生物技术实践

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1、最新考纲最新考纲1.微生物的分离和培养微生物的分离和培养2某种微生物数量的测定某种微生物数量的测定3培养基对微生物的选择作用培养基对微生物的选择作用4酶在食品制造和洗涤等方面的应用酶在食品制造和洗涤等方面的应用5制备和应用固定化酶制备和应用固定化酶6从生物材料中提取某些特定的成分从生物材料中提取某些特定的成分7运用运用发酵加工食品的基本方法酵加工食品的基本方法8植物的植物的组织培养培养9蛋白蛋白质的提取和分离的提取和分离1010PCRPCR技技术的基本操作和的基本操作和应用用 复习指要复习指要1.从实验的角度剖析每项技术，把握其原理、材料与器材、操作流程，加强有效地从实验的角度剖析每项技术，把

2、握其原理、材料与器材、操作流程，加强有效地训练，如默写流程图、背诵重要的过程和原理。利用教材中相应的流程图、示意图进行复训练，如默写流程图、背诵重要的过程和原理。利用教材中相应的流程图、示意图进行复习，能简明形象地理解和记忆相应的知识，突破重点和难点。试题中经常会以简述或填图习，能简明形象地理解和记忆相应的知识，突破重点和难点。试题中经常会以简述或填图的形式考查理解、应用原理和过程解决实际问题的能力，所以复习过程中可以以默写或填的形式考查理解、应用原理和过程解决实际问题的能力，所以复习过程中可以以默写或填写流程图、示意图，看图讲述过程的形式训练图文转换能力。写流程图、示意图，看图讲述过程的形式

3、训练图文转换能力。2用用对比的方法区分一些重要概念和方法，如果酒和果醋制作的比比的方法区分一些重要概念和方法，如果酒和果醋制作的比较，水蒸气蒸，水蒸气蒸馏法、法、压榨法、有机溶榨法、有机溶剂萃取法的比萃取法的比较，平板划，平板划线操作与涂布平板操作的比操作与涂布平板操作的比较等。等。3用用联系的系的观点看待不同的技点看待不同的技术，如酵母菌可涉及与培养及固定化酵母，如酵母菌可涉及与培养及固定化酵母细胞等内容。胞等内容。 (2011浙江自浙江自选)杨梅是浙江梅是浙江省的特色水果之一，省的特色水果之一，为对其其进行深行深加工，某厂加工，某厂进行了行了杨梅酒和梅酒和杨梅醋梅醋的研制，基本工的研制，基

4、本工艺流程如右流程如右图。请回答：回答：(1)在制在制备杨梅酒梅酒过程中，程中，为了提高了提高杨梅的出汁率，在梅的出汁率，在压榨前可加入一定榨前可加入一定浓度的度的纤维素素酶酶和和_酶酶。甲罐。甲罐顶上弯管中加水的主要目的是上弯管中加水的主要目的是_。发酵一定酵一定时间后，后，观察到察到发酵罐内液面不再有酵罐内液面不再有_，说明明发酵基本完酵基本完毕。(2)在制在制备杨梅醋梅醋过程中，乙罐内先填充程中，乙罐内先填充经_处理的木材刨花，然后加入含理的木材刨花，然后加入含_菌的培养液，使菌的培养液，使该菌菌_在刨花上，再在刨花上，再让甲罐中甲罐中发酵完酵完毕的的杨梅酒流入梅酒流入乙罐乙罐进行行杨梅

5、醋梅醋发酵，酵，杨梅醋的梅醋的pH可通可通过控制控制杨梅酒的梅酒的_来来调节。(3)若甲罐中的若甲罐中的杨梅酒全部流梅酒全部流经乙罐制成乙罐制成杨梅醋，梅醋，则乙罐中乙罐中CO2的的产生量是生量是_。A甲罐的两倍甲罐的两倍B与甲罐的相等与甲罐的相等C甲罐的一半甲罐的一半 D几乎几乎为零零(4)在在杨梅酒和梅酒和杨梅醋梅醋发酵的整个酵的整个过程中，某物程中，某物质浓度随度随时间变化的示意化的示意图如下，如下，该物物质是是_。解析：解析：(1)纤维素酶和果胶酶具有专一性，能分解细胞壁中的纤维素和果胶，破坏纤维素酶和果胶酶具有专一性，能分解细胞壁中的纤维素和果胶，破坏细胞壁，以提高出汁率；酒精发酵罐

6、顶上弯管中加水是为了防止空气进入；发酵一段时间细胞壁，以提高出汁率；酒精发酵罐顶上弯管中加水是为了防止空气进入；发酵一段时间后，发酵罐内液面不再有气泡产生，说明发酵基本完毕。后，发酵罐内液面不再有气泡产生，说明发酵基本完毕。(2)在制备杨梅醋过程中，醋酸发酵罐中填充的木材刨花要经过灭菌，然后加入含有在制备杨梅醋过程中，醋酸发酵罐中填充的木材刨花要经过灭菌，然后加入含有醋酸杆菌的培养液，使该菌附着在刨花上，通过调节杨梅酒进入乙罐的流速来调节杨梅醋醋酸杆菌的培养液，使该菌附着在刨花上，通过调节杨梅酒进入乙罐的流速来调节杨梅醋的的pH。(3)比较乙醇和醋酸的生成反应式即可得出比较乙醇和醋酸的生成反应

7、式即可得出葡萄糖氧化成乙醇的反应式：葡萄糖氧化成乙醇的反应式：C6H12O62CO22C2H5OH乙醇氧化成醋酸的反应式：乙醇氧化成醋酸的反应式：C2H5OHO2CH3COOHH2O(4)结合杨梅酒和杨梅醋的发酵全过程，分析图示曲线结合杨梅酒和杨梅醋的发酵全过程，分析图示曲线(先上升，后下降先上升，后下降)可知，该物可知，该物质应为酒精。质应为酒精。答案：答案：(1)(1)果胶果胶防止空气防止空气进入入气泡冒出气泡冒出(2)(2)灭菌菌醋酸杆醋酸杆附着附着流速流速(3)(3)D D(4)(4)酒精酒精 近几年的高考新近几年的高考新课标试卷中，命卷中，命题特点有：以特点有：以发酵食品加工酵食品加

