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1、 不发酵革兰阴性杆菌 1定义v 不发酵革兰阴性杆菌，指一大群不发酵葡不发酵革兰阴性杆菌，指一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧、无芽胞的革兰阴性杆菌；多为条件性厌氧、无芽胞的革兰阴性杆菌；多为条件致病菌。致病菌。2O-F试验发酵型（发酵型（F）氧化型氧化型(O)产碱型产碱型(-)3 革兰阴性杆菌O-F试验试验Fo/非发酵菌非发酵菌氧化酶试验氧化酶试验+弧菌科弧菌科肠杆菌科肠杆菌科4 不发酵革兰阴性杆菌包括假单胞菌属、产碱不发酵革兰阴性杆菌包括假单胞菌属、产碱杆菌属、无色杆菌属、不动杆菌属、莫拉菌属、杆菌属、无色杆菌属、不动杆菌属、莫拉
2、菌属、金氏杆菌属、黄杆菌属、艾肯菌属、土壤杆菌金氏杆菌属、黄杆菌属、艾肯菌属、土壤杆菌属、黄单胞菌属、丛毛单胞菌属等。属、黄单胞菌属、丛毛单胞菌属等。 分类5分群依据分群依据v氧化酶试验v葡萄糖氧化发酵试验v动力试验6常常见不不发酵革酵革兰阴性杆菌的初步分群阴性杆菌的初步分群鉴定定试验假假单胞菌属胞菌属无色杆菌无色杆菌属属黄杆菌属黄杆菌属不不动杆菌属杆菌属产碱杆菌属碱杆菌属丛毛菌属毛菌属莫拉菌属莫拉菌属氧化氧化酶酶+/-+/-O/F试验试验O/-OOO/-动力力+/-+/-+/-+-注：注：+：90%以上阳性；以上阳性；-10%以下的阳性；以下的阳性；+/-：约70%为阳性；阳性；O：为氧化。
3、氧化。不发酵革兰阴性杆菌不发酵革兰阴性杆菌7假单胞菌属v 假单胞菌属为需氧、有鞭毛、无芽胞、无假单胞菌属为需氧、有鞭毛、无芽胞、无荚膜的革兰阴性杆菌，氧化酶试验阳性，荚膜的革兰阴性杆菌，氧化酶试验阳性，DNA DNA G+CG+C为为585871mol71mol，包括，包括200200余种菌。多数为余种菌。多数为腐生菌，少数为植物和动物寄生菌，大多为条腐生菌，少数为植物和动物寄生菌，大多为条件致病菌。件致病菌。 代表菌株为铜绿假单胞菌。代表菌株为铜绿假单胞菌。8v 假假单单胞胞菌菌属属分分布布广广泛泛，土土壤壤、水水和和空空气气中中均均有有存存在在，人人类类非非发发酵酵菌菌感感染染中中，假假单
4、单胞胞菌菌占占7070 8080，主主要要为为铜铜绿绿假假单单胞胞菌菌，其其他他较较为为常常见见的的菌菌种种有有嗜嗜麦麦芽芽窄窄食食单单胞胞菌菌、荧荧光光假假单单胞胞菌菌、恶恶臭臭假假单单胞胞菌菌、产产碱碱假假单单胞胞菌菌等等。这这些些菌菌种种也也是是医医院院感感染染的的主主要要病病原菌。原菌。 临床意义临床意义9微生物特性微生物特性 共性共性 :G-杆菌，无芽孢，有荚膜，多数菌杆菌，无芽孢，有荚膜，多数菌有鞭毛，专性需氧菌，生长温度范围广，有鞭毛，专性需氧菌，生长温度范围广，最适最适35度度 ，普通培养基上可以生长，可产，普通培养基上可以生长，可产各种水溶性色素。抵抗力强，多种抗生素各种水溶
