《微生物及无菌知识培训六步洗手法及进入洁净车间程序》由会员分享，可在线阅读，更多相关《微生物及无菌知识培训六步洗手法及进入洁净车间程序（45页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1微生物及无菌知识培训微生物及无菌知识培训一、前言我们所生活的环境中，到处都存在着大量的微生我们所生活的环境中，到处都存在着大量的微生物。在一般空气中，微生物达物。在一般空气中，微生物达80035008003500个个/m3/m3，在，在土壤中达土壤中达15001081500108个个/g/g，在严重污染的水中可达，在严重污染的水中可达107107个个/ml/ml。（饮用水要求细菌总数。（饮用水要求细菌总数100100个个/ml/ml，大，大肠杆菌肠杆菌33个个/ml/ml。经水塔或贮水池贮存后，短期内。经水塔或贮水池贮存后，短期内可繁殖至可繁殖至105106105106个个/ml/ml。）人
2、的头皮上有。）人的头皮上有140140万个万个/cm2/cm2，两手上约有，两手上约有440440万个，万个，1g1g指甲污垢有指甲污垢有3838亿亿个，个，1g1g粪便可达粪便可达101000101000亿个。可以说微生物是无亿个。可以说微生物是无处不在，无处不有。许多以前被人们认为是极端处不在，无处不有。许多以前被人们认为是极端（高温、高压、强酸、强碱、低温等）甚至是致（高温、高压、强酸、强碱、低温等）甚至是致死的环境，现在已发现生活着各种类型的微生物死的环境，现在已发现生活着各种类型的微生物（称为极端微（称为极端微 2生物）。事实说明，微生物有特别顽强的生存、生物）。事实说明，微生物有特
3、别顽强的生存、繁殖和变异能力来适应环境。繁殖和变异能力来适应环境。微生物种类繁多，有的对人有益，有的有害，有微生物种类繁多，有的对人有益，有的有害，有的无益也无害。但在药品生产过程中，不可能对的无益也无害。但在药品生产过程中，不可能对环境中的各种微生物加以区别对待，为保证药品环境中的各种微生物加以区别对待，为保证药品的安全有效，需要对其进行控制。空气中的微生的安全有效，需要对其进行控制。空气中的微生物多数附着在灰尘上，或以芽孢形式悬浮于空气物多数附着在灰尘上，或以芽孢形式悬浮于空气中，中，1m1m以下者处于悬浮状态，以下者处于悬浮状态，10m10m以上者会逐以上者会逐渐沉下来而形成菌尘。所以也
4、要对尘粒进行控制。渐沉下来而形成菌尘。所以也要对尘粒进行控制。大量临床资料表明，注射剂（尤其是静脉注射剂）大量临床资料表明，注射剂（尤其是静脉注射剂）如污染了如污染了712m712m的尘粒，可导致热原反应、肺动的尘粒，可导致热原反应、肺动脉炎、微血栓或异物肉芽肿等，严重的还会致人脉炎、微血栓或异物肉芽肿等，严重的还会致人死命。而如果污染了细菌，轻则局部红肿化脓，死命。而如果污染了细菌，轻则局部红肿化脓，重则引起全身细菌性感重则引起全身细菌性感 3n n染。因此，对微生物和尘粒进行更加严格的控制染。因此，对微生物和尘粒进行更加严格的控制对于针剂生产洁净室非常重要。对于针剂生产洁净室非常重要。人是
5、洁净室最大的污染源，占人是洁净室最大的污染源，占90%90%左右。一般男左右。一般男性每人每分钟向周围排放性每人每分钟向周围排放10001000个以上的含菌粒子，个以上的含菌粒子，女性为女性为750750个以上。穿无菌服时，静止时的发菌量个以上。穿无菌服时，静止时的发菌量为为1030010300个个/min/min，一般活动时发菌量为，一般活动时发菌量为15010001501000个个/min/min，行走时发菌量为，行走时发菌量为90025009002500个个/min/min。咳嗽。咳嗽一次发菌量为一次发菌量为7070070700个个/min/min，喷嚏一次为，喷嚏一次为40006000
6、0400060000个个/min/min。所以在洁净室中，人的数量。所以在洁净室中，人的数量和活动应有特别严格的限制。和活动应有特别严格的限制。二微生物简介二微生物简介4n n微生物是广泛存在于自然界的一群体形微小（直微生物是广泛存在于自然界的一群体形微小（直径小于径小于1mm1mm）、结构简单、肉眼看不见，必须藉）、结构简单、肉眼看不见，必须藉助光学或电子显微镜放大数百至数万倍才能观察助光学或电子显微镜放大数百至数万倍才能观察到的生物。需要说明的是，微生物是一个比较笼到的生物。需要说明的是，微生物是一个比较笼统的概念，界线有时非常模糊。如单细胞藻类和统的概念，界线有时非常模糊。如单细胞藻类和
7、一些原生动物也应算是微生物，但通常它们并不一些原生动物也应算是微生物，但通常它们并不放在微生物中进行研究。放在微生物中进行研究。微生物具有以下特点：微生物具有以下特点：体积小，面积大；体积小，面积大；吸吸收多，转化快（收多，转化快（20002000倍体重倍体重/h/h）；）；生长旺，繁生长旺，繁殖快（殖快（20min20min分裂一次）；分裂一次）；易变异，适应强；易变异，适应强；分布广，种类多（分布广，种类多（1010万种以上）。万种以上）。微生物按其结构、化学组成及生活习性等差异可微生物按其结构、化学组成及生活习性等差异可分成三大类：分成三大类：1 1真核细胞型细胞核的分化程度较高，有核膜