8、工为背景考背景考查微生物的分微生物的分离、离、纯化和培养化和培养过程以及在食品加工中所起的作用；程以及在食品加工中所起的作用；结合食品制造和洗合食品制造和洗涤业考考查酶酶的固定的固定化及化及实际应用；果酒、果醋和泡菜的制作方法与流程，植物的用；果酒、果醋和泡菜的制作方法与流程，植物的组织培养、蛋白培养、蛋白质的提取和的提取和分离、分离、PCR技技术的基本操作和的基本操作和应用，理解生物技用，理解生物技术在其他方面的在其他方面的应用。用。题型大多以非型大多以非选择题为主，江主，江苏单科卷，广科卷，广东理理综卷也有卷也有选择题。1微生物培养基的配制、消毒微生物培养基的配制、消毒灭菌、菌、计数分离等

9、技数分离等技术，尤其是培养与分离，尤其是培养与分离2果酒、果醋、腐乳、泡菜制作果酒、果醋、腐乳、泡菜制作过程及原理程及原理3植物有效成分提取的基本原理、装置、方法，以及提取有效成分的最佳条件的探索植物有效成分提取的基本原理、装置、方法，以及提取有效成分的最佳条件的探索4传统发酵食品制作的原理、酵食品制作的原理、过程、程、设计、条件控制、条件控制5DNA、蛋白、蛋白质技技术中相关成分的提取、分离的原理、方法与装置中相关成分的提取、分离的原理、方法与装置6固定化固定化酶酶和固定化和固定化细胞的原理和方法，胞的原理和方法，酶酶活力的活力的测定方法，影响定方法，影响酶酶活性的因素研活性的因素研究及究及

10、酶酶在生在生产生活中的生活中的应用用 1(2011北北京京海海淀淀期期中中)通通过实验测定定土土壤壤中中的的细菌菌数数量量，下下列列与与此此操操作作有有关关的的叙叙述述中，不正确的是中，不正确的是()A用蒸用蒸馏水配制牛肉膏蛋白水配制牛肉膏蛋白胨培养基，培养基，经高温、高高温、高压灭菌后倒平板菌后倒平板B取取104、105的土壤稀的土壤稀释液液0.1 mL，分，分别涂布于各涂布于各组平板上平板上C将培养皿倒置，将培养皿倒置，37 恒温培养恒温培养1224小小时D选择菌落数在菌落数在300个以上的培养皿个以上的培养皿进行行计数数解解析析：检检测测土土壤壤中中细细菌菌总总数数，用用蒸蒸馏馏水水配配

11、制制牛牛肉肉膏膏蛋蛋白白胨胨培培养养基基，经经高高温温、高高压压灭灭菌菌后后倒倒平平板板，取取104、105、106倍倍的的土土壤壤稀稀释释液液和和无无菌菌水水各各0.1 mL，分分别别涂涂布布于于各各组组平平板板上上，将将实实验验组组和和对对照照组组平平板板倒倒置置，37 恒恒温温培培养养2448小小时时，在在确确定定对对照照组组无无菌菌后后，选选择择菌落数在菌落数在30300的平板进行计数。的平板进行计数。答案：答案：D培养基的配制及微生物的分离培养基的配制及微生物的分离1培养基的配制：计算培养基的配制：计算称量称量溶化溶化灭菌灭菌倒平板倒平板2微生物的纯化培养微生物的纯化培养包包括括培培

12、养养基基的的制制备备和和纯纯化化微微生生物物两两个个阶阶段段，纯纯化化微微生生物物时时常常用用的的接接种种方方法法是是平平板板划划线法和稀释涂布平板法。线法和稀释涂布平板法。3微生物的分离和计数微生物的分离和计数(1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数土壤中分解尿素的细菌的分离与计数筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。测定微生物数量的常用方法：统计菌落数目和显微镜直接计数。测定微生物数量的常用方法：统计菌落数目和显微镜直接计数。过程：土壤取样过程：土壤取样样品的稀释样品的稀释微生物的培养与观察。微生物的培养与观察。(2)分解分解纤维素的微生物的分离素的微生物的分离

13、实验原理原理即：可根据是否即：可根据是否产生透明圈来生透明圈来筛选纤维素分解菌。素分解菌。流程：土壤取流程：土壤取样选择培养培养梯度稀梯度稀释涂布平板涂布平板挑挑选菌落。菌落。1消毒和灭菌的区别：消毒和灭菌的区别：条条件件结果果常用方法常用方法应用范用范围消消毒毒较较为温和的为温和的物理或化物理或化学方法学方法仅杀死物仅杀死物体表面或体表面或内部一部内部一部分对人体分对人体有害的微有害的微生物生物煮沸消毒法煮沸消毒法一般物品一般物品巴氏消毒法巴氏消毒法不耐高温的液体不耐高温的液体化学药剂化学药剂消毒法消毒法用酒精擦拭双用酒精擦拭双手，用氯气消手，用氯气消毒水等毒水等条件条件结果果常用方法常用方

14、法应用范用范围灭菌菌强强烈烈的的理化因素理化因素杀死物体杀死物体内外所有内外所有的微生物，的微生物，包包 括括 芽芽 孢孢和孢子和孢子灼烧灭菌灼烧灭菌接种工具接种工具干热灭菌干热灭菌玻璃器皿、金玻璃器皿、金属工具属工具高压蒸高压蒸汽灭菌汽灭菌培养基及容器培养基及容器的灭菌的灭菌2.微生物的纯化培养常用的两种接种方法的比较微生物的纯化培养常用的两种接种方法的比较方法方法平板划线法平板划线法注注意意事事项接种环的灼烧接种环的灼烧a第一次划线前：杀死残留微生物，避免污染菌种和培养基第一次划线前：杀死残留微生物，避免污染菌种和培养基b每每次次划划线线前前：杀杀死死残残留留菌菌种种，保保证证每每次次划划

