实验室生物安全培训课件0625

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1、培训人：培训人：XXXXXX1目目 录录实验室生物安全的相关法律与规范实验室生物安全的相关法律与规范管理体系管理体系病源微生物，危险品管理病源微生物，危险品管理实验室生物安全危害实验室生物安全危害实验室生物安全防护实验室生物安全防护实验室生物安全基本操作规程实验室生物安全基本操作规程手卫生手卫生2 实验室生物安全的相关实验室生物安全的相关 法律与规范法律与规范3 世界卫生组织（世界卫生组织（WHO） WHO一直非常重视生物安全问题在国际事务中的重要性一直非常重视生物安全问题在国际事务中的重要性 1983年年 “实验室生物安全手册实验室生物安全手册”（第一版）（第一版）:l 将传染性微生物根据其

2、致病能力和传染的危险程度等划分为四类将传染性微生物根据其致病能力和传染的危险程度等划分为四类l 将生物实验室根据其设备和技术条件等划分为四级：（将生物实验室根据其设备和技术条件等划分为四级：（BSL 1-4）l 相应的操作程序也划分为四级（相应的操作程序也划分为四级（BSL 1-4）l 对四类微生物可操作的相应级别的实验室及程序进行了规定对四类微生物可操作的相应级别的实验室及程序进行了规定l 在该手册中，在该手册中，WHO鼓励各国针对自己国内的微生物实验室制定相应鼓励各国针对自己国内的微生物实验室制定相应 的生物安全条例，并愿为此提供指导的生物安全条例，并愿为此提供指导 4中国实验室生物安全相

3、关法律法规中国实验室生物安全相关法律法规1 1、国家法律：、国家法律：中华人民共和国刑法修正案中华人民共和国刑法修正案中华人民共和国主席令（第51号）2006.6.29中华人民共和国传染病防治法中华人民共和国传染病防治法中华人民共和国主席令（第17号）2004.12.12 2、国务院条例、国务院条例病原微生物实验室生物安全管理条例病原微生物实验室生物安全管理条例中华人民共和国国务院令（第424号）2004.11.12突发公共卫生事件应急条例突发公共卫生事件应急条例中华人民共和国国务院令（第376号）2003.5.9医疗废物管理条例医疗废物管理条例中华人民共和国国务院令（第380号）2003.6

4、.65 3、国家标准及行业标准实验室生物安全通用要求实验室生物安全通用要求中华人民共和国国家标准（GB19489-2008）2008.12.26生物安全实验室建筑技术规范生物安全实验室建筑技术规范 中华人民共和国国家标准（GB50346-2004）2004.9.1微生物和生物医学实验室生物安全通用准则微生物和生物医学实验室生物安全通用准则中华人民共和国卫生行业标准（WS233-2002）2003.8.1生物安全柜生物安全柜中华人民共和国医药行业标准（YY0569-2005）2008.6.1生物安全柜生物安全柜中华人民共和国建筑工业行业标准（JG170-2005）2005.6.16 4、部门规章

5、可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定华人民共和国卫生部令（第45号）2006.2.1人间传染的病原微生物名录人间传染的病原微生物名录中华人民共和国卫生部文件（卫科教发200615号）2006.2.1人间传染的高致病性病原微生物实验室和实验活动生物安全审批管理办法人间传染的高致病性病原微生物实验室和实验活动生物安全审批管理办法中华人民共和国卫生部令（第50号）2006.8.1病原微生物实验室安全环境管理办法病原微生物实验室安全环境管理办法国家环境保护总局令（第32号）2006.5.1医疗卫生机构医疗废物管理办法医疗卫

6、生机构医疗废物管理办法中华人民共和国卫生部令（第35号）2003.10.15医疗废物管理行政处罚办法医疗废物管理行政处罚办法中华人民共和国卫生部、环境保护总局令（第21号）2004.6.1医疗废物分类目录医疗废物分类目录中华人民共和国卫生部、环境保护总局（卫医发2003287号）2003.10.10医疗废物专用包装物、容器标准和警示标识规定医疗废物专用包装物、容器标准和警示标识规定环境保护总局（环发2003188号）2003.11.20医疗废物集中处置技术规范医疗废物集中处置技术规范环境保护总局（环发2003206号）2003.12.26人间传染的病原微生物菌（毒）种保藏机构管理办法人间传染的

7、病原微生物菌（毒）种保藏机构管理办法 中华人民共和国卫生部令（第68号）2009.7.18地方性：地方性：江西省病原微生物实验室生物安全管理办法江西省病原微生物实验室生物安全管理办法2018.4.257实验室生物安全通用要求实验室生物安全通用要求国家标准国家标准 实验室生物安全通用要求实验室生物安全通用要求(GB 19489-2004)(GB 19489-2004)国家标准于国家标准于20042004年年4 4月月5 5日审定日审定通过，通过，20042004年年1010月月1 1日正式实施。日正式实施。 20082008年修订年修订, , 目前实施的是目前实施的是实验室生物实验室生物安全通用

8、要求安全通用要求(GB 19489-2008)(GB 19489-2008) 该标准的发布是我国实验室安全管理、公共卫生体系建设以及认证认可体系该标准的发布是我国实验室安全管理、公共卫生体系建设以及认证认可体系建设具有里程碑意义的一件大事，它标志着我国实验室生物安全管理和实验建设具有里程碑意义的一件大事，它标志着我国实验室生物安全管理和实验室生物安全认可工作步入了科学、规范和发展的新阶段。室生物安全认可工作步入了科学、规范和发展的新阶段。 8江西省病原微生物实验室生物安全管理办法江西省病原微生物实验室生物安全管理办法 共共8 8章章4141条条第一章第一章 总总 则则（1-31-3条）：条）：

9、目的、适用范围、原则（目的、适用范围、原则（预防为预防为主、依法管理、明确职责、科学处置主、依法管理、明确职责、科学处置）第二章第二章 组织管理组织管理（4-84-8条）：条）：省市县级卫计委、实验室省市县级卫计委、实验室第三章第三章 病原微生物管理病原微生物管理（9-149-14条）：条）：分分1 1、2 2、3 3、4 4类，致类，致病性由高至低，病性由高至低，1 1、2 2类为高致病性，运送要不少类为高致病性，运送要不少2 2位受训位受训人员参与，专用运输容器、专用交通工具，运输要审批。人员参与，专用运输容器、专用交通工具，运输要审批。第四章第四章 实验室管理实验室管理（15-2515-

