《高中生物 专题二 课题1 微生物的实验室培养课件 新人教版选修1》由会员分享，可在线阅读，更多相关《高中生物 专题二 课题1 微生物的实验室培养课件 新人教版选修1（39页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、专题专题2微生物的培养与应用微生物的培养与应用 课题课题1微生物的实验室培养微生物的实验室培养 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接科科学学家家在在南南极极数数百百英英尺尺的的冰冰层层下下面面，在在没没有有光光和和氧氧气气的的环环境境中中，发发现现了了一一种种微微生生物物。据据推推测测，它它们们已已经经生生存存了了150万万年年之之久久。基基因因检检测测显显示示，它它们们类类似似今今天天海海洋洋环环境境中中的的微微生生物物。科科学学家家认认为为，这这些些微微生生物物曾曾经经生生活活在在海海洋洋里里，150万万200万万年年前前海海洋洋被被冰冰川川截截断断形形成
2、成像像大大池池塘塘的的水水面面，后后来来又又被被冰冰川川覆覆盖盖。从从此此，这这些些微微生生物物与与世隔绝了。世隔绝了。, 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接请思考：请思考：1.微生物是如何获得能量维持生存的？微生物是如何获得能量维持生存的？2.它们还需要哪些营养物质？它们还需要哪些营养物质？ 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接1概念概念人人们们按按照照微微生生物物对对_的的不不同同需需求求，配配制制出出供供其其_的营养基质的营养基质。2种类种类按按照
3、照培培养养基基的的_划划分分为为_培培养养基基和和_培养基培养基。一、培养基一、培养基 营养物质营养物质 生长繁殖生长繁殖 物理状态物理状态 液体液体 固体固体 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接3营养要素营养要素各种培养基一般都含有水、各种培养基一般都含有水、_、_、_，此外还要满足微生物生长对，此外还要满足微生物生长对_、_以及以及_的要求的要求。 碳源碳源 氮源氮源 无机盐无机盐 pH 特殊营养物质特殊营养物质 氧气氧气 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接二、无菌技术二、无菌技术1获获得得纯纯净净培培养养物物的的关关
4、键键是是防防止止_的的入入侵，具体操作如下：侵，具体操作如下：(1)对对实实验验操操作作的的_、操操作作者者的的衣衣着着和和手手进进行行_和和_。(2)将将用用于于微微生生物物培培养养的的_、_和和_等器具进行灭菌。等器具进行灭菌。外来杂菌外来杂菌 空间空间 清洁清洁 消毒消毒 器皿器皿 接种用具接种用具 培养基培养基 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接(3)为为避避免免周周围围环环境境中中_的的污污染染，实实验验操操作作应在应在_进行。进行。(4)实实验验操操作作时时应应避避免免已已经经灭灭菌菌处处理理的的材材料料用用具具与与_相接触。相接触。 微生物微生
5、物 酒精灯火焰附近酒精灯火焰附近 周围的物品周围的物品 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接2消毒和灭菌消毒和灭菌(1)消消毒毒是是指指使使用用较较为为_的的物物理理或或化化学学方方法法仅仅杀杀死死物物体体表表面面或或_微微生生物物(不不包包括括芽芽孢孢和和孢孢子子)。常常用用的的方方法法有有_消消毒毒法法和和_消消毒法。毒法。(2)灭灭菌菌是是指指使使用用_的的理理化化因因素素杀杀死死物物体体内内外外_的的微微生生物物(包包括括芽芽孢孢和和孢孢子子)。常常见见的的方方法法有有：_灭菌、灭菌、_灭菌、灭菌、_灭菌。灭菌。 温和温和 内部一部分内部一部分 煮沸煮
