医院感染微生物学监测

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1、 感染暴感染暴感染暴感染暴发发或感染流行或感染流行或感染流行或感染流行时时，环环境因素在感染中有流行病学意境因素在感染中有流行病学意境因素在感染中有流行病学意境因素在感染中有流行病学意义义 监测监测潜在的危潜在的危潜在的危潜在的危险环险环境，境，境，境，证证明有危明有危明有危明有危险险的病原体存在或的病原体存在或的病原体存在或的病原体存在或证证明危明危明危明危险险病原体已被成功清除病原体已被成功清除病原体已被成功清除病原体已被成功清除 当某当某当某当某项项感染控制措施改感染控制措施改感染控制措施改感染控制措施改变时变时，评评价其效果；或根据要求，价其效果；或根据要求，价其效果；或根据要求，价其

2、效果；或根据要求，仪仪器器器器设备设备或系或系或系或系统统启用启用启用启用时进时进行行行行监测监测 询证询证医学医学医学医学证证据支持据支持据支持据支持 采采采采样样后后后后应应尽快尽快尽快尽快对样对样品品品品进进行相行相行相行相应应指指指指标标的的的的检测检测送送送送检检时间时间不得超不得超不得超不得超过过4h4h 若若若若样样品品品品保存保存保存保存于于于于0 04 4时时送送送送检时间检时间不得超不得超不得超不得超过过24h24h 采采采采样样和和和和检查检查原原原原则则医院消毒医院消毒医院消毒医院消毒卫卫生生生生标标准准准准(2011)(2011)不推荐不推荐不推荐不推荐医院常医院常医

3、院常医院常规规开展开展开展开展灭灭菌物品菌物品菌物品菌物品的的的的无菌无菌无菌无菌检查检查当流行病学当流行病学当流行病学当流行病学调查怀调查怀疑医院感染事件疑医院感染事件疑医院感染事件疑医院感染事件与与与与灭灭菌物品有关菌物品有关菌物品有关菌物品有关时时，进进行相行相行相行相应应物品的无菌物品的无菌物品的无菌物品的无菌检查检查常常常常规监规监督督督督检查检查可不可不可不可不进进行致病性微生物行致病性微生物行致病性微生物行致病性微生物检测检测涉及疑似医院感染暴涉及疑似医院感染暴涉及疑似医院感染暴涉及疑似医院感染暴发发、医院感染暴、医院感染暴、医院感染暴、医院感染暴发调查发调查或工作中或工作中或工

4、作中或工作中怀怀疑微生物疑微生物疑微生物疑微生物污污染染染染时时应进应进行行行行目目目目标标微生物的微生物的微生物的微生物的检测检测采采采采样样和和和和检查检查原原原原则则医院消毒医院消毒医院消毒医院消毒卫卫生生生生标标准准准准(2011)(2011)采采采采样样和和和和检查检查原原原原则则医院消毒医院消毒医院消毒医院消毒卫卫生生生生标标准准准准(2011)(2011)可使用可使用可使用可使用经验证经验证的的的的现场现场快速快速快速快速检测仪检测仪器器器器进进行行行行环环境、物体表面境、物体表面境、物体表面境、物体表面等等等等微生物微生物微生物微生物污污染情况染情况染情况染情况和和和和医医医医

5、疗疗器材清器材清器材清器材清洁洁度度度度的的的的监监督督督督筛查筛查也可用于也可用于也可用于也可用于医院清洗效果医院清洗效果医院清洗效果医院清洗效果检查检查和和和和清洗程序的清洗程序的清洗程序的清洗程序的评评价和价和价和价和验证验证ATPATP荧光检测仪荧光检测仪荧光检测仪荧光检测仪医院消毒技术规范医院消毒技术规范(2011) 医院消毒卫生标准医院消毒卫生标准(2011)医院感染管理规范医院感染管理规范监监 测测 内内 容容 医院空气微生物学医院空气微生物学医院空气微生物学医院空气微生物学监测监测 物体表面微生物学物体表面微生物学物体表面微生物学物体表面微生物学监测监测 使用中消毒使用中消毒使

6、用中消毒使用中消毒剂剂微生物学微生物学微生物学微生物学监测监测 医医医医务务人人人人员员手微生物学手微生物学手微生物学手微生物学监测监测 压压力蒸汽力蒸汽力蒸汽力蒸汽灭灭菌效果生物菌效果生物菌效果生物菌效果生物监测监测 环环氧乙氧乙氧乙氧乙烷灭烷灭菌效果生物菌效果生物菌效果生物菌效果生物监测监测 医医医医疗疗器械消毒效果器械消毒效果器械消毒效果器械消毒效果监测监测 医院治医院治医院治医院治疗疗用水的用水的用水的用水的细细菌学菌学菌学菌学检测检测 血液透析液内毒素血液透析液内毒素血液透析液内毒素血液透析液内毒素监测监测 采样时间采样时间2 2、未采用、未采用、未采用、未采用洁净洁净技技技技术净术

7、净化空气的房化空气的房化空气的房化空气的房间间（、）消毒、通消毒、通消毒、通消毒、通风换风换气后气后气后气后操作前操作前操作前操作前1 1、采用、采用、采用、采用洁净洁净技技技技术净术净化空气的房化空气的房化空气的房化空气的房间间（）洁净洁净系系系系统统自自自自净净后后后后操作前操作前操作前操作前3 3、怀怀疑空气与医院感染暴疑空气与医院感染暴疑空气与医院感染暴疑空气与医院感染暴发发有关有关有关有关时时消毒后消毒后消毒后消毒后操作前操作前操作前操作前 监测方法监测方法沉降法沉降法沉降法沉降法重力沉降（平板沉降法）重力沉降（平板沉降法）重力沉降（平板沉降法）重力沉降（平板沉降法）静静静静电电沉降

8、沉降沉降沉降热热沉降沉降沉降沉降浮游菌浮游菌浮游菌浮游菌测测定法定法定法定法撞撞撞撞击击式空气微生物采式空气微生物采式空气微生物采式空气微生物采样样法法法法离心式空气微生物采离心式空气微生物采离心式空气微生物采离心式空气微生物采样样法法法法洗刷式空气微生物采洗刷式空气微生物采洗刷式空气微生物采洗刷式空气微生物采样样法法法法过滤过滤空气微生物采空气微生物采空气微生物采空气微生物采样样法法法法温差空气微生物采温差空气微生物采温差空气微生物采温差空气微生物采样样法法法法静静静静电电或冲或冲或冲或冲击击空气微生物采空气微生物采空气微生物采空气微生物采样样法法法法未采用洁净技术净化空气的房间：未采用洁净

9、技术净化空气的房间： 平板暴露法平板暴露法室内面室内面室内面室内面积积 30m30m2 2 设设内、外、中内、外、中内、外、中内、外、中对对角角角角线线3 3点点点点内、外点距离内、外点距离内、外点距离内、外点距离墙墙壁壁壁壁1m1m处处室内面室内面室内面室内面积积30m30m2 2 设设四角及中央共四角及中央共四角及中央共四角及中央共5 5点点点点四角距离四角距离四角距离四角距离墙墙壁壁壁壁1m1m处处 1 1、平板暴露法、平板暴露法、平板暴露法、平板暴露法2 2、空气采、空气采、空气采、空气采样样器法器法器法器法参照参照参照参照GB50333-2002GB50333-2002（医院（医院（

10、医院（医院洁净洁净手手手手术术部建筑技部建筑技部建筑技部建筑技术规术规范）范）范）范）采用洁净技术净化空气的房间：采用洁净技术净化空气的房间：手手手手术术区：手区：手区：手区：手术术台及其周台及其周台及其周台及其周围围的区域的区域的区域的区域级级手手手手术术室室室室 ( (手手手手术术区百区百区百区百级级，周，周，周，周围围千千千千级级）：）：）：）： 手手手手术术台两台两台两台两侧边侧边至少各外推至少各外推至少各外推至少各外推0.9m0.9m 两端至少各外推两端至少各外推两端至少各外推两端至少各外推0.4m0.4m后（包括手后（包括手后（包括手后（包括手术术台）的区域台）的区域台）的区域台）

11、的区域级级手手手手术术室室室室 ( (手手手手术术区千区千区千区千级级，周，周，周，周围围万万万万级级）：）：）：）： 手手手手术术台两台两台两台两侧边侧边至少各外推至少各外推至少各外推至少各外推0.6m0.6m 两端至少各外推两端至少各外推两端至少各外推两端至少各外推0.4m0.4m后（包括手后（包括手后（包括手后（包括手术术台）的区域台）的区域台）的区域台）的区域级级手手手手术术室（手室（手室（手室（手术术区域万区域万区域万区域万级级，周，周，周，周围围十万十万十万十万级级）：）：）：）： 手手手手术术台四台四台四台四边边至少各外推至少各外推至少各外推至少各外推0.4m0.4m后（包括手后

12、（包括手后（包括手后（包括手术术台）的区域台）的区域台）的区域台）的区域级级手手手手术术室（三十万室（三十万室（三十万室（三十万级级）：不分手）：不分手）：不分手）：不分手术术区和周区和周区和周区和周边边区区区区周周周周围围区：除去手区：除去手区：除去手区：除去手术术区以外的其他区域区以外的其他区域区以外的其他区域区以外的其他区域平板暴露法平板暴露法局部百局部百局部百局部百级级周周周周围围千千千千级设级设置置置置1313点点点点局部千局部千局部千局部千级级周周周周围围万万万万级设级设置置置置9 9点点点点局部万局部万局部万局部万级级周周周周围围十万十万十万十万级设级设置置置置7 7点点点点局部

13、十万局部十万局部十万局部十万级级周周周周围围三十万三十万三十万三十万级设级设置置置置5 5点点点点?医院洁净手术部建筑技术规范医院洁净手术部建筑技术规范 GB50333-2002当用沉降法当用沉降法当用沉降法当用沉降法测测定沉降菌定沉降菌定沉降菌定沉降菌浓浓度度度度时时细细菌菌菌菌浓浓度度度度测测点数既要不少于被点数既要不少于被点数既要不少于被点数既要不少于被测测区域含区域含区域含区域含尘浓尘浓度度度度测测点数点数点数点数又又又又应满应满足沉降菌最少培养皿数足沉降菌最少培养皿数足沉降菌最少培养皿数足沉降菌最少培养皿数被测区域洁净度的级别被测区域洁净度的级别被测区域洁净度的级别被测区域洁净度的级