5、性色素。抵抗力强，多种抗生素耐药耐药 10微生物检验微生物检验2.鉴定：氧化分解葡萄糖、产酸不产气，触酶氧化分解葡萄糖、产酸不产气，触酶氧化酶阳性，吲哚氧化酶阳性，吲哚 、甲基红、甲基红、VP阴性阴性。 11微生物检验微生物检验3.药敏试验A组：头孢他定、庆大霉素、美洛西林、替卡西林、哌拉西林头孢他定、庆大霉素、美洛西林、替卡西林、哌拉西林B组：头孢吡肟、头孢哌酮、氨曲南、亚胺培南、阿米卡星、妥布霉素、环丙沙星头孢吡肟、头孢哌酮、氨曲南、亚胺培南、阿米卡星、妥布霉素、环丙沙星C组：头孢噻肟、氯霉素头孢噻肟、氯霉素U组：羧苄西林、头孢唑肟、四环素、诺氟沙星、羧苄西林、头孢唑肟、四环素、诺氟沙星、
6、SMZ4.抗菌药物：抗菌药物：内酰胺类，氨基糖苷类，喹诺酮类。内酰胺类，氨基糖苷类，喹诺酮类。5. -内酰胺类抗生素是含有内酰胺类抗生素是含有-内酰胺环的一大类抗生素内酰胺环的一大类抗生素,以青霉素类、头孢菌以青霉素类、头孢菌素类为典型代表素类为典型代表,此外还包括非典型此外还包括非典型-内酰胺类抗生素如青霉烯类、碳青霉内酰胺类抗生素如青霉烯类、碳青霉烯类、氧青霉烯类及单环烯类、氧青霉烯类及单环-内酰胺类等。内酰胺类等。12 铜绿假单胞菌14 铜绿假单胞菌广泛存在环境中，加之多种传播铜绿假单胞菌广泛存在环境中，加之多种传播途径和污染，因此易感染途径和污染，因此易感染, ,特别是免疫力低下的特别
7、是免疫力低下的患者。引起患者。引起: :1.1.皮肤感染、呼吸道感染、泌尿道感染、烧伤感染皮肤感染、呼吸道感染、泌尿道感染、烧伤感染2.2.菌血症、心内膜炎、囊性纤维变性菌血症、心内膜炎、囊性纤维变性3.3.感染眼部的铜绿假单胞菌，可以合成胶原酶，以感染眼部的铜绿假单胞菌，可以合成胶原酶，以致引起角膜穿孔而失明。致引起角膜穿孔而失明。临床意义临床意义15致病物质：致病物质：1.1.粘附素粘附素- -菌毛菌毛2.2.多糖荚膜多糖荚膜3.3.内毒素，外毒素内毒素，外毒素4.4.绿脓毒素绿脓毒素- -催化过氧化氢和超氧化物催化过氧化氢和超氧化物5.5.弹性蛋白酶弹性蛋白酶6.6.磷脂酶磷脂酶C C临
8、床意义临床意义16生物学性状生物学性状v形态与染色形态与染色：G- G- 杆杆菌，多形性，有鞭毛、菌，多形性，有鞭毛、菌毛、荚膜，无芽孢菌毛、荚膜，无芽孢, ,产荧光素和绿脓素产荧光素和绿脓素172.生物学特性生物学特性v培养特性：培养特性：专性需氧，专性需氧，44不生长不生长42 生长，生长，在血平板上经在血平板上经35373537，1824h1824h培养可表现为：培养可表现为：菌落大而扁平、湿润、菌落大而扁平、湿润、边缘不齐边缘不齐, ,有金属光泽有金属光泽, ,有生姜样芳香气味有生姜样芳香气味, ,菌落菌落周围有宽大的兰绿色透周围有宽大的兰绿色透明溶血环。明溶血环。182.生物学特性生
9、物学特性v血平板，麦康凯平板上五种菌落血平板，麦康凯平板上五种菌落v1.典型型典型型-灰绿色，大小不一，扁平湿润，金属光灰绿色，大小不一，扁平湿润，金属光泽泽v2.大肠菌样型大肠菌样型-灰白色半透明灰白色半透明v3.黏液型黏液型-光滑突起，成粘液状光滑突起，成粘液状v4.侏儒型侏儒型-细小，无光泽，半透明细小，无光泽，半透明v5.粗糙型粗糙型-中央凸起，边缘扁平，表面粗糙中央凸起，边缘扁平，表面粗糙19铜绿假单胞菌（铜绿假单胞菌（P. aeruginosa)v可产生多种色素：可产生多种色素： 荧光素与绿脓素荧光素与绿脓素20铜绿假单胞菌（铜绿假单胞菌（P. aeruginosa)v绿脓素绿脓素
