猪人工授精操作标准课件

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1、猪人工授精操作业标准郭小明1猪人工授精操作标准内容提要内容提要猪精液的品质检查猪精液的品质检查猪精液的稀释分装猪精液的稀释分装猪精液处理后输精猪精液处理后输精猪人工授精的意义猪人工授精的意义猪精液的人工采集猪精液的人工采集2猪人工授精操作标准人工授精人工授精(Artifical Insemination:AI)o借助于专门的器械,用人工的方法采取公畜借助于专门的器械,用人工的方法采取公畜精液,经体外检查与处理后,再输入发情母精液,经体外检查与处理后,再输入发情母畜的生殖道内,使其受胎的一种繁殖技术。畜的生殖道内,使其受胎的一种繁殖技术。o人工授精技术包括:人工授精技术包括: 采精采精精液品质评

2、定精液品质评定稀释稀释保存保存运输运输输精等环节。输精等环节。3猪人工授精操作标准猪人工授精的意义猪人工授精的意义减少种公猪饲养数量,降低种猪生产成本;减少种公猪饲养数量,降低种猪生产成本;减少由公猪直配造成的疾病传播;减少由公猪直配造成的疾病传播;充分发挥优秀公猪的遗传潜力,提高其利用率;充分发挥优秀公猪的遗传潜力,提高其利用率;克服公母猪体格差异太大造成的配种困难;克服公母猪体格差异太大造成的配种困难;维持母猪群成批配种、分娩和断奶,改善猪群整齐度;维持母猪群成批配种、分娩和断奶,改善猪群整齐度;优良基因的利用不受时间和地域的限制,加快遗传改良优良基因的利用不受时间和地域的限制,加快遗传改

3、良4猪人工授精操作标准猪人工授精的实验室设备猪人工授精的实验室设备 设设 备备显微镜(恒温载物台)、精子密度仪显微镜(恒温载物台)、精子密度仪、电子天平、电子天平 、恒温水浴锅、恒温水浴锅、17度恒温箱、度恒温箱、 干燥箱、预热箱、干燥箱、预热箱、双蒸馏水机、磁力搅拌器等双蒸馏水机、磁力搅拌器等 器器 材材采精杯采精杯、温度计、玻璃烧杯、塑料有柄烧杯、温度计、玻璃烧杯、塑料有柄烧杯玻璃棒、放水瓶、载玻片、盖玻片、洗涤瓶等玻璃棒、放水瓶、载玻片、盖玻片、洗涤瓶等 耗耗 材材输精瓶、输精管输精瓶、输精管、润滑剂、润滑剂、PVC手套、采精袋手套、采精袋 、 精液过滤纸、橡皮筋、稀释粉等精液过滤纸、橡

4、皮筋、稀释粉等5猪人工授精操作标准猪精液的人工采集猪精液的人工采集采集前的准备工作采集前的准备工作猪精液采精的方法猪精液采精的方法6猪人工授精操作标准精液采集前的准备工作精液采集前的准备工作实验室的准备实验室的准备精液稀释液准备精液稀释液准备操作人员的准备操作人员的准备采精器材的准备采精器材的准备检测仪器的准备检测仪器的准备分装器材的准备分装器材的准备采精公猪的准备采精公猪的准备7猪人工授精操作标准猪的人工采精方法猪的人工采精方法手握采精法手握采精法8猪人工授精操作标准手握采精法手握采精法用温的生理盐水清洗猪腹部和包皮用温的生理盐水清洗猪腹部和包皮 一手带双层手套,另一手持集精一手带双层手套,

5、另一手持集精杯杯公猪伸出阴茎时,脱去外层手套公猪伸出阴茎时,脱去外层手套 用手紧握伸出的公猪阴茎螺旋状龟头用手紧握伸出的公猪阴茎螺旋状龟头顺其向前冲力将阴茎的顺其向前冲力将阴茎的“S”状弯曲拉直状弯曲拉直 收集浓份精液于集精杯的一次性采精袋收集浓份精液于集精杯的一次性采精袋 采精流程采精流程采精流程采精流程 成年公猪:成年公猪:2次次/ 周周 采精频率采精频率采精频率采精频率青年公猪:青年公猪: 1次次/周周 9猪人工授精操作标准猪精液的品质检查猪精液的品质检查品质检查的目的品质检查的目的精液显微镜检查精液显微镜检查精液外观检查精液外观检查10猪人工授精操作标准精液的外观检查精液的外观检查 颜

6、颜颜颜 色色色色 乳白色或浅灰色乳白色或浅灰色呈云雾状呈云雾状 绿色、黄色绿色、黄色 浅红色、红褐色浅红色、红褐色 气气气气 味味味味略带腥味略带腥味 恶臭等异常气味恶臭等异常气味 pH pH 值值值值正常精液正常精液pH值为值为 7.07.8pH值越低值越低, 精子密度越大精子密度越大 采精量采精量采精量采精量 电子天平称量法电子天平称量法按按1g = 1 mL计计 射精量为射精量为200500 mL 正常正常正常正常异常异常异常异常11猪人工授精操作标准精液的显微镜检查精液的显微镜检查 精子活率检查精子活率检查精子畸形率检查精子畸形率检查精子密度检查精子密度检查12猪人工授精操作标准精子活

7、率检查精子活率检查玻片升温至玻片升温至37 取精液取精液10l制片制片 于于37恒温台上恒温台上 显微镜下显微镜下 400倍观察精子倍观察精子 与受精能力相关与受精能力相关 精子活率精子活率精液品质的指标精液品质的指标 按按0.11.0的十级评分法进行评估的十级评分法进行评估 目测估测法目测估测法活率要求活率要求 鲜精活率鲜精活率0.7才可进行稀释配制才可进行稀释配制 保存精液活率保存精液活率0.6才可以使用才可以使用 13猪人工授精操作标准精子密度检查精子密度检查估测法估测法估测法估测法 精子密度仪法精子密度仪法精子密度仪法精子密度仪法 血细胞计数法血细胞计数法血细胞计数法血细胞计数法 主观

