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1、 第三节第三节 血液分析仪及其临床应用血液分析仪及其临床应用 血液分析仪及临床应用 【检测原理】【检测原理】 根据血细胞非传导性的性质，以对电解质溶液根据血细胞非传导性的性质，以对电解质溶液中悬浮颗粒在通过计数小孔时引起的电阻变化进行中悬浮颗粒在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础，来进行血细胞计数和体积测定，这种检测为基础，来进行血细胞计数和体积测定，这种方法也被称为库尔特原理方法也被称为库尔特原理 血液分析仪及临床应用图图3-1 3-1 细胞计数电阻抗原理细胞计数电阻抗原理血液分析仪及临床应用n放大：细胞通过小孔时所产生的脉冲传导微弱，难以放大：细胞通过小孔时所产生的脉冲传导微弱，难
2、以直接触发计数电路，必须经电子放大器把信号放大直接触发计数电路，必须经电子放大器把信号放大 n阈值调节：在一定范围内调节参考电平大小，使计数阈值调节：在一定范围内调节参考电平大小，使计数结果更加符合实际结果更加符合实际 n甄别：各种微粒通过微孔时均可产生讯号、讯号电平甄别：各种微粒通过微孔时均可产生讯号、讯号电平（脉冲幅度）与微粒子大小成正比，所为甄别就是根（脉冲幅度）与微粒子大小成正比，所为甄别就是根据阈值调节器提供的参考电平，把低于参考电平的假据阈值调节器提供的参考电平，把低于参考电平的假讯号去掉，以提高准确性讯号去掉，以提高准确性 n整形整形 经放大和甄别的波形不一致，须经过整形器调经放
3、大和甄别的波形不一致，须经过整形器调整为形状一致标准的平顶波后才能触发电路，送入计整为形状一致标准的平顶波后才能触发电路，送入计数系统，得出计数结果数系统，得出计数结果 n计数得出结果计数得出结果 血液分析仪及临床应用电阻抗法白细胞检测原理电阻抗法白细胞检测原理 根根据据电电阻阻抗抗的的原原理理，不不同同体体积积的的白白细细胞胞通通过过小小孔孔时时产产生生的的脉脉冲冲大大小小有有明明显显的的差差异异，而而不不同同类类型型的的白白细细胞胞（如如淋淋巴巴细细胞胞、单单核核细细胞胞、嗜嗜中中性性粒粒细细胞胞）经经溶溶血血剂剂作作用用后后有有明明显显的的差差异异，根根据据脉脉冲冲的的大大小小，即即可可
4、人人为为地地将血内的白细胞分成几群（将血内的白细胞分成几群（2 2分群、分群、3 3分群）。分群）。血液分析仪及临床应用图图3-2. 3-2. 直方图与脉冲信号的关系直方图与脉冲信号的关系 血液分析仪及临床应用 图图3-3. 3-3. 白细胞体积分布直方图白细胞体积分布直方图fL 将白细胞体积从将白细胞体积从30-450fl30-450fl分为分为256256个通道，每个通道为个通道，每个通道为1.64fl1.64fl。第一群（小细胞群，第一群（小细胞群，35-90fl35-90fl）是淋巴细胞；第二群（）是淋巴细胞；第二群（90-160fl90-160fl）是单个核细胞区，也称为中间细胞，白
5、血病细胞、异型淋巴细胞、是单个核细胞区，也称为中间细胞，白血病细胞、异型淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、浆细胞、嗜碱性粒细胞等嗜酸性粒细胞、浆细胞、嗜碱性粒细胞等 ；第三群（；第三群（160fl160fl以上）以上）大细胞区，中性粒。大细胞区，中性粒。 血液分析仪及临床应用电阻抗法红细胞测试原理电阻抗法红细胞测试原理n n红细胞计数和红细胞比容测定红细胞计数和红细胞比容测定红细胞计数和红细胞比容测定红细胞计数和红细胞比容测定 红细胞通过小孔时，形成相应大小的脉冲，脉冲红细胞通过小孔时，形成相应大小的脉冲，脉冲的多少即红细胞的数目，脉冲的高度代表单个细胞的的多少即红细胞的数目，脉冲的高度代表单个细胞的体