14、别 最少培养皿数（最少培养皿数（最少培养皿数（最少培养皿数（90909090，30min30min30min30min计）计）计）计） 100100100100级级级级 13131313 1000 1000 1000 1000级级级级 5 5 5 5 10000 10000 10000 10000级级级级 3 3 3 3 100000 100000 100000 100000级级级级 2 2 2 2 300000 300000 300000 300000级级级级 2 2 2 2 局部千局部千局部千局部千级设级设置置置置5 5点点点点周周周周围围万万万万级设级设置置置置4 4点点点点 局部百局部

15、百局部百局部百级设级设置置置置1313点点点点周周周周围围千千千千级设级设置置置置6 6点点点点 局部万局部万局部万局部万级设级设置置置置3 3点点点点周周周周围围十万十万十万十万级设级设置置置置2 2点点点点 局部十万局部十万局部十万局部十万级设级设置置置置2 2点点点点周周周周围围三十万三十万三十万三十万级设级设置置置置2 2点点点点操操 作作 方方 法法将平皿（直径将平皿（直径将平皿（直径将平皿（直径9cm9cm）放置在采）放置在采）放置在采）放置在采样样点点点点处处采采采采样样高度距离地面高度距离地面高度距离地面高度距离地面80-100cm80-100cm采采采采样时样时将平皿盖打开、

16、将平皿盖打开、将平皿盖打开、将平皿盖打开、扣放扣放扣放扣放于平板旁于平板旁于平板旁于平板旁采采采采样时样时，必，必，必，必须须有有有有2 2次次次次空白空白空白空白对对照照照照第第第第1 1次次次次对对用于用于用于用于检测检测的的的的培养皿或培养基条培养皿或培养基条培养皿或培养基条培养皿或培养基条做做做做对对比比比比试验试验每一批做一个每一批做一个每一批做一个每一批做一个对对照皿照皿照皿照皿第第第第2 2次次次次是在是在是在是在检测时检测时，每区或每室，每区或每室，每区或每室，每区或每室1 1个个个个对对照皿照皿照皿照皿对对操作操作操作操作试验试验做做做做对对照照照照试验试验模模模模拟拟操作操

17、作操作操作过过程程程程但培养皿或培养基条打开后又迅速封盖但培养皿或培养基条打开后又迅速封盖但培养皿或培养基条打开后又迅速封盖但培养皿或培养基条打开后又迅速封盖两次两次两次两次对对照照照照试验试验都必都必都必都必须为须为阴性阴性阴性阴性整个操作整个操作整个操作整个操作过过程都必程都必程都必程都必须须无菌操作无菌操作无菌操作无菌操作未采用未采用未采用未采用洁净洁净技技技技术净术净化空气的房化空气的房化空气的房化空气的房间间暴露暴露暴露暴露5minmin采用采用采用采用洁净洁净技技技技术净术净化空气的房化空气的房化空气的房化空气的房间间暴露暴露暴露暴露30minmin未采用未采用未采用未采用洁净洁净

18、技技技技术净术净化空气的房化空气的房化空气的房化空气的房间间类环类环境境境境暴露暴露暴露暴露15min15min 、类类环环境暴露境暴露境暴露境暴露5min5min采用采用采用采用洁净洁净技技技技术净术净化空气的房化空气的房化空气的房化空气的房间间暴露暴露暴露暴露30minmin采采采采样样后盖好平皿盖子后盖好平皿盖子后盖好平皿盖子后盖好平皿盖子记录记录采采采采样时间样时间采采采采样样平皿平皿平皿平皿6h6h内送内送内送内送实验实验室培养室培养室培养室培养置置置置361361恒温培养箱培养恒温培养箱培养恒温培养箱培养恒温培养箱培养48h48h计计数每个平板的菌落数每个平板的菌落数每个平板的菌落

19、数每个平板的菌落总总数数数数若若若若怀怀疑与医院感染有关疑与医院感染有关疑与医院感染有关疑与医院感染有关时时进进行目行目行目行目标标微生物微生物微生物微生物检测检测平板暴露法采样平板暴露法采样注意事项注意事项：布点布点布点布点应应尽量尽量尽量尽量避开高效送避开高效送避开高效送避开高效送风风口正下方口正下方口正下方口正下方放置培养皿放置培养皿放置培养皿放置培养皿时时应应从从从从最里面的房最里面的房最里面的房最里面的房间间或或或或房房房房间间的的的的最里面开始布点最里面开始布点最里面开始布点最里面开始布点依次向外依次向外依次向外依次向外 最后人最后人最后人最后人员员撤出撤出撤出撤出收集培养皿收集培

20、养皿收集培养皿收集培养皿时时从从从从最外面的房最外面的房最外面的房最外面的房间间或或或或房房房房间间的最外面的最外面的最外面的最外面开始开始开始开始最先布的点最后收最先布的点最后收最先布的点最后收最先布的点最后收采采采采样样前前前前关关关关闭门闭门窗窗窗窗 无人走无人走无人走无人走动动的情况下的情况下的情况下的情况下 静止静止静止静止1010分分分分钟钟后采后采后采后采样样对检测人员的要求：对检测人员的要求：着无菌的工作服、戴口罩、帽子着无菌的工作服、戴口罩、帽子着无菌的工作服、戴口罩、帽子着无菌的工作服、戴口罩、帽子操作前洗手或手操作前洗手或手操作前洗手或手操作前洗手或手卫卫生生生生手臂及手

21、臂及手臂及手臂及头头部不可越部不可越部不可越部不可越过过打开的培养皿上方打开的培养皿上方打开的培养皿上方打开的培养皿上方行行行行动动及放置及放置及放置及放置动动作要作要作要作要轻轻尽量减少尽量减少尽量减少尽量减少对对空气流空气流空气流空气流动动状状状状态态的影响的影响的影响的影响每次采每次采每次采每次采样样人人人人员员不得超不得超不得超不得超过过2 2人人人人所所所所带带物品徐清物品徐清物品徐清物品徐清洁洁后方可后方可后方可后方可带带入入入入结结 果果 计计 算算奥梅良斯基公式（奥氏公式）：奥梅良斯基公式（奥氏公式）：奥梅良斯基公式（奥氏公式）：奥梅良斯基公式（奥氏公式）：5 5分分分分钟钟在

22、在在在100cm100cm2 2的面的面的面的面积积上降落的上降落的上降落的上降落的细细菌数菌数菌数菌数相当于相当于相当于相当于10L10L空气中所含的空气中所含的空气中所含的空气中所含的细细菌数菌数菌数菌数细菌数（细菌数（细菌数（细菌数（cfu/mcfu/m3 3)=)=50000N50000NAtAtt-t-平皿暴露于空气中的平皿暴露于空气中的平皿暴露于空气中的平皿暴露于空气中的时间时间（分（分（分（分钟钟）N-N-培养后，平皿上的培养后，平皿上的培养后，平皿上的培养后，平皿上的细细菌菌菌菌总总数数数数A-A-所用平皿的面所用平皿的面所用平皿的面所用平皿的面积积（20022002版版消消毒

23、毒技技术术规规范范）版版消消毒毒技技术术规规范范）20112011年年年年消毒技术规范消毒技术规范消毒技术规范消毒技术规范 平板暴露法平板暴露法平板暴露法平板暴露法按平均每皿的菌落数按平均每皿的菌落数按平均每皿的菌落数按平均每皿的菌落数报报告：告：告：告：cfu/cfu/皿皿皿皿暴露暴露暴露暴露时间时间 例如：例如：例如：例如： 产产房房房房 30m30m2 2 放置平皿放置平皿放置平皿放置平皿5 5个个个个放置放置放置放置15min15min 培养后培养后培养后培养后5 5个平皿共个平皿共个平皿共个平皿共长长菌落菌落菌落菌落1515个个个个该产该产房空气培养的房空气培养的房空气培养的房空气培

24、养的结结果果果果为为平均每皿的菌落数平均每皿的菌落数平均每皿的菌落数平均每皿的菌落数 3cfu/3cfu/皿皿皿皿 15min15min空气采样器法（浮游菌测定法）空气采样器法（浮游菌测定法）二二二二级级撞撞撞撞击击式空气采式空气采式空气采式空气采样仪样仪六六六六级级撞撞撞撞击击式空气采式空气采式空气采式空气采样仪样仪八八八八级级撞撞撞撞击击式空气采式空气采式空气采式空气采样仪样仪推荐使用推荐使用推荐使用推荐使用六六六六级级撞撞撞撞击击式空气采式空气采式空气采式空气采样样器器器器或其他或其他或其他或其他经验证经验证的空气采的空气采的空气采的空气采样样器器器器6 6层层有微小孔眼的有微小孔眼的有

25、微小孔眼的有微小孔眼的铝铝合金合金合金合金圆盘圆盘圆盘圆盘下放下放下放下放琼琼脂平皿脂平皿脂平皿脂平皿圆盘间圆盘间有密封胶圈有密封胶圈有密封胶圈有密封胶圈通通通通过过三个三个三个三个弹弹簧卡子把簧卡子把簧卡子把簧卡子把圆盘圆盘固定固定固定固定联联在一起在一起在一起在一起标标准采准采准采准采样样流量流量流量流量为为1 1立方尺立方尺立方尺立方尺28.3L/min28.3L/min 提前提前提前提前联联系需采系需采系需采系需采样样的科室的科室的科室的科室 安排好采安排好采安排好采安排好采样样的的的的时间时间以及房以及房以及房以及房间间的准的准的准的准备备百百百百级洁净级洁净房房房房间间至少已运行至

26、少已运行至少已运行至少已运行1515分分分分钟钟其余其余其余其余洁净洁净度房度房度房度房间间至少已运行至少已运行至少已运行至少已运行4040分分分分钟钟空气采样仪（浮游法）采样步骤和方法空气采样仪（浮游法）采样步骤和方法 采采采采样仪样仪需提前充需提前充需提前充需提前充电电1010小小小小时时 采采采采样样点点点点: : 洁净洁净房房房房间间每每每每间间需要采需要采需要采需要采样样至少至少至少至少2 2个点个点个点个点一次采一次采一次采一次采样样需要需要需要需要2 2个空白个空白个空白个空白对对照照照照 采采采采样样的布点：的布点：的布点：的布点：中央区和周中央区和周中央区和周中央区和周边边区

