医学微生物学PPT课件

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1、进入夏天，少不了一个热字当头，电扇空调陆续登场，每逢此时，总会想起进入夏天，少不了一个热字当头，电扇空调陆续登场，每逢此时，总会想起那一把蒲扇。蒲扇，是记忆中的农村，夏季经常用的一件物品。记忆中的故那一把蒲扇。蒲扇，是记忆中的农村，夏季经常用的一件物品。记忆中的故乡，每逢进入夏天，集市上最常见的便是蒲扇、凉席，不论男女老少，个个手持乡，每逢进入夏天，集市上最常见的便是蒲扇、凉席，不论男女老少，个个手持一把，忽闪忽闪个不停，嘴里叨叨着一把，忽闪忽闪个不停，嘴里叨叨着“怎么这么热怎么这么热”，于是三五成群，聚在大树，于是三五成群，聚在大树下，或站着，或随即坐在石头上，手持那把扇子，边唠嗑边乘凉。孩

2、子们却在周下，或站着，或随即坐在石头上，手持那把扇子，边唠嗑边乘凉。孩子们却在周围跑跑跳跳，热得满头大汗，不时听到围跑跑跳跳，热得满头大汗，不时听到“强子，别跑了，快来我给你扇扇强子，别跑了，快来我给你扇扇”。孩。孩子们才不听这一套，跑个没完，直到累气喘吁吁，这才一跑一踮地围过了，这时子们才不听这一套，跑个没完，直到累气喘吁吁，这才一跑一踮地围过了，这时母亲总是，好似生气的样子，边扇边训，母亲总是，好似生气的样子，边扇边训，“你看热的，跑什么？你看热的，跑什么？”此时这把蒲扇，此时这把蒲扇，是那么凉快，那么的温馨幸福，有母亲的味道！蒲扇是中国传统工艺品，在是那么凉快，那么的温馨幸福，有母亲的味

3、道！蒲扇是中国传统工艺品，在我国已有三千年多年的历史。取材于棕榈树，制作简单，方便携带，且蒲扇的表我国已有三千年多年的历史。取材于棕榈树，制作简单，方便携带，且蒲扇的表面光滑，因而，古人常会在上面作画。古有棕扇、葵扇、蒲扇、蕉扇诸名，实即面光滑，因而，古人常会在上面作画。古有棕扇、葵扇、蒲扇、蕉扇诸名，实即今日的蒲扇，江浙称之为芭蕉扇。六七十年代，人们最常用的就是这种，似圆非今日的蒲扇，江浙称之为芭蕉扇。六七十年代，人们最常用的就是这种，似圆非圆，轻巧又便宜的蒲扇。蒲扇流传至今，我的记忆中，它跨越了半个世纪，圆，轻巧又便宜的蒲扇。蒲扇流传至今，我的记忆中，它跨越了半个世纪，也走过了我们的半个人

4、生的轨迹，携带着特有的念想，一年年，一天天，流向长也走过了我们的半个人生的轨迹，携带着特有的念想，一年年，一天天，流向长长的时间隧道，袅长的时间隧道，袅医学微生物学PPT课件 四体四体一一 螺旋体螺旋体( (spirochete ) )l概念：螺旋体是一类细长、柔软、一端或两端弯曲成概念：螺旋体是一类细长、柔软、一端或两端弯曲成螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物。螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物。基本结构与基本结构与细菌相似，例如有细胞壁、原始核质，以二分裂方式细菌相似，例如有细胞壁、原始核质，以二分裂方式繁殖和对抗生素等药物敏感等繁殖和对抗生素等药物敏感等l主要类型：主要类型：l 疏螺旋体

5、属：疏螺旋体属： 回归热螺旋体回归热螺旋体 伯氏螺旋体伯氏螺旋体 密螺旋体属：密螺旋体属： 梅毒螺旋体梅毒螺旋体 钩端螺旋体属：钩端螺旋体属： 钩端螺旋体钩端螺旋体2024/7/292 四体四体 四体四体 四体四体 四体四体二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性传播途径传播途径经粘膜或破损皮肤进入经粘膜或破损皮肤进入;经胎盘垂直传播经胎盘垂直传播传染源传染源鼠和猪鼠和猪致病物质致病物质-类似细菌内毒素与外毒素类似细菌内毒素与外毒素1内毒素样物质内毒素样物质(ELS)或称脂多糖样物质或称脂多糖样物质(LLS)2溶血素溶血素 3细胞毒性因子细胞毒性因子(CTF) 4. 细胞致病作用细胞致病作用(CP

6、E)物质物质2024/7/296 四体四体钩端螺旋体病钩端螺旋体病-一种人畜共患传染病一种人畜共患传染病所致疾病所致疾病疾病特点疾病特点起病急、高热、乏力、全身酸痛、起病急、高热、乏力、全身酸痛、眼结眼结眼结眼结膜充血、腓肠肌压痛、浅表淋巴结肿大膜充血、腓肠肌压痛、浅表淋巴结肿大膜充血、腓肠肌压痛、浅表淋巴结肿大膜充血、腓肠肌压痛、浅表淋巴结肿大2024/7/297 四体四体免疫性免疫性疾病后可获得抗疾病后可获得抗同型同型钩体的持久免疫力，钩体的持久免疫力，体液免疫为主体液免疫为主2024/7/298 四体四体三、微生物学检查法三、微生物学检查法1.病原体检测病原体检测 发病发病10天内取血液

