动物细胞工程-细胞融合与单克隆抗体.ppt

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1、动物细胞工程动物细胞工程动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体1、动物细胞融合与植物细胞融合的异同点?、动物细胞融合与植物细胞融合的异同点?2、什么是单克隆抗体?、什么是单克隆抗体?3、怎样生产单克隆抗体?、怎样生产单克隆抗体?4、单克隆抗体有什么优点?、单克隆抗体有什么优点?5、应用?、应用?一、植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较一、植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较比较项目比较项目比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合动物细胞融合动物细胞融合细胞融合原细胞融合原细胞融合原细胞融合原理理理理使用的酶使用的酶使用的酶使用的酶诱

2、导方法诱导方法诱导方法诱导方法结果结果结果结果主要用途主要用途主要用途主要用途细胞膜的流动性细胞膜的流动性植物细胞的全能性植物细胞的全能性细胞膜的流动性细胞膜的流动性纤维素酶、果胶酶纤维素酶、果胶酶胰蛋白酶胰蛋白酶物理(离心、振荡、物理(离心、振荡、电刺激)电刺激)化学(聚乙二醇)化学(聚乙二醇)物理、化学方法物理、化学方法(同左)(同左)灭活的病毒灭活的病毒获得杂种植株获得杂种植株制备单克隆抗体制备单克隆抗体形成杂种植株形成杂种植株形成杂交细胞形成杂交细胞二、制备单克隆抗体二、制备单克隆抗体3 3、单单克隆抗体制克隆抗体制克隆抗体制克隆抗体制备备的原理的原理的原理的原理 利用利用利用利用 产

3、生特异性抗体的功能。产生特异性抗体的功能。产生特异性抗体的功能。产生特异性抗体的功能。 利用利用利用利用 无限增殖的特性。无限增殖的特性。无限增殖的特性。无限增殖的特性。 利用利用利用利用 技术将两种细胞融合获得技术将两种细胞融合获得技术将两种细胞融合获得技术将两种细胞融合获得 杂交瘤细胞。杂交瘤细胞。杂交瘤细胞。杂交瘤细胞。 利用利用利用利用 技术大量培养杂交瘤细胞。技术大量培养杂交瘤细胞。技术大量培养杂交瘤细胞。技术大量培养杂交瘤细胞。B B B B淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞动物细胞融合动物细胞融合动物细胞融合动物细胞融合动物细胞培养动物细胞培

4、养动物细胞培养动物细胞培养4 4、单单克隆抗体的克隆抗体的克隆抗体的克隆抗体的优优点与点与点与点与应应用用用用1 1、常、常、常、常规规抗体抗体抗体抗体获获得的方法及其特点得的方法及其特点得的方法及其特点得的方法及其特点2 2、单单克隆抗体的制克隆抗体的制克隆抗体的制克隆抗体的制备备骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞免疫小鼠免疫小鼠免疫小鼠免疫小鼠单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体筛选筛选筛选筛选克隆、筛选克隆、筛选克隆、筛选克隆、筛选体内培养体内培养体内培养体内培养体外培养体外培养体外培养体外培养B B B B淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞(选择培养基)(选择培养基)(选择培养

5、基)(选择培养基)(抗体检测)(抗体检测)(抗体检测)(抗体检测)细胞融合细胞融合细胞融合细胞融合融合的细胞融合的细胞融合的细胞融合的细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞单克隆抗体单克隆抗体 由由单个单个B淋巴细胞淋巴细胞经过经过无性繁殖无性繁殖(克(克隆),形成基因型相同的细胞群,这一细隆),形成基因型相同的细胞群,这一细胞群所产生的胞群所产生的化学性质单一化学性质单一、特异性强特异性强的的抗体抗体称为称为单克隆抗体。单克隆抗体。 特点:特点:特异性强、灵敏度高特异性强、灵敏度高 小结小结两个过程两个过程动物细胞融合动物细胞融合过程过程单克隆抗体制备单克隆抗体制备过程过程三三个个“一

6、一”一个诱导细胞融合的新方法一个诱导细胞融合的新方法 灭活病毒灭活病毒一个新细胞一个新细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞一个优势一个优势单克隆抗体单克隆抗体特异性强、特异性强、 灵敏度高灵敏度高的优势的优势(1)_技技术是是单克隆抗体技克隆抗体技术的基的基础。(2)根据培养基的用途分根据培养基的用途分类,图中中HAT培养基属于培养基属于_培养基培养基 练习:下图为单克隆抗体制备流程阶段示意图。练习:下图为单克隆抗体制备流程阶段示意图。 动物细胞培养动物细胞培养(微生物培养)微生物培养)选择选择(3)(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比,最大的优越性是单克隆抗体与常规的血清抗体相比,最大的优越性是_。(4

7、)(4)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外,还可以采用导剂外,还可以采用_。(5)(5)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的_特点,特点,又具备淋巴细胞的又具备淋巴细胞的_特点。特点。(6)(6)淋巴细胞是由动物体淋巴细胞是由动物体_中的中的_细胞分化、细胞分化、发育而来。发育而来。(7)7)杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是_。特异性强,灵敏度高特异性强,灵敏度高灭活的病毒灭活的病毒在体外大量增殖在体外大量增殖分泌特异性抗体分泌特异性抗体骨髓骨髓造血干造血干主动运输主动运输(主动吸收主动吸收)

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