8、、真核细胞型细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体；胞质内有完整的细胞核仁和染色体；胞质内有完整的细胞 5n n器（如内质网、核糖体及线粒体等）。真菌属于器（如内质网、核糖体及线粒体等）。真菌属于此类型微生物。此类型微生物。2 2原核细胞型细胞核分化程度低，仅有原始核原核细胞型细胞核分化程度低，仅有原始核质，没有核膜与核仁；细胞器不很完善。这类微质，没有核膜与核仁；细胞器不很完善。这类微生物种类众多，有细菌、支原体、衣原体、立克生物种类众多，有细菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体和放线菌。次体、螺旋体和放线菌。3 3非细胞型没有典型的细胞结构，亦无产生能非细胞型没有典型的细胞结构，亦无产
9、生能量的酶系统，只能在活细胞内生长繁殖。体积微量的酶系统，只能在活细胞内生长繁殖。体积微小，能通过除菌滤器。病毒属于此类型微生物。小，能通过除菌滤器。病毒属于此类型微生物。微生物在自然界中的分布极为广泛，空气、土壤、微生物在自然界中的分布极为广泛，空气、土壤、江河、湖泊、海洋等都有数量不等、种类不一的江河、湖泊、海洋等都有数量不等、种类不一的微生物存在。在人类、动物和植物的体表及其与微生物存在。在人类、动物和植物的体表及其与外界相通的腔道中也有多种微生物存在。外界相通的腔道中也有多种微生物存在。6n n绝大多数微生物对人类和动、植物的生存是有益绝大多数微生物对人类和动、植物的生存是有益而必需的
10、。自然界中氮、碳、硫等多种元素循环而必需的。自然界中氮、碳、硫等多种元素循环靠微生物的代谢活动来进行。例如空气中的大量靠微生物的代谢活动来进行。例如空气中的大量氮气只有依靠微生物的作用才能被植物吸收，土氮气只有依靠微生物的作用才能被植物吸收，土壤中的微生物能将动、植物蛋白质转化为无机含壤中的微生物能将动、植物蛋白质转化为无机含氮化合物，以供植物生长的需要，而植物又为人氮化合物，以供植物生长的需要，而植物又为人类和动物所利用。因此，没有微生物，植物就不类和动物所利用。因此，没有微生物，植物就不能新陈代谢，而人类和动物也将无法生存。能新陈代谢，而人类和动物也将无法生存。另一方面，由极少数微生物引起
11、的传染病发病快、另一方面，由极少数微生物引起的传染病发病快、死亡率高、传播迅速、传播范围广，严重危害着死亡率高、传播迅速、传播范围广，严重危害着人民健康。人民健康。三微生物的形态结构7n n1 1细菌（原核单细胞生物）细菌（原核单细胞生物）细菌按形状可分为：球菌（细菌按形状可分为：球菌（0.52m0.52m）、杆菌（长）、杆菌（长15m15m，宽，宽0.31m0.31m）和螺形菌（大小与杆菌相似）和螺形菌（大小与杆菌相似）。按革兰氏染色法染色的不同，分为革兰氏阳性菌按革兰氏染色法染色的不同，分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。革兰氏阳性菌的细胞壁表面含和革兰氏阴性菌。革兰氏阳性菌的细胞壁表面含较多
12、的磷壁酸，会产生外毒素，如金黄色葡萄球较多的磷壁酸，会产生外毒素，如金黄色葡萄球菌；革兰氏阴性菌的细胞壁表面多含脂蛋白和脂菌；革兰氏阴性菌的细胞壁表面多含脂蛋白和脂多糖，会产生内毒素（即热原），如大肠杆菌。多糖，会产生内毒素（即热原），如大肠杆菌。细菌一般有细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核，细菌一般有细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核，有的还有荚膜、鞭毛、菌毛和芽胞等特殊结构。有的还有荚膜、鞭毛、菌毛和芽胞等特殊结构。细菌一般为无性繁殖，以二分法繁殖，几十分钟细菌一般为无性繁殖，以二分法繁殖，几十分钟或或1212小时分裂一次。小时分裂一次。8n n资料：关于芽孢资料：关于芽孢在温度逐渐降低或营养缺乏
13、时，芽胞杆菌属（如在温度逐渐降低或营养缺乏时，芽胞杆菌属（如炭疽杆菌）及梭状芽胞杆菌属（如破伤风杆菌）炭疽杆菌）及梭状芽胞杆菌属（如破伤风杆菌）能在菌体内形成一个折光性很强的不易着色小体，能在菌体内形成一个折光性很强的不易着色小体，称为芽胞。芽胞是处于休眠状态的细菌，并非细称为芽胞。芽胞是处于休眠状态的细菌，并非细菌的繁殖体，当环境适宜时，可恢复生长繁殖。菌的繁殖体，当环境适宜时，可恢复生长繁殖。芽胞在自然界分布广泛，要注意防止污染。芽胞芽胞在自然界分布广泛，要注意防止污染。芽胞的抵抗力强，对热力、干燥、辐射、化学消毒剂的抵抗力强，对热力、干燥、辐射、化学消毒剂等理化因素均有强大的抵抗力，用一
