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1、分枝杆菌学习目的与要求1 1、掌握结核杆菌：抗酸染色、免疫、掌握结核杆菌：抗酸染色、免疫特点致病特点、结核菌素试验（原理、特点致病特点、结核菌素试验（原理、方法、结果分析及用途）。方法、结果分析及用途）。2 2、熟悉结核杆菌：形态、培养特性、熟悉结核杆菌：形态、培养特性防治原则防治原则3 3、了解结核杆菌：抵抗力、致病因、了解结核杆菌：抵抗力、致病因素、微生物学检查、防治原则素、微生物学检查、防治原则学习目的与要求学习目的与要求第一节第一节 结核分枝杆菌结核分枝杆菌n流行病学流行病学n全球总疫情全球总疫情n2020亿人口感染了结核菌，现症结核病人亿人口感染了结核菌，现症结核病人20002000
2、万，每年新发病人数万，每年新发病人数80080010001000万，万，每年每年300300万人死于结核病。万人死于结核病。n我国疫情我国疫情n现有活动性肺结核病人现有活动性肺结核病人500500万人，传染万人，传染性肺结核病人性肺结核病人200200万人，每年因结核病万人，每年因结核病死亡死亡2525万人。万人。n“世界防治结核病日世界防治结核病日”n20042004年年 控制结核控制结核 让每一次呼吸更健康让每一次呼吸更健康n20032003年年 防治结核，造福人民防治结核，造福人民n20022002年年 遏制结核，消除贫困遏制结核，消除贫困n20012001年年 积极发现、治愈肺结核病人
3、积极发现、治愈肺结核病人n20002000年年 动员全社会共同关注结核病动员全社会共同关注结核病3 3月月2424日日n形态与染色 n细长略弯，有时呈细长略弯，有时呈分枝状分枝状n（1 14 4） m m 0.40.4 m mn无芽胞、鞭毛和荚无芽胞、鞭毛和荚膜膜n齐齐- -尼氏抗酸染色尼氏抗酸染色结核杆菌的形态n培养特性培养特性 n专性需氧专性需氧n营养要求高馋营养要求高馋（含（含蛋黄、甘油、马铃薯等蛋黄、甘油、马铃薯等的罗氏培养基的罗氏培养基）n生长缓慢懒生长缓慢懒( (约约1818h-24h/h-24h/一代），一代），培养培养2-62-6周周n罗氏固体培养基丑罗氏固体培养基丑n变异性：
4、结核杆菌易发生菌落、毒力和耐变异性：结核杆菌易发生菌落、毒力和耐药性等方面的变异。如卡介苗（药性等方面的变异。如卡介苗（BCGBCG）就）就是牛型结核杆菌毒力变异株。是牛型结核杆菌毒力变异株。(1908(1908年年- -19211921年年) ) 230 230次传代次传代n三三耐耐(干燥、酸碱、染料干燥、酸碱、染料) 尘埃中传染性持续尘埃中传染性持续810天天 干痰中干痰中 68月月 三怕三怕(湿热、紫外线、酒精湿热、紫外线、酒精)6030min可杀死；可杀死；(巴氏消毒法巴氏消毒法)在在70%75%乙醇中数分钟即被杀死乙醇中数分钟即被杀死对抗结核药易产生耐药性对抗结核药易产生耐药性致病性