6、积。脉冲高度叠加，经换算即可得红细胞的比积体积。脉冲高度叠加，经换算即可得红细胞的比积 血液分析仪及临床应用n血红蛋白测定原理血红蛋白测定原理 被稀释的血液加入溶血剂后，红细胞溶解，释放被稀释的血液加入溶血剂后，红细胞溶解，释放血红蛋白，后者与溶血剂中有关成分结合形成血红蛋血红蛋白，后者与溶血剂中有关成分结合形成血红蛋白衍生物，进入血红蛋白测试系统，在特定波长（一白衍生物，进入血红蛋白测试系统，在特定波长（一般在般在530530550nm550nm）下比色，吸光度的变化与液体中血）下比色，吸光度的变化与液体中血红蛋白含量成正比，仪器便可显示其浓度。红蛋白含量成正比，仪器便可显示其浓度。 血液分
7、析仪及临床应用 电阻抗法血小板测定原理电阻抗法血小板测定原理n n血小板随红细胞一起在一个系统中进行检测，根据不血小板随红细胞一起在一个系统中进行检测，根据不血小板随红细胞一起在一个系统中进行检测，根据不血小板随红细胞一起在一个系统中进行检测，根据不同的阈值，计算机分别给出血小板与红细胞数目同的阈值，计算机分别给出血小板与红细胞数目同的阈值，计算机分别给出血小板与红细胞数目同的阈值，计算机分别给出血小板与红细胞数目 识别器识别器小孔小孔血液分析仪及临床应用n n 血小板分别储存于血小板分别储存于血小板分别储存于血小板分别储存于64646464个通道内，直方图范围为个通道内，直方图范围为个通道内
8、，直方图范围为个通道内，直方图范围为2-2-2-2-20fl 20fl 20fl 20fl 之间。不同仪器的血小板直方图范围不一。之间。不同仪器的血小板直方图范围不一。之间。不同仪器的血小板直方图范围不一。之间。不同仪器的血小板直方图范围不一。MPVMPVMPVMPV就是此平整曲线所含的群体算术平均体积，就是此平整曲线所含的群体算术平均体积，就是此平整曲线所含的群体算术平均体积，就是此平整曲线所含的群体算术平均体积，MPVMPVMPVMPV也就是也就是也就是也就是血小板体积分布直方图的产物。血小板体积分布直方图的产物。血小板体积分布直方图的产物。血小板体积分布直方图的产物。 图图3-5. 3-
9、5. 电阻抗法血小板体积分布直方图电阻抗法血小板体积分布直方图血液分析仪及临床应用图图3-6. 3-6. 血细胞分析的具体流程血细胞分析的具体流程 血液分析仪及临床应用【临床应用】【临床应用】n细胞直方图：细胞直方图：血液分析仪在计数细胞数量的同时，还血液分析仪在计数细胞数量的同时，还提供细胞体积分布图形，横坐标为血细胞体积大小，提供细胞体积分布图形，横坐标为血细胞体积大小，纵坐标为不同体积细胞的相对频率，这些用以表示细纵坐标为不同体积细胞的相对频率，这些用以表示细胞群体分布情况的曲线图形称细胞直方图。胞群体分布情况的曲线图形称细胞直方图。血液分析仪及临床应用 红细胞直方图的红细胞直方图的临床
10、应用临床应用n正常红细胞直方图：正常红细胞直方图：仪器在仪器在35-250fl35-250fl的范围内分析红细胞。红的范围内分析红细胞。红细胞体积分布直方图的显示范围为细胞体积分布直方图的显示范围为25-250fl25-250fl。正常红细胞主要。正常红细胞主要分布在分布在5050150fl150fl范围内，从红细胞直方图上看好似两侧对称正范围内，从红细胞直方图上看好似两侧对称正态分布曲线。态分布曲线。 血液分析仪及临床应用缺铁性贫血的直方图缺铁性贫血的直方图：曲线峰左移，峰底变宽，显示：曲线峰左移，峰底变宽，显示小细胞不均一性。小细胞不均一性。MCVMCV：66.2fl66.2fl，RDWR
