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1、 外周血细胞形态检验浙中大 微免教研室以红细胞系统的成熟过程为例 单个细胞观察顺序细胞大小、形状 胞浆量多少、颜色、颗粒细胞核形状、染色质结构（粗细、凝聚）、核仁数目、大小。核、浆比例。 外周血细胞检验程序外周血细胞检验程序外周血细胞检验程序外周血细胞检验程序 涂片、染色与镜检；外周血细胞形态检验报告方式涂片、染色与镜检；外周血细胞形态检验报告方式涂片、染色与镜检；外周血细胞形态检验报告方式涂片、染色与镜检；外周血细胞形态检验报告方式 外周血红细胞异常形态检验外周血红细胞异常形态检验外周血红细胞异常形态检验外周血红细胞异常形态检验 大小、形态、染色与结构异常；点彩红细胞大小、形态、染色与结构异
2、常；点彩红细胞大小、形态、染色与结构异常；点彩红细胞大小、形态、染色与结构异常；点彩红细胞 外周血白细胞异常形态检验外周血白细胞异常形态检验外周血白细胞异常形态检验外周血白细胞异常形态检验 中性粒细胞异常变化；异常淋巴细胞中性粒细胞异常变化；异常淋巴细胞中性粒细胞异常变化；异常淋巴细胞中性粒细胞异常变化；异常淋巴细胞 血小板形态与寄生虫检验血小板形态与寄生虫检验血小板形态与寄生虫检验血小板形态与寄生虫检验 血小板大小、形态、数量变化；寄生虫血小板大小、形态、数量变化；寄生虫血小板大小、形态、数量变化；寄生虫血小板大小、形态、数量变化；寄生虫外周血细胞检验程序外周血细胞检验程序血涂片的制备血涂片
3、的制备 器材器材 清洁、干燥、无尘、无油脂的载玻片。 操作操作 在玻片近一端1/3处，加一滴血液，握住另一张边缘光滑的推片，以3045角使血滴沿推片迅速散开，快速、平稳地推动推片至载玻片的另一端。 注意事注意事项 血膜呈舌状，血膜呈舌状，头、体、尾分明、体、尾分明 空气中晃空气中晃动，尽快干燥；，尽快干燥；37恒温箱中促干恒温箱中促干 涂片的厚薄、涂片的厚薄、长度与血滴大小（度与血滴大小（1020l）与血片）与血片质量量 1h内染色或在内染色或在1h内甲醇固定内甲醇固定 正确清正确清洁玻片玻片 抗凝血或毛抗凝血或毛细血管血涂片；血管血涂片；EDTA能阻止能阻止PLT聚集聚集 抗凝血液抗凝血液4
4、h内涂片内涂片血涂片染色血涂片染色 原理原理 瑞氏（瑞氏（Wright）染色法（经典染色法）染色法（经典染色法） 瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应，又有物理吸附作用。瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应，又有物理吸附作用。 瑞氏染液含瑞氏染液含美蓝和伊红美蓝和伊红两种成分：两种成分：美蓝美蓝偏碱性，与细胞内酸性物质有偏碱性，与细胞内酸性物质有亲和力（胞亲和力（胞 浆），染成兰色；浆），染成兰色； 伊红伊红偏酸性，与细胞内碱性物质有亲和力偏酸性，与细胞内碱性物质有亲和力（胞核），染成紫红色。（胞核），染成紫红色。 试剂试剂 瑞氏染液瑞氏染液 瑞氏染料瑞氏染料 0.1 g 甲醇甲醇 （AR）
