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1、 内分泌常用激素测定的原理、内分泌常用激素测定的原理、标本收集及注意事项标本收集及注意事项广东江门中心医院广东江门中心医院 内分泌科内分泌科第一节、第一节、 垂体相关激素测定垂体相关激素测定 1 1、促肾上腺皮质激素(、促肾上腺皮质激素(ACTHACTH)2 2、促甲状腺激素(、促甲状腺激素(TSHTSH)3 3、生长激素(、生长激素(GHGH)4 4、泌乳素(、泌乳素(PRLPRL)5 5、黄体生成素(、黄体生成素(LHLH)、卵泡刺激素()、卵泡刺激素(FSHFSH)6 6、抗利尿激素(、抗利尿激素(ADHADH)1 1、促肾上腺皮质激素(、促肾上腺皮质激素(ACTHACTH)测定)测定【
2、原理】【原理】 ACTHACTH由腺垂体由腺垂体ACTHACTH细胞分泌,刺激肾上腺皮质生长和释放各细胞分泌,刺激肾上腺皮质生长和释放各种类固醇激素,特别是皮质醇。种类固醇激素,特别是皮质醇。ACTHACTH分泌有昼夜节律变化,清晨分泌有昼夜节律变化,清晨最高,午夜最低,最高,午夜最低,ACTHACTH受促上腺皮质激素释放激素(受促上腺皮质激素释放激素(CRHCRH)调控,)调控,皮质醇在下丘脑和垂体水平反馈抑制皮质醇在下丘脑和垂体水平反馈抑制ACTHACTH分泌。分泌。1 1、促肾上腺皮质激素(、促肾上腺皮质激素(ACTHACTH)测定)测定【采血要点和注意事项】【采血要点和注意事项】 1.
3、1.由于由于ACTHACTH的分子不稳定,半衰期短(的分子不稳定,半衰期短(1010分钟),在采集分钟),在采集标本过程中容易被玻璃皿吸附,需预冷塑料注射器于上午标本过程中容易被玻璃皿吸附,需预冷塑料注射器于上午8 8时空时空腹采血,标本量腹采血,标本量2ml2ml,加入,加入EDTAEDTA抗凝,立即置于冰浴中,即送实抗凝,立即置于冰浴中,即送实验室;验室; 2.2.尽快分离血浆(尽快分离血浆(44低温离心)后于低温离心)后于-20-20以下冰箱保存以下冰箱保存(-70-70更好);更好); 3.3.各种应激可使各种应激可使ACTHACTH水平增高,应尽量避免。水平增高,应尽量避免。2 2、
4、促甲状腺激素(、促甲状腺激素(TSHTSH)测定)测定【原理】【原理】 TSH TSH由腺垂体分泌,作用于甲状腺,促进甲状腺激素由腺垂体分泌,作用于甲状腺,促进甲状腺激素的合成和分泌,的合成和分泌,TRHTRH可刺激可刺激TSHTSH分泌,而甲状腺激素反馈分泌,而甲状腺激素反馈抑制抑制TSHTSH分泌。分泌。【采血要点】【采血要点】 空腹不抗凝静脉血空腹不抗凝静脉血2ml2ml。2 2、促甲状腺激素(、促甲状腺激素(TSHTSH)测定)测定【注意事项】【注意事项】 (1 1)多巴胺、皮质醇可显著减少)多巴胺、皮质醇可显著减少TSHTSH的释放,在使用这些药物时的释放,在使用这些药物时TSHTS
5、H水水平可抑制到甲亢水平,生长抑素和平可抑制到甲亢水平,生长抑素和5 5羟色胺也可使羟色胺也可使TSHTSH分泌减少。分泌减少。 (2 2)在某些非甲状腺疾病和急性精神疾病,)在某些非甲状腺疾病和急性精神疾病,TSHTSH水平急剧波动使结果难水平急剧波动使结果难以分析,应待病情稳定后重新评价或连续观察以分析,应待病情稳定后重新评价或连续观察TSHTSH的动态变化。的动态变化。 (3 3)不同化验方法,灵敏度不同,其意义有所不同:)不同化验方法,灵敏度不同,其意义有所不同: RIA(RIA(放射免疫法放射免疫法) )不能区别正常人与甲亢病人;不能区别正常人与甲亢病人; IRMAIRMA(免疫放射
6、法)可区别绝大多数甲亢病(免疫放射法)可区别绝大多数甲亢病人和正常人,称为人和正常人,称为sTSHsTSH; ICMAICMA(免疫化学发光)和(免疫化学发光)和TRIFMATRIFMA(时间分辨(时间分辨免疫荧光法)为免疫荧光法)为uTSHuTSH。 血清血清TSH测定方法测定方法建议选择第三代及以上的建议选择第三代及以上的TSH测定方法测定方法3 3、生长激素(、生长激素(GHGH)测定)测定【原理】【原理】 GHGH由腺垂体由腺垂体GHGH细胞分泌,正常情况下细胞分泌,正常情况下GHGH呈脉冲式分泌,大部分是在夜呈脉冲式分泌,大部分是在夜间睡眠时分泌,受下丘脑神经内分泌细胞分泌的生长激素
