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1、骨髓细胞学检测骨髓细胞学检测l 什么情况下要做骨髓穿刺什么情况下要做骨髓穿刺? ?l 如何看懂骨髓检查报告单如何看懂骨髓检查报告单? ?l 血血细细胞胞的的发发育育有有哪哪些些一一般般规规律律？l临临床床常常用用化化学学染染色色在在哪哪些些血血液液系统疾病鉴别上具重要意义？系统疾病鉴别上具重要意义？学习学习 目目 的的l了解：血细胞的生成，正常骨髓象特点；l熟悉：常用血细胞细胞化学染色在不同血液系统疾病中的鉴别诊断意义，血细胞的形态特点，骨髓细胞学检测的方法和内容；l掌握：血细胞的发育一般规律，骨髓细胞学检测临床应用。目的与要求目的与要求 教学主要内容教学主要内容l骨髓细胞学的临床应用、检测方
2、骨髓细胞学的临床应用、检测方法和内容法和内容l血细胞的生成、发育规律及形态血细胞的生成、发育规律及形态特点特点l血细胞化学染色血细胞化学染色l临床应用临床应用l适应症适应症l禁忌症禁忌症l 一、骨一、骨 检检 的的 临临 床床 应应 用用l 疾病诊断和辅助诊断疾病诊断和辅助诊断 肯定性诊断肯定性诊断 提示性诊断提示性诊断 符合性诊断符合性诊断 怀疑性诊断怀疑性诊断 形态学描述形态学描述 稀释骨髓象稀释骨髓象l 观察疗效观察疗效 缓解缓解 改善改善 退步退步 复发复发 1 1. . 骨骨 检检 的的 临临 床床 作作 用用l不明原因外周血细胞计数或和分类异常不明原因外周血细胞计数或和分类异常l不
3、明原因的发烧、肝、脾、淋巴结肿大不明原因的发烧、肝、脾、淋巴结肿大l黄疸、骨痛、骨质破坏、蛋白尿、肾功能异黄疸、骨痛、骨质破坏、蛋白尿、肾功能异常、血沉明显增加等常、血沉明显增加等2 2. .骨骨 检检 的的 适适 应应 症（症（1 1）l血血液液病病的的定定期期复复查查和和疗疗效效观观察察（如如化化疗后）疗后）l其它检查其它检查 ： 骨髓活检骨髓活检 细胞免疫学分型细胞免疫学分型 染色体核型检查染色体核型检查 感染病原体检查感染病原体检查 骨髓细胞培养骨髓细胞培养 2 2. . 骨骨 检检 的的 适适 应应 症（症（2 2） l 严严重重出出血血的的疾疾病病（如如血血友友病病病病人人）禁用禁
4、用l 晚期妊娠的孕妇慎用晚期妊娠的孕妇慎用 3 3. . 骨骨 检检 的的 禁禁 忌忌 症症 l 骨髓穿刺步骤骨髓穿刺步骤l 骨髓穿刺注意事项骨髓穿刺注意事项l 骨髓穿刺取材情况判断骨髓穿刺取材情况判断二、二、骨骨 髓髓 穿穿 刺刺 术（了解）术（了解） 定位定位 常规消毒常规消毒 无菌操作无菌操作铺孔巾铺孔巾 局麻局麻 进骨穿针进骨穿针 抽骨髓液抽骨髓液 骨髓涂片骨髓涂片 包扎包扎 骨髓活检骨髓活检1.1.骨骨 髓髓 穿穿 刺刺 术术 步步 骤骤l红髓丰富红髓丰富l浅表易定位浅表易定位 髂骨上棘、胸骨、胫骨髂骨上棘、胸骨、胫骨l避开重要脏器避开重要脏器骨骨 髓髓 穿穿 刺刺 术术 部部 位位
