细胞学教学课件

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1、病理科细胞学病理科细胞学教学课件教学课件细胞病理学与临床应用细胞病理学与临床应用概概 述述一、细胞病理学概念一、细胞病理学概念 细胞病理学又称诊断细胞学，是利用机体某细胞病理学又称诊断细胞学，是利用机体某些器官组织离体的细胞进行些器官组织离体的细胞进行涂片检查涂片检查，通过，通过观察细胞的结构和形态来研究和诊断疾病的一观察细胞的结构和形态来研究和诊断疾病的一门科学，是病理学分支学科之一。门科学，是病理学分支学科之一。 根据细胞标本来源不同分为根据细胞标本来源不同分为脱落细胞学脱落细胞学和和细针穿刺吸取细胞学细针穿刺吸取细胞学。二、细胞学检查的应用范围二、细胞学检查的应用范围 细胞学标本的类型细

2、胞学标本的类型1、自然脱落细胞、自然脱落细胞 (脱落细胞脱落细胞)： 用于体腔积液，痰、尿、宫颈、阴道、乳头溢液、用于体腔积液，痰、尿、宫颈、阴道、乳头溢液、前列腺等排出物的检查。前列腺等排出物的检查。2、细针穿刺吸取细胞：、细针穿刺吸取细胞： 普通细针普通细针穿刺主要用于体表肿块的诊断，穿刺主要用于体表肿块的诊断，如：甲状腺、皮肤肿物，肿大的淋巴结等。如：甲状腺、皮肤肿物，肿大的淋巴结等。 活检切割针活检切割针在在B超、超、CT引导下穿刺深部内脏器官，引导下穿刺深部内脏器官，用于肿瘤的诊断（获取的组织主要用于切片，液体用于肿瘤的诊断（获取的组织主要用于切片，液体用于涂片）。用于涂片）。三、细

3、胞学检查的优点和不足三、细胞学检查的优点和不足（一）脱落细胞检查的优点：（一）脱落细胞检查的优点：（1）设备简便、操作简单、报告快，费用低廉，）设备简便、操作简单、报告快，费用低廉，适用于大规模防癌普查。适用于大规模防癌普查。（2）脱落细胞可来源于多个位点，能代表更大）脱落细胞可来源于多个位点，能代表更大范围的病变，有时比组织病理学更利于早期肿范围的病变，有时比组织病理学更利于早期肿瘤的诊断；瘤的诊断； （3）病人痛苦少、易接受，可多次重复检查。）病人痛苦少、易接受，可多次重复检查。（4）对某些无法做活检的病例，细胞学诊断更）对某些无法做活检的病例，细胞学诊断更显优势。显优势。（5）恶性肿瘤诊

4、断阳性率较高）恶性肿瘤诊断阳性率较高（二）脱落细胞检查的不足及局限性：（二）脱落细胞检查的不足及局限性：（）有一定的误诊率，主要是假阴性率较（）有一定的误诊率，主要是假阴性率较高（即癌肿病人未能找到癌细胞）。痰涂高（即癌肿病人未能找到癌细胞）。痰涂片的假阴性率可达，胃癌可高达片的假阴性率可达，胃癌可高达左右，假阳性率则较低，约左右。左右，假阳性率则较低，约左右。（）不能对肿瘤进行定位，无法了解肿瘤（）不能对肿瘤进行定位，无法了解肿瘤的浸润情况。的浸润情况。（）分型困难。（）分型困难。 影响阳性率的因素：影响阳性率的因素： 影响细胞学诊断的因素很多，包括标本影响细胞学诊断的因素很多，包括标本采集

5、、涂片的制作以及医生的诊断水平。其采集、涂片的制作以及医生的诊断水平。其中最常见的原因就是涂片固定不及时，造成中最常见的原因就是涂片固定不及时，造成细胞退变而影响诊断，尤其是妇科涂片、气细胞退变而影响诊断，尤其是妇科涂片、气管刷片以及临床医生所制的针吸涂片等，如管刷片以及临床医生所制的针吸涂片等，如果当时不固定送到病理科，细胞多数都会发果当时不固定送到病理科，细胞多数都会发生退变，给诊断带来影响。生退变，给诊断带来影响。四、细胞学检查基本技术：四、细胞学检查基本技术：（一）、细胞标本采集方法：（一）、细胞标本采集方法：肿瘤表面直接压片（印片）或刮片法：肿瘤表面直接压片（印片）或刮片法： 宫颈、