7、释放激素和生长间睡眠时分泌,受下丘脑神经内分泌细胞分泌的生长激素释放激素和生长抑素调节。抑素调节。【采血要点】【采血要点】 1. 1.检查前一天晚饭后禁食,避免饮酒、喝茶或咖啡,勿过度兴奋,夜检查前一天晚饭后禁食,避免饮酒、喝茶或咖啡,勿过度兴奋,夜间保证充分睡眠。次晨醒后半小时内(勿下床活动并保持精神安静)卧位间保证充分睡眠。次晨醒后半小时内(勿下床活动并保持精神安静)卧位取静脉血取静脉血2ml2ml,不加抗凝剂送检,不加抗凝剂送检; ; 2. 2.门诊患者在家取血门诊患者在家取血; ;门诊抽血者,需要在安静环境下休息至少半小时门诊抽血者,需要在安静环境下休息至少半小时后方可采血后方可采血3
8、 3、生长激素(、生长激素(GHGH)测定)测定【注意事项和影响因素】【注意事项和影响因素】 GHGH为应激激素,故情绪紧张,手术刺激、体力活动,进食、为应激激素,故情绪紧张,手术刺激、体力活动,进食、禁食禁食24h24h以上以及入睡后,均可使以上以及入睡后,均可使GHGH水平升高,判断时需排除水平升高,判断时需排除影响因素。影响因素。 1. 1.GHGH减少的因素有肥胖、甲减、雌激素、生长抑素、脂肪酸、急性葡减少的因素有肥胖、甲减、雌激素、生长抑素、脂肪酸、急性葡萄糖负荷;萄糖负荷; 2.GH2.GH增加的因素包括抑制生长抑素、增加的因素包括抑制生长抑素、受体阻滞剂、多巴胺能激动剂、受体阻滞
9、剂、多巴胺能激动剂、胆碱能激动剂、胆碱能激动剂、受体激动剂、生长激素释放激素、低血糖,此外,大手受体激动剂、生长激素释放激素、低血糖,此外,大手术、紧张、胰高血糖素、输入氨基酸等也可引起术、紧张、胰高血糖素、输入氨基酸等也可引起GHGH增加。增加。4 4、泌乳素(、泌乳素(PRLPRL)测定)测定【原理】【原理】 PRLPRL由腺垂体细胞分泌,主要受泌乳素释放抑制激素的调节,许多因由腺垂体细胞分泌,主要受泌乳素释放抑制激素的调节,许多因素可以影响素可以影响PRLPRL的分泌。的分泌。【采血要点】【采血要点】 1.1.要求病人在清醒、安静和没有紧张以及乳腺检查之前采血,为避免要求病人在清醒、安静
10、和没有紧张以及乳腺检查之前采血,为避免刺激可于采血前刺激可于采血前1h1h预先留置肝素抗凝静脉导管预先留置肝素抗凝静脉导管; ; 2. 2.空腹采血,取静脉血空腹采血,取静脉血2ml2ml,标本不加抗凝剂送检,分离血清待测,标本不加抗凝剂送检,分离血清待测,2828储存储存24h24h对结果无影响,超过对结果无影响,超过24h24h需储存于需储存于-20-20。4 4、泌乳素(、泌乳素(PRLPRL)测定)测定【注意事项和影响因素】【注意事项和影响因素】 1.1.PRLPRL释放呈脉冲式分泌,存在一个与睡眠相关的波动,睡眠时释放呈脉冲式分泌,存在一个与睡眠相关的波动,睡眠时PRLPRL水水平升
11、高,醒后几个小时下降到最低点,因此,为避免睡眠平升高,醒后几个小时下降到最低点,因此,为避免睡眠- -醒觉时的高峰,醒觉时的高峰,建议在建议在9am9am至中午采血,取至中午采血,取3 3次血清次血清PRLPRL的平均值(每次间隔的平均值(每次间隔30603060分钟);分钟); 2 2. .引起高泌乳素血症的药物因素有引起高泌乳素血症的药物因素有H H2 2受体阻滞剂、雌激素、三环类抗受体阻滞剂、雌激素、三环类抗抑郁药、利血平、抑郁药、利血平、甲基多巴、氯丙嗪、胃复安等;甲基多巴、氯丙嗪、胃复安等; 3. 3.垂体损伤、受压或阻断:垂体柄受压或断裂(外伤、手术、放疗等)垂体损伤、受压或阻断:
12、垂体柄受压或断裂(外伤、手术、放疗等)、垂体浸润性疾病(结核、垂体肿瘤、结节病等)、垂体炎、空泡蝶鞍、垂体浸润性疾病(结核、垂体肿瘤、结节病等)、垂体炎、空泡蝶鞍、动静脉畸形、脑积水可使动静脉畸形、脑积水可使PRLPRL水平升高;水平升高; 4.4.其他使其他使PRLPRL水平升高的因素包括肝脏疾病、肾衰竭、原发甲减、多囊水平升高的因素包括肝脏疾病、肾衰竭、原发甲减、多囊卵巢综合征、肾上腺皮质功能减退等。卵巢综合征、肾上腺皮质功能减退等。 5 5、LHLH、FSHFSH测定测定【原理】【原理】 LHLH和和FSHFSH由腺垂体分泌,在女性由腺垂体分泌,在女性LHLH的主要作用是促进排卵和黄体形
13、成,的主要作用是促进排卵和黄体形成,FSHFSH促进卵泡生长和发育。在男性促进卵泡生长和发育。在男性LHLH促进睾丸间质细胞分泌睾酮、促进睾丸间质细胞分泌睾酮、FSHFSH刺激刺激和维持精子的发生和成熟。测定和维持精子的发生和成熟。测定LHLH和和FSHFSH对了解下丘脑对了解下丘脑- -垂体垂体- -性腺轴的功性腺轴的功能状态有重要意义。能状态有重要意义。【采血要点】【采血要点】 清清晨空腹采静脉血晨空腹采静脉血2ml2ml,不加抗凝送检。,不加抗凝送检。5 5、LHLH、FSHFSH测定测定【影响因素和注意事项】【影响因素和注意事项】 促性腺激素释放激素(促性腺激素释放激素(LHRHLHR
14、H)可刺激)可刺激LHLH和和FSHFSH的分泌,雌激素、孕激的分泌,雌激素、孕激素和睾酮在下丘脑和垂体水平对素和睾酮在下丘脑和垂体水平对LHLH、FSHFSH进行负反馈调节。进行负反馈调节。LHLH和和FSHFSH受年龄、受年龄、月经周期的影响,在一天的不同时间月经周期的影响,在一天的不同时间LHLH和和FSHFSH可有不规则的分泌波动,单可有不规则的分泌波动,单次化验结果有时难以解释,每次化验结果有时难以解释,每15-2015-20分钟采血分钟采血1 1次,将多次血混合后测平均次,将多次血混合后测平均值,可减少波动造成的差异,在分析值,可减少波动造成的差异,在分析LHLH和和FSHFSH时
15、应与靶器官激素同时考虑,时应与靶器官激素同时考虑,如雌二醇、孕酮或睾酮。如雌二醇、孕酮或睾酮。 6 6、抗利尿激素(、抗利尿激素(ADHADH)测定)测定【原理】【原理】 ADHADH主要由视上核和室旁核合成,经神经垂体分泌,主要主要由视上核和室旁核合成,经神经垂体分泌,主要受血液渗透压和容量的调节,作用于肾小管和集合管,促进受血液渗透压和容量的调节,作用于肾小管和集合管,促进水的重吸收。水的重吸收。【采血要点】【采血要点】 空腹不抗凝静脉血空腹不抗凝静脉血2ml2ml,或在禁水加压素试验开始时(基础),或在禁水加压素试验开始时(基础)与注射加压素前分别采静脉血。与注射加压素前分别采静脉血。6
16、 6、抗利尿激素(、抗利尿激素(ADHADH)测定)测定【注意事项和影响因素】【注意事项和影响因素】 1.1.血浆渗透压是生理情况下调节血浆渗透压是生理情况下调节ADHADH分泌的主要因素,高渗和低血容量分泌的主要因素,高渗和低血容量可刺激可刺激ADHADH分泌,此外,引起分泌,此外,引起ADHADH升高的其他因素包括从卧位改为立位、老升高的其他因素包括从卧位改为立位、老年人;年人; 2.2.某些药物可刺激某些药物可刺激ADHADH释放,如尼古丁、吗啡、三环类抗抑郁药、长春释放,如尼古丁、吗啡、三环类抗抑郁药、长春新碱、环磷酰胺、安妥明、氯磺丙脲。抑制新碱、环磷酰胺、安妥明、氯磺丙脲。抑制AD
17、HADH释放的药物有苯妥英钠、释放的药物有苯妥英钠、氯丙嗪、乙醇等。氯丙嗪、乙醇等。 第二节、第二节、 甲状腺和甲状旁腺相关激素测定甲状腺和甲状旁腺相关激素测定 2 2、FTFT3 3、FTFT4 4测定测定3 3、甲状腺自身抗体、甲状腺自身抗体TRAbTRAb测定测定4 4、TGAbTGAb和和TPOAbTPOAb测定测定5 5、完整、完整PTHPTH测定测定 1 1、TTTT3 3、TTTT4 4测定测定6 6、降钙素(、降钙素(CTCT)测定)测定1 1、TTTT3 3、TTTT4 4测定测定【原理】【原理】 全部全部 T T4 4和和 20%20%的的 T T3 3由甲状腺滤泡上皮直接