14、般的方法不等理化因素均有强大的抵抗力，用一般的方法不易将其杀死。有的芽胞可耐易将其杀死。有的芽胞可耐100100沸水煮沸数小时。沸水煮沸数小时。杀灭芽胞最可靠的方法是高压蒸汽灭菌。当进行杀灭芽胞最可靠的方法是高压蒸汽灭菌。当进行消毒灭菌时往往以芽胞是否被杀死作为判断灭菌消毒灭菌时往往以芽胞是否被杀死作为判断灭菌效果的指标。效果的指标。2 2霉菌（丝状真菌的通称，真核多细胞生物）霉菌（丝状真菌的通称，真核多细胞生物）9n n霉菌是真菌的一部分。在培养基上长成绒毛状或霉菌是真菌的一部分。在培养基上长成绒毛状或棉絮状的菌丝体的真菌统称为霉菌。棉絮状的菌丝体的真菌统称为霉菌。霉菌细胞呈狭长的管状，称为
15、菌丝。菌丝直径比霉菌细胞呈狭长的管状，称为菌丝。菌丝直径比细菌、放线菌大，约细菌、放线菌大，约210m210m。菌丝分枝连接，交。菌丝分枝连接，交错集合在一起的总体称为菌丝体。错集合在一起的总体称为菌丝体。霉菌大多数是多细胞微生物，菌丝细胞由细胞壁、霉菌大多数是多细胞微生物，菌丝细胞由细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核和各种细胞器组成。细细胞膜、细胞质、细胞核和各种细胞器组成。细胞壁很薄，往往在表面产生色素，使菌落出现各胞壁很薄，往往在表面产生色素，使菌落出现各种颜色。种颜色。霉菌靠孢子繁殖，有无性繁殖和有性繁殖两种方霉菌靠孢子繁殖，有无性繁殖和有性繁殖两种方式，以无性繁殖为主。式，以无性繁殖为主
16、。有些真菌可用酿酒造酱，或用于发酵生产柠檬酸、有些真菌可用酿酒造酱，或用于发酵生产柠檬酸、葡萄糖酸、酶、抗生素（如青霉素、头孢菌素）；葡萄糖酸、酶、抗生素（如青霉素、头孢菌素）；少数真菌能引起各种真菌病。真菌产生的真菌毒少数真菌能引起各种真菌病。真菌产生的真菌毒素（如黄曲霉素）有毒。素（如黄曲霉素）有毒。10n n3 3酵母菌（真核单细胞生物，属真菌）酵母菌（真核单细胞生物，属真菌）酵母菌以单细胞存在，呈圆形、卵圆形和香肠形，酵母菌以单细胞存在，呈圆形、卵圆形和香肠形，比细菌大，细胞长比细菌大，细胞长530m530m，宽，宽15m15m。细胞结构。细胞结构有细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核和各种
17、细胞有细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核和各种细胞器等。器等。酵母菌的增殖分无性繁殖和有性繁殖两个阶段，酵母菌的增殖分无性繁殖和有性繁殖两个阶段，有三种方式：芽殖、裂殖、孢子生殖。有三种方式：芽殖、裂殖、孢子生殖。酵母菌是重要的工业微生物，用于酿酒，生产单酵母菌是重要的工业微生物，用于酿酒，生产单细胞蛋白、细胞蛋白、B B族维生素、核酸、辅酶族维生素、核酸、辅酶A A、细胞色素、细胞色素C C等。一般对人体无害。等。一般对人体无害。4 4放线菌（原核单细胞生物）放线菌（原核单细胞生物）放线菌有生长发育良好的菌丝体，呈分枝状，菌放线菌有生长发育良好的菌丝体，呈分枝状，菌丝宽为丝宽为0.21.2m0.
18、21.2m，革兰氏阳性。其内部构造与细，革兰氏阳性。其内部构造与细菌相似，无完整的细胞核。菌落常呈幅射状，因菌相似，无完整的细胞核。菌落常呈幅射状，因此称放线菌。此称放线菌。11n n繁殖方式为无性孢子繁殖。最适繁殖方式为无性孢子繁殖。最适pH6.77.5pH6.77.5，温度，温度25302530。放线菌可用于生产抗生素、维生素和酶类，少数放线菌可用于生产抗生素、维生素和酶类，少数可引起人畜放线菌病。可引起人畜放线菌病。5 5病毒病毒病毒是一类体积十分微小，结构简单，只含一种病毒是一类体积十分微小，结构简单，只含一种核酸（核酸（DNADNA或或RNARNA），没有产生能量的酶系统，），没有产
19、生能量的酶系统，只能在活细胞内以复制方式增殖的非细胞型微生只能在活细胞内以复制方式增殖的非细胞型微生物。病毒在自然界分布非常广泛，在所有其它生物。病毒在自然界分布非常广泛，在所有其它生物中都有病毒寄居。病毒是最常见的致病微生物，物中都有病毒寄居。病毒是最常见的致病微生物，人类传染病中大约人类传染病中大约75%75%是由病毒引起的。是由病毒引起的。病毒体主要由核酸和蛋白质组成。病毒体积微小，病毒体主要由核酸和蛋白质组成。病毒体积微小，最大直径最大直径300nm300nm（如牛痘病毒），最小直径（如牛痘病毒），最小直径20nm20nm（如口蹄疫病毒），绝大多数在（如口蹄疫病毒），绝大多数在 12n
20、 n150nm150nm以下，能通过细菌滤器，用普通光学显微以下，能通过细菌滤器，用普通光学显微镜看不见，必须用电子显微镜放大数千至数万倍镜看不见，必须用电子显微镜放大数千至数万倍才能看见。形态多呈球形，少数为杆状或砖形。才能看见。形态多呈球形，少数为杆状或砖形。噬菌体（细菌病毒）有呈蝌蚪状的。噬菌体（细菌病毒）有呈蝌蚪状的。朊病毒于朊病毒于19821982年发现，它很特殊，与一般病毒不年发现，它很特殊，与一般病毒不同，是一种异常蛋白质，不含有核酸。与疯牛病同，是一种异常蛋白质，不含有核酸。与疯牛病（牛海绵状脑病）及人克雅氏病关系密切。其复（牛海绵状脑病）及人克雅氏病关系密切。其复制方式不明。