15、线线菌菌种种来来自自上上次次划划线线末端末端 c划线结束后：杀死残留菌种，避免污染环境和感染操作者划线结束后：杀死残留菌种，避免污染环境和感染操作者 灼灼烧烧接接种种环环之之后后，要要冷冷却却后后才才能能伸伸入入菌菌液液，以以免免温温度度太太高高杀杀死死菌种菌种划线时最后一区域不要与第一区域相连划线时最后一区域不要与第一区域相连划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破方方法法稀释涂布平板法稀释涂布平板法注注意事意事项稀稀释释操操作作时时：每每支支试试管管及及其其中中的的9 mL水水、移移液液管管等等均均需需灭灭菌菌；操操作时，试管口和移液管应在离

16、火焰作时，试管口和移液管应在离火焰12 cm处处涂布平板时：涂布平板时：a涂涂布布器器用用70%酒酒精精消消毒毒，取取出出时时，让让多多余余酒酒精精在在烧烧杯杯中中滴滴尽尽，然然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃 b不不要要将将过过热热的的涂涂布布器器放放在在盛盛放放酒酒精精的的烧烧杯杯中中，以以免免引引燃燃其其中中的的酒酒精精c酒精灯与培养皿距离要合适，移液管管头不要接触任何物体酒精灯与培养皿距离要合适，移液管管头不要接触任何物体方法方法平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法目的目的获获得得单单细细胞胞菌菌落落：在在培培养养基基上上

17、形形成成的的由由单单个个菌菌种种繁繁殖殖而而来来的子细胞群体的子细胞群体 培养培养平平板板冷冷凝凝后后倒倒置置培培养养，使使培培养养基基表表面面的的水水分分更更好好地地挥挥发发，防止皿盖上水珠落入培养基造成污染防止皿盖上水珠落入培养基造成污染2(2011江江苏单科科)下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是()A腐乳制作所需要的适宜温度最高腐乳制作所需要的适宜温度最高B果醋果醋发酵包括无氧酵包括无氧发酵和有氧酵和有氧发酵酵C使用的菌种分使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌D使用的菌种都具有使用的菌种都具有细胞壁、核糖

18、体、胞壁、核糖体、DNA和和RNA解解析析：果果醋醋制制作作所所需需要要的的适适宜宜温温度度最最高高，为为3035 ；果果醋醋制制作作所所用用的的菌菌种种(醋醋酸酸菌菌)为为好好氧氧细细菌菌，只只进进行行有有氧氧呼呼吸吸；腐腐乳乳制制作作所所用用的的菌菌种种主主要要是是毛毛霉霉；酵酵母母菌菌、醋醋酸酸菌菌、毛霉等菌种都具有细胞壁，都既有毛霉等菌种都具有细胞壁，都既有DNA又有又有RNA，细胞中都有核糖体。，细胞中都有核糖体。答案：答案：D1果酒、果醋、腐乳、泡菜制作过程中所用菌种及控制条件的比较果酒、果醋、腐乳、泡菜制作过程中所用菌种及控制条件的比较制作内容制作内容比比较项目目果酒果酒果醋果醋

19、腐乳腐乳泡泡菜菜菌种菌种酵母菌酵母菌醋酸醋酸菌菌毛霉毛霉乳乳酸菌酸菌控控制制条条件件O2的有的有无无无氧无氧有氧有氧无氧无氧无无氧氧最适温最适温度度1825 3035 1518 常常温温2.果酒、果醋、腐乳和泡菜制作过程比较及亚硝酸盐含量的检测果酒、果醋、腐乳和泡菜制作过程比较及亚硝酸盐含量的检测果酒和果酒和果醋制作果醋制作腐乳腐乳的制作的制作制作泡菜并制作泡菜并检测亚硝酸硝酸盐含量含量制制作原理作原理果果酒酒：无氧呼吸无氧呼吸果果醋醋：有氧呼吸有氧呼吸多多 种种微生物微生物发酵酵泡泡菜菜制制作作：乳乳酸酸菌菌无无氧氧呼呼吸吸。亚硝硝酸酸盐检测：在在盐酸酸酸酸化化条条件件下下，亚硝硝酸酸盐与与

20、对氨氨基基苯苯磺磺酸酸发生生重重氮氮化化反反应后后，与与N1萘基基乙二胺乙二胺盐酸酸盐结合形成玫瑰合形成玫瑰红色染料色染料果酒和果醋制作果酒和果醋制作腐乳的制腐乳的制作作制作泡菜并制作泡菜并检测亚硝硝酸酸盐含量含量操操作提示作提示材材料料的的选择与与处理理；防防止止发酵酵液液被被污染染；控控制制好好发酵的条件酵的条件控控制制好好材材料料的的用用量量；防防止止杂菌菌污染染泡泡菜菜坛的的选择；腌腌制制的的条条件件；测定定亚硝硝酸酸盐含含量量的操作的操作3(2011广广东理理综卷卷)以下关于猪血以下关于猪血红蛋白提蛋白提纯的描述，不正确的是的描述，不正确的是()A洗洗涤红细胞胞时，使用生理，使用生理

21、盐水可防止水可防止红细胞破裂胞破裂B猪成熟猪成熟红细胞中缺少胞中缺少细胞器和胞器和细胞核，提胞核，提纯时杂蛋白蛋白较少少C血血红蛋白的蛋白的颜色可用于凝胶色色可用于凝胶色谱法分离法分离过程的程的监测D在凝胶色在凝胶色谱法分离法分离过程中，血程中，血红蛋白比分子量蛋白比分子量较小的小的杂蛋白移蛋白移动慢慢解解析析：猪猪成成熟熟红红细细胞胞中中缺缺少少细细胞胞器器和和细细胞胞核核，提提纯纯时时其其它它蛋蛋白白较较少少，是是提提纯纯血血红红蛋蛋白白的的理理想想材材料料。提提纯纯血血红红蛋蛋白白分分四四步步：红红细细胞胞的的洗洗涤涤、血血红红蛋蛋白白的的释释放放、分分离离血血红红蛋蛋白白溶溶液液、透透