27、区区区 房房房房间间大于大于大于大于10m10m2 2 每增加每增加每增加每增加10m10m2 2 增增增增设设一个采一个采一个采一个采样样点点点点在平皿上要在平皿上要在平皿上要在平皿上要标标注房注房注房注房间间号和采号和采号和采号和采样样区域及采区域及采区域及采区域及采样时间样时间 采采采采样样的高度：的高度：的高度：的高度：将采将采将采将采样样器置于室内中央器置于室内中央器置于室内中央器置于室内中央0.8m0.8m1.5m1.5m高度高度高度高度 采采采采样样的角度：的角度：的角度：的角度：在在在在100100级级区域区域区域区域检测时检测时，采，采，采，采样样口口口口应对应对着气流方向着

28、气流方向着气流方向着气流方向在其他在其他在其他在其他级别级别区域区域区域区域检测时检测时，采，采，采，采样样口均向上口均向上口均向上口均向上 采采采采样样的的的的时长时长：百百百百级级中央区中央区中央区中央区3030分分分分钟钟其余其余其余其余洁净洁净房房房房间间均均均均为为1010分分分分钟钟（至少（至少（至少（至少2 2分分分分钟钟）采采采采样时间样时间不不不不应应超超超超过过30min30min 采采采采样时样时要注意无菌操作：要注意无菌操作：要注意无菌操作：要注意无菌操作：操作者：操作者：操作者：操作者：带带口罩、帽子，穿隔离衣口罩、帽子，穿隔离衣口罩、帽子，穿隔离衣口罩、帽子，穿隔离

29、衣换换鞋或穿鞋套；手鞋或穿鞋套；手鞋或穿鞋套；手鞋或穿鞋套；手卫卫生生生生安装安装安装安装进进气盖前需用酒精灯气盖前需用酒精灯气盖前需用酒精灯气盖前需用酒精灯灭灭菌菌菌菌进进气端盖正反两面气端盖正反两面气端盖正反两面气端盖正反两面 空白空白空白空白对对照的照的照的照的设设置：置：置：置：空白空白空白空白对对照照照照1 1：培养皿不打开：培养皿不打开：培养皿不打开：培养皿不打开空白空白空白空白对对照照照照2 2：模：模：模：模拟拟操作操作操作操作过过程程程程但培养皿打开后又立封盖但培养皿打开后又立封盖但培养皿打开后又立封盖但培养皿打开后又立封盖两次两次两次两次对对照必照必照必照必须须均均均均为为

30、阴性。阴性。阴性。阴性。被被被被测测区域区域区域区域洁净洁净度度度度级别级别最小采最小采最小采最小采样样量量量量mm3 3(L) 100(L) 100级级0.6(600)0.6(600)10001000级级0.06(60) 0.06(60) 1000010000级级0.03(30)0.03(30)100000100000级级0.006(6) 0.006(6) 300000 300000级级0.006(6) 0.006(6) 浮游菌法最小采样量浮游菌法最小采样量培养皿的准备要求培养皿的准备要求培养皿的准备要求培养皿的准备要求配置平皿的配置平皿的配置平皿的配置平皿的试验试验台需要使用水平台需要使用

31、水平台需要使用水平台需要使用水平仪仪提前校正提前校正提前校正提前校正保保保保证证加注培养基后平民内加注培养基后平民内加注培养基后平民内加注培养基后平民内琼琼脂厚度均匀脂厚度均匀脂厚度均匀脂厚度均匀需提前培养需提前培养需提前培养需提前培养24h24h（为证实为证实无菌）无菌）无菌）无菌）空气采样器法计算公式空气采样器法计算公式空气中菌落空气中菌落空气中菌落空气中菌落总总数（数（数（数（cfu/mcfu/m3 3）采采采采样样器各平皿菌落数之和（器各平皿菌落数之和（器各平皿菌落数之和（器各平皿菌落数之和（cfucfu）采采采采样样速率（速率（速率（速率（L/minL/min) ) 采采采采样时间样

32、时间( (minmin) )10001000=合合 格格 标标 准准环境类别环境类别环境类别环境类别 范围范围范围范围空气标准空气标准空气标准空气标准（cfu/mcfu/mcfu/mcfu/m3 3 3 3) ) ) )I I I I类类类类层流手术室、层流洁净病房层流手术室、层流洁净病房层流手术室、层流洁净病房层流手术室、层流洁净病房10101010类类类类普通手术室、产房、婴儿室、早普通手术室、产房、婴儿室、早普通手术室、产房、婴儿室、早普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供产儿室、普通保护性隔离室、供产儿室、普通保护性隔离室、供产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧

33、伤病房、应室无菌区、烧伤病房、应室无菌区、烧伤病房、应室无菌区、烧伤病房、ICUICUICUICU 200 200 200 200类类类类儿科病房、妇科检查室、注射室、儿科病房、妇科检查室、注射室、儿科病房、妇科检查室、注射室、儿科病房、妇科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、换药室、治疗室、供应室清洁区、换药室、治疗室、供应室清洁区、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房急诊室、化验室、各类普通病房急诊室、化验室、各类普通病房急诊室、化验室、各类普通病房和房间和房间和房间和房间500500500500类类类类传染病科病房传染病科病房传染病科病房传染病科病房- -

34、 - -类环类环境：采用空气境：采用空气境：采用空气境：采用空气洁净洁净技技技技术术的的的的诊诊所，所，所，所，分分分分洁净洁净手手手手术术部部部部和和和和其他其他其他其他洁净场洁净场所所所所类环类环境：非境：非境：非境：非洁净洁净手手手手术术部（室）；部（室）；部（室）；部（室）；产产房；房；房；房；导导管室管室管室管室；血液病区血液病区血液病区血液病区、烧伤烧伤病区等保病区等保病区等保病区等保护护性隔离区；性隔离区；性隔离区；性隔离区；重症重症重症重症监护监护病房；新生儿室等病房；新生儿室等病房；新生儿室等病房；新生儿室等类环类环境：境：境：境：消毒供消毒供消毒供消毒供应应中心的中心的中心

35、的中心的检查检查包装包装包装包装灭灭菌区菌区菌区菌区和无菌物品存放区和无菌物品存放区和无菌物品存放区和无菌物品存放区；母母母母婴婴同室同室同室同室；血液透析中心（室）血液透析中心（室）血液透析中心（室）血液透析中心（室）；其他普通住院病区；其他普通住院病区；其他普通住院病区；其他普通住院病区类环类环境：感染性疾病科境：感染性疾病科境：感染性疾病科境：感染性疾病科门诊门诊和病区；和病区；和病区；和病区；普通普通普通普通门门急急急急诊诊及其及其及其及其检查检查、治治治治疗疗（注射、（注射、（注射、（注射、换药换药等）室等）室等）室等）室类环境境等等等等级级级级手术室手术室手术室手术室名称名称名称名

36、称空气洁净度空气洁净度空气洁净度空气洁净度级别级别级别级别沉降法沉降法沉降法沉降法/ / / /浮游菌细菌浮游菌细菌浮游菌细菌浮游菌细菌最大平均浓度最大平均浓度最大平均浓度最大平均浓度手术区手术区手术区手术区周边区周边区周边区周边区手术区手术区手术区手术区周边区周边区周边区周边区I I I I特别洁净特别洁净特别洁净特别洁净手术室手术室手术室手术室百级百级百级百级千级千级千级千级0.20.20.20.2个个个个/ / / /（30min30min30min30min 90909090皿）皿）皿）皿）0.40.40.40.4个个个个/ / / /（30min30min30min30min 909

37、09090皿）皿）皿）皿）5 5 5 5个个个个/m/m/m/m3 3 3 310101010个个个个/m/m/m/m3 3 3 3标准洁净标准洁净标准洁净标准洁净手术室手术室手术室手术室千级千级千级千级万级万级万级万级0.750.750.750.75个个个个/ / / /（30min30min30min30min 90909090皿）皿）皿）皿）1.51.51.51.5个个个个/ / / /（30min30min30min30min 90909090皿）皿）皿）皿）25252525个个个个/m/m/m/m3 3 3 350505050个个个个/m/m/m/m3 3 3 3一般洁净一般洁净一般

38、洁净一般洁净手术室手术室手术室手术室万级万级万级万级十万十万十万十万级级级级2 2 2 2个个个个/ / / /（30min30min30min30min 90909090皿）皿）皿）皿）4 4 4 4个个个个/ / / /（30min30min30min30min 90909090皿）皿）皿）皿）75757575个个个个/m/m/m/m3 3 3 3150150150150个个个个/m/m/m/m3 3 3 3准洁净手准洁净手准洁净手准洁净手术室术室术室术室三十万级三十万级三十万级三十万级5 5 5 5个个个个/ / / /（30min30min30min30min 90909090皿）皿）

39、皿）皿）175175175175个个个个/m/m/m/m3 3 3 3 洁净洁净手手手手术术部：部：部：部：要求符合要求符合要求符合要求符合GB50333GB50333要求要求要求要求类类区域：区域：区域：区域：细细菌菌菌菌总总数数数数 4cfu/15min4cfu/15min 平皿平皿平皿平皿、类类区域：区域：区域：区域：细细菌菌菌菌总总数数数数 5cfu/5min5cfu/5min 平皿平皿平皿平皿浮游菌测定法的优点浮游菌测定法的优点能能能能够够采集浮游在空气中的微生物粒子采集浮游在空气中的微生物粒子采集浮游在空气中的微生物粒子采集浮游在空气中的微生物粒子这这种粒子可随人种粒子可随人种粒子

40、可随人种粒子可随人们们呼吸道运呼吸道运呼吸道运呼吸道运动进动进入呼吸道入呼吸道入呼吸道入呼吸道因而更具有因而更具有因而更具有因而更具有卫卫生学意生学意生学意生学意义义采采采采样样效率高效率高效率高效率高采采采采样样量准确量准确量准确量准确采采采采样时样时不受粒径大小、沉降速度和气流的影响不受粒径大小、沉降速度和气流的影响不受粒径大小、沉降速度和气流的影响不受粒径大小、沉降速度和气流的影响能准确的表示出空气中能准确的表示出空气中能准确的表示出空气中能准确的表示出空气中细细菌的菌的菌的菌的实际实际含量含量含量含量 医院物体表面消毒效果的医院物体表面消毒效果的监测 采样时间采样时间消消 毒毒 后后消

