《2019版高考生物总复习第一部分非选择题必考五大专题专题五选修部分第13讲微生物的培养分离及酶的应用课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2019版高考生物总复习第一部分非选择题必考五大专题专题五选修部分第13讲微生物的培养分离及酶的应用课件.ppt（38页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、第第13讲微生物的讲微生物的培养、分离培养、分离及酶的应用及酶的应用考考试试要要求求1.大大肠肠杆杆菌菌的的培培养养和和分分离离。2.分分离离以以尿尿素素为为氮氮源源的的微微生生物物。3.果果汁汁中中的的果果胶和果胶酶。胶和果胶酶。4.淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测。淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测。1.(2018浙江浙江11月选考节选月选考节选)回答与微生物培养及应用有关的问题：回答与微生物培养及应用有关的问题：(1)对对培培养养基基进进行行高高压压蒸蒸汽汽灭灭菌菌时时，灭灭菌菌时时间间应应从从_时时开开始始计计时时。对对于于不不耐耐热热的的液液体体培培养养基基，一一般般可可将将其其转
2、转入入G6玻玻璃璃砂砂漏漏斗斗中中，采采用用_方式可较快地进行过滤灭菌。方式可较快地进行过滤灭菌。(2)与与酿酿造造果果醋醋相相比比，利利用用大大米米、高高粱粱等等富富含含淀淀粉粉的的原原料料制制醋醋，需需增增加加_的的过过程程。某某醋醋化化醋醋杆杆菌菌培培养养基基由由蛋蛋白白质质胨胨、酵酵母母提提取取物物和和甘甘露露醇醇组组成成，其其中中某某露露醇醇的的主主要作用是要作用是_。 (3)为为筛筛选选胞胞外外淀淀粉粉酶酶分分泌泌型型菌菌种种，一一般般从从_(A.果果园园树树下下B.肉肉类类加加工工厂厂周周围围C.米米酒酒厂厂周周围围D.枯枯树树周周围围)获获得得土土样样，用用无无菌菌水水稀稀释释
3、，涂涂布布到到含含有有淀淀粉粉的的选选择择培培养养基基上上培培养养，一一段段时时间间后后在在培培养养基基表表面面滴滴加加碘碘液液，可可在在菌菌落落周周围围观观察察到到透透明明的的水水解解圈圈。若若要要筛筛选选酶酶活活性性较较高高的的菌菌种种，需需挑挑选选若若干干个个_比比值值大大的的菌菌落落，分分别别利利用用液液体体培培养基振荡培养进行扩增。然后将培养液离心，取养基振荡培养进行扩增。然后将培养液离心，取_用于检测酶活性。用于检测酶活性。 解解析析(1)由由于于高高压压蒸蒸汽汽灭灭菌菌锅锅的的升升温温升升压压需需要要一一定定时时间间，而而未未达达设设定定温温度度和和压压力力将将导导致致灭灭菌菌不
4、不彻彻底底，因因此此对对培培养养基基进进行行高高压压蒸蒸汽汽灭灭菌菌时时，灭灭菌菌时时间间应应从从达达到到设设定定的的温温度度或或压压力力值值时时开开始始计计时时。对对于于不不耐耐热热的的液液体体培培养养基基，如如尿尿素素培培养养基基，一一般般可可将将其其转转入入G6玻玻璃璃砂砂漏漏斗斗中中过过滤滤灭灭菌菌，采采用用抽抽滤滤方方式式可可加加快快过过滤滤速速度度。(2)相相比比果果醋醋制制作作中中先先利利用用葡葡萄萄糖糖进进行行酒酒精精发发酵酵，再再进进行行醋醋酸酸发发酵酵，以以淀淀粉粉为为原原料料制制醋醋，需需增增加加淀淀粉粉分分解解成成糖糖的的过过程程。醋醋化化醋醋杆杆菌培养基由蛋白胨、酵母