22、析析，其其中中洗洗涤涤红红细细胞胞时时，要要用用生生理理盐盐水水反反复复洗洗涤涤，既既要要将将红红细细胞胞洗洗涤涤干干净净，又又要要不不破破坏坏红红细细胞胞，然然后后再再用用蒸蒸馏馏水水和和甲甲苯苯使使红红细细胞胞破破裂裂，释释放放出出血血红红蛋蛋白白。分分离离提提纯纯血血红红蛋蛋白白时时用用凝凝胶胶色色谱谱法法，是是根根据据相相对对分分子子质质量量的的大大小小来来分分离离蛋蛋白白质质，相相对对分分子子质质量量大大的的蛋蛋白白质质移移动动速速度度较较快快；血血红红蛋蛋白白的的颜颜色色可可用用于于观观察察红红色色区区带带的的移移动动情情况况，并并据据此此判判断断分分离离效效果果。故故D不正确。不

23、正确。答案：答案：D五种生物成分的提取五种生物成分的提取提提取取物物质提取提取方法方法提取原理提取原理步步骤DNA盐析析法法DNA在在不不同同浓度度的的NaCl溶溶液液中中溶溶解解度度不不同同DNA不不溶溶于于酒酒精精，但但某某些些蛋蛋白白质则溶溶于于酒精酒精将将实验材材料料溶溶解解在在2mol/L的的NaCl溶溶液液中中，过滤加水稀加水稀释至至0.14mol/L的的NaCl溶溶液液使使DNA析析出出并并过过滤滤，再再用用2mol/L的的NaCl溶液溶解溶液溶解DNA加加入入与与滤滤液液体体积积相相等等的的、冷冷却却的的体体积积分分数数为为95%的酒精溶液的酒精溶液提取提取物物质提取提取方法方

24、法提取原理提取原理步步骤血血红蛋白蛋白凝胶色凝胶色谱法法根根据据相相对分分子子质量量的的大大小小样品品处理理粗粗分分离离纯化化纯度度鉴定定电泳法泳法根根据据各各种种分分子子带电性性质的的差差异异及及分分子子本本身身的的大大小小、形形状的不同状的不同玫瑰玫瑰精油精油水蒸气水蒸气蒸蒸馏法法利利用用水水蒸蒸气气将将挥发性性较强强的植物芳香油携的植物芳香油携带出来出来水水蒸蒸气气蒸蒸馏分分离离油油层(加加NaCl)除除 水水 过 滤 (加加 无无 水水Na2SO4)提提取取物物质提提取取方方法法提取原理提取原理步步骤橘橘皮皮精精油油压榨法榨法通通过机机械械加加压，压榨榨出果皮中的芳香油出果皮中的芳香油

25、石石灰灰水水浸浸泡泡、漂漂洗洗压榨、榨、过滤、静置、静置再次再次过滤胡胡萝卜卜素素萃萃取法取法使使提提取取物物溶溶解解在在有有机机溶溶剂中，蒸中，蒸发后得到提取物后得到提取物粉粉碎碎、干干燥燥萃取、萃取、过滤浓缩4(2011江江苏卷卷)下列有关下列有关酶酶的制的制备和和应用的叙述，正确的是用的叙述，正确的是()A酶酶解法和吸水解法和吸水涨破法常用于制破法常用于制备微生物的胞内微生物的胞内酶酶B透析、透析、电泳和酸解等方法常用于泳和酸解等方法常用于酶酶的分离与的分离与纯化化C棉棉织物不能使用添加物不能使用添加纤维素素酶酶的洗衣粉的洗衣粉进行洗行洗涤D多多酶酶片中的胃蛋白片中的胃蛋白酶酶位于片位于

26、片剂的核心的核心层解解析析：酶酶解解法法可可利利用用酶酶的的专专一一性性去去除除微微生生物物的的细细胞胞壁壁，再再通通过过吸吸水水涨涨破破法法使使细细胞胞内内的的物物质质释释放放出出来来，然然后后提提取取其其中中的的胞胞内内酶酶，A项项正正确确；透透析析和和电电泳泳可可用用于于酶酶的的分分离离和和纯纯化化，但但酸酸解解会会导导致致酶酶结结构构的的破破坏坏，B项项错错误误；棉棉织织物物的的主主要要成成分分是是纤纤维维素素，用用添添加加了了纤纤维维素素酶酶的的洗洗衣衣粉粉进进行行洗洗涤涤会会使使棉棉织织物物蓬蓬松松，有有利利于于污污物物的的洗洗涤涤，纤纤维维素素酶酶还还能能去去除除掉掉棉棉织织物物

27、表表面面的的浮浮毛毛，平平整整棉棉织织物物表表面面，使使洗洗涤涤后后的的棉棉织织物物柔柔软软、蓬蓬松松，花花纹纹清清晰晰，色色泽泽更更加加鲜鲜艳艳，穿穿着着更更加加舒舒适适，C项项错错误误；多多酶酶片片中中的的胃胃蛋蛋白白酶酶应应位位于于片片剂剂核核心心层层的的外外层层，而而片片剂剂的的核核心心层是在小肠中发挥作用的胰蛋白酶等消化酶，层是在小肠中发挥作用的胰蛋白酶等消化酶，D项错误。项错误。答案：答案：A固定化酶和固定化细胞的比较固定化酶和固定化细胞的比较项目目固定化固定化酶酶固定化固定化细胞胞常常用方法用方法化学化学结合法、物理吸附法合法、物理吸附法包埋法包埋法优点点可可反反复复使使用用；有

28、有利利于于工工艺的的连续化、管道化，同化、管道化，同时降低了生降低了生产成本成本可可以以连续发酵酵，节约成成本本；保保持持酶酶在在细胞胞内内的的原原始始状状况况，增增加加了了酶酶的的稳定定性性；操作容易操作容易项目目固定化固定化酶酶固定化固定化细胞胞不不足足酶酶在在固固定定化化时活活力力有有所所损失；失；不适用于多不适用于多酶酶反反应细胞胞膜膜、细胞胞壁壁会会阻阻碍碍底底物的渗透和物的渗透和扩散，降低反散，降低反应效率效率 (2011新新课标全全国国卷卷)有有些些细菌菌可可分分解解原原油油，从从而而消消除除由由原原油油泄泄漏漏造造成成的的土土壤壤污染。某同学欲从受原油染。某同学欲从受原油污染的