41、消 毒毒 后后1 1、消毒、消毒、消毒、消毒处处理后理后理后理后2 2、怀怀疑与医院感染暴疑与医院感染暴疑与医院感染暴疑与医院感染暴发发有关有关有关有关时时 采样方法采样方法5cm 5cm5cm 5cm灭灭菌菌菌菌规规格板格板格板格板放在被放在被放在被放在被检检物体表面物体表面物体表面物体表面用蘸有生理用蘸有生理用蘸有生理用蘸有生理盐盐水的棉拭子水的棉拭子水的棉拭子水的棉拭子1 1支支支支在在在在规规格板内横格板内横格板内横格板内横竖竖往返各涂擦往返各涂擦往返各涂擦往返各涂擦5 5次次次次并随之并随之并随之并随之转动转动棉拭子棉拭子棉拭子棉拭子被采表面被采表面被采表面被采表面100cm100c

42、m2 2，取，取，取，取全部面全部面全部面全部面积积被采被采被采被采样样表面表面表面表面 100cm100cm2 2，取，取，取，取100cm100cm2 2剪去手接触部分剪去手接触部分剪去手接触部分剪去手接触部分将棉拭子投入装有将棉拭子投入装有将棉拭子投入装有将棉拭子投入装有10ml10ml无菌无菌无菌无菌检测检测用洗脱液的用洗脱液的用洗脱液的用洗脱液的试试管中送管中送管中送管中送检检门门把手等小型物体用棉拭子直接涂抹物体表面采把手等小型物体用棉拭子直接涂抹物体表面采把手等小型物体用棉拭子直接涂抹物体表面采把手等小型物体用棉拭子直接涂抹物体表面采样样采采采采样样物体表面有消毒物体表面有消毒物

43、体表面有消毒物体表面有消毒剂剂残留残留残留残留时时采采采采样样液液液液应应含有相含有相含有相含有相应应中和中和中和中和剂剂 检测方法检测方法倾注法注法充分振充分振充分振充分振荡荡采采采采样样管管管管取不同稀取不同稀取不同稀取不同稀释释倍数的的洗脱液倍数的的洗脱液倍数的的洗脱液倍数的的洗脱液1.0ml1.0ml接种平皿接种平皿接种平皿接种平皿（每一（每一（每一（每一标标本接种本接种本接种本接种2 2个平皿）个平皿）个平皿）个平皿）将冷却至将冷却至将冷却至将冷却至40404545的融化的融化的融化的融化营营养养养养琼琼脂培养基脂培养基脂培养基脂培养基（ 45454848）每皿每皿每皿每皿倾倾注注注

44、注15-20ml15-20ml（15-18ml15-18ml）363611恒温箱培养恒温箱培养恒温箱培养恒温箱培养48h48h计计数菌落数数菌落数数菌落数数菌落数怀怀疑与医院感染暴疑与医院感染暴疑与医院感染暴疑与医院感染暴发发有关有关有关有关时时，进进行目行目行目行目标标微生物的微生物的微生物的微生物的检测检测涂抹法涂抹法将采将采将采将采样试样试管充分振管充分振管充分振管充分振荡荡或在混匀器上混匀或在混匀器上混匀或在混匀器上混匀或在混匀器上混匀30s30s取取取取100ul100ul接种于平皿接种于平皿接种于平皿接种于平皿均匀涂布均匀涂布均匀涂布均匀涂布363611恒温箱培养恒温箱培养恒温箱培

45、养恒温箱培养48h48h计计数菌落数数菌落数数菌落数数菌落数怀怀疑与医院感染暴疑与医院感染暴疑与医院感染暴疑与医院感染暴发发有关有关有关有关时时，进进行目行目行目行目标标微生物的微生物的微生物的微生物的检测检测 结果计算结果计算规则物体表面物体表面物体表面菌落物体表面菌落物体表面菌落物体表面菌落总总数（数（数（数（cfu/cmcfu/cm2 2) )平皿菌落数平皿菌落数平皿菌落数平皿菌落数 洗脱液洗脱液洗脱液洗脱液稀稀稀稀释释倍数倍数倍数倍数采采采采样样面面面面积积（cmcm2 2）=小型物体表面小型物体表面物体表面菌落物体表面菌落物体表面菌落物体表面菌落总总数（数（数（数（cfu/cfu/件

46、件件件) )=平皿菌落数平皿菌落数平皿菌落数平皿菌落数 洗脱液洗脱液洗脱液洗脱液稀稀稀稀释释倍数倍数倍数倍数例如：例如：例如：例如：手手手手术术室手室手室手室手术术床，面床，面床，面床，面积积100cm100cm2 2 采采采采样样面面面面积积100cm100cm2 2涂抹法接种涂抹法接种涂抹法接种涂抹法接种培养培养培养培养48h48h后后后后平皿上的菌落数平皿上的菌落数平皿上的菌落数平皿上的菌落数为为10cfu10cfu手手手手术术床的菌落床的菌落床的菌落床的菌落总总数数数数= =（1010010100）/100/100=10cfu/cm=10cfu/cm2 2倾倾注法接种注法接种注法接种注

47、法接种培养培养培养培养48h48h后后后后平皿上的菌落数平皿上的菌落数平皿上的菌落数平皿上的菌落数为为100cfu100cfu手手手手术术床的菌落床的菌落床的菌落床的菌落总总数数数数= =（1001010010）/100/100=10cfu/cm=10cfu/cm2 2 合格标准合格标准 、类区域：类区域：类区域：类区域： 细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数 5cfu/cm5cfu/cm2 2 、 类区域：类区域：类区域：类区域： 细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数细菌菌落总数 10cfu/cm10cfu/cm2 2 、类类区域：区域：区域：区域：细细菌菌落菌菌落菌菌落菌菌落总

48、总数数数数 5cfu/cm5cfu/cm2 2 类类区域：区域：区域：区域：细细菌菌落菌菌落菌菌落菌菌落总总数数数数 10cfu/cm10cfu/cm2 2 类类区域：区域：区域：区域：细细菌菌落菌菌落菌菌落菌菌落总总数数数数 15cfu/cm15cfu/cm2 2不得不得不得不得检检出致病微生物出致病微生物出致病微生物出致病微生物使用中消毒液染菌量监测使用中消毒液染菌量监测证证明被明被明被明被污污染的消毒染的消毒染的消毒染的消毒剂剂可以成可以成可以成可以成为为医医医医疗疗机构感染和流行机构感染和流行机构感染和流行机构感染和流行传传播的媒介已有播的媒介已有播的媒介已有播的媒介已有5050年的年

49、的年的年的历历史史史史已已已已经经有有有有报报告告告告证证明明明明污污染的消毒染的消毒染的消毒染的消毒剂导剂导致医院感染的例子致医院感染的例子致医院感染的例子致医院感染的例子消毒剂溶液中长菌常见有下列几种原因：消毒剂溶液中长菌常见有下列几种原因：消毒剂溶液中长菌常见有下列几种原因：消毒剂溶液中长菌常见有下列几种原因：消毒消毒消毒消毒剂剂的配制的配制的配制的配制问题问题消毒消毒消毒消毒剂剂的外源性的外源性的外源性的外源性污污染染染染消毒消毒消毒消毒剂剂的的的的储储存存存存问题问题消毒消毒消毒消毒剂剂本身成分的本身成分的本身成分的本身成分的问题问题美国美国CDCCDC医疗机构消毒灭菌指南医疗机构消

50、毒灭菌指南20082008采采 样样 及及 操操 作作 方方 法法 1、涂涂布布法法用无菌吸管吸取消毒液用无菌吸管吸取消毒液用无菌吸管吸取消毒液用无菌吸管吸取消毒液1ml1ml加入加入加入加入9ml9ml相相相相应应中和中和中和中和剂剂中中中中充分振充分振充分振充分振荡荡或在混匀器上混匀或在混匀器上混匀或在混匀器上混匀或在混匀器上混匀30s30s取取取取200ul200ul接种于培养基平皿表面接种于培养基平皿表面接种于培养基平皿表面接种于培养基平皿表面均匀涂布均匀涂布均匀涂布均匀涂布每份每份每份每份样样品同品同品同品同时时做做做做2 2个平行个平行个平行个平行样样一个平皿置于一个平皿置于一个平

51、皿置于一个平皿置于2020培养培养培养培养7d7d观观察真菌的生察真菌的生察真菌的生察真菌的生长长另一平皿置于另一平皿置于另一平皿置于另一平皿置于3535恒温培养箱培养恒温培养箱培养恒温培养箱培养恒温培养箱培养72h72h计计数菌落数数菌落数数菌落数数菌落数怀怀疑与医院感染暴疑与医院感染暴疑与医院感染暴疑与医院感染暴发发相关相关相关相关时时进进行目行目行目行目标标微生物微生物微生物微生物检测检测消毒消毒剂染菌量（染菌量（cfu/ml）= 每个平皿上的菌落数每个平皿上的菌落数50 结结 果果 计计 算算 2、倾倾注注法法用无菌吸管吸取消毒液用无菌吸管吸取消毒液用无菌吸管吸取消毒液用无菌吸管吸取消

52、毒液1ml1ml加入加入加入加入9ml9ml相相相相应应中和中和中和中和剂剂中中中中充分振充分振充分振充分振荡荡或在混匀器上混匀或在混匀器上混匀或在混匀器上混匀或在混匀器上混匀30s30s分分分分别别取取取取500ul500ul接种于接种于接种于接种于2 2个个个个灭灭菌平皿内菌平皿内菌平皿内菌平皿内加入已溶化的加入已溶化的加入已溶化的加入已溶化的45454848普通普通普通普通营营养养养养琼琼脂脂脂脂151518ml18ml边倾边倾注注注注边摇边摇匀匀匀匀待待待待琼琼脂凝固脂凝固脂凝固脂凝固一个平皿置于一个平皿置于一个平皿置于一个平皿置于2020培养培养培养培养7d7d观观察真菌的生察真菌的

53、生察真菌的生察真菌的生长长另一平皿置于另一平皿置于另一平皿置于另一平皿置于361361恒温培养箱培养恒温培养箱培养恒温培养箱培养恒温培养箱培养72h72h计计数菌落数数菌落数数菌落数数菌落数怀怀疑与医院感染暴疑与医院感染暴疑与医院感染暴疑与医院感染暴发发相关相关相关相关时时进进行目行目行目行目标标微生物微生物微生物微生物检测检测消毒消毒剂染菌量（染菌量（cfu/ml）= 每个平皿上的菌落数每个平皿上的菌落数20 结结 果果 计计 算算中和剂中和剂在微生物在微生物在微生物在微生物杀灭实验杀灭实验中中中中用以消除用以消除用以消除用以消除试验试验微生物与消毒微生物与消毒微生物与消毒微生物与消毒剂剂的