8、性强,误差大主观性强,误差大主观性强,误差大主观性强,误差大一个精子为一个精子为“密密”一个精子为一个精子为“中中”一个精子为一个精子为“稀稀”最准确,但速度慢最准确,但速度慢最准确,但速度慢最准确,但速度慢滴上滴上1滴稀释精液滴稀释精液原精液原精液200L3%NaCl稀释稀释10倍倍计数板上放盖玻片计数板上放盖玻片计数计数5个中方格精子个中方格精子将该数乘以将该数乘以50万万 方便、时间短、方便、时间短、方便、时间短、方便、时间短、重复性好重复性好重复性好重复性好猪精子密度一般为猪精子密度一般为猪精子密度一般为猪精子密度一般为2323亿亿亿亿/mL/mL生产上主要以精子密度仪法检测生产上主要

9、以精子密度仪法检测生产上主要以精子密度仪法检测生产上主要以精子密度仪法检测 14猪人工授精操作标准精子计数精子计数注意:让稀释后的精液通过毛细作用自行吸入!用吸管稀释后精用吸管稀释后精液注入计数室液注入计数室共有两个对称的计数室15猪人工授精操作标准精子计数室及一个中方格精子计数室及一个中方格以图示次序计数,精子以图示次序计数,精子的头部为准,依数上不的头部为准,依数上不数下,数左右不数右的数下,数左右不数右的原则进行计数格线上的原则进行计数格线上的精子。白色精子不计数精子。白色精子不计数1mL原精液内的精子数原精液内的精子数5个中方个数的精子数个中方个数的精子数5 10 1000 稀释倍数稀

10、释倍数如果为原精液,则不乘以如果为原精液,则不乘以稀释倍数稀释倍数16猪人工授精操作标准精子畸形率检查精子畸形率检查取中层精液抹片 固定液固定20minGiemsa染色90min水洗并风干置1000倍油镜下观察精子 300个畸形率检查方法畸形率检查方法 显微镜直接观察伊红或姬姆萨等染色后普通显微镜观察畸形率要求畸形率要求 一般要求不超过18%为宜染色后显微镜观查染色后显微镜观查 17猪人工授精操作标准猪精液的保存处理猪精液的保存处理精液的稀释精液的稀释精液的分装精液的分装精液的保存精液的保存精液的运输精液的运输18猪人工授精操作标准精液的稀释精液的稀释器具须消毒,使用前,用少量稀释液冲洗一遍品

11、质检查不合格(活率0.7)的精液不能稀释精液采集后尽快稀释, 原精贮存时间不宜超过30min稀释时严禁太阳光直射精液,应于较暗处操作精液要求等温稀释,以精液为标准,调节稀释液温度稀释液沿杯壁加入到精液中,沿一个方向搅拌混匀高倍稀释时先进行低倍稀释,以防 “稀释打击”稀释倍数: 根据精液的品质,输精量,配种母猪头数以每个输精剂量40亿/80 100mL来确定稀释倍数稀释后要求静置片刻再作精子活率检查采精量采精量200 mL, 活率活率0.8, 密度密度2亿亿/ mL, 每每个输精剂量含个输精剂量含40亿亿/100 mL。总精子数总精子数=200 mL 2亿亿/ mL =400亿亿稀释份数稀释份数

12、=400亿亿 0.8/40亿亿=8份份需稀释液需稀释液=8100 mL -200 mL =600mL19猪人工授精操作标准精液的分装精液的分装精液的分装精液的分装 瓶装管装袋装分装简单方便用于冷冻保存输精方便,但需分装机分装后标注分装后标注 公猪品种公猪耳号生产日期稀释液名称20猪人工授精操作标准精液的保存精液的保存保存温度保存温度 生产上:常温17常温保存要求常温保存要求 精液需缓慢降温,室温12h或纱布包裹每12h将精液摇匀1次,要轻缓均匀注意冰箱内温度的变化防止温度升高或降低减少保存箱开关次数,以减少对精子的影响使用前检查活率,活率0.6精液应弃之用稀释液保存的精液,应尽快用完21猪人工

13、授精操作标准精液的运输精液的运输精液运输关键精液运输关键 保温、防震、避光运输注意事项运输注意事项 运输前应检查活率,低于0.7的精液严禁调出包装瓶(袋)应排尽空气,以减少运输震荡运输过程中,放入保温箱中保温(1618)到达目的地,检查精子活率,合格方可接收运输过程中,应严格避光22猪人工授精操作标准1发情鉴定发情鉴定o 发情鉴定最佳方法是当母猪喂料后半小时表现安静时进行,每天进行两次发情鉴定,上下午各一次,检查采用人工查情与公猪试情相结合的方法。23猪人工授精操作标准1发情鉴定发情鉴定o引导公猪与待查情的母猪口鼻接触。24猪人工授精操作标准1发情鉴定发情鉴定o仔细观察母猪的外阴、分泌物、行为

14、及其他方面的表现和变化,在查情时要综合所有的发情迹象考虑,不应只根据少数征状来查情。外阴分泌物25猪人工授精操作标准1发情鉴定发情鉴定o配种员所有工作时间的1/3应放在母猪发情鉴定上。26猪人工授精操作标准1发情鉴定发情鉴定o一头后备母猪 发情外阴变化全过程红肿-肿胀-出现皱褶-消退27猪人工授精操作标准1发情鉴定发情鉴定o一头后备母猪 发情外阴变化全过程红-深红-消退28猪人工授精操作标准1发情鉴定发情鉴定o一头经产母猪 发情外阴变化全过程有变化但不明显29猪人工授精操作标准1发情鉴定发情鉴定o一头经产母猪 发情外阴变化全过程红-深红-消退30猪人工授精操作标准1发情鉴定发情鉴定o母猪的发情