29、土壤中染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答出能高效降解原油的菌株。回答问题：(1)在在筛选过程程中中，应将将土土壤壤样品品稀稀释液液接接种种于于以以_为唯唯一一碳碳源源的的固固体体培培养养基基上。从功能上上。从功能上讲，该培养基属于培养基属于_培养基。培养基。(2)纯 化化 菌菌 种种 时 ， 为 了了 得得 到到 单 菌菌 落落 ， 常常 采采 用用 的的 接接 种种 方方 法法 有有 两两 种种 ， 即即_和和_。(3)为了了筛选出出高高效效菌菌株株，可可比比较单菌菌落落周周围分分解解圈圈的的大大小小，分分解解圈圈大大说明明该菌菌株株的的降解能力降解能力_。(4)通通常常情情况况下下

30、，在在微微生生物物培培养养过程程中中，实验室室常常用用的的灭菌菌方方法法有有灼灼烧灭菌菌、_和和_。无无菌菌技技术要要求求实验操操作作应在在酒酒精精灯灯_附附近近进行行，以避免周以避免周围环境中微生物的境中微生物的污染。染。解解析析：(1)可可以以将将所所需需要要的的微微生生物物从从混混杂杂的的微微生生物物群群中中分分离离出出来来的的培培养养基基为为选选择择培培养养基基。欲欲筛筛选选出出能能降降解解原原油油的的菌菌株株，则则培培养养基基中中应应只只含含有有原原油油而而无无其其他他碳碳源源，这这样样不不能能降降解解原原油油的的细细菌菌在在此此培培养养基基上上不不能能生生存存，能能降降解解原原油油

31、的的细细菌菌才才能能在在只只含含原原油油这这一一碳碳源源的的培培养养基基上上生生存存。(2)分分离离纯纯化化菌菌种种时时，接接种种的的方方法法有有平平板板划划线线法法和和稀稀释释涂涂布布平平板板法法，其其目目的的都都是是使使聚聚集集在在一一起起的的微微生生物物分分散散成成单单个个细细胞胞，从从而而能能在在培培养养基基表表面面形形成成单单菌菌落落，以以便便于于纯纯化化菌菌种。种。(3)降解原油能力越强的菌株，在菌落周围形成的分解圈越大。降解原油能力越强的菌株，在菌落周围形成的分解圈越大。(4)实实验验室室常常用用的的灭灭菌菌方方法法有有灼灼烧烧灭灭菌菌(如如接接种种环环)、干干热热灭灭菌菌(如如

32、培培养养皿皿)和和高高压压蒸蒸汽汽灭灭菌菌(如如培培养养基基)等等。无无菌菌技技术术要要求求整整个个实实验验操操作作都都要要在在酒酒精精灯灯火火焰焰附附近近进进行行，以以避避免免周周围围微生物的污染。微生物的污染。答答案案：(1)原原油油选选择择(2)平平板板划划线线法法稀稀释释涂涂布布平平板板法法(3)强强(4)干干热热灭灭菌菌高压蒸汽灭菌火焰高压蒸汽灭菌火焰1通通过选择培培养养基基可可以以从从混混杂的的微微生生物物群群体体中中分分离离出出所所需需的的微微生生物物。在在缺缺乏乏氮氮源源的的培培养养基基上上大大部部分分微微生生物物无无法法生生长；在在培培养养基基中中加加入入青青霉霉素素可可以以

33、抑抑制制细菌菌和和放放线菌菌；在在培培养养基基中中加加入入10%的的苯苯酚酚可可以以抑抑制制细菌菌和和霉霉菌菌。利利用用上上述述方方法法不不能能从从混混杂的的微微生生物物群群体体中中分分离离出出()A大大肠杆菌杆菌B霉菌霉菌C放放线菌菌 D固氮固氮细菌菌解解析析：缺缺氮氮培培养养基基可可选选择择固固氮氮细细菌菌；青青霉霉素素不不抑抑制制霉霉菌菌的的生生长长，而而10%的的苯苯酚酚不不抑制放线菌的生长。大肠杆菌既不能固氮，也不能抵制青霉素和苯酚，所以不能被分离出。抑制放线菌的生长。大肠杆菌既不能固氮，也不能抵制青霉素和苯酚，所以不能被分离出。答案：答案：A (2011南南通通三三模模)下下列列关

34、关于于DNA和和血血红蛋蛋白白的的提提取取与与分分离离实验的的叙叙述述，不不正正确确的的是是()A提取提取动物物细胞中的胞中的DNA和蛋白和蛋白质都可以采用蒸都可以采用蒸馏水水涨破破细胞的方法胞的方法B采用不同采用不同浓度的度的NaCl溶液反复溶解与析出溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除蛋白的方法可去除蛋白质等等杂质C蛋白蛋白质纯化化过程中采用透析法可去除溶液中的小分子程中采用透析法可去除溶液中的小分子杂质D血血红蛋白只能采用凝胶色蛋白只能采用凝胶色谱法法纯化，化，DNA则可采用可采用电泳、泳、盐析等方法析等方法纯化化 解解析析：提提取取动动物物细细胞胞中中的的DNA和和蛋蛋白白质质，都都可

35、可以以将将红红细细胞胞放放入入到到蒸蒸馏馏水水中中，吸吸水水涨涨破破，释释放放出出DNA、蛋蛋白白质质。血血红红蛋蛋白白的的纯纯化化，除除了了采采用用凝凝胶胶色色谱谱法法纯纯化化外外，还还可可以以采采用用电泳法、透析法进行纯化。电泳法、透析法进行纯化。答案：答案：D生物体内生物体内DNA复制与复制与PCR反应的区别反应的区别项目目体内复制体内复制PCR反应反应解旋解旋在在解解旋旋酶酶作作用用下下，细细胞胞提提供供能量，部分解开能量，部分解开加加热热至至90 ，双双链链全全部部解解开，不需解旋酶开，不需解旋酶引物引物一小段一小段RNA可可以以是是RNA或或单单链链DNA分子片段分子片段合成合成子

