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1、中药制剂中药制剂中药制剂中药制剂1 1、了解中药制剂的分析的特点、了解中药制剂的分析的特点2 2、熟悉中药制剂分析的基本程序、熟悉中药制剂分析的基本程序3 3、掌握中药制剂的分析方法、掌握中药制剂的分析方法4 4、了解中药制剂的分析的特点、了解中药制剂的分析的特点一、定义一、定义 中药制剂是根据中医理论和中药制剂是根据中医理论和用药原则,将中药的原料药物加用药原则,将中药的原料药物加工制成具有一定规格,可以直接工制成具有一定规格,可以直接用于防病、治病的药品。用于防病、治病的药品。第一节第一节 中药制剂分析简介中药制剂分析简介1.中药市场混乱中药市场混乱同物异名同物异名 同名异物同名异物(30
2、多种,鳞毛蕨科、蹄盖蕨科、多种,鳞毛蕨科、蹄盖蕨科、 紫萁科、乌毛蕨科)紫萁科、乌毛蕨科)贯众贯众一、一、 中药制剂分析的特点中药制剂分析的特点 重楼为百合科重楼为百合科Paris polyphylla Smith. 的根茎又名的根茎又名七叶一枝花、蚤休、草河车。七叶一枝花、蚤休、草河车。 拳参为蓼科拳参为蓼科Polygonum bistra L.的根茎又名草河车。的根茎又名草河车。2. 中药材质量的不稳定性中药材质量的不稳定性生长环境、采收季节及部位差异生长环境、采收季节及部位差异麻黄麻黄 东北东北西北(西北(-)麻黄碱含量)麻黄碱含量 (+)麻黄碱含量)麻黄碱含量GAP 中药材生产质量管理
3、规范中药材生产质量管理规范益母草益母草 水苏碱水苏碱 营养期含量最高营养期含量最高 益母草碱益母草碱 营养期含量最低营养期含量最低薄荷脑薄荷脑 秋季叶变黄时含量最高秋季叶变黄时含量最高丹参酮丹参酮 11、12月份含量最高月份含量最高不同部位人参皂苷的含量不同部位人参皂苷的含量 重量比重量比(%) 总皂苷含量总皂苷含量(%) 周皮周皮 6.9 2.60韧皮韧皮 46.6 3.04木质部木质部 46.5 0.313.五倍子五倍子 鞣质(鞣质(70%)槐米槐米 芦丁(芦丁(20%)长春花长春花 长春新碱(百万分之一)长春新碱(百万分之一)美登木美登木 美登木碱(千万分之一)美登木碱(千万分之一)各种
4、有效成分在中药中含量各种有效成分在中药中含量相差悬殊相差悬殊4. 中药药效的发挥是多种成分中药药效的发挥是多种成分协同作用的结果,因此应从整体协同作用的结果,因此应从整体上来控制中药的质量。上来控制中药的质量。成分复杂,而且大多数中药的成分复杂,而且大多数中药的有效成分尚不十分清楚。有效成分尚不十分清楚。鞣质鞣质 地榆(止血)地榆(止血) 其他(无药效)其他(无药效)有效有效 无效无效5. 同一成分在不同药材中的药理同一成分在不同药材中的药理作用不同作用不同6. 制剂工艺不同,有效成分的量制剂工艺不同,有效成分的量也不同也不同例例 三黄泻心汤干浸膏三黄泻心汤干浸膏有效成分与浓缩干燥方法的关系有
5、效成分与浓缩干燥方法的关系(%) 常压常压 减压减压 逆浸透逆浸透 成分成分 浓缩浓缩 浓缩浓缩 喷雾喷雾大黄酸葡萄糖苷大黄酸葡萄糖苷 41.1 51.6 96.8小檗碱小檗碱 34.5 37.5 94.5黄连碱黄连碱 6.3 12.0 93.7黄岑苷黄岑苷 77.4 77.6 98.5丸、散、片、锭、合、酒、酊、丸、散、片、锭、合、酒、酊、膏、露、茶、栓、颗粒、糖浆等膏、露、茶、栓、颗粒、糖浆等7. 剂型繁多,辅料干扰大剂型繁多,辅料干扰大 针对不同的剂型,采用相应的针对不同的剂型,采用相应的方法进行分离纯化后测定方法进行分离纯化后测定蜡丸蜡丸 蜂蜡蜂蜡蜜丸蜜丸 蜂蜜蜂蜜糊剂糊剂 糯米粉、黄