15、表现有:a) a) 阴门红肿,阴道内有粘液性分泌物;阴门红肿,阴道内有粘液性分泌物; 31猪人工授精操作标准1发情鉴定发情鉴定o母猪的发情表现有:b)b)在圈内来回走动,频频排尿;在圈内来回走动,频频排尿;32猪人工授精操作标准1发情鉴定发情鉴定o母猪的发情表现有:c)c)神经质,食欲差;神经质,食欲差;33猪人工授精操作标准1发情鉴定发情鉴定o母猪的发情表现有:d)d)压背静立不动;压背静立不动;34猪人工授精操作标准1发情鉴定发情鉴定o母猪的发情表现有:d)d)互相爬跨,接受公猪爬跨互相爬跨,接受公猪爬跨; ;35猪人工授精操作标准 输精输精输精的时间输精的时间输精的方法输精的方法填写输精

16、记录填写输精记录36猪人工授精操作标准输精的时间输精的时间输精时间输精时间 第一次输精:出现静立反射后12h左右进行第二次输精:第一次输精后812h进行竖耳,阴部红肿,出现静立反射母猪接收公猪或其它母猪的爬跨有爬跨其它母猪的行为发情母猪表现发情母猪表现 37猪人工授精操作标准输输 精精 方方 法法子宫颈输精法子宫颈输精法 intra-cervical insemination,intra-CAI38猪人工授精操作标准宫颈输精法宫颈输精法 消毒清洁双手,戴上消毒手套 清洁母猪外阴、尾根及臀部周围 取出一次性输精管,在其前端涂上润滑剂 将输精管45向上插入母猪生殖道内直到子宫颈 取出精液轻轻摇匀,

17、去除瓶嘴,接输精管,输精 输精完毕后抽出输精管输精流程输精流程输精流程输精流程 输精次数输精次数输精次数输精次数 一个情期内输精两次(间隔812 h)39猪人工授精操作标准猪人工授精最佳部位40猪人工授精操作标准配种步骤消毒液配制消毒液配制用消毒药水清洗手用消毒药水清洗手41猪人工授精操作标准配种技术员进入猪栏配种技术员进入猪栏42猪人工授精操作标准1三、配种程序三、配种程序1、配种顺序配种顺序:一般情况下先配断奶母猪和返情母猪,然后根据满负荷配种需求再配后备母猪,也可根据后备母猪的月龄、情期以及后备母猪和断奶母猪的体况等实际情况,优先配后备母猪。经经产产母母猪猪后后备备母母猪猪43猪人工授精

18、操作标准1三、配种程序三、配种程序 2、配种方式配种方式:全人工授精配种方式。44猪人工授精操作标准 那天我说:“你是猪。”你说:“我是猪才怪。”于是以后我就叫你“猪才怪”!终于有一天,你忍无可忍当着众人的面大叫:“我不是猪才怪!” 45猪人工授精操作标准人工授精技术概述猪生产中相互制约的5个环节品种改良健康饲料猪群管理生产系统影响人工授精效益的因素:1.猪群管理 2.健康 3.品种改良46猪人工授精操作标准人工授精和自然交配的比较从A-B 迅速的发生和转化所以 ,产生错误的可能性就小一些B的转化过程最长可能延迟到5天后才发生所采集的每一头份原精液最多能稀释到20头份。但是但是某些环节产生错误

19、的可能性会增加。某些环节产生错误的可能性会增加。47猪人工授精操作标准使用人工授精技术使母猪受孕的有关因素人工授精站人工授精站1.公猪的管理和照料2.精液采集3.精液加工4.精液包装1.刺激母猪发情2.发情鉴定3.站立发情4.排卵配种区域配种区域5.精液储存6.使用前准备7.输精8.妊娠检测48猪人工授精操作标准人工授精成功与否的八个技术因素o管理公猪o精液采集o实验室的准备工作o精液处理与质量控制o精液分装、保存与运输o发情鉴定o输精o妊娠诊断成功应用人工授精技术可让母猪分娩率高于成功应用人工授精技术可让母猪分娩率高于85%,每窝产仔数增加,每窝产仔数增加0-5头头49猪人工授精操作标准成功

20、进行猪人工授精 8个 重要步骤 1.饲养公猪的地方必须干净和舒服,高质量的饲料是生产高质量和高产量精液的一个关键因素。2.准备工作。混合和搅拌稀释液,准备好采精杯,把所有的采精设备、器皿和用具都预热到37度。3.采精最好用专用的假母猪,放的地方一定要保持干净和清洁。4.稀释精液是通过把原精液向稀释液里慢慢注入来进行稀释和保存(有8个步骤)。5.用塑料瓶或塑料管来分装稀释好的精液。6.把要超过4小时后才用的精液放到17度的恒温冰箱里进行保存。7.在一个情期里输精两次。输精前也可给精液预热。8.在配种后18-23天进行返情检查,24天后进行妊娠检测。稀释液精液50猪人工授精操作标准初学人工授精可能

21、遇到的问题1.精液的污染通常是由空气中的尘埃、使用不干净的器皿和卫生条件不佳等因素造成的。2.如果使用不纯或储存时间太长的原料来做稀释粉将造成稀释液质量不佳和不稳定。3.稀释用水的质量一定要好,要纯,最好用双蒸水或去离子水,不能用自来水。4如果输精前不检查精液的质量将造成配种质量的下降。5.如果公猪管理和饲养得不好导致精液的质量和数量下降。6.没有认识到每头公猪的精液都有其自身的特征。7.缺乏足够的经验确定最佳的输精时间。8.输精管插入的位子不对可能导致精液的损失或子宫内部的组织受伤。每次采集分成24头份活力很强每次采集分成12份活力很差由于输精管的插入的位置不对而引起精液的倒流插入太深可能引