5、提取物和甘露醇组成，其中甘露醇的主要作用是作为碳源。菌培养基由蛋白胨、酵母提取物和甘露醇组成，其中甘露醇的主要作用是作为碳源。 (3)结结合合生生物物具具有有适适应应性性的的规规律律，米米酒酒厂厂周周围围的的淀淀粉粉量量相相对对较较多多，因因此此存存在在可可分分泌泌淀淀粉粉酶酶的的分分泌泌型型菌菌种种。分分泌泌的的淀淀粉粉酶酶活活性性越越高高，数数量量越越多多，菌菌落落周周围围的的透透明明水水解解圈圈越越大大。由由于于水水解解圈圈越越大大，表表明明淀淀粉粉分分解解量量越越多多，因因此此水水解解圈圈直直径径与与菌菌落落直直径径比比值值大大的的菌菌落落，分分泌泌的的酶酶活活性性较较高高。经经液液体
6、体培培养养基基振振荡荡培培养养进进行行扩扩增增后后，再再将将培培养养液液离离心心，菌菌种会分布于沉淀，而分泌的胞外酶分布于上清液，可取上清液测定酶活性。种会分布于沉淀，而分泌的胞外酶分布于上清液，可取上清液测定酶活性。答案答案(1)达到设定的温度或压力值抽滤达到设定的温度或压力值抽滤(2)将淀粉分解成糖作为碳源将淀粉分解成糖作为碳源(3)C水解圈直径与菌落直径上清液水解圈直径与菌落直径上清液 2.(2018浙江浙江4月选考节选月选考节选)回答与果胶、淀粉等提取和利用有关的问题：回答与果胶、淀粉等提取和利用有关的问题：某某植植物物富富含含果果胶胶、淀淀粉粉、蛋蛋白白质质和和纤纤维维素素成成分分。
7、某某小小组组开开展展了了该该植植物物综综合合利利用用的的研研究。究。(1)果果胶胶提提取取工工艺艺研研究究结结果果表表明明，原原料料先先经经过过一一段段时时间间沸沸水水漂漂洗洗的的果果胶胶得得率率(提提取取得得到到的的果果胶胶占占原原料料质质量量的的百百分分率率)显显著著高高于于常常温温水水漂漂洗洗的的果果胶胶得得率率，最最主主要要原原因因是是沸沸水水漂漂洗洗_(A.有有助助于于清清洗洗杂杂质质和和去去除除可可溶溶性性糖糖B.使使植植物物组组织织变变得得松松散散C.使使有有关酶失活关酶失活D.有利于细胞破裂和原料粉碎制浆有利于细胞破裂和原料粉碎制浆)。(2)在在淀淀粉粉分分离离生生产产工工艺艺
8、研研究究中中，为为促促进进淀淀粉粉絮絮凝凝沉沉降降，添添加加生生物物絮絮凝凝剂剂(乳乳酸酸菌菌菌菌液液)，其其菌菌株株起起重重要要作作用用。为为了了消消除除絮絮凝凝剂剂中中的的杂杂菌菌，通通常常将将生生产产上上使使用用的的菌菌液液，采采用用_，进进行行单单菌菌落落分分离离，然然后后将将其其_，并并进进行行特特性性鉴鉴定定，筛筛选选得得到到纯纯的菌株。的菌株。(3)在在用用以以上上提提取取过过果果胶胶和和淀淀粉粉后后的的剩剩渣渣加加工工饮饮料料工工艺艺研研究究中中，将将剩剩渣渣制制成成的的汁汁液液经经蛋蛋白白 酶酶 和和 纤纤 维维 素素 酶酶 彻彻 底底 酶酶 解解 处处 理理 后后 ， 发发
9、 现现 仍仍 存存 在在 浑浑 浊浊 和和 沉沉 淀淀 问问 题题 。 可可 添添 加加_使使 果果 胶胶 彻彻 底底 分分 解解 成成 半半 乳乳 糖糖 醛醛 酸酸 ， 再再 添添 加加_，以解决汁液浑浊和沉淀问题。，以解决汁液浑浊和沉淀问题。(4)在在建建立立和和优优化化固固定定化化酶酶反反应应器器连连续续生生产产工工艺艺研研究究中中，通通常常要要分分析析汁汁液液中中各各种种成成分分的的浓浓 度度 和和 所所 用用 酶酶 的的 活活 性性 ， 然然 后后 主主 要要 优优 化化 各各 固固 定定 化化 酶酶 反反 应应 器器 中中 的的_(答答出出2点点即即可可)、反反应应pH和和酶酶反反
