实验诊断学:出血、血栓与止血检测

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1、血栓与止血检测血栓与止血检测(LaboratoryDiagnosticsinThrombosisandHemostasis)ContentsandObjectivesvBasic theory of the blood coagulation system vHow to collect specimens, store them, and transport them to the laboratoryvDiscuss Screening and Diagnostic TestsVocabulary 1vclot (thrombus) vfibrinolytic systemvdissemi

2、nated intravascular coagulationvHenoch-Schnlein purpura止血和凝止血和凝血系统血系统抗凝和纤抗凝和纤溶系统溶系统导导言言apathologicalactivationofcoagulation mechanisms that happens in response to a variety of diseasesthemassive,ongoing activation of coagulation may result in depletionofplateletsandcoagulationfactors ,which may caus

3、e bleeding .a timely and reliable diagnosisDisseminatedIntravascularCoagulation(DIC)Case 1vthrombin vfibrin-fibrinogenvplasmin- plasminogenvfibrin degradation productvextrinsic and intrinsic pathways vantithrombinvheparinVocabulary 2一一.止血机制:止血机制: 机体的正常止血,主要依赖于完整的机体的正常止血,主要依赖于完整的血管壁血管壁结构和功能,有效的结构和功能,

4、有效的血小板血小板质质量和数量,正常的血浆量和数量,正常的血浆凝血因子凝血因子活性活性及健全的神经体液调节。及健全的神经体液调节。第一节第一节基础理论(止血、凝血和纤溶机制)基础理论(止血、凝血和纤溶机制)1.Hemorrhage(Bleeding)2.Hemostasis(WhiteThrombus)3.Coagulation(RedThrombus)BleedingandClotting-14.Restoration5.Hemostasis(WhiteThrombus)6.RestorationBleedingandClotting-2二二.凝血机制凝血机制血液由液体状态变为凝胶状态称血液

5、由液体状态变为凝胶状态称为血液凝固,这一过程分为三条途径为血液凝固,这一过程分为三条途径两个系统。两个系统。The coagulation cascadeThecoagulationcascade (依依K因子:因子因子:因子、)编号号同同义名名纤维蛋白原(蛋白原(fibrinogen)凝血凝血酶原原(prothrombin)组织凝血激素凝血激素(tissue thromboplastin)Ca2+前加速素前加速素(proaccelerin)前前转变素素(proconvertin)抗血友病因子抗血友病因子(antihemophilic factor,AHF)血血浆凝血激凝血激酶(plasma

6、thromboplastin component,PTC)Stuart-Prower因子因子血血浆凝血激凝血激酶前前质(plasma thromboplastin antecedent,PTA)接触因子接触因子(contact factor)纤维蛋白蛋白稳定因子定因子(fibrin-stabilizing factor)三三.抗凝系统:抗凝系统:q细胞抗凝作用细胞抗凝作用q体液抗凝作用体液抗凝作用vAT-:最主要的生理抗凝活性物质。:最主要的生理抗凝活性物质。v蛋白蛋白C和蛋白和蛋白S系统。系统。四四. 纤溶系统纤溶系统Vocabulary 3vanticoagulantvvon Willeb

7、rand diseasevmyocardial infarction vhemophiliavwarfarinvhyperfibrinolysiscontains3.2%(0.109M)sodiumcitratecalciumionsplasmaisusedfortestingplateletrichplasma(PRP)isusedanticoagulanttherapysuchasheparinorwarfarinnotedonthetestrequestformSample Collection 第二节第二节血栓与止血检测血栓与止血检测一一.血管壁检测血管壁检测1.毛细血管脆性试验毛细血

8、管脆性试验(毛细血管抵抗力试验、束毛细血管抵抗力试验、束臂试验,臂试验,CRT,Tourniquettest )主要反映毛细血管结构和功能,也与血小板质和量有关。主要反映毛细血管结构和功能,也与血小板质和量有关。The WHO definition of denguehaemorrhagicfever has been in use since 1975; all four criteria must be fulfilled:2. Hemorrhagic tendency (positive tourniquet test, spontaneous bruising, bleeding fr

9、om mucosa, gingiva, injection sites, etc.; vomiting blood, or bloody diarrhea) Denguefever2TemplateBleedingTime,TBT二二. 血小板检测血小板检测ThePFA-100Analyzer 血小板功能检测血小板功能检测plateletfunctionscreen常见于一些高凝状态的疾病:心梗、脑梗、静常见于一些高凝状态的疾病:心梗、脑梗、静脉血栓形成等。脉血栓形成等。PLT粘附、聚集功能降低常见于粘附、聚集功能降低常见于PLT无力症、无力症、vWD、骨髓增生性疾病等、骨髓增生性疾病等三三.