22、起组织破损和流血“结块”通常说明精液已被污染51猪人工授精操作标准二.公猪方面在公猪站里对公猪进行良好的管理调教后备公猪精液采集52猪人工授精操作标准对公猪进行良好管理是至关重要的特殊的公猪饲料1.饲料的质量对用于人工授精公猪所产生的精液质量和数量的影响很大。2.公猪的体况太肥或太瘦都可能造成精液质量的下降。3.不平衡的饲料可能导致公猪的性欲下降和其他一些问题的发生。4质量差的饲料=低浓度的精液+低质量的精液+低数量的精液。5.公猪必须有一个舒适的环境,温度控制在20度,相对湿度70%左右。6. 经常的运动及常规的采精计划使公猪保持旺盛的工作激情。7常规的免疫计划和驱虫方案使公猪站的公猪总保持

23、最佳的健康水平。8.测试新引进的公猪,每头人工授精的公猪每年将产生2000个后代,所以对其精液质量的检测是必须的。记录一头新公猪最先配过的12头母猪以检查其精液的质量,不要使用混合精液或用其他公猪配这些测试母猪。乙脑 细小病毒 猪丹毒 猪瘟 疥癣53猪人工授精操作标准驯化新种公猪1.大多数的种公猪都试着对任何物体跃起爬垮2.因品种的不同其配种的兴趣也表现不同3.确认假母台上用带有公、母猪气味的分泌物涂抹好4.让新种公猪观看一头有经验的老公猪被采精的过程5.确认年轻公猪不产生疑惑6.使新公猪集中注意力于假母台的正确位置上7.保持足够耐心。每天驯化公猪不要超过2030分钟8.不要生气愤怒或去击打公

24、猪,如此会使公猪失去信心杜洛克大白长白我确信她们看起来不是这样!讨厌!大小子54猪人工授精操作标准驯化新种公猪1.一些公猪在开始阶段被操作时感非常敏感2.注意于树立年轻公猪的信心3.开始几次射出精液的精子密度很低,因此收取精液并不重要4.优先要驯化新公猪快速、正确地爬跨假母台5.在一个场内精液采集站,一头发情母猪可以关在紧邻假母台的栏内以刺激公猪的性欲6.每周采集年轻公猪精液不超过一次7.至少用12头母猪进行精液配种测试,以确认其受孕率8.等到母猪产仔后进一步检测新公猪不带有任何遗传缺陷嘿!你介意吗?我很高兴于你温暖的双手好!只剩一天又该采的精液了唇裂畸型腿疝气无肛门畸型尾畸型背55猪人工授精

25、操作标准精液采集 1.采精是第一个步骤,也是最容易受到污染的阶段。2.准备好采精杯,放上采精袋和过滤纸,预热到37度。3.把预热好的采精杯放入保温的精液运送箱中,然后拿到采精区域。4.把公猪赶到采精区域,然后诱导公猪爬上假母猪。5.把采精杯从精液运送箱中取出,放在一个安全和容易拿到的地方。6.戴上双层手套,用干净的纸巾擦洗包皮囊。7.脱掉外层手套,用手握住阴茎,引诱公猪把阴茎全部伸出来。8.让第一次射出的液体流在地上,然后用干纸巾擦干净。精液受污染的危险来自于:1包皮尿液2水3包皮囊上掉下的尘土4空气中的尘埃5汗液以上任何一个因素都可能破坏精液的质量。保温采精杯1升的采精保鲜袋过滤纸 橡皮筋两

26、双采精手套采精杯56猪人工授精操作标准精液采集1当奶油状白色的液体开始流出来时,开始用采精杯采集。2.继续采集直到公猪完全停止。3.马上把采好精液的采精杯放入保温运送箱中,不要拿掉过滤纸。4.把保温运送箱放在转移窗口中,关上窗口的门。5.让公猪自己从假母猪上下来,不要推它或催它。6.把公猪放回自己的栏中,准备下一个采集。7.记住:很多精液从一开始采集时就污染了,破坏了精液的质量。8.我们必须在采集时保护精液受外界物质或温差变化的影响。实验室传送窗口采精区域空气中的尘埃水和空气包皮囊中的灰包皮液和尿液低温在进入采精杯前就污染了灰尘57猪人工授精操作标准三.精液方面保存新鲜精液的关键因素保存和稀释

27、新鲜精液的步骤精液采集前实验室的准备工作在实验里处理精液加工精液精子包装和储存精液58猪人工授精操作标准保存新鲜精液的关键因素1温度2渗透压3PH值4污染5时间清洗设备的时候,不要使用肥皂液或洗涤液,只能使用热水1这些是能影响精液质量的五个因素。2.采集、加工、储存和使用精液时应注意的事项3.防止温差变化应注意的事项。 4.使用的水必须纯净,不含任何杂质,最好用双蒸水配置精液稀释液时必须用高质量的稀释粉和纯净水5.把1包稀释粉(大约50克)倒入1升蒸溜水中,至少在使用前1小时准备好。6.有三种不同类型的稀释粉,根据你的用途选泽正确的种类。7蒸馏水可以当地购买,也可以用双蒸水机自己制作。8.精液

28、采集和使用之间的时间越长,精液质量变坏的危险性就越大。1防止温差变化2保持正确的渗透压和PH值3消除外界污染4通过使用一次性器材来防止交叉感染和疾病传播5当使用时确保是高质量的精液1温度的变化必须缓慢,不能超过每5分钟1度的速度2在温度下降到32度以前,混合精液和稀释液3当混合时,精液和稀释液必须等温4混合后,精液的温度继续慢慢下降,然后放在17度的冰箱中保存5在人工授精实验时,室内温度控制在22-24度精液稀释粉中包含:1维持能量的纯葡萄糖2维持渗透压和PH值平衡和稳定的纯盐3防止细菌生长的抗生素1短效:稀释好精液后24小时内用掉2中效:稀释好精液后4天内用掉3长效:稀释好精液后8天内用掉短