10、21生物学性状生物学性状v普通琼脂培养基上普通琼脂培养基上能产生水溶性绿色能产生水溶性绿色素，使整个培养基素，使整个培养基变为绿色。变为绿色。MACMAC培养培养基上，基上，18-24h18-24h可形可形成微小无光泽半透成微小无光泽半透明的菌落。明的菌落。SSSS平板平板上可行成类似沙门上可行成类似沙门菌的菌落。菌的菌落。( (中心黑中心黑色菌落）色菌落）22生物学性状生物学性状v生化反应：生化反应：氧化酶阳性，触酶阳性，氧化酶阳性，触酶阳性，O/FO/F氧氧化型，精双（化型，精双（+ +）还原硝酸盐。）还原硝酸盐。v抗原构造和分型：抗原构造和分型：菌体菌体O,O,鞭毛鞭毛H,H,粘液粘液S
11、 S和菌和菌毛抗原。毛抗原。v抵抗力抵抗力: :耐潮湿、干燥、紫外线，不耐热和消耐潮湿、干燥、紫外线，不耐热和消毒剂，临床分离的菌株多耐药。毒剂，临床分离的菌株多耐药。23 铜绿假单胞菌检验铜绿假单胞菌检验 v1标本采集标本采集 按按疾疾病病和和检检查查目目的的，分分别别采采取取不不同同的的标标本本：患患者者的的血血液液、脑脑脊脊液液、胸胸( (腹腹) )水水、脓脓液液、分分泌泌液液、痰痰、尿尿液液、十十二二指指肠肠引引流流液液、粪粪便便等等；医医院院病病区区或或手手术术室室的的空空气气、水水、地地面面、把把手手、医医疗疗诊诊断断器器械械及及生生活活用品。用品。 24检验方法检验方法v直接镜检
12、：直接镜检：G-杆菌杆菌v分离培养分离培养：在普通培养基生长良好，在普通培养基生长良好，经经1824h1824h形成圆形、扁平隆起、湿润菌形成圆形、扁平隆起、湿润菌落。琼脂被染成绿色或黄绿色，约落。琼脂被染成绿色或黄绿色，约8080- -9090产生绿脓素或荧光素。在血平板上表产生绿脓素或荧光素。在血平板上表现为：菌落大而扁平、湿润、边缘不齐；现为：菌落大而扁平、湿润、边缘不齐；有金属光泽；有生姜样芳香气味；菌落周有金属光泽；有生姜样芳香气味；菌落周围有宽大的兰绿色透明溶血环。围有宽大的兰绿色透明溶血环。26检验方法检验方法v鉴定鉴定：氧化酶阳性，触酶阳性，氧化酶阳性，触酶阳性，O-FO-F试
13、试验氧化型、木糖产酸不产气，液化明胶，验氧化型、木糖产酸不产气，液化明胶，还原硝酸盐产生氮气，吲哚阴性，利用枸还原硝酸盐产生氮气，吲哚阴性，利用枸橼酸盐，精氨酸双水解酶阳性。橼酸盐，精氨酸双水解酶阳性。27v 铜绿假单胞菌快速鉴定要点：铜绿假单胞菌快速鉴定要点：vv1、能产生绿色素。、能产生绿色素。vv2、血血平平板板上上菌菌落落大大而而扁扁平平、湿湿润润、边边缘缘不不齐齐；有有金金属属光光泽泽；有有生生姜姜样样气气味味；菌菌落周围有宽大的兰绿色透明溶血环。落周围有宽大的兰绿色透明溶血环。vv3、氧化酶阳性、氧化酶阳性 90%28检验结果分析与报告检验结果分析与报告vv1.结合感染症状，在血、