21、制方式不明。四微生物的营养1 1水分：水占细胞浆的水分：水占细胞浆的70%70%90%90%，是细胞的重，是细胞的重要组成成分。较普遍的观点认为：只有要组成成分。较普遍的观点认为：只有 13n n在含水的环境中微生物才能存活。但也有人发现在含水的环境中微生物才能存活。但也有人发现在无水碳氢化合物中微生物可长期存活。在无水碳氢化合物中微生物可长期存活。2 2碳源：碳源是构成细胞的重要物质。有些微生碳源：碳源是构成细胞的重要物质。有些微生物的碳源必须来自有机碳化合物如糖、蛋白质、物的碳源必须来自有机碳化合物如糖、蛋白质、脂肪、有机酸等（同时利用其化学能），属异养脂肪、有机酸等（同时利用其化学能），
22、属异养型；有些微生物不需有机碳化合物，以型；有些微生物不需有机碳化合物，以CO2CO2为碳为碳源，属自养型（分为光能自养型和化能自养型）。源，属自养型（分为光能自养型和化能自养型）。3 3氮源：氮是组成蛋白质和核酸的重要元素。氮源：氮是组成蛋白质和核酸的重要元素。4 4无机盐类：细菌所需无机盐包括磷、硫、镁、无机盐类：细菌所需无机盐包括磷、硫、镁、铁、钾、钠、钙、氯、锰、锌、钴、铜等。其中铁、钾、钠、钙、氯、锰、锌、钴、铜等。其中磷、硫、镁、钾、钠、铁需要量较多，其他只需磷、硫、镁、钾、钠、铁需要量较多，其他只需微量。微量。5 5生长因子：生长因子是某些微生物生长发生长因子：生长因子是某些微生
23、物生长发14n n育所必需，而其自身又不能合成的一类营养物质。育所必需，而其自身又不能合成的一类营养物质。包括维生素、嘌呤和嘧啶等。包括维生素、嘌呤和嘧啶等。n五微生物生长的影响因素1 1营养物营养物2 2pHpH值：各种微生物都有其最适宜的值：各种微生物都有其最适宜的pHpH值，大值，大多数细菌最适多数细菌最适pHpH为为6.87.46.87.4，但一般有较大的容忍，但一般有较大的容忍度，在度，在4949也可存活和生长，少数细菌能在极端也可存活和生长，少数细菌能在极端pHpH值范围内生长。真菌适于值范围内生长。真菌适于pHpH值值3636的微酸性环的微酸性环境，但在境，但在210210也可生
24、长。也可生长。3 3温度：微生物适于生长繁殖要有适宜的温度，温度：微生物适于生长繁殖要有适宜的温度，当超过其最低或最高可耐受的温度时，即停止生当超过其最低或最高可耐受的温度时，即停止生长或死亡。一般细菌最适温度为长或死亡。一般细菌最适温度为 15n n30403040，真菌为，真菌为20302030。4 4氧气：大多数细菌和所有霉菌都是需氧菌（在氧气：大多数细菌和所有霉菌都是需氧菌（在有氧环境中才能生长），少数细菌是厌氧菌（在有氧环境中才能生长），少数细菌是厌氧菌（在无氧环境中才能生长），有些细菌和酵母菌是兼无氧环境中才能生长），有些细菌和酵母菌是兼性需氧厌氧的，在有氧或无氧环境中都能生长繁性
25、需氧厌氧的，在有氧或无氧环境中都能生长繁殖。殖。5 5渗透压：微生物细胞膜和所有生物膜一样是一渗透压：微生物细胞膜和所有生物膜一样是一种半透膜，可让水自由通过，对溶质则有选择性。种半透膜，可让水自由通过，对溶质则有选择性。由于细胞壁的保护，微生物能存活在低渗透压的由于细胞壁的保护，微生物能存活在低渗透压的水中。而在高渗溶液（如高浓度的盐溶液或糖溶水中。而在高渗溶液（如高浓度的盐溶液或糖溶液、液、40%40%甘油）中，细胞会脱水并停止生长繁殖。甘油）中，细胞会脱水并停止生长繁殖。但也有一些专性耐高盐细菌只有在高盐但也有一些专性耐高盐细菌只有在高盐（1015%1015%）条件下才生长。）条件下才生
26、长。6 6表面张力：表面活性剂可降低表面张力表面张力：表面活性剂可降低表面张力 16n n它是影响细菌生长的因素之一。很多革兰氏阴性菌，特别它是影响细菌生长的因素之一。很多革兰氏阴性菌，特别是大肠菌群可很好地在表面活性剂包围的介质中生长，而是大肠菌群可很好地在表面活性剂包围的介质中生长，而大多数革兰氏阳性菌在表面张力低时（大多数革兰氏阳性菌在表面张力低时（0.05N/m0.05N/m）不能很）不能很好生长。阳离子表面活性剂对很多有机体有毒性，阴离子好生长。阳离子表面活性剂对很多有机体有毒性，阴离子表面活性剂毒性很小，非离子表面活性剂几乎没有毒性，表面活性剂毒性很小，非离子表面活性剂几乎没有毒性
27、，并可成为某些微生物的营养物。并可成为某些微生物的营养物。六消毒与灭菌消毒与灭菌是微生物实验技术中最基本的操作，从事药品消毒与灭菌是微生物实验技术中最基本的操作，从事药品生产和检验的人员都应当了解消毒与灭菌的方法及其意义，生产和检验的人员都应当了解消毒与灭菌的方法及其意义，严格遵守操作规程，否则会影响产品质量，危害患者安全。严格遵守操作规程，否则会影响产品质量，危害患者安全。1 1概念概念17n n1 1概念概念无菌无菌不存在活的生物（不存在活的生物（GMPGMP指南）。指南）。 “ “无菌无菌” ”从定义上来说是一个绝对的概念，但遗从定义上来说是一个绝对的概念，但遗憾的是，在科学和技术高度发