7、天内取血液;1周后取尿液周后取尿液;有脑膜刺激者取脑脊液有脑膜刺激者取脑脊液 直接镜检（直接镜检（FontanaFontana镀银染色法，暗视野查活菌）镀银染色法，暗视野查活菌）镀银染色法，暗视野查活菌）镀银染色法，暗视野查活菌）分离与鉴定分离与鉴定 接种至接种至KorthofKorthof培养基，置培养基，置2828孵育。孵育。 阳阳性性标标本本在在2 2周周内内可可见见培培养养液液呈呈轻轻度度混混浊浊暗暗视视野野显显微微镜检查镜检查有有则用已知诊断血清鉴定其血清群和血清型。则用已知诊断血清鉴定其血清群和血清型。阴性标本阴性标本: :分离培养应连续观察分离培养应连续观察4 4个月，仍无生长者

8、。个月，仍无生长者。动物接种动物接种 幼龄豚鼠或金地鼠腹腔幼龄豚鼠或金地鼠腹腔分子生物学方法分子生物学方法 2024/7/299 四体四体2.血清学诊断血清学诊断病初和发病后第病初和发病后第3 34 4周各采血清一次。有脑膜刺激周各采血清一次。有脑膜刺激 症状者采取脑脊液症状者采取脑脊液方法方法: : 显微镜凝集试验显微镜凝集试验(MAT)(MAT) 间接凝集试验间接凝集试验 以乳胶以乳胶 ( (聚苯乙烯聚苯乙烯) )或活性炭微粒为载体，或活性炭微粒为载体， 吸附钩端螺旋体可溶性抗原作为指示物吸附钩端螺旋体可溶性抗原作为指示物2024/7/2910 四体四体四、防治原则四、防治原则防：防：防鼠

9、、灭鼠，加强对带菌家畜的管理。防鼠、灭鼠，加强对带菌家畜的管理。在在常常年年流流行行地地区区，对对易易感感人人群群和和与与疫疫水水接接触触者者宜宜接接种包含当地流行株在内的多价钩端螺旋体疫苗。种包含当地流行株在内的多价钩端螺旋体疫苗。治：治：首选青霉素首选青霉素2024/7/2911 四体四体梅毒螺旋体梅毒螺旋体形状：两端尖直。形状：两端尖直。结构：与钩端螺旋体相同。结构：与钩端螺旋体相同。 动力：移行、滚动等方式运动。动力：移行、滚动等方式运动。 染色法：与钩端螺旋体相同。染色法：与钩端螺旋体相同。培培养养：不不能能在在无无生生命命的的人人工工培培养养基基上上生生长长繁繁殖殖，但但可可用用棉

10、棉尾尾兔兔上上皮细胞或接种家兔培养皮细胞或接种家兔培养 。 l暗视野显微镜下的梅毒暗视野显微镜下的梅毒螺旋体螺旋体l镀银染色法染色的梅毒镀银染色法染色的梅毒螺旋体螺旋体 四体四体致病物质：致病物质：l荚膜样物质、黏附因子、透明质酸酶荚膜样物质、黏附因子、透明质酸酶致病过程及临床特征：致病过程及临床特征：l获得性梅毒和先天性梅毒获得性梅毒和先天性梅毒l致病性与免疫性致病性与免疫性 四体四体获得性梅毒病程及特征：获得性梅毒病程及特征：-I期期 梅梅 毒毒 ： 外外 生生 殖殖 器器 硬硬 下下 疳疳 （ hard chancre），传染性强。），传染性强。-II期期 梅梅 毒毒 ： 皮皮 肤肤 及

11、及 粘粘 膜膜 梅梅 毒毒 疹疹（syphilid），传染性强、组织破坏小。），传染性强、组织破坏小。-III期期梅梅毒毒：动动脉脉瘤瘤、脊脊髓髓痨痨或或全全身身麻麻痹，传染性小，组织破坏大。痹，传染性小，组织破坏大。 四体四体l梅毒梅毒疹疹l外外生生殖殖器器硬硬下下疳疳l心心内内梅梅毒毒瘤瘤 四体四体先天性梅毒先天性梅毒：l流流产产、早早产产或或死死胎胎，新新生生儿儿皮皮肤肤病病变变、马马鞍鞍鼻鼻、锯锯齿齿牙牙、骨骨软软骨骨炎炎、先先天天性性耳耳聋聋等等体体征征，俗俗称称梅梅毒儿。毒儿。 l骨软骨炎骨软骨炎l锯齿锯齿牙牙 四体四体免疫性：免疫性：l传染性免疫，以迟发型超敏反应为主的传染性免疫

12、，以迟发型超敏反应为主的细胞免疫抗感染作用较大。细胞免疫抗感染作用较大。 四体四体l微生物学检查及防治原则微生物学检查及防治原则微生物学检查微生物学检查-病病原原学学检检查查：（一一期期）硬硬下下疳疳、（二二期期）梅梅毒毒疹疹渗渗出出液，用暗视野显微镜、直接免疫荧光法或液，用暗视野显微镜、直接免疫荧光法或ELISA检查。检查。-血血清清学学检检查查：RPR或或TRUST初初筛筛，TPHA或或TPPA确确诊。诊。防治原则防治原则-预防：加强性卫生教育和性卫生，但目前尚无疫苗。预防：加强性卫生教育和性卫生，但目前尚无疫苗。-治疗：青霉素类药物长程治疗。治疗：青霉素类药物长程治疗。 四体四体二二 支