14、尿及无菌体液中结合感染症状，在血、尿及无菌体液中检出特别是重复检出即可确定为病原菌。检出特别是重复检出即可确定为病原菌。vv2. 若无感染症状，特别是儿童，检出的革若无感染症状，特别是儿童，检出的革兰阴性杆菌可视为正常菌群。兰阴性杆菌可视为正常菌群。vv3.注意铜绿假单胞菌的耐药性注意铜绿假单胞菌的耐药性。29马勒伯克霍尔德菌与伪马勒伯克霍尔德菌马勒伯克霍尔德菌与伪马勒伯克霍尔德菌v属于rRNA第II群v鼻疽病与类鼻疽病的病原体v2004年NCCLs称为可能成为生物恐怖的细菌v（炭疽杆菌（Bacillus anthraci）属于需氧芽胞杆菌属，能引起羊、牛、马等动物及人类的炭疽病。炭疽杆菌曾被
15、帝国主义作为致死战剂之一。平时，牧民、农民、皮毛和屠宰工作者易受感染。30马勒伯克霍尔德菌与伪马勒伯克霍尔德菌马勒伯克霍尔德菌与伪马勒伯克霍尔德菌v两菌均人兽共患病原菌v人类感染是经伤口、粘膜、呼吸道v急性患者可有高热、衰竭等全身症状v肺鼻疽病 、皮肤鼻疽病、内脏脓肿、菌血症、脓毒血症 临床意义临床意义（鼠疫耶尔森菌（鼠疫耶尔森菌, ,炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌, ,布鲁菌属布鲁菌属, ,巴斯德菌属和弗朗西斯菌属等）巴斯德菌属和弗朗西斯菌属等）31生物学特性生物学特性 v革兰阴性杆菌 v无芽胞、无荚膜v伪马勒鼻伯克霍尔德菌一端有丛鞭毛(14 根)， 4不能生长v马勒鼻伯克霍尔德菌无鞭毛无动力，4
16、2 不生长32微生物检验微生物检验v分离培养与鉴定分离培养与鉴定 v需氧菌v生长温度35v普通培养基、血琼脂、麦康凯v生化鉴定v荧光直接法染色镜检，可快速诊断33 嗜麦芽窄食单胞菌34分分 类类v 分类曾经过两次反复分类曾经过两次反复 ，最终定为假单胞菌属。，最终定为假单胞菌属。35临床意义v分布广泛，为条件致病菌，可引起抵抗力低分布广泛，为条件致病菌，可引起抵抗力低下患者呼吸道、泌尿道、伤口等部位的感染，下患者呼吸道、泌尿道、伤口等部位的感染，严重者可出现菌血症和心内膜炎。严重者可出现菌血症和心内膜炎。 假单胞菌的感染中居第二位，非发酵菌所致假单胞菌的感染中居第二位，非发酵菌所致的感染中居第
17、三位。的感染中居第三位。36微生物特性vG-杆菌，具有端鞭毛杆菌，具有端鞭毛1-8根，有动力，无芽孢根，有动力，无芽孢无荚膜。无荚膜。37微生物检验v标本采集：血液标本先增菌标本采集：血液标本先增菌后分离培养，其他标本直接后分离培养，其他标本直接接种。接种。v分离培养：营养需求不高，分离培养：营养需求不高，在血平板和普通琼脂平板上在血平板和普通琼脂平板上生长良好，经生长良好，经35培养培养18-24h后可形成中等大小、圆形、后可形成中等大小、圆形、光滑、湿润、不溶血的菌落，光滑、湿润、不溶血的菌落，并可产黄色色素。并可产黄色色素。 4不生长，不生长，42 近半数生长。并在近半数生长。并在MAC