5、 选选 择择 骨髓穿刺术骨髓穿刺术 、活检针结构、活检针结构 抽吸的骨髓液一般抽吸的骨髓液一般0.20.2mlml 取有黄色小粒的骨髓液涂片取有黄色小粒的骨髓液涂片 骨髓骨髓涂片制备要好涂片制备要好、要快、要快 片上片上注明患者姓名注明患者姓名2.2.骨髓穿刺术注意骨髓穿刺术注意事项（事项（1 1） 初诊病人治疗前骨穿初诊病人治疗前骨穿 初诊病人一定要送检血片初诊病人一定要送检血片 某些病人可某些病人可干抽干抽 骨髓申请单填写要规范、正确骨髓申请单填写要规范、正确 2.2.骨髓穿刺术注意事项骨髓穿刺术注意事项(2)(2)l抽吸骨髓液时有特殊的疼痛感抽吸骨髓液时有特殊的疼痛感l抽出的骨髓液中有抽
6、出的骨髓液中有黄色小粒黄色小粒（骨髓小粒）（骨髓小粒）l显微镜下有显微镜下有骨髓特有的细胞骨髓特有的细胞： 幼红、幼粒、巨核细胞、浆细胞等幼红、幼粒、巨核细胞、浆细胞等l骨髓杆骨髓杆/ /分叶、有核细胞数大于外周血分叶、有核细胞数大于外周血3 3. . 骨穿判断：取材的判断骨穿判断：取材的判断-成功成功l完全稀释：与血片完全一样完全稀释：与血片完全一样l部分稀释：介于取材成功与完全稀释之间部分稀释：介于取材成功与完全稀释之间骨骨穿刺取材的判断穿刺取材的判断-失败失败厚薄均匀、镜下细胞分散排列厚薄均匀、镜下细胞分散排列头体尾分明头体尾分明两边留有空隙两边留有空隙尾呈锯齿状，头部要留有约尾呈锯齿状
7、，头部要留有约2 2cmcm的空间的空间染色清楚、没有沉渣染色清楚、没有沉渣骨髓涂片制备、染色佳的特点：骨髓涂片制备、染色佳的特点：l 骨髓检查步骤骨髓检查步骤l 填写报告单填写报告单l 正常骨髓象正常骨髓象三、三、骨髓细胞形态学检查骨髓细胞形态学检查瑞氏染色瑞氏染色 显微镜观察显微镜观察结果计算结果计算 、判断增生程度、判断增生程度 填写报告单填写报告单 登记登记 存档存档1.1.骨骨 髓髓 细细 胞胞 学学 检检 查查 步步 骤骤骨髓有核细胞增生程度骨髓有核细胞增生程度增生程度增生程度成熟红细胞成熟红细胞：有核细胞：有核细胞有核细胞均有核细胞均数数/高倍镜视高倍镜视野野常见病例常见病例增生
8、极度活增生极度活跃跃1：1100各类型白血病各类型白血病增生明显活增生明显活跃跃10：150100各类型白血病、增生性贫各类型白血病、增生性贫血、血、ITP增生活跃增生活跃20：12050正常骨髓象、增生性贫血正常骨髓象、增生性贫血增生减低增生减低50：1510再障、粒缺或粒细胞减少再障、粒缺或粒细胞减少症症增生极度减增生极度减低低200：15再障再障增增 生生 极极 度度 活活 跃跃增增 生生 明明 显显 活活 跃跃增增 生生 活活 跃跃增增 生生 减减 低低增增 生生 极极 度度 减减 低低l有核细胞分类计数：有核细胞分类计数：200200 500500个细胞，按个细胞，按细胞的不同系列和
9、不同发育阶段分别计数，计细胞的不同系列和不同发育阶段分别计数，计算各阶段细胞所占百分比。算各阶段细胞所占百分比。l观察细胞形态：观察细胞形态：分类计数同时观察细胞形态分类计数同时观察细胞形态是否正常，有无异常细胞、寄生虫等。是否正常，有无异常细胞、寄生虫等。油镜检查油镜检查l 各系、各期有核细胞的百分比各系、各期有核细胞的百分比l 粒红比值：所有粒细胞百分比总和粒红比值：所有粒细胞百分比总和/ / 所有有核红细胞百分比总和所有有核红细胞百分比总和 结结 果果 计计 算算 病人情况病人情况 本次骨穿号本次骨穿号 涂片情况涂片情况 各期细胞百分比各期细胞百分比 形态描述形态描述 诊断意见诊断意见
