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1、专题专题2 微生物的培养与应用微生物的培养与应用课题课题1 微生物的实验室培养微生物的实验室培养生生长因子因子生生长必不可少的微量有机必不可少的微量有机物物维生素、氨生素、氨基酸、碱基基酸、碱基等等水水在生物体内含量很高,在在生物体内含量很高,在低等生物体内含量更高低等生物体内含量更高外界外界摄入入无机无机盐为微生物提供碳源、氮源微生物提供碳源、氮源以外的各种重要元素,包以外的各种重要元素,包括某些大量元素括某些大量元素无机化合物无机化合物内容内容种种类主要方法主要方法应用范用范围区区别灭菌菌灼灼烧灭菌法菌法酒精灯火酒精灯火焰灼焰灼烧微生物接种工微生物接种工具,如接种具,如接种环、接种接种针或
2、其他或其他金属用具等,金属用具等,接种接种过程中程中试管口或瓶口等管口或瓶口等强强烈的理化烈的理化因素,能因素,能杀死物体内外死物体内外包括芽包括芽孢和和孢子在内的子在内的所有微生物所有微生物灭菌菌干干热灭菌法菌法干干热灭菌箱菌箱160170 加加热12 h玻璃器皿玻璃器皿(如吸如吸管、培养皿等管、培养皿等)、金属用具等、金属用具等不适合用其他不适合用其他方法方法灭菌而又菌而又能耐高温的物能耐高温的物品品强强烈的理烈的理化因素,化因素,能能杀死物死物体内外包体内外包括芽括芽孢和和孢子在内子在内的所有微的所有微生物生物高高压蒸蒸汽汽灭菌菌法法100 kPa、121 维持持1530 min培养基及
3、多种培养基及多种器材、物品器材、物品消消毒毒巴氏巴氏消毒消毒法法7075 煮煮30 min或或80 煮煮15 min牛奶、啤酒、牛奶、啤酒、果酒和果酒和酱油等油等不宜不宜进行高温行高温灭菌的液体菌的液体温和的物理、温和的物理、化学方法,化学方法,杀死表面微死表面微生物生物营养体养体或抑制或抑制营养养体繁殖,是体繁殖,是部分部分灭菌菌煮沸煮沸消毒消毒法法100 煮沸煮沸56 min(15130 min水蒸气水蒸气)日常食品、罐日常食品、罐装食品装食品消消毒毒紫外紫外线消消毒法毒法紫外紫外线照射照射30 min接种室、接接种室、接种箱、超种箱、超净工作台工作台温和的物理、温和的物理、化学方法,化学
4、方法,杀死表面微死表面微生物生物营养体养体或抑制或抑制营养养体繁殖,是体繁殖,是部分部分灭菌菌化学化学药剂消毒法消毒法用体用体积分数分数为70%75%的乙醇、的乙醇、碘酒涂抹,碘酒涂抹,来来苏水水喷洒洒等等用于皮肤、用于皮肤、伤口、口、动植植物物组织表面表面消毒,空气、消毒,空气、手手术器械、器械、塑料或玻璃塑料或玻璃器皿消毒等器皿消毒等灼灼烧时期期目的目的取菌种前取菌种前杀死接种死接种环上原有微生物上原有微生物每次每次划划线前前杀死上次划死上次划线后接种后接种环上残留的菌种,上残留的菌种,使下次划使下次划线的菌种直接来自于上次划的菌种直接来自于上次划线末端,使每次划末端,使每次划线菌种数目减少,达到菌种数目减少,达到分离菌株的目的分离菌株的目的接种接种结束后束后杀死接种死接种环上残存的菌种,避免上残存的菌种,避免细菌菌污染染环境和感染操作者境和感染操作者方法方法优点点缺点缺点平板划平板划线法法可以可以观察菌落的察菌落的特征、特征、对混合菌混合菌进行分离行分离不能不能计数数稀稀释涂布涂布平板法平板法可以可以计数,可以数,可以观察菌落特征察菌落特征操作操作较麻麻烦,稀,稀释度不度不够高高时,很,很难得到得到单个菌落个菌落