54、混的混的混的混悬悬液中液中液中液中和微生物表面上残留的消毒和微生物表面上残留的消毒和微生物表面上残留的消毒和微生物表面上残留的消毒剂剂使其失去使其失去使其失去使其失去对对微生物的抑制和微生物的抑制和微生物的抑制和微生物的抑制和杀灭杀灭作用的作用的作用的作用的试剂试剂中和剂选择原则中和剂选择原则本身本身本身本身对对菌无影响菌无影响菌无影响菌无影响生成物生成物生成物生成物对对菌无影响菌无影响菌无影响菌无影响确能去除确能去除确能去除确能去除杀杀菌因子菌因子菌因子菌因子消毒剂消毒剂消毒剂消毒剂中和剂中和剂中和剂中和剂含氯消毒剂含氯消毒剂含氯消毒剂含氯消毒剂硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（硫代硫酸钠

55、（0.1%-1.0%0.1%-1.0%0.1%-1.0%0.1%-1.0%）碘类消毒剂碘类消毒剂碘类消毒剂碘类消毒剂硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（0.1%-1.1%0.1%-1.1%0.1%-1.1%0.1%-1.1%）戊二醛（戊二醛（戊二醛（戊二醛（2%2%2%2%）甘氨酸（甘氨酸（甘氨酸（甘氨酸（1%1%1%1%）或甲醛（）或甲醛（）或甲醛（）或甲醛（1%1%1%1%）醇类消毒剂醇类消毒剂醇类消毒剂醇类消毒剂吐温吐温吐温吐温80808080（0.5%-3.0%0.5%-3.0%0.5%-3.0%0.5%-3.0%）过氧乙酸（过氧乙酸（过氧乙酸（过氧乙酸（0.1%-0.5%

56、0.1%-0.5%0.1%-0.5%0.1%-0.5%）硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（0.1%-0.5%0.1%-0.5%0.1%-0.5%0.1%-0.5%）过氧乙酸（过氧乙酸（过氧乙酸（过氧乙酸（0.5%-1.0%0.5%-1.0%0.5%-1.0%0.5%-1.0%） 硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（0.5%-1.0%0.5%-1.0%0.5%-1.0%0.5%-1.0%）常用消毒剂的中和剂常用消毒剂的中和剂 合合 格格 标标 准准皮肤黏膜消毒皮肤黏膜消毒剂染菌染菌 10cfu/ml灭菌菌剂染菌量染菌量0cfu/ml消毒消毒剂染菌量染菌量 100cfu/

57、ml对对未使用的未使用的未使用的未使用的低效消毒低效消毒低效消毒低效消毒剂剂和皮肤黏膜用消毒和皮肤黏膜用消毒和皮肤黏膜用消毒和皮肤黏膜用消毒剂剂使用前使用前使用前使用前应应按照使用中消毒液染菌量的方法按照使用中消毒液染菌量的方法按照使用中消毒液染菌量的方法按照使用中消毒液染菌量的方法进进行行行行细细菌菌菌菌检测检测未未未未检检出出出出细细菌菌菌菌为为合格合格合格合格消毒剂有效浓度的监测消毒剂有效浓度的监测使用中消毒液的有效使用中消毒液的有效使用中消毒液的有效使用中消毒液的有效浓浓度度度度应该应该符合使用要求符合使用要求符合使用要求符合使用要求连续连续使用消毒液使用消毒液使用消毒液使用消毒液应应

58、定期定期定期定期进进行有效行有效行有效行有效浓浓度度度度测测定定定定 每日使用，每日每日使用，每日每日使用，每日每日使用，每日监测监测；每周使用，每次使用前每周使用，每次使用前每周使用，每次使用前每周使用，每次使用前监测监测；医务人员手卫生效果的监测医务人员手卫生效果的监测遵循遵循WS/T 313WS/T 313中中华人民共和国人民共和国卫生部行生部行业标准准医医务人人员手手卫生生规范范手手手手术术室室室室产产房房房房母母母母婴婴室室室室新生儿室新生儿室新生儿室新生儿室口腔科口腔科口腔科口腔科器官移植病房器官移植病房器官移植病房器官移植病房层层流流流流洁净洁净病房病房病房病房 烧伤烧伤病房病房

59、病房病房血液透析室血液透析室血液透析室血液透析室导导管室管室管室管室 ICU ICU 感染性疾病科感染性疾病科感染性疾病科感染性疾病科 等部等部等部等部门门医医疗机构机构应每季度每季度对医医务人人员手手进行消毒效果行消毒效果监测当当当当怀怀疑医院感染暴疑医院感染暴疑医院感染暴疑医院感染暴发发与医与医与医与医务务人人人人员员手手手手卫卫生相关生相关生相关生相关时时应应及及及及时进时进行行行行监测监测并并并并进进行相关致病微生物的行相关致病微生物的行相关致病微生物的行相关致病微生物的检测检测 1、采采样样时时间间手手手手卫卫生后生后生后生后接触病人或接触病人或接触病人或接触病人或诊疗诊疗操作之前操

60、作之前操作之前操作之前 2、采采样样方方法法棉拭子法棉拭子法被被被被检检人人人人员员五指并五指并五指并五指并拢拢用蘸有含相用蘸有含相用蘸有含相用蘸有含相应应中和中和中和中和剂剂的棉拭子的棉拭子的棉拭子的棉拭子在双手手指屈面从指根到指尖往返涂擦在双手手指屈面从指根到指尖往返涂擦在双手手指屈面从指根到指尖往返涂擦在双手手指屈面从指根到指尖往返涂擦2 2次次次次一只手的涂擦面一只手的涂擦面一只手的涂擦面一只手的涂擦面积约积约30cm30cm2 2并随之并随之并随之并随之转动转动采采采采样样棉拭子棉拭子棉拭子棉拭子剪去操作者手接触的部分剪去操作者手接触的部分剪去操作者手接触的部分剪去操作者手接触的部分

61、将棉拭子投入将棉拭子投入将棉拭子投入将棉拭子投入10ml10ml含相含相含相含相应应中和液的中和液的中和液的中和液的试试管中管中管中管中立即送立即送立即送立即送检检 3、检检测测方方法法同物体表面消毒效果同物体表面消毒效果检验方法方法 4、结结果果计计算算菌落数（菌落数（菌落数（菌落数（cfu/cmcfu/cm2 2) )平皿菌落数平皿菌落数平皿菌落数平皿菌落数 稀稀稀稀释释倍数倍数倍数倍数采采采采样样面面面面积积（cmcm2 2）= 5、合合格格标标准准 、类类区域：区域：区域：区域：细细菌菌落菌菌落菌菌落菌菌落总总数数数数 5cfu/cm5cfu/cm2 2类类区域：区域：区域：区域：细细

62、菌菌落菌菌落菌菌落菌菌落总总数数数数 10cfu/cm10cfu/cm2 2类类区域：区域：区域：区域：细细菌菌落菌菌落菌菌落菌菌落总总数数数数 15cfu/cm15cfu/cm2 2卫卫生手消毒生手消毒生手消毒生手消毒： 细细菌菌落菌菌落菌菌落菌菌落总总数数数数 10cfu/cm10cfu/cm2 2外科手消毒外科手消毒外科手消毒外科手消毒： 细细菌菌落菌菌落菌菌落菌菌落总总数数数数 5cfu/cm5cfu/cm2 2不得不得不得不得检检出治病微生物出治病微生物出治病微生物出治病微生物压力蒸汽灭菌效果的生物监测压力蒸汽灭菌效果的生物监测监测时间监测时间：每周一次每周一次每周一次每周一次指示菌

63、株：指示菌株：指示菌株：指示菌株：嗜嗜嗜嗜热热脂肪芽胞杆菌脂肪芽胞杆菌脂肪芽胞杆菌脂肪芽胞杆菌（ATCC7953ATCC7953或或或或SSIK31SSIK31株）株）株）株）培养基：培养基：培养基：培养基：溴甲酚紫葡萄糖蛋白溴甲酚紫葡萄糖蛋白溴甲酚紫葡萄糖蛋白溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨胨水培养基水培养基水培养基水培养基该该菌菌菌菌为为需氧芽需氧芽需氧芽需氧芽孢孢杆菌，革杆菌，革杆菌，革杆菌，革兰兰氏染色呈紫色氏染色呈紫色氏染色呈紫色氏染色呈紫色细细菌芽胞孔雀菌芽胞孔雀菌芽胞孔雀菌芽胞孔雀绿绿着色着色着色着色在溴甲酚紫葡萄糖蛋白在溴甲酚紫葡萄糖蛋白在溴甲酚紫葡萄糖蛋白在溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨琼胨琼脂上

64、表面呈粗糙呈米黄色脂上表面呈粗糙呈米黄色脂上表面呈粗糙呈米黄色脂上表面呈粗糙呈米黄色 嗜热脂肪芽胞杆菌（嗜热脂肪芽胞杆菌（ATCC7953ATCC7953或或SSIK31SSIK31株）株）最适生最适生最适生最适生长长繁殖温度繁殖温度繁殖温度繁殖温度为为5656 6565，培养，培养，培养，培养24h24h形成菌落形成菌落形成菌落形成菌落热热死亡死亡死亡死亡时间为时间为121121嗜嗜嗜嗜热热脂肪芽脂肪芽脂肪芽脂肪芽孢孢杆菌菌片杆菌菌片杆菌菌片杆菌菌片染菌量染菌量染菌量染菌量为为5105105 5 10106 6cfu/cfu/片片片片检测方法方法将嗜将嗜将嗜将嗜热热脂肪芽胞杆菌菌片放入脂肪芽

65、胞杆菌菌片放入脂肪芽胞杆菌菌片放入脂肪芽胞杆菌菌片放入灭灭菌的小菌的小菌的小菌的小纸纸袋内袋内袋内袋内置于置于置于置于标标准准准准实验实验包中心部位包中心部位包中心部位包中心部位标标准生物准生物准生物准生物监测监测包包包包应应置于置于置于置于灭灭菌器排气口的上方菌器排气口的上方菌器排气口的上方菌器排气口的上方或厂家建或厂家建或厂家建或厂家建议议的的的的灭灭菌器内最菌器内最菌器内最菌器内最难灭难灭菌的部位菌的部位菌的部位菌的部位试验包制作包制作3 3件平件平件平件平纹长纹长袖手袖手袖手袖手术术衣衣衣衣4 4块块小手小手小手小手术术巾巾巾巾2 2块块中手中手中手中手术术巾巾巾巾1 1块块大手大手大