6、阴道、口腔、肛管、皮肤等宫颈、阴道、口腔、肛管、皮肤等自然分泌液涂片：自然分泌液涂片： 痰液，前列腺液，乳头溢液等痰液，前列腺液，乳头溢液等。 穿刺抽吸物涂片穿刺抽吸物涂片（粗针穿刺或细针穿刺）（粗针穿刺或细针穿刺） 体腔积液涂片。体腔积液涂片。 穿刺抽液至少穿刺抽液至少50ml以上，最好是以上，最好是200ml。 病变细胞采集器病变细胞采集器(一次性使用一次性使用) 病变细胞采集器是对脱落于体液或病变细胞采集器是对脱落于体液或其他液体中的肿瘤及病变细胞进行浓其他液体中的肿瘤及病变细胞进行浓缩制样的一种器具缩制样的一种器具. 优点优点 ：简单、方便、快捷，无需：简单、方便、快捷，无需电源、离心

7、机等设备，可大量采集液电源、离心机等设备，可大量采集液体中的肿瘤或病变细胞。利于提高阳体中的肿瘤或病变细胞。利于提高阳性率，降低漏诊率。性率，降低漏诊率。 （二）、涂片制作（二）、涂片制作（很重要）（很重要）涂片要求和涂片制备方法：涂片要求和涂片制备方法： 1、涂片要求、涂片要求 （1）标本要新鲜；）标本要新鲜； （2）操作要轻柔：）操作要轻柔：涂片均匀、厚薄适度、涂片均匀、厚薄适度、 避免重叠、防止挤压；避免重叠、防止挤压； （3）玻片要清洁；）玻片要清洁； （4）涂片要粘附牢固；）涂片要粘附牢固； （5）至少涂两张以上。）至少涂两张以上。2、涂片常用制备方法涂片常用制备方法 （1）推片法）

8、推片法 （2）涂抹法）涂抹法 （3 ）压拉涂片法）压拉涂片法 （4）吸管涂抹法）吸管涂抹法 （5）喷射法）喷射法 （6）印片法）印片法细胞涂片方法：细胞涂片方法：涂抹法：涂抹法：用棉签或针头将标本单向、均匀地涂抹用棉签或针头将标本单向、均匀地涂抹 于载玻片上。于载玻片上。拉片法：拉片法：将一滴检材置于一张载玻片上，再用另将一滴检材置于一张载玻片上，再用另 一张载玻片叠加其上并予轻压，再将该两张载一张载玻片叠加其上并予轻压，再将该两张载 玻片朝反向拉动，从而获得两张涂片。玻片朝反向拉动，从而获得两张涂片。推片法：推片法：将一滴检材置于载玻片的右端，再用另将一滴检材置于载玻片的右端，再用另 一张窄

9、边光滑的载玻片作为推片，并以与滴液一张窄边光滑的载玻片作为推片，并以与滴液 载玻片成载玻片成400夹角，自右向左均匀推动检液，夹角，自右向左均匀推动检液， 形成涂片。形成涂片。液基细胞学制片（超薄宫颈涂片）液基细胞学制片（超薄宫颈涂片） 液液基基细细胞胞学学制制片片技技术术是是一一种种薄薄层层细细胞胞制制片片新新技技术术。与与传传统统制制片片方方法法对对比比具具有有操操作作简简便便，可可读读细细胞胞丰丰富富，细细胞胞薄薄而而均均匀匀、背背景景清清晰晰、细细胞胞形形态态清清楚楚，便便于于观观察察，易易于于检检出出阳阳性性细细胞胞，标标本本可可长长期期保保存存等等特特点点。如如果果加加用用计计算算