10、应应时时间间等等因因素素。其其中中，酶酶反反应时间可通过应时间可通过_来调节。来调节。解解析析本本题题考考查查选选修修一一酶酶的的应应用用，试试题题侧侧重重与与社社会会生生产产中中利利用用酶酶的的相相关关内内容容结结合合。果果胶胶酶酶活活性性受受温温度度、pH或或酶酶抑抑制制剂剂的的影影响响。固固定定化化酶酶就就是是将将水水溶溶性性的的酶酶用用物物理理或或化化学学的的方方法法固固定定在在某某种种介介质质(如如石石英英砂砂)上上，使使之之成成为为不不溶溶于于水水而而又又有有酶酶活活性性的的制制剂剂。常常用用方方法有吸附法、共价偶联法等。法有吸附法、共价偶联法等。答案答案(1)C(2)划线分离法划
11、线分离法(或涂布分离法或涂布分离法)扩大培养扩大培养(3)果胶酶和果胶甲酯酶淀粉酶使淀粉分解果胶酶和果胶甲酯酶淀粉酶使淀粉分解(4)固定化酶的量、反应液温度控制反应器液体流量固定化酶的量、反应液温度控制反应器液体流量(或体积或体积) 3.(2017浙浙江江4月月选选考考节节选选)制制作作泡泡菜菜时时，为为缩缩短短发发酵酵周周期期，腌腌制制前前可可加加入入乳乳酸酸菌菌。取取少少量量酸酸奶奶，用用无无菌菌蒸蒸馏馏水水稀稀释释后后，再再用用_蘸蘸取取少少量量的的稀稀释释液液，在在MRS乳乳酸酸菌菌专专用用培培养养基基的的平平板板上上划划线线，以以获获得得乳乳酸酸菌菌单单菌菌落落。下下图图所所示示的的
12、划划线线分分离离操操作作，正正确确的的是是_。 解解析析取取少少量量酸酸奶奶，用用无无菌菌蒸蒸馏馏水水稀稀释释后后，再再用用接接种种环环蘸蘸取取少少量量的的稀稀释释液液，在在MRS乳乳酸酸菌菌专专用用培培养养基基的的平平板板上上划划线线，以以获获得得乳乳酸酸菌菌单单菌菌落落。划划线线分分离离法法从从第第二二次次开开始始每每次次都都是是从从上上一一次次划划线线的的末末端端开开始始划划线线，因因为为线线条条末末端端细细菌菌的的数数目目比比线线条条起起始始处处要要少少，正正确的是确的是B。答案答案接种环接种环B 4.(2016浙江浙江10月选考节选月选考节选)请回答从土壤中分离产脲酶细菌实验的有关问
13、题：请回答从土壤中分离产脲酶细菌实验的有关问题：(1)LB固固体体培培养养基基：取取适适量量的的蛋蛋白白胨胨、酵酵母母提提取取液液、NaCl，加加入入一一定定的的量量的的蒸蒸馏馏水水溶溶解，再加解，再加_，灭菌备用。，灭菌备用。(2)尿尿素素固固体体培培养养基基：先先将将适适宜宜浓浓度度的的尿尿素素溶溶液液，用用_灭灭菌菌过过的的G6玻玻璃璃砂砂漏漏斗斗过过滤滤，因因为为G6玻玻璃璃砂砂漏漏斗斗_，故故用用于于过过滤滤除除菌菌，然然后后将将尿尿素素溶溶液液加加入入到到已经灭菌的含有酚红的培养基中，备用。已经灭菌的含有酚红的培养基中，备用。 (3)取取适适量量含含产产脲脲酶酶细细菌菌的的104、
14、105两两种种土土壤壤稀稀释释液液，分分别别涂涂布布接接种种到到LB固固体体培培养养基基和和尿尿素素固固体体培培养养基基上上，培培养养48小小时时，推推测测固固体体培培养养基基上上生生长长的的菌菌落落数数最最少少的的是是_(A.105稀稀释释液液尿尿素素固固体体培培养养基基B.105稀稀释释液液LB固固体体培培养养基基C.104稀稀释释液液尿尿素素固固体体培培养养基基D.104稀稀释释液液LB固固体体培培养养基基)。在在尿尿素素固固体体培培养养基基上上产产脲脲酶酶细细菌菌菌菌落落周周围围出出现现_，其其原原因因是是细细菌菌产产生生的的脲脲酶酶催催化化尿尿素素分分解解产产生生_所致。所致。(4)