11、DW：23.9%23.9% 血液分析仪及临床应用轻型地中海贫血的直方图：轻型地中海贫血的直方图：曲线峰左移，峰底变窄，曲线峰左移，峰底变窄，显示小细胞均一性。显示小细胞均一性。MCV:71.9flMCV:71.9fl，RDW:13.3%RDW:13.3% 血液分析仪及临床应用铁铁粒粒幼幼细细胞胞性性贫贫血血的的直直方方图图：曲曲线线峰峰左左移移，可可呈呈“双双峰峰”形形，峰峰底底明明显显变变宽宽。缺缺铁铁性性贫贫血血经经铁铁剂剂治治疗疗有有效效，在在三三周周左左右右时时也也可可出出现类似的现类似的“双峰双峰”状图形，但峰底更宽。状图形，但峰底更宽。MCV:73.6flMCV:73.6fl，RD
12、W:22.8%RDW:22.8% 血液分析仪及临床应用巨幼红细胞贫血的直方图巨幼红细胞贫血的直方图：治疗前的直方图曲线峰变低、右移，峰：治疗前的直方图曲线峰变低、右移，峰底明显变宽，显示明显的大细胞不均一性，是叶酸或维生素底明显变宽，显示明显的大细胞不均一性，是叶酸或维生素B B1212缺乏缺乏引起巨幼细胞性贫血的重要直方图特征。经叶酸或引起巨幼细胞性贫血的重要直方图特征。经叶酸或B B1212治疗后，正常治疗后，正常红细胞群逐步释放进入外周血，而病理性红细胞并未完全消亡，检红细胞群逐步释放进入外周血，而病理性红细胞并未完全消亡，检测的红细胞直方图可呈测的红细胞直方图可呈“双峰双峰”形，说明治
13、疗有效。形，说明治疗有效。MCVMCV：131.2fl131.2fl，RDWRDW：24.2%24.2% 血液分析仪及临床应用急性失血性贫血的直方图：急性失血性贫血的直方图：直方图的曲线峰变低，其直方图的曲线峰变低，其它特点与正常红细胞直方图一致。它特点与正常红细胞直方图一致。MCVMCV：91.3fl91.3fl，RDWRDW：13.0%13.0% 血液分析仪及临床应用 RDW 的临床应用的临床应用 n用用于于缺缺铁铁性性贫贫血血和和轻轻型型地地中中海海贫贫血血的的鉴鉴别别诊诊断断：由由于于HbHb合合成成障障碍碍，两两者者均均可可表表现现为为小小细细胞胞低低色色素素性性贫贫血血，但前者但前
14、者RDWRDW增高，后者大多数（增高，后者大多数（88%88%）病例）病例RDWRDW正常。正常。n用用于于缺缺铁铁性性贫贫血血的的早早期期诊诊断断和和疗疗效效观观察察：绝绝大大多多数数（96%96%）IDAIDA时时RDWRDW均均增增高高，MCVMCV尚尚处处于于正正常常时时，RDWRDW增增高高是是缺缺铁铁性性贫贫血血的的早早期期诊诊断断的的重重要要指指标标，当当MCVMCV减减低低时时，RDWRDW增增高高更更明明显显。给给予予铁铁剂剂治治疗疗有有效效时时，RDWRDW先先增增高高，随随着着正正常常红红细细胞胞的的增增多多和和小小红红细细胞胞的的减减少少，RDWRDW逐逐渐渐降降至参考
15、范围。至参考范围。n用于贫血的形态学分类用于贫血的形态学分类 血液分析仪及临床应用表表3-2 3-2 贫血的贫血的MCV/RDWMCV/RDW分类法分类法贫血类型贫血类型MCV/RDWMCV/RDW特征特征常见原因或疾病常见原因或疾病小细胞均一性小细胞均一性MCVMCV减少，减少，RDWRDW正常正常轻型珠蛋白生成障碍性贫血、某些轻型珠蛋白生成障碍性贫血、某些继发性贫血等继发性贫血等小细胞不均一性小细胞不均一性MCVMCV减少，减少，RDWRDW增高增高缺铁性贫血、缺铁性贫血、-珠蛋白生成障碍珠蛋白生成障碍性贫血、性贫血、HbHHbH病等病等大细胞均一性大细胞均一性MCVMCV增大，增大，RD