36、子链在在引引物物基基础础上上，一一条条链链连连续续合成，另一条链不连续合成合成，另一条链不连续合成分分别别从从两两条条链链的的引引物物端端开开始始，都都是是连连续续合合成成，控控制制温温度度72 项目目体内复制体内复制PCR反应反应特点特点边解旋边复制，半保留复制边解旋边复制，半保留复制体外迅速扩增体外迅速扩增Taq DNA聚合聚合酶酶不需要不需要需要需要循循环次数次数受生物体自身控制受生物体自身控制30多次多次相同点相同点生生物物体体内内的的DNA复复制制和和PCR体体外外DNA扩扩增增都都需需要要模模板板、四种脱氧核苷酸，且都需要在一定的缓冲溶液中进行四种脱氧核苷酸，且都需要在一定的缓冲溶

37、液中进行2(2011苏州州调研研)下下列列是是有有关关血血红蛋蛋白白提提取取和和分分离离的的相相关关操操作作，其其中中正正确确的的是是()A透析可去除透析可去除样品中分子量品中分子量较小的小的杂质B用蒸用蒸馏水重复洗水重复洗涤红细胞胞C血血红蛋白蛋白释放后放后应低速短低速短时间离心离心D洗脱液接近色洗脱液接近色谱柱底端柱底端时开始收集流出液开始收集流出液 解解析析：透透析析袋袋可可允允许许小小分分子子自自由由进进出出，而而大大分分子子则则保保留留在在袋袋内内，因因此此通通过过透透析析法法可可以以去去除除样样品品中中相相对对分分子子质质量量较较小小的的杂杂质质；应应用用生生理理盐盐水水而而不不能

38、能用用蒸蒸馏馏水水重重复复洗洗涤涤红红细细胞胞，蒸蒸馏馏水水的的作作用用是是涨涨破破红红细细胞胞使使血血红红蛋蛋白白释释放放，血血红红蛋蛋白白释释放放后后应应高高速速长长时时间间离离心心；红红色色的的血红蛋白血红蛋白(红色区带红色区带)接近色谱柱底端时开始收集流出液。接近色谱柱底端时开始收集流出液。答案：答案：A (2010南京二模南京二模)下列有关果酒、果醋和腐乳制作的叙述，正确的是下列有关果酒、果醋和腐乳制作的叙述，正确的是()A参与果酒参与果酒发酵和果醋酵和果醋发酵的微生物都含有酵的微生物都含有线粒体粒体B果酒制成后只需将装置果酒制成后只需将装置转移至温度移至温度较高的高的环境中即可制作

39、果醋境中即可制作果醋C在腐乳制作在腐乳制作过程中必程中必须有能生有能生产蛋白蛋白酶酶的微生物参与的微生物参与D在腐乳装瓶在腐乳装瓶时自下而上随自下而上随层数的增加逐数的增加逐渐减少减少盐量量解解析析：酵酵母母菌菌是是真真核核生生物物，含含有有线线粒粒体体；醋醋酸酸杆杆菌菌是是原原核核生生物物，无无线线粒粒体体；果果酒酒制制作作要要求求果果酒酒发发酵酵过过程程中中温温度度为为1825 左左右右，而而醋醋酸酸发发酵酵的的温温度度为为3035 ，且且醋醋酸酸菌菌是是需需氧氧型型，在在果果醋醋发发酵酵过过程程中中，还还需需充充足足的的氧氧气气；在在腐腐乳乳制制作作过过程程中中必必须须有有能能产产生生蛋

40、蛋白白质质酶酶的的微微生生物物参参与与，因因为为豆豆腐腐的的主主要要成成分分为为蛋蛋白白质质；为为防防止止杂杂菌菌污污染染，在在腐腐乳乳装装瓶瓶时时自自下下而而上随层数的增加应增加盐量。上随层数的增加应增加盐量。答案：答案：C3果酒和果醋制作果酒和果醋制作过程中，程中，发酵条件的控制至关重要，相关措施正确的是酵条件的控制至关重要，相关措施正确的是()A葡萄汁要装葡萄汁要装满发酵瓶，造成无氧酵瓶，造成无氧环境，有利于境，有利于发酵酵B在葡萄酒在葡萄酒发酵酵过程中，每隔程中，每隔12 h左右打开瓶盖一次，放出左右打开瓶盖一次，放出CO2C果酒果酒发酵酵过程中温度控制在程中温度控制在30 ，果醋，果

41、醋发酵酵过程中温度控制在程中温度控制在20 D在果醋在果醋发酵酵过程中，适程中，适时通通过充气口充气，有利于醋酸菌的代充气口充气，有利于醋酸菌的代谢解解析析：酵酵母母菌菌异异化化作作用用类类型型是是兼兼性性厌厌氧氧型型，果果酒酒制制作作过过程程中中要要充充气气后后密密封封。有有氧氧时时，酵酵母母菌菌大大量量繁繁殖殖，无无氧氧时时发发酵酵产产生生酒酒精精，发发酵酵旺旺盛盛期期CO2量量大大，须须及及时时排排气气，防防止止瓶瓶子子破破裂裂，但但不不能能打打开开瓶瓶盖盖；果果酒酒发发酵酵过过程程中中温温度度为为1825 左左右右，而而醋醋酸酸发发酵酵温温度度为为3035 ；醋酸菌是需氧型，在果醋发酵

