测定比活性比活性比活性比活性纯度测定纯度测定纯度测定纯度测定相对分子量测定相对分子量测定相对分子量测定相对分子量测定瘸败肛柿座净香秤锤运崎葡挚营材拒撕绪贺窍峙罐厕

351、久勋蝉功深裳缩苏慧生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO残余外源性残余外源性DNA含量测定含量测定残余血清残余血清igG含量测定含量测定残余抗生素活性测定残余抗生素活性测定紫外光谱扫描紫外光谱扫描肽图测定肽图测定等电点测定等电点测定除菌半成品干扰素效价测定、无菌试除菌半成品干扰素效价测定、无菌试验、热原试验。验、热原试验。射切盈貉是冒碰澜忠胡继寇绳荤葬信蹿绷柴绵延桂莆讳衬毡豢及禁郁已叁生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印LOGO成品检定成品检定成品检定成品检定物理性状物理性状鉴别试验鉴别试验水分测定水分测定无菌试验无菌试验热原试验热原试验干扰素效价测定干扰素效价测定安全试验安全试验泉缠缨公必搓褂帛套视蛙搓捡蔼字芯辗固谅眩碉碘秆侦渝逗咬裹坠龋伯凳生物药物分析所有课件,于打印生物药物分析所有课件,于打印