29、效中效长效蒸馏水蒸馏水蒸馏水蒸馏水进水双蒸水出精液瓶总是在使用前检查精液的质量滴一滴在预热 的载玻片上59猪人工授精操作标准稀释和保存新鲜精液的步骤1)诱导公猪爬上假母台2)擦净包皮囊3)握住阴茎4)采集射出的精液浓稠部分5)把采好的精液运送到实验室里精液的采集1)打开恒温水槽和预热箱2)混合稀释液3)准备好采精杯 4)打开和检查所有的电子设备5)准备好输精瓶、器皿、标签等 6)确保稀释溶液加热到37度,混 合好至少1个小时。步骤步骤 1采精开始前实验室的准备工作步骤步骤 21)识别公猪2)称重计算精液容量3)精液的颜色和味道4)稳定采集5)精子浓度计算 6)显微镜观察精子的形状 和活力7)计

30、算每次采集所能分装的头份数,每头份至少含有30亿活的精子8)加入稀释液在实验室里对所采集的精液进行加工和质量检测步骤步骤 3步骤步骤 4步骤步骤 5步骤步骤 6步骤步骤 7步骤步骤 81)准备好分装精液的输精瓶和标签2)根据需要选择输精瓶/精液袋/精液管来分装精液3)盖上输精瓶的盖子或给精液袋/精液管封口分装1)把分装好的精液放在17度的恒温冰箱中2)每隔24小时把输精瓶转动一下以保持精子的旋浮状态3)小心冰箱门打开时温度的上升储存1)如果运输的过程超过30分钟,最好用可移动的恒温冰箱2)如果运输的过程少于30分钟,可以用保温的运送箱,但必须放入可升温/降温的冰袋 3)在输精前抽样检查每一次

31、采集的精液样品。运送输精1)发情鉴定2)组织好输精区域3)规范操作程序4)使用一次性用具以防止尿道感染的传播5)输精完后对母猪的照顾60猪人工授精操作标准精液采集前实验室的准备工作1实验室的准备工作至少在计划采精前1小时必须开始2实验室工作人员必须穿上工作服,擦净所有工作台、墙面和地面,保持室内没有灰尘,把实验室的温度定在22-24度之间。3打开恒温水槽,预热到37度,准备好足够的稀释液,放入恒温水槽中4把所有的采精器皿放在预热箱中,预热到37度5准备好采精杯,放入预热箱中6准备好检测设备:恒温载物台、显微镜、精虫计数器7准备好记录本、识别用标签、笔等8当采精员要开始采精时,把预热好的采精杯放

32、入保温运送箱中,通过传递窗口送到采精区域。开始采精的时间开始做实验室准备工作的时间橡皮圈过滤纸1升采精袋采精区域实验室61猪人工授精操作标准在实验室里准备精液有两个目的1把采集的精液分装成若干头份,每头份100毫升,含有40亿个活的精子。2保存好稀释好的精液,使之在3-5天后能够很好地使用实验室的操作规程必须使我们:1)不污染精液2)不使精液受温差变化的影响在实验室里,才把采精杯从保温运送箱中取出,拿掉过滤纸,测量精液的温度精液只能漫漫降温,至34-37度,下降的速度不能超过每5分钟1度的速度精液降温的时间可能需要15-20分钟,可以用这段时间来检查精液的质量,计算精子的密度。把计算好的稀释液

33、倒入另外一个烧杯,比较温度当精液和稀释液的温度完全一致时,把稀释液漫漫倒入精液中精液稀释液3-5天温度的急剧变化将导致精子死亡38-39扔掉62猪人工授精操作标准精液处理精液处理:精液处理和质量控制的精液处理和质量控制的 8个步骤个步骤1对精液进行标识把采集好的精液放进预热好的烧杯中,贴上标签2.通过称重计算出精液的容积,放上烧杯置零后在称精液3.颜色和味道奶白色而不是粉红色带咸味4.精子的浓度一般用专用的精子计数器来计算每1毫升原精液中有多少亿个精子5.精子的活力一般用100倍的显微镜来估算精子活力的百分比,超过60%以上有活力认为是正常的6.精子的活率一般用400倍的显微镜来观察,加上一滴

34、染色剂,超过80%以上的成活率认为是正常的7.计算分装的头份用标准的计算公式计算出能分装的头份数和需要加入稀释液的数量8.加入稀释液精液和稀释液的温度必须相等以防止温差变化对精子的破坏每毫升范围是8千万-8亿的精子畸形死亡活一滴染色剂1.号码2.容量3.眼观4.密度5.活力6.活率#563122MLOKOK0.35x10 85%95%信息头份数=122/13.5=9总容量=9x100=900ML添加的稀释液=900-122=778ML最好把稀释液倒入精液中,慢慢搅拌63猪人工授精操作标准质量控制射精时的正常精子顶体精子发育时,两点发生改变原生质滴由颈部向尾部缓慢移动顶体脱落64猪人工授精操作标

35、准分装和储存稀释好的精液把混合好的精液漫漫倒入输精瓶或精液管/袋中,每头份容量为100毫升盖上输精瓶盖或封好精液管/袋的口,贴上标签,慢慢冷却。对4小时以后才使用的精液,必须放入17度的恒温冰箱中保存在储存的过程中,精子会沉淀下去,每隔24小时以180度的角度漫漫转动输精瓶/管/袋每天必须对每一次采集的精液进行抽样,检查其活力或活率,用恒温载物台把载玻片加热到37度需要使用精液时,把分装好的精液从恒温冰箱中取出,可以让其慢慢升温把分装好的精液放入保温运送箱中,送到配种区域每天根据所需要输精的母猪数量,计算出所需要的精液头份数把输精瓶预热至37瓶盖封口恒温载物台只是在要输精时才把精液从冰箱中取出

36、如果把用不完的精液再放回冰箱将破坏精液的质量65猪人工授精操作标准四.卵子方面发情鉴定受孕步骤成功受孕的管理进行发情鉴定时试情公猪的作用试情公猪的品质发情鉴定的步骤输精时间66猪人工授精操作标准受孕步骤1.发情期的定义是当母猪站立不动发情的时候。2.由于作息时间的关系,站立发情的母猪可能会推迟几个小时才被配种员发现。3.发情后36-72个小时才开始排卵。4.排卵的时间通常会持续 4到 6个小时。 5.卵子需要大约 30 到 45分钟到达壶腹,这是受孕的最佳地点6.卵子在壶腹的下端最多呆上8个小时,这个时候卵子的活力 最强。5.精子成熟后其活力最多可以保持 24小时。4精子通过一个峡谷游到受孕的