66、手大手术术巾巾巾巾3030块块10cm10cm10cm10cm纱纱布敷料布敷料布敷料布敷料裹成裹成裹成裹成25cm30 cm30cm25cm30 cm30cm大小大小大小大小经过经过一个一个一个一个灭灭菌周期后菌周期后菌周期后菌周期后在无菌条件下取出在无菌条件下取出在无菌条件下取出在无菌条件下取出试验试验包包包包或通气或通气或通气或通气储储物盒中的指示菌片物盒中的指示菌片物盒中的指示菌片物盒中的指示菌片投入投入投入投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白溴甲酚紫葡萄糖蛋白溴甲酚紫葡萄糖蛋白溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨胨水培养基水培养基水培养基水培养基中中中中5656培养培养培养培养48h48h同同同同时时将未将未将未将

67、未经灭经灭菌的菌片投入另一管培养基中作菌的菌片投入另一管培养基中作菌的菌片投入另一管培养基中作菌的菌片投入另一管培养基中作对对照照照照观观察培养基察培养基察培养基察培养基颜颜色的色的色的色的变变化化化化若指示菌片中的若指示菌片中的若指示菌片中的若指示菌片中的细细菌未被菌未被菌未被菌未被杀灭杀灭可分解培养基中的葡萄糖可分解培养基中的葡萄糖可分解培养基中的葡萄糖可分解培养基中的葡萄糖产产酸酸酸酸使指示使指示使指示使指示剂剂溴甲酚紫溴甲酚紫溴甲酚紫溴甲酚紫由原来的由原来的由原来的由原来的紫色紫色紫色紫色变变成成成成黄色黄色黄色黄色对对照管照管照管照管为为黄色黄色黄色黄色灭灭菌合格仍菌合格仍菌合格仍菌

68、合格仍为为淡淡淡淡蓝蓝色色色色灭灭菌不合格菌不合格菌不合格菌不合格为为黄色黄色黄色黄色自含式生物指示自含式生物指示剂使用方法使用方法使用方法使用方法经过经过一个一个一个一个灭灭菌菌菌菌过过程后程后程后程后取出指示取出指示取出指示取出指示剂剂管管管管挤挤破内含的安瓿破内含的安瓿破内含的安瓿破内含的安瓿与与与与对对照管一起放入照管一起放入照管一起放入照管一起放入5656培养培养培养培养48h48h结果判断结果判断灭灭菌合格菌合格菌合格菌合格检测检测管培养阴性管培养阴性管培养阴性管培养阴性阳性阳性阳性阳性对对照管培养阳性照管培养阳性照管培养阳性照管培养阳性阴性阴性阴性阴性对对照管培养阴性照管培养阴性

69、照管培养阴性照管培养阴性灭灭菌不合格菌不合格菌不合格菌不合格检测检测管培养阳性管培养阳性管培养阳性管培养阳性阳性阳性阳性阳性对对照管培养阳性照管培养阳性照管培养阳性照管培养阳性阴性阴性阴性阴性对对照管培养阴性照管培养阴性照管培养阴性照管培养阴性环氧乙烷灭菌效果的生物监测环氧乙烷灭菌效果的生物监测监测时间监测时间：每每每每灭灭菌批次菌批次菌批次菌批次指示菌株：指示菌株：指示菌株：指示菌株：枯草杆菌黑色枯草杆菌黑色枯草杆菌黑色枯草杆菌黑色变变种芽胞种芽胞种芽胞种芽胞（ATCC9372ATCC9372）培养基：培养基：培养基：培养基：普通普通普通普通营营养肉养肉养肉养肉汤汤培养基培养基培养基培养基检

70、测方法方法取取取取20ml20ml一次性塑料或玻璃注射器一次性塑料或玻璃注射器一次性塑料或玻璃注射器一次性塑料或玻璃注射器去掉去掉去掉去掉针头针头和和和和针头针头套套套套 拔出拔出拔出拔出针针栓栓栓栓将指示将指示将指示将指示剂带剂带孔的塑料盖孔的塑料盖孔的塑料盖孔的塑料盖应应朝向注射器朝向注射器朝向注射器朝向注射器针头处针头处将注射器将注射器将注射器将注射器针针栓插入原位栓插入原位栓插入原位栓插入原位（不要接触到生物指示（不要接触到生物指示（不要接触到生物指示（不要接触到生物指示剂剂）用一条全棉小毛巾折成两用一条全棉小毛巾折成两用一条全棉小毛巾折成两用一条全棉小毛巾折成两层层包裹包裹包裹包裹置

71、于置于置于置于纸纸塑包装袋中塑包装袋中塑包装袋中塑包装袋中 封袋封袋封袋封袋将常将常将常将常规规生物生物生物生物监测监测包放在包放在包放在包放在灭灭菌器最菌器最菌器最菌器最难灭难灭菌的部位菌的部位菌的部位菌的部位同同同同时设时设阴、阳性阴、阳性阴、阳性阴、阳性对对照照照照灭灭菌周期完成后菌周期完成后菌周期完成后菌周期完成后立即将生物指示立即将生物指示立即将生物指示立即将生物指示剂剂取出取出取出取出363611 培养培养培养培养7 7天天天天若用自含式生物指示若用自含式生物指示若用自含式生物指示若用自含式生物指示剂剂可直接可直接可直接可直接挤挤碎置于碎置于碎置于碎置于3737温箱中温箱中温箱中温

72、箱中培养培养培养培养48h48h观观察察察察结结果果果果医医 疗疗 器器 械械 消消 毒毒 效效 果果 监监 测测高度危高度危高度危高度危险险性医性医性医性医疗疗器械：器械：器械：器械： 进进入入入入正常无菌正常无菌正常无菌正常无菌组织组织、脉管系、脉管系、脉管系、脉管系统统或有无菌体液（如血或有无菌体液（如血或有无菌体液（如血或有无菌体液（如血液）流液）流液）流液）流过过，若，若，若，若被微生物被微生物被微生物被微生物污污染将染将染将染将导导致极高感染危致极高感染危致极高感染危致极高感染危险险的器材的器材的器材的器材 如如如如手手手手术术器械；穿刺器械；穿刺器械；穿刺器械；穿刺针针；腹腔；腹

73、腔；腹腔；腹腔镜镜；活；活；活；活检钳检钳；牙科手机；牙科手机；牙科手机；牙科手机及其配套器械；心及其配套器械；心及其配套器械；心及其配套器械；心导导管；植入物管；植入物管；植入物管；植入物等等等等消毒效果：消毒效果：消毒效果：消毒效果：应应无菌生无菌生无菌生无菌生长长消毒水平：达到消毒水平：达到消毒水平：达到消毒水平：达到灭灭菌菌菌菌中度危险性医疗器械：中度危险性医疗器械：中度危险性医疗器械：中度危险性医疗器械： 直接、直接、直接、直接、间间接接触粘膜接接触粘膜接接触粘膜接接触粘膜的器材的器材的器材的器材 如如如如胃胃胃胃肠肠道内道内道内道内镜镜；气管；气管；气管；气管镜镜；喉；喉；喉；喉镜

74、镜；体温表（口腔；体温表（口腔；体温表（口腔；体温表（口腔测测温温温温表肛表肛表肛表肛门测门测温表）；呼吸机管道；麻醉温表）；呼吸机管道；麻醉温表）；呼吸机管道；麻醉温表）；呼吸机管道；麻醉剂剂管道；管道；管道；管道；压压舌板；舌板；舌板；舌板；肛肛肛肛门门直直直直肠压肠压力力力力测测量量量量导导管管管管等等等等消毒效果：消毒效果：消毒效果：消毒效果：菌落数菌落数菌落数菌落数应应 20cfu/20cfu/件、件、件、件、g g或或或或100cm100cm2 2消毒水平：消毒水平：消毒水平：消毒水平：高水平消毒或中水平消毒高水平消毒或中水平消毒高水平消毒或中水平消毒高水平消毒或中水平消毒氧气湿化

75、瓶、吸引器、婴儿暖箱、加温加湿罐等氧气湿化瓶、吸引器、婴儿暖箱、加温加湿罐等氧气湿化瓶、吸引器、婴儿暖箱、加温加湿罐等氧气湿化瓶、吸引器、婴儿暖箱、加温加湿罐等宜采用宜采用宜采用宜采用高水平消毒高水平消毒高水平消毒高水平消毒低度危险性医疗器械：低度危险性医疗器械：低度危险性医疗器械：低度危险性医疗器械： 仅仅与完整皮肤接触与完整皮肤接触与完整皮肤接触与完整皮肤接触而而而而不与粘膜接触不与粘膜接触不与粘膜接触不与粘膜接触的器材的器材的器材的器材 如如如如听听听听诊诊器；血器；血器；血器；血压计压计袖袖袖袖带带；病床；病床；病床；病床围栏围栏、床面以及床、床面以及床、床面以及床、床面以及床头头柜、

76、被褥；柜、被褥；柜、被褥；柜、被褥；墙墙面；痰盂、尿面；痰盂、尿面；痰盂、尿面；痰盂、尿壶壶、便器、便器、便器、便器等等等等消毒效果：消毒效果：消毒效果：消毒效果：菌落数菌落数菌落数菌落数应应 200cfu/200cfu/件、件、件、件、g g或或或或100cm100cm2 2消毒水平：消毒水平：消毒水平：消毒水平：中水平消毒或低水平消毒中水平消毒或低水平消毒中水平消毒或低水平消毒中水平消毒或低水平消毒或保持日常清或保持日常清或保持日常清或保持日常清洁洁在消毒或在消毒或在消毒或在消毒或灭灭菌菌菌菌处处理后理后理后理后存放有效期内采存放有效期内采存放有效期内采存放有效期内采样样采采 样样 时时

77、间间可用可用可用可用破坏性破坏性破坏性破坏性方法取方法取方法取方法取样样的，如一次性的，如一次性的，如一次性的，如一次性输输液（血）器、注射液（血）器、注射液（血）器、注射液（血）器、注射器和注射器和注射器和注射器和注射针针等参照等参照等参照等参照中中中中华华人民共和国人民共和国人民共和国人民共和国药药典典典典无菌无菌无菌无菌检查检查法法法法进进行。行。行。行。灭菌医疗器材的检查方法灭菌医疗器材的检查方法灭菌医疗器材的检查方法灭菌医疗器材的检查方法牙科手机牙科手机牙科手机牙科手机采采采采样样：应应在在在在100100级洁净实验级洁净实验室将每支手机分室将每支手机分室将每支手机分室将每支手机分别