6、米粉糯米粉、黄米粉曲剂曲剂 发酵发酵胶剂胶剂 豆油、黄酒、冰糖豆油、黄酒、冰糖中药制剂的分类中药制剂的分类二、二、中国药典(中国药典(2005年版)一部(二十六种)年版)一部(二十六种)丸剂丸剂 胶剂胶剂 膏药膏药 颗粒剂颗粒剂 滴眼剂滴眼剂散剂散剂 合剂合剂 露剂露剂 糖浆剂糖浆剂 软膏剂软膏剂片剂片剂 酒剂酒剂 茶剂茶剂 滴丸剂滴丸剂 注射剂注射剂锭剂锭剂 酊剂酊剂 搽剂搽剂 胶囊剂胶囊剂 滴鼻剂滴鼻剂栓剂栓剂 巴布膏剂巴布膏剂 橡胶膏剂橡胶膏剂 气雾剂喷雾剂气雾剂喷雾剂 煎膏剂(膏滋)煎膏剂(膏滋)流浸膏剂与浸膏剂流浸膏剂与浸膏剂(一)(一)液体制剂液体制剂用药材提取物制备的液体制剂用药
7、材提取物制备的液体制剂合剂、糖浆剂、酒剂、茶剂、酊剂合剂、糖浆剂、酒剂、茶剂、酊剂 滴鼻剂、滴眼剂、露剂、搽剂等滴鼻剂、滴眼剂、露剂、搽剂等(无植物组织与细胞,故无显微鉴别)(无植物组织与细胞,故无显微鉴别)1、合剂与口服液合剂与口服液(单剂量合剂也可称为(单剂量合剂也可称为“口服液口服液”)pH 装量装量相对密度相对密度微生物限度微生物限度一般检查项目一般检查项目合剂系指药材用水或其他溶剂,合剂系指药材用水或其他溶剂,采用适宜方法提取,经浓缩制成的采用适宜方法提取,经浓缩制成的内服液体制剂内服液体制剂2、 酒剂与酊剂酒剂与酊剂酒剂酒剂酊剂酊剂含乙醇量(含乙醇量(GC)甲醇量检查(甲醇量检查(
8、GC)总固体总固体装量装量微生物限度微生物限度一般检查项目一般检查项目药材用蒸馏酒提取制成的澄清液药材用蒸馏酒提取制成的澄清液体制剂体制剂药物用规定浓度的乙醇提取或溶药物用规定浓度的乙醇提取或溶解而制成的澄清液体制剂解而制成的澄清液体制剂(二)(二)半固体制剂半固体制剂软膏软膏装量装量微生物限度微生物限度检查项目检查项目常用基质常用基质 油脂性、水溶性油脂性、水溶性 乳剂型(乳膏剂)乳剂型(乳膏剂)药物、药材细粉、药材提取药物、药材细粉、药材提取物与适量基质混合制成的半物与适量基质混合制成的半固体外用制剂固体外用制剂 药材提取液的浓缩液药材提取液的浓缩液(三)(三)半流体制剂半流体制剂煎膏剂煎
9、膏剂(膏滋膏滋)流浸膏剂与浸膏剂(半流体或固体)流浸膏剂与浸膏剂(半流体或固体)(无植物组织与细胞,故无显微鉴别)(无植物组织与细胞,故无显微鉴别)药材用水煎煮、去渣浓缩后,加炼药材用水煎煮、去渣浓缩后,加炼蜜或糖制成的半流体制剂蜜或糖制成的半流体制剂1、煎膏剂煎膏剂(膏滋膏滋) 相对密度相对密度不溶物不溶物 装量装量微生物限度微生物限度检查项目检查项目应无焦臭、异味,无糖结晶析出应无焦臭、异味,无糖结晶析出2、流浸膏剂与浸膏剂(半流浸膏剂与浸膏剂(半/固)固)药材用适宜的溶剂提取,蒸去部分药材用适宜的溶剂提取,蒸去部分或全部溶剂,调整浓度至规定标准或全部溶剂,调整浓度至规定标准而制成的制剂而
10、制成的制剂装量装量微生物限度微生物限度检查项目检查项目1ml流流 浸膏浸膏 1g 原药材原药材1g 浸膏浸膏 2 5g 原药材原药材生产提取溶剂大多为水或稀醇生产提取溶剂大多为水或稀醇检测时一般需经有机提取后分析检测时一般需经有机提取后分析(1)有效成分明确且有适当方法有效成分明确且有适当方法 ,测定,测定 有效成分的含量有效成分的含量 (2)有效成分不明或无定量方法的,可有效成分不明或无定量方法的,可 测一定溶剂的浸出物含量测一定溶剂的浸出物含量 (3)对于流浸膏,有的测总固体量以控对于流浸膏,有的测总固体量以控 制其质量制其质量(四)(四)固体制剂固体制剂 药材提取物、药材粉末加赋药材提取