37、地点。3.精子在使卵子受精前需要 8个小时的成熟期。2.精子很快地被转移到子宫的顶端。1.精子在子宫顶端子宫颈口输入。其目的是使新鲜的精子和新鲜的卵子在最佳的时间和最佳地点相遇,实际上,最佳的受孕效果是在排卵前12小时进行输精。67猪人工授精操作标准成功受孕的管理秘诀秘诀死精成熟的精子, 可以受孕有顶体的精子, 不能受孕有活力的卵子没活力的卵子小时小时-48-36-24-120+12+24+36+60+48+72阴户开始红肿爬跨特征未完全发情开始发情可以开始进行第一次输精可以开始进行第二次输精可以开始进行第三次输精排卵排卵可以开始进行第四次输精可以开始进行第五次输精太早低受胎率 输精时间输精时

38、间OK高受胎率太迟低受胎率 排卵时间排卵时间 高 受胎率站立发情观察站立发情观察68猪人工授精操作标准好试情公猪的品质o1.雄性味道越重越好。o2.会交谈,唾液多,并含有外激素。o3.在爬跨母猪前知道怎样做,有和母猪交谈的欲望。o4.有忍让性-当不能让它配种时不会感到愤怒。69猪人工授精操作标准好试情公猪的品质o5.温柔而有耐性-知道怎样和母猪“工作” 而不至于把母猪赶得到处跑.o6.好管理-当你需要的时候,可以比较容易地把它从一栏赶到另一栏。o7.可靠性-知道每天和母猪将要进行一系列的工作。o8.积极性-当发现另一头母猪又发情时,不要认为一天的工作已完成了。o9.性格好-不会攻击配种员。o1

39、0.培训良好-有可靠的本质和特点。注意注意:1.有些品种和品系比另外一些品种和品系更容易培训成试情公猪。2.有很多生产者使用结扎的公猪作为试情公猪。70猪人工授精操作标准鉴定发情的步骤o1.爬跨另一头母猪暗示将要开始发情。o2.食欲减退。o3.烦躁不安 -当其他母猪休息时,却表现出要”找公猪”的症状。o4.渴望的表情,眼睛失去注意力。71猪人工授精操作标准鉴定发情的步骤o5.耳朵向上竖起。o6.身体颤抖。o7.接受背部按压时站立不动。o8.尾巴上下摇摆。o9.阴户红肿。o10. 阴道有黏液流出。o11. 母猪阴道“成熟”。o12. 如果把手指放在阴唇间有潮湿、温暖的感觉。母猪在发情期间将出现以

40、上局部或全部症状。母猪在发情期间将出现以上局部或全部症状。72猪人工授精操作标准输精时间#1经产母猪断奶3-4天发情发情-输精(输精)输精(输精)(输精)上午下午发情-输精(输精)输精(输精)(输精)下午上午#2经产母猪断奶5-7天发情发情输精(输精)输精上午下午发情输精(输精)输精下午上午#3经产母猪7天以上发情发情输精(输精)输精上午下午发情输精(输精)(输精)下午上午发情.P.输精输精输精上午下午输精输精下午上午#4后备母猪发情输精输精(输精)上午下午发情输精输精(输精)下午上午#5使用激素(PG600)的母猪(后+经)1-2425-4849-7273-961-2425-4849-727

41、3-96发情鉴定(上午)间隔时间8小时(下午)公猪试情十人为观察发情.P.输精输精 :第一次输精 输精:第二次输精P=50cc 精浆 (输精):可输可不输第一天第二天第三天第四天第一天第二天第三天第四天73猪人工授精操作标准发情持续期最佳人工授精时间取决于:断奶至发情,发情持续期及发情至排卵之间的关系接受公猪接受公猪背压正常背压正常精子的授精能力精子的授精能力排卵排卵可以输精的时间可以输精的时间断奶天数断奶天数123456789+OVOVOVOV晚发情母猪正常发情母猪早发情母猪74猪人工授精操作标准进行发情鉴定试情公猪的作用当我们进行人工授精时我们要使用两种类型的公猪1.公猪站里用于采精 的公

42、猪2.配种区域里用于发 情鉴定的试情公猪没有公猪刺激的背部按压,鉴定发情的比率只有50%加上公猪的声音增加到75%加上公猪的味道增加到85%加上公猪的声音和味道可以达到90%在发情鉴定时,过道必须有栏门来控制公猪如果试情公猪做不好本职工作,换另一头公猪加上公猪的声音、味道和视觉可以、达到97%75猪人工授精操作标准诱情76猪人工授精操作标准怎么办?怎么办?o配种前为促进发情排卵,要求适时提高饲料喂量,对提高配种受胎率和产仔数大有好处。尤其是初产母猪更为重要。o对产仔多、泌乳量高或哺乳后体况差的经产母猪,配种前采用“短短期期优饲”办法,即在维持需要的基础上提高50-100%,喂量达3-3.5kg

43、/天,可促使排卵;o对后备母猪,在准备配种前10-1510-15天加料, 可促使发情,多排卵,喂量可达2.5-3.0kg/天,但具体应根据猪的体况增减,配种后应逐步减少喂量77猪人工授精操作标准其中其中 母猪的发情鉴定管理母猪的发情鉴定管理o发情周期发情周期:一般为18-24天,平均为21天,历经发情前期、发情中期、发情后期和休情期。o前前期期:表现不安、食欲下降、外阴红肿,阴道分泌的粘液较少,不接受分猪的爬跨。o中中期期:鸣叫、跳栏、食欲减退,爬跨其它猪只,频频排尿,外阴充血红肿,阴道分泌的粘液量多且粘稠,接受公猪的爬跨,出现“呆立反应”。o后后期期:性欲减退,站立反应消失,不接受公猪爬跨,

