血浆蛋白质的组成功能及分类血浆蛋白质的组成课件

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1、一、血浆蛋白质的组成、功能及分类一、血浆蛋白质的组成、功能及分类 (一)血浆蛋白质的组成(一)血浆蛋白质的组成 血浆蛋白血浆蛋白质是血浆固体成份中含量最多、组成复质是血浆固体成份中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化合物。占血浆固杂、功能广泛的一类化合物。占血浆固体成份体成份90左右,目前已经研究的血浆左右,目前已经研究的血浆蛋白质有蛋白质有500多种,分离出的纯品物多种,分离出的纯品物200来种,除免疫球蛋白外,主要由肝细胞来种,除免疫球蛋白外,主要由肝细胞合成。合成。第一节第一节 概概 述述 (二)血浆蛋白质的功能(二)血浆蛋白质的功能 1. 维持血浆胶体渗透压维持血浆胶体渗透压 清蛋白。

2、清蛋白。 2. 作为某些物质的载体作为某些物质的载体 如清蛋白能如清蛋白能与多种物质结合(与多种物质结合(FA、胆红素),而某胆红素),而某些球蛋白具特异地运输某些物质的功能,些球蛋白具特异地运输某些物质的功能,运铁蛋白、运皮质醇蛋白。运铁蛋白、运皮质醇蛋白。 3. 维持体液维持体液pH恒定恒定 血浆蛋白血浆蛋白PI一一般都小于般都小于7.4是弱酸,一部分的弱酸盐形是弱酸,一部分的弱酸盐形式存在,构成缓冲对。式存在,构成缓冲对。 4.免疫功能免疫功能 血浆中汗多具有免疫功血浆中汗多具有免疫功能的球蛋白,主要由浆细胞合成,电泳时能的球蛋白,主要由浆细胞合成,电泳时位于位于r区带,如区带,如IgG

3、、IgA、IgM、IgD、IgE,此外,还有具有免疫作用的非特异此外,还有具有免疫作用的非特异球蛋白,如补体。球蛋白,如补体。 5.凝血与纤溶作用凝血与纤溶作用 凝血与纤溶是一凝血与纤溶是一对矛盾的统一、凝血因子与纤溶因子绝大对矛盾的统一、凝血因子与纤溶因子绝大部分是血浆蛋白质,它们促进血液凝固,部分是血浆蛋白质,它们促进血液凝固,防止血液流失和溶解血栓,防止重要脏器防止血液流失和溶解血栓,防止重要脏器的动脉栓塞。的动脉栓塞。 6.营养作用营养作用 血浆蛋白质可分成血浆蛋白质可分成AA,用于合成组织蛋白或氧化供能。用于合成组织蛋白或氧化供能。 7.催化作用催化作用 血浆中有汗多酶类,血浆中有汗

4、多酶类,其中部分在血浆中发挥作用,称血浆功其中部分在血浆中发挥作用,称血浆功能性酶,如凝血酶原、纤溶酶原、铜蓝能性酶,如凝血酶原、纤溶酶原、铜蓝蛋白、蛋白、LPL、LCAT、肾素等。肾素等。二、个别血浆蛋白质二、个别血浆蛋白质 (一)前血蛋白(一)前血蛋白(pueallumun PA)分子分子量量5.4万,由肝细胞合成,电脉时移速较白蛋万,由肝细胞合成,电脉时移速较白蛋白快,位于其前方面得名,半寿期短白快,位于其前方面得名,半寿期短12h,PA是一类运载蛋白,一种能与甲状腺素结合,是一类运载蛋白,一种能与甲状腺素结合,称为甲状腺结合蛋白,一种能与称为甲状腺结合蛋白,一种能与VitA结合,结合,