6、沸 化学药剂化学药剂 强烈强烈 所有所有 灼烧灼烧 干热干热 高压蒸汽高压蒸汽 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接三、大肠杆菌的纯化培养三、大肠杆菌的纯化培养牛肉膏蛋白胨牛肉膏蛋白胨 称量称量 灭菌灭菌 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接2纯化大肠杆菌纯化大肠杆菌(1)纯纯化化培培养养方方法法：在在牛牛肉肉膏膏蛋蛋白白胨胨培培养养基基上上纯纯化化大大 肠肠 杆杆 菌菌 ， 最最 常常 用用 的的 方方 法法 有有 _法法 和和_法。法。(2)纯纯化化培培养养的的原原理理：想想方方设设法法在在培培养养基基上上得得到到由由一一
7、个个细细胞胞繁繁殖殖而而来来的的肉肉眼眼可可见见的的_，即即获获得得较较纯纯的菌种。的菌种。(3)平平板板划划线线法法：通通过过_在在琼琼脂脂固固体体培培养养基基表表面面连连续续_的的操操作作，将将聚聚集集的的菌菌种种逐逐步步_分散到培养基的表面。其具体操作是：分散到培养基的表面。其具体操作是：平板划线平板划线 稀释涂布平板稀释涂布平板 菌落菌落 接种环接种环 划线划线 稀释稀释 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接将将_放在火焰上燃烧，直到接种环烧红放在火焰上燃烧，直到接种环烧红。在火焰旁冷却在火焰旁冷却_，并打开棉塞，并打开棉塞。将试管口通过将试管口通过_
8、。将已冷却的接种环伸入菌液中，沾取一环菌液将已冷却的接种环伸入菌液中，沾取一环菌液。将试管口通过火焰，并塞上棉塞将试管口通过火焰，并塞上棉塞。左左手手将将皿皿盖盖打打开开一一条条缝缝隙隙，右右手手将将沾沾有有菌菌种种的的接接种种环环迅迅速速伸伸入入平平板板内内，划划三三到到五五条条_线线，盖盖上上皿盖。注意不要划破培养基皿盖。注意不要划破培养基。 接种环接种环 接种环接种环 火焰火焰 平行平行 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接灼灼烧烧_，待待其其冷冷却却后后，从从第第一一区区域域划划线线的的末末端端开开始始往往第第二二区区域域内内划划线线。重重复复以以上上
9、操操作作，在在三三、四四、五五区区域域内内划划线线。注注意意不不要要将将最最后后一一区区的的划划线线与与第第一一区区相相连。连。将平板将平板_放入培养箱中培养。放入培养箱中培养。(4)稀稀释释涂涂布布平平板板法法：将将菌菌液液进进行行一一系系列列的的梯梯度度_，然然后后将将不不同同稀稀释释度度的的菌菌液液分分别别_到到琼琼脂脂固固体培养基的表面，进行培养。其操作步骤是：体培养基的表面，进行培养。其操作步骤是：系列稀释系列稀释(梯度稀释梯度稀释)操作：操作： 接种环接种环 倒置倒置 稀释稀释 涂布涂布 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接 情景导入情景导入 知识
10、梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接 酒精酒精 表面表面 酒精酒精 频繁使用的菌种频繁使用的菌种 需长期保存的菌种需长期保存的菌种 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接一、制备培养基一、制备培养基1配制原则配制原则(1)目目的的明明确确：不不同同微微生生物物需需求求不不同同，根根据据培培养养目目的进行配制。的进行配制。(2)营养要协调：营养物质的浓度和比例要适宜。营养要协调：营养物质的浓度和比例要适宜。(3)pH要要适适宜宜：为为维维持持pH的的相相对对恒恒定定，可可在在培培养
11、养基中加入缓冲剂，常用磷酸氢二钾或磷酸二氢钾。基中加入缓冲剂，常用磷酸氢二钾或磷酸二氢钾。 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接营养物营养物质质功功 能能主要来源主要来源碳源碳源能为微生物的代谢提能为微生物的代谢提供碳元素的物质供碳元素的物质无机碳源：无机碳源：CO2、NaHCO3等；有机碳等；有机碳源：糖类、蛋白质、源：糖类、蛋白质、脂肪、花生饼、石油脂肪、花生饼、石油等等氮源氮源能为微生物的代谢提能为微生物的代谢提供氮元素的物质供氮元素的物质无机氮源：无机氮源：N2、NH3、NO、NH有机氮源：有机氮源：蛋白胨、尿素、蛋白蛋白胨、尿素、蛋白质等质等2培养基