10、凝血功能检查凝血功能检查3243s1113s Most common causes Heparin (contamination from lines or therapeutic) LupusAnticoagulant Other causes Liverdisease (site of production for most coagulation factors) Consumption of coagulation factors as seen in Disseminated Intravascular Coagulation (DIC) Deficiencies of coagul

11、ation factors FVIII (Hemophilia A or Von Willebrand Disease), FIX, FXI, FXIICausesforProlongedaPTTCzarNicholasIIofRussiaandhisfamily(photographedc.1916)showinghiswifeAlexandra(whowasacarrierofhemophilia),hisfourdaughters,andhissonAlexis,perhapsthemostfamousEuropeanroyalwithhemophilia.QueenVictoria32

12、43s1113sTFTissuethromboplastinInternational Normalized Ratio (INR) International Sensitivity Index (ISI)PT: 9 sPT: 14 sISI为所用凝血活酶试剂利用标准为所用凝血活酶试剂利用标准品的凝血活酶进行校正而得出的,品的凝血活酶进行校正而得出的,致使每个实验室及每批试剂所测的致使每个实验室及每批试剂所测的INR具有可比性具有可比性CausesforProlongedPT Deficienciesorabnormalitiesin:FVII(ExtrinsicPathway)FV,FX,

13、FII(prothrombin),andFI(fibrinogen)BothPTandaPTTwillbeprolonged VitaminKantagonistsPTsensitivetoreductionsinthreeoffourvitaminK-dependent Warfarinmedicationmonitor LiverdiseaseSiteforsynthesisofvitaminK-dependentproteinsSiteforclearanceofcoumarins(warfarin)andcoagulationproteins四、抗凝系统检测四、抗凝系统检测vAntit

14、hrombinIIIInhibitstheformationofthrombin.v增高:可导致出血,见于先天性凝血因子缺乏,如血友病;后天性凝血因子缺乏,如急性肝炎、肾移植、使用抗凝药物等。v减低:可导致血栓形成,见于先天性缺乏和功能异常,如肺梗塞、深部静脉血栓等血栓性疾病;后天性减低,如 DIC、慢性肝病、心肌梗塞等。纤溶酶原纤溶酶原纤溶酶原纤溶酶原纤溶酶纤溶酶纤溶酶纤溶酶凝血酶原凝血酶原凝血酶凝血酶纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白纤维蛋白纤维蛋白纤维蛋白降解产物降解产物纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白纤维蛋白降解产物降解产物原发性纤溶原发性纤溶primaryfibrinolysis继发性纤溶继发

15、性纤溶secondaryfibrinolysis1.血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验plasmaprotamineparacogulationtest ,3P2.D-二聚体二聚体3.FDPs五五. 纤溶功能检查纤溶功能检查卫生部卫医发卫生部卫医发2000412号文件号文件一、停止使用出血时间测定项目的一、停止使用出血时间测定项目的Duke法,但出血时间的检法,但出血时间的检验项目不废除。若临床怀疑血管壁异常所致出血性疾病时验项目不废除。若临床怀疑血管壁异常所致出血性疾病时(如血管性血友病、单纯性紫癜、过敏性紫癜等),可使用(如血管性血友病、单纯性紫癜、过敏性紫癜等),可使用

16、出血时间测定器法检测出血时间。出血时间测定器法检测出血时间。二、停止使用凝血时间测定玻片法和毛细血管法,用活化部分二、停止使用凝血时间测定玻片法和毛细血管法,用活化部分凝血活酶时间(凝血活酶时间(aPTT)或全血凝固时间()或全血凝固时间(CT,试管法)测,试管法)测定进行替代。定进行替代。三、停止使用一般外科手术前的常规出血时间检测,三、停止使用一般外科手术前的常规出血时间检测,用活化部分凝血活酶时间(用活化部分凝血活酶时间(aPTT)、血浆凝血酶原)、血浆凝血酶原时间(时间(PT)和血小板计数()和血小板计数(PLT)联合检测取代)联合检测取代,如临床有出血史时另加出血时间测定器法进行出血

17、如临床有出血史时另加出血时间测定器法进行出血时间检测。时间检测。一期止血缺陷一期止血缺陷二期止血缺陷二期止血缺陷特点特点血管壁血管壁-血小板型,皮肤紫血小板型,皮肤紫癜和粘膜出血癜和粘膜出血凝血凝血-纤溶型出血,关节、纤溶型出血,关节、肌肉出血肌肉出血筛选试验筛选试验出血时间(出血时间(BT)和血小板)和血小板计数(计数(PLT)活化部分凝血活酶时间活化部分凝血活酶时间(APTT)和血浆凝血酶原)和血浆凝血酶原时间时间(PT) 诊断试验诊断试验 血小板聚集试验(血小板聚集试验(PagT)和流式细胞术(和流式细胞术(FCM) 因子因子活性(活性(F:C)和抗原(和抗原(FAg) 基因诊断基因诊断

18、 b3基因缺失、插入及基因缺失、插入及点突变点突变 内含子内含子 第三节第三节 检测项目的合理选择和应用检测项目的合理选择和应用PrimaryhemostasisSecondaryhemostasissuperficialsitessuchastheskinandmucousmembranesdeepsubcutaneoustissues,muscles,joints,orbodycavitiesBleedingtimePlateletcountPlateletfunctionPTaPTTvWF?medication?F:C?vesselwallstatus?liverlupus?FVIIRe

19、ference http:/www.nlm.nih.gov/medlineplus/medlineplus.htmlhttp:/www.labtestsonline.org/understanding/analytes/platelet_function/glance.htmlhttp:/tollefsen.wustl.edu/projects/coagulation/coagulation.htmlPlatelets,SecondEditionbyAlan D. Michelsonhttp:/www.hemophilia.org.tw/related/cha pter26-01.htmhttp:/ fcgi?book=cm&part=A4616

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