11、物、药材粉末加赋形剂制备而成形剂制备而成丸剂、胶剂、颗粒剂、散剂、片剂、丸剂、胶剂、颗粒剂、散剂、片剂、胶囊剂、锭剂、茶剂、栓剂胶囊剂、锭剂、茶剂、栓剂(有植物组织与细胞,可做显微鉴别)(有植物组织与细胞,可做显微鉴别)1、 丸剂丸剂 指药材细粉或药材提取物加适宜的指药材细粉或药材提取物加适宜的黏合剂或其他辅料制成球形或类球形制黏合剂或其他辅料制成球形或类球形制剂,分为蜜丸、水丸、水蜜丸、糊丸、剂,分为蜜丸、水丸、水蜜丸、糊丸、浓缩丸、蜡丸、微丸等浓缩丸、蜡丸、微丸等检查项目检查项目水分、重量差异水分、重量差异(按丸或重量按丸或重量)装量差异装量差异(按一次剂量分装的按一次剂量分装的)溶散时限
12、、微生物限度溶散时限、微生物限度水分规定水分规定大蜜丸、小蜜丸、浓缩蜜丸大蜜丸、小蜜丸、浓缩蜜丸 15.0%水蜜丸、浓缩水蜜丸水蜜丸、浓缩水蜜丸 12.0%水丸、糊丸、浓缩水丸水丸、糊丸、浓缩水丸 9.0%装量差异装量差异高高低低溶散时限溶散时限6丸,照崩解时限检查法丸,照崩解时限检查法重量差异重量差异第一法(按丸服用)每次最高丸数或每第一法(按丸服用)每次最高丸数或每 丸(丸(1.5g),),10份份高高低低高高低低第二法(按重量服)每份第二法(按重量服)每份10丸,丸,10份份 高高 低低2、 散剂散剂 一种或多种药材混合制成的粉一种或多种药材混合制成的粉末状制剂,分内服和外用散剂末状制剂
13、,分内服和外用散剂 检查项目检查项目均匀度均匀度水分水分装量差异装量差异微生物限度微生物限度均匀度均匀度取供试品适量置光滑纸上,平铺取供试品适量置光滑纸上,平铺约约5cm2,将其表面压平,在亮处,将其表面压平,在亮处观察,应呈现均匀的色泽,无花观察,应呈现均匀的色泽,无花纹、色斑纹、色斑水分水分9.0%3、颗粒剂颗粒剂 药材提取物与适宜辅料或药材细药材提取物与适宜辅料或药材细粉制成的颗粒状制剂,分为可溶性颗粉制成的颗粒状制剂,分为可溶性颗粒剂、混悬性颗粒剂、泡腾性颗粒剂粒剂、混悬性颗粒剂、泡腾性颗粒剂 检查项目检查项目粒度粒度 水分水分 溶化性溶化性装量差异装量差异 微生物限度微生物限度粒度粒
14、度 1号筛号筛4号筛号筛8%(左右轻轻往返左右轻轻往返3分钟分钟)溶化性溶化性装量差异装量差异单剂量包装单剂量包装 同丸剂同丸剂多剂量包装多剂量包装 最低装量检查法最低装量检查法(附录附录 C) 平均装量平均装量标示装量标示装量 每个装量每个装量限量限量% 4、 片剂片剂 药材提取物加药材细粉或药材细药材提取物加药材细粉或药材细粉与适宜辅料混匀压制而成的园片状粉与适宜辅料混匀压制而成的园片状或异形片状的制剂,分为浸膏片、半或异形片状的制剂,分为浸膏片、半浸膏片和全粉片浸膏片和全粉片检查项目检查项目重量差异重量差异崩解时限崩解时限微生物限度微生物限度原粉片原粉片30浸膏片浸膏片1h薄膜衣片薄膜衣
15、片1h5、胶囊剂胶囊剂硬胶囊剂硬胶囊剂软胶囊剂软胶囊剂肠溶胶囊剂肠溶胶囊剂 检查项目检查项目水分水分装量差异装量差异崩解时限崩解时限微生物限度微生物限度第二节第二节 中药制剂分析的一般程序及方法中药制剂分析的一般程序及方法取样取样鉴别鉴别含量测定含量测定检查检查提取提取纯化纯化供试品溶液的制备供试品溶液的制备一、一、(一)(一)提取方法提取方法1、萃取法萃取法 利用溶质在两种互不相溶的溶利用溶质在两种互不相溶的溶剂中溶解度的不同,使物质从一种剂中溶解度的不同,使物质从一种溶剂转移到另一种溶剂中,将测定溶剂转移到另一种溶剂中,将测定组分提取出来的方法组分提取出来的方法正丁醇正丁醇 用于皂苷类用于