10、机机扫扫描描辅辅助助细细胞胞学学检检测测系系统统，自自动动筛筛查查、捕捕捉异常细胞，效果会更好。捉异常细胞，效果会更好。超薄宫颈涂片超薄宫颈涂片 传统涂片传统涂片（三）、涂片的固定（三）、涂片的固定（很重要）（很重要）固定目的：固定目的：防止细胞自溶、细菌繁殖，保证染色防止细胞自溶、细菌繁殖，保证染色结构清晰。固定愈及时染色效果愈好结构清晰。固定愈及时染色效果愈好. 1、固定液：、固定液： 95%酒精（乙醇）酒精（乙醇） 2、固定方法：浸入法、滴加法、固定方法：浸入法、滴加法（1）带湿固定）带湿固定 涂片后立即（几秒钟内）固定涂片后立即（几秒钟内）固定. 适于粘稠标本适于粘稠标本.（2）干燥固

11、定）干燥固定 自然干燥后固定。适于稀薄标本自然干燥后固定。适于稀薄标本. 3、固定时间：、固定时间：15-30min(分钟分钟)（四）、涂片常用染色方法（四）、涂片常用染色方法1 1、巴氏染色法：、巴氏染色法： 细胞核深蓝色，腺癌胞浆呈灰蓝色，鳞癌细细胞核深蓝色，腺癌胞浆呈灰蓝色，鳞癌细胞浆呈粉红色或橘黄色，炎细胞胞浆为蓝色。胞浆呈粉红色或橘黄色，炎细胞胞浆为蓝色。 2、苏木精、苏木精-伊红染色（伊红染色（HE染色）：染色）： 细胞核蓝色，胞质淡红色。细胞核蓝色，胞质淡红色。 3、瑞士、瑞士-吉姆萨染色：吉姆萨染色： 细胞核紫红色，胞质淡蓝色。主要用于血液细胞核紫红色，胞质淡蓝色。主要用于血液

12、涂片。涂片。 第二节第二节 显微镜检查显微镜检查 细胞学诊断报告方式细胞学诊断报告方式（一）直接法直接法（二）分级法（二）分级法改良巴氏五级分类法：改良巴氏五级分类法： （三）描述性诊断报告方式（三）描述性诊断报告方式（TBS） （一）阅片前了解病史注意结合临床表现（一）阅片前了解病史注意结合临床表现（二）阅片时认真、仔细、全面，防止遗漏，（二）阅片时认真、仔细、全面，防止遗漏，有效标记阳性细胞。有效标记阳性细胞。 细胞学的诊断方法与应用细胞学的诊断方法与应用1、有无炎症或特异性炎症；、有无炎症或特异性炎症；2、有无核异质细胞（轻、中、重）、有无核异质细胞（轻、中、重）3、有无恶性细胞、有无恶

13、性细胞4、提出建议或提供参考意见（复查、提出建议或提供参考意见（复查、随访、取活检）随访、取活检）直接法细胞学诊断内容直接法细胞学诊断内容应包括：应包括：改良巴氏五级分类法改良巴氏五级分类法（多用于宫颈（多用于宫颈/阴道涂片）阴道涂片）级级: 涂片内未见异常细胞涂片内未见异常细胞(基本正常基本正常)级级: 涂片内见异常细胞涂片内见异常细胞,但均为良性。但均为良性。 a 轻度核异质细胞。轻度核异质细胞。 b 中中-重度核异质细胞重度核异质细胞,属癌前病变。属癌前病变。 级级: 可疑癌。须随访观察或复查。可疑癌。须随访观察或复查。级级: 有癌细胞，但不典型，尚须证实。有癌细胞，但不典型，尚须证实。