5、60mlpH6.8磷酸磷酸盐缓冲液（冲液（pH6.46.8） 磷酸二磷酸二氢钾（KH2PO4） 0.3g 磷酸磷酸氢二二钠（Na2HPO4） 0.2g 加少量蒸加少量蒸馏水溶解，再加至水溶解，再加至1000ml。 操作操作加瑞氏染液数滴，固定血膜约加瑞氏染液数滴，固定血膜约1min。滴加约等量的缓冲液与染液混合，滴加约等量的缓冲液与染液混合，室温下染色室温下染色510min。用流水冲去染液用流水冲去染液, ,待干燥后镜检。待干燥后镜检。 注意事项注意事项pH对细胞染色有影响。胞染色有影响。未干透的血膜不能染色。未干透的血膜不能染色。染色染色时间与染液与染液浓度、染色度、染色时温度成反比。温度成
6、反比。不能先倒掉染液，用流水冲去。不能先倒掉染液，用流水冲去。血膜上有染料血膜上有染料颗粒沉粒沉积，可加少，可加少许甲醇。甲醇。 涂抹涂抹标本的本的观察方法察方法: 肉眼肉眼观察察 低倍低倍镜下下观察察 油油镜下下观察察血血 涂涂 片片 镜镜 检检先在低倍先在低倍镜下下浏览全片，了解染色好坏和全片，了解染色好坏和 细胞分布情况，胞分布情况，观察有无异常察有无异常细胞。胞。选择涂片体尾交界涂片体尾交界处染色良好的区域，在染色良好的区域，在 油油镜下下计数数100个白个白细胞，按其形胞，按其形态特征特征 进行分行分类计数。求出各数。求出各类细胞所占百分数。胞所占百分数。血血 涂涂 片片 镜镜 检检
7、A：染色偏酸，细胞核、颗粒结构不清楚，红细胞染色偏红。：染色偏酸，细胞核、颗粒结构不清楚，红细胞染色偏红。B：染色较好，细胞结构、颗粒、胞浆清晰，红细胞染粉红色。：染色较好，细胞结构、颗粒、胞浆清晰，红细胞染粉红色。C：染色偏碱，细胞核、胞浆染色太深，细胞不易辨认，红细胞：染色偏碱，细胞核、胞浆染色太深，细胞不易辨认，红细胞 染成蓝色。染成蓝色。 注意事项注意事项分分类时应从血膜体尾交界从血膜体尾交界处边缘向中央依次上下呈向中央依次上下呈城城垛状迂回移状迂回移动，计数使不能重复和数使不能重复和遗漏。漏。白白细胞数明胞数明显减少的血片，减少的血片，应检查多多张血片。血片。分分类见有核有核红细胞，
8、不胞，不计入入100个白个白细胞内，以分胞内，以分类100个白个白细胞胞过程中程中见到多少有核到多少有核红细胞胞报告，并告，并注明所属注明所属阶段。段。除慢淋外，破碎除慢淋外，破碎细胞或不能胞或不能识别细胞不超胞不超过白白细胞胞总数的数的2%。若破碎。若破碎细胞仍能明确胞仍能明确鉴别，如破碎的，如破碎的嗜酸性粒嗜酸性粒细胞，胞，应包括在分包括在分类计数中。在数中。在结果果报告中告中应对破碎破碎细胞或不能胞或不能识别细胞作适当描述。胞作适当描述。分分类中中应注意注意观察成熟察成熟红细胞、血小板的形胞、血小板的形态、染、染色及分布情况，注意有无寄生虫和其他异常所色及分布情况，注意有无寄生虫和其他异
9、常所见。白白细胞形胞形态变化化较大，遇有疑大，遇有疑问应请示上示上级主管或主管或主任主任进行核行核实，以减少，以减少错误。异常红细胞形态检查异常红细胞形态检查大小异常大小异常 正常红细胞大小较为一致，直径正常红细胞大小较为一致，直径69um在各种贫血时，红细胞可出现大、小不在各种贫血时，红细胞可出现大、小不一。直径一。直径10um为大红细胞，为大红细胞，15um为为巨红细胞，常见于巨幼贫、肝脏疾病等，巨红细胞，常见于巨幼贫、肝脏疾病等，直径直径6um为小红细胞，多见于缺铁性贫为小红细胞，多见于缺铁性贫血等血等。 直径相差直径相差1 1倍以上为大小不均倍以上为大小不均 右图：大红细胞（上）右图：