18、合成和分泌,由甲状腺滤泡上皮直接合成和分泌,80%80%的的T T3 3由由T T4 4在外周组织脱碘而来,血液中大部分甲状腺激素与在外周组织脱碘而来,血液中大部分甲状腺激素与TBGTBG呈可逆性结合,呈可逆性结合,T T3 3和和T T4 4与蛋白结合的量分别为与蛋白结合的量分别为99.7%99.7%和和99.97%99.97%,测定,测定TTTT3 3和和TTTT4 4分别代表结合与分别代表结合与游离游离T T3 3和和T T4 4的总量。的总量。【采血要点】【采血要点】 晨空腹取静脉血晨空腹取静脉血1,53.0ml1,53.0ml,不抗凝干燥管送检,分离血清进行测定。,不抗凝干燥管送检,
19、分离血清进行测定。【注意事项和影响因素】【注意事项和影响因素】 1.1.受受TBGTBG的影响,雌激素(如妊娠、避孕药)可使的影响,雌激素(如妊娠、避孕药)可使TBGTBG升高,雄激素、水升高,雄激素、水杨酸、皮质醇、严重肝肾疾病和低蛋白血症时杨酸、皮质醇、严重肝肾疾病和低蛋白血症时TBGTBG下降;下降; 2.2.血中存在的抗血中存在的抗T3T3、抗、抗T4 T4 抗体可以干扰化验结果,使之出现假性增高或抗体可以干扰化验结果,使之出现假性增高或降低(根据试验方法);降低(根据试验方法); 3.3.采血时病人刚服用含采血时病人刚服用含T3T3的甲状腺激素,可使的甲状腺激素,可使T3T3的水平升
20、高;的水平升高; 4.4.服用抑制服用抑制T4T4转化为转化为T3T3的药物如丙基硫氧嘧啶、普萘洛尔、地塞米松、的药物如丙基硫氧嘧啶、普萘洛尔、地塞米松、胺碘酮可影响胺碘酮可影响T3T3值,使值,使T3T3减少。减少。1 1、TTTT3 3、TTTT4 4测定测定2 2、FTFT3 3、FTFT4 4测定测定【原理】【原理】 FT3FT3和和FT4FT4不受不受TBGTBG的影响,是甲状腺激素中具有代谢活性的部分,能的影响,是甲状腺激素中具有代谢活性的部分,能更直接反应甲状腺的功能。更直接反应甲状腺的功能。【采血要点】【采血要点】 晨空腹取静脉血晨空腹取静脉血1,53.0ml1,53.0ml,
21、不抗凝干燥管送检,分离血清进行测定。,不抗凝干燥管送检,分离血清进行测定。【注意事项和影响因素】【注意事项和影响因素】 个别人体内存在抗个别人体内存在抗T3T3和抗和抗T4T4抗体,可以干扰抗体,可以干扰FT3FT3、FT4FT4的化验结果,在的化验结果,在分析时要结合病人情况以及分析时要结合病人情况以及TSHTSH结果来判断病人的甲状腺功能情况。结果来判断病人的甲状腺功能情况。3 3、TRAbTRAb测定测定【原理】【原理】 全部全部 TRAbTRAb主要由甲状腺内的免疫活性淋巴细胞产主要由甲状腺内的免疫活性淋巴细胞产生,作用于甲状腺生,作用于甲状腺TSHTSH受体上,受体上,TRAbTRA
22、b为多克隆抗体,为多克隆抗体,其中包括甲状腺刺激抗体(其中包括甲状腺刺激抗体(TSAbTSAb),使甲状腺激素合),使甲状腺激素合成和分泌增加,导致成和分泌增加,导致GravesGraves病,甲状腺刺激阻断抗体病,甲状腺刺激阻断抗体(TSBAbTSBAb)使甲状腺激素分泌减少。)使甲状腺激素分泌减少。【采血要点】【采血要点】 静脉血静脉血1.03.0ml1.03.0ml,不抗凝送检,分离血清测定。,不抗凝送检,分离血清测定。【注意事项和影响因素】【注意事项和影响因素】 试验方法不同其意义有所不同,放射受体法是依试验方法不同其意义有所不同,放射受体法是依据患者抗体阻断同位素标记的据患者抗体阻断
23、同位素标记的TSHTSH与与TSHTSH受体结合而测受体结合而测的的TRAbTRAb,不能确定,不能确定TRAbTRAb的性质,生物法可以测定兴奋的性质,生物法可以测定兴奋性和阻断性性和阻断性TRAbTRAb。4 4、TGAbTGAb和和TPOAbTPOAb测定测定【原理】【原理】 甲状腺球蛋白为甲状腺滤泡胶质的主要成份,甲状腺微粒体抗体甲状腺球蛋白为甲状腺滤泡胶质的主要成份,甲状腺微粒体抗体(TMAbTMAb)其真正抗原成份为甲状腺过氧化物酶()其真正抗原成份为甲状腺过氧化物酶(TPOTPO),),TGAbTGAb和和TPOAbTPOAb经常经常存在于甲状腺自身免疫性疾病中,存在于甲状腺自身