14、级级: 有癌细胞，形态典型。有癌细胞，形态典型。细胞形态变化细胞形态变化一、正常上皮细胞形态一、正常上皮细胞形态（一）（一）鳞状上皮：鳞状上皮： 内底层：基底层细胞，内底层：基底层细胞，12-15um12-15um为为 立方、低柱状细胞，脱落立方、低柱状细胞，脱落 后呈圆形卵圆形，核浆比后呈圆形卵圆形，核浆比 1 1：0.5-10.5-1宫颈内基底细胞和炎细胞宫颈内基底细胞和炎细胞外底层：深棘层细胞，外底层：深棘层细胞，2-32-3层细胞构层细胞构 成，细胞稍大，成，细胞稍大，15-30um,15-30um, 圆形卵圆形，有棘状突圆形卵圆形，有棘状突 起，核圆、居中，一般不起，核圆、居中，一般

15、不 见核仁，核浆比见核仁，核浆比1 1：1-21-2。宫宫颈颈外外、内内基基底底细细胞胞宫宫颈颈外外基基底底细细胞胞和和炎炎细细胞胞宫宫颈颈外外基基底底细细胞胞与与炎炎细细胞胞中层：上皮中部的棘细胞，有棘状中层：上皮中部的棘细胞，有棘状 突起，体积较大突起，体积较大,30-40um,30-40um,卵卵 圆、菱形，胞浆丰富，核居圆、菱形，胞浆丰富，核居 中，核浆比中，核浆比1 1：2-32-3。表层表层中层中层外基底层外基底层宫内膜腺细胞宫内膜腺细胞各层上皮细胞各层上皮细胞角化前细胞：角质层，梭形、多边角化前细胞：角质层，梭形、多边 形，形，40-50um40-50um，胞浆丰，胞浆丰 富，核

16、小、居中、圆富，核小、居中、圆 形，核浆比形，核浆比1 1：3-53-5。宫宫颈颈角角化化、部部分分角角化化细细胞胞不全角化细胞：最浅层细胞，胞浆不全角化细胞：最浅层细胞，胞浆 内角化蛋白，形态、大小内角化蛋白，形态、大小 同角化前细胞，但胞浆鲜同角化前细胞，但胞浆鲜 红，核固缩、居中，核浆红，核固缩、居中，核浆 比比1 1：5 5以上，渐成为无核以上，渐成为无核 的完全角化细胞。的完全角化细胞。（二）柱状上皮（二）柱状上皮纤毛柱状上皮：圆锥形，顶宽有纤纤毛柱状上皮：圆锥形，顶宽有纤 毛，核位于中下部，可见毛，核位于中下部，可见1-2 1-2 个小核仁。个小核仁。黏液柱状上皮：卵圆形、圆柱状，

17、胞黏液柱状上皮：卵圆形、圆柱状，胞 浆淡而透明，浆淡而透明，核位于中下部，核位于中下部， 如细胞内含大量黏液时，核被如细胞内含大量黏液时，核被 压至底部呈半月形，呈杯状细压至底部呈半月形，呈杯状细 胞胞纤毛柱状上皮纤毛柱状上皮宫颈涂片黏液柱状上皮宫颈涂片黏液柱状上皮核异质细胞核异质细胞 指细胞异型性超过炎症变性程度，但尚指细胞异型性超过炎症变性程度，但尚不足以诊断为癌细胞的异型细胞不足以诊断为癌细胞的异型细胞。 表现为：核大小不等、形态异常，核染色表现为：核大小不等、形态异常，核染色质增多、分布不均、核膜增厚、边界不整、但质增多、分布不均、核膜增厚、边界不整、但核浆比例增大不明显或轻度增大。核

18、浆比例增大不明显或轻度增大。 根据异型性大小，将核异质细胞分为轻根据异型性大小，将核异质细胞分为轻度、中度和重度。度、中度和重度。核异质细胞核异质细胞(又称非典型增生细胞又称非典型增生细胞)核异质细胞的意义核异质细胞的意义 核异质细胞是介于良性和恶性之间的细核异质细胞是介于良性和恶性之间的细胞，常见于慢性炎症，易与恶性肿瘤细胞混胞，常见于慢性炎症，易与恶性肿瘤细胞混淆。核异质细胞提供的信息包括：淆。核异质细胞提供的信息包括： 炎症变性上皮细胞、炎症变性上皮细胞、癌变癌变前期细胞、形前期细胞、形态不够典型的癌细胞（态不够典型的癌细胞（不足以诊断为癌）。不足以诊断为癌）。不足以诊断为癌）。不足以诊