78、别置置置置20-25mL20-25mL采采采采样样液的无菌大液的无菌大液的无菌大液的无菌大试试管（内径管（内径管（内径管（内径25mm25mm）中，液面）中，液面）中，液面）中，液面高度高度高度高度为为4.5cm4.5cm，于旋，于旋，于旋，于旋涡涡混合器上洗混合器上洗混合器上洗混合器上洗涤涤震震震震荡荡30s30s，取洗脱液，取洗脱液，取洗脱液，取洗脱液进进行无菌行无菌行无菌行无菌检查检查。对对不能用破坏性不能用破坏性不能用破坏性不能用破坏性方法取方法取方法取方法取样样的医的医的医的医疗疗器材，器材，器材，器材，应应在在在在100100级洁净级洁净实验实验室，用浸有无菌生理室，用浸有无菌生理

79、室，用浸有无菌生理室，用浸有无菌生理盐盐水采水采水采水采样样液的棉拭子在被液的棉拭子在被液的棉拭子在被液的棉拭子在被检检物物物物体表面涂抹采体表面涂抹采体表面涂抹采体表面涂抹采样样，被采表面，被采表面，被采表面，被采表面100cm2100cm2，取全部表面；，取全部表面；，取全部表面；，取全部表面；被采表面被采表面被采表面被采表面 100cm2100cm2，取，取，取，取100cm2100cm2；然后将采；然后将采；然后将采；然后将采样样棉拭子棉拭子棉拭子棉拭子进进行行行行无菌无菌无菌无菌检查检查。手机采样方法决定检测结果！手机采样方法决定检测结果！手机采样方法决定检测结果！手机采样方法决定检

80、测结果！棉签涂擦法不能体现手机的无菌性！棉签涂擦法不能体现手机的无菌性！棉签涂擦法不能体现手机的无菌性！棉签涂擦法不能体现手机的无菌性！（1 1）在）在）在）在洁净洁净度度度度100100级级区域中区域中区域中区域中进进行，行，行，行，严严格无菌操作格无菌操作格无菌操作格无菌操作 （2 2）采）采）采）采样样后送后送后送后送检时间检时间不得超不得超不得超不得超过过6h6h 样样品保存于品保存于品保存于品保存于4 4，则则不超不超不超不超过过24h 24h （3 3）如消毒因子）如消毒因子）如消毒因子）如消毒因子为为消毒消毒消毒消毒剂剂，采，采，采，采样样液中液中液中液中应应加入中和加入中和加入

81、中和加入中和剂剂 （4 4）采）采）采）采样样面面面面积积，100cm100cm2 2 （5 5）设设好阳性、阴性好阳性、阴性好阳性、阴性好阳性、阴性对对照照照照 注意事项：注意事项：不推荐医院常不推荐医院常规开展开展灭菌物品的无菌菌物品的无菌检查可用可用可用可用破坏性方法取破坏性方法取破坏性方法取破坏性方法取样样的，的，的，的，应应在在在在100100级级超超超超净净工作台称取工作台称取工作台称取工作台称取1 110g10g样样品，放入装有品，放入装有品，放入装有品，放入装有10mL10mL采采采采样样液的液的液的液的试试管内管内管内管内进进行洗脱，取洗脱液行洗脱，取洗脱液行洗脱，取洗脱液行

82、洗脱，取洗脱液接种平皿接种平皿接种平皿接种平皿进进行菌落行菌落行菌落行菌落计计数（数（数（数（cfu/gcfu/g），必要），必要），必要），必要时时分离致病性微生物。分离致病性微生物。分离致病性微生物。分离致病性微生物。消毒医疗器材的检查方法消毒医疗器材的检查方法消毒医疗器材的检查方法消毒医疗器材的检查方法可可可可整件整件整件整件放入放入放入放入试试管管管管进进行洗脱的，用洗脱液浸没后震行洗脱的，用洗脱液浸没后震行洗脱的，用洗脱液浸没后震行洗脱的，用洗脱液浸没后震荡荡30s30s以上，以上，以上，以上，取洗脱液接种平皿，取洗脱液接种平皿，取洗脱液接种平皿，取洗脱液接种平皿，进进行菌落行菌落行

83、菌落行菌落计计数（数（数（数（cfu/cfu/件），必要件），必要件），必要件），必要时时分离致分离致分离致分离致病性微生物。病性微生物。病性微生物。病性微生物。对对不能用破坏性方法取不能用破坏性方法取不能用破坏性方法取不能用破坏性方法取样样的医的医的医的医疗疗器材，器材，器材，器材，应应在在在在100100级级超超超超净净工作台，工作台，工作台，工作台，用浸有无菌生理用浸有无菌生理用浸有无菌生理用浸有无菌生理盐盐水采水采水采水采样样液的棉拭子在被液的棉拭子在被液的棉拭子在被液的棉拭子在被检检物体表面涂抹采物体表面涂抹采物体表面涂抹采物体表面涂抹采样样，被采表面被采表面被采表面被采表面100c

84、m2100cm2，取全部表面，被采表面，取全部表面，被采表面，取全部表面，被采表面，取全部表面，被采表面 100cm2100cm2，取，取，取，取100cm2100cm2，然后将采，然后将采，然后将采，然后将采样样棉拭子棉拭子棉拭子棉拭子进进行洗脱，取洗脱液接种平皿行洗脱，取洗脱液接种平皿行洗脱，取洗脱液接种平皿行洗脱，取洗脱液接种平皿进进行行行行菌落菌落菌落菌落计计数（数（数（数（cfu/ cm2cfu/ cm2），必要），必要），必要），必要时时分离致病性微生物。分离致病性微生物。分离致病性微生物。分离致病性微生物。采样时间采样时间采样时间采样时间消毒消毒消毒消毒灭灭菌后菌后菌后菌后使用前

85、使用前使用前使用前内窥镜消毒灭菌效果的生物监测内窥镜消毒灭菌效果的生物监测采样方法采样方法监测监测部位部位部位部位为为内内内内镜镜的的的的内腔面内腔面内腔面内腔面用无菌注射器抽取用无菌注射器抽取用无菌注射器抽取用无菌注射器抽取50ml50ml含有相含有相含有相含有相应应中和中和中和中和剂剂的洗脱液的洗脱液的洗脱液的洗脱液从待从待从待从待检检内内内内镜镜的的的的活活活活检检口口口口注入内注入内注入内注入内镜镜（使用蠕使用蠕使用蠕使用蠕动泵动泵）用无菌用无菌用无菌用无菌试试管从活管从活管从活管从活检检出口收集注入的液体出口收集注入的液体出口收集注入的液体出口收集注入的液体2h2h内送内送内送内送检

86、检检测方法检测方法将洗脱液充分混匀将洗脱液充分混匀将洗脱液充分混匀将洗脱液充分混匀 取洗脱液取洗脱液取洗脱液取洗脱液1.0ml1.0ml接种平皿接种平皿接种平皿接种平皿将冷却至将冷却至将冷却至将冷却至4040- 45- 45溶化的溶化的溶化的溶化的营营养养养养琼琼脂培养基脂培养基脂培养基脂培养基每皿每皿每皿每皿倾倾注注注注15-20ml 15-20ml 3636 1 1恒温箱培养恒温箱培养恒温箱培养恒温箱培养48h48h计计数菌落数（数菌落数（数菌落数（数菌落数（cfu/cfu/件）件）件）件）将剩余洗脱液在将剩余洗脱液在将剩余洗脱液在将剩余洗脱液在无菌条件下用无菌条件下用无菌条件下用无菌条件

87、下用滤过滤过膜（膜（膜（膜（0.45um0.45um）过滤浓缩过滤浓缩将将将将滤过滤过膜接种于凝固的膜接种于凝固的膜接种于凝固的膜接种于凝固的营营养养养养琼琼脂平板上脂平板上脂平板上脂平板上置置置置3636 1 1恒温箱培养恒温箱培养恒温箱培养恒温箱培养48h48h计计数菌落数（数菌落数（数菌落数（数菌落数（cfu/cfu/件）件）件）件）合格标准合格标准消毒内消毒内消毒内消毒内镜镜 细细菌菌菌菌总总数数数数 20cfu/20cfu/件件件件 灭灭菌内菌内菌内菌内镜镜 无任何无任何无任何无任何细细菌菌菌菌检检出出出出采样时间采样时间采样时间采样时间消毒消毒消毒消毒灭灭菌后菌后菌后菌后使用前使用

88、前使用前使用前呼吸机麻醉机等螺纹管消毒效果生物监测呼吸机麻醉机等螺纹管消毒效果生物监测采样方法采样方法用蘸有相用蘸有相用蘸有相用蘸有相应应中和中和中和中和剂剂的的的的长长柄棉柄棉柄棉柄棉签签在被在被在被在被检检螺螺螺螺纹纹管内面反复涂擦管内面反复涂擦管内面反复涂擦管内面反复涂擦并同并同并同并同时转动时转动棉棉棉棉签签剪去手接触的部位剪去手接触的部位剪去手接触的部位剪去手接触的部位将棉将棉将棉将棉签签投入投入投入投入10ml10ml含相含相含相含相应应中和中和中和中和剂剂的的的的无菌生理无菌生理无菌生理无菌生理盐盐水水水水试试管管管管立即送立即送立即送立即送检检检测方法检测方法同物体表面微生物学

89、的同物体表面微生物学的检测方法方法结果计算结果计算细细菌菌菌菌总总数（数（数（数（cfu/cmcfu/cm2 2）= =平板上的菌落数平板上的菌落数平板上的菌落数平板上的菌落数 稀稀稀稀释释倍数倍数倍数倍数采采采采样样面面面面积积采采采采样样面面面面积积 = = 棉棉棉棉签签涂抹采涂抹采涂抹采涂抹采样样的的的的长长度度度度 螺螺螺螺纹纹管内周管内周管内周管内周长长 医院治疗用水的细菌学检测医院治疗用水的细菌学检测血液透析相关治疗用水的细菌学监测血液透析相关治疗用水的细菌学监测依据依据依据依据YY 0572YY 0572YY 0572YY 0572血液透析和相关治疗用水血液透析和相关治疗用水血液