28、展的今天，药品的憾的是，在科学和技术高度发展的今天，药品的绝对无菌即做不到，也无法加以证实。然而，无绝对无菌即做不到，也无法加以证实。然而，无菌制剂的安全性要求人们设定无菌的相对标准。菌制剂的安全性要求人们设定无菌的相对标准。FDAFDA、欧洲制药工业界曾将百万分之一微生物污、欧洲制药工业界曾将百万分之一微生物污染率作为灭菌产品染率作为灭菌产品“ “无菌无菌” ”的相对标准，它和蒸的相对标准，它和蒸汽灭菌后产品中微生物存活的概率为汽灭菌后产品中微生物存活的概率为10-610-6（即产（即产品的无菌保证值为品的无菌保证值为6 6），系同一标准的不同表示法。），系同一标准的不同表示法。这一标准于这
29、一标准于19801980起收录于起收录于USPXXUSPXX中，如今已为世中，如今已为世界各国普遍接受和采用。界各国普遍接受和采用。灭菌灭菌使达到无菌状态的方法（使达到无菌状态的方法（GMPGMP指南指南18n n南）。用物理或化学方法杀灭传播媒介上所有的南）。用物理或化学方法杀灭传播媒介上所有的微生物，使其达到无菌（微生物，使其达到无菌（GBGB）。通常是指杀灭或）。通常是指杀灭或除去全部活的微生物（包括繁殖体和芽孢）。除去全部活的微生物（包括繁殖体和芽孢）。 消毒消毒用物理或化学方法杀灭或清除传播媒介用物理或化学方法杀灭或清除传播媒介上的病原微生物，使其达到无害化（上的病原微生物，使其达到
30、无害化（GBGB）。通常）。通常是指杀死病原微生物的繁殖体，但不能破坏其芽是指杀死病原微生物的繁殖体，但不能破坏其芽孢。所以消毒是不彻底的，不能代替灭菌。孢。所以消毒是不彻底的，不能代替灭菌。 无菌制剂无菌制剂不存在活的微生物的制剂（不存在活的微生物的制剂（GMPGMP指指南）。南）。 非无菌制剂非无菌制剂所含活的微生物量符合卫生学标所含活的微生物量符合卫生学标准的制剂（准的制剂（GMPGMP指南）。指南）。 2 2常用消毒剂常用消毒剂消毒剂消毒剂常用量常用量用途用途19n n乙醇乙醇70%75%70%75%水溶液水溶液0.5%0.5%洗必泰溶于洗必泰溶于70%70%乙醇，再加入乙醇，再加入2
31、%2%甘油甘油用于皮肤、器具等消毒用于皮肤、器具等消毒供洗手用消毒供洗手用消毒异丙醇异丙醇75%75%水溶液水溶液用于皮肤、器具等消用于皮肤、器具等消毒毒甲醛甲醛37%40%37%40%甲醛液甲醛液89ml89ml，再加入，再加入45g45g高高锰酸钾锰酸钾每每m3m3熏蒸量，密闭熏蒸量，密闭1224h1224h。刺激性强。刺激性强戊二醛戊二醛2%2%水溶液水溶液用于空气、器具等消毒。用于空气、器具等消毒。广谱、高效、低毒，可杀芽孢和病毒。刺激性较广谱、高效、低毒，可杀芽孢和病毒。刺激性较轻。轻。新洁尔灭（苯扎溴铵）新洁尔灭（苯扎溴铵）0.1%0.1%水溶液水溶液用于用于皮肤、粘膜、器具等消毒
32、，有清洁和消毒双重功皮肤、粘膜、器具等消毒，有清洁和消毒双重功效。抗菌谱较窄。效。抗菌谱较窄。20n n杜灭芬（消毒宁）杜灭芬（消毒宁）0.05%0.1%0.05%0.1%水溶液水溶液用用于皮肤、器具等消毒于皮肤、器具等消毒过氧乙酸过氧乙酸0.2%0.5%0.2%0.5%水溶液水溶液 新配新配0.5%0.5%水溶液水溶液1g/m31g/m3用于器具等消毒抗菌谱广，用于器具等消毒抗菌谱广，可可用于皮肤消毒杀灭某些病毒用于皮肤消毒杀灭某些病毒熏蒸但性质不稳定熏蒸但性质不稳定乳酸乳酸0.331mol/L0.331mol/L11.5ml/m311.5ml/m3熏蒸或与等量苯酚合用熏蒸熏蒸或与等量苯酚合
33、用熏蒸喷喷雾，用于空气消毒，有强杀菌作用雾，用于空气消毒，有强杀菌作用熏蒸，密闭熏蒸，密闭12h12h以上以上麝香草酚麝香草酚5%5%麝香草酚溶于麝香草酚溶于50%50%乙醇乙醇喷洒喷洒墙面、地面，杀霉菌墙面、地面，杀霉菌21n n3 3常用灭菌法常用灭菌法1 1）干热灭菌法常见的有火焰、烧灼、干烤和红）干热灭菌法常见的有火焰、烧灼、干烤和红外线灭菌等。外线灭菌等。火焰、烧灼：通常用于实验室无菌操作中金属火焰、烧灼：通常用于实验室无菌操作中金属或其它耐火材料制成的器具的灭菌。或其它耐火材料制成的器具的灭菌。干烤和红外线：利用干热空气或热辐射进行灭干烤和红外线：利用干热空气或热辐射进行灭菌。一般
34、菌。一般135145135145需需35h35h，160170160170需需2h2h以上，以上，170180170180需需1h1h以上，以上，180200180200需需0.51h0.51h。除热。除热原则需原则需25030min25030min，或，或20045min20045min，1802h1802h。空气传热慢，穿透力不强，故干热灭菌时间长。空气传热慢，穿透力不强，故干热灭菌时间长。干热灭菌时烤箱内装入物品应留有空隙，以利空干热灭菌时烤箱内装入物品应留有空隙，以利空气流动，否则使箱内温度不均，部分物品灭菌不气流动，否则使箱内温度不均，部分物品灭菌不彻底。彻底。22n n2 2）湿热