10、25条）：条）：分分1 1、2 2、3 3、4 4级级，安全，安全等级由低到高，使用前等级由低到高，使用前1 1个月内备案，个月内备案，5 5年有效期，到期年有效期，到期3 3个内再申请备案，要在相应安全等级内开展实验活动。人个内再申请备案，要在相应安全等级内开展实验活动。人员要考核培训，有健康档案，员要考核培训，有健康档案，监督生物安全管理体系的运监督生物安全管理体系的运行行，定期安全自查，人员定期体检，废物符合环境保护法，定期安全自查，人员定期体检，废物符合环境保护法律法规，有专人处置。律法规，有专人处置。9江西省病原微生物实验室生物安全管理办法江西省病原微生物实验室生物安全管理办法第五章

11、第五章 实验活动管理实验活动管理（26-3126-31条）：条）：实验活动应备案且在实验活动应备案且在相应安全等级的实验室开展，相应安全等级的实验室开展，高致病性病原微生物实验活高致病性病原微生物实验活动应有动应有2 2名以上的工作人员共同进行名以上的工作人员共同进行，样本处理要符合生，样本处理要符合生物安全要求且有记录。物安全要求且有记录。第六章第六章 实验室感染控制实验室感染控制（31-3731-37条）：条）：高致病性病原微生高致病性病原微生物菌（毒）种或者样本在实验活动、运输、储存中被盗、物菌（毒）种或者样本在实验活动、运输、储存中被盗、被抢、丢失、泄漏的，应当按照病原微生物实验室生物

12、被抢、丢失、泄漏的，应当按照病原微生物实验室生物安全管理条例规定报告、处理安全管理条例规定报告、处理；发生感染应及时报告并；发生感染应及时报告并救治，评估危害程度；发生安全事件应启动应急处置预案。救治，评估危害程度；发生安全事件应启动应急处置预案。第七章第七章 监督管理与法律责任监督管理与法律责任（38-4038-40条）：条）：卫计行政部门卫计行政部门负责监督检查，上级部门督导检查；对违反本办法的行为负责监督检查，上级部门督导检查；对违反本办法的行为进行处罚、追责。进行处罚、追责。第八章第八章 附附 则则（4141条）：条）：自公布之日起实施自公布之日起实施，省卫计委负省卫计委负责解释。责解

13、释。10管理体系管理体系11建立健全实验室生物安全管理体系的重要性建立健全实验室生物安全管理体系的重要性如果缺乏健全和行之有效的管理体系，无论多么高级如果缺乏健全和行之有效的管理体系，无论多么高级的实验室硬件设施，都难以发挥其安全作用。的实验室硬件设施，都难以发挥其安全作用。据不完全统计，国内外绝大多数生物安全实验室的感据不完全统计，国内外绝大多数生物安全实验室的感染事件和遗漏事故都是由管理不善而导致的。染事件和遗漏事故都是由管理不善而导致的。 12 生物安全管理组织体系生物安全管理组织体系4 4个层面构成个层面构成江西省卫计委江西省卫计委区市卫计委区市卫计委县级卫计委县级卫计委实验室所在单位

14、、实验室实验室所在单位、实验室实施分类、分级管理，统一标准实施分类、分级管理，统一标准13 实验室生物安全组织体系实验室生物安全组织体系法人法人法人法人责任部门责任部门责任部门责任部门实验室负责人实验室负责人实验室负责人实验室负责人实验室生物安全管理员实验室生物安全管理员实验室生物安全管理员实验室生物安全管理员人人人人物物物物14实验室实验室实验室负责人实验室负责人为实验室生物安全的第一责任人为实验室生物安全的第一责任人实验室负责人实验室负责人应当任命一名应当任命一名实验室生物安全负责人实验室生物安全负责人指定专人监督检查实验室技术规范和操作规程的落实情指定专人监督检查实验室技术规范和操作规程

15、的落实情况。况。 实验室生物安全负责人应为实验室生物安全负责人应为 微生物学家或专业人员微生物学家或专业人员 有基础物理学、生物科学的技术背景有基础物理学、生物科学的技术背景 有与行政、技术、后勤的有效沟通协调有与行政、技术、后勤的有效沟通协调15 实验室生物安全负责人的工作(1)生物安全、生物安全保障以及技术规章方面的咨询工作。(2)就技术方法、程序和方案、生物因子、材料和设备进行定期的内部安全检查。(3)与有关人员讨论违反生物安全方案或程序的情况。(4)核实所有工作人员都接受了适当的生物安全培训。(5)进行生物安全继续教育。(6)对于所有牵涉到潜在感染性物质或有毒物品泄露等意外事故进行调查

16、，并将调查结果以及处理意见向实验室主任和生物安全委员会报告。(7)就可能的实验室感染与医务人员进行协调。(8)在出现涉及感染性物质溢出或其他事故时，要确保清除了污染。(9)确保废弃物的正确管理。(10)确保对所有设备在修理或维护之前已经过适当的消毒处理。(11)经常了解社区对卫生和环境问题的态度。(12)要根据国家规定，针对病原体运入、运出实验室制订适当的程序。(13)对所有涉及感染性物质研究工作的计划、方案以及操作程序，均要在具体操作实施以前进行生物安全审查。(14)组织应急系统。16体系文件体系文件（1 1）实验室生物安全管理的方针和目标）实验室生物安全管理的方针和目标（2 2）管理手册）

17、管理手册（3 3）程序文件）程序文件（4 4）说明及操作规程）说明及操作规程（5 5）安全手册）安全手册（6 6）记录）记录（7 7）标识系统）标识系统实验室生物安全通用要求实验室生物安全通用要求实验室生物安全通用要求实验室生物安全通用要求 GB 19489-2008 7.417手册手册手册手册程序文件程序文件程序文件程序文件标准操作规范，标准标准操作规范，标准安全、技术记录、表格、标识安全、技术记录、表格、标识第二层次文件第二层次文件第二层次文件第二层次文件第四层次文件第四层次文件第四层次文件第四层次文件第三层次文件第三层次文件第三层次文件第三层次文件第一层次文件第一层次文件第一层次文件第一