13、原体支原体( (mycoplasma) )l没有细胞壁没有细胞壁的原核细胞型微生物，多形性的原核细胞型微生物，多形性l细胞膜含固醇细胞膜含固醇l能通过能通过0.45 m滤菌器滤菌器l二分裂繁殖，含二分裂繁殖，含DNA与与RNAl能在无生命培养基中繁殖的最小原核细胞型能在无生命培养基中繁殖的最小原核细胞型微生物微生物 l概念：是一类无细胞壁，形态高度多形性，概念：是一类无细胞壁，形态高度多形性，能通过细菌滤器，能在无生命培养基上生长能通过细菌滤器，能在无生命培养基上生长的最小原核细胞型微生物的最小原核细胞型微生物2024/7/2919 四体四体致病类别致病类别l肺炎支原体（肺炎支原体（M.pne

14、umoniae)l人型支原体人型支原体(M.hominis)l生殖器支原体生殖器支原体(M.genitalium)l穿透支原体穿透支原体(M.penetraus)l溶脲脲原体溶脲脲原体(U.urealyticum) l发酵支原体（发酵支原体（F. pneumoniae)2024/7/2920 四体四体生物学性状生物学性状l形态与结构形态与结构 最小，最小，0.20.3m 多形性：多形性：球形，双球状，丝状球形，双球状，丝状（无细胞壁）（无细胞壁） 细胞膜含有大量固醇细胞膜含有大量固醇 特殊结构：荚膜，顶端结构，微丝特殊结构：荚膜，顶端结构，微丝 繁殖方式：二分裂，出芽等繁殖方式：二分裂，出芽等

15、 染色方法：染色方法：Giemsa染色染色 淡紫色淡紫色 革兰染色阴性革兰染色阴性2024/7/2921 四体四体培养培养l营养要求比一般细菌高营养要求比一般细菌高 l在在pH7.88.0间生长，低于间生长，低于7.0则死亡（溶脲脲原则死亡（溶脲脲原体体pH6.06.5）l生长缓慢生长缓慢l典型的菌落呈典型的菌落呈荷包蛋样荷包蛋样 l液体培养基澄清（以颜色改变作为生长现象）液体培养基澄清（以颜色改变作为生长现象）2024/7/2922 四体四体抵抗力抵抗力l无细胞壁，对理化因素比较敏感无细胞壁，对理化因素比较敏感l对青霉素等耐药对青霉素等耐药（无细胞壁）（无细胞壁）l对干扰蛋白质合成抗生素敏感

16、（红霉素等）对干扰蛋白质合成抗生素敏感（红霉素等）2024/7/2923 四体四体致病性致病性l致病性致病性 支原体支原体 致病性致病性 肺炎支原体肺炎支原体 （儿童）原发性非典型肺炎（儿童）原发性非典型肺炎、支气管炎支气管炎 表面感染表面感染人型支原体人型支原体 泌尿生殖道感染泌尿生殖道感染 表面感染表面感染生殖器支原体生殖器支原体 泌尿生殖道感染泌尿生殖道感染 表面感染表面感染穿透支原体穿透支原体 多见于艾滋病多见于艾滋病 入血入血溶脲脲原体溶脲脲原体 泌尿生殖道感染，垂直传播泌尿生殖道感染，垂直传播 表面感染表面感染发酵支原体发酵支原体 关节炎关节炎 表面感染表面感染2024/7/292

17、4 四体四体一、肺炎支原体一、肺炎支原体l感染呈全球性分布，主要侵犯呼吸系统感染呈全球性分布，主要侵犯呼吸系统,借滑行运借滑行运动穿过粘膜上皮细胞纤毛屏障，主要粘附因子为一动穿过粘膜上皮细胞纤毛屏障，主要粘附因子为一类对胰酶敏感的表面蛋白，称类对胰酶敏感的表面蛋白，称Pl蛋白。蛋白。 四体四体二、解脲脲原体二、解脲脲原体l也也称称溶溶脲脲脲脲原原体体，是是1954年年Shepard首首先先从从非非淋淋菌菌性性尿尿道道炎炎(NGU)患患者者的的尿尿道道分分泌泌物物中中分分离离获获得得，因因其其分分解解尿尿素素的的特特性性命命名名为为解解脲脲脲脲原原体体。在在分分类类学学上上属属人人支支原原体体科

18、科脲脲原原体体属属。是是人人类类泌泌尿尿生生殖殖道道最最常常见见的的寄寄生生菌菌之之一一，近近年年来来研研究究发发现现，它它与与多多种种疾疾病病有有关关，故故引引起起国国内内外外有有关关学学者的广泛重视。者的广泛重视。 四体四体1.寄寄居居泌泌尿尿生生殖殖道道，传传播播途途径径为为性性接接触触和和母母婴婴传传播播。致致病病机机制制与与侵侵袭袭性性酶酶有有关关。吸吸附附后后产产生生磷磷脂脂酶酶分分解解胞胞膜膜中中的的磷磷脂脂，脲脲酶酶分分解解尿尿素素产产氨氨，影影响响宿宿主主细细胞胞生生物物合合成成。产产生生IgA蛋蛋白白酶酶，破破坏坏IgA的的局局部部抗感染作用，有利于粘附和致病。抗感染作用，

19、有利于粘附和致病。 四体四体2.引引起起非非淋淋菌菌性性尿尿道道炎炎(NGU) ，上上行行感感染染，可可引引起起前前列列腺腺炎炎或或附附睾睾炎炎；阴阴道道炎炎和和宫宫颈颈炎炎，并并可可导导致致流流产产。因因为为与与人人精精子子膜膜有有共共同同抗抗原原，对对精精子子可可造造成免疫损伤而致不育。成免疫损伤而致不育。 四体四体三三 立克次体立克次体( (rickettsia) )共同特点共同特点l多形态，革兰染色阴性，大小介于细菌和病毒之间多形态，革兰染色阴性，大小介于细菌和病毒之间l专性寄生专性寄生(活细胞内寄生，似病毒活细胞内寄生，似病毒）、二分裂繁殖）、二分裂繁殖（似细菌似细菌）lDNA、RN

