病原生物与免疫学实验:免疫实验二 沉淀反应与溶血试验

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1、 医学免疫学实验医学免疫学实验 实验二实验二(一)沉淀反(一)沉淀反应 1、单向向琼脂脂扩散散试验(示教)(示教) 2、双向、双向琼脂脂扩散散试验 3、对流免疫流免疫电泳泳试验(二)(二)补体参与的免疫反体参与的免疫反应 1、溶血反、溶血反应 2、补体体结合合试验(原理)(原理)一定条件一定条件Ag、Ab比例合适比例合适(一)(一) 沉淀反应沉淀反应可溶性可溶性Ag + Ab 沉淀物沉淀物沉淀反应可在溶液中进行,也可在琼脂等沉淀反应可在溶液中进行,也可在琼脂等凝胶中进行凝胶中进行1、单向琼脂扩散试验、单向琼脂扩散试验 (定量)(定量) 2 2、双向琼脂扩散试验、双向琼脂扩散试验 (定性或半定量

2、)(定性或半定量) AgAbAb ?AgAb ?AgAb ?Ag:标本中无:标本中无Ag:标本中有:标本中有Ag(相同抗原(相同抗原?)(在(在Ag、Ab比例合适处形成沉淀线)比例合适处形成沉淀线)标本标本阳性对照阳性对照Ab ?AgAb ?AgAb ?Ag:标本中无:标本中无Ag:标本中有:标本中有Ag(相同抗原)(相同抗原)标本标本阳性对照阳性对照2 2、双向琼脂扩散试验(定性)、双向琼脂扩散试验(定性) (请按照实验指导讲义方法进行操作)AbAgAg?Ab ?Ag1. Make a agar plate (without Ab or Ag)2. Punch wells3.Add samp

3、les: Anti-AFP positive control (AFP) Test sample (AFP?)AbAg ?Ab ?AgAb ?Ag:no Ag(AFP) in sample serum :same Ag(AFP) in sample serumResult (1):4. incubation and observe results:no Ag(AFP) in sample serum :same Ag(AFP) in sample serumAbAgAgAgAg?AbResult (2):sample serum (AFP?)AFP, (positive control)Ant

4、i-AFPAbAgAg?sample serum (AFP?)Anti-AFPResult (3):Ab ?AgAFP, (positive control)明天下午看结果, 3 3、对流免疫电泳、对流免疫电泳 原理图:原理图:AbAgpH 8.6电泳力:电泳力:电渗力:电渗力:合力:合力:运动方向:运动方向:14 对流免疫电泳检测方法对流免疫电泳检测方法:Ab 阳性对照(阳性对照(Ag)待测标本(?待测标本(?Ag)(有沉淀线:有(有沉淀线:有Ag; 无沉淀线:无无沉淀线:无Ag)? 对流免疫电泳检测方法对流免疫电泳检测方法(加样图):(加样图):Ab(抗(抗AFP) 阳性对照(阳性对照(A

5、g)(阳性血清,含(阳性血清,含AFP)待测标本待测标本(?(?Ag,?AFP)(有沉淀线:有(有沉淀线:有Ag,AFP; 无沉淀线:无无沉淀线:无Ag,无无AFP)?(二)补体参与的免疫反应(二)补体参与的免疫反应 1 1、溶血反应、溶血反应 补体补体SRBC + Ab SRBC-Ab SRBC + Ab SRBC-Ab 溶血溶血 (溶血素)(溶血素) 请按照实验指导讲义方法进行操作请按照实验指导讲义方法进行操作2 2人人/ /组组注意观察溶血现象注意观察溶血现象请分析:为何第请分析:为何第3 3、4 4管不溶血,分别缺什么成分?管不溶血,分别缺什么成分?2、补体结合试验(检测原理)、补体结合试验(检测原理)?补体补体Ab?Ab补体补体反应系统(待测系统)反应系统(待测系统)指示系统指示系统溶血素溶血素溶血素溶血素SRBCSRBC有有Ag无无Ag不溶血不溶血溶血溶血(标本中有(标本中有 Ag) (标本中无(标本中无 Ag)

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