42、过程中，适时通过充气口充气，有利于醋酸菌的代谢。；醋酸菌是需氧型，在果醋发酵过程中，适时通过充气口充气，有利于醋酸菌的代谢。答案：答案：D1(2011北京西城一模北京西城一模)下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是()A利用稀利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能涂布平板法只能分离微生物不能对微生物微生物进行行计数数B接种接种时连续划划线的目的是将聚集的菌种逐步稀的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得得单菌落菌落C以尿素以尿素为唯一氮源且含酚唯一氮源且含酚红的培养基可的培养基可选择和和鉴别尿素分解菌尿素分解菌D用大白菜腌制泡菜的用大白菜腌制泡菜的过程中程中亚硝

43、酸硝酸盐含量含量变化是先增加后减少化是先增加后减少解解析析：接接种种划划线线可可以以将将菌菌体体分分散散，最最后后得得到到单单个个菌菌体体细细胞胞，经经过过培培养养可可以以得得到到单单个个菌菌落落；用用稀稀释释涂涂布布平平板板法法可可以以分分离离微微生生物物也也可可以以对对微微生生物物进进行行计计数数；在在泡泡菜菜的的腌腌制制过过程程中中，开开始始亚亚硝硝酸酸盐盐含含量量增增加加，10天天后后含含量量开开始始下下降降；以以尿尿素素为为唯唯一一氮氮源源且且含含酚酚红红的的培培养养基基可选择和鉴别尿素分解菌。可选择和鉴别尿素分解菌。答案：答案：A2目目前前，酶酶已已经经大大规规模模地地应应用用于于

44、各各个个领领域域，下下列列属属于于酶酶应用中面临的实际问题的是应用中面临的实际问题的是()A酶酶对对有有机机溶溶剂剂不不敏敏感感，但但对对高高温温、强强酸酸、强强碱碱非非常常敏敏感感B加加酶酶洗洗衣衣粉粉因因为为额额外外添添加加了了酶酶制制剂剂，比比普普通通洗洗衣衣粉粉更更易污染环境易污染环境C固固定定化化酶酶可可以以反反复复利利用用，但但在在固固定定时时可可能能会会造造成成酶酶的的损伤而影响活性损伤而影响活性D酶酶的的催催化化功功能能很很强强，但但需需给给以以适适当当的的营营养养物物质质才才能能较较长时间维持其作用长时间维持其作用解解析析：酶酶对对有有机机溶溶剂剂、强强酸酸、强强碱碱、高高温

45、温等等条条件件都都很很敏敏感感，容容易易失失活活；加加酶酶洗洗衣衣粉粉中中添添加加了了多多种种酶酶制制剂剂，如如碱碱性性蛋蛋白白酶酶制制剂剂和和碱碱性性脂脂肪肪酶酶制制剂剂等等，这这些些酶酶制制剂剂不不仅仅可可以以有有效效地地清清除除衣衣物物上上的的污污渍渍，并并且且这这些些酶酶制制剂剂及及其其分分解解产产物物能能够够被被微微生生物物分分解解，不不会会污污染染环环境境；酶酶在在固固定定的的时时候候会会由由于于损损伤伤而而影影响响酶酶的的活活性性；酶酶是是催催化化剂剂，本本身身并并不不会会在在化化学学反反应应前前后后发发生生改改变变，也也不不会会消消耗耗能能量量；需需给给以以适适当当的的营营养养

46、物物质质才才能能较较长长时时间间维维持持，其其作作用用的的是是固固定定化化细胞。细胞。答案：答案：C3(2011江江苏南南通通一一模模)下下列列有有关关“血血红蛋蛋白白提提取取和和分分离离”的的相相关关叙叙述述中中，正正确确的的是是()A用蒸用蒸馏水水进行行红细胞的洗胞的洗涤，其目的是去除，其目的是去除细胞表面胞表面杂蛋白蛋白B将血将血红蛋白溶液蛋白溶液进行透析，其目的是去除相行透析，其目的是去除相对分子分子质量量较大的大的杂质C血血红蛋白蛋白释放放时加入有机溶加入有机溶剂，其目的是使血，其目的是使血红蛋白溶于有机溶蛋白溶于有机溶剂D整个整个过程不断用磷酸程不断用磷酸缓冲液冲液处理，是理，是为

47、了了维持血持血红蛋白的蛋白的结构构解解析析：红红细细胞胞的的洗洗涤涤用用的的是是生生理理盐盐水水，其其目目的的是是去去除除血血浆浆蛋蛋白白等等杂杂质质，有有利利于于后后续续步步骤骤的的分分离离纯纯化化，而而不不是是去去除除细细胞胞表表面面杂杂蛋蛋白白；而而本本实实验验中中蒸蒸馏馏水水的的作作用用是是涨涨破破红红细细胞胞使使血血红红蛋蛋白白释释放放。将将血血红红蛋蛋白白溶溶液液进进行行透透析析，其其目目的的是是去去除除相相对对分分子子质质量量较较小小的的杂杂质质。血血红红蛋蛋白白释释放放时时加加入入有有机机溶溶剂剂，其其目目的的是是溶溶解解细细胞胞膜膜。整整个个过过程程不不断断用用磷磷酸酸缓缓冲

48、冲液液处处理理，是是为了维持血红蛋白的结构。为了维持血红蛋白的结构。答案：答案：D4(2011北京石景山一模北京石景山一模)下列有关生物技下列有关生物技术的的说法，正确的是法，正确的是()ADNA粗提取粗提取时，用体，用体积分数分数为95%的冷却酒精的冷却酒精进一步一步纯化化DNAB制作果醋制作果醋时应避免通入空气以保避免通入空气以保证有关菌种正常代有关菌种正常代谢C制作果酒制作果酒时应反复冲洗葡萄以避免反复冲洗葡萄以避免杂菌的影响菌的影响D测定土壤中能分解尿素的定土壤中能分解尿素的细菌数目，菌数目，应采用平板划采用平板划线法法解解析析：DNA粗粗提提取取用用不不同同浓浓度度的的NaCl溶溶液