16、皂苷类醋酸乙酯醋酸乙酯 用于黄酮类用于黄酮类氯仿氯仿 用于生物碱类用于生物碱类乙醚、石油醚乙醚、石油醚 用于挥发油用于挥发油(1)萃取溶剂的选择)萃取溶剂的选择(2)水相)水相pH的选择的选择酸性成分酸性成分 比其比其pKa低低12个个pH单位单位碱性成分碱性成分 比其比其pKa高高12个个pH单位单位(3)仪器和提取次数)仪器和提取次数(4)酒剂和酊剂)酒剂和酊剂先挥去乙醇先挥去乙醇(5)防止和消除乳化)防止和消除乳化分液漏斗分液漏斗鉴别鉴别1次次含量测定含量测定 3 4次次2、冷浸法冷浸法 样品置溶剂里,室温下浸泡一样品置溶剂里,室温下浸泡一段时间的提取方法段时间的提取方法适宜易溶出的组分
17、适宜易溶出的组分适宜遇热不稳定的药物适宜遇热不稳定的药物 费时费时(8 24小时)小时)特点特点适用范围适用范围适宜植物性粉末适宜植物性粉末不宜动物性粉末不宜动物性粉末亲脂性亲脂性 亲水性亲水性石油醚石油醚 苯苯 氯仿氯仿 乙醚乙醚 乙酸乙酯乙酸乙酯 丙酮丙酮 乙醇乙醇 甲醇甲醇 水水3、回流提取法回流提取法 样品置有机溶剂中加热回流的样品置有机溶剂中加热回流的提取方法提取方法加快溶出速度,省时加快溶出速度,省时适宜受热稳定的药物适宜受热稳定的药物适宜较难溶出的组分适宜较难溶出的组分特点特点仪器仪器普通回流装置普通回流装置通过更换溶剂,使提取更完全通过更换溶剂,使提取更完全4、连续回流提取法连
18、续回流提取法 样品置有机溶剂中加热,蒸发样品置有机溶剂中加热,蒸发的溶剂经冷凝流回样品管的提取方的溶剂经冷凝流回样品管的提取方法法节省溶剂,提高提取效率节省溶剂,提高提取效率适宜受热稳定的药物适宜受热稳定的药物费时费时特点特点仪器仪器索氏提取器索氏提取器5、水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法 适用于具挥发性的可随水蒸气适用于具挥发性的可随水蒸气蒸出的组分的测定蒸出的组分的测定麻黄碱、槟榔碱、丹皮酚、挥发油麻黄碱、槟榔碱、丹皮酚、挥发油6、超声提取法超声提取法 超声波振荡器(超声波清洗器)超声波振荡器(超声波清洗器) 简便简便 省时省时 提取率高提取率高 利用超声波的助溶作用进行提取利用超声波的助溶作用进
19、行提取原理原理 超声波在液体中以疏密相间的形式超声波在液体中以疏密相间的形式向物体辐射,出现向物体辐射,出现“空化空化”现象(气泡现象(气泡的的形成、产生及破裂现象),形成超过形成、产生及破裂现象),形成超过1000个大气压的冲击力个大气压的冲击力7、超临界流体萃取超临界流体萃取(SFE法)法)当压力和温度超过气体的临当压力和温度超过气体的临界点时所形成的单一相态界点时所形成的单一相态超临界流体超临界流体 是一种处于超临界点之上的流体,是一种处于超临界点之上的流体,是介于气体与液体之间的一种物相,兼是介于气体与液体之间的一种物相,兼有气体与液体的一些特性有气体与液体的一些特性气体气体超临界流体
20、超临界流体气体气体T 压力压力T 压力压力SFE 工艺流程工艺流程 超临界流体萃取与化学法萃取相比有超临界流体萃取与化学法萃取相比有以下突出的优点:以下突出的优点: (1) 它具有与液体相似的密度,因它具有与液体相似的密度,因而具有与液体相似的较强的溶解能力;而具有与液体相似的较强的溶解能力;(2)溶质在流体中的扩散系数与气)溶质在流体中的扩散系数与气体相似,具有传质快,提取时间短的体相似,具有传质快,提取时间短的优点;优点; (5) CO2是一种不活泼的气体是一种不活泼的气体, 萃取萃取过程不发生化学反应过程不发生化学反应,且属于不燃性气且属于不燃性气体体,无味、无臭、无毒,故安全性好;无味