18、平板上生长良好。平板上生长良好。38微生物检验v鉴定：氧化酶（鉴定：氧化酶（-），明胶液化试验（），明胶液化试验（+），）， 七叶苷（七叶苷（+），赖氨酸脱羧酶（），赖氨酸脱羧酶（+），）， 氧化分解葡萄糖。氧化分解葡萄糖。39药敏试验v含含 内酰胺酶。内酰胺酶。v 临床治疗首选磺胺类和奎诺酮类抗生素（磺临床治疗首选磺胺类和奎诺酮类抗生素（磺胺嘧啶，环丙沙星）。胺嘧啶，环丙沙星）。v 对亚胺培南天然耐药对亚胺培南天然耐药 鉴定实验鉴定实验v 不用不用K-b法做药敏试验。法做药敏试验。40嗜麦芽窄食单胞菌初步鉴定要点v在血平板和在血平板和MAC上生长良好上生长良好v氧化酶（氧化酶（-）v OF试
19、验氧化型试验氧化型v 赖氨酸脱羧酶阴性赖氨酸脱羧酶阴性v 可产黄色色素可产黄色色素v 抗生素的敏感方式抗生素的敏感方式41 不动杆菌属42分 类v定义：为一群不发酵糖类、氧化酶阴性、不定义：为一群不发酵糖类、氧化酶阴性、不能运动的能运动的G-杆菌。杆菌。v属奈瑟菌科属奈瑟菌科v 17个杂交群个杂交群v 临床分离最多的为鲍曼不动杆菌，排在非发临床分离最多的为鲍曼不动杆菌，排在非发酵菌的第二位，仅次于铜绿假单胞菌。酵菌的第二位，仅次于铜绿假单胞菌。43临床意义v分布广泛分布广泛v 条件致病菌条件致病菌v 医院感染的常见病原菌医院感染的常见病原菌44微生物特性vG-球杆菌，常成对排列，也可单个存球杆
20、菌，常成对排列，也可单个存在。无芽孢，无鞭毛，粘液型菌株有在。无芽孢，无鞭毛，粘液型菌株有荚膜。荚膜。奈瑟菌科奈瑟菌科。v营养要求一般，在普通琼脂平板和营养要求一般，在普通琼脂平板和MAC平板上均能生长。平板上均能生长。 SS平板上部平板上部分菌株可生长。分菌株可生长。45微生物检验v标本采集：对于含菌量较多的标本采取直接标本采集：对于含菌量较多的标本采取直接接种血平板和麦康凯平板，含菌量较少的标接种血平板和麦康凯平板，含菌量较少的标本需增菌后再培养。本需增菌后再培养。v直接镜检：标本经革兰染色后镜检可见直接镜检：标本经革兰染色后镜检可见G-球球杆菌常成双排列，并可见白细胞吞噬现象。杆菌常成双
21、排列，并可见白细胞吞噬现象。v 抗原检测和分型：抗原检测和分型：47微生物检验v分离培养：血平板形成圆形、灰白分离培养：血平板形成圆形、灰白色、光滑、边缘整齐、直径色、光滑、边缘整齐、直径2-3mm的菌落。洛菲不动杆菌菌落小，的菌落。洛菲不动杆菌菌落小，1-1.5mm。溶血不动杆菌可出现。溶血不动杆菌可出现 溶溶血。血。MAC平板生长良好，鲍曼不平板生长良好，鲍曼不动杆菌可呈轻微红色。动杆菌可呈轻微红色。v鉴定：氧化酶（鉴定：氧化酶（-）、动力（）、动力（-）、）、硝还（硝还（-）48药敏试验和结果解释v 可采用可采用K-B法药敏试验法药敏试验v 鲍曼不动杆菌对全部氨基青霉素、一代二代鲍曼不动
22、杆菌对全部氨基青霉素、一代二代头孢菌素和一代奎诺酮类抗生素天然耐药。头孢菌素和一代奎诺酮类抗生素天然耐药。49鲍曼不动杆菌初步鉴定要点vOF试验：试验：O/-vMAC 上生长良好，菌落呈轻微粉红色上生长良好，菌落呈轻微粉红色v 氧化酶（氧化酶（-）v快速分解葡萄糖和乳糖快速分解葡萄糖和乳糖v 无动力无动力v 对青霉素耐药对青霉素耐药50产碱杆菌属产碱杆菌属v1.1.与临床有关的有粪产碱杆菌及亚型、皮乔特产碱与临床有关的有粪产碱杆菌及亚型、皮乔特产碱杆菌、木糖氧化产碱杆菌及亚种，杆菌、木糖氧化产碱杆菌及亚种，DNA G+C mol%DNA G+C mol%为为56567070，典型菌种为粪产碱杆
