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1、第八章第八章 螺形菌螺形菌 第一节第一节 弧菌属（弧菌属（VibrioVibrio） 菌体短小，弯曲成菌体短小，弯曲成弧形弧形，革兰阴性菌革兰阴性菌 广布于自然界，广布于自然界，水水表面最多表面最多 氧化酶试验阳性氧化酶试验阳性 有有单鞭毛单鞭毛主要有主要有霍乱弧菌和副溶血弧菌霍乱弧菌和副溶血弧菌与人类感染有关的主要弧菌与人类感染有关的主要弧菌弧菌弧菌人类疾病人类疾病霍乱弧菌霍乱弧菌O1O1和和O139 O139 血清血清群群霍乱，可造成大流行甚至世界性霍乱，可造成大流行甚至世界性大流行大流行非非O1O1和非和非O139O139霍乱弧菌霍乱弧菌血清群血清群霍乱样腹泻，一般腹泻，偶尔，霍乱样腹泻
2、，一般腹泻，偶尔，肠道外感染肠道外感染副溶血性弧菌副溶血性弧菌胃肠炎，肠道外感染胃肠炎，肠道外感染其他：拟态弧菌、创伤其他：拟态弧菌、创伤弧菌、霍利斯弧菌、河弧菌、霍利斯弧菌、河弧菌弧菌不常见不常见霍 乱 弧 菌霍乱弧菌（V.cholera）是人类霍乱的病原体，霍乱是一种古老且流行广泛的烈性传染病之一。曾在世界上引起多次大流行，主要表现为剧烈的呕吐、腹泻、失水，死亡率甚高。属于国际检疫的烈性传染病。霍霍 乱乱 弧弧 菌菌 包包 括括 两两 个个 生生 物物 型型 ： 古古 典典 生生 物物 型型（Classical Classical biotypebiotype）和和埃埃尔尔托托生生物物型型
3、（EL-Tor EL-Tor bio-typebio-type）。这这两两种种型型别别除除个个别别生生物物学学性性状状稍稍有有不不同同外外，形形态态和和免免疫疫学学性性基基本本相相同同，在在临临床床病病理理及及流流行行病病学学特特征征上上没没有有本本质质的的差差别别。自自18171817年年以以来来，全全球球共共发发生生了了七七次次世世界界性性大大流流行行，前前六六次次病病原原是是古古典典型型霍霍乱乱弧弧菌菌，第第七七次次病病原原是是埃尔托型所致埃尔托型所致。1992年10月在印度东南部又发现了一个引起霍乱霍乱流行的新血清型菌株（流行的新血清型菌株（01390139），它引起的霍乱在临床表现及
4、传播方式上与古典型霍乱完全相同，但不能被01群霍乱弧菌诊断血清所凝集。该菌株在水中的存活时间较01群霍乱弧菌长，因而有可能成为引起世界性霍乱流行的新菌株。一、生物学性状（一）形态染色霍 乱 弧 菌 呈 弧弧 形形 或或 逗逗 点点 形形 态态 ， 大 小 为1.42.60.50.8m。革革兰兰氏氏阴阴性性菌菌，菌菌体体一一端端有有单根鞭毛和菌毛，无荚膜与芽胞。单根鞭毛和菌毛，无荚膜与芽胞。取霍乱病人米泔水样粪便作活菌悬滴观察，可见细菌运动极为活泼，呈流星穿梭运动运动极为活泼，呈流星穿梭运动。 图注：霍乱弧菌的鞭毛（）和它可溶解的鞘膜（） 负染，3 100 图注：分裂中的霍乱弧菌 冰冻蚀刻，70
5、 000 （二）培养特性霍乱弧菌为需氧或兼性厌氧菌需氧或兼性厌氧菌; ;营营养养要要求求不不高高，耐耐碱碱不不耐耐酸酸，在pH8.89.0的碱性蛋白胨水或平板中生长良好。因其他细菌在这一pH不易生长，故碱性蛋白胨水可作为选择性增殖霍乱弧菌的培养基碱性蛋白胨水可作为选择性增殖霍乱弧菌的培养基; ;在碱性平板上菌落直径为2mm，圆形，光滑，透明圆形，光滑，透明。 3.3.抗原结构与分型抗原结构与分型O抗原特异性高分155个血清群耐热H抗原无特异性，弧菌属所共有不耐热H H抗体无保护作用O O1 1血清群血清群 古典生物型古典生物型EL TorEL Tor生物型生物型6 6次霍乱大流行次霍乱大流行西