15、制制备备固固定定化化脲脲酶酶时时，用用石石英英砂砂吸吸附附脲脲酶酶，装装柱柱，用用蒸蒸馏馏水水洗洗涤涤固固定定化化酶酶柱柱，其其作作用用为为_。 答答案案(1)琼琼脂脂糖糖(2)高高压压蒸蒸汽汽孔孔径径小小，细细菌菌不不能能滤滤过过(3)A红红色色环环氨氨(4)除除去去游离的脲酶游离的脲酶 5.(2016浙江浙江4月选考节选月选考节选)请回答与请回答与“果汁中的果胶和果胶酶果汁中的果胶和果胶酶”实验有关的问题：实验有关的问题：(1)果果胶胶是是细细胞胞壁壁的的重重要要组组成成成成分分，其其化化学学本本质质是是_(A.蛋蛋白白质质B.脂脂质质C.核核酸酸D.多糖多糖)。它在细胞壁的形成过程中的主
16、要作用是将相邻的细胞。它在细胞壁的形成过程中的主要作用是将相邻的细胞_在一起。在一起。(2)制制取取果果汁汁时时，先先用用果果胶胶酶酶将将果果胶胶分分解解成成_和和半半乳乳糖糖醛醛酸酸甲甲酯酯等等物物质质，再再用用_酶酶处处理理，可可得得到到比比较较澄澄清清的的果果汁汁。用用适适量量且且浓浓度度适适宜宜的的上上述述两两种种酶酶处处理理时时，果汁的出汁率、澄清度与酶的果汁的出汁率、澄清度与酶的_高低呈正相关。高低呈正相关。 (3)由由于于果果胶胶不不溶溶于于乙乙醇醇，故故可可用用乙乙醇醇对对果果胶胶粗粗提提物物(经经酶酶处处理理后后的的混混合合物物)进进行行_处理，从而得到干制品。处理，从而得到
17、干制品。答案答案(1)D粘合粘合(2)半乳糖醛酸果胶甲酯活性半乳糖醛酸果胶甲酯活性(3)沉淀沉淀 1.正误判断正误判断(1)单单菌菌落落的的常常用用分分离离方方法法有有划划线线分分离离法法和和涂涂布布分分离离法法，其其中中前前者者操操作作简简单单，且且可可计计数菌体数目。数菌体数目。( )(2)在在划划线线操操作作的的第第一一次次划划线线以以及及之之后后每每次次划划线线之之前前都都要要灼灼烧烧接接种种环环，在在每每次次划划线线操操作结束后，也需要灼烧接种环。作结束后，也需要灼烧接种环。 ( )(3)倒平板时将培养皿的盖拿开，以方便将锥形瓶中的培养基倒入培养皿。倒平板时将培养皿的盖拿开，以方便将
18、锥形瓶中的培养基倒入培养皿。 ( )(4)筛选分解尿素的细菌的培养基以尿素为唯一氮源，且为琼脂固体培养基。筛选分解尿素的细菌的培养基以尿素为唯一氮源，且为琼脂固体培养基。 ( )(5)果果胶胶由由半半乳乳糖糖醛醛酸酸和和半半乳乳糖糖醛醛酸酸甲甲酯酯组组成成，果果胶胶酶酶和和果果胶胶甲甲酯酯酶酶均均可可水水解解果果胶胶。( )(6)将果胶酶用于果汁的生产，既能提高出汁率又能提高果汁的澄清度。将果胶酶用于果汁的生产，既能提高出汁率又能提高果汁的澄清度。( )(7)教材上教材上淀粉酶固定在石英砂上，固定方法为吸附法。淀粉酶固定在石英砂上，固定方法为吸附法。( )(8)酶酶的的固固定定化化方方法法有有
19、吸吸附附法法、共共价价偶偶联联法法、交交联联法法和和包包埋埋法法等等，将将酶酶加加上上糖糖衣衣做做成成胶胶囊属于包埋法。囊属于包埋法。( )2.读图析图读图析图下图是微生物划线分离示意图，划线的顺序是下图是微生物划线分离示意图，划线的顺序是1、2、3、4、5。 图图示示划划线线操操作作共共需需灼灼烧烧接接种种环环_次次。第第一一次次灼灼烧烧接接种种环环的的目目的的是是_，最后一次灼烧接种环的目的是最后一次灼烧接种环的目的是_，中间几次灼烧接种环的目的是中间几次灼烧接种环的目的是_。 提提示示6避避免免接接种种环环上上可可能能存存在在的的微微生生物物污污染染菌菌种种及及时时杀杀死死接接种种环环上