16、WRDW正常正常MDSMDS、部分再障、部分肝病性贫血、部分再障、部分肝病性贫血、某些肾病性贫血等某些肾病性贫血等大细胞不均一性大细胞不均一性MCVMCV、RDWRDW均增高均增高巨幼细胞性贫血、某些肝病性贫血巨幼细胞性贫血、某些肝病性贫血等等血液分析仪及临床应用 血小板细胞直方图的血小板细胞直方图的临床应用临床应用n正常血小板直方图：正常血小板直方图：血细胞分析仪通常在血细胞分析仪通常在2 230fl30fl范围分析血小范围分析血小板，正常血小板主要集中在于板，正常血小板主要集中在于2 220fl20fl范围内，一般在范围内，一般在252530fl30fl之间的某一点与横坐标重合，直方图是一
17、条呈对数正态分布的之间的某一点与横坐标重合，直方图是一条呈对数正态分布的光滑曲线。光滑曲线。 血液分析仪及临床应用大血小板直方图：大血小板直方图：曲线峰右侧右移，在大于曲线峰右侧右移，在大于30fl30fl的某一点与横坐的某一点与横坐标重合，标重合，MPVMPV明显增高。如果血小板数减低，可见于明显增高。如果血小板数减低，可见于ITPITP及体外循及体外循环时；如果血小板数升高，见于脾切除术后。如果血小板数正常，环时；如果血小板数升高，见于脾切除术后。如果血小板数正常，可见于慢性髓性白血病、骨髓纤维化等可见于慢性髓性白血病、骨髓纤维化等 血液分析仪及临床应用小血小板直方图：小血小板直方图：曲线
18、峰右侧左移，在小于曲线峰右侧左移，在小于20fl20fl的某一点与横坐的某一点与横坐标重合，标重合，MPVMPV值明显减低。如果血小板数减低，可见于值明显减低。如果血小板数减低，可见于AIDSAIDS病毒感病毒感染和脾亢等；如果血小板数正常，可见于慢性再障；如果血小板染和脾亢等；如果血小板数正常，可见于慢性再障；如果血小板数升高，可见于反应性血小板增多症。数升高，可见于反应性血小板增多症。 血液分析仪及临床应用聚集的血小板直方图：聚集的血小板直方图：曲线峰变低，如果以曲线峰变低，如果以 20 2020个的血小板聚集为个的血小板聚集为主，则曲线峰变低、主，则曲线峰变低、变平，右侧抬高不明变平，右
19、侧抬高不明显。此时，在白细胞显。此时，在白细胞直方图的直方图的35fl35fl处有一处有一个小峰。见于标本采个小峰。见于标本采集不当或集不当或EDTAEDTA依赖性依赖性血小板聚集等血小板聚集等 血液分析仪及临床应用小小红红细细胞胞干干扰扰的的血血小小板板直直方方图图：在在曲曲线线峰峰的的右右侧侧抬抬起起并并上上扬，不与横坐标重合。可见于扬，不与横坐标重合。可见于IDAIDA或发生溶血的标本或发生溶血的标本。血液分析仪及临床应用白细胞直方图的临床应用白细胞直方图的临床应用 正常白细胞直方图：正常白细胞直方图：血细胞分析仪通常在血细胞分析仪通常在3535450fl450fl的范围内分的范围内分析
20、白细胞。根据正常白细胞在溶血剂作用后体积的大小，在直析白细胞。根据正常白细胞在溶血剂作用后体积的大小，在直方图上从左至右可确认其相应的三个细胞群方图上从左至右可确认其相应的三个细胞群 血液分析仪及临床应用中性粒细胞比例增高或淋巴细胞比例减低中性粒细胞比例增高或淋巴细胞比例减低：粒细胞峰明显变大，：粒细胞峰明显变大，淋巴细胞峰明显变小。在严重的细菌感染时，如果中性粒细胞淋巴细胞峰明显变小。在严重的细菌感染时，如果中性粒细胞发生中毒性改变，粒细胞峰可向左移动或向右延伸发生中毒性改变，粒细胞峰可向左移动或向右延伸血液分析仪及临床应用中性粒细胞比例减低或淋巴细胞比例增高：中性粒细胞比例减低或淋巴细胞比
21、例增高：白细胞直方图白细胞直方图表现为粒细胞峰明显变小，淋巴细胞峰明显变大表现为粒细胞峰明显变小，淋巴细胞峰明显变大 血液分析仪及临床应用单核细胞比例增高：单核细胞比例增高：在单个核细胞区出现一个明显的峰，其在单个核细胞区出现一个明显的峰，其大小与单核细胞比例增高的程度有关。值得注意的是，仪器大小与单核细胞比例增高的程度有关。值得注意的是，仪器显示的显示的“MO”“MO”或或“MID”“MID”增高仅表示可能是单核细胞增高，也增高仅表示可能是单核细胞增高，也可能是嗜酸性粒细胞或幼稚细胞等，因此，必须涂片染色后可能是嗜酸性粒细胞或幼稚细胞等，因此，必须涂片染色后经显微镜确认。经显微镜确认。 血液