6、奈半岛西奈半岛 EL TorEL Tor地区发现第地区发现第7 7次霍乱大流行次霍乱大流行O O139139群：群： 19921992年印度分离，流行于南亚和东南亚年印度分离，流行于南亚和东南亚我国流行以El Tor、小川型霍乱弧菌为主。O1群霍乱弧菌的血清分型型别别名O抗原成份原型稻叶型（Inaba）A、C异型小川型（Ogawa）A、B中间型彦岛型（Hikojima）A、B、C血清型：O1群霍乱弧菌的菌体抗原由A A、B B、C C三个抗原成份三个抗原成份组成4.抵抗力对热、干燥、酸、消毒剂都很敏感100 12min死亡胃酸中存活4min 漂白粉（1：4）处理污染物1小时可达到消毒目的霍乱弧
7、菌对链霉素、氯霉素和四环素敏感，但El Tor生物型对一定浓度的多粘菌素B及庆大霉素有耐药性。（二）（二）致病性致病性 1、致病物质-鞭毛、菌毛鞭毛、菌毛，粘液素酶，粘液素酶，霍乱肠毒素（霍乱肠毒素（CTCT） （1 1）鞭毛、菌毛）鞭毛、菌毛及及粘液素酶粘液素酶 靠鞭毛运动，穿过粘液层，靠鞭毛运动，穿过粘液层，粘液素酶消化粘液素酶消化 粘液粘液 粘附于肠壁上皮细胞刷状缘的微绒毛上粘附于肠壁上皮细胞刷状缘的微绒毛上霍霍乱乱肠肠毒毒素素1个A亚单位毒性单位A1肽链具有激活腺苷酸环化酶的酶活性A2肽链结合B亚单位；参与转位5个B亚单位（46）结合单位特异地识别肠上皮细胞膜上的神经节苷脂受体致病机理
8、霍乱弧菌胃对酸敏感，很快被杀死肠胃酸降低或缺乏，菌体增多鞭毛、菌毛、粘液素酶绒毛上大量繁殖CT的B亚单位结合神经节苷脂受体形成膜通道A1肽链进入细胞ATP cAMP 肠粘膜上皮细胞分泌亢进肠液大量分泌大量体液和电解质进入肠腔而发生剧烈吐泻大量脱水和失盐发生代谢性酸中毒，血循环衰竭，甚至休克或死亡激活腺苷酸环化酶系统 剧烈的喷射状呕吐剧烈的喷射状呕吐 休克、电解质紊乱及酸中毒休克、电解质紊乱及酸中毒 腹泻物呈米泔水样腹泻物呈米泔水样 不治疗，死亡率达不治疗，死亡率达60%霍乱：霍乱：霍乱：霍乱： 一种残忍的瘟疫一种残忍的瘟疫一种残忍的瘟疫一种残忍的瘟疫传染源：患者及带菌者传染源：患者及带菌者人类
9、是唯一易感者人类是唯一易感者 摄入摄入10108 8-10-101010个细菌可个细菌可造成感染，引起霍乱造成感染，引起霍乱传播途径：传播途径：经水传播经水传播经食物传播经食物传播经生活接触传播经生活接触传播经苍蝇传播经苍蝇传播霍乱： 一种残忍的瘟疫免疫性免疫性体液免疫为主体液免疫为主可获得牢固的免疫力，很少再感染可获得牢固的免疫力，很少再感染血流中抗毒素、抗菌抗体、局部血流中抗毒素、抗菌抗体、局部sIgAsIgA（三）微生物学检查法（三）微生物学检查法标本标本直接镜检直接镜检分离培养分离培养涂片见G-性弧菌，鱼群状排列悬滴法观察细菌呈穿梭样运动碱性蛋白胨水增菌选择培养基为TCBS（阳性显黄色
10、）病人粪便，肛拭（流行病学调查包括水样）尽早隔离治疗尽早隔离治疗及时检出病人及时检出病人 治疗时适当补液和纠酸治疗时适当补液和纠酸应用抗生素缩短排菌期，减少霍乱毒素应用抗生素缩短排菌期，减少霍乱毒素切断传播途径切断传播途径对粪便及呕吐物处理，防污染对粪便及呕吐物处理，防污染保护易感人群保护易感人群皮下接种死菌苗皮下接种死菌苗口服减毒活疫苗保护率可达口服减毒活疫苗保护率可达82-82-近近100100( (四四) )防防治原治原则二、副溶血性弧菌形态染色形态染色G-G-一一端有端有单鞭毛鞭毛 培养培养嗜盐嗜盐3.5-4.53.5-4.5NaClNaCl最适最适营养要求不高营养要求不高致病性致病机