19、断为癌）。根据细胞异型性大小分为：根据细胞异型性大小分为： 轻度核异质细胞（轻度核异质细胞（多见于炎症）；多见于炎症）； 中度核异质细胞（中度核异质细胞（多见于炎症）；多见于炎症）；重度核异质细胞多重度核异质细胞多见于癌前病变或原位癌见于癌前病变或原位癌。中度核异质细胞中度核异质细胞宫颈鳞状上皮宫颈鳞状上皮 内基底细胞内基底细胞鳞状上皮鳞状上皮重度核异质细胞重度核异质细胞宫颈鳞状上皮宫颈鳞状上皮 内基底细胞内基底细胞二、宫颈二、宫颈/阴道细胞学阴道细胞学描述性诊断报告方式（描述性诊断报告方式（TBS） 由于核异质细胞的概念比较模糊，包括了由于核异质细胞的概念比较模糊，包括了炎症性核异质细胞，亦

20、可以是癌前病变或癌，炎症性核异质细胞，亦可以是癌前病变或癌，与临床难沟通，使临床无法采取适当的相应与临床难沟通，使临床无法采取适当的相应处理措施，常导致临床过度治疗。因此处理措施，常导致临床过度治疗。因此目前目前提倡使用提倡使用TBS描述性诊断报告方式描述性诊断报告方式。TBS报告方式的意义报告方式的意义 宫颈宫颈/阴道细胞学描述性诊断报阴道细胞学描述性诊断报告方式（告方式（TBS）自推出临床应用已）自推出临床应用已有有10多年，已得到基本肯定，其优多年，已得到基本肯定，其优点是：内容直观、易懂和具体，能点是：内容直观、易懂和具体，能为临床提供更多的信息，临床医生为临床提供更多的信息，临床医生

21、易理解，更能准确、及时地决定对易理解，更能准确、及时地决定对所检病人的进一步处理。所检病人的进一步处理。TBS报告方式的内容报告方式的内容（向临床提供的信息）（向临床提供的信息）（1）标本类型（巴氏涂片或液基）标本类型（巴氏涂片或液基）（2）标本质量评估）标本质量评估（3）描述性诊断内容：）描述性诊断内容：感染（滴虫、霉菌）、上皮增生情况、非典型感染（滴虫、霉菌）、上皮增生情况、非典型增生的程度（轻、中、重）。增生的程度（轻、中、重）。 （4）恶性肿瘤：鳞癌、腺癌、其它。）恶性肿瘤：鳞癌、腺癌、其它。 浆膜腔积液脱落细胞检查浆膜腔积液脱落细胞检查 抽取的体腔积液必须在抽取的体腔积液必须在1小时

22、小时内完成检查，以防细胞退变；内完成检查，以防细胞退变； 注意不要将退变的间皮细胞注意不要将退变的间皮细胞误诊为恶性细胞。误诊为恶性细胞。 而提高胸水脱落细胞检查的阳性率，需而提高胸水脱落细胞检查的阳性率，需 要注意以下几方面：要注意以下几方面：第一，对大量胸水者留取最后一管胸液标本第一，对大量胸水者留取最后一管胸液标本 送检胸液量不少于送检胸液量不少于200ml，应及时送检，应及时送检， 胸液易凝者加入肝素抗凝；胸液易凝者加入肝素抗凝；第二，反复数次抽取胸液送检可提高阳性率；第二，反复数次抽取胸液送检可提高阳性率；第三，送检人员提高对癌细胞的辨认水平是关第三，送检人员提高对癌细胞的辨认水平是