5、称为称为VitA结合蛋白,常用测定方法是免疫化结合蛋白,常用测定方法是免疫化学方法,学方法, 【参考范围参考范围】0.20.4g/L, 【临床意义临床意义】急性炎症,恶性肿瘤,肝硬急性炎症,恶性肿瘤,肝硬化或肾炎时下降。化或肾炎时下降。 (二二)白白蛋蛋白白(allumim, ALb)分分子子量量66458,由由肝肝实实质质细细胞胞合合成成,半半寿寿期期1519天天,是是血血浆浆中中含含量量最最多多的的蛋蛋白白质质,占占4060,主主要要功功能能,维维持持血血浆浆胶胶体体渗渗透透性性,缓缓冲冲作作用用,运运输输作作用用,营营养养作作用用,调调节节某某些些激激素素或或药药物物活性。活性。 白白蛋

6、蛋白白可可微微量量地地通通过过肾肾小小球球,约约0.04,但但大大部部分分被被血血小小管管重重吸吸收收。白白蛋蛋白白的的测测定定方方法目前主要是溴甲酚绿(法目前主要是溴甲酚绿(BCG)法。法。 【参考范围参考范围】3555g/L 【临临床床意意义义】血血浆浆白白蛋蛋白白增增高高临临床床少少见见,主主要要见见于于严严重重失失水水引引起起血血液液浓浓缩缩。血血浆浆白白蛋蛋白白降降低低临临床床常常见见。合合成成障障碍碍急急、慢慢性性肝肝炎炎。丢丢失失过过多多,肾肾病病综综合合症症、慢慢性性肾肾小小球球、肾肾炎炎、糖糖尿尿病病、系系统统性性斑斑狼狼疮疮等等。分分解解过过多多,营养不良,慢性胃肠道疾病。

7、营养不良,慢性胃肠道疾病。 (三三)1-抗抗胰胰蛋蛋白白酶酶(1AT或或AAT),分分子子量量5.5万万,pI4.8,含含糖糖1012,电电泳泳时时位位于于1区区带带,占占90左左右右,由由肝肝细细胞胞合合成成,能能抑抑制制多多种种酶酶活活性性,尤尤其其是是蛋蛋白白酶酶,占占血血清清中中抑抑制制蛋蛋白白酶酶活活力力的的90左左右右,抑抑制制作作用用有有明明显显的的pH依依赖赖性性,在在中中性性和和弱弱碱碱性性中中活活力力最最大。大。 AAT也也是是一一种种急急性性时时相相反反应应蛋蛋白白,主主要要功功能能是是对对抗抗多多形形核核蛋蛋白白细细胞胞吞吞噬噬作作用用时时释释放放的溶酶体蛋白水解酶。的

8、溶酶体蛋白水解酶。 AAT测定方法测定方法 目前主要采用免疫目前主要采用免疫化学法。化学法。 【参考范围参考范围】成人成人0.832.0g/L, 【临床意义临床意义】AAT下降见于胎儿呼吸下降见于胎儿呼吸窘迫症,窘迫症,AAT缺陷所致的肺气肿、肝硬缺陷所致的肺气肿、肝硬化等。化等。AAT上升见于急性炎症、外科手上升见于急性炎症、外科手术后,长期服用可的松药物,妊娠及服术后,长期服用可的松药物,妊娠及服用避孕药物。用避孕药物。 (四)(四)1-酸性糖蛋白酸性糖蛋白(-AG或或AAG)分分子量约子量约4万,含糖约万,含糖约45,pI2.73.5,主要主要由肝细胞合成,某些肿瘤组织也可合成。由肝细胞

9、合成,某些肿瘤组织也可合成。AAG是主要的急性相反应蛋白是主要的急性相反应蛋白,急性炎症时,急性炎症时上升,与免疫防御功能有关。上升,与免疫防御功能有关。 AAG测定方法测定方法 使用使用AAG抗体,进行免抗体,进行免疫散法或免疫比浊法检测,疫散法或免疫比浊法检测, 【参考范围参考范围】0.252.0g/L 【临床意义临床意义】主要作为急必时相反应的指主要作为急必时相反应的指标,风湿病、恶性肿瘤、心肌梗塞患者上升,标,风湿病、恶性肿瘤、心肌梗塞患者上升,营养不良、严重肝病下降。营养不良、严重肝病下降。 (五五)甲甲胎胎蛋蛋白白(AFP)分分子子量量6.57万万,pI4.75,含含糖糖量量4,主