21、、无臭、无毒,故安全性好;(6) CO2价格便宜,纯度高,容易价格便宜,纯度高,容易取得,且在生产过程中循环使用,从取得,且在生产过程中循环使用,从而降低成本;而降低成本;(7) 该技术易与其他仪器联用实现该技术易与其他仪器联用实现自动化自动化(二)(二)纯化方法纯化方法1、萃取法萃取法 利用药物与杂质溶解性能利用药物与杂质溶解性能的不同进行分离的不同进行分离例例生物碱盐生物碱盐氨水氨水H2O2、柱色谱法柱色谱法(1)保留测定组分在柱上,洗去杂)保留测定组分在柱上,洗去杂 质,再用适当溶剂洗下组分质,再用适当溶剂洗下组分(2)保留杂质于柱上)保留杂质于柱上常用固定相常用固定相硅胶硅胶氧化铝氧化
22、铝大孔吸附树脂大孔吸附树脂3、沉淀法沉淀法鉴别试验鉴别试验二、二、鉴定有临床疗效的已知成分鉴定有临床疗效的已知成分黄连黄连 小檗碱(抗菌消炎)小檗碱(抗菌消炎) 麻黄麻黄 麻黄碱(支气管哮喘)麻黄碱(支气管哮喘)乌头乌头 乌头碱(毒性)乌头碱(毒性)洋地黄洋地黄 强心苷(强心)强心苷(强心)延胡索延胡索 延胡索乙素(镇痛)延胡索乙素(镇痛)(一)(一)显微鉴别显微鉴别(含生药粉制剂)(含生药粉制剂)丸剂、片剂、胶囊剂、散剂丸剂、片剂、胶囊剂、散剂快速,简便,覆盖面大快速,简便,覆盖面大 选择原则选择原则1、应选有专属性的特征进行鉴别、应选有专属性的特征进行鉴别2、多来源的药材应选择共有的特征进
23、行、多来源的药材应选择共有的特征进行 鉴别鉴别1、水牛角浓缩粉、水牛角浓缩粉2、麝香、麝香3、珍珠、珍珠4、朱砂、朱砂5、雄黄、雄黄6、黄连、黄连7、栀子、栀子8、郁金、郁金9、黄芩、黄芩安宫牛黄丸安宫牛黄丸(二)(二)化学鉴别化学鉴别 抗干扰能力差抗干扰能力差显色、显色、荧光、荧光例例 二妙丸中苍术的鉴别二妙丸中苍术的鉴别苍术酮苍术酮苍术炔苍术炔(三)(三)色谱鉴别色谱鉴别TLC法法应用最多应用最多 (Rf、颜色、荧光)、颜色、荧光)GC法法 适用于含挥发性成分适用于含挥发性成分 的药物的药物 HPLC法法常与含量测定同时进常与含量测定同时进 行行对照品对照对照品对照-某一药材有效成分某一药
24、材有效成分阴、阳对照阴、阳对照-对照药材对照对照药材对照-标准药材标准药材阴、阳对照法阴、阳对照法阳性对照阳性对照 将要鉴别的药材按制剂将要鉴别的药材按制剂 工艺处理,再按鉴别方工艺处理,再按鉴别方 法提取的溶液法提取的溶液阴性对照阴性对照 把制剂中要鉴别的药材把制剂中要鉴别的药材 除去,用剩下的各味药除去,用剩下的各味药 按制剂工艺处理,再按按制剂工艺处理,再按 鉴别方法提取的溶液鉴别方法提取的溶液 例例样样品品对照对照药材药材小小檗檗碱碱O O OO O 例例硅胶硅胶硅胶硅胶GG板(可加板(可加板(可加板(可加0.3% 0.5% CMC-0.3% 0.5% CMC-NaNa) 多用多用多用
25、多用 氧化铝板氧化铝板氧化铝板氧化铝板 常用于生物碱类药物常用于生物碱类药物常用于生物碱类药物常用于生物碱类药物 聚酰胺板聚酰胺板聚酰胺板聚酰胺板 常用于黄酮类及酚类常用于黄酮类及酚类常用于黄酮类及酚类常用于黄酮类及酚类 药物药物药物药物 纤维素板纤维素板纤维素板纤维素板 常用于氨基酸类药物常用于氨基酸类药物常用于氨基酸类药物常用于氨基酸类药物 (四)中药鉴别新技术中药指(四)中药鉴别新技术中药指 纹图谱纹图谱1.定义:定义: 中药材或中药制剂经适当处理后,中药材或中药制剂经适当处理后,采用一定的分析手段,得到的能够标定采用一定的分析手段,得到的能够标定该中药材或中药制剂特性的共有峰的图该中药