20、上残残留留的的菌菌种种，避避免免菌菌种种污污染染环环境境和和感感染染操操作作者者杀杀死死上上一一次次划划线线结结束束后后接接种种环环上上残残留留的的菌菌种种，使使下下一次划线时接种环上的菌种直接来源于上一次划线的末端一次划线时接种环上的菌种直接来源于上一次划线的末端 考点考点1结合大肠杆菌的培养和分离考查科学实践能力结合大肠杆菌的培养和分离考查科学实践能力1.下图为下图为“大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离”实验的基本流程：实验的基本流程： 请回答：请回答：(1)培培养养基基灭灭菌菌常常用用_法法，灭灭菌菌后后，要要待待_时时才才能能打打开锅盖。开锅盖。(2)倒倒平平板板和和接接种种前前
21、要要用用_擦擦手手。接接种种和和划划线线前前使使用用_的的方方法法对对接接种种环环灭菌。灭菌。(3)划划线线分分离离时时，接接种种环环在在菌菌液液中中蘸蘸取取_次次。下下图图甲甲表表示示在在平平板板培培养养基基上上的的第第一一次和第二次划线，请在乙图中画出第三次划线。次和第二次划线，请在乙图中画出第三次划线。 (4)划线后在恒温培养箱中培养时，培养皿须倒置，目的是划线后在恒温培养箱中培养时，培养皿须倒置，目的是_。(5)实验完成后，接触过细菌的器皿应如何处理？实验完成后，接触过细菌的器皿应如何处理？_。 解解析析此此题题考考查查大大肠肠杆杆菌菌的的培培养养和和分分离离过过程程，具具体体分分析析
22、如如下下：(1)对对培培养养基基进进行行的的灭灭菌菌应应该该是是用用灭灭菌菌锅锅进进行行高高压压蒸蒸汽汽灭灭菌菌。灭灭菌菌后后，灭灭菌菌锅锅内内的的压压力力与与大大气气压压相相同同时时，才才能能打打开开锅锅盖盖，否否则则会会造造成成培培养养液液溅溅出出。(2)在在进进行行实实验验操操作作时时，操操作作者者的的双双手手要要用用酒酒精精棉棉球球擦擦拭拭消消毒毒，接接种种环环要要用用火火焰焰灼灼烧烧灭灭菌菌。(3)划划线线分分离离时时，接接种种环环在在菌菌液液中中蘸蘸取取菌菌液液1次次然然后后连连续续划划线线。(4)在在培培养养时时，培培养养皿皿须须倒倒置置，目目的的是是防防止止冷冷凝凝后后形形成成
23、的的水水滴滴落落在在培培养养基基上上污污染染培培养养基基，冲冲散散菌菌落落。(5)实实验验完完成成后后，接接触触过过细细菌菌的的器器皿皿应应灭灭菌菌处处理理以以防防止止污染。污染。 答案答案(1)高压蒸汽灭菌灭菌锅内压力与大气压相同高压蒸汽灭菌灭菌锅内压力与大气压相同(2)酒精棉球酒精棉球(酒精灯火焰上酒精灯火焰上)灼烧灼烧(3)1(见下图见下图) (4)防止冷凝后形成的水滴落在培养基上污染培养基防止冷凝后形成的水滴落在培养基上污染培养基(5)接触过细菌的器皿应作灭菌处理接触过细菌的器皿应作灭菌处理(1)常见无菌操作技术常见无菌操作技术 提醒：提醒：为防止葡萄糖高温分解碳化，含有葡萄糖的培养基
24、要用为防止葡萄糖高温分解碳化，含有葡萄糖的培养基要用500 g/cm2压力压力(90 以以上上)灭灭菌菌30 min。尿尿素素等等加加热热会会分分解解的的物物质质，不不能能加加热热灭灭菌菌，只只能能用用G6玻玻璃砂漏斗过滤。璃砂漏斗过滤。方法方法灼灼烧灭烧灭菌菌高高压压蒸汽蒸汽灭灭菌菌酒精消毒酒精消毒紫外紫外线线消毒消毒适用适用对对象象接种接种环环等金属等金属用具用具培养皿等玻璃用具、接种培养皿等玻璃用具、接种环环等等金属用具、培养基等金属用具、培养基等双手、操作桌面双手、操作桌面等等操作台、接种室操作台、接种室等等(2)微生物分离的两种常用方法微生物分离的两种常用方法比比较较划划线线分离法分