11、制不清耐热直接溶血毒素耐热直接溶血毒素绝大多数致病性副溶血性弧菌能产生绝大多数致病性副溶血性弧菌能产生使人或家兔的红细胞溶解使人或家兔的红细胞溶解 该毒素也具有肠道毒性该毒素也具有肠道毒性 耐热相关溶血素耐热相关溶血素所致疾病所致疾病：食物中毒夏秋季多发，病程短，恢复快夏秋季多发，病程短，恢复快腹痛、腹泻，呕吐及发热腹痛、腹泻，呕吐及发热水便、血便水便、血便免疫性免疫性：病后免疫力不强病后免疫力不强可重复感染可重复感染血水样便血水样便微生物微生物检查法法分离培养：分离培养：SSSS琼脂平板、嗜盐菌选择平板琼脂平板、嗜盐菌选择平板生化反应、诊断血清生化反应、诊断血清快速诊断：探针杂交、快速诊断：
12、探针杂交、PCRPCR治治疗抗菌药抗菌药如庆大霉素或复方新诺明等如庆大霉素或复方新诺明等 严重病例需输液和补充电解质严重病例需输液和补充电解质第二节 空肠弯曲菌弯弯曲曲菌菌属属(Campylobacter)细菌是一类微需氧、不分解糖类、氧化酶阳性、菌体弯曲呈逗点状、S型或螺旋状、有动力的革兰氏阴性菌。对人类致病的主要是空空肠肠弯弯曲曲菌菌和和胎胎儿儿弯弯曲曲菌菌胎胎儿儿亚亚种种，前者是人类腹腹泻泻最常见的病原菌之一，后者在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎等败血症、脑膜炎等。、 幽门螺杆菌 与慢性胃炎、十二指肠溃疡有关一、生物学性状（一）形态与染色 空肠弯曲菌 （C.jejuni）菌体轻度弯曲
13、似逗点状，长1.55 m，宽0.20.8 m。菌体一端或两端有鞭毛，运动活泼，在暗视野镜下观察似飞蝇。有荚膜，不形成芽胞。革兰氏阴性。图注：空肠弯曲菌的两端单鞭毛（） 负染，21 000 （二）培养特性（二）培养特性为为微微需需氧氧菌菌，在含2.55%氧和10%CO2的环境中生长最好。最适温度为3742。在正常大气或无氧环境中均不能生长。本菌营养要求高营养要求高，需加入血液、血清才能生长需加入血液、血清才能生长。在凝固血清和血琼脂培养基上培养36小时可见无无色色半半透透明明毛毛玻玻璃璃样样小小菌菌落落，单单个个菌菌落落呈呈中中心心凸凸起起，周周边边不不规则，无溶血现象规则，无溶血现象。（三）生
14、化反应空肠弯曲生化反应不活泼，不发酵糖类，不分解尿素，不液化明胶，靛基质阴性。甲基红和VP试验阴性；枸椽酸盐培养基中不生长。 （四）抵抗力抵抵抗抗力力不不强强，易被干燥、直射日光及弱消毒剂所杀灭，565分钟可被杀死。对红霉素、新霉素、庆大霉素、四环素、氯霉素、卡那霉素等抗生素敏感抗生素敏感。但近年发现了不少耐药菌株。 （五）抗原构造本菌抗原构造与肠道杆菌一样具有具有O O、H H和和K K抗抗原原。根据O抗原，可把空肠弯曲菌分成45个以上血清型。 二、致病性与免疫性空肠弯曲菌是多种动物如牛、羊、狗及禽类的正正常常寄寄居菌居菌。污染食物和饮水污染食物和饮水，可引起人类急性肠炎和食物中毒急性肠炎和
15、食物中毒，其其致致病病因因素素与与肠肠毒毒素素、内内毒毒素素、细细胞胞毒毒素素、侵侵袭袭力力有有关。关。感染后能产生特异性血清抗体感染后能产生特异性血清抗体，三、微生物学诊断（一）标本采集： 取腹泻病人新新鲜粪便或肛拭子便或肛拭子立即送检。如不能及时送检，应将标本接种于卡布运送培养基。（二）检验程序：二、二、 幽门螺杆菌幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)（一）、生物学特性n n在胃粘膜粘液层中常呈鱼群在胃粘膜粘液层中常呈鱼群在胃粘膜粘液层中常呈鱼群在胃粘膜粘液层中常呈鱼群样排列，传代培养可变为杆状样排列，传代培养可变为杆状样排列，传代培养可变为杆状样排列，传代培养可变为杆状或
