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1、实验红鲫的蓄积毒性实验实验红鲫的蓄积毒性实验蓄积毒性试验导读导读一、前言及基本概念一、前言及基本概念三、研究的重点及难点三、研究的重点及难点二、蓄积毒性试验设计二、蓄积毒性试验设计四、本实验的进度安排四、本实验的进度安排蓄积毒性试验一、前言及基本概念一、前言及基本概念 前言前言 随着人类社会科技水平的不断发展,各种化学品开始随着人类社会科技水平的不断发展,各种化学品开始进入交易市场,多种有害物质及危险因素开始进入环境,进入交易市场,多种有害物质及危险因素开始进入环境,对人类及其他生物形成潜在威胁甚至危害,对各种化学品对人类及其他生物形成潜在威胁甚至危害,对各种化学品的毒性分析已刻不容缓。但常规
2、物理和化学检测只能测定的毒性分析已刻不容缓。但常规物理和化学检测只能测定污染物的浓度,但不能测定污染物对生物的影响,例如,污染物的浓度,但不能测定污染物对生物的影响,例如,污染物的毒性强弱。我国还没有标准化的实验鱼类。红鲫污染物的毒性强弱。我国还没有标准化的实验鱼类。红鲫是我国长江流域的小型鲤科鱼类,作为实验动物具有许多是我国长江流域的小型鲤科鱼类,作为实验动物具有许多独特的优点,尤其是对毒性物质特别敏感,是急性毒性试独特的优点,尤其是对毒性物质特别敏感,是急性毒性试验、亚慢性毒性试验、慢性毒性试验、毒性蓄积试验、致验、亚慢性毒性试验、慢性毒性试验、毒性蓄积试验、致突变、致畸、致癌试验的首选实
3、验动物。突变、致畸、致癌试验的首选实验动物。蓄积毒性试验 本毕业论文的实验研究本毕业论文的实验研究- -蓄积毒性作用是评估环境污蓄积毒性作用是评估环境污染毒性作用的指标之一,也是制定其在环境中的卫生标准染毒性作用的指标之一,也是制定其在环境中的卫生标准的重要参考依据。因此,阐明外来化合物有无蓄积作用及的重要参考依据。因此,阐明外来化合物有无蓄积作用及其程度具有重要意义。另外,也可为实验红鲫的标准化提其程度具有重要意义。另外,也可为实验红鲫的标准化提供依据,以填补我国标准化实验鱼类空白。供依据,以填补我国标准化实验鱼类空白。蓄积毒性试验 蓄积毒性试验是评价外来化合物蓄积毒蓄积毒性试验是评价外来化
4、合物蓄积毒性的实验方法。对实验动物给予低于中毒阈剂性的实验方法。对实验动物给予低于中毒阈剂量的外来化合物,反复多次的与机体进行接触,量的外来化合物,反复多次的与机体进行接触,经一定时间后使机体出现明显的中毒表现,称经一定时间后使机体出现明显的中毒表现,称为蓄积毒性作用。这是由于受试物进入机体的为蓄积毒性作用。这是由于受试物进入机体的速度大于消除的速度。使受试物不断蓄积,达速度大于消除的速度。使受试物不断蓄积,达到了使机体发生毒性反应的阈剂量所致。到了使机体发生毒性反应的阈剂量所致。 生物半衰期长的化学毒物,其蓄积性较大生物半衰期长的化学毒物,其蓄积性较大 化学毒物的蓄积包括两个内涵:物质蓄积和
5、功化学毒物的蓄积包括两个内涵:物质蓄积和功能蓄积两个相对的概念,同时存在、互为基础,能蓄积两个相对的概念,同时存在、互为基础,因为物质蓄积的情况下,肯定存在机体一定结因为物质蓄积的情况下,肯定存在机体一定结构和功能的改变,而功能改变的积累也必须以构和功能的改变,而功能改变的积累也必须以物质积累为基础。物质积累为基础。 蓄积毒性试验二二、蓄积毒性的实验设计蓄积毒性的实验设计本次采用蓄积系数法本次采用蓄积系数法(Cumulative Coefficient Method)中的剂量定期递增染毒法。中的剂量定期递增染毒法。蓄积系数是一种用来评价环境污染物蓄积作用的蓄积系数是一种用来评价环境污染物蓄积作