10、主要要在在胎胎儿儿肝肝合合成成,妊妊娠娠1315周周血血清清AFP含含量量最最高高,以以后后逐逐渐渐下下降降,出出生生时时仅仅为为高高峰峰期期的的1,周周岁岁时时接接近近成成人水平,仅人水平,仅1030g/L,功能不详。功能不详。 AFP测测定定方方法法 火火箭箭电电泳泳放放射射自自显显影影;放放射射免免疫疫法法(RIA);酶酶联联免免疫疫吸吸附附法法(ELISA)灵灵敏敏度度接接近近放放免免,且且操操作作简简便便,无放射污染,便于推广。无放射污染,便于推广。 【参考范围参考范围】1030g/L 【临临床床意意义义】AFP作作为为肿肿瘤瘤标标志志物物,对对原原发发性性肝肝癌癌的的诊诊断断很很有

11、有价价值值,80以以上上原原发发性性肝肝癌癌患患者者血血清清AFP上上升升,但但无无特特异异性性,肺肺癌癌、胰胰腺腺癌癌,肝肝硬硬化化患患者者血血清清AFP亦亦升升高高,此此外外,羊羊水水AFP含含量量测测定定可可用用于于胎胎儿儿产产前前监监测测,AFP增增高高,提提示示胎胎儿儿畸畸形形(神神经经管管缺缺损损、脊脊柱裂、无脑儿)死胎。柱裂、无脑儿)死胎。 (六六)结结合合球球蛋蛋白白( Hp)又又名名触触珠珠蛋蛋白白,是是一一种种糖糖蛋蛋白白,主主要要由由肝肝合合成成,电电泳泳时时位位于于2区区带带,是是一一种种急急性性时时相相反反应应蛋蛋白白,为为两两对对肽肽链链组组成成的的四四聚聚体体(2

12、2)。链链有有1和和2两种,其中两种,其中1有两种遗传变异体。有两种遗传变异体。 Hp的的主主要要功功能能与与血血浆浆中中游游离离血血红红蛋蛋白白结结合合,(不不可可逆逆结结合合),并并送送至至肝肝细细胞胞内内降解,因此降解,因此Hp在溶血后含量急剧下降。在溶血后含量急剧下降。 血血浆浆Hp测测定定方方法法 测测定定Hp-Hb复复合合物物中中过过氧氧化化物物酶酶活活性性。在在血血浆浆中中加加入入过过量量Hb,生生成成Hp-Hb复复合合物物,凝凝胶胶层层折折法法收收复复合合物物分分离离,测测定定结结合合的的Hb。电电泳泳法法。免免疫疫化化学法。学法。 【参考范围参考范围】0.52.2g/L 【临

13、临床床意意义义】急急性性时时相相反反应应中中血血浆浆Hp上上升升,烧烧伤伤、肾肾病病综综合合征征引引起起Alb丢丢失失时时Hp上上升,血管内溶血升,血管内溶血Hp下降。下降。 (七七)2-巨巨球球蛋蛋白白(2MG或或AMG)是是血血浆浆中中分分子子量量最最大大的的蛋蛋白白质质,分分子子量量为为62.580万万,含含糖糖量量8。 AMG由由肝肝细细胞胞与与单单核核吞吞噬噬细细胞系统合成,半寿期胞系统合成,半寿期5天。天。 AMG最最突突出出的的特特性性能能与与多多种种分分子子和和离离子子结结合合,特特别别是是它它能能与与不不少少蛋蛋白白水水解解酶酶结结合合而而影影响响这这些些酶酶的的活活性性,有