20、A及复杂酶系统，对多种抗生素敏感（及复杂酶系统，对多种抗生素敏感（似似细菌细菌）l l与节肢动物关系密切，与节肢动物关系密切，与节肢动物关系密切，与节肢动物关系密切，寄生在吸血节肢动物体内，或寄生在吸血节肢动物体内，或为寄生宿主、或为储存宿主、或同时为传播媒介为寄生宿主、或为储存宿主、或同时为传播媒介l大多是人兽共患病的病原体大多是人兽共患病的病原体2024/7/2929 四体四体一、生物学性状一、生物学性状形态与染色形态与染色 l多形态性，球杆状或杆状多形态性，球杆状或杆状 柯克斯体更小，多形性更明显柯克斯体更小，多形性更明显l革兰染色阴性，但不易着色革兰染色阴性，但不易着色l姬姆萨染色（紫

21、色）姬姆萨染色（紫色）结构与组成结构与组成l细胞壁：外膜、肽聚糖、蛋白脂质多糖细胞壁：外膜、肽聚糖、蛋白脂质多糖l粘液层、微荚膜粘液层、微荚膜l宿主细胞内排列不规则宿主细胞内排列不规则 2024/7/2930 四体四体培养特性培养特性 l动物接种、鸡胚接种、细胞培养动物接种、鸡胚接种、细胞培养贝纳柯克斯体在小鼠脾细胞空泡内繁殖贝纳柯克斯体在小鼠脾细胞空泡内繁殖贝纳柯克斯体在小鼠脾细胞空泡内繁殖贝纳柯克斯体在小鼠脾细胞空泡内繁殖2024/7/2931 四体四体l1 普氏立克次体：普氏立克次体：l（1）传染源：患者（唯一传染源）传染源：患者（唯一传染源）l（2）传播媒介：）传播媒介：人虱人虱l（3

22、）所致疾病：）所致疾病：流行性斑疹伤寒（虱传型斑疹伤寒）流行性斑疹伤寒（虱传型斑疹伤寒）l（4）传播途径：）传播途径：病人病人粪便粪便人虱人虱另一人另一人（抓破的伤口进入体内）（抓破的伤口进入体内）流行性斑疹伤寒流行性斑疹伤寒2024/7/2932 四体四体l2 斑疹伤寒立克次体：斑疹伤寒立克次体：l（1）传染源：患鼠，患者）传染源：患鼠，患者l（2）传播媒介：）传播媒介：鼠虱，鼠蚤鼠虱，鼠蚤l（3）所致疾病：）所致疾病：地方性斑疹伤寒（鼠传型斑疹伤寒）地方性斑疹伤寒（鼠传型斑疹伤寒）l（4）传播途径：）传播途径：鼠粪中立克次体鼠粪中立克次体破损皮肤，口，破损皮肤，口，鼻眼黏膜鼻眼黏膜地方性斑

23、疹伤寒地方性斑疹伤寒体体体体内内内内2024/7/2933 四体四体( (三三) )微生物检验微生物检验1.1.标本采集标本采集(1)(1)病人血液标本：发热期均有立克次体血症，病人血液标本：发热期均有立克次体血症， 在急性期较易检出立克次体。争取在用抗生在急性期较易检出立克次体。争取在用抗生 素前采血，立即床侧接种。素前采血，立即床侧接种。(2)(2)活检或尸检材料：肺、肝、脾、淋巴结、心活检或尸检材料：肺、肝、脾、淋巴结、心 瓣膜等标本。瓣膜等标本。 四体四体2.2.标本直接检查标本直接检查(1)免免疫疫荧荧光光检检测测 用用于于脏脏器器检检查查。制制备备标标本本片片薄薄而而均均匀匀，组组

24、织织结结构构清清晰晰，固固定定后后用用荧荧光光抗抗体体染染色色, 常常见见脾脾、肺肺及及心心瓣瓣膜膜中中有有立立克克次次体体，也也可可在在肝肝、肾肾及及皮皮疹疹活活检组织中检出。检组织中检出。(2)核核酸酸检检测测 PCR敏敏感感性性高高，所所需需样样品品量量只只需需ELISA实实验验的的15。以以编编码码17kD蛋蛋白白的的基基因因和和编编码码普普氏氏和和莫莫氏氏立立克克次次体体169kD蛋白的基因作为扩增靶区。蛋白的基因作为扩增靶区。 四体四体3 3分离培养分离培养(1)动物接种动物接种 选选用用健健康康雄雄性性豚豚鼠鼠接接种种以以便便观观察察阴阴囊囊肿肿胀胀现现象象。每每日日测测体体温温

25、，至至40发发热热时时采采血血或或脏脏器器悬悬液液、接接种种鸡鸡胚胚卵卵黄黄囊囊或或细细胞胞培培养养以以分分离离立立克次体；克次体； 感感染染莫莫氏氏立立克克次次体体豚豚鼠鼠在在发发热热12日日内内出出现现阴阴囊囊红红肿肿，解解剖剖可可见见腹腹股股沟沟淋淋巴巴结结肿肿大大、充充血血、脾脾大大2-3倍倍，有有腹腹水水；有有阴阴囊囊反反应应者者，睾睾丸丸有有小小出出血血点点，鞘鞘膜膜充充血血并并有有浆浆液液性性渗渗出出物物等。鞘膜涂片可查到立克次体。等。鞘膜涂片可查到立克次体。 四体四体(2)(2)鉴定鉴定l用用免免疫疫荧荧光光法法鉴鉴定定感感染染动动物物脏脏器器、鸡鸡胚胚卵卵黄黄囊囊、细细胞胞培