18、层次文件实验室生物安全管理体系文件实验室生物安全管理体系文件以四层次划分为例以四层次划分为例18病源微生物，危险品管理病源微生物，危险品管理19生物危害程度的分级生物危害程度的分级根据对个体和群体的危害性分四级：根据对个体和群体的危害性分四级：级级：指指危危害害性性最最低低的的病病毒毒、细细菌菌、真真菌菌和和寄寄生虫等生物因子；生虫等生物因子；级级：指指中中等等危危害害的的生生物物因因子子，多多为为条条件件致致病病菌或机会致病菌；菌或机会致病菌；级级：指指能能引引起起个个体体的的严严重重感感染染，但但不不易易在在人人群中传播扩散的生物因子；可用抗生素治疗群中传播扩散的生物因子；可用抗生素治疗级

19、：级：指能引起个体和群体严重感染，难治疗指能引起个体和群体严重感染，难治疗20人间传染的病原微生物名录人间传染的病原微生物名录21根据以上实际情况，临床微生物实验室及免疫根据以上实际情况，临床微生物实验室及免疫根据以上实际情况，临床微生物实验室及免疫根据以上实际情况，临床微生物实验室及免疫学病原体筛检的防护标准应该是学病原体筛检的防护标准应该是学病原体筛检的防护标准应该是学病原体筛检的防护标准应该是病原体病原体病原体病原体危害程度分类危害程度分类危害程度分类危害程度分类实验活动实验活动实验活动实验活动BSLBSLBSLBSL级别级别级别级别各类肠道致病菌各类肠道致病菌各类肠道致病菌各类肠道致病

20、菌3 3 3 3类类类类（VC 2VC 2VC 2VC 2类）类）类）类）BSL-2BSL-2BSL-2BSL-2各类呼吸道致病菌各类呼吸道致病菌各类呼吸道致病菌各类呼吸道致病菌3 3 3 3类类类类（TB 2TB 2TB 2TB 2类）类）类）类）BSL-2BSL-2BSL-2BSL-2各类条件致病菌各类条件致病菌各类条件致病菌各类条件致病菌3 3 3 3类类类类BSL-2BSL-2BSL-2BSL-2乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒3 3 3 3类类类类BSL-2BSL-2BSL-2BSL-2丙型肝炎病毒丙型肝炎病毒丙型肝炎病毒丙型肝炎病毒3 3 3 3类类类类BSL-2B

21、SL-2BSL-2BSL-2爱滋病病毒爱滋病病毒爱滋病病毒爱滋病病毒2 2 2 2类类类类BSL-2BSL-2BSL-2BSL-2梅毒螺旋体梅毒螺旋体梅毒螺旋体梅毒螺旋体3 3 3 3类类类类BSL-2BSL-2BSL-2BSL-222 危险物品共分为九大类危险物品共分为九大类第第1 1类类 爆炸品爆炸品 第第2 2类类 气体气体第第3 3类类 易燃液体易燃液体 第第4 4类类 易燃固体易燃固体第第5 5类类 氧化剂和有机过氧化物氧化剂和有机过氧化物 第第6 6类类 毒害品和感染性物质毒害品和感染性物质 第第7 7类类 放射性物品放射性物品 第第8 8类类 腐蚀品腐蚀品第第9 9类类 杂项危险

22、品杂项危险品23实验实验室生物安全危害室生物安全危害24（一）、实验室生物安全事件（一）、实验室生物安全事件（二）、气溶胶与实验室感染（二）、气溶胶与实验室感染25（一）、实验室生物安全事件（一）、实验室生物安全事件前车之鉴前车之鉴1 1、美国、美国CDCCDC医务人员感染医务人员感染HIVHIV数据统计数据统计262 2 2 2、我国实验室生物安全事件事例、我国实验室生物安全事件事例、我国实验室生物安全事件事例、我国实验室生物安全事件事例 中国中国CDCCDC实验人员感染非典病毒事故实验人员感染非典病毒事故 2004年年4月中国月中国CDC病毒所腹泻病毒室两名研究生在做病毒病毒所腹泻病毒室两

23、名研究生在做病毒 实验时感染实验时感染sars 病毒。病毒。 事故调查：事故起因系该所实验人员多次违规将未完全灭活事故调查：事故起因系该所实验人员多次违规将未完全灭活 的的sars病毒从病毒从P3实验室带出至普通实验室操作而引起。实验室带出至普通实验室操作而引起。 台湾实验人员感染非典病毒事故台湾实验人员感染非典病毒事故 2003年年12月台湾一位实验人员在月台湾一位实验人员在 P3 实验室做病毒实验实验室做病毒实验 时，因清理废弃物操作疏忽，安全程序处理不当而感染病毒。时，因清理废弃物操作疏忽，安全程序处理不当而感染病毒。 浙江省中医院一名医师因违规操作，致浙江省中医院一名医师因违规操作，致

24、5 5名治疗者感染艾滋病病毒名治疗者感染艾滋病病毒 2017年初，浙江省中医院一检验科主管技师因操作“封闭抗体治疗”服务项目中淋巴 细胞的收集、提纯时，严重违反“一人一管一抛弃”的职业操作“铁律”，多次使用同一 根吸管交叉吸取、搅拌、提取所操作批次人员的淋巴细胞，致5名妇女感染HIV病毒，其中两人已怀孕。2018年5月28日，杭州市上城区法院于2017年12月12日判决该名医生犯医疗事故罪，判处有期徒刑二年六个月。（一）、实验室生物安全事件（一）、实验室生物安全事件27亲切握手亲切握手-热烈交谈热烈交谈-粗心与意外粗心与意外-实验室感染途径实验室感染途径穿白褂到处走穿白褂到处走戴手套随意开手柄