49、液，精精提提取取DNA用用冷冷却却的的酒酒精精；果果醋醋制制作作时时用用的的醋醋酸酸菌菌是是好好氧氧菌菌，制制作作果果酒酒时时需需要要酵酵母母菌菌，而而酵酵母母菌菌多多数数在在葡葡萄萄表表面面，反反复复冲冲洗洗会会减减少少含含量量影影响响发发酵酵；测测定定土土壤壤中中能能分分解解尿尿素素的的细细菌菌数数目目是是把把土土样样制制成成菌菌悬悬液液，直直接接涂涂布布在在以尿素为唯一氮源的选择培养基上，直接分离得到菌落。以尿素为唯一氮源的选择培养基上，直接分离得到菌落。答案：答案：A5下列关于生物技下列关于生物技术实践的叙述中，践的叙述中，错误的是的是()A加加酶酶洗衣粉中添加的洗衣粉中添加的酶酶包括

50、包括纤维素素酶酶、脂肪、脂肪酶酶、淀粉、淀粉酶酶和蛋白和蛋白酶酶等等B与与斐斐林林试剂检测相相比比，用用尿尿糖糖试纸检测尿尿液液中中的的葡葡萄萄糖糖，特特异异性性更更强强、灵灵敏敏度度更高更高C利用利用PCR技技术扩增目的基因增目的基因时，引物，引物和引物和引物的碱基序列的碱基序列应互互补D腐乳制作腐乳制作过程中，添加料酒、香辛料和程中，添加料酒、香辛料和盐，均可以抑制，均可以抑制杂菌的生菌的生长解析：解析：PCR技术中的引物技术中的引物和引物和引物的碱基序列不互补。的碱基序列不互补。答案：答案：C6对“DNA的粗提取和的粗提取和鉴定定”实验的叙述，正确的是的叙述，正确的是()A利用利用DNA

51、能溶于酒精溶液，而蛋白能溶于酒精溶液，而蛋白质不溶于酒精溶液，可将不溶于酒精溶液，可将DNA与蛋白与蛋白质分离分离B利用高温能使蛋白利用高温能使蛋白质变性，却性，却对DNA没有影响的特性，可将没有影响的特性，可将DNA与蛋白与蛋白质分离分离C在在溶溶有有DNA的的2 mol/L氯化化钠溶溶液液中中缓缓加加入入蒸蒸馏水水，轻轻搅拌拌后后过滤，取取滤液液进行以后的行以后的实验D在在DNA滤液中加入嫩肉粉，通液中加入嫩肉粉，通过木瓜蛋白木瓜蛋白酶酶的作用，可将的作用，可将DNA与蛋白与蛋白质分离分离解解析析：利利用用DNA不不溶溶于于酒酒精精溶溶液液，蛋蛋白白质质溶溶于于酒酒精精溶溶液液的的特特点点

52、，可可将将DNA与与蛋蛋白白质质分分离离；利利用用高高温温能能使使蛋蛋白白质质、DNA变变性性，蛋蛋白白质质在在6080 可可变变性性，而而DNA在在80 以以上上才才变变性性，所所以以高高温温对对DNA有有影影响响；在在溶溶有有DNA的的2mol/L氯氯化化钠钠溶溶液液中中缓缓缓缓加加入入蒸蒸馏馏水水，轻轻轻轻搅搅拌拌后后过过滤滤，得得到到DNA黏黏稠稠物物，用用DNA黏黏稠稠物物进进行行以以后后的的实实验验；在在DNA滤滤液液中中加加入入嫩嫩肉粉，通过木瓜蛋白酶的专一性作用，可将肉粉，通过木瓜蛋白酶的专一性作用，可将DNA与蛋白质分离。与蛋白质分离。答案：答案：D7(2011海南卷海南卷)

53、【生物生物选修修1：生物技：生物技术实践践】许多植物含有天然香料，如薄荷叶中含有薄荷油。现用薄荷叶提取薄荷油。许多植物含有天然香料，如薄荷叶中含有薄荷油。现用薄荷叶提取薄荷油。回答回答问题：(1)薄薄荷荷油油是是挥发性性物物质。提提取取薄薄荷荷油油时应选用用_(鲜、干干)薄薄荷荷叶叶作作原原料料，其其原因是原因是_。(2)用用 萃萃 取取 法法 提提 取取 薄薄 荷荷 油油 时 ， 采采 用用 的的 溶溶 剂 是是 _， 原原 理理 是是_。(3)用用水水蒸蒸气气蒸蒸馏法法提提取取薄薄荷荷油油时，在在油油水水混混合合物物中中加加入入氯化化钠的的作作用用是是_。常常用用于于分分离离油油层和和水水

54、层的的器器皿皿是是_。分分离离出出的的油油层中中加加入入无无水水硫硫酸酸钠的的作作用用是是_，除去固体硫酸，除去固体硫酸钠的常用方法是的常用方法是_。解解析析：(1)薄薄荷荷油油挥挥发发性性强强，薄薄荷荷叶叶在在干干燥燥过过程程中中，薄薄荷荷油油因因挥挥发发含含量量降降低低。(2)因因薄薄荷荷油油易易溶溶于于石石油油醚醚、酒酒精精等等有有机机溶溶剂剂，故故用用萃萃取取法法提提取取薄薄荷荷油油时时，采采用用的的溶溶剂剂为为有有机机溶溶剂剂。(3)向向通通过过水水蒸蒸气气蒸蒸馏馏得得到到的的油油水水混混合合物物中中加加入入NaCl后后，增增加加水水的的密密度度，就就会会出出现现油油水水分分层层现现象象。常常用用分分液液漏漏斗斗将将水水、油油分分离离。向向分分离离出出的的油油层层中中加加无无水水Na2SO4的的作作用用是是除除去少量的水，用过滤的方法除去薄荷油中的去少量的水，用过滤的方法除去薄荷油中的Na2SO4。答答案案：(1)鲜鲜鲜鲜叶叶比比干干叶叶的的薄薄荷荷油油含含量量高高(2)有有机机溶溶剂剂薄薄荷荷油油溶溶于于有有机机溶溶剂剂，而而不溶于水不溶于水(3)增加水层的密度，有利于油层和水层的分离分液漏斗除去少量的水过滤增加水层的密度，有利于油层和水层的分离分液漏斗除去少量的水过滤