22、分析仪及临床应用嗜酸性粒细胞比例增高：嗜酸性粒细胞比例增高：在单个核细胞区出现一个明显的在单个核细胞区出现一个明显的峰，其大小也与嗜酸性粒细胞增高的程度有关。注意事项峰，其大小也与嗜酸性粒细胞增高的程度有关。注意事项与单核细胞比例增高相同与单核细胞比例增高相同 血液分析仪及临床应用急性淋巴细胞白血病急性淋巴细胞白血病：白细胞直方图表现为淋巴细胞峰：白细胞直方图表现为淋巴细胞峰向单个核细胞区扩展变宽，其程度与原始及幼稚淋巴细向单个核细胞区扩展变宽，其程度与原始及幼稚淋巴细胞的比例高低有关胞的比例高低有关 血液分析仪及临床应用急性非淋巴细胞性白血病：急性非淋巴细胞性白血病：白细胞直方图常以单个核细
23、胞白细胞直方图常以单个核细胞峰增高为主，并向淋巴细胞区和粒细胞区扩展。其异常峰峰增高为主，并向淋巴细胞区和粒细胞区扩展。其异常峰的高低及扩展的程度与原始及幼稚细胞的比例高低有关。的高低及扩展的程度与原始及幼稚细胞的比例高低有关。 血液分析仪及临床应用慢慢性性淋淋巴巴细细胞胞白白血血病病：白白细细胞胞直直方方图图与与正正常常淋淋巴巴细细胞比例增高时相似，但淋巴细胞峰底略宽。胞比例增高时相似，但淋巴细胞峰底略宽。血液分析仪及临床应用慢性粒细胞白血病：慢性粒细胞白血病：白细胞直方图表现为多区异常，为形白细胞直方图表现为多区异常，为形状单一而分布广泛的图形，淋巴细胞峰可有可无，随淋巴状单一而分布广泛的
24、图形，淋巴细胞峰可有可无，随淋巴细胞所占的比例大小而异细胞所占的比例大小而异 血液分析仪及临床应用各种干扰因素引起的白细胞直方图变化各种干扰因素引起的白细胞直方图变化n白细胞计数时先加入溶血剂，使红细胞破坏，保留白细胞计数时先加入溶血剂，使红细胞破坏，保留的的“膜包核膜包核”状的白细胞进行计数。状的白细胞进行计数。某些贫血的病理红细胞及新生儿红细胞对溶血剂有某些贫血的病理红细胞及新生儿红细胞对溶血剂有较强的抵抗力，使之不溶解或不完全溶解；较强的抵抗力，使之不溶解或不完全溶解；有核红细胞；有核红细胞；血小板聚集成团，这些均可误计数为白细胞等，此血小板聚集成团，这些均可误计数为白细胞等，此时白细胞
25、直方图也可发生相应的改变。时白细胞直方图也可发生相应的改变。因此，当实验结果出现这些图形时，提示白细胞计数因此，当实验结果出现这些图形时，提示白细胞计数和分群结果均不准确，需要复查。和分群结果均不准确，需要复查。 血液分析仪及临床应用 聚集的血小板干扰聚集的血小板干扰 血液分析仪及临床应用 不完全溶解的红细胞干扰不完全溶解的红细胞干扰 血液分析仪及临床应用 巨大血小板干扰巨大血小板干扰 血液分析仪及临床应用 冷球蛋白干扰冷球蛋白干扰 血液分析仪及临床应用图形和报警提示相同、细胞不同的白细胞图形和报警提示相同、细胞不同的白细胞直方图变化直方图变化 异型淋巴细胞异型淋巴细胞(、型型) )22%22%非典型淋巴细胞非典型淋巴细胞( (核分叶和浆核分叶和浆空泡空泡)13%)13%、中晚幼粒中晚幼粒10%10%血液分析仪及临床应用细胞相同、图形和报警提示不同的白细胞细胞相同、图形和报警提示不同的白细胞直方图变化直方图变化 A B CA.嗜酸性粒细胞比例增高嗜酸性粒细胞比例增高(20%)(20%) B.嗜酸性粒细胞比例增高嗜酸性粒细胞比例增高(24%)(24%) C.嗜酸性粒细胞比例增高嗜酸性粒细胞比例增高(18%)(18%) 血液分析仪及临床应用谢谢大家谢谢大家血液分析仪及临床应用血液分析仪及临床应用