25、戴手套随意开手柄 台面台面/ /器皿不清洁器皿不清洁 不做善后工作不做善后工作 清洁区与污染区不分清洁区与污染区不分针刺、器皿破碎、离心、穿拖鞋针刺、器皿破碎、离心、穿拖鞋空气传播空气传播手口传播手口传播无知最危险无知最危险-28（二）、气溶胶与实验室感染 相关文献报道：相关文献报道：相关文献报道：相关文献报道：对对对对39213921例实验室相关感染例实验室相关感染例实验室相关感染例实验室相关感染统计分析结果发现，已知原因的实验室感染统计分析结果发现，已知原因的实验室感染统计分析结果发现，已知原因的实验室感染统计分析结果发现，已知原因的实验室感染只占全部感染的只占全部感染的只占全部感染的只占

26、全部感染的1818，不明原因的实验室感，不明原因的实验室感，不明原因的实验室感，不明原因的实验室感染却高达染却高达染却高达染却高达8282。对不明原因的实验室感染的。对不明原因的实验室感染的。对不明原因的实验室感染的。对不明原因的实验室感染的研究表明，大多数可能是病原微生物形成的研究表明，大多数可能是病原微生物形成的研究表明，大多数可能是病原微生物形成的研究表明，大多数可能是病原微生物形成的感染性气溶胶在空气扩散，实验室内工作人感染性气溶胶在空气扩散，实验室内工作人感染性气溶胶在空气扩散，实验室内工作人感染性气溶胶在空气扩散，实验室内工作人员吸入了污染的空气感染发病的。员吸入了污染的空气感染发

27、病的。员吸入了污染的空气感染发病的。员吸入了污染的空气感染发病的。29生物气溶胶无色无味、无孔不入，不易发现，实验人员在自然呼吸中不知不觉吸入而造成感染。若治疗控制不及时会造成严重后果。呼吸道传播的传染病的微生物特别是高致病性病毒常常发生变异，尤其是其抗原性、致病性都可能发生改变，在空气中存活力增强。可以远距离或较远距离传播，这是其与其他传播途径的显著区别，也是气溶胶传播难以预防的另一重要原因。30可产生各种严重程度微生物气溶胶的实验室操作可产生各种严重程度微生物气溶胶的实验室操作可产生各种严重程度微生物气溶胶的实验室操作可产生各种严重程度微生物气溶胶的实验室操作 3132微生物气溶胶的控制微

28、生物气溶胶的控制实验室空气传播与感染主要有三个过程：u一是微生物气溶胶的产生产生u二是微生物气溶胶的扩散扩散u三是微生物气溶胶人体暴露和吸入暴露和吸入因此，要控制或减少实验室空气传播和感染，要有相应得生物安全措施，以控制实验室微生物气溶胶感染的三个过程。33微生物气溶胶的控制微生物气溶胶的控制安全操作安全操作规范和改进操作过程和操作技术，规范和改进操作过程和操作技术，尽量避免操作失误。尽量避免操作失误。例如：例如：用冷却接种环沾取菌液进行接种-气溶胶减少效果可达91%。34使用生物安全柜使用生物安全柜 各种产生感染性气溶胶的操作尽量在生物安全柜内操作。正确使用生物安全柜，以有效地减少实验室获得

29、性感染和由于气溶胶暴露而导致的培养物的交叉感染，并能保护环境。35个人防护与实验室通风系统个人防护与实验室通风系统实验室工作人员在进行微生物检验时，应进行个人防护。操作时应穿戴防护服、口罩、面罩、帽子和手套防护服、口罩、面罩、帽子和手套。对实验室以外区域应形成一个相对密闭的系统，对实验室内部则是一个气流定向流动气流定向流动的系统，清洁区、缓冲区、低污染清洁区、缓冲区、低污染区、严重污染区区、严重污染区，每个区域之间保持一定压差，防止空气倒流。3637实验室生物安全防护实验室生物安全防护38实验室生物安全的目的意义实验室生物安全的目的意义不同生物安全等级实验室的介绍不同生物安全等级实验室的介绍安

30、全防护的基本要求安全防护的基本要求防护设备设施防护设备设施个人防护用品个人防护用品医疗垃圾处置医疗垃圾处置39实验室生物安全的目的意义实验室生物安全的目的意义 安全安全对公众公众对实验者者对周周围环境境对样品品40（一）不同生物安全等级实验室的介绍（一）不同生物安全等级实验室的介绍41BSLBSL1 1实验室实验室42BSLBSL2 2实验室实验室43BSLBSL3 3实验室实验室4445BSLBSL4 4实验室实验室46BSLBSL4 4实验室实验室47（二）安全防护的基本要求（二）安全防护的基本要求在实验室工作时，必须穿着合适的工作服或在实验室工作时，必须穿着合适的工作服或在实验室工作时，

31、必须穿着合适的工作服或在实验室工作时，必须穿着合适的工作服或防护服。防护服。防护服。防护服。在进行可能接触到血液、体液以及其他具有在进行可能接触到血液、体液以及其他具有在进行可能接触到血液、体液以及其他具有在进行可能接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料的操作时，应戴上合适的潜在感染性的材料的操作时，应戴上合适的潜在感染性的材料的操作时，应戴上合适的潜在感染性的材料的操作时，应戴上合适的手套。手套用完后，应先消毒再摘除，随后手套。手套用完后，应先消毒再摘除，随后手套。手套用完后，应先消毒再摘除，随后手套。手套用完后，应先消毒再摘除，随后必须洗手。必须洗手。必须洗手。必须洗手。在处理完感染

32、性实验材料后，以及在离开实在处理完感染性实验材料后，以及在离开实在处理完感染性实验材料后，以及在离开实在处理完感染性实验材料后，以及在离开实验室工作区域前，都必须洗手。验室工作区域前，都必须洗手。验室工作区域前，都必须洗手。验室工作区域前，都必须洗手。为了防止眼睛或面部受到喷溅物的污染、碰为了防止眼睛或面部受到喷溅物的污染、碰为了防止眼睛或面部受到喷溅物的污染、碰为了防止眼睛或面部受到喷溅物的污染、碰撞或人工紫外线辐射的伤害，必须戴合适的撞或人工紫外线辐射的伤害，必须戴合适的撞或人工紫外线辐射的伤害，必须戴合适的撞或人工紫外线辐射的伤害，必须戴合适的安全眼镜、面罩（面具）或其他防护设备。安全眼