5、与免疫性致病性与免疫性n结核杆菌不产生任何内、外毒素以及侵结核杆菌不产生任何内、外毒素以及侵袭酶。其致病性可能与下列因素有关袭酶。其致病性可能与下列因素有关n细菌在组织中顽强增殖引起炎症细菌在组织中顽强增殖引起炎症n代谢产物的毒性代谢产物的毒性n机体对其产生免疫损伤（超敏反应）机体对其产生免疫损伤（超敏反应） 致病物质致病物质( (了解了解) )n脂质：含量越高，致病性越强脂质：含量越高，致病性越强n索状因子：可损伤细胞线粒体和抑制氧化磷酸化过索状因子：可损伤细胞线粒体和抑制氧化磷酸化过程，抑制粒细胞游走和引起慢性肉芽肿程，抑制粒细胞游走和引起慢性肉芽肿n磷脂磷脂: :促使单核促使单核c c增
6、生，形成结核结节和干酪样坏死增生，形成结核结节和干酪样坏死n硫酸脑苷酯：抑制吞噬体和溶酶体结合硫酸脑苷酯：抑制吞噬体和溶酶体结合n蜡质蜡质D D：刺激机体发生迟发型超敏反应。：刺激机体发生迟发型超敏反应。n分枝菌酸苷酶：与该菌抗酸性有关，减弱溶菌酶、分枝菌酸苷酶：与该菌抗酸性有关，减弱溶菌酶、抗体等杀菌物质的杀伤作用抗体等杀菌物质的杀伤作用n蛋白质：结核菌素蛋白质：结核菌素n荚膜荚膜所致疾病所致疾病n入侵途径：多途径（呼吸道、消化道、入侵途径：多途径（呼吸道、消化道、损伤的皮肤粘膜等）损伤的皮肤粘膜等）n所致疾病：结核所致疾病：结核( (多部位、多脏器多部位、多脏器) )；以；以肺结核为最多见
7、。肺结核为最多见。临床症状临床症状n全身症状：发热（低热），疲倦、乏力、全身症状：发热（低热），疲倦、乏力、夜间盗汗夜间盗汗n呼吸系统症状：咳嗽、咳痰呼吸系统症状：咳嗽、咳痰 咯血、胸痛、气急咯血、胸痛、气急肺部感染肺部感染细菌侵入肺泡，细菌侵入肺泡，巨噬细胞吞噬巨噬细胞吞噬渗透性肺泡炎渗透性肺泡炎肺肺原发病灶原发病灶淋巴管淋巴管+肺门肺门淋巴结结核淋巴结结核性炎症性炎症纤维化、纤维化、钙化钙化(自愈自愈)细菌细菌n n少数免疫少数免疫少数免疫少数免疫低下者结低下者结低下者结低下者结核杆菌经核杆菌经核杆菌经核杆菌经血流、淋血流、淋血流、淋血流、淋巴管扩散巴管扩散巴管扩散巴管扩散致粟粒性致粟粒性
8、致粟粒性致粟粒性结核或其结核或其结核或其结核或其它肺外感它肺外感它肺外感它肺外感染如结核染如结核染如结核染如结核性脑膜炎性脑膜炎性脑膜炎性脑膜炎等。等。等。等。 粟粟粒粒性性肺肺结结核核(暴暴风风雪雪表表现现)原发后感染原发后感染3 3、免疫性、免疫性( (难点难点) )n结核的免疫为有菌免疫或称传染性免疫。即只结核的免疫为有菌免疫或称传染性免疫。即只有当结核杆菌在体内存在时才有免疫力，当体有当结核杆菌在体内存在时才有免疫力，当体内结核杆菌消失时，抗结核免疫也随之消失。内结核杆菌消失时，抗结核免疫也随之消失。故将这种免疫称传染性免疫或有菌免疫。故将这种免疫称传染性免疫或有菌免疫。n结核菌可刺激
9、机体产生抗体，但无保护作用，结核菌可刺激机体产生抗体，但无保护作用，结核病的免疫以细胞免疫为主。机体对结核杆结核病的免疫以细胞免疫为主。机体对结核杆菌产生细胞免疫的同时，也产生迟发型超敏反菌产生细胞免疫的同时，也产生迟发型超敏反应。结核迟发型超敏反应和免疫反应是由不同应。结核迟发型超敏反应和免疫反应是由不同亚群细胞介导的两个独立反应，可发生在同亚群细胞介导的两个独立反应，可发生在同一感染机体。一感染机体。机体机体CD4CD4Th1Th1细胞细胞清除抗原清除抗原细胞免疫细胞免疫CD8CD8CTLCTL直接杀伤靶直接杀伤靶C C抗原抗原细胞因子细胞因子单个核细胞浸润为主的炎症反应单个核细胞浸润为主