12、的营养成分及功能培养基的营养成分及功能 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接生长因生长因子子生长必不可少的微量生长必不可少的微量有机物有机物维生素、氨基酸、碱维生素、氨基酸、碱基等基等水水在生物体内含量很高，在生物体内含量很高，在低等生物体内含量在低等生物体内含量更高更高外界摄入外界摄入无机盐无机盐为微生物提供碳源、为微生物提供碳源、氮源以外的各种重要氮源以外的各种重要元素，包括某些大量元素，包括某些大量元素元素无机化合物无机化合物 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接对对异异养养微微生生物物来来说说，含含C、H、O、N的的化
13、化合合物物既既是碳源又是氮源、能源。是碳源又是氮源、能源。一一些些天天然然营营养养物物质质，如如酵酵母母膏膏、蛋蛋白白胨胨、动动植植物物组织提取液等可为微生物提供生长因子。组织提取液等可为微生物提供生长因子。不不同同微微生生物物对对营营养养的的需需求求不不同同，因因此此，首首先先根根据据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。营营养养物物质质过过少少不不能能满满足足微微生生物物的的营营养养需需要要，过过多多对微生物的生长有抑制作用。对微生物的生长有抑制作用。特特 别别提提 醒醒 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接例
14、例1下列关于配制培养基的有关叙述中，正确的下列关于配制培养基的有关叙述中，正确的是是()A制作固体培养基必须加入琼脂制作固体培养基必须加入琼脂B发酵工程中一般用液体培养基发酵工程中一般用液体培养基C氮源主要是为微生物提供能量氮源主要是为微生物提供能量D牛肉膏主要为微生物提供氮元素牛肉膏主要为微生物提供氮元素 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接解解析析：制制作作固固体体培培养养基基时时必必须须加加入入凝凝固固剂剂。琼琼脂脂是是常常用用的的凝凝固固剂剂，但但不不是是唯唯一一的的凝凝固固剂剂，例例如如明明胶胶也也可可作作为为凝凝固固剂剂；发发酵酵工工程程一一般般都
15、都是是用用液液体体培培养养基基，原原因因是是液液体体培培养养基基便便于于调调节节pH、温温度度、溶溶氧氧等等，而而且且液液体体培培养养基基还还能能有有利利于于微微生生物物充充分分利利用用营营养养物物质质；氮氮源源主主要要是是作作为为微微生生物物合合成成蛋蛋白白质质和和核核酸酸的的原原料料；牛牛肉肉膏膏主主要要为为微微生生物提供碳源、磷酸盐和维生素。物提供碳源、磷酸盐和维生素。答案：答案：B 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接变式变式训练训练1下下列列制制备备牛牛肉肉膏膏蛋蛋白白胨胨固固体体培培养养基基的的叙叙述述，错错误误的的是是()A操作顺序为计算、称量、
16、溶化、倒平板、灭菌操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C将培养基冷却至将培养基冷却至50 左右时进行倒平板左右时进行倒平板D将平板冷却凝固约将平板冷却凝固约510 min后将平板倒过来放置后将平板倒过来放置 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接变式变式训练训练解解析析：制制备备牛牛肉肉膏膏蛋蛋白白胨胨固固体体培培养养基基的的步步骤骤是是计计算算、称称量量、溶溶化化、灭灭菌菌、倒倒平平板板，顺顺序序不不能能颠颠倒倒。牛牛肉肉膏膏容容易易吸吸潮潮，所所以以当当牛牛肉肉膏膏溶溶化化并并与与