33、镜、面罩（面具）或其他防护设备。安全眼镜、面罩（面具）或其他防护设备。安全眼镜、面罩（面具）或其他防护设备。48严禁穿着实验室防护服离开实验室工作区域。严禁穿着实验室防护服离开实验室工作区域。严禁穿着实验室防护服离开实验室工作区域。严禁穿着实验室防护服离开实验室工作区域。不得在实验室内穿露脚趾的鞋。不得在实验室内穿露脚趾的鞋。不得在实验室内穿露脚趾的鞋。不得在实验室内穿露脚趾的鞋。禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆和处理隐形眼镜。化妆和处理隐形眼镜。化妆和处理隐形眼镜。化妆

34、和处理隐形眼镜。禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在同一柜子内。在同一柜子内。在同一柜子内。在同一柜子内。（二）安全防护的基本要求（二）安全防护的基本要求49生物安全柜生物安全柜压力蒸汽灭菌器压力蒸汽灭菌器可移动紫外灯可移动紫外灯红外加热灭菌器红外加热灭菌器酒精灯酒精灯洗眼冲淋装置洗眼冲淋装置（三）防护设备设施（三）防护设备设施5051

35、生物安全柜生物安全柜主要的保护屏障，防止生物有害气溶胶主要的保护屏障，防止生物有害气溶胶逃逸逃逸. .保护操作人员保护操作人员- -负压负压保护周边环境保护周边环境-HEPA-HEPA可以保护样品可以保护样品- -层流层流52生物安全柜生物安全柜实验室操作都可能产生感染性气溶胶。 直径小于5m的气溶胶、直径为5100m的微小液滴亦可能产生吸入或交叉污染工作台面的其他材料。 正确使用生物安全柜将有效减少由于气溶胶暴露所造成的实验室感染以及培养物交叉污染。53CLASS II 二级生物安全柜二级生物安全柜层流负压柜层流负压柜 CLASSII级生物安全柜适用于1、2、3级生物安全水平的实验。它们可以

36、安全的保护样品、它们可以安全的保护样品、人员和环境人员和环境。CLASS II 级生物安全柜根据结构以及气流分配的不同，主要是外排气流，分为： A A型型 （30%30%排在实验室内排在实验室内 ） B B型型 B1 B1 （70%70%接管道外排）接管道外排） B2 B2 （100%100%接管道外排）接管道外排） B3 B3 （30% 30% 接管道外排）接管道外排） HEPA（高效微粒子空气，能99.99%地去除0.3微米以上颗粒) 54生物安全保护的不同产品区别55在生物安全柜上工作在生物安全柜上工作理想的工作台摆放原则（清洁理想的工作台摆放原则（清洁理想的工作台摆放原则（清洁理想的工

37、作台摆放原则（清洁污染区）污染区）污染区）污染区） 在工作台面上的实验操作应该按照从清洁区到污染在工作台面上的实验操作应该按照从清洁区到污染在工作台面上的实验操作应该按照从清洁区到污染在工作台面上的实验操作应该按照从清洁区到污染区的方向进行区的方向进行区的方向进行区的方向进行 56在生物安全柜上操作在生物安全柜上操作 避免使用明火，用适当的灭菌措施避免使用明火，用适当的灭菌措施避免使用明火，用适当的灭菌措施避免使用明火，用适当的灭菌措施 避免使用干扰安全柜内层流的实验手段避免使用干扰安全柜内层流的实验手段避免使用干扰安全柜内层流的实验手段避免使用干扰安全柜内层流的实验手段 如使用中有遗洒，所有

38、物品被拿走前必须经去污染如使用中有遗洒，所有物品被拿走前必须经去污染如使用中有遗洒，所有物品被拿走前必须经去污染如使用中有遗洒，所有物品被拿走前必须经去污染处理处理处理处理 安全柜必须处于安全柜必须处于安全柜必须处于安全柜必须处于操作状态时，操作状态时，操作状态时，操作状态时，才能彻底消毒内壁才能彻底消毒内壁才能彻底消毒内壁才能彻底消毒内壁明火明火： 在生物安全柜内所形成的几乎没有微生物的环境中应避在生物安全柜内所形成的几乎没有微生物的环境中应避免使用明火。免使用明火。 -使用明火会对气流产生影响使用明火会对气流产生影响 -特别在处理挥发性物品和易燃物品时，也易造成危险特别在处理挥发性物品和易

39、燃物品时，也易造成危险 -在对接种环进行灭菌时，可以使用微型燃烧器或电炉，而不应使在对接种环进行灭菌时，可以使用微型燃烧器或电炉，而不应使用明火。用明火。 57安全柜的维护保养安全柜的维护保养 用消毒剂清洁所有内壁，待其干燥用消毒剂清洁所有内壁，待其干燥 定期抬起工作面清洁下面的区域；洗定期抬起工作面清洁下面的区域；洗 净抹布净抹布 每天关机后，打开安全柜内部的紫外每天关机后，打开安全柜内部的紫外 灯消毒灯消毒6060分钟分钟 安全柜每年需要进行性能检测安全柜每年需要进行性能检测 第三方机构（个体防护能力、样品保第三方机构（个体防护能力、样品保 护能力、交叉污染防护能力）护能力、交叉污染防护能

40、力）58淋浴装置和应急消毒喷淋装置淋浴装置和应急消毒喷淋装置 1 1、 规定：规定：-BSL-2-BSL-2实验室在必要时应有应急喷淋装置。实验室在必要时应有应急喷淋装置。-BSL-3-BSL-3实验室应设置淋浴装置（清洁区），必要时在半污染区实验室应设置淋浴装置（清洁区），必要时在半污染区 设置应急消毒喷淋装置。设置应急消毒喷淋装置。 2 2、要求：、要求：保持管道的通畅、必须告知工作人员应急消毒。保持管道的通畅、必须告知工作人员应急消毒。喷淋装置的摆放位置、培训其操作方法。喷淋装置的摆放位置、培训其操作方法。应急消毒喷淋装置应急消毒喷淋装置 。在使用中可用大量冷水淋洗污染的部位，淋洗时间至