23、关 键。胸水中恶性肿瘤细胞常有核增大且大小键。胸水中恶性肿瘤细胞常有核增大且大小 不一、核畸形、核深染、核浆比例失常及异不一、核畸形、核深染、核浆比例失常及异 常有丝分裂等特点，应注意鉴别。常有丝分裂等特点，应注意鉴别。一、良性病变脱落细胞一、良性病变脱落细胞1、脱落的正常间皮细胞、脱落的正常间皮细胞 间皮细胞间皮细胞被覆于胸膜、心包膜、腹膜被覆于胸膜、心包膜、腹膜面，属于单层扁平上皮。面，属于单层扁平上皮。 脱落的间皮细胞呈圆形或椭圆形，核脱落的间皮细胞呈圆形或椭圆形，核居中央或略偏位。多为单核，少数为双居中央或略偏位。多为单核，少数为双核或多核，分散排列，无聚集现象。可核或多核，分散排列，

24、无聚集现象。可见正常核分裂象。见正常核分裂象。正常间皮细正常间皮细 胞胞2、退化变性（退变）的间皮细胞、退化变性（退变）的间皮细胞细胞退变有：细胞退变有：1）肿胀性退变）肿胀性退变 2）固缩性退变）固缩性退变 退变的细胞易误诊为癌细胞。退变的细胞易误诊为癌细胞。细胞退变的原因：细胞退变的原因：1、标本固定不及时，放置时间过长。体、标本固定不及时，放置时间过长。体腔积液抽取后要在腔积液抽取后要在1 小时内完成检查。小时内完成检查。2、由于疾病间皮细胞脱落退变。、由于疾病间皮细胞脱落退变。 间皮细胞空泡变性（肿胀退变）间皮细胞空泡变性（肿胀退变）体积大、胞浆有空泡、核质比正常体积大、胞浆有空泡、核

25、质比正常3、异型间皮细胞、异型间皮细胞（反应性不典型间皮细胞）（反应性不典型间皮细胞） 异型间皮细胞见于慢性炎或肿瘤异型间皮细胞见于慢性炎或肿瘤放疗后须与癌细胞鉴别：放疗后须与癌细胞鉴别：异型间皮细胞核质比仍属正常范围；异型间皮细胞核质比仍属正常范围；核染色质细颗粒状，分布均匀；核染色质细颗粒状，分布均匀；核仅有轻度异型。核仅有轻度异型。退变间皮细胞退变间皮细胞异型间皮细胞异型间皮细胞成团脱落退变的成团脱落退变的间皮细胞间皮细胞 癌细胞团癌细胞团腹水异型间皮细胞腹水异型间皮细胞（核大、深染）（核大、深染） 二、恶性病变脱落细胞二、恶性病变脱落细胞 浆膜腔积液中浆膜腔积液中98%的癌细胞的癌细胞

26、是转移性的，例：肺癌（鳞癌或腺是转移性的，例：肺癌（鳞癌或腺癌）、乳腺癌、胃癌、大肠癌、卵癌）、乳腺癌、胃癌、大肠癌、卵巢癌、肝癌、胆囊癌等；腺癌占巢癌、肝癌、胆囊癌等；腺癌占80%，少数为鳞癌、未分化癌；，少数为鳞癌、未分化癌； 原发性恶性间皮瘤少见原发性恶性间皮瘤少见。浆膜腔各种脱落癌细胞示意图浆膜腔各种脱落癌细胞示意图鳞癌鳞癌腺癌腺癌未分化癌未分化癌（三）癌细胞团（三）癌细胞团 癌细胞体积增大，细胞大小不等，癌细胞体积增大，细胞大小不等，排列紊乱，失去极性，具有成巢倾向排列紊乱，失去极性，具有成巢倾向（群集、成堆出现），互相拥挤，堆叠（群集、成堆出现），互相拥挤，堆叠或镶嵌状，细胞之间界限不清。由于癌或镶嵌状，细胞之间界限不清。由于癌细胞间的粘着力差，较易脱落，穿刺时细胞间的粘着力差，较易脱落，穿刺时癌组织较易被吸出。癌组织较易被吸出。高分化腺癌细胞高分化腺癌细胞（排列呈腺腔样结构、核大小不等（排列呈腺腔样结构、核大小不等）腺细胞癌形态腺细胞癌形态 高分化腺癌细胞高分化腺癌细胞 ： 癌细胞排列呈腺腔样癌细胞排列呈腺腔样