26、材或中药制剂特性的共有峰的图谱谱2. 色谱指纹图谱的基本属性色谱指纹图谱的基本属性 整体性整体性 将指纹图谱作为一个整体将指纹图谱作为一个整体来分析和比较它的综合特征以达到来分析和比较它的综合特征以达到鉴别的目的。鉴别的目的。 模糊性模糊性 强调分析、比较指纹图谱强调分析、比较指纹图谱的相似性,而不是完全相同。的相似性,而不是完全相同。 是一种综合的、量化的色谱鉴别手是一种综合的、量化的色谱鉴别手段。段。色谱指纹图谱在中药质量评价中色谱指纹图谱在中药质量评价中能够尽可能多地反应中药的全貌。能够尽可能多地反应中药的全貌。不需要清楚每一个组分的化学结不需要清楚每一个组分的化学结构;不需要对每一个组
27、分都进行构;不需要对每一个组分都进行定量;只要求不同批号的同一种定量;只要求不同批号的同一种药品的指纹图谱保持一致。药品的指纹图谱保持一致。3. 指纹图谱的应用指纹图谱的应用雅莲云莲味莲味莲雅莲雅莲云莲云莲IIIIII诃诃 子子小诃子小诃子大诃子大诃子绒毛诃子绒毛诃子人参须根人参须根人参主根人参主根不不同同产产地地高高良良姜姜的的气气相相指指纹纹图图谱谱杂质检查杂质检查三、三、水分水分水分水分总灰分和酸不溶性灰分总灰分和酸不溶性灰分总灰分和酸不溶性灰分总灰分和酸不溶性灰分重金属重金属重金属重金属砷盐砷盐砷盐砷盐残留农药残留农药残留农药残留农药 一般杂质一般杂质特殊杂质特殊杂质杂质来源及检查意义
28、杂质来源及检查意义水分水分 结块、霉变或有效成分水解结块、霉变或有效成分水解灰分灰分 控制药物本身及泥土、沙石控制药物本身及泥土、沙石 等无机杂质等无机杂质砷盐砷盐 剧毒,常由除草剂、杀虫剂剧毒,常由除草剂、杀虫剂 或化肥引入或化肥引入重金属重金属 环境污染和使用农药引入环境污染和使用农药引入 残留农药残留农药 有毒有毒烘干法烘干法(不含或少含挥发性成分)(不含或少含挥发性成分)甲苯法甲苯法 (含挥发性成分)(含挥发性成分)减压干燥法减压干燥法(含挥发性成分贵重药)(含挥发性成分贵重药) GC法法(一)(一)水分测定法水分测定法酸不溶性灰分的测定酸不溶性灰分的测定总灰分的测定总灰分的测定(二)
29、(二)总灰分和酸不溶性灰分的测定总灰分和酸不溶性灰分的测定WHO规定植物药规定植物药铅铅10ppm镉镉0.3ppm干法破坏干法破坏湿法破坏湿法破坏硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法(三)(三)重金属的测定重金属的测定干法破坏(干法破坏(ChP)湿法破坏(湿法破坏(USP)(调到中性调到中性)碱融法破坏碱融法破坏湿法破坏湿法破坏碱融法碱融法H+(四)(四)砷盐的测定砷盐的测定(五)(五)残留农药的测定残留农药的测定1、总氯量的测定总氯量的测定2、总磷量的测定总磷量的测定3、GC法法含量测定项目的选定含量测定项目的选定四、四、测定项目的选定原则测定项目的选定原则1 首选君药及贵重药、剧毒药建立首选君药及贵重
30、药、剧毒药建立 含量测定方法含量测定方法2 其次考虑臣药及其他味药其次考虑臣药及其他味药3 有效成分明确的,可选有效成分有效成分明确的,可选有效成分4 成分类别清楚的,可测某一类总成分类别清楚的,可测某一类总 成分的含量成分的含量5 检测成分应归属某单一药味检测成分应归属某单一药味6 检测成分应与中医用药的功能主检测成分应与中医用药的功能主 治相近治相近7 确无法含量测定的,可测定浸出确无法含量测定的,可测定浸出 物含量物含量化学分析法化学分析法色谱法色谱法常用定量方法常用定量方法 分光光度法分光光度法(一)(一)化学分析法化学分析法重量分析法重量分析法 容量分析法容量分析法特点特点 A、准确