14、有选选择择地地保保护护某某些些蛋蛋白白酶酶活活性的作用。性的作用。 AMG测定方法测定方法 免疫化学法,免疫化学法, 【参考范围参考范围】1.254.10g/L 【临临床床意意义义】在在低低蛋蛋白白血血症症,AMG上上升升,妊娠、服用避孕药时妊娠、服用避孕药时AMG上升。上升。 (八八)铜铜蓝蓝蛋蛋白白(CER)含含铜铜的的糖糖蛋蛋白白,分分子子量量约约1216万万,含含糖糖量量约约10,因因含含铜铜而而呈呈蓝蓝色,故名铜蓝蛋白。主要由肝脏合成。色,故名铜蓝蛋白。主要由肝脏合成。 CER具具有有氧氧化化酶酶活活性性,使使血血液液中中Fe2+氧氧化化成成Fe3+,故故又又称称亚亚铁铁氧氧化化酶酶

15、。CER还还起起着着抗抗氧氧化化剂剂的的作作用用。防防止止组组织织中中脂脂质质过过氧氧化化物物和和自自由由基基的的生生成。成。 CER测定方法测定方法 免疫化学法或酶活性测定。免疫化学法或酶活性测定。 【参考范围参考范围】0.20.5g/L。 【临临床床意意义义】CER属属于于急急性性时时相相反反应应蛋蛋白白。在在感感染染、创创伤伤和和肿肿瘤瘤时时上上升升,Wilson病病(肝肝豆豆状状核变性)核变性)CER下降。下降。 (九九)转转铁铁蛋蛋白白(TRF) 血血浆浆中中主主要要含含铁铁蛋蛋白白质质,分分子子量量7.7万万,含含糖糖约约6,由由肝肝及及网网状皮系统合成,半寿期状皮系统合成,半寿期

16、7天。天。 主主要要运运载载由由消消化化道道吸吸收收的的铁铁和和RBC降降解解释释放放的的铁铁,此此外外还还可可逆逆地地结结合合多多价价金金属属离离子子,如如Ca、Zn、Cu等。等。 TRF测定方法测定方法 放免法、散射比浊法。放免法、散射比浊法。 【参考范围参考范围】2.54.3g/L。 【临临床床意意义义】TRF在在急急性性时时反反应应中中下下降降,如如炎炎症症、恶恶性性病病变变时时、TRF、Alb、PA同同时时下下降降,慢慢性性肝肝现现营营养养不不良良亦亦下下降降,妊妊娠娠、口口服服避避孕孕药药,注射雌激素注射雌激素TRF上升。上升。 (十十)2-微微球球蛋蛋白白(BMG) 由由淋淋巴巴

17、细细胞胞合合成成,分分子子量量11800,pI5.7,存存在在于于所所有有有有核核细细胞胞的的表表面面,特特别别是是淋淋巴巴细细胞胞和和肿肿瘤瘤细细胞胞并并由由此此释释放放入血,半寿期入血,半寿期107min。 BMG测定方法测定方法 常用放免法,常用放免法,ELISA法。法。 【参考范围参考范围】1.02.5mg/L。 【临临床床意意义义】主主要要用用于于监监测测肾肾小小管管功功能能,特特别别是是肾肾移移植植后后,如如有有排排异异反反应应,BMG在在尿尿中中排排出出量量上上升升,肾肾功功能能衰衰竭竭,炎炎症症、肿肿瘤瘤血血浆浆BMG上升。上升。 (十十一一)C-反反应应蛋蛋白白(CRP) 是

18、是一一种种能能结结合合肺肺炎炎双双球球菌菌细细胞胞壁壁C-多多糖糖的的蛋蛋白白质质,分分子子量量11.514万万,五五条条肽肽链链组组成成,肝肝细细胞胞合合成成。CRP能能激激活活补补体体,促促进进粒粒细细胞胞、巨巨噬噬细细胞胞的的运运动动和和吞吞噬噬,具有调理素样作用。具有调理素样作用。 CRP测测定定方方法法 免免疫疫扩扩散散法法,火火箭箭免免疫疫电电泳泳法,法,ELISA法,放免法,法,放免法, 【参考范围参考范围】8.0mg/L。 【临临床床意意义义】作作为为急急性性时时相相反反应应的的一一个个极极灵灵敏敏指指标标 ,急急性性心心肌肌梗梗死死,创创伤伤、感感染染、炎炎症症、外外科手术、