44、阴道粘液排出量减少。o休情期休情期:生理活动处于相对静止时期,恢复正常78猪人工授精操作标准后备母猪发情步骤红肿 - 肿胀 - 出现皱褶 - 消退红-深红-消退79猪人工授精操作标准o一头经产母猪 发情外阴变化全过程有变化但不明显红-深红-消退80猪人工授精操作标准其中其中 母猪的发情鉴定管理母猪的发情鉴定管理o母猪发情期长短因品种、环境、个体而异,短则一天,长则7-10天,平均3-4天,青年母猪比经产母猪短。o 一看阴户,充血红肿紫色暗淡-皱缩 二看粘液,浓浊,粘有垫草时配种o 三看表情,即出现“呆立反应”时配种受胎率最高 四看年龄,“老配早,小配晚,不老不小配中间”o注意:强迫配种的受胎率

45、较低;为防止漏配,有时需用公猪进行试情;另外,有些母猪对公猪有选择性。81猪人工授精操作标准五.母猪方面输精照顾好断奶后的母猪准备好要配种的母猪输精输精注意事项配种区域的设计输精完后对母猪的照顾82猪人工授精操作标准照顾好断奶后的母猪只有当母猪站立发情时才接受公猪的爬跨断奶的仔猪数越多,菏尔蒙分泌越多,可刺激断奶母猪在4-7天后发情把刚断奶的母猪混合在一起可刺激发情,但也可能因为打架而造成损伤要使母猪有良好的发情,必须有可以接受的体况,一般认为在2.5之间是良好的在任何时候都不能给母猪使用发霉的饲料,这会引起疾病和生殖问题的发生如果后备母猪在第一次怀孕时照顾不好会引起发情期推后成功的受孕才是我

46、们生产猪只的开始,必须给予足够的重视和管理制定免疫程序防止疾病的发生,但不要影响发情到配种栏到保育舍4-7天后到配种舍到保育舍体态评分表至少在断奶后一周前给母猪打疫苗什么?我还要重做一次?83猪人工授精操作标准准备好要输精的母猪检查有多少后备母猪和经产母猪可以配种,所有母猪都至少输精两次每天用一头试情公猪来刺激母猪,检查有无发情症状没有发情的阴户发情前48小时,阴户开始变得红肿发情时阴户是潮湿的愿意接受压背的母猪在12小时后可以输精把需要输精的所有材料都准备好在配种栏附近放一头公猪将有助于刺激母猪站立配种员还可以通过压背和抚摩两腹给母猪进一步的刺激需要输精的母猪可以留在自己定位栏中或赶到特定的

47、配种栏记录本纸巾一次性手套润滑剂一次性输精管放在保温运送箱中的 精液瓶用不同的颜色来表示母猪发情的过程红色 第一天阴户变红红色 第二天阴户变 红,但不站立蓝色 站立绿色 第一次 配种耗材84猪人工授精操作标准输精用干纸巾擦干净母猪的阴户从塑料袋中取出一次性输精管,在输精管头部涂上润滑油以稍稍往上的方向轻轻插入输精管,并呈逆时针方向转动继续插入输精管直到输精管顶端被“锁定”在子宫颈部位从保温运送箱中取出输精瓶,漫漫转动以混合精液,用剪刀剪掉盖子的顶端按压母猪的背部,发情母猪自然的收缩功能将把精液吸到体内继续握住输精管输精过程完成后,让输精 管在体内再停留30秒钟轻轻有力地拉出输精管把输精瓶插入输

48、精管,尽量抬高输精瓶以使精液顺利通过输精管流入母猪体内卵巢子宫子宫颈膀胱85猪人工授精操作标准输精注意事项一次性输精管的海绵头被锁在子宫颈里母猪自然的内部收缩功能将在分钟的时间里把精液吸收到体内当输精瓶中精液输完时让输精管在体内再停留半到分钟然后轻轻稳健地向下拉出输精管当输精管头部还紧紧锁在子宫颈里,不要用力往外拉如果输精管拉出来了而海绵头留在了母猪体内,不要着急,给这头母猪做上记号海绵头会像在自然交配中母猪把胶状物排出体外一样排出输精完后把输精管后部折过来以防止精液倒流,当母猪放松时,输精管会自动掉下来86猪人工授精操作标准配种区域的设计一次性授精管用试情的公猪来刺激母猪配种栏润滑剂在保温箱

49、中的输精瓶配种区域必须设计合理配种区域必须设计合理输精压袋87猪人工授精操作标准输精完后对母猪的照顾母猪最好赶到一个单独的配种栏里进行输精,在设计上尽量避免配种时带来的麻烦母猪的发情将维持2-3天的时间,如果和其他的母猪混合会引起相互爬跨所以最好是把母猪放在一个单独的定位栏中,这样就不会有身体受伤害的危险在母猪的发情周期,每头母猪在24小时的间隔里至少配种两次在发情期或随后的几天里不要给母猪喂饲过多,但要用高质量的饲料在输精后18天开始检查有无返情的症状,一直检查到第23天在输精后第24天开始用超声波探测仪来确认母猪是否怀孕每天检查粪便的状况,观察有无阴道分泌物2.5-3.0公斤/天88猪人工

50、授精操作标准六.人工授精实验室设计人工授精实验室的构成隔离检疫区种公猪养殖区精液采集区人工授精实验室人工授精设备与耗材89猪人工授精操作标准场内人工授精实验室与种公猪站的设计1.2.3.4.6.5.场内人工授精设施的六个组成部分1.新公猪隔离检疫区2.公猪养殖区、养殖栏与养殖圈舍3.精液采集区4.人工授精实验室、清洁室标准5.精液贮存与发送区6.实验室入口与更衣区1、2区是养殖区;区是养殖区;3是过渡区;是过渡区;4、5、6是清洁区是清洁区90猪人工授精操作标准检疫区o1.在引进新种猪进入猪群之前进行一段适当的检疫隔离时间是必要的。如同一个商业性种公猪站引种一样,向其育种群中引进种母猪和场内人