26、培养养物物中中的的特特异异性性抗抗原原以以已已知知抗抗原原测测定定动动物物恢恢复复期期血血清清中中的的相相应应抗抗体体。必必要要时时用用补补体体结结合合试试验验、微微量量凝凝集集试试验验等等，作群和种的鉴定。作群和种的鉴定。 四体四体(3)(3)分离株繁殖及保存分离株繁殖及保存鸡胚卵黄囊培养鸡胚卵黄囊培养 收获卵黄囊，经涂片染收获卵黄囊，经涂片染色镜检色镜检, 含立克次体较多而又未发现细菌含立克次体较多而又未发现细菌的卵黄囊膜，或将其作成适当浓度的悬的卵黄囊膜，或将其作成适当浓度的悬液置液置-70冰箱保存，或冰冻干燥保藏；冰箱保存，或冰冻干燥保藏；细胞培养：选鸡胚、成纤维、人羊膜、细胞培养：选

27、鸡胚、成纤维、人羊膜、HeLa等细胞，接种培养、鉴定后将立克等细胞，接种培养、鉴定后将立克次体大量繁殖的感染细胞置次体大量繁殖的感染细胞置-70储存。储存。 四体四体4 4抗体检测抗体检测立克次体病常用的血清学诊断方法除外斐立克次体病常用的血清学诊断方法除外斐反应、间接免疫荧光反应、间接免疫荧光(IFA )试验、酶联免试验、酶联免疫吸附试验疫吸附试验(ELISA)外，还有补体结合外，还有补体结合(CF)试验、微量凝集试验、微量凝集(MA)试验、间接血凝试验、间接血凝(IHA)试验、胶乳凝集试验、胶乳凝集(LA)试验等试验等 。 四体四体(1)(1)外斐反应外斐反应除除Q热、立克次体痘及罗沙利马

28、体感染为阴性热、立克次体痘及罗沙利马体感染为阴性外，其他为阳性。外，其他为阳性。患者患者OX凝集素上升较晚，在病程凝集素上升较晚，在病程2周左右方出周左右方出现阳性，病程中双份血清试验，若效价有现阳性，病程中双份血清试验，若效价有4倍倍增长，方有诊断意义。增长，方有诊断意义。 四体四体(2)IFA试验试验为为现现在在诊诊断断立立克克次次体体病病常常用用的的方方法法。用用已已知知立立 克克 次次 体体 抗抗 原原( (感感 染染 鸡鸡 胚胚 卵卵 黄黄 囊囊 或或 细细 胞胞 培培 养养悬悬 液液) )制制 片片 ， 以以 低低 稀稀 释释 度度 的的 病病 人人 血血 清清 初初 筛筛 ，有有

29、呈呈典典型型立立克克次次体体形形态态的的明明亮亮荧荧光光颗颗粒粒者者，判判为为阳阳性性。再再将将病病程程早早期期及及晚晚期期血血清清分分别别作作双双 倍倍 或或4 4倍倍 稀稀 释释 以以 测测 效效 价价 ， 如如 呈呈4 48 8倍倍 增增 长长者可明确诊断。者可明确诊断。 四体四体(3)ELISAl检测检测IgMIgM抗体对早期诊断有价值。抗体对早期诊断有价值。l立立克克次次体体抗抗原原吸吸附附于于载载体体。泛泛影影葡葡胺胺梯梯度度离离心心纯纯化化抗抗原原为为优优，检检出出血血清清的的抗抗体体效效价价高高，纸纸上上ELISAELISA测测定定抗抗体体，方方法法简简便便。将将感感染染卵卵黄

30、黄囊囊悬悬液液加加于于玻玻片片( (经经氯氯仿仿甲甲醇醇洗洗净净) )上上，凉凉干干、固固定定，加加稀稀释释血血清清于于抗抗原原点点上上，每每张张玻玻片片上上包包括括阳阳性性和和阴阴性性对对照照，加加酶酶标标兔兔抗抗人人IgM/GIgM/G于于抗抗原原血血清清点点作作用用后后，将将浸浸透透新新鲜鲜配配制制的的底底物物无无灰灰滤滤纸纸覆覆盖盖在在玻玻片片上上约约4-64-6minmin，可可见见滤滤纸纸条条上上阳阳性性对对照照点点位位置置显显紫紫棕棕色色，取取下下滤滤纸纸条条( (即即终终止止反反应应) )，观观察察是是否否显显色色，与与对对照照比比较较判判定定结果。此法简便，并可保存实验记录。

31、结果。此法简便，并可保存实验记录。 四体四体(4)CF试验试验 CF试验原来是立克次体病血清学诊断的经典试试验原来是立克次体病血清学诊断的经典试验，虽然敏感性不如验，虽然敏感性不如IFA和和 ELISA，但非常特异。但非常特异。一般在立克次体病发病一周内，血清中即有一般在立克次体病发病一周内，血清中即有CF抗抗体出现，以后逐渐上升，至第体出现，以后逐渐上升，至第3周达最高峰，然后周达最高峰，然后逐渐降至较低的效价，并可保持几年不消失，但逐渐降至较低的效价，并可保持几年不消失，但也有在病后几周即转阴性者。病人恢复期血清与也有在病后几周即转阴性者。病人恢复期血清与斑疹伤寒群及斑点热群立克次体可溶性