41、少需要在使用中可用大量冷水淋洗污染的部位，淋洗时间至少需要2020分钟。如果为化学物品溅出污染，用大量急水冲洗。分钟。如果为化学物品溅出污染，用大量急水冲洗。当使用紧急淋浴装置后必须立刻填写事故报告单并立即报告主当使用紧急淋浴装置后必须立刻填写事故报告单并立即报告主管领导管领导 。59（四）个人防护用品（四）个人防护用品 护目镜护目镜 口罩、帽子口罩、帽子 防护衣防护衣 ( 实验服、隔离衣实验服、隔离衣) 手套手套 鞋套鞋套60 个体防护的配备原则个体防护的配备原则BSLBSL1 1实验室：实验室：工作人员在实验时应穿工作服，戴医用口罩。工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套。 61个体防护的

42、配备原则个体防护的配备原则BSL2实验室：除符合BSL1的要求外，还应该符合下列条件：在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实验室时，防护服必须脱下并留在实验室内。不得穿着外出。用过的工作服应先消毒，然后统一洗涤或丢弃。当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室。工作完全结束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。 6263正确使用手套正确使用手套 1 1、手套的选择：、手套的选择：生物安全实验室一般使用乳胶橡胶或聚腈类生物安全实验室一般使用乳胶橡胶或聚腈类 或聚氯乙烯手套用于对强酸、强碱、有机溶剂和生物危

43、害物或聚氯乙烯手套用于对强酸、强碱、有机溶剂和生物危害物质的防护质的防护 。 2 2、手套的检查：、手套的检查：在使用手套前应该检查手套是否退色、穿孔在使用手套前应该检查手套是否退色、穿孔（漏损）或有裂缝。可以（漏损）或有裂缝。可以 通过充气试验，将其通过充气试验，将其 浸入水中观察是否有浸入水中观察是否有 汽泡来检查手套的质汽泡来检查手套的质 量。量。 3 3、手套的使用：、手套的使用： a a） 一般情况下，佩戴一副手套即可（一般情况下，佩戴一副手套即可（BSL-1BSL-1实验室），实验室）， b b）若在生物安全柜中操作感染性物质时（）若在生物安全柜中操作感染性物质时（BSL-2BSL

44、-2和和BSL-3BSL-3实验实验室）应该佩戴两副手套。室）应该佩戴两副手套。 乳胶手套乳胶手套 聚脂手套聚脂手套 64正确使用手套正确使用手套 c c） 在操作过程中，外层手套被污染，立即用消毒剂喷洒手套在操作过程中，外层手套被污染，立即用消毒剂喷洒手套 并脱下后丢弃在生物安全柜中的高压灭菌袋中并立即戴上新手并脱下后丢弃在生物安全柜中的高压灭菌袋中并立即戴上新手 套继续实验。套继续实验。 d d）戴好手套后应完全遮住手及腕部，如必要可覆盖实验服袖。）戴好手套后应完全遮住手及腕部，如必要可覆盖实验服袖。 4 4、手套的清洗和更换：、手套的清洗和更换： a) a)使用一次性手套，不可再次使用。

45、用后立即进行使用一次性手套，不可再次使用。用后立即进行 高压灭菌消高压灭菌消毒然后丢弃。毒然后丢弃。 b) b)不得戴着手套离开实验室区域。不得戴着手套离开实验室区域。65戴手套注意要点戴手套注意要点: :1) 1)在实验室工作中要一直保持戴手套状态并选择正确类型和尺寸的在实验室工作中要一直保持戴手套状态并选择正确类型和尺寸的手套；手套；2) 2)将手插入手套后将手套口遮盖实验服袖将手插入手套后将手套口遮盖实验服袖; ;手套的手要远离面部。手套的手要远离面部。 66 脱手套过程及注意要点脱手套过程及注意要点: :用一手捏起另一近手腕部处的手套外缘用一手捏起另一近手腕部处的手套外缘, ,将手套从

46、手上脱下并将将手套从手上脱下并将手套外表面翻转入内；手套外表面翻转入内；用戴着手套的手拿住该手套；用戴着手套的手拿住该手套；用脱去手套的手指插入另一手套腕部处内面；用脱去手套的手指插入另一手套腕部处内面；脱下该手套使其内面向外并形成一个由两个手套组成的袋状；脱下该手套使其内面向外并形成一个由两个手套组成的袋状；丢弃在高温消毒袋中并进行消毒处理。丢弃在高温消毒袋中并进行消毒处理。67（五）医疗垃圾处置（五）医疗垃圾处置黄色垃圾袋医疗垃圾黑色垃圾袋生活垃圾红色垃圾袋放射性垃圾黄色锐器盒损伤性垃圾68医疗废物分类医疗废物分类感 染 性 废 物病 理 性 废 物损 伤 性 废 物药 物 性 废 物化

47、学 性 废 物69感染性废物特征：携带病原微生物具有引发感染性疾病传播危险的医疗废物。常见：1、被病人血液。体液。排泄物污染的物品，包括：棉球、棉签、引流面条、纱布及其他各种敷料；一次性使用卫生用品、一次性使用医疗用品；一次性医疗器械；废弃的被服；其它被病人血液、体液、排泄物污染的物品。2、医疗机构收治的隔离传染病病人或者疑似传染病病人产生的生活垃圾。3、病原体的培养基、标本和菌种保存液。4、各种废弃的医学标本。5、废弃的血液、血清。70病理性废物特征：诊疗过程中产生的人体废弃物和医学实验动物尸体等。常见：1、手术及其它诊疗过程中产生的废弃的人体组织、器官等。2、医学实验动物的组织、尸体。3、

48、病理切片后废弃的人体组织、病理腊块等。71损伤性废物特征：能够刺伤或者割伤人体的废弃的医用锐器。常见：1、医用针头、缝合针。2、各类医用锐器，包括：解剖刀、手术刀、备皮刀、手术锯等。3、载玻片、玻璃试管、玻璃安瓿等。72药物性废物特征：过期、淘汰、变质或者被污染的废弃的药品。常见：1、废弃的一般性药物，如：抗生素、非处方类药品等。2、废弃的细胞毒性药物和遗传毒性药物，包括:致癌性药物，如环孢霉素、环磷酰胺等；可疑致癌性药物，如:顺铂、丝裂霉素、阿霉素等；免疫抑制剂等。3、废弃的疫苗、血液制品等。73化学性废物特征：具有毒性、腐蚀性、易燃易爆性的废弃的化学物品。常见：1、医学影像室、实验室废弃的