25、离法涂布分离法涂布分离法工具工具接种接种环环玻璃刮刀玻璃刮刀原理原理通通过过接种接种环环在在琼琼脂固体培养脂固体培养基表面基表面连续连续划划线线的操作，将的操作，将聚集的菌种逐步稀聚集的菌种逐步稀释释分散到分散到培养基表面。在数次划培养基表面。在数次划线线后后培养，可以分离到由一个培养，可以分离到由一个细细菌菌细细胞繁殖而来的肉眼可胞繁殖而来的肉眼可见见的的细细胞群体，即菌落胞群体，即菌落将菌液将菌液进进行一系列的梯度稀行一系列的梯度稀释释，然，然后将不同稀后将不同稀释释度的菌液分度的菌液分别别涂布到涂布到琼琼脂固体培养基的表面，脂固体培养基的表面，进进行培养。行培养。在稀在稀释释度足度足够够
26、高的菌液里，聚集在高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成一起的微生物将被分散成单单个个细细菌菌细细胞，从而能在培养基表面形成胞，从而能在培养基表面形成单单个的菌落个的菌落特点特点方法方法简单简单，但不适宜，但不适宜计计数数单单菌落更易分开，可以菌落更易分开，可以计计数，数，但操作复但操作复杂杂培养培养结结果果目的目的使培养基上形成使培养基上形成单单个个细细菌菌细细胞繁殖而来的子胞繁殖而来的子细细胞群体胞群体菌落菌落考点考点2围绕分离以尿素为氮源的微生物考查科学实践能力围绕分离以尿素为氮源的微生物考查科学实践能力2.下图是下图是“分离以尿素为氮源的微生物分离以尿素为氮源的微生物”实验的基本流程
27、，请回答下列问题：实验的基本流程，请回答下列问题：(1)该实验培养基不能含有该实验培养基不能含有_(A.尿素尿素B.氯化钠氯化钠C.葡萄糖葡萄糖D.琼脂琼脂)。(2)尿尿素素溶溶液液可可用用_使使之之无无菌菌。若若要要检检查查B过过程程灭灭菌菌是是否否彻彻底底，可可以以采采用的方法是用的方法是_。(3)图图中中步步骤骤C为为_。相相对对于于划划线线分分离离法法，过过程程D涂涂布布分分离离法法的的优优点点是是_。(4)如果菌落周围出现如果菌落周围出现_色环带，说明该菌落能分泌脲酶。色环带，说明该菌落能分泌脲酶。 解解析析(1)分分离离以以尿尿素素为为氮氮源源的的微微生生物物，应应该该以以尿尿素素
28、为为唯唯一一氮氮源源，所所以以不不应应有有琼琼脂脂，因因为为琼琼脂脂是是未未被被纯纯化化的的混混合合物物，内内含含一一定定量量的的含含氮氮化化合合物物。(2)尿尿素素加加热热分分解解，不不能能够够加加热热灭灭菌菌，只只能能用用G6玻玻璃璃砂砂漏漏斗斗过过滤滤除除去去细细菌菌等等微微生生物物。将将空空白白培培养养基基放放在在适适宜宜温温度度下下培培养养一一段段时时间间，若若无无菌菌落落出出现现，则则说说明明培培养养基基灭灭菌菌彻彻底底。(3)图图中中步步骤骤C为为倒倒平平板板，相相对对于于划划线线分分离离法法，涂涂布布分分离离法法更更容容易易获获得得单单菌菌落落。(4)若若菌菌落落能能分分泌泌脲