10、检验日期检验日期 检验者签名检验者签名2.2.填写骨髓细胞学检查报告单填写骨髓细胞学检查报告单l 增生程度：增生活跃增生程度：增生活跃l 粒红比值：粒红比值：2 - 42 - 4：1 1l 粒系：粒系： 0.50-0.60 0.50-0.60，以中性中幼粒以下为主，以中性中幼粒以下为主l 红系红系: 0.20, : 0.20, 以中晚幼红细胞为主以中晚幼红细胞为主3. 3. 正正 常常 骨骨 髓髓 象（象（1 1）l淋系：淋系： 0.20 0.20，为成熟淋巴细胞，为成熟淋巴细胞l单系：单系： 0.040.04，为成熟单核细胞，为成熟单核细胞l浆细胞：浆细胞： 0.020.02，为成熟浆细胞，
11、为成熟浆细胞l巨系巨系 : 7-133 : 7-133个个 以颗粒型和产血小板型巨核细胞为主以颗粒型和产血小板型巨核细胞为主 3. 3. 正正 常常 骨骨 髓髓 象（象（2 2）l 血细胞的生成血细胞的生成l 血细胞的发育规律血细胞的发育规律l 各系血细胞的形态特点各系血细胞的形态特点 四、血细胞的生成、发育规律四、血细胞的生成、发育规律及形态特点及形态特点 造血干细胞造血干细胞 祖细胞祖细胞原始细胞原始细胞 幼稚细胞幼稚细胞 成熟细胞成熟细胞1.1.血血 细细 胞胞 的的 生生 成成早幼早幼C C 中幼中幼C C 晚幼晚幼C C 原始原始C C 幼稚幼稚C C 成熟成熟C C 早幼早幼 中幼
12、中幼 晚幼晚幼粒粒C C系列系列 原粒原粒 早幼粒早幼粒 中幼粒中幼粒 晚幼粒晚幼粒 粒粒C C红红C C系列系列 原红原红 早幼红早幼红 中幼红中幼红 晚幼红晚幼红 红红C C 单核单核C C系列系列 原单原单 幼单幼单 单核单核C C巨核巨核C C系列系列 原巨原巨 幼巨幼巨 成熟巨核成熟巨核C C淋巴淋巴C C系列系列 原淋原淋 幼淋幼淋 淋巴淋巴C C 原浆原浆 幼浆幼浆 浆浆C C血血 细细 胞胞 的的 生生 成成 图图血细胞生长发育图血细胞生长发育图 l胞体大小胞体大小 大大 小小l胞浆量胞浆量 少少 多多 染色性染色性 深蓝深蓝 浅、甚至淡红浅、甚至淡红 颗粒颗粒 无无 有有l胞
13、核大小胞核大小 大大 小小 核仁核仁 有有 无无 染色质染色质 细致细致 粗糙、致密粗糙、致密 核形核形 圆形圆形 椭圆形椭圆形 肾形肾形 杆状杆状 分叶分叶2.2.血细胞发育过程中形态演变血细胞发育过程中形态演变的一般规律的一般规律粒粒 细细 胞胞 系系 列列原粒原粒原粒原粒 早幼粒早幼粒早幼粒早幼粒 中幼粒中幼粒中幼粒中幼粒 晚幼粒晚幼粒晚幼粒晚幼粒 杆状核粒杆状核粒杆状核粒杆状核粒 分叶核粒分叶核粒分叶核粒分叶核粒l 粒细胞系列粒细胞系列l 红细胞系列红细胞系列l 单核细胞系列单核细胞系列l 巨核细胞系列巨核细胞系列l 淋巴细胞系列淋巴细胞系列l 浆细胞系列浆细胞系列3.3.血细胞正常形
14、态学特征血细胞正常形态学特征正正常常细细胞胞形形态态观察内容：观察内容：1.1.大小、形态。大小、形态。 3.3.核：位置、大小、形态、染色质。核：位置、大小、形态、染色质。2.2.胞浆：量、着色、包含物。胞浆：量、着色、包含物。 4.4.核仁：大小、多少、清晰度。核仁：大小、多少、清晰度。正正常常细细胞胞形形态态观察内容：观察内容：1.1.大小、形态。大小、形态。 3.3.核：位置、大小、形态、染色质。核：位置、大小、形态、染色质。2.2.胞浆：量、着色、包含物。胞浆：量、着色、包含物。 4.4.核仁：大小、多少、清晰度。核仁：大小、多少、清晰度。红细胞系列红细胞系列l 胞体、胞核圆形胞体、