24、免疫性疾病中,TPOAbTPOAb与甲状腺淋巴细胞浸润关系密切。与甲状腺淋巴细胞浸润关系密切。【采血要点】【采血要点】 静脉血静脉血1.03.0ml1.03.0ml,不抗凝送检。,不抗凝送检。【注意事项和影响因素】【注意事项和影响因素】 大约大约10%10%的健康正常人有低水平的的健康正常人有低水平的TGAbTGAb和和TPOAbTPOAb,影响影响TGAbTGAb和和TPOAbTPOAb的其他因素包括:的其他因素包括: 用甲状腺激素替代治疗慢性淋巴细胞性甲状腺用甲状腺激素替代治疗慢性淋巴细胞性甲状腺炎可使抗体滴度轻中度降低。炎可使抗体滴度轻中度降低。 甲状腺次全切或全切可使抗体滴度下降。甲状
25、腺次全切或全切可使抗体滴度下降。 131I 131I治疗使抗体滴度升高,峰值在治疗使抗体滴度升高,峰值在2 23 3个月。个月。 皮质醇和抗甲状腺药物治疗可降低抗体滴度。皮质醇和抗甲状腺药物治疗可降低抗体滴度。 患慢性淋巴细胞性甲状腺炎的儿童和孕妇抗体患慢性淋巴细胞性甲状腺炎的儿童和孕妇抗体滴度较低,孕妇产后升高。滴度较低,孕妇产后升高。 干扰素干扰素可增加抗体的产生。可增加抗体的产生。4 4、TGAbTGAb和和TPOAbTPOAb测定测定5 5、PTHPTH测定测定【原理】【原理】 PTHPTH由甲状旁腺的主细胞合成和分泌,血清中完整的有生物活性的由甲状旁腺的主细胞合成和分泌,血清中完整的
26、有生物活性的 PTH (84PTH (84个氨基酸个氨基酸) )占占5 520%20%,其半衰期不到,其半衰期不到5 5分钟,具有部分生物活性的分钟,具有部分生物活性的氨基端氨基端PTHPTH片段量很少片段量很少, PTH, PTH分子中无生物活性的羧基端和中段占分子中无生物活性的羧基端和中段占757595%95%,有较长的半衰期,使用免疫放射法或免疫化学发光法可以直接测定完整,有较长的半衰期,使用免疫放射法或免疫化学发光法可以直接测定完整PTHPTH,有较好的准确性、敏感性和特异性。,有较好的准确性、敏感性和特异性。【采血要点】【采血要点】 空腹不抗凝静脉血空腹不抗凝静脉血2ml2ml。【注
27、意事项和影响因素】【注意事项和影响因素】 PTH PTH的分泌在的分泌在2424小时内可有多个峰,主张早晨空小时内可有多个峰,主张早晨空腹取血,某些原发性甲状旁腺功能亢进病人高钙饮食腹取血,某些原发性甲状旁腺功能亢进病人高钙饮食的摄入可抑制的摄入可抑制PTHPTH的分泌,因此,理想的方法是限制的分泌,因此,理想的方法是限制钙饮食(元素钙钙饮食(元素钙400mg/400mg/日)日)3 35 5天,抽取血标本后应天,抽取血标本后应尽快处理和保存。尽快处理和保存。 促进促进PTHPTH分泌的因素有低血钙、高血磷、降钙素分泌的因素有低血钙、高血磷、降钙素、儿茶酚胺和皮质醇。、儿茶酚胺和皮质醇。 抑制
28、抑制PTHPTH分泌的主要因素有高血钙、低血磷、低分泌的主要因素有高血钙、低血磷、低血镁、血镁、1 1、2525(OH)2D3(OH)2D3和普萘洛尔。和普萘洛尔。 老年人老年人PTHPTH水平较中青年高,冬季水平较中青年高,冬季PTHPTH高于夏季。高于夏季。 肾功能不全的病人,其肾功能不全的病人,其PTHPTH水平可随血清钙的迅水平可随血清钙的迅速变化(因透析和饮食磷的量),而有较大的波动。速变化(因透析和饮食磷的量),而有较大的波动。5 5、PTHPTH测定测定6 6、降钙素(降钙素(CTCT)测定)测定【原理】【原理】 CTCT主要由甲状腺滤泡旁细胞(主要由甲状腺滤泡旁细胞(C C细胞