17、称称量量纸纸分分离离后后，用用玻玻棒棒取取出出称称量量纸纸。将将培培养养基基冷冷却却至至50 ，用用手手触触摸摸锥锥形形瓶瓶感感觉觉刚刚刚刚不不烫烫手手时时倒倒平平板板，平平板板冷冷却却后后还还需需倒倒置。置。答案：答案：A 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接二、消毒与灭菌的比较二、消毒与灭菌的比较 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接 酒酒精精消消毒毒时时，70%的的酒酒精精杀杀菌菌效效果果最最好好。原原因因是是浓浓度度过过高高，菌菌体体表表面面蛋蛋白白质质变变性性过过快快从从而而凝凝固固成成一一层层保保护护膜，乙醇分子不
18、能渗入其中；浓度过低，杀菌能力减弱膜，乙醇分子不能渗入其中；浓度过低，杀菌能力减弱特特 别别提提 醒醒 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接例例2 细细菌菌培培养养过过程程中中分分别别采采用用了了高高压压蒸蒸汽汽、酒酒精精、火火焰焰灼灼烧烧等等几几种种不不同同的的处处理理方方法法，这这些些方方法法依依次次用用于于杀灭哪些部位的杂菌杀灭哪些部位的杂菌()A接接种种针针、手手、培培养养基基B高高压压锅锅、手手、接接种针种针C培培养养基基、手手、接接种种针针 D接接种种针针、手手、高高压锅压锅 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接解
19、解析析：高高压压蒸蒸汽汽灭灭菌菌锅锅是是灭灭菌菌的的一一个个设设备备，通通常常用用于于培培养养基基的的灭灭菌菌。用用酒酒精精擦擦拭拭双双手手是是消消毒毒的的一一种种方方法法。火火焰焰灼灼烧烧，可可以以迅迅速速彻彻底底地地灭灭菌菌，适适用用于于微微生生物物的的接接种工具，如接种环、接种针。种工具，如接种环、接种针。答案：答案：C 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接2下列操作与消毒和灭菌无关的是下列操作与消毒和灭菌无关的是()A接种前用火焰灼烧接种环接种前用火焰灼烧接种环B接种前用酒精擦拭双手接种前用酒精擦拭双手C将平板倒置，放入培养箱中培养将平板倒置，放入培养
20、箱中培养D接种在酒精灯的火焰旁完成接种在酒精灯的火焰旁完成变变 式式训训 练练 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接解解析析：要要建建立立“有有菌菌观观念念”。接接种种用用具具、器器皿皿、空空气气中中都都充充满满了了微微生生物物，都都有有污污染染的的可可能能，必必须须严严格格地地消消毒毒、灭灭菌菌。A、B、D都都是是实实验验操操作作过过程程中中常常用用的的消消毒毒和和灭灭菌菌方方法法。将将平平板板倒倒置置，放放入入培培养养箱箱中中培培养养与与消消毒、灭菌无关。毒、灭菌无关。答案：答案：C变变 式式训训 练练 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破
21、 栏栏目目链链接接三、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基及纯化大肠杆菌三、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基及纯化大肠杆菌1 1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接2纯化大肠杆菌操作过程中的注意事项纯化大肠杆菌操作过程中的注意事项(1)平板划线法中几次灼烧接种环的目的：平板划线法中几次灼烧接种环的目的：灼烧时期灼烧时期目的目的取菌种前取菌种前杀死接种环上原有微生物杀死接种环上原有微生物每次每次划线前划线前杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使
22、杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来自于上次划线末下次划线的菌种直接来自于上次划线末端，使每次划线菌种数目减少，达到分端，使每次划线菌种数目减少，达到分离菌株的目的离菌株的目的接种接种结束后结束后杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者环境和感染操作者 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接(2)稀稀释释涂涂布布平平板板法法操操作作比比较较复复杂杂，且且各各个个细细节节均均需保证无菌操作，应特别注意：需保证无菌操作，应特别注意：酒精灯与培养皿的距离要适宜。酒精灯与培养皿的距离要适宜。吸管头不要接