10、大红细胞（上） 小红细胞（下）小红细胞（下） ( (中央苍白区扩大）中央苍白区扩大）形形形形 态态态态 异异异异 常常常常 RBC直径通常直径通常2.6 um，呈小圆形，细胞中呈小圆形，细胞中心区蛋白含量较正常多。见心区蛋白含量较正常多。见于遗传性球形红细胞增多症于遗传性球形红细胞增多症（25%以上）以上）、自身免疫性、自身免疫性溶贫和异常溶贫和异常Hb病（病（HBS、HBC病等）。病等）。 球形红细胞球形红细胞 红细胞呈椭圆形，横短，长大，有时红细胞呈椭圆形，横短，长大，有时呈畸形。正常人可见到，呈畸形。正常人可见到， 15%。 见于以下疾病见于以下疾病: : 1 1、遗传性椭圆性、遗传性椭
11、圆性RBC增多症，高增多症，高 于于 2550%才有诊断价值。才有诊断价值。 2、大细胞性贫血时可达大细胞性贫血时可达25%。 3、其他各类贫血有不同程度的其他各类贫血有不同程度的 增多增多。 椭圆形红细胞椭圆形红细胞 比正常红细胞扁薄，中心有少许血比正常红细胞扁薄，中心有少许血红蛋白，部分可与周围的血红蛋红蛋白，部分可与周围的血红蛋白连接，边缘部染色较中央深，白连接，边缘部染色较中央深，故呈靶状。主要见于以下疾病故呈靶状。主要见于以下疾病: : 1、珠蛋白生成障碍性贫血珠蛋白生成障碍性贫血 2、严重缺铁性贫血严重缺铁性贫血 3、一些血红蛋白病一些血红蛋白病（血红蛋白（血红蛋白C、D、E、S病
12、）病） 4、肝病、脾切除后及阻塞性黄疸肝病、脾切除后及阻塞性黄疸等。等。 靶形红细胞靶形红细胞 细胞狭长似镰刀，也细胞狭长似镰刀，也可呈麦粒状或冬青叶可呈麦粒状或冬青叶样，主要见于遗传性样，主要见于遗传性镰形红细胞增多症镰形红细胞增多症 镰形红细镰形红细胞胞 红细胞淡染区呈裂口胞淡染区呈裂口状狭孔，正常状狭孔，正常4%。增。增多多见于以下疾病于以下疾病 : 1、口形、口形红细胞增多症胞增多症 2、急性乙醇中毒、急性乙醇中毒口形红细胞口形红细胞 棘形红细胞是一种带刺状的红细胞，刺呈针刺状或尖刺状，见于以下疾病： 1、棘细胞增多症：遗传性血浆脂蛋白缺乏症时，棘形红细胞可高达70%80% 2、 严重
13、肝病或制片不当 棘形红细胞棘形红细胞 锯齿细胞也称短棘形细胞。细胞突出较棘细胞短，但分布均匀。主要见于尿毒症、微血管病性溶血性贫血、丙铜酸激酶缺乏症、阵发性睡眠性血红蛋白尿症等。 锯齿细胞锯齿细胞 裂红细胞指红细胞碎片，包括盔形红细胞等，多见于DIC和心源性溶血性贫血等。其他也多见于化学中毒、肾功能不全、血栓性血小板减少性紫癜等。 裂红细胞裂红细胞裂红细胞裂红细胞 红细胞中心淡染区扩大，多见于缺铁性贫血、地中海贫血及其他血红蛋白病 着色过浅着色过浅染染染染 色色色色 异异异异 常常常常 中心淡染区不见，着色较深，多见于溶血性贫血及大细胞性贫血着色过深着色过深 红细胞经瑞氏染色染成灰蓝色、灰红色