23、菌。，典型菌种为粪产碱杆菌。v2.2.人体的正常菌群，是医院感染的病原菌，可引起人体的正常菌群，是医院感染的病原菌，可引起抵抗力低下患者发生败血症，并可从患者呼吸道、抵抗力低下患者发生败血症，并可从患者呼吸道、尿液、血液及脑脊液中分离出来。尿液、血液及脑脊液中分离出来。 51产碱杆菌属产碱杆菌属v3.3.为为G-G-杆菌，呈链状、周鞭毛、有动力，无杆菌，呈链状、周鞭毛、有动力，无荚膜。荚膜。 v4.4.在普通培养基上在普通培养基上181824h24h形成无色透明菌落形成无色透明菌落 。氧化酶及触酶均阳性，不分解任何糖类，。氧化酶及触酶均阳性，不分解任何糖类，O-FO-F试验碱性，脲酶阴性，不液
24、化明胶。试验碱性，脲酶阴性，不液化明胶。 52生物学特性生物学特性v革兰阴性杆菌v周鞭毛、有动力v最适生长温度为 2535v普通培养基生长53分离培养与鉴定分离培养与鉴定vpH至8.6为本菌特点v氧化酶阳性v触酶阳性v不分解任何糖类v O-F基础培养呈碱性v脲素酶阴性v不液化明胶54黄杆菌属黄杆菌属v1.1.为为一一群群无无动动力力和和无无芽芽胞胞、氧氧化化酶酶阳阳性性的的G-G-杆杆菌菌。与与临临床床相相关关菌菌种种有有短短黄黄杆杆菌菌、脑脑膜膜炎炎败败血血性性黄黄杆杆菌菌、芳芳香香黄黄杆杆菌菌、水水田田黄黄杆杆菌菌、嗜嗜糖糖黄黄杆杆菌菌、嗜嗜醇黄杆菌、嗜温黄杆菌。模式菌种为水田黄杆菌。醇黄
25、杆菌、嗜温黄杆菌。模式菌种为水田黄杆菌。v2.2.本本菌菌有有两两个个特特点点：产产生生黄黄色色素素, ,菌菌落落多多数数呈呈黄黄色色；分分解解碳碳水水化化合合物物产产酸酸不不产产气气。 DNA DNA G+C G+C mol%mol%含量含量31314242。 55 v3.3.存在于水、土壤和蔬菜中，还可从口腔、上呼存在于水、土壤和蔬菜中，还可从口腔、上呼吸道、皮肤中检出，是条件致病菌，也是引起医吸道、皮肤中检出，是条件致病菌，也是引起医院感染的常见菌。可引起术后感染、菌血症、在院感染的常见菌。可引起术后感染、菌血症、在新生儿及婴幼儿的化脓性脑膜炎中分离出脑膜败新生儿及婴幼儿的化脓性脑膜炎中
26、分离出脑膜败血性黄杆菌比例较高。血性黄杆菌比例较高。 黄杆菌属黄杆菌属56v 4. 4. - -杆杆菌菌，需需氧氧代代谢谢，血血琼琼脂脂培培养养基基生生长长良良好好，典典型型菌菌落落为为淡淡黄黄色色，氧氧化化酶酶、触触酶酶、磷磷酸酸酶阳性。酶阳性。 脂溶性色素脂溶性色素 黄杆菌属黄杆菌属57v5. 5. 临临床床上上常常见见的的脑脑膜膜炎炎败败血血性性黄黄杆杆菌菌及及芳芳香香黄黄杆杆菌菌对对广广谱谱抗抗菌菌药药( (如如氨氨基基糖糖甙甙类类、-内内酰酰胺胺酶酶类类、四四环环素素类类、氯氯霉霉素素) )有有耐耐药药性性，应应根根据据药药敏敏试试验验选选择用药。择用药。黄杆菌属黄杆菌属58药物敏感