19、肿瘤浸润迅速上升。科手术、肿瘤浸润迅速上升。 上述蛋白质除上述蛋白质除PA、Alb、BMG外都属于糖蛋白,含糖量最高的是外都属于糖蛋白,含糖量最高的是AAG、45,除,除BMG外都主要由肝外都主要由肝细胞合成。细胞合成。 三、疾病时的血浆蛋白质三、疾病时的血浆蛋白质 (一)炎症、创伤(一)炎症、创伤 在在炎炎症症、创创伤伤、感感染染、心心肌肌梗梗塞塞、肿肿瘤瘤等等情情况况下下其其血血浆浆浓浓度度会会发发生生明明显显改改变变的的蛋蛋白白质质称称为为急急性性时时相相反反应应蛋蛋白白(acute phase reactants APR)。主主要要包包括括AAG、AAT、Hp、CER、C3、C4、纤纤

20、维维蛋蛋白白原原、CRP;PA、Alb、TRF。 (二)二)肝脏疾病肝脏疾病 血血浆浆蛋蛋白白质质大大多多数数由由肝肝脏脏合合成成,因因此此肝肝脏疾病可导致多种血浆蛋白质发生变化。脏疾病可导致多种血浆蛋白质发生变化。 如如乙乙肝肝活活动动期期AAT,Hp、PA、Alb,特特别别是是血血浆浆PA的的含含量量是是肝肝功功能能损损伤伤的的敏敏感感指指标。标。 肝肝硬硬化化时时AAT、IgA、AMG,CER、CRP, 而而 AAG、 Hp、 C3, PA、 Alb、TRF。 (三)肾脏疾病(三)肾脏疾病 肾肾脏脏疾疾病病可可出出现现蛋蛋白白尿尿而而导导致致血血浆浆蛋蛋白白质质丢丢失失,丢丢失失的的蛋蛋

21、白白质质与与其其分分子子量量有有关关。小小分分子子量量蛋蛋白白质质丢丢失失最最明明显显,而而大大分分子子量量的的蛋蛋白白质质因因肝肝细细胞胞代代偿偿性性地地合合成成增增加加,绝绝对对含含量量升升高高。所所以以血血浆浆Alb、PA、AAG、AAT、TRF,而而AMG、-LP、Hp,这这称为选择性蛋白质丢失。称为选择性蛋白质丢失。 当当严严重重肾肾病病是是肾肾小小球球失失去去分分子子筛筛作作用用,可可导导致致非非选选择择性性蛋蛋白白质质丢丢失失,表表现现为为广广泛泛地低血浆蛋白质血症。地低血浆蛋白质血症。 生化检验中测定蛋白质的方法很多,主生化检验中测定蛋白质的方法很多,主要利用蛋白质的分子组成,

22、结构或性质进行。要利用蛋白质的分子组成,结构或性质进行。一、蛋白质测定方法及评价一、蛋白质测定方法及评价 (一)测定蛋白质特征元素(一)测定蛋白质特征元素氮氮 如如凯凯氏定氮法氏定氮法,是测定蛋白质的经典方法,是测定蛋白质的经典方法,1883年年Kjeldahl首创,精密度准确度高,但操作复首创,精密度准确度高,但操作复杂、费时、技术性强,不适合临床常规检测,杂、费时、技术性强,不适合临床常规检测,一般一般用于标准血清的标定和校正用于标准血清的标定和校正。第二节第二节 体液蛋白质测定体液蛋白质测定 (二)利用重复的肽链结构(二)利用重复的肽链结构 如如双双缩脲法缩脲法,1914年首创,操作简便