32、抗原试验斑疹伤寒群及斑点热群立克次体可溶性抗原试验的阳性结果，只能说明该群立克次体的感染的阳性结果，只能说明该群立克次体的感染 。 四体四体l3 恙虫病立克次体：恙虫病立克次体：l（1）传染源：携带病原体野鼠，家鼠）传染源：携带病原体野鼠，家鼠l（2）传播媒介：）传播媒介：恙螨恙螨l（3）所致疾病：）所致疾病：恙虫病恙虫病l（4）传播途径：）传播途径：带菌鼠带菌鼠局部红色丘疹局部红色丘疹水疱，中央溃疡，形成水疱，中央溃疡，形成黑黑色焦痂色焦痂恙螨幼虫叮咬恙螨幼虫叮咬人体人体全身淋巴结肿大，肺，肝，全身淋巴结肿大，肺，肝，脾，脑损害脾，脑损害2024/7/2944 四体四体l一类严格细胞内寄生，

33、具有独特发育周期，并一类严格细胞内寄生，具有独特发育周期，并能通过细菌滤器的原核细胞型微生物能通过细菌滤器的原核细胞型微生物。l对人类致病的衣原体对人类致病的衣原体 沙眼衣原体沙眼衣原体 肺炎嗜衣原体肺炎嗜衣原体 鹦鹉热嗜衣原体鹦鹉热嗜衣原体四四 衣原体衣原体 四体四体l衣原体的发育周期衣原体的发育周期 原体原体（Elementary body, EB）：小而致密的颗粒结构，：小而致密的颗粒结构，是发育成熟的衣原体。具有强感染性，无繁殖能力。当进是发育成熟的衣原体。具有强感染性，无繁殖能力。当进入宿主易感细胞后，原体增殖成为网状体。入宿主易感细胞后，原体增殖成为网状体。Giemsa染色呈染色呈

34、紫色，紫色，Macchiavello染色呈红色。染色呈红色。 网状体（网状体（reticulate body，RB)亦称始体（亦称始体（Initial body）：大而疏松的结构，大而疏松的结构，无胞壁，以二分裂方式繁殖，增殖成许无胞壁，以二分裂方式繁殖，增殖成许多子代原体。网状体是衣原体发育周期中的繁殖型，不具多子代原体。网状体是衣原体发育周期中的繁殖型，不具感染性，感染性，Macchivello染色呈蓝色染色呈蓝色。 四体四体l包涵体包涵体(inclusion body) 衣原体在宿主细衣原体在宿主细胞内增殖后形成的网状体和子代原体的空胞内增殖后形成的网状体和子代原体的空泡，经染色后可在光

35、镜下观察到，被称为泡，经染色后可在光镜下观察到，被称为包涵体。包涵体。l包涵体经包涵体经Giemsa染色后呈深蓝色，经碘染色后呈深蓝色，经碘染色呈褐色。染色呈褐色。 四体四体2024/7/2948 四体四体原体和网状体的比较原体和网状体的比较性状性状原体原体网状体网状体大小（大小（m） 0.20.4 0.51.0 细胞壁细胞壁-代谢活性代谢活性-胞外稳定性胞外稳定性强强弱弱感染性感染性强强无无繁殖能力繁殖能力无无强强RNA:DNA比比 1:13:1 四体四体l培养特性培养特性 鸡胚卵黄囊鸡胚卵黄囊 组织细胞培养组织细胞培养Hela细胞、细胞、McCoy细胞等细胞等l抗原结构抗原结构n属特异性抗

36、原：脂多糖属特异性抗原：脂多糖n种特异性抗原：位于主要外膜蛋白种特异性抗原：位于主要外膜蛋白(MOMP)n型特异性抗原：也存在于型特异性抗原：也存在于MOMP上上 四体四体二二、致病性与免疫性、致病性与免疫性l致病机制致病机制n借助表面脂多糖和蛋白质吸附于易感细胞。借助表面脂多糖和蛋白质吸附于易感细胞。 n能能产产生生类类似似G菌菌内内毒毒素素的的毒毒性性物物质质，能能抑抑制制宿宿主主细细胞胞代代谢谢，直直接接破坏宿主细胞。破坏宿主细胞。nMOMP能阻止吞噬体与溶酶体融合能阻止吞噬体与溶酶体融合。nMOMP表表位位易易变变异异，在在体体内内可可逃逃避避特特异异性性抗抗体体的的中中和和作作用用而

37、而继继续续感染细胞感染细胞。n热热休休克克蛋蛋白白（HSP）能能刺刺激激机机体体巨巨噬噬细细胞胞产产生生TNF-、IL-1、IL-6等炎症性细胞因子等炎症性细胞因子。 四体四体l免疫性免疫性 感染后机体感染后机体产生特异性细胞免疫和体液产生特异性细胞免疫和体液免疫，以细胞免疫为主免疫，以细胞免疫为主，但保护性不强，但保护性不强，维持时间短，故常造成持续感染、反复维持时间短，故常造成持续感染、反复感染和隐性感染。感染和隐性感染。 四体四体致病性致病性l1 沙眼衣原体沙眼亚种沙眼衣原体沙眼亚种 沙眼：沙眼：眼眼 眼，眼眼，眼 手手 眼传播眼传播 包涵体性结膜炎：包涵体性结膜炎：婴儿产道感染，成人性