27、试验及结果解释药物敏感试验及结果解释v 临床经验用药可选磺胺及大环内脂类的红 霉素。v 临床上常见的脑膜炎败血黄杆菌及芳香黄 杆菌等对广谱抗菌药有耐药性，所以最好 根据药敏试验选择用药。59第五节第五节 莫拉菌属莫拉菌属60分类分类v莫拉菌属(Moraxella)属莫拉菌科（Moraxellaceae）v医学上重要的莫拉菌有：v腔隙莫拉菌（M. lacunata）v卡他莫拉菌（M.catarrhalis）v非液化莫拉菌(M. nonliquefaciens)v奥斯陆莫拉菌(M. osloensis)v亚特兰大莫拉菌(M. atlantae)v狗莫拉菌(M. canis)v林肯莫拉菌(M. li
28、ncolnii)61临床意义临床意义v引起眼结膜炎、气管炎、肺炎、脑膜炎、脑脓肿、心包炎、心内膜炎及泌尿生殖系统炎症62微生物特性微生物特性v革兰阴性球杆菌v呈双短链状排列，具有多形性63微生物检验微生物检验 分离培养：分离培养：v营养要求较高v生长温度3235v血琼脂平板上生长良好v针尖大小的圆形凸起、光滑、半透明、边缘整齐不溶血的菌落。64微生物检验微生物检验鉴定：鉴定：v氧化酶阳性v触酶阳性v无动力v不分解任何糖类v吲哚试验阴性65药物敏感试验及结果解释药物敏感试验及结果解释v对青霉素类敏感v对头孢类、四环素类、喹诺酮类、氨基糖 甙类药物均为敏感v脑炎或脑膜炎、脑脓肿应注意药物通过血 脑
29、屏障的问题66第六节第六节 军团菌属军团菌属67分类分类v军团菌属(Legionella) 属于军团菌科（Legionellaceae）v常见的与人类疾病有关的军团菌：v嗜肺军团菌（Legionella pneumophila）v米克戴德军团菌（L. micdadei）v长滩军团菌（L. longbeachae）v杜莫夫军团菌（L. dumoffii）v波兹曼军团菌（L. bozemanii） 68临床意义临床意义v引起肺炎型和非肺炎型(庞蒂亚克热Pontiac fever)感染v肺炎型：多器官损害，肺部、消化道及神经系统症 状及体征，致死率高v医院感染可高达23% v慢性心、肺、肾病变、艾滋
30、病或接受免疫抑制剂者 易发本病，且死亡率高达45%69临床意义临床意义 空气乳胶微粒传播 发病机制：内毒素和细胞产生的多种酶 裂解红细胞 消化卵黄囊70生物学特性生物学特性v革兰阴性杆菌v菌体呈线状v无芽胞，无荚膜，有端 鞭毛或侧鞭毛v严格需氧v触酶阳性v可液化明胶v不分解糖类v部份菌株氧化酶阳性71微生物检验微生物检验v临床标本：痰、气管分泌物、胸水和血液为主。v病理组织标本：必须制成悬液，再进行涂片和分离培养。v环境污染标本：应先浓缩再接种。72微生物检验微生物检验 分离培养：分离培养：v营养要求苛刻，生长缓慢v生长温度为35v最适pH6.77.0v初次分离必须采用(BCYE)v35天可形成12mm直径的光泽菌落73v核酸检测核酸检测：是快速特异的方法，采用DNA探针及PCR扩增rRNA的方法均可用于军团菌的快速诊断v抗体检测：是抗体检测：是检测军团菌感染临床常用手段，常采用方法：IFA、MAA、TAT、ELISA法等74军 团 菌菌 感感 染染 诊 断断 试 验试验敏感性(%)特异性(%)评注培养70100参考方法直接免疫荧光257095不推荐常规应用间接免疫荧光709099只用于嗜肺军团菌血清群1酶标记免疫709099乳胶凝集55908599血清学（间接免疫荧光）708095辅助培养 7576