23、,重年首创,操作简便,重复性好,各种蛋白产生的颜色反应相复性好,各种蛋白产生的颜色反应相近,但灵敏度较低,是目前临床上近,但灵敏度较低,是目前临床上测测定总蛋白的常规方法定总蛋白的常规方法。 (三三)利利用用酪酪氨氨酸酸、色色氨氨酸酸残残基基与与试试剂剂的的反反应或紫外吸收特性应或紫外吸收特性 1. 酚酚试试剂剂法法 1921年年,Folin首首创创,1951年年改改良良成成广广泛泛使使用用的的Lowry法法,灵灵敏敏度度高高(较较双双缩缩脲脲法法高高100倍倍),主主要要用用于于微微量量蛋蛋白白质质检检测测,但但各各种种蛋蛋白白质质中中酪酪氨氨酸酸含含量量不不一一,故故准准确确性性较较差差,

24、试试剂剂配配制制复复杂杂且且不不稳稳定定,化化学学干干扰扰大大,目目前前临临床床上仅上仅用于粘蛋白测定用于粘蛋白测定。 2. 紫紫外外吸吸收收法法 在在280nm处处有有一一吸吸收收峰峰,快快速速、简简单单,不不需需加加任任何何试试剂剂,保保留留蛋蛋白白质质活活性性,化学干扰大。化学干扰大。 (四)利用与染料的结合能力(四)利用与染料的结合能力 1. 考考马马斯斯亮亮蓝蓝G-250结结合合蛋蛋白白法法(CBB法法)1976年年Bradford应应用用于于蛋蛋白白质质测测定定,操操作作简简便便、快快速速、重重复复性性好好,灵灵敏敏度度高高,干干扰扰因因素素少少,但但特特异异性性不不高高,大大分分

25、子子肽肽(分分子子量量300以以上上),也也参参与与反反应应,线线性性范范围围窄窄,临临床床上上主主要要用用于于尿尿、脑脑脊脊液蛋白质测定液蛋白质测定。 2. 溴溴甲甲酚酚绿绿结结合合清清蛋蛋白白法法(BCG法法) 灵灵敏敏度度高高,血血清清用用量量少少,操操作作简简便便,但但特特异异性性不不高高,部部分分球球蛋蛋白白也也能能与与之之结结合合(1-球球蛋蛋白白、运运铁铁蛋蛋白白、触触珠珠蛋蛋白白等等),是是目目前前临临床床上上测测定定清清蛋蛋白白的的常规方法常规方法。 (五五)利利用用沉沉淀淀后后借借浊浊度度或或光光折折射射测测定定 如如比比浊浊法法、折折光光测测定定法法,方方法法简简便便,试

26、试剂剂易易得得,但但浊浊度度的的强强弱弱受受反反应应的的条条件件影影响响大大(加加试试剂剂的的方方法法、温温度度等等),结结果果准准确确性性差差,一一般般用用于于尿尿、脑脊液蛋白测定脑脊液蛋白测定。 (六六)电电泳泳法法 CAE、PAGE目目前前临临床床上上常常用用电电泳泳技技术术,但但只只能能测测定定各各种种蛋蛋白白质质的的百百分分含含量量。 (七七)利利用用免免疫疫学学特特性性 免免疫疫化化学学法法,特特异异性、灵敏度高,只能性、灵敏度高,只能用于某种特异蛋白的测定用于某种特异蛋白的测定。二、血清总蛋白的测定(双缩脲法)二、血清总蛋白的测定(双缩脲法) 【原理原理】蛋白质分子中的肽链在碱性

27、条蛋白质分子中的肽链在碱性条件下能与二价铜离子作用生成紫红色的络合件下能与二价铜离子作用生成紫红色的络合物,产生的颜色强度在一定范围内与蛋白质物,产生的颜色强度在一定范围内与蛋白质的含量成正比,但双缩脲反应并非蛋白质特的含量成正比,但双缩脲反应并非蛋白质特有的颜色反应,分子中含二个以上肽键者均有的颜色反应,分子中含二个以上肽键者均有此反应。有此反应。 【试试剂剂】双双缩缩脲脲试试剂剂 未未失失结结晶晶水水的的硫硫酸酸铜铜(CuSO45H2O)3.0g溶溶于于500ml新新鲜鲜制制备备的的蒸蒸馏馏水水或或刚刚煮煮沸沸冷冷却却的的去去离离子子水水中中,加加酒酒石石酸酸钾钾钠钠(NaKC4O4H64