90、透析和相关治疗用水血液透析和相关治疗用水进行检测进行检测进行检测进行检测监测时间监测时间监测时间监测时间最初最初最初最初监测应监测应每周每周每周每周监测监测1 1次次次次连续连续2 2次次次次监测结监测结果符合要求后果符合要求后果符合要求后果符合要求后改改改改为为每月每月每月每月1 1次次次次采样点采样点血液透析器与复用系血液透析器与复用系血液透析器与复用系血液透析器与复用系统连统连接接接接处处或尽可能接近此或尽可能接近此或尽可能接近此或尽可能接近此处处采样方法采样方法用用用用75%75%酒精擦拭采酒精擦拭采酒精擦拭采酒精擦拭采样样口口口口酒精自然酒精自然酒精自然酒精自然风风干后打开采干后打开

91、采干后打开采干后打开采样样口口口口在透析液在透析液在透析液在透析液连续连续流流流流动动1min1min后后后后用无菌用无菌用无菌用无菌试试管接取管接取管接取管接取样样本本本本3-4ml3-4ml检验方法检验方法倾注法注法将洗脱液充分混匀将洗脱液充分混匀将洗脱液充分混匀将洗脱液充分混匀 取洗脱液取洗脱液取洗脱液取洗脱液1.0ml1.0ml接种平皿接种平皿接种平皿接种平皿将冷却至将冷却至将冷却至将冷却至4040- 45- 45的的的的胰蛋白胰蛋白胰蛋白胰蛋白酶酶大豆大豆大豆大豆琼琼脂脂脂脂每皿每皿每皿每皿倾倾注注注注15-20ml 15-20ml 3535- 37- 37孵育孵育孵育孵育48h48

92、h48h48h后若呈阴性后若呈阴性后若呈阴性后若呈阴性 延延延延时时培养至培养至培养至培养至72h72h计计数平板上的菌落数数平板上的菌落数数平板上的菌落数数平板上的菌落数菌落菌落菌落菌落总总数数数数(cfu/ml(cfu/ml）= =平板上的菌落数平板上的菌落数平板上的菌落数平板上的菌落数结果计算结果计算无菌操作取无菌操作取无菌操作取无菌操作取100ul100ul样样本本本本滴于培养皿表面滴于培养皿表面滴于培养皿表面滴于培养皿表面 均匀涂抹均匀涂抹均匀涂抹均匀涂抹3535- 37- 37孵育孵育孵育孵育48h48h48h48h后若呈阴性后若呈阴性后若呈阴性后若呈阴性 延延延延时时培养至培养至

93、培养至培养至72h72h计计数平板上的菌落数数平板上的菌落数数平板上的菌落数数平板上的菌落数涂抹法涂抹法菌落菌落菌落菌落总总数数数数(cfu/ml(cfu/ml）= =平板上的菌落数平板上的菌落数平板上的菌落数平板上的菌落数1010结果计算结果计算透析用水透析用水透析用水透析用水细细菌菌菌菌总总数数数数合格标准合格标准ISO 13959:2002 ISO 13959:2002 ISO 13959:2002 ISO 13959:2002 血液透析和相关治疗用水血液透析和相关治疗用水血液透析和相关治疗用水血液透析和相关治疗用水200cfu/ml200cfu/ml100cfu/ml100cfu/ml

94、口腔科治口腔科治口腔科治口腔科治疗疗用水的用水的用水的用水的细细菌菌落菌菌落菌菌落菌菌落总总数数数数应应 100cfu/mL100cfu/mL口腔科治疗用水的细菌学监测口腔科治疗用水的细菌学监测直接取治直接取治直接取治直接取治疗疗用水用水用水用水1mL1mL接种平皿接种平皿接种平皿接种平皿3737恒温箱培养恒温箱培养恒温箱培养恒温箱培养48h48h计计数数数数细细菌菌落数。菌菌落数。菌菌落数。菌菌落数。检测方法检测方法检测方法检测方法合格标准合格标准合格标准合格标准 血血 液液 透透 析析 液液 内内 毒毒 素素 检检 测测血液透析用水内毒素血液透析用水内毒素血液透析用水内毒素血液透析用水内毒

95、素监测监测最初每周最初每周最初每周最初每周监测监测1 1次次次次连续连续2 2次次次次检测结检测结果符合要求后果符合要求后果符合要求后果符合要求后应应至少至少至少至少每每每每3 3月月月月送送送送检检1 1次次次次国际标准国际标准ISO 13959:ISO 13959:血液透析和相关治疗用水血液透析和相关治疗用水水水水水处处理理理理输输出端出端出端出端内毒素含量内毒素含量内毒素含量内毒素含量应应 1EU/ml1EU/ml血液透析器入口的血液透析器入口的血液透析器入口的血液透析器入口的输输出点出点出点出点内毒素含量内毒素含量内毒素含量内毒素含量 5EU/ml5EU/ml样本样本反渗水反渗水反渗水

96、反渗水 透析液透析液透析液透析液采集方法采集方法容器容器容器容器 专专用无用无用无用无热热源真空管源真空管源真空管源真空管方法方法方法方法 用用用用75%75%酒精擦拭采酒精擦拭采酒精擦拭采酒精擦拭采样样口口口口 酒精自然酒精自然酒精自然酒精自然风风干后打开采干后打开采干后打开采干后打开采样样口口口口 1 1分分分分钟钟后用无菌无后用无菌无后用无菌无后用无菌无热热源注射器源注射器源注射器源注射器针头针头 深入采深入采深入采深入采样样口内口内口内口内 吸取吸取吸取吸取样样本本本本3-4ml 3-4ml 用用用用75%75%酒精消毒无酒精消毒无酒精消毒无酒精消毒无热热源真空管源真空管源真空管源真空

97、管顶顶端端端端待酒精自然待酒精自然待酒精自然待酒精自然挥发挥发后后后后将将将将样样品注入真空管内品注入真空管内品注入真空管内品注入真空管内（不可打开真空管上方的（不可打开真空管上方的（不可打开真空管上方的（不可打开真空管上方的红红色盖子）色盖子）色盖子）色盖子）实验方法实验方法动态动态比比比比浊浊法（法（法（法（仪仪器法）器法）器法）器法）注意事项注意事项样样本采集、保存、运送整个本采集、保存、运送整个本采集、保存、运送整个本采集、保存、运送整个过过程中程中程中程中避免外来避免外来避免外来避免外来热热源的源的源的源的污污染染染染采采采采样样管抽真空管抽真空管抽真空管抽真空以防管内以防管内以防管

98、内以防管内压压力力力力过过高高高高试试管盖崩掉管盖崩掉管盖崩掉管盖崩掉运运运运输过输过程中做好保程中做好保程中做好保程中做好保护护措施措施措施措施以免运以免运以免运以免运输输途中碰撞、破碎途中碰撞、破碎途中碰撞、破碎途中碰撞、破碎每次送每次送每次送每次送样时样时需同需同需同需同时时送送送送3 3支与采支与采支与采支与采样时样时所用的所用的所用的所用的同一厂家、型号、批号的注射器同一厂家、型号、批号的注射器同一厂家、型号、批号的注射器同一厂家、型号、批号的注射器存在的问题存在的问题采采采采样样管的管的管的管的选择选择送送送送样样点点点点运运运运输输普通注射用水普通注射用水普通注射用水普通注射用水

99、0.25EU/ml0.25EU/ml内毒素内毒素内毒素内毒素监测监测用水用水用水用水0.003EU/ml0.003EU/ml产品资料：注：图片及文字介绍仅供参考，请以实物为准简介：我厂生产的六级筛孔撞击式空气微生物采样器，是一种双功能阶式多级撞击采样器，可广泛地用于卫生防疫、生物洁净、制药、发酵工业等环境中的监测以及有关研究教学部门作空气微生物的采样研究，为评价空气环境微生物污染危害及其防治措施提供依据。特点：六级筛孔撞击式空气微生物采样器能够测定空气微生物的数量之外，它独有的特性是还能测出这些粒子的大小，而后者是判定空气微生物危害的重要指标之一。它是由六个撞击器组合成一体，每一级实际是一个单

100、级采样器，利用6次反复撞击原理，绝大部分粒子特别是在气管及肺沉降的粒子基本都撞击下来，因而它采集到的粒子大小范围自然比单级的广，这是一些单级撞击采样器所无法比拟的而且采样器的圆形喷口比裂隙等喷口有更高的采样效率。采样时相对湿度逐级地增高（由第一级的39增至第六级的88），这十分有利于脆弱的病原微生物，特别是病毒粒子的存活。由于它这些与众不同的特点，使它广泛而有效地应用于空气微生物的监测，自问世以来常用不衰。被专家推荐为国际标准采样器。模拟人呼吸道的解剖结构和空气动力学生理特征，采样惯性撞击原理而将悬浮在空气中的微生物粒子分别等级地收集到采样介质表面上，然后供培养及微生物学分析。整个仪器是由撞击

101、器、主机（流量计）、定时器、三脚架组成。撞击器是6层有微小孔眼的铝合金圆盘。圆盘下放琼脂平皿，每圆盘间有密封胶圈，在通过三个弹簧挂钩把圆盘牢固地联在一起。每个圆盘上有400个成环行排列、逐层减小、尺寸精确的小孔，标准采样流量为1立方呎（28.3L/min）。当含有微生物粒子的气流进入最上层的采样口后，由于气流的逐层增高，不同大小的微生物粒子按空气动力学特征分别撞击在相应的琼脂表面上。捕获在各级上的粒子大小范围是由该级孔眼的气流速度和上一级的粒子截阻率而决定的。第1、2级类似人的上呼吸道捕获的粒子，第36级类似人的下呼吸道捕获的粒子，这就相当程度上复制了这些粒子在呼吸道的穿透作用和沉着部位。可提

102、供加装好普通营养琼脂的平皿。技术参数：测量范围捕获率：98%捕获粒子范围第一级：7.0m孔径1.18mm第二级：4.7m7.0m孔径0.91mm第三级：3.3m4.7m孔径0.71mm第四级：2.1m3.3m孔径0.53mm第五级：1.1m-2.1m孔径0.34mm第六级：0.65m1.1m孔径0.25mm采样流量28.3L/min可调节精度5%噪声60db电子定时器范围1-24小时，精度1%工作电源220V/AC功率45W保修期1年基本配置：1.主机：一套（含真空泵，流量剂，定时器各1个）2.撞击器：6级撞击器一台3.三脚架：一台4.操作手册：一份5.连接管等专用附件：一套6.铝合金手提箱：一个