29、)分泌,甲状腺髓样癌来自滤泡细胞)分泌,甲状腺髓样癌来自滤泡旁细胞,自主分泌大量旁细胞,自主分泌大量CTCT,可作为该肿瘤的标记。,可作为该肿瘤的标记。【采血要点】【采血要点】 空腹抗凝静脉血空腹抗凝静脉血2ml2ml。【注意事项和影响因素】【注意事项和影响因素】 CT CT主要受血中钙浓度的调节,高血钙可促进主要受血中钙浓度的调节,高血钙可促进CTCT的分泌。的分泌。 男性高于女性,随年龄增长降钙素下降,肾功能不全可使降钙素水男性高于女性,随年龄增长降钙素下降,肾功能不全可使降钙素水平升高(肾脏清除减少)。平升高(肾脏清除减少)。第三节、肾上腺功能相关激素测定第三节、肾上腺功能相关激素测定1
30、. 1. 血浆皮质醇及其昼夜节律血浆皮质醇及其昼夜节律2. 24H2. 24H尿游离皮质醇尿游离皮质醇3. 3. 肾素肾素- -血管紧张素血管紧张素- -醛固酮(醛固酮(RAASRAAS)4. 4. 尿尿3 3甲氧基甲氧基4 4羟基苦杏仁酸(羟基苦杏仁酸(VMAVMA)5. 5. 尿总甲基肾上腺素(尿总甲基肾上腺素(MN+NMNMN+NMN)1 1、皮质醇及其昼夜节律测定皮质醇及其昼夜节律测定【原理】【原理】 皮质醇由肾上腺分泌,受促肾上腺皮质激素(皮质醇由肾上腺分泌,受促肾上腺皮质激素(ACTHACTH)调控,具有昼夜)调控,具有昼夜节律变化,高峰时间在节律变化,高峰时间在6-8am6-8a
31、m,最低值在午夜,最低值在午夜11-2am11-2am,分泌入血的皮质醇,分泌入血的皮质醇有有1-3%1-3%呈游离状态,大部分与皮质类固醇结合球蛋白(呈游离状态,大部分与皮质类固醇结合球蛋白(CBGCBG)结合。)结合。【采血要点】【采血要点】 于安静状态下于安静状态下8am8am,必要时,必要时4pm4pm和和11pm11pm抽静脉血抽静脉血2ml2ml,加肝素抗凝送检。,加肝素抗凝送检。【注意事项及影响因素】【注意事项及影响因素】 引起皮质醇浓度升高的因素有体力活动、精神紧张、各种急性病、手术、引起皮质醇浓度升高的因素有体力活动、精神紧张、各种急性病、手术、感染、饥饿、抑郁症、神经性厌食
32、、饮酒、吸烟、过度劳累和慢性肝肾疾病感染、饥饿、抑郁症、神经性厌食、饮酒、吸烟、过度劳累和慢性肝肾疾病等,灯光和活动可影响皮质醇的节律变化。等,灯光和活动可影响皮质醇的节律变化。 皮质醇浓度受皮质醇浓度受CBGCBG的影响,使的影响,使CBGCBG升高的因素包括妊娠、肥胖、甲亢和雌升高的因素包括妊娠、肥胖、甲亢和雌激素治疗,使激素治疗,使CBGCBG降低的因素包括甲减、多发性骨髓瘤和先天性降低的因素包括甲减、多发性骨髓瘤和先天性CBGCBG缺乏。缺乏。1 1、皮质醇及其昼夜节律皮质醇及其昼夜节律测定测定2 2、24h24h尿游离皮质醇尿游离皮质醇测定测定【原理】【原理】 循环中的游离皮质醇通过
33、肾小球滤出,成为尿游离皮质醇,正常占肾循环中的游离皮质醇通过肾小球滤出,成为尿游离皮质醇,正常占肾上腺分泌皮质醇的上腺分泌皮质醇的1%1%左右。在皮质醇增多症时,皮质醇的增加超过皮质类左右。在皮质醇增多症时,皮质醇的增加超过皮质类固醇结合球蛋白(固醇结合球蛋白(CBGCBG)的结合能力,使大量游离皮质醇通过肾小球滤出,)的结合能力,使大量游离皮质醇通过肾小球滤出,导致尿游离皮质醇明显增多。导致尿游离皮质醇明显增多。【采血要点】【采血要点】 留留2424小时尿,标本加入防腐剂(每小时尿,标本加入防腐剂(每100ml100ml加加1g1g硼酸,或加硼酸,或加510ml510ml浓盐酸)浓盐酸),记
34、录总尿量,混匀后取,记录总尿量,混匀后取202030ml30ml送检。送检。【注意事项及影响因素】【注意事项及影响因素】 精神刺激、过度劳累、各种急性疾病、抑郁、饮酒和吸烟精神刺激、过度劳累、各种急性疾病、抑郁、饮酒和吸烟可使尿游离皮质醇升高。可使尿游离皮质醇升高。 尿游离皮质醇不受药物和类固醇结合球蛋白(尿游离皮质醇不受药物和类固醇结合球蛋白(CBGCBG)的影)的影响。响。 2 2、24h24h尿游离皮质醇尿游离皮质醇测定测定3 3、肾素、肾素- -血管紧张素血管紧张素- -醛固酮醛固酮测定测定【原理】【原理】 肾素由肾小球旁器产生,作用于血液中的血管紧张素原,使其产生血肾素由肾小球旁器产
