新生儿溶血病(HDN)的免疫血液学实验

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1、新生儿溶血病新生儿溶血病(HDN)的的免疫血液学实验免疫血液学实验第一部份要做好HDN 的免疫血液学检查必须具备的相关知识 一.HDN 的故事 (听故事,目的是引起对HDN的重视) 辽宁台,08,12,31,9:20.PM,王钢讲故事: 十九次怀孕的女人 怀宁县,何X, 90年,23岁, 在当地医院: 分娩女婴,次日发黄,紫, 诊断不清,死亡 产后第3天下身出血,刮宫,贫血,血型B, 误输A型血880ml,浑身痛,抽槒 状告县医院, 获得1万元赔偿 以后: 反复怀孕19次,每次死胎,流产, 出现 畏寒,脱发,浑身痛,头疼 当地医院看病,诊断不清;被折腾死去活来, 倾家荡产 最后走投无路,去上海

2、瑞金医院, 上海瑞金医院名不虚传, 门诊医生几句问诊, 就考虑新生儿溶血病 (HDN), 几项检查就确诊了 进一步检查发现: 畏寒、脱发、浑身痛、头疼, 是产后出血导致垂体功能低下, 即“席汉氏综合征”所致 医生解释: 如果刚开始及时诊断HDN, 及时治疗,是可以怀孕生育的; 刚患席汉氏综合征时,怀孕分娩,席汉氏综合征是可以治愈的 由于错失良机, 现在: 不但 垂体已萎缩, 已丧失治疗席汉氏综合征的机会, 必须终生每天吃药; 而且, 子宫萎缩,终身不育二、HDN 的定义“新生儿溶血”与“新生儿溶血病”新生儿溶血: 综合征,地贫,G6PD,遗传性球形RBC增多症新生儿溶血病:特指母婴血型不合所致

3、.意义:优生优育、妇幼保健. 三.母婴血型不合 RBC血型: 32个系统,300多种Ag 可以引起HDN 者: 常见:ABO(母O,儿非O), Rh(母D-,儿D+), 少见:MN,Ss,kell,Duffy,kidd,Lewis O(OO) RhD阴性(dd) A(AA,AO) IgG 胎 RhD阳性(DD,Dd) 抗-A, 母 抗-D 出血 A(AO),O D阳性(Dd),D阴性 母父儿了解随机婚配夫妻血型不合 妻 夫 O1 /3 A1/3 B1/3 AB1/10 O1/3 A1/3 B1/3 AB1/10 随机婚配夫妻ABO 血型不合: 2/9 随机婚配夫妻Rh不合: RhD(-) 3,

4、 妻如RhD(-), 遇到夫也RhD(-), 概率相当于买彩票中500万大奖 夫妻Rh几乎100%不合 四. 发病过程 1.胎母出血 2.免疫产生的抗体是IgG,分子量小, 可以通过胎盘 3. O型人(妻) 容易发病 4. RhD致敏血量: 5. 注意 RhD(-)女性“婚前”因人流, 可能产生抗体 “未婚”女性人流前查RhD, 五.临床特点1. ABO HDN占85.3% ; 夫A(49.6%)夫B(35.7%)与胎次无关:胎儿血型O?儿RBC Ag成熟?分泌型 血型物质中和 ?IgG亚类?2. Rh HDN占14.6%,常为D,其次E第二胎发病(注意输血,人流史),因Rh首次免疫常6个月到

5、峰值,第一胎 逃逸,一胎比一胎发病早,严重第二部份HDN 的免疫血液学检查一.产前检查试验 (一)对象: (二)时间: (三)实验: 1、采血: 2. 妻, 夫干管分离血清 妻,夫抗凝血分离红细胞, 洗3次, 配为5%悬液 3.检查项目 (1)妻、夫 : ABO RhD (2)妻血清IgG ABO Ab及效价 2ME中和 IgM ABO Ab : 中和血清100ul, 加夫红细胞悬液50ul: 作聚凝胺 如果有凝集, 妻中和血清倍比稀释, 加夫红细胞悬液, 作聚凝胺或AHG试验,测IgG ABO 抗体效价 (四) 注意: 1.夫未来检查, 或夫为AB型, 怎么办? 2. 可用试管法, 也可用

6、HDN 卡 试验 3.HDN 产前检查不属急诊 4. IgG ABO 抗体太高者,慎报!:(五)产前检查报告格式姓名,胎次,妊娠月,采血时间,送检单位一、血型 ABO Rh 妻 夫二、妻血清(含/ 无)免疫性ABO抗体, (抗 -A /B)效价三、妻血清抗体筛选(+/- ); 抗( )效价(六)产前检查结果分析1.试管法有IgG ABO Ab 43.1%2. 试管法IgG ABO Ab 效价64占 66.8%,512占5.6% , 32 64 129/256 512-1024 1024 HDN% 2.6 10.4 21.3 38.9 42.93.Rh,抗-D32,便可能生成严重HDN 3.与产

7、前HDN检查有关的几个临床问题 (1)妊期抗体突然猛升、猛降 (2) ABO,Rh不合同时存在, ABO不合有”保护”作用, (3)“外祖母” 效应, Rh HDN 可第一胎发病二.产后检查 (一)采样: (二)实验 1.ABO,Rh(D)检定 2.直抗: 3.游离抗体4.放散试验 热放散 注意:1.对临床,三项试验(直抗,游离,放散)只报告结果(阴/阳性),但要按上面格式记录存底2.三项试验(直抗,游离,放散)均可用 卡 操做, (三)三项试验: 试管法结果分析1、HDN:直抗+ 88.5% 游离+ 84.2% 放散+ 64.7% 三项全阳性 35.3%2、直抗假阴性/假阳性(华通氏胶污染)

8、3、儿如为A型 (1)游离 OC(+): BC(+): AC(+) AC(+),BC(+) (2)放散: OC(+); BC(+):! AC(+): AC(+),BC(+ 注意:游离(+):表明血浆中有Ab 放散(+):表明Ab粘上RBC, 4.儿如为B型, 同样方式分析结果. 三项试验结果综合分析 直抗 游离 放散 + + +有Ab,致敏儿RBC +-直抗假阳性?+-有Ab(可能Ag弱)未粘RBC-+直抗假阴性,有Ab,粘RBC,血清中残余-+直抗假阴性,Ab全粘RBC+-+有Ab,全粘RBC-+- 有Ab,未粘RBC,(四)产后患儿诊断HDN 的注意事项 1.免疫血液学实验 ,只是为临床提

9、供参考 2. 实验室技术员, 对 HDN ,无论产前、 或产后, 只能是“看见什么,报告什么”, 3.HDN 是血型抗体引起, 患儿体内的抗体是母亲给他的, 4.如果临床只送来可疑患儿标本, 一定要求送来母血标本 第三部份HDN 的其它相关问题 一.HDN研究 1.产前胎儿ABO,Rh血型检定 2.夫RhD纯合子/杂合子检定 3.妻免疫性抗体 IgG亚类测定 4.胎儿ABO分泌/非分泌型产前预测5.胎母出血状态及与HDN 发病关系研究6.少数民族HDN研究: 7.特别要指出的是: (1)ABO HDN 预测率太低, (2)对HDN 检测方法, 或试剂的研究, 不是要求提高灵敏度, 8. 关于 HDN 文章花团锦绣, 实际并不代表国内HDN 临床检测水平: 新生儿血小板减少症母婴血小板抗原(HPA)不合,发病机制和HDN相同,产前/后静脉Ig疗效好国内空白,国外研究红火填补国内空白

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