31、度、精密度高、准确度、精密度高 B、抗干扰能力差、抗干扰能力差例例(二)(二)分光光度法分光光度法UV法法 比色法比色法特点特点 A、灵敏度高、灵敏度高 B、简便、快速、简便、快速 C、精密度稍低、精密度稍低 D、干扰多、干扰多 1、对照品法、对照品法-用被测组分对照品用被测组分对照品 得:得:C样样=C标标 A样样 / A标标2、吸收系数法、吸收系数法-用被测组分对照用被测组分对照 品计算品计算 得:样品得:样品%=AX / D WX3、液、液-液萃取比色法液萃取比色法 - 被测组分被测组分 试剂试剂 有色产物有色产物 +有机溶剂提取有机溶剂提取 分取有机层比色分取有机层比色芦丁芦丁黄芩苷黄
32、芩苷小檗碱小檗碱 丹皮酚丹皮酚(三)(三) TLC法法 测定薄层板上斑点对单色光的吸测定薄层板上斑点对单色光的吸收或反射的强度而进行定量的方法收或反射的强度而进行定量的方法特点特点 A、分离效果好、分离效果好 B、适用于无法用、适用于无法用UV、HPLC 法测定的组分法测定的组分 C、准确度、精密度低于、准确度、精密度低于HPLC2005年版中国药典(年版中国药典(2005年版)年版)薄层扫描法品种薄层扫描法品种 品种数量品种数量 TLC数量数量 占总数占总数%534(药材)(药材) 20 3.74458(成药)(成药) 32 6.99992(总数)(总数) 52 10.731、 选择测定条件
33、选择测定条件(1)薄层色谱条件)薄层色谱条件 分离好分离好 不拖尾不拖尾(2)检测方法)检测方法吸收测定法吸收测定法荧光测定法荧光测定法反射法反射法透射法透射法(3)扫描方式)扫描方式 单波长单波长双波长双波长线性扫描法线性扫描法锯齿扫描法锯齿扫描法外标法外标法内标法内标法(1)薄层板)薄层板 均匀、平整均匀、平整2、 注意事项注意事项(2)点样量)点样量 准确准确(4)显色剂)显色剂 均匀、适当均匀、适当(5)保护斑点)保护斑点 用相同大小洁净玻璃用相同大小洁净玻璃盖住薄层板盖住薄层板,并用透明胶纸封住边缘,并用透明胶纸封住边缘,以起固定和隔绝空气作用以起固定和隔绝空气作用(3)斑点)斑点
34、应完全分离,不拖尾应完全分离,不拖尾 样样 样样 对对 对对 样样 样样 对对 对对 样样 样样 对对 对对 低低 高高 低低 高高 低低 高高 外标法(两点校正法)外标法(两点校正法)(四)(四)HPLC法法RP - HPLC色谱柱色谱柱 ODS流动相流动相 甲醇甲醇 - 水水PIC 反离子反离子 氢氧化四丁基铵氢氧化四丁基铵色谱柱色谱柱 ODSRP - PIC 反离子反离子 烷基磺酸盐烷基磺酸盐 无机阴离子无机阴离子外标法和内标法外标法和内标法离子对色谱法(离子对色谱法(PIC) 极性流动相中加入离子对试剂,极性流动相中加入离子对试剂,与被分析离子生成中性离子对,从而与被分析离子生成中性离
35、子对,从而增加在非极性固定相中的溶解度,使增加在非极性固定相中的溶解度,使分配系数增大分配系数增大2005年版中国药典(年版中国药典(2005年版)年版)HPLC法品种法品种 品种数量品种数量 HPLC数量数量 占总数占总数%534(药材)(药材) 54 10.11458(成药)(成药) 48 10.48992(总数)(总数) 102 20.59应用实例应用实例- -小青龙合剂小青龙合剂 处方处方 麻黄麻黄125g 125g 桂枝桂枝125g 125g 白芍白芍125g 125g 干姜干姜125 125 五味子五味子125g125g 细辛细辛62g 62g 甘草甘草( (蜜炙蜜炙) ) 法半夏