28、H2O)9.0g,碘碘化化钾钾5.0g,待待完完全全溶溶解解后后加加入入6mol/L NaOH溶溶液液100ml,最最后后加蒸馏水至加蒸馏水至1L,置聚乙烯瓶内盖紧保存。置聚乙烯瓶内盖紧保存。 酒酒石石酸酸钾钾钠钠的的作作用用是是络络合合铜铜离离子子,维维持持铜铜离离子子在在碱碱性性溶溶液液中中的的溶溶解解度度,碘碘化化钾钾防防止止两两价价铜铜离离子还原。子还原。 【参考范围参考范围】6080g/L 【临床意义临床意义】 (一)血清总蛋白增高(一)血清总蛋白增高 1. 血液浓缩血液浓缩 严重腹泻严重腹泻 、呕吐、高烧、呕吐、高烧 2. 合合成成增增加加 主主要要见见于于球球蛋蛋白白合合成成增增

29、加加,多多发发性性骨髓瘤。骨髓瘤。 (二)血清总蛋白降低(二)血清总蛋白降低 1.血血液液稀稀释释 静静脉脉滴滴注注过过多多低低渗渗溶溶液液,各各种种原原因因所引起的水钠潴留。所引起的水钠潴留。 2. 摄摄入入不不足足和和消消耗耗增增加加 营营养养不不良良,慢慢性性胃胃肠肠道道疾疾病病引引起起的的消消化化吸吸收收不不良良,消消耗耗性性疾疾病病,结结核核病病、甲甲亢、恶性肿瘤。亢、恶性肿瘤。 3. 合成障碍合成障碍 主要见于肝脏疾患。主要见于肝脏疾患。 4. 蛋蛋白白质质丢丢失失 严严重重烧烧伤伤,大大量量血血浆浆渗渗出出,肾肾病病综合症。综合症。 三、血清清蛋白测定(溴甲酚绿法)三、血清清蛋白

30、测定(溴甲酚绿法) 【原原理理】溴溴甲甲酚酚绿绿(BCG)在在pH4.2的的环环境境中中,在在有有非非离离子子去去垢垢剂剂(Brij-35)存存在在时时,可可与与清清蛋蛋白白结结合合形形成成蓝蓝绿绿色色复复合合物物,颜颜色色的的深深浅浅在在一一不定范围内与清蛋白含量成正比。不定范围内与清蛋白含量成正比。 BCG与与清清蛋蛋白白结结合合的的特特异异性性较较低低,它它不不仅仅与与Alb结结合合呈呈色色,还还可可与与其其他他蛋蛋白白质质呈呈色色,其其中中1-球球蛋蛋白白,TRF、Hp最最明明显显,但但反反应应速速度度不不同同,Alb可可立立即即反反应应(快快反反应应),其其他他蛋蛋白白质质反反应应慢

31、慢(慢反应)。(慢反应)。 【试剂试剂】 1. 10mmol/L BCG贮贮存存液液 BCG1.75g,溶溶于于5ml 1 mol/L NaoH溶液中,加蒸馏水至溶液中,加蒸馏水至250ml。 2. 0.5mol/L琥琥 珀珀 酸酸 缓缓 冲冲 贮贮 存存 液液 ( pH 4.0)NaoH10g,琥琥珀珀酸酸56g,溶溶解解于于800ml蒸蒸馏馏水水中中,用用1mol/L NaoH溶溶液液调调pH至至4.100.05加加蒸馏水至蒸馏水至1L。 3. 叠叠氮氮钠钠贮贮存存液液 叠叠氮氮钠钠40g溶溶于于1000ml蒸蒸馏水中。馏水中。 4. Brij-35溶溶液液 Brij-35 29g,加加蒸