35、生,作用于血液中的血管紧张素原,使其产生血管紧张素管紧张素I I,在肺组织,经转换酶作用,形成血管紧张素,在肺组织,经转换酶作用,形成血管紧张素IIII,可刺激醛固,可刺激醛固酮的产生和分泌。酮的产生和分泌。【试验方法】【试验方法】 (1 1)采标本前)采标本前2 2周停用有关药物,如周停用有关药物,如受体阻滞剂、受体阻滞剂、ACEI/ARBACEI/ARB、利尿剂、利尿剂、激素和甘草等;激素和甘草等; (2 2)卧位、)卧位、普食(钠普食(钠120 mmol/120 mmol/日),卧床日),卧床8 8小时以上,于小时以上,于8am8am采血采血5ml5ml,分别放入有抗凝剂的特殊试管中,查
36、肾素、血管紧张素,分别放入有抗凝剂的特殊试管中,查肾素、血管紧张素IIII和醛固酮,和醛固酮,尽量分离血浆,或置冰浴中送检。尽量分离血浆,或置冰浴中送检。 (3 3)卧位采血后,站立)卧位采血后,站立2 24 4小时后抽血,查上述化验。小时后抽血,查上述化验。【注意事项及影响因素】【注意事项及影响因素】 促进肾素分泌的主要因素有细胞外液容量降低和肾小管内钠离子浓度促进肾素分泌的主要因素有细胞外液容量降低和肾小管内钠离子浓度降低,站立可刺激肾素释放。醛固酮的分泌主要是通过肾素血管紧张素的作降低,站立可刺激肾素释放。醛固酮的分泌主要是通过肾素血管紧张素的作用。用。 各种影响血容量、血钾和血钠的因素
37、均可影响化验结果,降压药物特各种影响血容量、血钾和血钠的因素均可影响化验结果,降压药物特别是血管紧张素转换酶抑制剂和利尿剂等会干扰试验结果,应尽可能停用别是血管紧张素转换酶抑制剂和利尿剂等会干扰试验结果,应尽可能停用2-2-4 4周(血压较高不能完全停用降压药时,其结果要综合分析)。周(血压较高不能完全停用降压药时,其结果要综合分析)。 在卧立位采血时,为便于分析,应同时采血查皮质醇,用以判别在卧立位采血时,为便于分析,应同时采血查皮质醇,用以判别ACTHACTH或应激对醛固酮的影响。或应激对醛固酮的影响。3 3、肾素、肾素- -血管紧张素血管紧张素- -醛固酮醛固酮测定测定4 4、尿、尿VM
38、AVMA测定测定【原理】【原理】 VMAVMA是儿茶酚胺的终末代谢产物,嗜铬细胞瘤时儿茶酚胺产生增多,是儿茶酚胺的终末代谢产物,嗜铬细胞瘤时儿茶酚胺产生增多,进一步代谢为进一步代谢为VMAVMA,入血后经尿排出。,入血后经尿排出。【标本收集】【标本收集】 留留2424小时尿,加浓盐酸小时尿,加浓盐酸10ml10ml(加水(加水10ml10ml稀释后再倾入器皿内)防腐,稀释后再倾入器皿内)防腐,混匀后记录总量,取混匀后记录总量,取1030ml1030ml送检。送检。 【注意事项】【注意事项】 采集标本前采集标本前1 1周,停食可影响检查的药物和食物,如单胺氧化酶抑制周,停食可影响检查的药物和食物
39、,如单胺氧化酶抑制剂、降压药、水合氯醛、桔子、香蕉、香草、巧克力等,避免应激状况。剂、降压药、水合氯醛、桔子、香蕉、香草、巧克力等,避免应激状况。 5 5、尿总甲基肾上腺素(、尿总甲基肾上腺素(MN+NMNMN+NMN)测定测定【原理】【原理】 MNMN(3-3-甲氧基肾上腺素)和甲氧基肾上腺素)和NMNNMN(3-3-甲氧基去甲肾上腺素)分别为肾甲氧基去甲肾上腺素)分别为肾上腺素和去甲肾上腺素的中间代谢产物;嗜铬细胞瘤的病人排出量可达正上腺素和去甲肾上腺素的中间代谢产物;嗜铬细胞瘤的病人排出量可达正常上限的常上限的3 3倍或更高。血尿倍或更高。血尿MNMNS S推荐为嗜铬细胞瘤生化诊断的一线
40、筛查指标。推荐为嗜铬细胞瘤生化诊断的一线筛查指标。【标本收集】【标本收集】 同尿同尿VMAVMA。【注意事项】【注意事项】 (1 1)尿)尿MN+NMNMN+NMN的敏感性和特异性较尿的敏感性和特异性较尿VMAVMA和尿和尿CACA高,对嗜铬细胞瘤有较高,对嗜铬细胞瘤有较大的诊断价值;大的诊断价值; (2 2)影响尿)影响尿MNsMNs排出量的药物主要有:排出量的药物主要有:CACA类、对乙酰氨基酚(扑热息痛)类、对乙酰氨基酚(扑热息痛)、氯丙嗪、四环素、单胺氧化酶抑制剂、心得安、放射造影剂等。、氯丙嗪、四环素、单胺氧化酶抑制剂、心得安、放射造影剂等。 第四节、性腺功能相关激素测定第四节、性腺