10、的炎症反应损伤自身损伤自身迟发性超敏反应迟发性超敏反应再次刺激再次刺激初次刺激初次刺激 致敏淋巴细胞致敏淋巴细胞传染免疫传染免疫( (有菌免疫有菌免疫) )细胞免疫细胞免疫细胞免疫与细胞免疫与型超敏反应并存型超敏反应并存免疫特点免疫特点结核菌素试验结核菌素试验重点重点结核菌素试验结核菌素试验n原理：注入机体皮内后如受试者已感染过结核原理：注入机体皮内后如受试者已感染过结核杆菌，结核菌素与致敏淋巴细胞特异性结合，杆菌，结核菌素与致敏淋巴细胞特异性结合，在局部释放淋巴因子，形成超敏反应性炎症，在局部释放淋巴因子，形成超敏反应性炎症，出现红肿、硬结。若受试者未感染过结核杆菌出现红肿、硬结。若受试者未
11、感染过结核杆菌则无局部超敏反应发生。则无局部超敏反应发生。n方法：取方法：取OTOT或或PPD5PPD5单位单位注射于前臂掌侧皮内，注射于前臂掌侧皮内，经经48-72h48-72h检查反应情况。注意局部有无硬结，检查反应情况。注意局部有无硬结，不能单独以红晕为标准。不能单独以红晕为标准。结核菌素试验结核菌素试验n结果判断：结果判断：n局部红肿或硬结直径局部红肿或硬结直径5 mm 5 mm 阴性阴性n局部红肿或硬结直径局部红肿或硬结直径 5-15 mm 5-15 mm 阳性阳性n 15mm 15mm或不足或不足15mm15mm但有水泡、出但有水泡、出血、坏死、淋巴管炎血、坏死、淋巴管炎 强阳性强
12、阳性 the Mantoux testTuberculin test 结核菌素试验结核菌素试验的意义结核菌素试验的意义结核菌素试验结核菌素试验n阴性反应应考虑下述情况：如受试者处于阴性反应应考虑下述情况：如受试者处于n原发感染的早期，尚未产生超敏反应；原发感染的早期，尚未产生超敏反应；n正患严重结核病（如全身性粟粒性结核或结核正患严重结核病（如全身性粟粒性结核或结核性脑膜炎），机体丧失反应能力；性脑膜炎），机体丧失反应能力；n受试者正患有其他传染病（如麻疹等）；受试者正患有其他传染病（如麻疹等）；n极度虚弱或严重营养不良者；极度虚弱或严重营养不良者；n老年人或使用免疫抑制剂者。老年人或使用免疫
13、抑制剂者。结核菌素试验的应用结核菌素试验的应用n用于卡介苗接种前后检查结核免疫的转用于卡介苗接种前后检查结核免疫的转变，测定免疫效果变，测定免疫效果n作为婴幼儿结核病诊断的参考作为婴幼儿结核病诊断的参考n测定肿瘤患者细胞免疫功能测定肿瘤患者细胞免疫功能n在未接种卡介苗人群中作在未接种卡介苗人群中作结核杆菌感染的流行病学调查结核杆菌感染的流行病学调查三、微生物学检查法三、微生物学检查法n1 1标本涂片染色镜检：取标本直接涂片进行标本涂片染色镜检：取标本直接涂片进行抗酸染色、镜检，找到抗酸杆菌可初步诊断。抗酸染色、镜检，找到抗酸杆菌可初步诊断。n2 2分离培养分离培养( (费时较长费时较长) )n
14、3 3免疫学诊断：结核菌素试验；免疫学诊断：结核菌素试验；n4 4PCRPCR法：检测痰、胸水或关节液中有无结核法：检测痰、胸水或关节液中有无结核杆菌核酸。杆菌核酸。四、防治原则四、防治原则n1 1特异性预防：接种特异性预防：接种卡介苗卡介苗BCGBCG。n接种方法：接种方法：n新生儿可直接接种新生儿可直接接种n1 1岁以上须先做结核菌素试验，阴性者接岁以上须先做结核菌素试验，阴性者接种种n接种后接种后2323个月做结核菌素试验，阳性者个月做结核菌素试验，阳性者表示接种成功；阴性者需补种，免疫力可表示接种成功；阴性者需补种，免疫力可维持维持6-106-10年年n2 2治疗：常用药物有异烟肼、链