6、用的方法。所谓蓄积系数方法。所谓蓄积系数(Cumulative Coefficient)是是分次给受试动物后引起分次给受试动物后引起50%受试动物出现某种毒受试动物出现某种毒效应的总剂量,与一次给予受试动物后引起效应的总剂量,与一次给予受试动物后引起50%受试动物出现同一毒效应的剂量的比值,即受试动物出现同一毒效应的剂量的比值,即蓄积毒性试验蓄积系数蓄积系数 K=LD50(n)LD50(1)蓄积系数(蓄积系数(K)蓄积作用轻度蓄积作用轻度K11K 33K 5K5高度蓄积高度蓄积明显蓄积明显蓄积中毒蓄积中毒蓄积轻度蓄积轻度蓄积化学物蓄积作用分级化学物蓄积作用分级蓄积毒性试验剂量递增染毒法剂量递增
7、染毒法先测得半数致死剂量先测得半数致死剂量LDLD5050染毒期限染毒期限14589121316172021242528每日染毒剂量每日染毒剂量(LD50)0.10.150.220.340.500.751.12每每4d染毒总剂量染毒总剂量(LD50)0.40.600.901.362.003.004.48累计染毒总剂量累计染毒总剂量(LD50)0.41.001.903.265.268.2612.74定期递增染毒剂量定期递增染毒剂量试验鱼试验鱼40尾,随机分成尾,随机分成2组组(1个试验组和个试验组和1个对照组个对照组),每组,每组20尾,试验尾,试验组每天染毒组每天染毒1次,以次,以4 d为为1
8、期,期,在同一周期中,每天剂量相同,下一周在同一周期中,每天剂量相同,下一周期为上一周期剂量的期为上一周期剂量的1.5倍,第一周期为倍,第一周期为0.1LD50,直至半数死亡,计,直至半数死亡,计算总剂量即为算总剂量即为LD50(n)。如果到。如果到28d,死亡动物任未足半数,可停止试验,死亡动物任未足半数,可停止试验此时的此时的K=12.8,可认为无蓄积性。,可认为无蓄积性。可以用于化妆品、消毒剂的评价。可以用于化妆品、消毒剂的评价。蓄积毒性试验三三、蓄积、蓄积毒性实验研究的重点及难点毒性实验研究的重点及难点研究重点:观察有毒物质在实验红鲫体内蓄积对红鲫产研究重点:观察有毒物质在实验红鲫体内
9、蓄积对红鲫产生的影响,生的影响, 测定蓄积系数及评价测定蓄积系数及评价研究难点,研究难点,LDLD5050对某些化学物的评价不是一个良好的指标,对某些化学物的评价不是一个良好的指标,因为分次染毒时,在染毒的前期甚至整个过程都可能存在因为分次染毒时,在染毒的前期甚至整个过程都可能存在降解。降解。蓄积毒性试验四四、设计论、设计论文的文的进度安排进度安排 2012年年10月中旬月中旬-2012年年11月月 查阅相关文献查阅相关文献和资料,设计实验方案。和资料,设计实验方案。 2012年年12月月 准备实验器,药品试剂及实验材准备实验器,药品试剂及实验材料,训练实验基本技能,展开研究的预实验。料,训练实验基本技能,展开研究的预实验。 2013年年1月月-2013年年4月底月底 开展实验研究,翻开展实验研究,翻译外文文献,撰写相关综述论文。译外文文献,撰写相关综述论文。 其中:其中: 2013年年1月月-2013年年2月月 2013年年3月月-2013年年4月月 2013年年5月月 2013年年6月月 整理实验资料,查阅文献,撰写整理实验资料,查阅文献,撰写论文及报告论文论文及报告论文。蓄积毒性试验真诚希望老师和同学们指正真诚希望老师和同学们指正Thank you!蓄积毒性试验