23、触其他任何物体。吸管头不要接触其他任何物体。吸管要在酒精灯火焰周围使用。吸管要在酒精灯火焰周围使用。涂涂布布器器末末端端浸浸在在盛盛有有70%酒酒精精的的烧烧杯杯中中，取取出出时时，要要让让多多余余的的酒酒精精在在烧烧杯杯中中滴滴尽尽，然然后后将将沾沾有有少少量量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃，注意防火。酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃，注意防火。 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接在在稀稀释释涂涂布布平平板板操操作作中中，每每个个步步骤骤都都要要注注意意无无菌菌操作，以防培养基被污染，影响实验效果操作，以防培养基被污染，影响实验效果。每每一一稀稀释释倍倍数数
24、菌菌液液都都至至少少要要涂涂布布三三个个平平板板，作作为为实实验验重重复复，求求平平均均值值，若若其其中中有有菌菌落落数数与与其其他他实实验验差差距距悬殊者，应舍弃该实验数据，不进行统计、计算悬殊者，应舍弃该实验数据，不进行统计、计算。平平板板冷冷凝凝后后，皿皿盖盖上上会会凝凝结结成成水水珠珠。凝凝固固后后的的培培养养基基表表面面的的温温度度也也比比较较高高，将将平平板板倒倒置置，既既可可以以使使培培养养基基表表面面的的水水分分更更好好地地挥挥发发，又又可可以以防防止止皿皿盖盖上上的的水水珠珠落落入培养基造成污染入培养基造成污染。特特 别别提提 醒醒 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突
25、破方法突破 栏栏目目链链接接例例3 关于平板划线操作的叙述正确的是关于平板划线操作的叙述正确的是()A使使用用已已灭灭菌菌的的接接种种环环、培培养养皿皿，在在操操作作过过程程中中不不需要再灭菌需要再灭菌B打打开开含含菌菌种种的的试试管管，需需通通过过火火焰焰灭灭菌菌，取取出出菌菌种种后，需马上塞上棉塞后，需马上塞上棉塞C将将沾沾有有菌菌种种的的接接种种环环迅迅速速伸伸入入平平板板内内，划划三三至至五五条平行线即可条平行线即可D最后将平板倒置，放在培养箱中最后将平板倒置，放在培养箱中 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接解解析析：使使用用已已灭灭菌菌的的接接种种
26、环环、培培养养皿皿，操操作作过过程程仍仍要要灭灭菌菌；打打开开含含菌菌种种的的试试管管需需要要通通过过火火焰焰灭灭菌菌，取取出出菌菌种种后后含含菌菌种种的的试试管管需需要要通通过过火火焰焰灭灭菌菌后后再再塞塞好好棉棉塞塞；将将沾沾有有菌菌种种的的接接种种环环迅迅速速伸伸入入平平板板内内，划划三三至至五五条条平平行行线线后盖上皿盖；最后应将平板倒置，放入培养箱中培养后盖上皿盖；最后应将平板倒置，放入培养箱中培养。答案：答案：D 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接3稀稀释释涂涂布布平平板板法法是是微微生生物物培培养养中中的的一一种种常常用用的的接种方法。下列相关叙述错误的是接种方法。下列相关叙述错误的是()A操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释B需需将将不不同同稀稀释释度度的的菌菌液液分分别别涂涂布布到到固固体体培培养养基基表面表面C不不同同浓浓度度的的菌菌液液均均可可在在培培养养基基表表面面形形成成单单个个的的菌落菌落D操操作作过过程程中中对对培培养养基基和和涂涂布布器器等等均均需需进进行行严严格格灭菌处理灭菌处理变变 式式训训 练练C 情景导入情景导入 知识梳理知识梳理 方法突破方法突破 栏栏目目链链接接