29、脲酶酶，则则菌菌落落周周围围会出现红色环带。会出现红色环带。答答案案(1)D(2)G6玻玻璃璃砂砂漏漏斗斗过过滤滤将将空空白白培培养养基基放放在在适适宜宜温温度度下下培培养养一一段段时时间间，观观察有无菌落出现察有无菌落出现(3)倒平板单菌落更易分开倒平板单菌落更易分开(4)红红 (1)本本实实验验用用琼琼脂脂糖糖代代替替琼琼脂脂配配制制固固体体培培养养基基。琼琼脂脂是是未未被被纯纯化化的的混混合合物物，内内含含一一定定量的含氮化合物，不利于以尿素为氮源的细菌的筛选。量的含氮化合物，不利于以尿素为氮源的细菌的筛选。(2)因尿素加热分解，本实验配制尿素固体培养基时，需先高压蒸汽灭菌，冷却至因尿素
30、加热分解，本实验配制尿素固体培养基时，需先高压蒸汽灭菌，冷却至60 时再加入通过时再加入通过G6玻璃砂漏斗过滤的尿素溶液。玻璃砂漏斗过滤的尿素溶液。(3)微生物筛选过程中必要的两种对照培养基及其作用微生物筛选过程中必要的两种对照培养基及其作用筛选微生物时，除选择培养基外，还需设置两组对照培养基，以提高实验的说服力筛选微生物时，除选择培养基外，还需设置两组对照培养基，以提高实验的说服力和科学性。和科学性。 对照培养基对照培养基作用作用现象现象结论结论未接种的培养未接种的培养基基有无杂菌污染有无杂菌污染的判断的判断未接种的培养皿中无未接种的培养皿中无菌落生长菌落生长未被杂菌污染未被杂菌污染接种的全
31、营养接种的全营养培养基培养基选择培养基有选择培养基有无筛选作用的无筛选作用的判断判断全营养培养基上的菌全营养培养基上的菌落数大于选择培养基落数大于选择培养基上的数目上的数目选择培养基具有选择培养基具有筛选作用筛选作用考点考点3结合果汁中的果胶和果胶酶考查科学实践能力结合果汁中的果胶和果胶酶考查科学实践能力3.(2018学军中学学军中学3月模拟月模拟)回答下列有关果胶、果汁和果胶酶等问题。回答下列有关果胶、果汁和果胶酶等问题。(1)果果胶胶是是植植物物细细胞胞壁壁的的主主要要成成分分，起起着着将将植植物物细细胞胞_在在一一起起的的作作用用。制制作果汁时可加入果胶酶和作果汁时可加入果胶酶和_以分解
32、果胶，提高果汁出汁率和澄清度。以分解果胶，提高果汁出汁率和澄清度。(2)生生产产果果胶胶酶酶可可从从黑黑曲曲霉霉中中提提取取，下下列列适适于于黑黑曲曲霉霉扩扩大大培培养养的的培培养养基基是是_(A.蛋白胨和酵母提取物培养基蛋白胨和酵母提取物培养基 B.尿尿素素固固体体培培养养基基C.MS培培养养基基D.添添加加蔗蔗糖糖的的豆豆芽芽汁汁培培养养基基)。由由于于果果胶胶酶酶溶溶于于水水，不不利利于于重重复复使使用用，可可通通过过物物理理或或化化学学方方法法将将果果胶胶酶酶固固定定在在某某种种介介质质上上，使使之之成成为为不不溶溶于于水水而而又又有有_的的制剂。制剂。 (3)用用 果果 汁汁 制制
33、作作 果果 酒酒 ， 以以 果果 汁汁 为为 原原 料料 ， 加加 入入 一一 定定 比比 例例 的的 蔗蔗 糖糖 目目 的的 是是_。最最后后倒倒入入酵酵母母悬悬液液，混混匀匀，加加盖盖；发发酵酵开开始始时时，由由于于微微生生物物的的需需氧氧呼呼吸吸会会使使发发酵酵瓶内出现瓶内出现_，原因是，原因是_。解解析析“细细菌菌喜喜荤荤，霉霉菌菌喜喜素素”，霉霉菌菌培培养养基基一一般般用用无无机机物物配配制制或或添添加加蔗蔗糖糖的的豆豆芽芽汁汁即即可可。用用果果汁汁制制作作果果酒酒时时加加入入一一定定比比例例的的蔗蔗糖糖，既既可可以以增增加加糖糖的的含含量量，又又可可以借助酵母菌将蔗糖转化为酒精而提