14、、淡灰色，包体较正常红细胞稍大，这是一种尚未完全成熟的网织红细胞，多染性物质是核糖体，随着细胞的成熟而逐渐消失，主要见于各种增生性贫血 嗜多色性红细嗜多色性红细胞胞结结结结 构构构构 异异异异 常常常常 用亚甲蓝染色，成熟红细胞内有散在的深蓝色嗜碱性颗粒，外周血中点彩红细胞增多，表示贫血时骨髓再生旺盛或有紊乱现象，某些重金属中毒时可大量出现嗜碱性点彩红细胞嗜碱性点彩红细胞嗜碱性点彩红细胞嗜碱性点彩红细胞 成熟红细胞内有染成紫红色的细线状环，呈圆形或 8 8 字形，可能是残留核膜 所致，见于恶性贫血、溶血性贫血、铅中毒等。 卡波环卡波环 成熟红细胞中含有紫红色紫红色圆形小体，大小不等（12m），
15、数量不一，可能是残留的核染色质微粒。见于增生性贫血、脾切除后、巨幼红细胞性贫血、恶性贫血等。（注意与血（注意与血小板区别）小板区别）豪乔氏小体豪乔氏小体（染色质小体染色质小体）有核红细胞有核红细胞有核红细胞有核红细胞 正常成人血片中不会出现，新生儿出生新生儿出生1周内周内可能有少量有核红细胞出现。溶贫、急、慢性白血病、红白血病、髓外造血及严重缺氧等常见有核红细胞（主要是晚幼红）（主要是晚幼红）。 右图：中幼红（上） 晚幼红（下）红细胞形态异常：球形红细胞（左上），椭圆形红细胞（上），红细胞形态异常：球形红细胞（左上），椭圆形红细胞（上），口形红细胞（左下），棘形红细胞（右下）。口形红细胞（左下
16、），棘形红细胞（右下）。 红细胞形态异常：可见红细胞碎片，泪滴形红细胞，锯齿形红红细胞形态异常：可见红细胞碎片，泪滴形红细胞，锯齿形红 细胞，盔形红细胞，镰刀状红细胞。细胞，盔形红细胞，镰刀状红细胞。红细胞形态异常：可见靶形红细胞，半岛形红细胞，半月形红细胞，红细胞形态异常：可见靶形红细胞，半岛形红细胞，半月形红细胞，拖鞋形红细胞，环形红细胞，泪滴形红细胞拖鞋形红细胞，环形红细胞，泪滴形红细胞。异常白细胞形态检验异常白细胞形态检验 白白细胞胞 粒粒细胞胞 中性粒中性粒细胞：中性粒胞：中性粒细胞核分叶情况胞核分叶情况 1叶叶5-8% 2叶叶20-35% 3叶叶40-50% 4叶叶15-20% 5
17、叶叶3%的的现象。象。 中性粒细胞的异常变化中性粒细胞的异常变化中性粒细胞的异常变化中性粒细胞的异常变化 核象变化核象变化 包括核左移和核右移，反映中性粒细胞的成熟程度。正常血象中有少量杆状核细胞出现，它与分叶核细胞之间的比值约为1 1: :1313。 核左移核左移核左移核左移 外周血液中出现不分叶粒细胞（指杆状核粒细胞，正常：15%、幼稚粒细胞，正常：不出现） 5%。常见于感染（特别是急性化脓性感染）、急性中毒、急性失血及急性溶血等。如晚幼粒、中幼粒等细胞增多为极度左移，多见于类白血病反应或白血病。 具体表现为：具体表现为： 伴白细胞总数增高的核左移称再生性移，常见于急 性化脓性感染，如大叶
18、性肺炎等。 白细胞总数不增加或减低的核左移称退行性左移， 常见于严重感染、机体抵抗力低下时，如伤寒、感 染中毒性休克的败血症等。 中性粒细胞核出现4 4、5 5叶（正常时多为3叶，占5070%）或更多，其百分数 3%。这是造血功能衰退或造血物质缺乏的表现。常见于巨幼细胞性贫血和使用抗代谢药物后。此外，在疾病进行期突然出现核象右移，提示预后不良。核右移核右移毒性变化毒性变化毒性变化毒性变化 严重感染、恶性肿瘤、各种重金属或药物中毒、大面积烧伤等，中性粒细胞可出现形态变化。具体表现为： 细胞大小不均：为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。 中毒颗粒：细胞质中部分或全部颗粒变粗，着色深，颗粒的