15、胞核圆形l 胞浆有明显的变化规律胞浆有明显的变化规律l 胞浆中无颗粒胞浆中无颗粒粒细胞系列粒细胞系列l胞体圆形胞体圆形l颗颗粒粒和和胞胞核核有有明明显显的的变变化规律化规律淋巴细胞系列淋巴细胞系列l 胞体、胞核小胞体、胞核小l 胞浆量少胞浆量少浆细胞系列浆细胞系列 l胞核圆形、偏位胞核圆形、偏位l胞浆丰富、深兰色、胞浆丰富、深兰色、 核旁淡染区、泡沫浆核旁淡染区、泡沫浆单核细胞系列单核细胞系列l胞体、胞核较大且不规则胞体、胞核较大且不规则l胞浆较丰富、灰兰色胞浆较丰富、灰兰色l胞核染色质疏松胞核染色质疏松巨核细胞系列巨核细胞系列l胞体、胞核巨大且不规则胞体、胞核巨大且不规则l胞浆量、颗粒极丰富
16、胞浆量、颗粒极丰富 是是以以细细胞胞形形态态学学为为基基础础，根根据据化化学学反反应应的的原原理理，应应用用骨骨髓髓涂涂片片按按一一定定程程序序染染色色，然然后后在在显显微微镜镜下下观观察察细细胞胞化化学学成成分分及及其其变变化化的的一一项项检查方法。检查方法。细胞化学染色的定义细胞化学染色的定义五、血细胞的细胞化学染色五、血细胞的细胞化学染色 辅助辅助疾病的诊断疾病的诊断和和细胞系列细胞系列的判断的判断l不同细胞系列，其所含的化学物质各有不同不同细胞系列，其所含的化学物质各有不同l血细胞在病理情况下，其化学物质成分及含血细胞在病理情况下，其化学物质成分及含 量会发生改变量会发生改变血细胞化学
17、染色的作用血细胞化学染色的作用 辅辅助助鉴鉴别别急急性性白白血血病病细细胞胞类类型型: : 粒粒细细胞胞及及部部分分的的单单核核细细胞胞质质内内的的颗颗粒粒含含有有过过氧氧化化酶酶，此此染染色色用于急性白血病类型的鉴别诊断用于急性白血病类型的鉴别诊断( (急粒和急淋急粒和急淋) ) l 急粒急粒常阳性常阳性l 急单急单阴性、弱阳性阴性、弱阳性l急淋急淋阴性阴性. .过氧化物酶（过氧化物酶（POXPOX）染色）染色l NAPNAP主要存在于成熟阶段的中性粒细胞主要存在于成熟阶段的中性粒细胞 报告形式为阳性率及积分报告形式为阳性率及积分l明显增加：细菌性感染、类白血病反应明显增加：细菌性感染、类白
18、血病反应 l减少：慢粒等减少：慢粒等2.2.中性粒细胞碱性磷酸酶（中性粒细胞碱性磷酸酶（NAPNAP）染色）染色 辅助鉴别急性白血病细胞类型辅助鉴别急性白血病细胞类型l特异性酯酶（特异性酯酶（SESE）：急粒呈阳性）：急粒呈阳性l非特异性酯酶（非特异性酯酶（NSENSE）：）： 急单呈阳性或强阳性，加急单呈阳性或强阳性，加NaFNaF抑制抑制 急粒呈阴性或阳性，加急粒呈阴性或阳性，加NaFNaF不抑制不抑制. . 酯酯 酶酶 染染 色色M5l 骨髓铁分为细胞外铁、内铁骨髓铁分为细胞外铁、内铁l减少：缺铁性贫血减少：缺铁性贫血l增加：铁粒幼红细胞性贫血增加：铁粒幼红细胞性贫血. . 铁铁 染染 色色骨髓外铁染色细胞内铁染色细胞内铁染色