35、灭菌法通过热蒸汽或沸水使蛋白质变性）湿热灭菌法通过热蒸汽或沸水使蛋白质变性而杀灭微生物的方法。湿热穿透力强，灭菌效果而杀灭微生物的方法。湿热穿透力强，灭菌效果较干热好。较干热好。煮沸或流通蒸汽灭菌：常压下沸水和蒸汽的温煮沸或流通蒸汽灭菌：常压下沸水和蒸汽的温度是度是100100，一般处理，一般处理3060min3060min可杀死细菌繁殖体，可杀死细菌繁殖体，但不能完全杀灭芽孢。此法适用于不能高压蒸汽但不能完全杀灭芽孢。此法适用于不能高压蒸汽灭菌的物品。灭菌的物品。低温间隙灭菌（巴斯德灭菌法）：将物品先用低温间隙灭菌（巴斯德灭菌法）：将物品先用60806080加热（或煮沸）加热（或煮沸）1h1
36、h，然后置，然后置20252025保存保存24h24h（或常温过夜），使其中残存的芽孢萌发成繁（或常温过夜），使其中残存的芽孢萌发成繁殖体，再用以上条件灭菌，如此反复三次。本法殖体，再用以上条件灭菌，如此反复三次。本法适用于不耐高温或高温下易变质的物品，但很费适用于不耐高温或高温下易变质的物品，但很费时。时。高压蒸汽灭菌（热压灭菌法）：超过一个大气高压蒸汽灭菌（热压灭菌法）：超过一个大气压时，水的沸点高于压时，水的沸点高于100100，反之亦然。，反之亦然。 23n n高压蒸汽灭菌就是通过加压提高蒸汽温度，灭菌高压蒸汽灭菌就是通过加压提高蒸汽温度，灭菌效果最好。它简便、经济、可靠、无毒，是最可
37、效果最好。它简便、经济、可靠、无毒，是最可靠、应用最广泛的灭菌法。此法适用于耐高温和靠、应用最广泛的灭菌法。此法适用于耐高温和潮湿的物品。常用条件为：潮湿的物品。常用条件为：115.530min115.530min121.520min121.520min126.515min126.515min注意事项：注意事项：a.a.必须完全排出灭菌器内的空气。否则会影响灭必须完全排出灭菌器内的空气。否则会影响灭菌器内温度达到规定的要求。菌器内温度达到规定的要求。b.b.注意被灭菌物品的温度。灭菌器内温度与被灭注意被灭菌物品的温度。灭菌器内温度与被灭菌物品的温度一般是一致的，但在蒸汽输入过快菌物品的温度一般
38、是一致的，但在蒸汽输入过快时，后者可能低于前者，所以升温时要有一定的时，后者可能低于前者，所以升温时要有一定的预热时间。另外，降温过快易引起玻璃炸裂。因预热时间。另外，降温过快易引起玻璃炸裂。因此，对于一种灭菌产品，此，对于一种灭菌产品， 24n n应制定一固定的灭菌曲线（象冻干曲线一样）。应制定一固定的灭菌曲线（象冻干曲线一样）。c.c.定期检查灭菌器内温度的准确性。定期检查灭菌器内温度的准确性。3 3）化学灭菌法利用化学试剂形成的气体来杀灭）化学灭菌法利用化学试剂形成的气体来杀灭微生物的方法。常用的灭菌剂为环氧乙烷（又称微生物的方法。常用的灭菌剂为环氧乙烷（又称氧化乙烯）。环氧乙烷是广谱杀
39、菌剂，能杀灭细氧化乙烯）。环氧乙烷是广谱杀菌剂，能杀灭细菌、芽孢和多种病毒，还能杀死昆虫及虫卵。但菌、芽孢和多种病毒，还能杀死昆虫及虫卵。但由于环氧乙烷易燃易爆且有毒（有致变异性），由于环氧乙烷易燃易爆且有毒（有致变异性），用于药品方面极有限，多用于医疗器械、塑料制用于药品方面极有限，多用于医疗器械、塑料制品等灭菌。（不能用于橡胶和乳胶手套，能将其品等灭菌。（不能用于橡胶和乳胶手套，能将其溶解。）溶解。）4 4）滤过除菌法利用细菌不能通过致密具孔滤材）滤过除菌法利用细菌不能通过致密具孔滤材的原理，除去对热不稳定的药品溶液或液体物质的原理，除去对热不稳定的药品溶液或液体物质中的细菌的方法。过滤法
40、一般只能除菌，不能除中的细菌的方法。过滤法一般只能除菌，不能除去支原体和病毒。去支原体和病毒。25n n过滤除菌的效果与滤膜的性能、孔径的大小、密过滤除菌的效果与滤膜的性能、孔径的大小、密度、滤膜的厚度等因素有关。度、滤膜的厚度等因素有关。滤过除菌法要求最终过滤的滤膜孔径为滤过除菌法要求最终过滤的滤膜孔径为0.22m0.22m。由于各厂家生产的相同规格的滤膜质量并不一致，由于各厂家生产的相同规格的滤膜质量并不一致，为了保证除菌效果，在使用前后应检查滤器的完为了保证除菌效果，在使用前后应检查滤器的完好性（如压力维持试验或起泡点试验）。好性（如压力维持试验或起泡点试验）。一个过滤器的使用时间应根据
41、品种验证后确定，一个过滤器的使用时间应根据品种验证后确定，一般不应超过一般不应超过8 8小时。小时。5 5）辐射灭菌法辐射有两种类型：一种是电磁波）辐射灭菌法辐射有两种类型：一种是电磁波辐射，如紫外线、红外线、微波；一种是电离辐辐射，如紫外线、红外线、微波；一种是电离辐射，如可引起被照射物电离的射，如可引起被照射物电离的X X射线、射线、 射线。射线。紫外线：紫外光波长在紫外线：紫外光波长在136390nm136390nm之间，其中之间，其中260nm260nm左右能破坏核酸，杀菌作用最强。左右能破坏核酸，杀菌作用最强。 26n n另外，空气中的氧受紫外线照射后，可微量转变另外，空气中的氧受紫