32、蒸馏馏水水80ml,置置80ml左左右右水水溶溶使使其其溶溶解解,然然后后加加水水至至100ml。 5. BCG试试剂剂 于于IL容容量量瓶瓶内内加加蒸蒸馏馏水水400ml,琥琥珀珀酸酸缓缓冲冲贮贮存存液液100ml,BCG贮贮存存液液8ml,叠叠氮氮钠钠贮贮存存液液2.5ml,Brij-35溶溶液液2.5ml,加加蒸蒸馏馏水水至至刻刻度度,配配好好的的BCG试试剂剂的的pH应为应为4.150.05。 Brij-35可可提提高高蛋蛋白白质质与与染染料料的的结结合合力力及及溶溶解解度度,提提高高呈呈色色稳稳定定性性,如如无无Brij-35可可用用吐温吐温-20代替,叠氮钠有防腐作用。代替,叠氮钠

33、有防腐作用。【参考范围参考范围】3555g/L。【临床意义临床意义】四、血浆纤维蛋白原测定四、血浆纤维蛋白原测定 血血浆浆纤纤维维蛋蛋白白原原(Fib)是是一一种种参参与与血血液液凝凝固固的的糖糖蛋蛋白白,又又称称凝凝血血因因子子,分分子子量量34万万,在在肝肝脏脏合合成成,电电泳泳时时位位于于球球蛋蛋白白区区带带。血血浆浆纤纤维维蛋蛋白白原原测测定定对对于于出出血血性性疾疾病病和和肝肝脏脏损损伤伤的的诊诊断断有有重重要要意意义义。测测定定血血浆浆纤纤维维蛋蛋白白原原的的方方法法有有多种,主要有:多种,主要有: 1.复复钙钙双双缩缩脲脲法法 在在稀稀释释血血浆浆中中加加入入钙钙离离子子使使纤纤

34、维维蛋蛋白白原原转转化化为为不不溶溶性性纤纤维维蛋蛋白白凝凝块块,将凝块分离后用双缩脲法测定纤维蛋白含量。将凝块分离后用双缩脲法测定纤维蛋白含量。 2.盐盐析析双双缩缩脲脲法法 在在血血浆浆中中加加入入12.5%的的亚亚硫硫酸酸钠钠使使纤纤维维蛋蛋白白原原沉沉淀淀而而与与其其他他血血浆浆蛋蛋白白质质分分离离,将将纤纤维维蛋蛋白白原原用用双双缩缩脲脲试试剂剂显显色色,求求出其含量。出其含量。 3.比比浊浊法法 在在pH7.0时时,用用13.3%的的硫硫酸酸铵铵溶溶液液沉沉淀淀纤纤维维蛋蛋白白原原,而而血血浆浆中中其其他他蛋蛋白白质质保保持持溶溶解解状状态态,此此时时溶溶液液的的浊浊度度完完全全由

35、由纤纤维维蛋蛋白白原产生,通过比浊可求得其含量。原产生,通过比浊可求得其含量。 4.免免疫疫化化学学法法 用用人人纤纤维维蛋蛋白白原原免免疫疫动动物物获获得得抗抗人人纤纤维维蛋蛋白白原原抗抗体体,应应用用免免疫疫电电泳泳法法、免疫扩散法和免疫扩散法和ELISA法测定纤维蛋白原含量。法测定纤维蛋白原含量。 【参考范围参考范围】2.04.0g/L 【临床意义临床意义】 1.纤纤维维蛋蛋白白原原增增加加 纤纤维维蛋蛋白白原原是是一一种种急急性性时时相相反反应应蛋蛋白白,在在感感染染、严严重重组组织织损损伤伤、休休克克、肾肾炎炎、风风湿湿热热、恶恶性性肿肿瘤瘤以以及及放放射射治治疗疗、月经期和妊娠期增高。月经期和妊娠期增高。 2.纤纤维维蛋蛋白白原原减减少少 常常见见于于营营养养不不良良、严严重重的的肝肝功功能能损损伤伤、弥弥漫漫性性血血管管内内凝凝血血、分分娩娩时时羊羊水水进进入入血血液液在在血血管管内内形形成成血血栓栓、先先天天性性纤纤维维蛋白原缺乏症。蛋白原缺乏症。

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