49、化学试剂。2、废弃的过氧乙酸、戊二醛等化学消毒剂。3、废弃的汞血压计、汞温度计。74医疗废物严格按照分类分别置于黄色有警示标识的防渗漏、防破裂、防穿孔的专用垃圾袋/盒中，并贴好标签。75医疗垃圾由卫生员卫生员收集，并填写相应医疗垃圾收集处置登记本，再由指定的人员转运至医院医疗垃圾储存处。微生物培养基、鉴定药敏卡、菌毒株等医疗垃圾移交前需进行预处理（高压灭菌）血液、血清以及体液等标本移交前需用有效氯2000mg/L的消毒液浸泡30分钟以上。针头、玻片等损伤性垃圾要放入黄色锐器盒中。医疗垃圾的收集处置医疗垃圾的收集处置76实验室生物安全基本操作规程771、实验室的工作人员必须是受过专业教育的技术人

50、员。在独立进行工作前还需在中高级实验技术人员指导下进行上岗培训，达到合格标准，方可开始工作； 2、实验室的工作人员必须被告知实验室工作的潜在危险并接受实验室安全教育，自愿从事实验室工作； 3、实验室的工作人员必须遵守实验室的所有制度、规定和操作规程。 4、三级和四级生物安全防护实验室的工作人员在开始工作前必须留本底血清进行有关检测，以后定期复检。如有疫苗必须进行免疫注射。 一、实验室工作人员的资格和培训一、实验室工作人员的资格和培训 78二、二、级生物安全防护实验室安全操作规程级生物安全防护实验室安全操作规程1.禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准后方可进入。2.

51、接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手。3.禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物。 4.以移液器吸取液体，禁止口吸。5.制定尖锐器具的安全操作规程。6.按照实验室安全规程操作，降低溅出和气溶胶的产生。 7.每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时消毒。8.所有培养物、废弃物在运出实验室之前必须进行灭活，如高压灭活。需运出实验室灭活的物品必须放在专用密闭容器内。9.制定有效的防鼠防虫措施。79三、三、级生物安全防护实验室安全操作规程级生物安全防护实验室安全操作规程常规微生物操作规程中的安全操作要点 1.同一级生物安全防护实验室安全操作规程1-9。2.

52、实验室入口处须贴上生物危险标志,内部显著位置须贴上有关的生物危险信息,包括使用传染性材料的名称,负责人姓名和电话号码。80四、四、 级生物安全防护实验室级生物安全防护实验室 特殊的安全操作规程特殊的安全操作规程1.进行感染性实验时，禁止他人进入实验室，或必须经实验室负责人同意后方可进入。免疫耐受或正在使用免疫抑制剂的工作人员必须经实验室负责人同意方可在实验室或动物房内工作。 2. 实验室入口处须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、需要的免疫、负责人姓名和电话、进入实验室的特殊要求及离开实验室的程序。 3. 工作人员应接受必要的免疫接种和检测(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。4.并根据需要

53、定期收集血清样本，应有检测报告，如有问题及时处理。 5.将生物安全程序纳入标准操作规范或生物安全手册，由实验室负责人专门保管，工作人员在进入实验室之前要阅读规范并按照规范要求操作。6.工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训，掌握预防暴露以及暴露后的处理程序。每年要接受一次最新的培训。7.严格遵守下列规定，防止利器损伤：81四、四、 级生物安全防护实验室级生物安全防护实验室 特殊的安全操作规程特殊的安全操作规程7.1 除特殊情况(肠道外注射和静脉切开等)外，禁止在实验室使用针、注射器及其他利器。尽可能使用塑料器材代替玻璃器材。 7.2 尽可能应用一次性注射器，用过的针头禁止折弯、剪断、折断、重新

54、盖帽、从注射器取下，禁止用手直接操作。用过的针头必须直接放人防穿透的容器中。非一次性利器必须放入厚壁容器中并运送到特定区域消毒，最好进行高压消毒。 7.3 尽可能使用无针注射器和其他安全装置。 7.4 禁止用手处理破碎的玻璃器具。装有污染针、利器及破碎玻璃的容器在丢弃之前必须消毒。 82四、四、 级生物安全防护实验室级生物安全防护实验室 特殊的安全操作规程特殊的安全操作规程8.培养基、组织、体液及其他具有潜在危险性的废弃物须放在防漏的容器中储存、运输及消毒灭菌。9. 实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒。10. 人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇报，并记录事故经过和处理方案。11.

55、 禁止将无关动物带入实验室。83五、样本运送五、样本运送非高致病性的病原微生物菌（毒）种和生物样本的运送应由专人负责，专车运送，运送人员应经过培训取得相关资质，不得通过公共交通工具运送，运送过程应采取相应的防护措施。运输过程中发生意外状况，运送单位、运送人、接受机构应按国家有关规定，采取必要的应急措施。84六、生物安全柜操作注意事项生物安全柜运行正常时才能使用。 生物安全柜在使用中打开的玻璃观察挡板不能超过规定高度。安全柜内应尽量少放器材或标本，不能影响后部压力排风系统的气流循环。安全柜内不能使用明火，否则燃烧产生的热量会干扰气流并可能损坏过滤器。所有工作必须在工作台面的中后部进行，并能够通过

56、玻璃观察挡板看到。尽量减少操作者身后的人员活动。操作者不应反复移出或伸进手臂以免干扰气流。不要使实验记录本、移液器以及其它物品阻挡空气格栅 。在安全柜内的工作开始前和结束后，安全柜的风机应至少运行23分钟。在生物安全柜内操作时，不能进行文字工作。85七、离心机内破损样本的处理若离心时发生试管破损，应立即关掉离心机电源开关，三十分钟后打开离心机盖。 如在离心机停止时才发现试管破损，亦需再关闭离心机盖三十分钟。 必须穿工作服，戴口罩、乳胶手套，小心把破损试管移出离心机，可用镊子检起破碎的玻璃。破裂试管、玻璃碎片、离心机室，必须用75%的酒精消毒，离心机消毒不可用次氯酸盐溶液，以免造成离心机损坏。