19、分布及大小等，可能为中性颗粒成熟过程中发生变性所致 可在细胞质或核中出现，常为多个，被认为是细胞脂肪变性后未能着色所致。空空 泡泡 细胞质内出现嗜碱性多呈斑块、梨形或云雾状，可能为核浆发育不平衡所致，为细胞严重毒性变的表现杜勒小体杜勒小体杜勒小体杜勒小体 胞核有各种形态的芽状突出，临床意义尚不明确，可能与中毒、癌转移、严重的放射损伤等有关。 核棘突核棘突退行性变退行性变 表现为胞体肿大，结构模糊，边缘不清。胞核可呈固缩、肿胀、破碎、溶解等变化，退行性变是细胞衰老死亡的表现。粒细胞异常：粒细胞中毒性颗粒，中性杆状细胞胞浆内充满粗粒细胞异常：粒细胞中毒性颗粒，中性杆状细胞胞浆内充满粗大着色深染颗粒
20、大着色深染颗粒。粒细胞异常：粒细胞中毒性颗粒，中性杆状核细胞内充满粗粒细胞异常：粒细胞中毒性颗粒，中性杆状核细胞内充满粗大染色深的颗粒大染色深的颗粒。粒细胞异常：中性粒细胞胞浆空泡变性（左上），胞浆出现粒细胞异常：中性粒细胞胞浆空泡变性（左上），胞浆出现Dohle小体，核棘突和退行性变小体，核棘突和退行性变(右上、左下右上、左下)，核分叶过多，核右移（右，核分叶过多，核右移（右下）。下）。 粒细胞异常：中性粒细胞核棘突和核碎裂，核固缩粒细胞异常：中性粒细胞核棘突和核碎裂，核固缩。 粒细胞异常：中性粒细胞巨幼变，细胞分叶过多，见粒细胞异常：中性粒细胞巨幼变，细胞分叶过多，见8叶。叶。粒细胞异常：
21、中性粒细胞巨幼变，细胞分叶过多，呈粒细胞异常：中性粒细胞巨幼变，细胞分叶过多，呈7叶状叶状。粒细胞异常：佩尔格尔休特（粒细胞异常：佩尔格尔休特（Pelger-Huet)异常，细胞分叶异常，细胞分叶到到2叶为止，圆形或卵圆形，染色质明显浓缩。叶为止，圆形或卵圆形，染色质明显浓缩。粒细胞异常：佩尔格尔休特（粒细胞异常：佩尔格尔休特（Pelger-huet）异常，细胞分两叶，）异常，细胞分两叶，核染色质明显浓缩，如眼镜状。核染色质明显浓缩，如眼镜状。 粒细胞异常：佩尔格尔休特（粒细胞异常：佩尔格尔休特（Pelger-huet）异常）异常。粒细胞异常：佩尔格尔休特（粒细胞异常：佩尔格尔休特（Pelge
22、r-huet）异常，细胞分叶）异常，细胞分叶到到2叶为止，核染色质固缩。叶为止，核染色质固缩。粒细胞异常：佩尔格尔休特（粒细胞异常：佩尔格尔休特（Peger-huet）异常，细胞分叶）异常，细胞分叶障碍，核染色质固缩。障碍，核染色质固缩。粒细胞异常：佩尔格尔休特（粒细胞异常：佩尔格尔休特（Pelger-huet）异常，细胞分叶）异常，细胞分叶困难，核染色质固缩。困难，核染色质固缩。粒细胞异常：假性佩尔格尔休特（粒细胞异常：假性佩尔格尔休特（Pelger-huet）异常，细胞）异常，细胞分两叶，核染色质较疏松。分两叶，核染色质较疏松。 粒细胞异常：异常白细胞包涵体粒细胞异常：异常白细胞包涵体Ch