15、霉素、对治疗：常用药物有异烟肼、链霉素、对氨基水杨酸钠、利福平、乙胺丁醇等。氨基水杨酸钠、利福平、乙胺丁醇等。n“DOTS”“DOTS”：直接督导短程疗法：直接督导短程疗法检测检测n检测结核分枝杆菌最常用的染色方法是检测结核分枝杆菌最常用的染色方法是 。n结核菌素试验原理是结核菌素试验原理是 型超敏反应。型超敏反应。n结核分枝杆菌一般结核分枝杆菌一般 h h繁殖一代，传播繁殖一代，传播方式可有方式可有 ，预防可接种，预防可接种 。思考题n属于抗酸菌的是：属于抗酸菌的是：nA A 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌nB B 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌nC C 破伤风梭菌破伤风梭菌nD D 结核分枝杆菌结
16、核分枝杆菌nE E 大肠埃希菌大肠埃希菌答案：答案：D D思考题n人体对结核分支杆菌的免疫特点是：人体对结核分支杆菌的免疫特点是：nA A 为有菌免疫为有菌免疫nB B 以体液免疫为主以体液免疫为主nC C 以细胞免疫为主以细胞免疫为主nD D 以体液和细胞免疫并重以体液和细胞免疫并重nE E 可通过人工主动免疫获得可通过人工主动免疫获得答案：ACE思考题n结核菌素试验阳性反应，可以表明机体：结核菌素试验阳性反应，可以表明机体：nA 接种接种卡介苗成功卡介苗成功nB B 已感染过结核分支杆菌已感染过结核分支杆菌nC C 对结核分支杆菌发生对结核分支杆菌发生IIII型超敏反应型超敏反应nD D
17、对结核分支杆菌发生对结核分支杆菌发生IVIV型超敏反应型超敏反应nE E 对结核分支杆菌有一定的特异性免疫力对结核分支杆菌有一定的特异性免疫力答案：答案：ABDEABDE小结小结 n掌握结核杆菌掌握结核杆菌n抗酸染色抗酸染色n免疫特点（传染免疫、有菌免疫、细胞免疫、免疫特点（传染免疫、有菌免疫、细胞免疫、细胞免疫与细胞免疫与型超敏反应并存）型超敏反应并存）n致病特点（入侵途径、肺部感染和肺外感染）致病特点（入侵途径、肺部感染和肺外感染）n结核菌素试验（原理、方法、结果分析及用结核菌素试验（原理、方法、结果分析及用途）途）麻风分枝杆菌麻风分枝杆菌n为抗酸菌，通过皮肤、粘膜、呼吸道及密切接触为抗酸
18、菌，通过皮肤、粘膜、呼吸道及密切接触等传播。潜伏期等传播。潜伏期6 6月月-5-5年，长者年，长者2020年年n患者为传染源，侵犯皮肤、粘膜及外周神经系统患者为传染源，侵犯皮肤、粘膜及外周神经系统n症状：皮肤形成红斑结节，融合可呈症状：皮肤形成红斑结节，融合可呈“狮面状狮面状”，神经变粗变硬，可导致感觉运动障碍。，神经变粗变硬，可导致感觉运动障碍。n胞内寄生菌，机体对该菌的免疫主要是细胞免疫。胞内寄生菌，机体对该菌的免疫主要是细胞免疫。n防治：无特异性预防措施防治：无特异性预防措施用砜类、利福平、丙硫异烟胺等用砜类、利福平、丙硫异烟胺等Granuloma in a leprosy patient麻风病人身上的肉芽肿