57、86八、暴露事件的紧急处理八、暴露事件的紧急处理 “暴露事件”是实验室人员在执行本职工作时与潜在传染性物质的接触（眼、嘴、其它黏膜、经吸入方式进入呼吸道、破损皮肤、或非肠道）。遭到已知的或潜在暴露事件的工作人员必须按照以下相应暴露事件的处理措施，尽快脱去手套并处理被污染部位。 871、皮肤感染、皮肤感染 用抗菌皂液和温水冲洗感染部位15分钟。必要时进行医学处理。882、眼、面部飞溅、眼、面部飞溅 用冲眼器冲洗或温水冲洗感染部位15分钟。必要时进行医学处理。893、气溶胶暴露、气溶胶暴露 屏住呼吸迅速离开房间，小心脱去个人防护用品。 当脱去个人防护用品时必须确保个人防护用品暴露面朝里，用皂液和水

58、仔细洗手，实验室排风（通风）至少1小时。 904、级生物安全实验室溢出级生物安全实验室溢出通知在这一区域的其他人预防污染。穿戴手套、实验衣和面罩，用纸巾覆盖溢出物，把浓缩的消毒剂倒在溢出物区域周围并与溢出物混和，并维持适当的接触时间。用镊子捡起一些玻璃碎片并放在生物危害高压灭菌袋内待净化后丢弃。用皂液和消毒洗手液洗手。915、II级生物安全实验室溢出的处理级生物安全实验室溢出的处理 迅速离开房间，避免吸入经空气传播的物质。通知其他的人离开。 关门并贴上警告标签。 移去污染的衣物，放在生物危害袋内。 用肥皂和水清洗所有暴露的皮肤。 报告实验室生物安全负责人，如果需要帮助，请咨询生物安全委员会。

59、925、II级生物安全实验室溢出的处理级生物安全实验室溢出的处理 在进入实验室所前，使气溶胶弥散至少30分钟。备齐处理物（消毒剂，纸巾，生物危害袋和镊子）。 穿上防护衣（实验外套，面罩，实验手套，必要时穿上长统靴）。按溢出物的状态，可以戴一个HEPA过滤呼吸罩以代替外科面罩。 用消毒湿巾覆盖污染区域，然后，小心地倒上消毒剂在溢出物的周围。避免扩大污染区域。因为要被溢出物稀释所以要用更浓缩的消毒剂。允许至少20分钟的接触反应时间。用镊子捡起一些尖锐的物品丢弃在一个尖锐物存放器皿内，用消毒剂浸泡。 用消毒剂擦净溢出物可能飞溅到的周围区域。用消毒剂浸泡溢出物，并放在一个生物危害袋内。 用10家用漂白

60、液喷雾这个区域和并空气干燥，或在接触反应10分钟后用消毒湿巾擦掉。 用消毒剂或抗菌皂和水清洗手和暴露的皮肤部分。 93手卫生手卫生94手卫生手卫生手的清洁与消毒是控制医院感染手的清洁与消毒是控制医院感染最重要、最重要、最简便最简便的措施之一。的措施之一。全球洗手日全球洗手日 每年每年1010月月1515日日95手卫生手卫生无生命的环境是病原体的储存库！无生命的环境是病原体的储存库！96 沾满各种病原菌的双手沾满各种病原菌的双手97手卫生的重要性手卫生的重要性接接 触触 病菌病菌 洗手洗手菌菌9899100什么时间洗手什么时间洗手? ?直接接触病人前后直接接触病人前后摘手套后（戴手套不能代替洗手

61、）摘手套后（戴手套不能代替洗手）不论是否戴手套，进行侵袭性操作前不论是否戴手套，进行侵袭性操作前101接触体液或排泄物、粘膜、非完整皮肤或伤口接触体液或排泄物、粘膜、非完整皮肤或伤口敷料后敷料后 护理病人从污染部位移到清洁部位时护理病人从污染部位移到清洁部位时接触紧邻病人的物品后（包括医疗设备）接触紧邻病人的物品后（包括医疗设备）什么时间洗手什么时间洗手? ?102103第一步：第一步：掌心相对，手指并拢相掌心相对，手指并拢相互摩擦互摩擦 手卫生技术手卫生技术104第二步：第二步：手心对手背沿指缝相手心对手背沿指缝相互搓擦互搓擦 手卫生技术手卫生技术105第三步：第三步：掌心相对，双手交叉沿指

62、缝掌心相对，双手交叉沿指缝相互摩擦相互摩擦 手卫生技术手卫生技术106第四步：第四步：双手指交锁，指背在对双手指交锁，指背在对侧掌心侧掌心手卫生技术手卫生技术107第五步：第五步：一手握另一手大拇指旋转搓擦，一手握另一手大拇指旋转搓擦，交换进行交换进行 手卫生技术手卫生技术108第六步第六步 指尖在对侧掌心前指尖在对侧掌心前后擦洗后擦洗手卫生技术手卫生技术109第六步第六步 指尖在对侧掌心前指尖在对侧掌心前后擦洗后擦洗手卫生技术手卫生技术110必要时清洗手腕及手臂111手卫生手卫生医务人员手卫生要求医务人员手卫生要求u卫生手消毒后医务人员手表面的菌落总数应卫生手消毒后医务人员手表面的菌落总数应10cfu/cm10cfu/cm2 2。u外科手消毒后医务人员手表面的菌落总数应外科手消毒后医务人员手表面的菌落总数应 5cfu/cm5cfu/cm2 2112 保护我们的双手保护我们的双手冲净洗手液冲净洗手液正确的干手正确的干手 不长时间戴手套不长时间戴手套接触污染物和腐蚀性物品时接触污染物和腐蚀性物品时戴手套戴手套113特别提醒特别提醒 所有的化学消毒剂都有所有的化学消毒剂都有毒性毒性! !不能过度使用不能过度使用! !114LOGO115