23、ediak-Higashi综合症，综合症，中性粒细胞胞浆中含有明显紫红色的巨大颗粒。中性粒细胞胞浆中含有明显紫红色的巨大颗粒。 粒细胞异常：粒细胞异常：Chediak-Higashi综合症，中性粒细胞胞浆内综合症，中性粒细胞胞浆内含有明显紫红色巨大颗粒含有明显紫红色巨大颗粒。粒细胞异常：粒细胞异常：Chediak-Higashi综合症，中性粒细胞胞浆内含综合症，中性粒细胞胞浆内含有明显紫红色巨大颗粒有明显紫红色巨大颗粒。粒细胞异常：粒细胞异常：Chediak-Higashi综合症，中性粒细胞胞浆内含综合症，中性粒细胞胞浆内含有明显紫红色巨大颗粒有明显紫红色巨大颗粒。粒细胞异常：粒细胞异常：Ch
24、ediak-Higashi综合症，中性粒细胞胞浆内综合症，中性粒细胞胞浆内含有两个紫红色巨大颗粒含有两个紫红色巨大颗粒。粒细胞异常：粒细胞异常：Chediak-Higashi综合症的淋巴细胞，淋巴细综合症的淋巴细胞，淋巴细胞内也可见紫红色巨大颗粒胞内也可见紫红色巨大颗粒。粒细胞异常：梅粒细胞异常：梅-黑格林黑格林May-Hegglin异常，中性粒细胞胞浆内有异常，中性粒细胞胞浆内有淡蓝色的淡蓝色的Dohle小体，伴有巨大血小板。小体，伴有巨大血小板。Alder-Reiily异常异常: 中性粒中性粒细胞胞胞胞浆中有大量暗紫中有大量暗紫红色色颗粒。粒。Alder-Reiily异常异常: 淋巴淋巴细
25、胞胞胞胞浆中有暗紫中有暗紫红色色颗粒。粒。Alder-Reiily异常异常: 单核核细胞胞胞胞浆中有大量暗紫中有大量暗紫红色色颗粒。粒。 Alder-Reiily异常异常: 中性粒中性粒细胞和胞和单核核细胞胞胞胞浆中有大量暗紫中有大量暗紫红色色颗粒。粒。Alder-Reiily异常异常: 中性粒中性粒细胞胞胞胞浆中有大量暗紫中有大量暗紫红色色颗粒。粒。Alder-Reiily异常异常: 中性粒中性粒细胞和胞和单核核细胞胞胞胞浆中有大量暗紫中有大量暗紫红色色颗粒。粒。 棒状小体（棒状小体（Auer Body) 棒状小体（棒状小体（Auer Body) 棒状小体（棒状小体（Auer Body) 棒
26、状小体（棒状小体（Auer Body) 棒状小体（棒状小体（Auer Body) 棒状小体（棒状小体（Auer Body)棒状小体（棒状小体（Auer Body)：原始：原始细胞中可胞中可见数个棒状小体，数个棒状小体， 排列紊乱。排列紊乱。淋巴细胞的异常变化淋巴细胞的异常变化淋巴细胞的异常变化淋巴细胞的异常变化 异形淋巴细胞：细胞大小为1025l，形态各异，呈圆形，卵圆形或不规则形。细胞核形各异，呈圆形、卵圆形、凹陷形、折叠形、裂隙形或分叶形，核染色质可为细致、中度致密或粗颗粒；副染色质无或少量，核仁无或偶见，大小和染色性各异。细胞质中等至大量；染灰色、淡蓝色或深蓝色；可见细胞边缘染色深，核周淡染；浆细胞样淋巴细胞常有核周淡染区和核窝；有时可见细小嗜天青颗粒；偶见空泡。 异形淋巴细胞可见于各种病毒感染，如传染性单核细胞增多症时最为常见。此外，可见于疟疾、过敏性疾病、淋巴结炎等。 按形态学特征分为型： I型型：空泡型或浆细胞型空泡型或浆细胞型 II型型：不规则型或单核细胞型不规则型或单核细胞型 III型型：幼稚型幼稚型