38、传播，婴儿产道感染，成人性传播， 手手 眼，污染的泳池水眼，污染的泳池水 泌尿生殖道感染：泌尿生殖道感染：性传播疾病性传播疾病 2 性病淋巴肉芽肿亚种：性病淋巴肉芽肿亚种： 男性：腹股沟淋巴结化脓性炎症男性：腹股沟淋巴结化脓性炎症 慢性淋巴肉芽肿慢性淋巴肉芽肿 女性：会阴，肛门，和直肠形成肠皮肤瘘管女性：会阴，肛门，和直肠形成肠皮肤瘘管 3 肺炎衣原体：肺炎衣原体：主要引起青少年急性呼吸道感染主要引起青少年急性呼吸道感染2024/7/2953 四体四体四四、防治原则、防治原则预预防防重重点点是是注注意意个个人人卫卫生生，避避免免直接或间接的接触传染。直接或间接的接触传染。治治疗疗药药物物选选用

39、用强强力力霉霉素素、罗罗红红霉霉素、阿奇霉素、加替沙星等素、阿奇霉素、加替沙星等。 四体四体真菌真菌(fungus)：真核细胞型真核细胞型微生物微生物特点：特点：核膜和核仁核膜和核仁( (细胞核细胞核) )完整的细胞完整的细胞器器( (胞浆胞浆) )单细胞单细胞（少数少数）或）或多细胞多细胞（多（多数数）生存方式生存方式：腐生腐生或或寄生寄生繁殖方式繁殖方式：有性有性或或无性无性 概概 述述 四体四体分布广泛、种类繁多分布广泛、种类繁多多数有益多数有益少数有害：医学（病原）真菌少数有害：医学（病原）真菌400400种种 常见的有常见的有5050100100种种目前真菌病呈明显上升趋势：目前真菌

40、病呈明显上升趋势：1.1.抗生素、抗肿瘤药物、免疫抑制剂等的滥用抗生素、抗肿瘤药物、免疫抑制剂等的滥用2.2.器官移植、介入性治疗等新型技术的开展器官移植、介入性治疗等新型技术的开展3.3.艾滋病、糖尿病、恶性肿瘤等疾病造成宿主免疫艾滋病、糖尿病、恶性肿瘤等疾病造成宿主免疫功能低下功能低下第一节第一节 真菌的生物学性状真菌的生物学性状 四体四体形态：多种多样形态：多种多样 有有典型的典型的核结构和细胞器核结构和细胞器按形态、结构分为按形态、结构分为两类两类：单细胞真菌单细胞真菌多细胞真菌多细胞真菌形态与结构形态与结构 四体四体l圆形或椭圆形圆形或椭圆形l包括：包括：-酵酵母母型型真真菌菌：无无

41、菌菌丝丝，母母细细胞胞以以芽芽生生方方式式繁繁殖殖，菌菌落落与与细菌的菌落相似。细菌的菌落相似。-类类酵酵母母型型真真菌菌：母母细细胞胞以以芽芽生生方方式式繁繁殖殖，出出芽芽产产生生的的芽芽生生孢孢子子持持续续延延长长，但但不不断断裂裂、不不与与母母细细胞胞脱脱离离，产产生生相相互互连连接接成成藕藕节节状状较较长长的的细细胞胞链链，可可伸伸入入培培养养基基内内，称称假假菌菌丝丝 （pseudohypha）。单细胞真菌单细胞真菌 四体四体l基本结构：基本结构：菌丝菌丝和和孢子孢子-菌菌丝丝（hypha）：孢孢子子生生出出嫩嫩芽芽，称称为为芽芽管管管逐渐延长呈丝状，称为菌丝。管逐渐延长呈丝状，称为

42、菌丝。 -孢孢子子（spore）：真真菌菌的的生生殖殖结结构构，由由生生殖殖菌丝产生。菌丝产生。多细胞真菌多细胞真菌 四体四体菌丝体（菌丝体（mycelium）：菌丝交织成团）：菌丝交织成团l根据功能不同分为：根据功能不同分为： 营养菌丝（营养菌丝（vegetative mycelium） 气生菌丝（气生菌丝（aerial mycelium） 生殖菌丝（生殖菌丝（reproductive mycelium）菌菌 丝丝 四体四体 真菌的有隔、无隔菌丝（真菌的有隔、无隔菌丝（400）根据隔膜的消长分为：根据隔膜的消长分为：有隔菌丝（大部分病原性丝状菌）有隔菌丝（大部分病原性丝状菌）无隔菌丝无隔菌丝

43、 四体四体根据形态不同分为：根据形态不同分为：单纯菌丝单纯菌丝 球拍状菌丝球拍状菌丝 破梳状菌丝破梳状菌丝 螺旋状菌丝螺旋状菌丝 结节状菌丝结节状菌丝 鹿角状菌丝等鹿角状菌丝等鉴别和分类鉴别和分类的依据的依据 四体四体 真菌的各种菌丝真菌的各种菌丝 四体四体 生生殖殖结结构构，由由生生殖殖菌菌丝丝产产生生，是是鉴鉴定定和和分分类的主要依据。类的主要依据。l无性孢子无性孢子 不不经经两两性性细细胞胞配配合合而而产产生生的的孢孢子子。病病原原性性真真菌大多数产生无性孢子。菌大多数产生无性孢子。l有性孢子有性孢子 细细胞胞间间配配合合（质质配配和和核核配配）后后产产生生，绝绝大大多多数为非致病性真菌