51、工授精种公猪站内引入种公猪均具有同等重要性。o2.一些疾病可以通过精液传播。o3.检疫区应位于与养殖区/单元保持足够距离的位置上,这样如果引进感染疾病的种猪时其造成疾病传播的风险可降至最低程度。隔离检疫区内种猪的饲养应由另外的而不是由主要养殖区的人来进行。o4.新进种猪应保持在隔离检疫区内至少六个星期,并进行疾病的测试、免疫注射并与场内现存疾病进行适应驯化。91猪人工授精操作标准新公猪适应驯化o1.环境控制温度在1824,湿度为65%75%之间。o 公猪室内温度达到或超过28,可能造成暂时性或永久性公猪不育。o2.必须设计通风系统,以降低疾病传播风险。o3. 留出有效的养殖空间:公猪养在一个单

52、独的栏内,长度2.4米、宽0.75米、高1.1米。o4. 公猪栏下使用全漏缝水泥地板以维持其清洁干燥。饲料槽应高于地板平面,而非沉入水泥地面下。o5.保留一个运动圈,至少每8头公猪使用5平方米,如有可能最好是4头公猪共用一个运动圈。必须设计一个生物安全设施,称为一个必须设计一个生物安全设施,称为一个“非清洁非清洁”工作区工作区92猪人工授精操作标准公猪养殖区运动圈运动圈2.4X0.75米栏米栏2.0米的漏缝地板米的漏缝地板93猪人工授精操作标准94猪人工授精操作标准精液采集区o1.与公猪养殖区用墙壁和门分隔开,可以维持本室为无灰尘环境。o2.严格地控制温度为1824o3. 假母台牢固地安置在地

53、板上,位于一个角落处,面朝墙角。最好使用一块配种垫放于假母台下以使公猪可以牢固蹬踏。o4. 必须设计一个人员安全区以预防公猪突然攻击。o5.有一个通向实验室的唯一的传递窗,最好设计为双侧窗门。o6.有污水出口的防滑水泥地板,以便于清洗。设计为设计为“半清洁半清洁”工作区工作区95猪人工授精操作标准精液采集区(4MX4M)通向实验室的传递窗假母台人员安全区防滑垫防滑水泥地板污水排出口空调机96猪人工授精操作标准采集区(立体图)97猪人工授精操作标准人工授精实验室o1.相当于GMP清洁室的标准o 1)地板、墙壁、天花板、台面等必须是可清洗的瓷砖 o 、玻璃、高密度塑料等材料。o 2)达到无尘环境标

54、准的空气过滤系统。o 3)全控环境:温度22 24 ;湿度为70%。o2.用于冷、热水的不锈钢水池及排水口。o3. 足够的供电插座便于设备使用。o4. 特殊设计的冷却区用于精液缓慢冷却至稀释时。o5.唯一双侧窗门的传递窗至更衣区,另有一双侧窗门的传递窗至精液采集区。设计为设计为“清洁清洁”工作区工作区98猪人工授精操作标准人工授精实验室(4MX5M)电子称精液恒温水槽稀释剂恒温水槽磁力搅拌器双蒸水机冷热水清洗池从采集区柜台面恒温载物台精液加工及质量控制显微镜精虫密度计数器装瓶及冷却区玻璃柜面普通冰箱17 恒温冰箱17 恒温冰箱用于精液贮存包括输精瓶、输精管等物的贮存贮藏柜泡沫预热箱恒温预热箱授

55、精管消毒箱更衣区接收精液电子称精液恒温水槽稀释剂恒温水槽磁力搅拌器冷、热水清洗池99猪人工授精操作标准人工授精实验室设备人工授精基本应用物人工授精基本应用物品品1.假母台及配种垫2.双蒸水机3.小水浴槽4.计量小于2千克的电子称5.泡沫预热箱*6.显微镜(简易型)7.精虫密度计数器*8.17 恒温冰箱*泡沫预热箱=泡沫箱+数字温度计+加热灯*精虫密度计数器=亚卫精子密度测定器+10毫升移液管+1毫升可调移液器+血球计数板场内人工授精实验室完场内人工授精实验室完整配套设备整配套设备1.假母台及配种垫2.双蒸水机3.小水浴槽(精液)4.大水浴槽(稀释剂)5.计量小于2千克电子称6.泡沫恒温箱7.恒

56、温预热箱8.单目显微镜9.恒温载物台10.磁力搅拌器11.消毒箱12.精虫密度计数器13.17 恒温冰箱 多次性输精管消毒箱 热封口机 精液分装器商业性人工授精商业性人工授精实验室附加设备实验室附加设备1.贴标签器2.精虫检测比色计3.恒温运输箱4.相差显微镜5.200升恒温柜种公猪养殖设备种公猪养殖设备1.公猪限位栏2. 限位栏饲料斗3.自动饮水器4.降温水帘5.可调卷窗帘6.2米长漏缝水泥地板100猪人工授精操作标准人工授精实验室器材及耗材基本实验设备基本实验设备1.集精杯2.恒温运输箱3.1升玻璃烧杯4.2升玻璃烧杯5.1升三角烧瓶6.1升塑料量杯7.2升塑料量杯8.红水温度计9.搅拌棒10.剪子11.移液管12.可调式移液器基本实验室耗材基本实验室耗材1.1升塑料袋2.2升塑料袋3.过滤纱布/滤纸4.塑料采精手套5.乳胶实验室手套6.载玻片、盖玻片7.伊红染色剂8.精液包装品 1).精液瓶 2).精液管 3).精液袋 精液管夹 移液咀 工作服+鞋套授精区设备及耗授精区设备及耗材材1.输精压袋2.公猪气味棒/气雾剂 3.恒温运输箱4.输精管5.输精导管6.润滑剂7.剪子8.纸巾辅助设备及耗材辅助设备及耗材1.怀孕探测仪2. 发情检测仪101猪人工授精操作标准祝大家: 工作愉快 身体健康 业绩辉煌 谢谢!102猪人工授精操作标准

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