41、功能相关激素测定1. 1. 血清睾酮(血清睾酮(T T)测定)测定2. 2. 血清雌二醇(血清雌二醇(E E2 2)测定)测定3. 3. 血清孕酮(血清孕酮(P P)测定)测定【原理】【原理】 睾酮在男性主要来自睾丸间质细胞;在女性,睾酮小部分由卵巢间质睾酮在男性主要来自睾丸间质细胞;在女性,睾酮小部分由卵巢间质细胞和肾上腺产生,细胞和肾上腺产生,50-60%50-60%由雄激素在外周转换而来。在男性睾酮主要受由雄激素在外周转换而来。在男性睾酮主要受LHLH调节,测定睾酮有助于了解下丘脑调节,测定睾酮有助于了解下丘脑- -垂体垂体- -性腺轴的功能状态。性腺轴的功能状态。【标本收集】【标本收集
42、】 不抗凝静脉血不抗凝静脉血2ml2ml。 1 1、血清睾酮、血清睾酮(T)(T)测定测定1 1、血清睾酮、血清睾酮(T)(T)测定测定【注意事项】【注意事项】 (1 1)男性成人睾酮分泌有昼夜节律变化,)男性成人睾酮分泌有昼夜节律变化,6-9am6-9am分泌最高,然后逐渐分泌最高,然后逐渐下降,在夜间达最低值,这种节律变化在青年人较老年人明显,采血时应下降,在夜间达最低值,这种节律变化在青年人较老年人明显,采血时应在早晨睾酮高峰时间;在早晨睾酮高峰时间; (2 2)女性睾酮水平明显低于男性,受月经周期和妊娠等多种因素的)女性睾酮水平明显低于男性,受月经周期和妊娠等多种因素的影响。影响。 (
43、3 3)服用复方避孕药物、肾上腺皮质类固醇可抑制睾酮分泌。)服用复方避孕药物、肾上腺皮质类固醇可抑制睾酮分泌。 2 2、血清、血清E E2 2测定测定【原理】【原理】 在女性在女性E E2 2主要来自卵巢,部分由肾上腺产生,发育成熟后,主要来自卵巢,部分由肾上腺产生,发育成熟后,E E2 2随月经随月经周期性变化。在男性主要来自睾丸。周期性变化。在男性主要来自睾丸。E E2 2是雌激素中活性最强的一种,测定是雌激素中活性最强的一种,测定E E2 2对了解下丘脑对了解下丘脑- -垂体垂体- -性腺轴的功能有重要意义。性腺轴的功能有重要意义。【标本收集】【标本收集】 不抗凝静脉血不抗凝静脉血2ml
44、2ml。 【注意事项】【注意事项】 (1 1)不同月经周期其雌激素水平不同,采血时应注意;)不同月经周期其雌激素水平不同,采血时应注意; (2 2)绝经后卵巢分泌雌激素下降,)绝经后卵巢分泌雌激素下降,E E2 2来源于雄激素在性腺外的转化,来源于雄激素在性腺外的转化,无周期变化,浓度低;无周期变化,浓度低; (3 3)使用复方口服避孕药、雌激素和促排卵药物会影响)使用复方口服避孕药、雌激素和促排卵药物会影响E E2 2水平;水平; (4 4)分析)分析E E2 2时,应与促性腺激素同时考虑。时,应与促性腺激素同时考虑。 2 2、血清、血清E E2 2测定测定3 3、血清孕酮(、血清孕酮(P
45、P)测定测定【原理】【原理】 孕酮主要由正常月经周期后半期的黄体分泌,在卵泡期常测不到,排孕酮主要由正常月经周期后半期的黄体分泌,在卵泡期常测不到,排卵后孕酮分泌增加,持续约卵后孕酮分泌增加,持续约1414天,随黄体萎缩而下降,测定孕酮可以了解天,随黄体萎缩而下降,测定孕酮可以了解排卵和黄体功能情况。排卵和黄体功能情况。【标本收集】【标本收集】 不抗凝静脉血不抗凝静脉血2ml2ml。 【注意事项】【注意事项】 (1 1)孕酮的分泌随黄体生成呈周期性变化,孕酮的分泌呈脉冲式,)孕酮的分泌随黄体生成呈周期性变化,孕酮的分泌呈脉冲式,单次血孕酮不一定能正确评价黄体功能;单次血孕酮不一定能正确评价黄体功能; (2 2)使用复方口服避孕药由于不能排卵,孕酮浓度维持在低水平,)使用复方口服避孕药由于不能排卵,孕酮浓度维持在低水平,使用促排卵药则可使孕酮浓度升高。使用促排卵药则可使孕酮浓度升高。 3 3、血清孕酮(、血清孕酮(P P)测定测定