34、高果酒的酒精含量。以借助酵母菌将蔗糖转化为酒精而提高果酒的酒精含量。答答案案(1)粘粘合合果果胶胶甲甲酯酯酶酶(2)D酶酶活活性性(3)提提高高果果酒酒的的酒酒精精和和糖糖的的含含量量负负压需氧呼吸消耗氧气，产生的二氧化碳易溶于水压需氧呼吸消耗氧气，产生的二氧化碳易溶于水 考点考点4淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测4.如图是固定化酶反应柱，请回答下列问题：如图是固定化酶反应柱，请回答下列问题： (1)将将淀淀粉粉酶酶溶溶于于水水中中，再再加加入入石石英英砂砂，不不时时搅搅拌拌，这这样样淀淀粉粉酶酶就就可可以以固固定定在在石石英英砂砂上上。这这种种固固定定化化
35、酶酶的的方方法法称称为为_。30 min后后，装装入入如如图图所所示示的的反反应应器器中中，构构成成固固定定化化酶酶反反应应柱柱，并并用用10倍倍体体积积的的蒸蒸馏馏水水洗洗涤涤此此反反应应柱柱，洗洗涤涤的的目目的的是是_。洗洗涤涤时时，蒸馏水流速蒸馏水流速_(填填“能能”或或“不能不能”)过快。过快。(2)实实验验时时，将将此此反反应应柱柱固固定定在在支支架架上上，用用滴滴管管滴滴加加可可溶溶性性淀淀粉粉溶溶液液，并并以以0.3 mL/min的流速过柱，控制流速的目的是的流速过柱，控制流速的目的是_。在在流流出出5 mL后后接接收收0.5 mL流流出出液液，加加入入12滴滴_，观观察察颜颜色
36、色。为为了了使使观观察察到到的的颜色变化明显，可颜色变化明显，可_后再观察。如果溶液呈红色，说明淀粉水解成为后再观察。如果溶液呈红色，说明淀粉水解成为_。(3)实实 验验 后后 ， 用用 10倍倍 柱柱 体体 积积 的的 蒸蒸 馏馏 水水 洗洗 涤涤 此此 反反 应应 柱柱 ， 洗洗 涤涤 的的 目目 的的 是是_。洗涤后，放置在洗涤后，放置在4 冰箱中保存。几天后，可重复使用。冰箱中保存。几天后，可重复使用。 解解析析(1)固固定定化化酶酶的的制制作作方方法法有有吸吸附附法法、共共价价偶偶联联法法、交交联联法法和和包包埋埋法法，本本题题所所示示为为吸吸附附法法。洗洗涤涤的的目目的的是是除除去
37、去未未吸吸附附的的一一些些游游离离的的酶酶，在在洗洗涤涤时时流流速速不不能能过过快快，为为1 mL/min。(2)以以相相对对较较慢慢的的流流速速使使淀淀粉粉溶溶液液流流过过反反应应柱柱，可可以以让让吸吸附附着着的的酶酶与与底底物物充充分分反反应应。根根据据KII2溶溶液液与与淀淀粉粉反反应应呈呈蓝蓝色色，与与糊糊精精反反应应呈呈红红色色的的原原理理来来鉴鉴定定反反应应情情况况。(3)实实验验完完成成后后还还需需要要对对反反应应柱柱进进行行洗洗涤涤，以以除除去去参参与与反反应应的的反反应应物物及及生生成成的产物，以便重复使用。的产物，以便重复使用。答答案案(1)吸吸附附法法除除去去未未吸吸附附
38、的的游游离离淀淀粉粉酶酶不不能能(2)使使淀淀粉粉溶溶液液与与溶溶粉粉酶酶充充分分接接触充分反应触充分反应KII2溶液稀释糊精溶液稀释糊精(3)洗去残留的反应物和产物洗去残留的反应物和产物 (1)固固定定化化酶酶的的优优点点：酶酶既既能能与与反反应应物物接接触触，又又能能与与产产物物分分离离，且且可可被被反反复复多多次次利利用。用。(2)两次用两次用10倍体积的蒸馏水洗涤注射器的目的比较倍体积的蒸馏水洗涤注射器的目的比较 洗洗涤过涤过程程目的目的在固定在固定淀粉淀粉酶酶后，用后，用10倍体倍体积积的蒸的蒸馏馏水水洗洗涤涤注射器注射器除去未吸附的游离除去未吸附的游离淀粉淀粉酶酶实验结实验结束后，用束后，用10倍体倍体积积的蒸的蒸馏馏水洗水洗涤涤注注射器射器洗去残留的淀粉溶液和洗去残留的淀粉溶液和产产物物