42、外线照射后，可微量转变为臭氧共同起杀菌作用。紫外线消毒的效果与光为臭氧共同起杀菌作用。紫外线消毒的效果与光源的功率、光源与被照射物的距离、照射时间、源的功率、光源与被照射物的距离、照射时间、温度和湿度等因素有关。我国规定紫外灯照射强温度和湿度等因素有关。我国规定紫外灯照射强度在距离度在距离1m1m处不低于处不低于70W/cm270W/cm2（以紫外线测强（以紫外线测强仪测定）。在操作面上要求强度达仪测定）。在操作面上要求强度达40W/cm240W/cm2以上。以上。一般每一般每10m210m2装装30W30W灯管灯管1 1支，工作前开支，工作前开3060min3060min。紫外灯的输出功率随
43、使用时间增加而降低。国产紫外灯的输出功率随使用时间增加而降低。国产紫外灯的平均寿命（点到紫外灯的平均寿命（点到70%70%额定功率的时间）额定功率的时间）一般为一般为2000h2000h，超过平均寿命时，就达不到预期效，超过平均寿命时，就达不到预期效果，必须更换。果，必须更换。紫外线的穿透力很弱，不能穿透一般包装材料，紫外线的穿透力很弱，不能穿透一般包装材料，如玻璃、塑料薄膜、纸等。玻璃能强烈吸收小于如玻璃、塑料薄膜、纸等。玻璃能强烈吸收小于350nm350nm的紫外线，石英玻璃能吸收的紫外线，石英玻璃能吸收 27n n小于小于200nm200nm的紫外线。因此，它主要用于空气和的紫外线。因此
44、，它主要用于空气和物体表面消毒，特制的紫外灯装置也可用于水的物体表面消毒，特制的紫外灯装置也可用于水的消毒。消毒。紫外线对眼、皮肤有损坏，照射过程中产生的臭紫外线对眼、皮肤有损坏，照射过程中产生的臭氧对眼、鼻腔有刺激，臭氧过多时使人头晕、胸氧对眼、鼻腔有刺激，臭氧过多时使人头晕、胸闷、血压下降。闷、血压下降。红外线：通过加热碳化硅板产生的辐射热能，红外线：通过加热碳化硅板产生的辐射热能，由空气传导加热灭菌。如红外线烤箱，温度可达由空气传导加热灭菌。如红外线烤箱，温度可达180180左右。热效应特点是由表及里。左右。热效应特点是由表及里。微波：微波灭菌主要是因其热效应。微波加热微波：微波灭菌主要
45、是因其热效应。微波加热升温快，温度高且均匀，杀菌作用强。热效应特升温快，温度高且均匀，杀菌作用强。热效应特点是由里及表。不同性质的物品吸收微波的能力点是由里及表。不同性质的物品吸收微波的能力不同，其热效应和消毒效果也不同。不同，其热效应和消毒效果也不同。28n n微波有一定穿透力，但不强。微波对人体有害，微波有一定穿透力，但不强。微波对人体有害，要注意防护。要注意防护。60Co60Co灭菌：放射性同位素灭菌：放射性同位素60Co60Co（或（或137Cs137Cs）衰）衰变时可放射出变时可放射出 射线，射线， 射线的能量高、穿透力强，射线的能量高、穿透力强，可使细胞内各种活性物质发生化学变化，
46、从而使可使细胞内各种活性物质发生化学变化，从而使细菌损伤或死亡。细菌损伤或死亡。经经60Co60Co辐射灭菌的物品温度升高很少，一般仅约辐射灭菌的物品温度升高很少，一般仅约55，故又称，故又称“ “冷灭菌冷灭菌” ”。60Co60Co辐射存在两个方面的安全问题：一是辐射的辐射存在两个方面的安全问题：一是辐射的直接作用。直接作用。 射线对人体细胞同样有害；二是经过射线对人体细胞同样有害；二是经过辐射的食品、药品的安全性。辐射的食品、药品的安全性。19841984年美国农业部年美国农业部食品安全实验室用辐射处理的鸡肉喂饲小鼠，发食品安全实验室用辐射处理的鸡肉喂饲小鼠，发现患现患*肿瘤增加，包括加重
47、癌病损害。因此肿瘤增加，包括加重癌病损害。因此60Co60Co辐射用于食品和药品都应经过安全试验，进行科辐射用于食品和药品都应经过安全试验，进行科学的、全面的评学的、全面的评 29n n价，高剂量的辐射药品更应慎重。价，高剂量的辐射药品更应慎重。美国药典（？版）规定美国药典（？版）规定25kGy25kGy为有效灭菌剂量。为有效灭菌剂量。19971997年我年我国卫生部颁发了国卫生部颁发了60Co60Co中药灭菌标准，该标准限国内流通中中药灭菌标准，该标准限国内流通中药可用药可用60Co60Co辐照灭菌，规定了允许辐照的药材和中成药的辐照灭菌，规定了允许辐照的药材和中成药的品种和剂量。品种和剂量
48、。中药辐照最大吸收剂量标准：中药辐照最大吸收剂量标准：散剂散剂3kGy3kGy片剂片剂3kGy3kGy丸剂丸剂5kGy5kGy中药原料粉中药原料粉6kGy6kGyn n附录：附录：1 1药品生产洁净室（区）的空气洁净度等级药品生产洁净室（区）的空气洁净度等级（GMP1998GMP1998）洁净度级别洁净度级别尘粒最大允许数（个尘粒最大允许数（个/m3/m3）微生物最微生物最大允许数大允许数0.5m5m0.5m5m浮游菌（个浮游菌（个/m3/m3）沉降菌（个沉降菌（个/ /皿）皿）100100级级3,5000513,50005110,00010,000级级350,0002,0001003350,