44、所具有。数为非致病性真菌所具有。孢孢 子子 四体四体l接合孢子接合孢子 l子囊孢子子囊孢子 l担担（子）（子）孢子孢子有性孢子有性孢子 四体四体l叶状孢子（叶状孢子（thallospore） 芽生孢子（芽生孢子（blastospore） 关节孢子（关节孢子（arthrospore） 厚膜孢子（厚膜孢子（chlamydospore）l分生孢子分生孢子 （conidia） 大分生孢子（大分生孢子（macroconidia） 小分生孢子（小分生孢子（microconidia）l孢子囊孢子（孢子囊孢子（sporangiospore）无性孢子无性孢子 四体四体 真菌的叶状孢子真菌的叶状孢子 四体四体 真

45、菌的大分生孢子真菌的大分生孢子 四体四体真菌的小分生孢子真菌的小分生孢子 四体四体 真菌的子囊及子囊孢子真菌的子囊及子囊孢子 四体四体l依靠孢子及菌丝进行繁殖依靠孢子及菌丝进行繁殖l繁殖方式繁殖方式： 无性繁殖无性繁殖真菌的主要繁殖方式真菌的主要繁殖方式 有性繁殖有性繁殖（二）真菌的繁殖与培养（二）真菌的繁殖与培养 四体四体无性繁殖主要包括：无性繁殖主要包括：1.1.芽生芽生 母细胞发芽产生。常见于酵母型和类酵母母细胞发芽产生。常见于酵母型和类酵母型真菌。型真菌。2.2.裂殖裂殖 母细胞二分裂产生。如裂殖酵母。母细胞二分裂产生。如裂殖酵母。3.3.芽管芽管 萌发芽管，伸延形成菌丝。萌发芽管，伸

46、延形成菌丝。4.4.隔殖隔殖 分生孢子梗形成一隔膜，原生质浓缩形成分生孢子梗形成一隔膜，原生质浓缩形成新孢子。新孢子。 四体四体培养特性培养特性培养基：营养要求不高，常用培养基：营养要求不高，常用沙氏葡萄糖琼脂沙氏葡萄糖琼脂（沙保弱）培养基（沙保弱）培养基（SDA）、马铃薯葡萄糖琼）、马铃薯葡萄糖琼脂培养基（脂培养基（PDA）、察氏培养基（）、察氏培养基（Czapek-Dox Agar）、脑心浸膏琼脂培养基（）、脑心浸膏琼脂培养基（BHI） 温度：温度：3737（酵母型和类酵母型真菌）（酵母型和类酵母型真菌） 25 252828（丝状真菌）（丝状真菌） 最适最适pH：4.04.06.06.0

47、生长速度：多数病原性真菌生长缓慢生长速度：多数病原性真菌生长缓慢 四体四体SDA培养基上，可形成培养基上，可形成3 3种类型菌落种类型菌落：1.1.酵母型菌落酵母型菌落（yeast type colony） 芽生孢子，无菌丝。如新生隐球菌芽生孢子，无菌丝。如新生隐球菌2.2.类类酵酵母母型型菌菌落落（酵酵母母样样菌菌落落）（yeast-like type colony） 呈藕节状细胞链的假菌丝。如白假丝酵母呈藕节状细胞链的假菌丝。如白假丝酵母3 3. .丝状型菌落丝状型菌落（filamentous type colony） 菌落形态和颜色可作为鉴定、分类的参考菌落形态和颜色可作为鉴定、分类的参

48、考依据。见于大多数依据。见于大多数丝状真菌丝状真菌第二节第二节 真菌的致病性与免疫性真菌的致病性与免疫性 四体四体l真菌感染真菌感染 l真菌性超敏反应真菌性超敏反应 l真菌毒素中毒真菌毒素中毒l肿瘤肿瘤 致病性致病性 四体四体真菌病（真菌病（mycoses）：）： 由真菌引起的感染，并表现临床症状由真菌引起的感染，并表现临床症状原发性感染：致病性真菌原发性感染：致病性真菌 球孢子菌（球孢子菌（coccidiodes） 皮炎芽生菌（皮炎芽生菌（blastomyoes dermatitidis） 组织胞浆菌（组织胞浆菌（histoplasma） 马尔尼菲青霉（马尔尼菲青霉（penicillium

49、marneffei）等）等继发性感染：机会致病性真菌继发性感染：机会致病性真菌 机体免疫功能显著下降时发生机体免疫功能显著下降时发生真菌感染真菌感染 四体四体按性质分类：按性质分类： 感染性超敏反应：感染性超敏反应： 感染，感染，型型 接触性超敏反应：接触性超敏反应： 吸入或食入，吸入或食入，型型按部位分类按部位分类: 皮肤超敏反应皮肤超敏反应 呼吸道超敏反应呼吸道超敏反应 消化道超敏反应消化道超敏反应 真菌性超敏反应真菌性超敏反应 四体四体来源：真菌代谢产生毒素，存在于农作物、来源：真菌代谢产生毒素，存在于农作物、食物或饲料中食物或饲料中表现：表现：1. 1. 肝、肾、神经、造血系统等损伤肝、肾、神经、造血系统等损伤2. 2. 致癌（黄曲霉毒素等）致癌（黄曲霉毒素等） 真菌真菌毒素中毒毒素中毒 四体四体非特异性免疫非特异性免疫 1.1.皮肤粘膜屏障作用皮肤粘膜屏障作用2.2.正常菌群拮抗作用（白假丝酵母菌）正常菌群拮抗作用（白假丝酵母菌）3.3.吞噬作用吞噬作用特异性免疫特异性免疫 1.1.细胞免疫细胞免疫2.2.体液免疫体液免疫 免疫性免疫性结束结束