36、法半夏188g188gNOTESNOTES:合剂是在传统汤剂基础上改进后的一种新剂型:合剂是在传统汤剂基础上改进后的一种新剂型生物碱生物碱桂皮醛桂皮醛挥发油挥发油三萜皂苷三萜皂苷芍药苷芍药苷含量测定含量测定HPLC法测定芍药甙的含量法测定芍药甙的含量仪器与色谱条件仪器与色谱条件 BECKMAN 332型高效液相色谱仪型高效液相色谱仪163型可变波长紫外检测仪,型可变波长紫外检测仪,220nm427型记录及数据处理仪型记录及数据处理仪色谱柱为色谱柱为YWGC18流动相乙腈流动相乙腈-水(水(15:85) 分析实例分析实例万氏牛黄清心丸万氏牛黄清心丸 处方处方 牛黄牛黄10g 10g 朱砂朱砂60
37、g 60g 黄连黄连200g 200g 黄芩黄芩120g 120g 栀子栀子120g 120g 郁金郁金80g80g鉴别鉴别q 显微鉴别显微鉴别郁金郁金糊化淀粉团块几乎无色。糊化淀粉团块几乎无色。栀子栀子种皮石细胞。种皮石细胞。黄芩黄芩纤维淡黄色,梭形,厚壁,孔沟细。纤维淡黄色,梭形,厚壁,孔沟细。黄连黄连纤维鲜黄色,壁稍厚,纹孔明显。纤维鲜黄色,壁稍厚,纹孔明显。朱砂朱砂不规则块状物或颗粒状物,暗红棕色、不规则块状物或颗粒状物,暗红棕色、鲜红色或棕黄色。鲜红色或棕黄色。郁金郁金糊化淀粉团块糊化淀粉团块栀子栀子种皮石细胞种皮石细胞黄芩黄芩纤维纤维黄连黄连纤维纤维朱砂朱砂不规则块状物不规则块状物
38、或颗粒状物,暗红棕或颗粒状物,暗红棕色、鲜红色或棕黄色色、鲜红色或棕黄色q 化学鉴别化学鉴别1. 朱砂的鉴别朱砂的鉴别 取本品取本品3g,加水适量,研匀,反复洗去,加水适量,研匀,反复洗去悬浮物,可得少量朱红色沉淀,取出,加悬浮物,可得少量朱红色沉淀,取出,加入盐酸入盐酸1ml及铜片少量,加热煮沸,铜片及铜片少量,加热煮沸,铜片由黄色变为银白色。由黄色变为银白色。 HgS+2HCl+CuCuCl2+Hg+H2S NOTES:在酸性条件下,朱砂与铜片发:在酸性条件下,朱砂与铜片发生置换反应析出金属汞,在铜片表面形成生置换反应析出金属汞,在铜片表面形成银白色汞齐。银白色汞齐。人人工工牛牛黄黄供供试
39、试品品牛牛黄黄空空白白猪去氧胆酸猪去氧胆酸胆胆酸酸使斑点更为集中使斑点更为集中-OH与与Fe+3络合络合黄芩甙供试品黄芩空白栀子甙供试品栀子空白盐酸小檗碱黄连黄连公式品供试品供试品黄连空白黄连空白含量测定含量测定 1. 朱砂朱砂 取本品约取本品约5g,剪碎,精密称定,置,剪碎,精密称定,置250ml凯氏烧瓶中,加硫酸凯氏烧瓶中,加硫酸30ml与硝酸钾与硝酸钾8g,加热俟溶液至近无色,放冷,转入,加热俟溶液至近无色,放冷,转入250ml锥形瓶中,用水锥形瓶中,用水50ml分次洗涤烧瓶,洗液分次洗涤烧瓶,洗液并人溶液中,滴加并人溶液中,滴加1%高锰酸钾溶液至显粉高锰酸钾溶液至显粉红色,两分钟内不消失,再滴加红色,两分钟内不消失,再滴加2%硫酸亚硫酸亚铁溶液至红色消失后,加硫酸铁铵指示液铁溶液至红色消失后,加硫酸铁铵指示液2ml,用硫氰酸铵滴定液滴定,即得。每,用硫氰酸铵滴定液滴定,即得。每1ml的硫氰酸铵滴定液相当于的硫氰酸铵滴定液相当于11.63mg的硫的硫化汞。化汞。 三、中药制剂分析的进展三、中药制剂分析的进展 1、新方法的进展、新方法的进展 (1)计算药物计算药物UV (2)模式识别法模式识别法 2、新技术进展、新技术进展 (1)多维色谱联用技术多维色谱联用技术 (2)药理、生物测定技术药理、生物测定技术 (3)微量元素分析进展微量元素分析进展