16、球型。或球型。或球型。或球型。n n微需氧菌，营养要求高，需微需氧菌，营养要求高，需微需氧菌，营养要求高，需微需氧菌，营养要求高，需血液或血清血液或血清血液或血清血液或血清n n菌落：细小、针尖、半透明菌落：细小、针尖、半透明菌落：细小、针尖、半透明菌落：细小、针尖、半透明n n脲酶、氧化酶、过氧化氢酶脲酶、氧化酶、过氧化氢酶脲酶、氧化酶、过氧化氢酶脲酶、氧化酶、过氧化氢酶丰富丰富丰富丰富二、致病性和免疫性二、致病性和免疫性（一）致病物质（一）致病物质 1、鞭毛与、鞭毛与尿素酶尿素酶 2、黏附素、黏附素 3、脂多糖、脂多糖 4、毒素（空泡毒素、毒素（空泡毒素VacA、细胞毒素相关、细胞毒素相关
17、CagA） 确切机制尚未完全阐明，与胃窦炎、十二指肠溃疡和胃溃疡关确切机制尚未完全阐明，与胃窦炎、十二指肠溃疡和胃溃疡关确切机制尚未完全阐明，与胃窦炎、十二指肠溃疡和胃溃疡关确切机制尚未完全阐明，与胃窦炎、十二指肠溃疡和胃溃疡关 系密切，可能与胃癌的发生也有关系密切，可能与胃癌的发生也有关系密切，可能与胃癌的发生也有关系密切，可能与胃癌的发生也有关（二）（二） 所致疾病（人是唯一肯定传染源）所致疾病（人是唯一肯定传染源） 功能性消化不良、慢性胃炎、消化性溃疡、功能性消化不良、慢性胃炎、消化性溃疡、 胃癌、胃淋巴瘤、胃肠道外疾病、胃癌、胃淋巴瘤、胃肠道外疾病、（三）免疫性（三）免疫性（IgA和和
18、IgG感染或疾病的标志）感染或疾病的标志）三、微生物学检查法三、微生物学检查法1、标本：胃镜采集组织活检标本、标本：胃镜采集组织活检标本2、分离培养与鉴定：、分离培养与鉴定：37 3天天 微需氧微需氧 湿润湿润3、快速诊断：组织学染色、快速尿素酶试验、快速诊断：组织学染色、快速尿素酶试验 血清学、分子生物学血清学、分子生物学 尿素呼吸试验、粪便抗原测定尿素呼吸试验、粪便抗原测定四、防治原则：无有效预防四、防治原则：无有效预防 尚无单一药物根除尚无单一药物根除抗酸分泌剂、铋剂、两种抗生素联合使用抗酸分泌剂、铋剂、两种抗生素联合使用1. 1. 霍乱弧菌生霍乱弧菌生长繁殖的最适宜繁殖的最适宜pHpH
19、值范范围是是 A. 4.0-6.0 B. 8.8-9.2 A. 4.0-6.0 B. 8.8-9.2 C. 7.2-7.6 D. 6.0-7.0 C. 7.2-7.6 D. 6.0-7.0 E. 2.0-5.0 E. 2.0-5.0 2. 2. 能致人能致人类食物中毒的病原菌是食物中毒的病原菌是 A. A. 霍乱弧菌霍乱弧菌 B. B. 副溶血性弧菌副溶血性弧菌 C. C. 溶血性溶血性链球菌球菌 D. D. 志志贺痢疾菌痢疾菌 E. E. 肺炎双球菌肺炎双球菌 3. 3. 机体感染下列哪种病原菌后能机体感染下列哪种病原菌后能获得牢固持久免疫力得牢固持久免疫力 A. A. 流感杆菌流感杆菌 B. B. 大大肠杆菌杆菌 C. C. 痢疾杆菌痢疾杆菌 D. D. 肺炎肺炎链球菌球菌 E. E. 霍乱弧菌霍乱弧菌 4. 4. 霍乱弧菌的主要致病物霍乱弧菌的主要致病物质是是 A. A. 肠毒素毒素 B. B. 内毒素内毒素 C. C. 鞭毛鞭毛 D. D. 菌毛菌毛 E. E. 荚膜膜