49、0002,000100330n n100,000100,000级级3,500,00020,000500103,500,00020,00050010300,000300,000级级10,500,00060,00010,500,00060,0001515注：注：我国我国GMP1998GMP1998附录规定：附录规定：“ “洁净室（区）在静态条件下检测洁净室（区）在静态条件下检测的尘埃粒子数、浮游菌数或沉降菌必须符合规定，应定期监控动态条的尘埃粒子数、浮游菌数或沉降菌必须符合规定，应定期监控动态条件下的洁净状况。件下的洁净状况。” ”因此，洁净室（区）空气洁净度的测定要求为静因此，洁净室（区）空气洁
50、净度的测定要求为静态测试，动态监控。对尘粒和微生物中的两项测定指标，至少各测一态测试，动态监控。对尘粒和微生物中的两项测定指标，至少各测一项。项。空气洁净度为空气洁净度为100100级的洁净室，室内大于等于级的洁净室，室内大于等于5m5m尘粒的计数，应尘粒的计数，应进行多次采样，当某一测试值多次出现时，该值方可认可。进行多次采样，当某一测试值多次出现时，该值方可认可。测试按医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试测试按医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法。方法。2 2水和一些物料的卫生学（法定）标准：水和一些物料的卫生学（法定）标准： 饮用水饮用水某些辅料某些辅料#
51、二部片剂二部片剂二部胶囊剂二部胶囊剂%XX%XX霜霜* *细菌总数细菌总数100/ml1000/g1000/g1000/g100/g100/ml1000/g1000/g1000/g100/g霉菌、酵母菌数霉菌、酵母菌数100/g100/g100/g10/g100/g100/g100/g10/g大肠杆菌大肠杆菌3/100ml3/100mlNCNC沙门氏菌沙门氏菌NCNCNCNCNCNCNCNC铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌NCNCNCNCNCNC金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌NCNCNCNCNCNC注：注：# #：包括有乳糖、药用炭、淀粉、葡萄糖、糊精。：包括有乳糖、药用炭、淀粉、葡萄糖、糊精。31n
52、n%：XX胶囊属中药制剂，含胎盘粉，按中国药典2000版一部规定，还不得检出沙门菌。*：XX霜属中药制剂，用于创伤、烧伤，故要求细菌总数100个/g、霉菌数10个/g。说明：表示每1g或每1ml不得检出。NC：表示无规定。可不检查。32六步洗手法33六步洗手法六步洗手法n n科学的六步洗手法是在平时日常生活中预防肠道传染病的关键。现做以下介绍：n n第一步：第一步：掌心相对，手指并拢相互摩擦； 第二步：第二步：手心对手背沿指缝相互搓擦，交换进行；n n第三步：第三步：掌心相对，双手交叉沿指缝相互摩擦；34n n第四步：第四步：一手握另一手大拇指旋转搓擦，交换进行；n n第五步：第五步：弯曲各手
53、指关节，在另一手掌心旋转搓擦，交换进行；n n第六步：第六步：搓洗手腕，交换进行。n n最好流水洗手加肥皂擦洗，90%左右的沾污在手上的微生物都能洗干净。如果几个人合用一盆水，在某种35n n意义上讲比不洗还不好。把握洗手时间。手随时随地都有弄脏的可能，时时不停洗手，难以办到。安排是：工作（学习）结束洗一洗手；外出归来洗一洗手；食前便后洗一洗手；特别是食前便后更是不能勿视的一招。随着生活水平的提高，人们自我保护意识增强，在做好饮食、饮水卫生的同时，注意一双手的卫生，那么，肠道传染病是完全可能预防的。36 操作员工进入生产区的操作员工进入生产区的 清洗、消毒规程清洗、消毒规程37操作员工进入生产
54、区的清洗、消毒规程 脱鞋将鞋放入鞋柜转身穿脱鞋38将衣服饰物放入衣柜将衣服饰物放入衣柜 关柜门戴口罩戴口罩穿洁净衣（下身）穿洁净衣（下身） 39穿洁净衣（右袖穿洁净衣（右袖 ）穿洁净衣（左袖）穿洁净衣（左袖） 穿洁净衣（系帽带）穿洁净衣（系帽带） 穿洁净衣（拉拉链）穿洁净衣（拉拉链） 40脱拖鞋脱拖鞋 转身转身 穿工鞋穿工鞋 对镜整理41清洗清洗 取洗手液取洗手液 用洗手液揉搓手部用洗手液揉搓手部 冲洗去除洗手液冲洗去除洗手液 42手风干手风干 喷消毒液喷消毒液 开门至碰珠开门至碰珠 进入风淋室并关门进入风淋室并关门 43风淋（面朝西）风淋（面朝西） 风淋（面朝南）风淋（面朝南） 风淋（面朝东）风淋（面朝东） 出风淋室并关门出风淋室并关门 4445
